Mecanismos de transduccion de senales: mensajeros y receptores

CAP. 14 Dra. Ana M. Lugo 2008

Comunicacion celular

Entre organismos unicelulares de vida libre En organismos multicelulares

Contacto Paracrina Endocrina Sinapsis

Formas de transmitir seales intracelulares

Molculas que transmiten seales: mensajeros primarios o ligandos

Amino cidos, pptidos y protenas Nucletidos Esteroides Derivados de cidos grasos Gases

CO2 y NO

Receptores
3 dominios: Enlace de ligando Regin citoplsmica

Regin intramembranal

Respuestas a seales extracelulares

Cuando el ligando se pega al receptor

activa una serie de eventos conocidos como la Transduccin de seales. Esto lleva la seal al interior de la clula, resultando en una respuesta celular y /o cambios en la expresin de un gene.

EJEMPLO: Oxido ntrico y guanilil ciclasa

Mensajero primario vrs secundario

Ligando o mensajero primario: es la molcula que se une al receptor. La unin del ligando al receptor resulta en la produccin de molculas adicionales dentro de la celula blanco. Estos se conocen como segundos mensajeros.

Caractersticas de la transduccin de seales

1. Especificidad 2. Amplificacin 3. Insensibilizacin/Adaptacin 4. Integracin

1. Especificidad

Cada receptor tiene su ligando especifico

Enzima sustrato

Ligandos solubles chocan con el R Se dice que el R esta ocupado. Se necesita cierta cantidad de Rs ocupados para que ocurra la transduction de la senal.

Afinidad del R por el ligando

Cuan facilmente el L se pega al R. Guarda relacin con la cantidad del ligando que tengamos presente y el numero de Rs ocupados.

L de alta afinidad por su R- son aquellos que en una baja [L] ocupan muchos Rs. L de baja afinidad por su R- son aquellos L donde necesitan altas [L] para ocupar Rs.

La afinidad de un R se puede

medir

Constante de disociacin o Kd . Kd es un numero que representa la concentracion de ligando que se necesita para que se ocupen la Rs. El Kd nos indica la cantidad de ligando necesaria para inducir respuesta celular Ls alta afinidad tienen Kd pequea Ls baja afinidad tienen Kd alta

2. Amplificacin

Para que ocurran estas cascadas tienen que activarse y desactivarse proteinas dentro de la celula. El interruptor la prende o apaga la presencia o ausencia de fosfato.

3. Insensibilizacin

Es cuando un ligando esta presente por un periodo prolongado de tiempo, la clula se adapta y no responde al ligando. Para hacer que la clula responda se necesita mas ligando Porque :

Para remover R de la superficie ( endocitosis de Rs) Alterar la afinidad del receptor por el ligando Alterar el R para que no pueda transmitir la seal y producir la respuesta celular

La insensibilizacin lleva a la tolerancia

Insensibilizacin/Adaptacin Mecanismos de insensibilizacin

Insensibilizacion del receptor Badrenergico

4. Integracin de senales

Anlogos estructurales del ligando

Pueden enlazar receptor con igual o mayor afinidad que el ligando Agonistas : activan al receptor en el que se unen Antagonistas: se enlazan al receptor pero no hay respuesta (bloqueo)

Pepcid AC- contiene famotidine Tagamet- cimetidine Controlan el cido- se enlazan a R histamina en el estmago y lo bloquean

Receptores inician secuencia de eventos pre-programados dentro de una celula

Clasificacion de los Rs: Canales abiertos por los ligandos

Rs intracelulares

Receptores de esteroides Receptores heptahelicales: Acoplados a protenas G Receptores con actividad enzimatica R cinasas de tirosinas

Rs en la membrana plasmtica

Receptores nucleares

Receptor heptahelical o acoplados a Proteina G

Componentes:

Receptor transmembranal Protena G (liga nucletido de guanina) Molcula efectora (enzima, canal) Transduce seal de hormonas y neurotransmisores Sentido del gusto, visin y olfato

Funciones:

Estructura de los Receptores acoplados a protenas G

a. b.

c. d.

Estructura Rs 7 dominios transmembranales ( helices alfa) Terminal N- extracelular; terminal Ccitosolico Lazos extracelulares- nicos enlazan ligandos Lazos citosolicos entre 5 y 6 enlazan prot. G

Estructura de receptores acoplados a Proteinas G

Proteinas ligadoras de nucleotidos de guanina

Dos Tipos: Grandes heterotrimericas ( alfa, beta, gamma) Pequea monomerica ( RAS), tirosina cinasa Su activacin depende del enlace con GTP GTP- on GDP- off

Protenas G heterotrimericas

Ligando se enlaza al R y ocurre un cambio en la conformacin del R que activa a proteina G G (alfa-beta-gamma) en su forma inactiva liga GDP. Al formarse R-L se disocia del GDP y se asocia a GTP G-GTP se activa y se separa de beta y gamma.
Dependiendo de la celula G alfa GTP puede iniciar transduccin de seal o complejo beta y gamma pueden ser simultaneos.

G-GTP activa a su vez a un canal o una enzima Proteina G entonces hidroliza el GTP a GDP y se inactiva.

Activacion de la cascada

Activacion e inactivacion de proteina G

Receptores membranales acoplados a proteinas G

Cascadas de cAMP

Segundos mensajeros

El cAMP esta formado por la enzima adenynyl ciclasa, esta se encuentra en la membrana plasmtica; su porcin catalitica esta en el citosol

cAMP

La enzima adenylyl ciclasa (AC) que se encuentra en la membrana interna de la celula es activada por la proteina G. AC se activa y produce cAMP. cAMP intracelular aumenta considerablemente. El cAMP activa un target intracelular especfico conocido como la protena cinasa A (PKA). La enzima fosfodiesterasa en poco tiempo degrada el cAMP.

Activacion de PKA por cAMP

Ej. Receptor de epinefrina

Cascada

R-L
Proteina G

AC
cAMP PKA
Proteinas Reguladoras De genes

Proteinas target

Estos receptores acoplados a proteinas G pueden

Activar AC

Aumentar cAMP Activa PKA

Activar fosfolipasa C (PLC)

Aumentan niveles de IP3 Abren canales de calcio en el RER Calcio activa calmodulinas

PLC rompe PIP2 en IP3 y DAG

Muchas de las protenas G utilizan como segundos mensajeros el Inositol trifosfato (IP3 ) y diacilgricerol (DAG) Para obtener el IP3 se utiliza la enzima fosfolipasa C que fija PIP2 en dos molculas DAG y IP3

Eventos cascada de PLC

1.

2.
3. 4.

5.
6. 7.

L-R Activa la protena G G alfa (GTP) activa la PLC (Fosfolipasa C) PIP2 se rompe y genera IP3 + DAG IP3 soluble activa canales de calcio en RER Aumenta el calcio en el citosol Calcio activa las calmodulinas

Cascada PLC

Rol del calcio en la transduccin

Para medir los niveles de calcio intracelular se utilizan indicadores como Fura 2 Los ionoforos de calcio como lo es el ionomycin imita el efecto de IP3 Aumento del calcio en ausencia de un estimulo (L)

Regulacion de calcio

Complejo de calmodulinas
Esta protena juega un rol importante en la regulacin de procesos celulares

Seal a travs de
en [Ca2+]

2+ Ca

Calmodulin
CaM kinases

Cascada PLC

R-L
Proteina G

PLC

IP3 Calcio
calmodulinas

DAG

PKC

CaMK

Receptores membranales

Receptores con actividad enzimtica

Clases de receptores enzimticos

Cinasas de Tyr Asociados a cinasas de Tyr Fosfatasas de Tyr Cinasas de Ser/Thr Guanilil ciclasas Asociados a cinasas de histidina

Receptores cinasas de Tyr

Tienen gran cantidad de residuos de tirosina en su estructura. Poseen un rea dentro de la membrana como fuera de la membrana (son Transmembranales). Cuando se activan por el L forman dimeros y se fosforilan en los residuos de Tyr. Estos receptores forman una gran familia cuyos ligandos son factores de crecimiento: involucrados en division celular.

Ejemplos de receptores cinasas de Tyr

En clase veremos dos ejemplos

Receptor de EGF Receptor de insulina

Estructura receptor de EGF

Mecanismo de transduccion de senales del receptor de EGF

Ligando (EGF) liga receptor (R). Rs forman dimeros (agregacion Rs) Autofosforilacion R en residuos de Tyr. Puede ocurrir:

Activacion de PLC gamma, Aumento de IP3, Salida de calcio de RER Activacion de Ras (proteina G monomerica) y subsecuente activacion de MAPK y AP-1

Respuesta celular: activacion del ciclo celular

Posibles rutas para la transduccin de seales de estos receptores

Receptor
PLC- IP3 DAG Ras MAP-K Pathway

Ca2+
PKC

CaM-kinases

Rececptor de Insulina

Se forma complejo Insulina-R Formacion de dimeros y autofosforilacion del R El R fosforila a IRS-1 y la activa Grb-2 se enlaza a IRS-1 y forma complejo Sos se enlaza al complejo Grb2-IRS1 Ras se enlaza tambien al complejo y liga GTP Sas se liga a Raf-1 quien activa a MEK MEK activa a ERK, la cual entra al nucleo y fosforila a Elk-1 Elk1 es un factor de transcripcion Se activan genes Se divide la celula

Receptor de insulina induce division celular mediante cascada que involucra a Ras.

Resumen

Cascadas de receptores ligados a proteina G Cascadas de receptores Cinasas de Tirosina

Rutas de seales de receptores enzimticos y heptahelicales