Western Blot Intradermorreaccin

Jaime Ilich Bocanegra Cedillo

Western Blot
Inmunoelectrotransferencia Confirmatoria Fcil manejo Alta especificidad Deteccin de Abs
Vs Ags especficos

Western Blot
Electroforesis de protenas Ag

Membrana de nitrocelulosa

Recortar en tiras

Administrar suero problema, control + y -

Ag-Ab-Anti Ig

Agregar Ab-Anti Ig (Enzima)

Incubar y lavar

Ag - Ab

Agregar sustrato

Precipitacin (Bandas)

Antgenos

Aadir suero
Se transfiere a papel de celulosa

Electroforesis

Gel

Antgenos separados

Papel de celulosa

Seguido de anti-Ac humano y una enzima especfica de sustrato

Complejos AgAc visualizados

Western Blot
+ ?

Interpretacin
Positivo: Bandas coinciden con el control Indeterminado: Otras bandas de reaccin Negativo: No hay bandas

Western Blot
Criterios mnimos de positividad del Western Blot FDA Existencia de por lo menos 3 bandas: p24, p31 y gp41 u otra gp ARC Existencia de al menos 3 bandas una por cada uno de los 3 genes estructurales CDG Al menos dos bandas: p24, gp41 y gp160/120 CRSS Al menos una banda del core (gag/pol) y otra de envoltura (env) OMS Al menos dos bandas de envoltura

Respuesta Inmune Celular

Hipersensibilidad tarda (IV) Clulas inmunocompetentes
Linfocitos Granulocitos Macrfagos Monocitos

Inmunidad
Intracelulares Tumores Rechazo a injertos

Intradermorreaccin
Hipersensibilidad cutnea
Ag(s)

Simple y til Enfermedad infecciosa

Positivo
Exposicin al agente

Intradermorreaccin
Reaccin de la tuberculina
Robert Koch Tuberculina vieja (OT)
Filtrados concentrados de M. Tuberculosis Factor activo: PPD Enrojecimiento e hinchazn

Inyeccin (ID)

Intradermorreaccin
Prueba de Mantoux
PPD (5UT) ID (cara anterior del antebrazo) Prueba +
Vacunados Recuperados de tuberculosis primaria Aparece a las 24-48 hrs Mxima a las 48-72 hrs

Intradermorreaccin
Inyeccin (PPD)
Clulas endoteliales Permeabilidad

Acumulacin de neutrfilos (4hrs)

Salida de fibringeno a tejidos

Infiltracin de LT y monocitos (12hrs)

Hinchazn e induracin del Tejido (48-72 hrs)

Conversin a fibrina y depsito

Intradermorreaccin
Interpretacin de la prueba:
Reaccin +: induracin > 10 mm Reaccin ?: induracin de 5 a 9 mm Reaccin -: induracin < 5 mm

Sujetos en contacto con Px con tuberculosis: 5-9mm = positivo

Intradermorreaccin
Agentes infecciosos
Virus (partculas) Parsitos Hongos
Toxoplasma

Candida

Histoplasma

Bacterias
Tuberculosis Difteria Lepra Brucelosis Diagnstico (poco) Epidemiolgico Estreptococos

Uso

Intradermorreaccin
Anergia
Hiporreaccin
Desordenes inmunitarios Infecciones Inmunosupresores Antiinflamatorios Errores tcnicos

Intradermorreaccin
Fallas tcnicas
Concentraciones inadecuadas de Ag Absorcin del Ag en el contenedor Exposicin a la luz/calor Inyeccin inadecuada Lectura inadecuada

Reaccin adversas
Px hipersensibles

Reacciones locales marcadas Antgeno diluido