ALFONSO R.

FUENTES CALCINO

CONTENIDO DE LA SESION 05 BIOLOGIA Forense 1.- BUSQUEDA DE INDICIOS BIOLOGICOS Como introduccin se enumeraran cuales son los indicios biolgicos ms frecuentes en los Laboratorios Forenses. La metodologa a seguir en la bsqueda vendr condicionada por las circunstancias particulares de cada caso en concreto; si bien es muy conveniente efectuar una interpretacin in situ de los indicios antes de manipular nada, ya que una correcta valoracin de los mismos exige su estudio dentro del contexto del lugar en que se ha producido el delito. La bsqueda en s debe de ser minuciosa, ordenada y sistemtica, extremando las precauciones para no pasar por alto algn indicio o destruirlo inadvertidamente; siendo muy recomendable seguir los mtodos de dividir la escena en cuadrculas, que se irn examinando sucesivamente, o bien en crculos concntricos, tomando como centro el lugar que consideremos ms importante, por ejemplo, la ubicacin del cadver. En cualquier caso, antes de proceder a la recogida, se debe documentar la localizacin de todos los indicios biolgicos que se vayan a recoger mediante esquemas, fotografas o vdeo, lo cual nos podr servir para poder plantear una hiptesis sobre los hechos. En cuanto a los lugares de bsqueda, vendrn condicionados por las circunstancias particulares de cada caso en concreto. A ttulo de ejemplo, se describir como se procedera en los casos ms comunes (lugar cerrado, abierto, vehculos, vctima y agresor). 2.- RECOGIDA DE INDICIOS BIOLOGICOS Durante el proceso de recogida es muy conveniente adoptar una serie de precauciones que abarcan un doble mbito: La proteccin del personal encargado de la recogida y la proteccin de las muestras (esta ltima para evitar distintos procesos que puedan afectar a su integridad, fundamentalmente la posible contaminacin de las mismas).

ALFONSO R. FUENTES CALCINO

Como complemento a la prctica de la Inspeccin Ocular, en muchos casos se efecta la toma de las denominadas muestras de referencia o indubitadas, que seran aquellas de las que sabemos de qu persona proceden (vctima, sospechoso, cadver) para su cotejo con las evidencias recogidas en el lugar del delito (muestras dubitadas).

En lo referente a la recogida de indicios biolgicos en el lugar de los hechos, se enumerarn las normas bsicas a seguir para efectuar una correcta recogida de los indicios, con ejemplos de la casustica mas frecuente (manchas en soportes pequeos y de fcil transporte, en soportes no transportables, soportes absorbentes y no absorbentes, indicios hmedos, lquidos, pelos, etc.) 3.- EL LEVANTAMIENTO DEL CADVER Se trata de una actuacin judicial por la que se constituye en el lugar de los hechos la Comisin Judicial, formados por el Juez, el Secretario, el Mdico Forense y el Perito Judicial. Una vez practicada, el Juez ordena el LEVANTAMIENTO DEL CADVER y su traslado al lugar donde vaya a realizarse la autopsia. La diligencia de inspeccin ocular y levantamiento del cadver es de extraordinario inters mdico forense ya que como dice el profesor Gisbert un examen a la ligera del cadver en el lugar de los hechos puede invalidar y hacer ineficaz la ms minuciosa y perfecta de las autopsias. En primer lugar, se trata de proceder al examen del cuerpo para comprobar la realidad de la muerte, el momento estimado del fallecimiento y el posible origen (natural o violento) de la misma. A continuacin habr que recoger aquellos datos e indicios que nos permitan la posibilidad de reconstruir los hechos, una aproximacin a la causa, circunstancias de la muerte y la posible intervencin de terceros. Para ello se tomar nota de los siguientes datos: posicin del cuerpo y relaciones con el entorno, examen somero de las ropas, apreciacin de lesiones de forma general, bsqueda y recogida de indicios biolgicos y no biolgicos y cualquier otra circunstancia de inters. Es fundamental apoyar la recogida de estos elementos con croquis, esquemas, fotografas o videos.
2

ALFONSO R. FUENTES CALCINO

Cindonos al tema que nos ocupa es evidente que en el estudio biolgico forense de un determinado caso nosotros somos el primer eslabn de la cadena. De nada sirve un extraordinario laboratorio, con los mejores recursos humanos y materiales, s el mdico forense no sabe que indicios buscar, como los tiene que recoger, conservar, enviar y que tiene que solicitar al laboratorio. VESTIGIOS DE INTERS MDICO LEGAL
BIOLGICOS NO BIOLGICOS - Sangre - Ropas - Semen - Balas, tacos, perdigones - Restos - Fibras diversas. - Tejidos - Restos de pintura - Uas - Fragmentos de vidrio - Mordeduras / saliva - Tierra -Otros - Otros

CONSERVACIN DE LOS VESTIGIOS A.- DURANTE EL TRASLADO - Evitar prdidas y contaminaciones. - Proteger las manos - Envolver el cuerpo. B.- EN EL DEPSITO - Mnima manipulacin. - No retirar envoltorio. - No desnudar ni lavar. - No obtener la necrorresea. RECUPERACIN DE LOS VESTIGIOS I.- EXAMEN CUIDADOSO DEL CUERPO - Bsqueda de elementos adheridos en ropa / piel. - Toma de muestras de sangre. - Toma de muestras de uas - Toma de muestra de boca / ano / vagina.
3

ALFONSO R. FUENTES CALCINO

II.- RECOGIDA DE VESTIGIOS BIOLGICOS III.- RECOGIDA DE VESTIGIOS NO BIOLGICOS RECONOCIMIENTO Y RECOGIDA DE MUESTRAS DEL POSIBLE AUTOR INSPECCIN GENERAL. Encaminada a la bsqueda de lesiones o signos de lucha o defensa, que puedan orientarse hacia su participacin en los hechos. RECOGIDAS DE INDICIOS. Ropas que llevaba en el momento de la agresin. Muestras de pelos: cabellos, barba, bigote, vello pbico... Muestras de sangre y/o saliva. Hisopo lavado de glande.

OTROS PROBLEMAS MDICO LEGALES QUE NOS PUEDE RESOLVER LA BIOLOGA FORENSE

INVESTIGACIN BIOLGICA DEL PARENTESCO INDIVIDUALIZACIN DE RESTOS HUMANOS. IDENTIFICACIN DE RESTOS SEOS. ESTUDIO BIOLGICOS DE LA MUERTE POR SUMERSIN. Si nos dejsemos llevar por nuestra imaginacin, uno pensara que no hay nada imposible para un laboratorio de biologa, en este caso forense, y esto es porque la visin que la sociedad recibe de la biologa moderna suele ser a menudo una simplificacin llena de falsedades procedentes del sensacionalismo periodstico y de la ciencia-ficcin. A pesar de los avances tecnolgicos, an quedan cuestiones por resolver, tales como la data exacta de una mancha, por ejemplo. Los tipos de estudios solicitados ms frecuentemente en un laboratorio de biologa forense son: Estudios de filiacin: el caso ms simple sera la investigacin biolgica de la paternidad o maternidad en un tro hijo-madre-padre o bien contando nicamente con el progenitor cuestionado y el hijo. Las complicaciones aparecen cuando no es posible contar con el progenitor cuestionado por
4

ALFONSO R. FUENTES CALCINO

fallecimiento, siendo necesario en tal caso recurrir al anlisis de otras muestras biolgicas del fallecido, al anlisis de familiares directos de ste que permitan reconstruir su genotipo o incluso a la exhumacin del cadver. Estudios de identificacin de restos cadavricos: se realiza mediante el anlisis biolgico de maternidad o paternidad o en su defecto anlisis de otros familiares que compartan la lnea materna o paterna. Tambin puede recurrirse al anlisis de otras muestras biolgicas del fallecido o de objetos personales del mismo. Identificacin de indicios biolgicos de inters criminal: son el tipo de anlisis ms solicitado en el laboratorio de biologa forense. Todos los indicios recogidos sobre la vctima, el sospechoso o el lugar de los hechos deben ser objeto de un minucioso y exhaustivo estudio que permita localizar, conocer o confirmar la naturaleza de los indicios, que variaran en funcin de las caractersticas del suceso investigado. Los vestigios biolgicos ms frecuentes son los restos de sangre, fluidos seminales, fluidos vaginales, saliva, pelos y restos orgnicos en uas. Otro tipo de restos biolgicos menos frecuentes son la orina, las heces, la caspa, las uas... . En el prximo tema de este curso tendremos ocasin de conocer en detalle cuales son los mtodos de deteccin de estos indicios en funcin de sus caractersticas, los tipos de soporte ms frecuentes sobre los que se encuentran as como sus posibilidades de individualizacin.

Identificacin de especie: determinados restos hallados casualmente pueden ser indicios de hechos delictivos que puedan ser causa para abrir una investigacin. La solicitud de identificacin de especie suele ir frecuentemente ligada al hallazgo de restos seos muy fragmentados o cualquier otro resto orgnico del que pueda sospecharse un origen humano. Estudios complementarios en casos de muerte por sumersin-asfixia: siempre que se recupera un cadver del agua o cuando se sospecha que la causa de la muerte puede haber sido la sumersin, ser necesario confirmar los datos macroscpicos obtenidos en la autopsia mediante estudio anatomopatolgico y considerar otros datos tales como la existencia de hidremia ( hemodilucin de la sangre del ventrculo izquierdo respecto de la del derecho) y la existencia de elementos formes en las vsceras del cadver que deben compararse, siempre que sea posible, con las del lquido de sumersin. Estudios bioqumicos en casos de muertes sbitas e intoxicaciones: En casos de shock anafilctico, los marcadores biolgicos que se investigan son la
5

ALFONSO R. FUENTES CALCINO

histamina, la triptasa y la IgE total y la especfica. En casos de muerte sbita interesa la determinacin de glucosa, urea, creatinina y cloruros. En casos de intoxicacin por organofosforados y carbamatos se proceder a la determinacin de acetilcolinesterasas y/o pseudocolinesterasas. Identificacin de setas y plantas superiores en casos de intoxicacin: cuando se sospecha una intoxicacin debida a setas o plantas txicas es necesario la identificacin del elemento txico para confirmar si es el responsable de los sntomas observados. La confirmacin del origen de la intoxicacin servir para adecuar el tratamiento mdico al txico concreto en funcin de su naturaleza. A tal fin, deben enviarse al laboratorio los especimenes completos responsables de la intoxicacin, si se cuenta con ellos, o restos cocinados o de contenido gstrico. Es posible identificar restos de setas en contenido gstrico o en otras muestras utilizando tcnicas de ADN, como veremos a lo largo de este curso. Estudios microbiolgicos en muestras postmortem en casos de etiologa no aclarada: en el caso concreto del INTCF se realizan nicamente en el Departamento de Madrid y su finalidad es intentar arrojar algo de luz en aquellos casos de muertes de etiologa desconocida en los que se sospeche un origen infeccioso. Si durante el curso de la investigacin se detecta algn patgeno de reconocida alarma social tal como el meningococo, en colaboracin con otros centros de referencia se proceder a informar a la consejera de salud correspondiente y a la puesta en marcha de los dispositivos de control epidemiolgico.

Estudio del contenido gstrico: en algunos casos, conocer el estado de la digestin as como la naturaleza de la ltima comida puede aportar datos en una investigacin. A menudo, la integridad de los fragmentos de alimento hallados en un contenido gstrico podra indicar un perodo corto de digestin, sin embargo, este dato no puede correlacionarse con una ingesta inmediata al momento de la muerte ya que pueden confluir muchos factores que hacen esta correlacin muy inexacta. Los estados emocionales del individuo as como la propia naturaleza de los alimentos influyen en el tiempo de digestin y permanencia de los alimentos en el estmago. IDENTIFICACIN DE INDICIOS

ALFONSO R. FUENTES CALCINO

Los tipos de indicios ms comnmente estudiados en el laboratorio de biologa forense son los restos de sangre, semen, fluidos vaginales, saliva y pelos, que se presentan sobre una amplia variedad de soportes. Casi todos tienen en comn que son escasos, estn degradados o contaminados y son nicos e irrepetibles. La localizacin de una determinada evidencia de asiste a menudo con el uso de una fuente de luz forense que nos permite la utilizacin de diversas longitudes de onda y diversos filtros para detectar la fluorescencia tpica de los fluidos orgnicos. En nuestro laboratorio contamos con una de estas fuentes (MCS-400 de Spex Forensics) basadas en el uso de distintos filtros, que han ido reemplazando a las fuentes laser por sus ventajas en el campo forense. Tras ser localizado, realizaremos una serie de pruebas preliminares, especficas para cada tipo de indicio, con las que estableceremos el diagnstico de orientacin o de certeza sobre la naturaleza del indicio. Sangre: es un tipo de indicio fcilmente reconocible sobre determinados soportes. Existe una amplia variedad de tests de diagnstico previo que ponen de relieve su presencia (luminol, benzidina, fenolftaleina, o-toloidina, guayacol, verde leucomalaquita...). Los tipos de soporte ms comunes sobre los que se presenta son ropas, armas, uas, en el lugar de los hechos (tierra, suelo, piedras, paredes..). El estudio de la morfologa de las manchas en la escena del delito proporciona informacin a cerca de cmo se produjeron los hechos. Semen: el principal componente celular del semen es el espermatozoide, clula especializada flagelada que suele medir entre 50 y 55 m, distinguindose bsicamente dos partes: cabeza y cola. Su nmero puede variar entre 50 x 106 y 150 x 106 por mililitro de eyaculado, con una media de unos 100 x 106/ml en individuos normospermos. El volumen de eyaculado tambin vara entre unos 2 ml y 6 ml con un valor medio de unos 3,5 ml. Existe una gran variabilidad en estos datos no slo entre individuos, sino tambin dentro del mismo individuo segn la edad o entre distintos eyaculados. Adems de los espermatozoides, en el semen podemos encontrar otros elementos formes tales como leucocitos y clulas epiteliales del tracto urinario aunque en nmero mucho menor. As, si en un individuo normospermo podemos esperar unos 450 g de ADN/ml de eyaculado, en un individuo azoosprmico esperaremos unos 30 g, esto es, slo un 6,3% del normal. Otros rasgos caractersticos del semen son su pH bsico (8,3) y su capacidad de fluorescer en la regin visible del espectro cuando es irradiado con luz ultravioleta. La presencia caracterstica de altas concentraciones de fosfatasa
7

ALFONSO R. FUENTES CALCINO

cida y de una protena especfica (protena P30 PSA) sern rasgos que se utilicen en el diagnstico previo ( test presuntivos) en la investigacin de restos de semen. Las tcnicas de confirmacin implican la observacin de espermatozoides en preparaciones microscpicas realizadas a partir de las muestras a analizar. Fluidos vaginales: las clulas del epitelio vaginal sintetizan glucgeno bajo la accin de los estrgenos. La identificacin de estos restos se basa en esta particularidad (Reaccin de PAS (+) Periodic Acid-Schiff) as como en la presencia de flora bacteriana caracterstica (bacilos de Dderlein). Sin embargo, este carcter glucogenognico est ausente en mujeres amenrquicas (aunque las terapias con estrgenos pueden afectar esto) y sufre variaciones durante el ciclo menstrual, alcanzndose los niveles ms altos de glucgeno durante la ovulacin. Estas clulas no son exclusivas del epitelio vaginal ya que se encuentran tambin en menor cantidad en la boca y en el tracto uretral de hombres (en concreto en la fosa navicular). Por tanto, el hallazgo de unas pocas clulas puede ser comprometido, hecho que se da a veces cuando se solicita la localizacin de clulas procedentes del epitelio vaginal en un hisopo penil. Saliva: a menudo estos restos se hallan en cantidades mnimas, por lo que es comprometido decidir entre la identificacin del tipo de vestigio o la obtencin del perfil de ADN. Los humanos producimos entre 1 y 1,5 litros de saliva al da y, acompaando a la saliva, se encuentran las clulas descamadas del epitelio bucal que sern el sustrato para la extraccin de ADN en estos restos. Las pruebas de orientacin se basan en la deteccin de actividad alfa-amilasa. Esta enzima no es especfica de la saliva, se encuentra tambin en el pncreas, en el sudor, en la leche materna, en el semen y en los fluidos vaginales. Puede considerarse un buen marcador para la presencia de saliva ya que sus niveles son 50 veces ms altos en saliva que en el resto de fluidos orgnicos. Las amilasas se encuentran tambin en animales (tipo alfaamilasas) y en plantas (tipo beta-amilasas). Para la confirmacin de presencia de restos de saliva debern observarse clulas del epitelio bucal en los extractos de las muestras. Los soportes ms comunes son colillas, sellos, sobres, mordazas, mordeduras, manchas en ropas, chicles, vasos... . TRICOLOGIA. Estudio y tratamiento del pelo sus caractersticas y fenmenos. Pelos: en los mamferos, el pelo atraviesa tres fases en su ciclo de crecimiento, angena, catgena y telgena. La fase angena es la fase de crecimiento activo del pelo, en ella las clulas del folculo se multiplican por mitosis y forman el pelo al queratinizarse completamente.

ALFONSO R. FUENTES CALCINO

Un cabello humano crece a un ritmo aproximado de 0.35 mm por da. La fase catgena es una transicin entre el estado de crecimiento activo y el estado de no crecimiento. En la fase telgena, ha cesado la actividad del folculo. Una cabeza humana tiene aproximadamente entre 100.000 y 150.000 folculos pilosos, de los cuales entre el 80 y el 90% estarn en fase angena y entre el 10 y el 20% en fase catgena o telgena. En nuestra actividad diaria, los humanos perdemos entre 50 y 100 pelos. A menudo un perito es consultado sobre la cuestin de s un determinado pelo hallado en la escena de un crimen puede haber sido arrancado o simplemente cay all. Si el pelo fue arrancado por la fuerza muy probablemente quedar tejido folicular adherido a la base del pelo, sin embargo es posible arrancar pelos que estuviesen en fase telgena o que no cuenten con ningn tejido adherido a la base. Por tanto, la ausencia de tejido folicular no prueba necesariamente que el pelo fuese cado y no arrancado. A diferencia de los cabellos, los pelos pbicos pasan ms tiempo en fase telgena que en angena. La mayora de los pelos que encontraremos en casos de agresin sexual sern telgenos. De entre todas las evidencias, los pelos son los ms susceptibles de transferencias secundarias. Restos en uas: una excoriacin leve en la piel, cuyas seales desaparezcan a las 24 horas, puede dejar restos epidrmicos en las uas suficientes para obtener un perfil de ADN por PCR. Un estudio realizado entre voluntarios que se produjeron excoriaciones leves y superficiales que desaparecieron dentro de las 24 horas posteriores al experimento concluy que: los dedos ndice y medio producen los araazos ms largos y profundos; a igual fuerza aplicada, en los araazos sobre regiones de piel ms suave tales como el cuello o zona superior del brazo se recuperaron restos epidrmicos pero no as en zonas de piel muy curtidas como el antebrazo; se encontr una correlacin entre la fuerza aplicada y la cantidad de ADN recuperado. Otros tipos de indicios menos frecuentes en el laboratorio: a veces se solicita al laboratorio el anlisis de restos que, aunque no son habituales, pueden aportar datos importantes a la investigacin de un caso determinado. Entre estos restos podemos citar: Restos de orina: La identificacin de la orina se basa en la deteccin de iones o compuestos orgnicos que se hallan ms concentrados en orina que en otros fluidos fisiolgicos, tales como la urea o creatinina, tambin presentes en sudor, sangre, saliva, semen... pero en menor concentracin. Contiene clulas

ALFONSO R. FUENTES CALCINO

epiteliales del tracto urinario, as como leucocitos y eritrocitos, muy diluidas en la orina, por lo que la esperanza de recuperar ADN a partir de manchas de orina es muy baja. Adems, la flora bacteriana propia de la orina acelera los procesos de degradacin en la muestra. Heces: La identificacin de restos fecales se basa en la presencia de pigmentos biliares y de restos alimenticios no digeridos. Son un psimo sustrato para la extraccin de ADN. No es posible el estudio de ADN nuclear en estos restos debido a la extrema degradacin y a su contaminacin natural (aproximadamente la tercera parte del peso seco de las heces son bacterias). Sin embargo, si se han conseguido resultados en ADN mitocondrial, en concreto la regin HV1, partiendo de 10 mg de heces frescas. Otros restos tambin analizados en el laboratorio son secreciones nasales, uas, restos de tejido, caspa... TECNOLOGA DEL ADN EN EL PROCESADO DE MUESTRAS FORENSES De todas las partes que comprende una investigacin criminal, sta que a continuacin desarrollaremos, pondr de manifiesto la capacidad pericial y profesional del laboratorio de biologa forense. De forma general y una vez que tenemos seleccionadas las muestras objeto de anlisis, todo el proceso analtico se puede dividir en tres grandes bloques: EXTRACCIN de ADN, AMPLIFICACIN (PCR) y DETECCIN. Extraccin de ADN Posiblemente, de los tres bloques citados anteriormente, la extraccin constituya el paso ms crtico, ya que cualquier manipulacin errnea de la muestra en esta etapa inicial del proceso puede conducirnos a su descarte, siendo en algunos casos, el nico indicio biolgico de que se dispone para resolver un delito. Cualquier laboratorio forense debe contar con diferentes mtodos de extraccin que permitan obtener en cantidad y calidad suficiente ADN de la enorme variabilidad muestral que recibe. Los mtodos de extraccin se pueden dividir en tres grupos: a) Aquel que comprende una digestin, una extraccin orgnica y una purificacin-concentracin o, como alternativa, una precipitacin con etanol. Se utiliza para la mayora de las muestras biolgicas de inters forense. b) Aquel que comprende una etapa de digestin seguida de una precipitacin con etanol. Se usa, principalmente, para obtener mucha cantidad de ADN a partir de sangre en buen estado.
10

ALFONSO R. FUENTES CALCINO

c) Aquel que comprende solo una extraccin directa mediante membranas especiales o bolas de slice o similares. Su uso se limita normalmente a muestras de sangre lquida. Centrndonos en el primer mtodo de extraccin, y en concreto en la digestin lo que se consigue con ella es romper toda la estructura celular, es decir, se alteran todos los sistemas membranosos de la clula as como todas las estructuras en las que estn implicadas protenas (nucleosomas, citoesqueleto celular, etc.), dejando el ADN libre. Para ello, se utiliza un tampn de lisis con detergente (SDS) para solubilizar los lpidos y una enzima proteoltica (Proteinasa K) para lisar las protenas. Una vez que se encuentran todos los componentes celulares libres entre s, pasamos al proceso de extraccin propiamente dicho, donde se recuperar el ADN de todo ese caldo molecular. El mtodo ms extendido de todos es el de extraccin orgnica con fenol cloroformo isoamlico (FCI). Al mezclar esta solucin de FCI con el lisado celular obtenido de la etapa de digestin se genera una emulsin, que despus de un centrifugado, permitir separar el ADN de todo el material celular, aunque a veces junto con el ADN se separen otras molculas que ser una fuente potencial de inhibidotes para el proceso de amplificacin. Seguidamente, se aade N-butanol para eliminar los posibles restos de fenol que pudieran haber quedado en la solucin acuosa. A continuacin, esta solucin acuosa se pasa por unidades de microfiltracin-purificacin para obtener un ADN lo ms limpio posible, ptimo para el proceso de amplificacin. Alternativamente a esta ltima etapa podremos llevar a cabo una precipitacin con etanol. Como ejemplo de mtodos de extraccin directa expondremos la extraccin con Chelex y con columnas GFx, entre otros. Por ltimo, realizaremos un recorrido por los distintos tipos de muestras que llegan al laboratorio y por los mtodos de extraccin que se aconseja aplicar en cada caso. Adems, se abordar brevemente la cuantificacin del ADN humano y sus diferentes mtodos. Amplificacin de ADN Sin lugar a dudas, posiblemente el desarrollo de esta tecnologa de la Reaccin en Cadena de la Polimerasa (PCR) y su aplicacin a la biologa molecular ha
11

ALFONSO R. FUENTES CALCINO

permitido que este campo de la ciencia se haya desarrollado a un ritmo espectacular. El proceso en s mismo es muy sencillo; utilizando solo unos cuantos ingredientes se puede multiplicar (en millones de copias) cualquier fragmento de ADN que queramos. Desde el punto de vista molecular se requiere exclusivamente dNTPs, Cl2Mg, cebadores, polimerasa termorresistente, agua y el molde de ADN que se quiera multiplicar. El proceso de amplificacin se puede dividir en tres etapas: a) Desnaturalizacin del ADN a 95C b) Annealing o unin de los cebadores al molde de ADN c) Extensin, es decir, la polimerasa empieza a fabricar la nueva cadena de ADN. Como requerimiento instrumental se necesitar un Termociclador. En definitiva, la PCR constituye un mtodo fiable, sencillo, rpido y econmico. Sistemas de deteccin de ADN Hace unos aos, la gran mayora de los laboratorios de gentica molecular utilizaba como principal sistema de deteccin, geles de poliacrilamida seguidos de una tincin con plata. Sin embargo, con el desarrollo de los secuenciadores automticos, que combinan qumica y fluorescencia tanto en su formato de gel como de capilar, no solo se ha mejorado en gran medida la calidad y la rapidez en la deteccin de un producto amplificado, sino que adems ha permitido incluso analizar simultneamente fragmentos de ADN del mismo peso molecular. Dentro de los secuenciadores automticos parece que ha tomado ventaja en el mercado el de capilar respecto al de gel entre otras razones porque requiere una menor manipulacin de la muestra y permite reanalizarla sin tener que volver a prepararla. En la actualidad existen varios modelos de secuenciadores del formato de capilar: uno, cuatro, diecisis y noventa y seis capilares.

12