MICROBIOLOGIA - GENERALIDADES

UNIVERSIDAD ALAS PERUANAS CATEDRA DE BACTERIOLOGIA

JOSE ALBERTO DIAZ TELLO Mg. Bilogo-Microbilogo Adiaz_60@hotmail.com

MICROBIOLOGIA
Es la Ciencia que estudia a los microorganismos. La vida empez en la tierra hace 4 mil millones de aos, estas formas de vida fueron los primeros en poblar el planeta y sern los ltimos en desaparecer. La mayora de seres vivos son microscpicos, son los ms diversos y a la muchos no lo conocemos. Habitan diferentes ambientes, algunos viven en lugares inhspitos y en condiciones extremas imposibles de vida. El hombre tuvo conocimiento de ellos cuando se invento el microscopio ptico ( 1674).

CLASIFICACION DE LOS SERES VIVOS EN DOMINIOS - SEGN CARL WOESE

CLASIFICACION DE LOS SERES VIVOS

CLASIFICACION DE LOS SERES VIVOS EN REINOS

LA MICROBIOLOGA

y su extensin en la biodiversidad

Reinos segn criterios fenotpicos (L. Margulis)

MICROBIOS
Formas de vida microscpicas o submicroscps. Visibles al microscopio ptico o electrnico. Ocasionan enfermedades infecciosas en el hombre, animales y plantas. Conservan el equilibrio del medio ambiente, al degradar y reciclar el material orgnico. Muchos son utilizados en la alimentacin y se espera den solucin al hambre y desnutricin. Algunos se emplea como armas biolgicas.

CLASIFICACION DE LOS MICROBIOS

Prion. Virus. Algas. Bacterias Protozoarios. Hongos.

TIPOS DE MICROBIOS
Bacterias Protozoos

Algas

Hongos

PRIONES
Es una protena infecciosa ( PrP ) Carente de genoma y cidos nucledos Produce enfermedades neurodegenerativas, llamadas Encefalopatas Espongiformes Se encuentra en la neurona de mamferos Pueden ser transmitidas genticamente Periodo de incubacin largo No se les considera formas vida

1 - VIRUS
Son parsitos intracelulares obligados. Son formas de vida submicroscopicas. Son cristalizables. Poseen solo un tipo de AN. Son parsitos del hombre, plantas animales, algas, bacterias. No tienen citoplasma ni Apar. Metab. Ocasionan enfermedades: Virosis.

2- ALGAS
Son organismos auttrofos fotosintticos. Pueden ser unicelulares o pluricelulares. Pared celular: carbonato de slice, celulosa La mayora viven en agua Son mviles o inmviles. Tienen diferentes colores. Estn relacionadas a los vegetales Las mas importantes son Cianophytas, Rodophytas, Clorophytas, Feophytas.

3 - BACTERIAS
Son organismos procariontes. Todos son unicelulares. Son organismos hetertrofos Pared celular a base de mureina Crecen en medios de cultivo Viven solitarias o forman colonias Son las formas de vida ms antigua Producen enfermedades infecciosas

4 - PROTOZOARIOS
Son animales ms primitivos. Poseen una sola clula. Son organismos eucariontes. Carecen de pared celular. Son hetertrofos. Reproduccin sexual y asexual Son de vida libre o parasitaria Ocasionan: Parasitosis

5 - HONGOS
Son organismos uni o pluricelulares Son eucariontes. Pared celular a base de Quitina Hetertrofos Se alimentan por absorcin Se reproducen por esporas Forman talo o micelio Ocasionan: Micosis

ASPECTOS QUE ESTUDIA LA MICROBIOLOGIA

1- Microbiologa General: los microorganismos * Anatoma Bactriana. * Crecimiento y Diferenciacin * Fisiologa Bacteriana. * Reproduccin y Gentica. * Ecologa Bacteriana * Clasificacin y Diversidad. * Poder Patgena * Resistencia a los Antibiticos

ASPECTOS QUE ESTUDIA LA MICROBIOLOGIA

2- Microbiologa Aplicada: Rol de los microbios.
* * * * * * Produccin y conservacin de alimentos. Transformacin de la materia orgnica y mineral. Generacin de Energa. Proteccin del Medio Ambiente. Promocin y Proteccin vegetal. Biotecnologa.

IMPACTO DE LOS MICROORGANISMOS EN LA ACTIVIDAD DEL HOMBRE

1- En la Alimentacin: Mejoramiento, proteico y energtico de los alimentos. 2- En la Industria: Saccharomyces cerviseae ha sido modificada genticamente para mejorar su rendimiento en la fermentacin de la cerveza. 3- En la Biotecnologa: Los microbios en la produccin de energa y biodiesel, cidos, alcoholes, extraccin de minerales. Transferencia gnica. 4- En la Agricultura: Fijacin biolgica del Nitrgeno: 175 millones Toneladas/ao transformacin de materia orgnica y como biocontroles.

IMPACTO DE LOS MICROORGANISMOS EN LA ACTIVIDAD DEL HOMBRE

5- Como Agentes de Enfermedades * Los microbios en el transcurso de la historia del hombre han causado grandes mortalidades, incluso mayor a cualquier guerra humana. * Los nios y los ancianos es la poblacin mas vulnerable * Son famosas las pandemias por: Clera, Gripe aviar, SIDA. * Son usadas como armas biolgicas por el Terrorismo. * Se producen 100 millones de Toneladas por ao de antibiticos para combatir estos agentes infecciosos.

PORQUE ESTUDIAR MICROBIOLOGIA

1- Como Ciencia Biolgica Bsica: Proporcionan herramientas para la compresin de principios metablicos generales, genticos y de reproduccin de los microbios. 2- Como Ciencia Biolgica Aplicada: Relaciona a problemas de la Medicina, Agricultura, Medio Ambiente, Industria y Biotecnologa

TRABAJOS CIENTIFICOS EN BACTERIAS

GRACIAS

HISTORIA DE LA MICROBIOLOGIA
UNIVERSIDAD ALAS PERUANAS CATEDRA DE BACTERIOLOGIA

JOSE ALBERTO DIAZ TELLO Mg. BIOLOGO-MICROBIOLOGO adiaz_60@hotmail.com

HISTORIA DE LA MICROBIOLOGIA
La Microbiologa se ha desarrollado en 4 periodos:
1- Periodo anterior a 1865: especulacin sobre los microbios. 2- Periodo entre 1865 y 1882: se asentaron las bases como una ciencia nueva. 3- Periodo de 1882 a 1940: acumulacin de informacin sobre organismos patgenos. 4- Periodo de 1940 a la Fecha: la Microbiologa llega a una completa madurez, la aplicacin de conocimientos en la vida humana son verdaderamente revolucionarios.

PERIODO ANTERIOR A 1865

En los escritos de Aristteles (384 a. de C.) y en los, del mdico rabe Rhazes (860 a 932 d. de C.), se encuentran referencias de que seres invisibles podran ser responsables de las enfermedades y de su propagacin entre personas. En el siglo XVI la Teora de enfermedad por Grmenes empez a tomar forma ms definida. En 1546 el clebre mdico Italiano, Girolomo Fracastoro public un tratado en el expresaba la idea de que organismos vivos invisibles causaban enfermedades y lo transmitan por contacto a otras personas. En 1674 Anthony Van Leeuwenhoek descubre los microbios.

PERIODO ENTRE 1865 Y 1882

Durante la primera mitad del siglo XIX muchos investigadores informaron sobre la presencia de microorganismos Cuatro eran los problemas de inters de esa poca: 1- La clasificacin de los microorganismos. 2- El origen de los microbios y la verdad o falsedad de la teora de la Generacin Espontnea de los seres vivos. 3- La relacin de los microbios con Fermentacin y Putrefaccin. 4- Relacin entre microbios y enfermedad.

DESCUBRIDOR DE LOS MICRORGANISMOS

Anthony Van Leeuwenhoek (1631723) Pulidor de lentes, en Holanda. Construye un microscopio simple que aumentaba 200 veces a las cosas. En el ao de 1674 observ por primera los microbios y los llam, animalculos

DERROTA DE LA GENERECION ESPONTANEA

* La teora de la generacin espontanea fue aceptada hasta mediados del siglo XIX, tal como lo crea Aristteles. * En 1749 Needham realiz estudios sobre Generacin espontanea demostrando su veracidad.
* En 1765 y 1776 Lzaro Spallanzani, modificando los experimentos de Needham demostr el error de esta conclusin. * Appter en 1810 aplic los resultados de Spallanzani a la conservacin de alimentos sin microbios. * En 1845, Schoeder y Von Dusch demostraron que infusiones hervidas permanecan sin microbios si se tapaban con algodn. * En 1860 y 1861 Pasteur y Tyndall pusieron fin a la Generacin

EDWARD JENNER
Naci en Inglaterra ( 1749- 1823 ). Fue el inventor de la Vacuna. Realiz la primera inoculacin de la vacuna contra la viruela. El 14 de mayo de 1796 extrajo pus de la Pstula de una Mujer ordeadora de vacas y lo inocul a un nio de 8 aos, James Phipps El 14 de julio lo inocula con la temible viruela de un enfermo, el nio no enfermo.

PERIODO DE 1882 A 1940

Hay mucha acumulacin de informacin sobre microorganismos patgenos. Muchos bacterilogos se dedican al estudio de los microbios y su relacin con las enfermedades.

PRINCIPALES APORTES DE PASTEUR

Naci en Francia (1822-1895) Rebati la Teora: Generacin Espontanea Demostr la verdadera naturaleza fermentacin. Investig sobre las enfermedades Infecciosas, del gusano de la seda y el del Carbunco. Llev a la prctica la idea de la inoculacin protectora con grmenes atenuados Desarroll Vacunas: para el Carbunco, Clera aviar y la Rabia.

de la

MATRAZ CUELLO DE CISNE

FERDINAND COHN
Naci, en Inglaterra (1828 1898) Fue el fundador de la Bacteriologa. Descubri las esporas. Introdujo los tapones de algodn para evitar la contaminacin en los cultivos Estudio a las cianobacterias. Clasifica a las bacterias como vegetales

JOHN TYNDALL
Naci en Irlanda (1820 1,893). Conocido por sus estudios de coloides. Invent la tindalizacin. Es un mtodo para destruir esporas por calor fraccionado.

JOSEPH LISTER
Naci en Inglaterra (1827-1912). Creador de la Ciruga Antisptica. Los microbios son causantes de la Infeccin de las heridas. Utiliz el cido fnico como profilctico en heridas infectadas y en fracturas expuestas

ROBERT KOCH
Naci en Alemania (1843-1910). Simplifico y mejor el mtodo de estudio de las bacterias. Introdujo el mtodo de frotz y de tincin en lminas portaobjeto Utiliz medios de cultivos slidos para aislar cultivos puros. Descubri el bacilo de Tuberculosis, del Clera y del Carbunco. En 1884, expuso los famosos Postulados de Koch

ELIAS METCHNIKOFF

Naci en Rusia Ucrania ( 1845-1916). Descubri la inmunidad celular. Demostr el papel de los leucocitos en la Defensa del organismo.

PAUL ERLICH
Naci en Polonia (1854-1916)
Emple las tinciones con colorantes Descubridor de la inmunidad humoral mediado por anticuerpos. Descubri la Sulfonamidas en el tratamiento de enfermedades.

ALEXANDER FLENIMG
Naci en Escocia ( 1881 1955 ). Capacidad de observacin e intuicin. En 1928 descubre la penicilina. Antibitico usado en al II Guerra Mundial En 1945 recibe el Premio Nobel. Es el iniciador de la era Antimicrobiana.

FREDERICK GRIFFIT
En 1928 descubre la transformacin Gentica al trabajar con dos cepas de Pneumococcus una con capsula y la otra sin ella

ERNEST RUSCKA Y MAX KNOLL

En los aos de 1925 y 1930 disean el microscopio electrnico con un aumento de 200,000 a 5000,000 X

PERIODO DE 1940 A LA FECHA

Descubrimiento dela estructura del ADN. Descubrimiento de las Archeobacterias. Invencion del PCR. Descubrimiento de las vacunas Recombinantes. Secuenciamento del genoma Humano

J. WATSON Y F. CRICK
En el ao de 1953 descubren la estructura del ADN

ARCHEOBACTERIAS / EXTREMOFILAS
Fueron descubiertas 1977, por Carl Woese Se parecen a las bacterias, pero su ARNr y constituyentes de la pared son diferentes. La pared celular presenta capa S; para cristalina y metacondroitina y pseudomureina Viven en ambientes extremos: fuentes termales, depsitos de petrleo, lagos salinos. * Son hetertrofas(metano, petrleo, sal)

KARY MULLIS
En el ao 1985 inventa el PCR. Poderosa tcnica enzimtica, que Amplifica el ADN de una pequea cantidad a una gran cantidad, por diferencia de temperaturas. Se realiza en el Termociclador

VACUNAS RECOMBINANTES
En el ao 1986, se crea la primera vacuna recombinante contra la Hepatitis B. Se estn desarrollando vacunas contra el HPV, Malaria, Citomegalovirus, Herpes, Shigella Toxoplasmosis, Clera, Dengue, HIV. Ciertos tipos de cncer

GENOMA BACTERIANO
En 1995 se lleg a secuenciar el genoma de Haemophluz influenzae En el 2003 se secuenci el Genoma Humano al 99%.

ESTERILIZACION
UNIVERSIDAD ALASPERUANAS CATEDRA DE BACTERIOLOGIA

JOSE ALBERTO DIAZ TELLO Mg. BIOLOGO- MICROBIOLOGO

adiaz_60@hotmail.com

DECONTAMINACION
Es un pre-tratamiento de materiales potencialmente infectadas con lquidos, secreciones o tejidos biolgicos, en soluciones desinfectantes o detergentes enzimticos. Los materiales se colocan en una parrilla y se sumergen en un recipiente con solucin desinfectante por 30 minutos. Las soluciones desinfectantes usadas son: hipoclorito de sodio al 5% glutaraldehido, formaldehido, etc.

LIMPIEZA
Proceso fsico por el cual se elimina de los materiales, materia orgnica o microorganismos mediante el lavado con agua con o sin detergente. La limpieza elimina los contaminantes de los objetos por arrastre. Los materiales antes de pasar por la desinfeccin o esterilizacin deben estar limpios.

DESINFECCION
Es la eliminacin total o parcial de las formas vegetativas de organismos patgenos de objetos inanimados (superficies) y no necesariamente esporas, se realiza utilizando un desinfectante atreves de mtodos fsicos o qumicos. Clases de Desinfeccin:

ASEPSIA
Exclusin continua de microorganismos contaminantes de un tejido vivo a fin de evitar infecciones. Se realiza atreves de sustancias antispticas.

ANTISEPTICO
Son sustancias qumicos que son usadas sobre la piel o tejidos vivos para eliminar o disminuir la carga bacteriana patgena o normal; a fin de reducir la posibilidad de infeccin, sepsis o putrefaccin.

Algunos agentes qumicos son usados como desinfectantes o antisptico, pero sin la misma efectividad.

ASEPTISAR
Proceso por el cual se aplica un antisptico a la piel o a un tejido vivo a fin de eliminar o disminuir la flora bacteriana patgena o normal. A estas sustancias se llama antispticos. Son muy usados el alcohol ( 60 a 90%), tintura de yodo (0.05 a 0,5%), yodo povidona, cloroheximida (0.2 al 4%). Compuestos de amonio cuaternario, fenol, Mercurio, leja.

AGENTES QUIMICOS
DESINFECTANTES Alcohol Fenol al 5% Jabones Detergentes catinicos Sol. Cloradas (1/10 0.3%) Acidos y alcalis Formaldehdo 3- 8 % ANTISEPTICOS -

Alcohol ETILICO 70 % Clorexidina al 1% Jabones Detergentes Sol. Yodadas Metales pesados

Perxido de Hidrgeno 3-6%

FENOLES Y DERIVADOS
Actan en presencia de materia orgnica Al 5% excelente desinfectante para Micobacterium tuberculosis. De olor muy picante y txico

ALCOHOLES
* Etlico o isoproplico (al 70%) * Concentraciones menores al 45% tienen una actividad incierta * Desinfeccin y antisepsia (2 minutos de contacto mata casi el 90% de los microorganismos cutneos )

CLORHEXIDINA
* Potente antisptico para G+ y G* Acta en presencia de materia orgnica * Puede utilizarse en solucin acuosa o alcohlica al 1%. * Lavado de manos hospitalario.

Detergentes Catinicos (Amonios Cuaternarios)

* Mayor actividad a pH alcalino * No son esporicidas, ni tuberculicidas. En la actualidad las Pseudomonas son refractarias * Su accin es interferida por la presencia de materia orgnica, y son neutralizados por jabones y detergentes aninicos * Se usan como desinfectantes (saneamiento ambiental)

CLORO Y COMPUESTOS
* El ms usado: Hipoclorito de Sodio
* Se usan como desinfectantes de superficie de instrumentos de laboratorio en solucin acuosa (material contaminado 1/10; si no al 0,3%).

* Inestable, las soluciones se deben preparar en el momento y proteger de la luz y el calor.

IODO Y COMPUESTOS
* Para antisepsia de heridas y piel * Tintura de Iodo, Idoforos

PEROXIDO DE HIDROGENO
* Se utiliza al 3-6 % * Solucin madre al 30%, a partir de aqu se hace la solucin final.

* Se debe preparar antes de usar. Guardar en frasco color caramelo

* Para antisepsia de heridas y desinfeccin (dispositivos mdico-quirrgicos y lentes de contacto blandos)

FORMALDEHIDO
* Se presenta comercialmente en solucin acuosa al 40%, a partir de ella se realiza la solucin final al 3 u 8 %(segn uso) * Formalina al 8% esporicida (no menos de 18 hs. A Tambiente) * Para desinfeccin (laboratorio, instrumental, guantes) * Preparacin de vacunas al 0,2- 0,4%. * Los materiales deben seguir el mismo tratameitno que para el xido de etileno y glutaraldehdo. * Uso muy restringido

EMPAQUE / ENVOLTORIOS
La finalidad de empaques o envoltorios es de proveer un barrera para la contaminacin bacteriana de los materiales y permitir su manipulacin en forma asptica. Los materiales usados como empaques deben de reunir ciertos requisitos: Permitir la difusin y penetracin del agente esterilzante. Proveer una barrera adecuada al polvo y microorganismos. Ser resisten tanto a las punciones y manipulaciones. Permitir una presentacin asptica y cierre hermtico. Permitir la identificacin de los contenidos.

ALMACENAMIENTO
Proceso por el cul los artculos y materiales esteriles son conservados adecuadamente hasta su uso. La condiciones de almacenamiento, debe asegurar la esterilidad o desinfeccin del material al momento de su uso.

DURACION DEL MATERIAL ESTERIL

JOSEPH LISTER
Naci en Inglaterra (1827-1912). Triunf sobre la infeccin de las heridas. Creador de la Ciruga Antisptica. Los microbios son causantes de la Infeccin de las heridas. Utiliz el cido fnico como profilctico en heridas infectadas y en fracturas expuestas. * Actualmente se usa el mtodo Asptico

ESTERILIZACION
Es la eliminacin de toda forma de vida microbiana y de priones de un objeto o material atreves de: mtodos fsicos, qumico o gaseosos.

La esterilizacin es absoluta no hay trminos intermedios.

RESISTENCIA A LA ESTERILIZACION
PRIONES

ESPORAS BACTERIANAS MICOBACTERIAS PROTOZOOS VIRUS PEQUEOS SIN ENVUELTA VIRUS GRANDES SIN ENVUELTA ESPORAS FUNGICAS FORMAS VEGETATIVAS BACTERIANAS. *FORMAS VEGETATIVAS FUNGICAS

VIRUS GRANDES CON ENVUELTA

METODOS DE ESTERILIZACION
Mtodos Fsicos
1- Calor Hmedo. 2- Calor Seco. 3- Fro. 4- Desecacin. 5- Presin Osmtica. 6- Radiaciones. 7- Agentes Mecnicos.

Mtodos Qumicos
1- Lquidos: Glutaraldehido al 2% y acido paracetico. 2- Gases: Oxido de etileno, Formaldehido Perxido de hidrogeno. 3- Plasma: - Perxido de hidrogeno - Acido para ctico.

ESTERILIZACION POR CALOR HUMEDO

1- Pasteurizacin. 2- Ebullicin. 3- Tindalizacin. 3- Termo desinfeccin. 4- Vapor Fluente o Libre. 5- Vapor a Presin.

ESTERILIZACION POR CALOR SECO

Incineracin. Llama Directa. Flameado. Esterilizador de bolillas. Estufa u Horno de aire Caliente.

ESTERILIZACION POR FRIO

Refrigeracin. Congelacin. Liofilizacin.

PASTEURIZACION
Proceso de calentamiento de lquidos (alimentos) para la reduccin de elementos patgenos. La pasteurizacin no destruye esporas, ni elimina patgenos termfilos, reduce poblaciones bacterianas hasta un nivel que no causen intoxicaciones alimenticias. Clases de Pasteurizacin: 1- Pasteurizacin Clsica: calentamiento a temperatura de 62 a 63 C por 30 minutos, seguido de un enfriamiento rpido. 2- Pasteurizacin Rpida: calentamiento a 72 0 75C por 15 segundo con enfriamiento rpido. 3- Pasteurizacin a Temperaturas Ultra altas: 135C por 2 seg.

AUTOCLAVADO
Se realiza utilizando el autoclave. Existen diferentes tipos de autoclave, pueden ser automatizadas y no automatizadas. El autoclave se usa para esterilizar: instrumental de vidrio, metal, ropa, medios de cultivo. Utiliza tres parmetros: temperatura, vapor de agua y presin. Los medios de cultivo se auto clavan a 121C a 15 libras de presin (1 atmosfera) por 15 minutos,

AUTOCLAVE
El autoclave tipo Chamberlain o de laboratorio esta constituido por una Caldera de Cobre de doble pared, en su parte inferior lleva una fuente calrica. En la parte superior lleva una Tapa de Bronce con tuercas tipo mariposa, la tapa tiene: un termmetro (T) y un manmetro (presin); tambin lleva un Espita (elimina el aire frio al inicio y el vapor de agua al final del proceso), una Vlvula de Seguridad para eliminar el exceso de vapor cuando se sobrepasa la presin que puede soportar el autoclave. En el interior hay una Rejilla donde se coloca el material que se va auto clavar.

GERMICIDA
Cualquier agente que destruya microorganismos. Afecta la reproduccin del germen, de tal manera que ya no puede reproducirse a un despus de separarse del agente que lo afecta. La accin es irreversible.

BACTERIOSTATICO
El agente bacteriosttico impide la propagacin de los microorganismos, no las mata inmediatamente y no afecta la reproduccin. Este efecto es reversible

MONITORES O INDICADORES DE ESTERILIZACION

CONTROL BIOLOGICO

USO DE INDICADORES

MECANISMO DE ACCION DE LOS ESTERILIZANTES

Desnaturalizacin de la protena celular: el calor y los desinfectante qumicos a altas concentraciones, coagulan o precipitan las protenas. Lesiones en la Pared y Membrana celular: muchos agentes qumico alteran la permeabilidad de la membrana y otros afectando la pared celular y el sistema enzimtico (deterge). Inhibicin de enzimas que tienen grupos SH; por agentes oxidantes como: Cl, I, H2O2,sales de metales (Hg, Ag, Cu). Antagonismos Qumico: Cuando un agente qumico compite por la unin entre la enzima y el sustrato. Inactivacin del Genoma bacteriano y de las enzimas.

METODOS DE ESTERILIZACION: COMPARACIONES