Implicacin de la Sustancia P en la Memoria Y Aprendizaje

BAUTISTA, ALEJANDRO NIETO, JAVIER

1. ___________ 1.Introduccin

2. _________ _ _______ 2.Materiales y mtodos

3. _________ 3.Resultados 4. ________ 4.Discusin 5. _________

5.Conclusin 6. ___________ 6.Bibliografa

Introduccin

Objetivos
1. Estudiar el efecto de la sustancia P sobre el fenmeno de potenciacin a largo plazo (LTP) en el hipocampo 2. Determinar el tipo de receptores que median dicho efecto

Sustancia P y NK-1 en el SNC

Telenc. Corteza Hipocampo Dienc. Hipotlamo posterior T.E. S. Gris P.A. Rafe magno M.E. Ganglios sensoriales

GGBB

Astas posteriores

Bulbo olfatorio

Tlamo Hipotlamo (varios ncleos)

Cerebelo Ncleo hipogloso

Astas posteriores

Amgdala
Hipocampo

Hipocampo

Potenciacin a Largo Plazo (LTP)

Mecanismos moleculares

Materiales y mtodos

Materiales
Cmara de registro de inmersin Drogas: SP y L-733060 Microscopio de transmisin 40X Microelectrodos
ESTIMULACIN: Bipolar de tungsteno REGISTRO: Vidrio con solucin salina NaCl 3M

Amplificador, filtro (3kHz), Interfaz A/D (10kHz) Ordenador Apple y software Pulse + IGOR Pro

Preparacin
Animales: cobaya
Anestesia con ter Extraccin de cerebro

Cortes de hipocampo
Transversales, 400 m En medio ice-cold

Incubacin
Cmara de incubacin, 25C Medio equilibrado con 95% O2, 5% CO2 Glucosa y sales: Na+, K+, Ca2+, Mg2+, Cl-, PO43-, SO42-, CO32-

Registro electrofisiolgico
ESTIMULACIN: Va colateral de Schaffer
A. Estimulacin de prueba Constante, 50 s, 4mA Diseada para evocar 2/3 del fEPSP mximo B. Estimulacin de alta frecencia (HFS) LTP Dos rfagas de 100 Hz, 1s, 4mA, separadas 10s

REGISTRO: clulas piramidales de CA1

Registro extracelular de una poblacin de neuronas

Aplicacin de las drogas

Por superfusin de los cortes en cmara de inmersin
2 ml/min 45 s para difusin total de la droga

L-733060 siempre 20 min antes que SP Presentes en el medio hasta el final del experimento

Procedimiento
1. 2. 3. 4. 5. Registro basal (10 min) Aplicacin de la/s droga/s (20 min) Registros de prueba Induccin de LTP (HFS) Registros de prueba (60 min)

Anlisis estadstico
Magnitud medida
Pendiente del fEPSP

Normalizacin (% de control) Obtencin de medias y SEM Prueba t para la comparacin de 2 medias

Nivel de significacin = 0.05 (confianza 95%)

Resultados

Efecto de la Sustancia P y HFS

Efecto de diferentes concentraciones de Sustancia P y su antagonista en el Potencial exitatorio postsinptico (fEPSP)

Magnitud de la Potenciacin a Largo Plazo (LTP)

Efecto del antagonista L733060

Comparacin entre experimentos

Discusin

La Sustancia P tiene efectos excitatorios en el hipocampo y facilita la LTP por la activacin de receptores NK-1.

Concentration de 1 M SP (experimento)

La Sustancia P y Antagonista frente a receptores NK-1

Potencial excitatorio postsinptico (fEPSP)

Conclusin

 Dichos experimentos demuestran que la sustancia P tiene efectos excitatorios en el hipocampo y podra facilitar la Potenciacin a Largo Plazo (LTP) mediante la activacin de los receptores NK-1 del hipocampo.
Sustancia P MEMORIA

L733060 (antagonista)

MEMORIA

Cuestiones por resolver

 Se desconocen los efectos conductuales que se produciran con el bloqueo de NK1 en el hipocampo con L733060. El aumento de SP se debe a inmersin, por lo que no queda claro que implicacin tiene a niveles reales.

Investigaciones relacionadas
En un estudio conductual con ratas la disminucin de los receptores NK1 en el estriado reducen la memoria procedimental. (Liu X-mei, Shu SY, Zeng C-chun, et al.; 2011)
NK-1 MEMORIA

Ratones Knock Out de receptores NMDA carecen de LTP (Tsien JZ, Huerta PT, Tonegawa S.; 1996)

LTP

Otros receptores y Neuroptidos involucrados en la memoria

TFF3 Neuropptido S Neuropptido Y Neuropptido NAP CRF Vasopresina y ADH ACTH y MSH -endorfina y metencefalina PACAP en Drosophila

Publicaciones

ISI Web of Knowledge

PubMed Science Direct

SP and Neuropeptide Memory and Memory 204 598 143 2742 7711 17563

Bibliografa
1. Langosch JM, Kupferschmid S, Heinen M, et al. Effects of substance P and its antagonist L-733060 on long term potentiation in guinea pig hippocampal slices. Progress in Neuro-Psychopharmacology and Biological Psychiatry. 2005;29(2):315-319. 2. Liu X-mei, Shu SY, Zeng C-chun, et al. The Role of Substance P in the Marginal Division of the Neostriatum in Learning and Memory is Mediated Through the Neurokinin 1 Receptor in Rats. Neurochemical Research. 2011;36:1896-1902. 3. Tsien JZ, Huerta PT, Tonegawa S. The Essential Role of Hippocampal CA1 NMDA ReceptorDependent Synaptic Plasticity in Spatial Memory. Cell. 1996;87(7):1327-1338. 4. Huston JP, Oitzl MS. The relationship between reinforcement and memory: parallels in the rewarding and mnemonic effects of the neuropeptide substance P. Neuroscience & Biobehavioral Reviews. 1989;13(2-3):171180. 5. Huston JP, Hasenhrl RU. The role of neuropeptides in learning: focus on the neurokinin substance P. Behavioural Brain Research. 1995;66(1-2):117-127. 6. Bingmann D, Speckmann EJ. Specific suppression of pentylenetetrazol-induced epileptiform discharges in CA3 neurons (hippocampal slice, guinea pig) by the organic calcium antagonists flunarizine and verapamil. Experimental Brain Research. 1989;74(2):239248.