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Relación Huésped
Relación Huésped
resumen
Se describe la asociación de la geoduck Panopea abbreviata y el alga verde Coccomyxa
parasitica.
La identidad del alga verde fue confirmada por estudios moleculares; el alga se encontró
dentro de los hemocitos que se infiltran en el tejido conectivo de los sifones geoduck.
Características citológicas de los hemocitos.
no fueron alterados por la infección de algas; muy a menudo las algas se veían envueltas
por una vacuola digestiva dentro del citoplasma de los hemocitos, evidenciando diversos
grados de reabsorción. Células conectivas de sifones rara vez estaban infectados por C.
parasitica. La prevalencia media de C. parasitica fue mayor (82%) en San Matías
Golfo (42000S, 65050W) que en el Golfo San José (45%) (40320S, 64020W); a excepción
de la primavera, cuando los dos las localidades no mostraron diferencias en las
prevalencias (80%). Independientemente de la ubicación, la temporada y el tamaño del
huésped, los geoducks infectados mostraron valores de índice de condición más bajos que
los no infectados. En cuanto a otros bivalvos especie, sólo se encontró infectado un
ejemplar de navaja Ensis macha, y ninguna de las ostras Ostrea puelchana y Pododesmus
rudis y la vieira Aequipecten tehuelchus fue parasitada por el verde alga.
1. Introducción
2. Materiales y métodos
Trozos de tejidos de dos geoducks que muestran coloración verde fueron cortados y
conservados en etanol 96% hasta el análisis molecular fue realizado. Un sobrenadante
verde obtenido después de triturar tejidos con una espátula se pipeteó en un microtubo
Eppendorf y centrifugado (5000 rpm, 5 min) utilizando una minicentrífuga de mesa.
Se recogió un sedimento verdoso mezclado con restos de tejido. El sobrenadante se
centrifugó nuevamente (12.000 rpm, 10 min) y una segunda
Se obtuvo un sedimento de color verde oscuro. Ambos gránulos se enjuagaron en
100 ll de tampón de extracción de bromuro de N-cetil N,N,N,-trimetilamonio (CTAB)
(Ishida et al., 1999) y se transfirieron a un tubo de centrífuga de 2 ml. Una cantidad de
perlas de vidrio (G-8772, Sigma Chemical Co., St. Louis, MO, EE. UU.) suficiente para llenar
la parte cónica del
Luego se añadió el tubo de centrífuga. Luego se usó un MiniBeadBeater (Biospec Products,
Bartlesville, OK, EE. UU.) para romper las células, con agitación durante 20 s a máxima
velocidad. A continuación, la mezcla se centrifugó a 5000 rpm durante 5 min para separar
las fases. La fase acuosa se extrajo a un nuevo tubo de microcentrífuga y se extrajo el ADN
después de una modificación con bromuro de N-cetil N,N,N,-trimetilamonio al 1 %.
(CTAB) protocolo (Ishida et al., 1999). La posibilidad de obtener Secuencias de ARNr de
SSU de las algas infectantes utilizando cebadores específicos
Para evitar la amplificación simultánea de las secuencias de ARNr de SSU del huésped y
eludir, si es posible, el paso de clonación, se probado Una secuencia parcial del gen SSU
rRNA (568 bases, idéntica para los dos gránulos mencionados anteriormente) se amplificó
utilizando los cebadores de oligonucleótidos (SSUF) 50-CCG ACT CGC GGT GAA TCA-30 y
(SSUR) 50-GGC CAG AGT CCT ATC GTG-30
Los cebadores se diseñaron con base en el conjunto de datos SSU rRNA utilizado por
Rodríguez et al. (2008) para amplificar secuencias parciales de ARNr de SSU
pertenecientes a Trebouxiophyceae, incluidas las algas similares a Coccomyxa que se
encuentran en M. edulis. Secuencias adicionales de ARNr de SSU de Panopea japonica y
P. abrupta fueron inspeccionados para confirmar eso e interacciones (Newey et al., 2005).
También se utilizó el análisis GLM para probar el efecto de la presencia, la ubicación, la
estación y el tamaño del parásito en el índice de condición. En este caso, se utilizó una
distribución de error gaussiana junto con una función de vínculo de identidad. Los
intervalos de confianza para las medias de tratamiento estimadas se obtuvieron mediante
una rutina de arranque no paramétrico utilizando 2000 repeticiones (Efron y Tibshirani,
1993). Todos los análisis se realizaron utilizando lenguaje R (R Development Core Team,
2008).
3. Resultados