ESPECTROSCOPIA

DAVID AXEL CONTRERAS PÉREZ

 ESPECTROSCOPIA UV-VIS
FUNDAMENTOS
DEFINICIÓN
La técnica espectrofotométrica
que se utiliza para medir la
intensidad de la luz en las
regiones UV (10–400 nm) y VIS
(400–800 nm) en función de la
longitud de onda
El espectro producido después de la
El analito absorbe la luz de
absorción de la luz UV-VIS resulta de la
una longitud de onda
interacción de EMR en la región UV-VIS con
específica (solo UV y VIS) y se
el analito. Constituye la base para analizar
mide la cantidad de radiación
una variedad de sustancias como
absorbida por el analito.
compuestos orgánicos, inorgánicos,
bioquímicos y farmacéuticos.
Rehman, K., & Akash, M. S. H.
(2020). Essentials of
Pharmaceutical Analysis.
https://doi.org/10.1007/978-981-
15-1547-7
 ABSORCIÓN DISOLVENTE COMPONENTES
La absorción de las radiaciones UV-
Los disolventes (tanto polares como Fuente de Luz
VIS se basa en los electrones de las
no polares) desempeñan un papel Monocromador
moléculas que pueden ascender a
destacado en los espectros de Dispositivo/cubeta de muestra
niveles de energía más altos después
absorción determinados por
de la absorción de energía. Los Detector
espectroscopia UV-VIS. Por lo tanto,
electrones presentes en las moléculas Grabador
el disolvente no debe interactuar con
se pueden clasificar en los siguientes
el analito y no debe interferir con
tipos:
los espectros de absorción del
Electrones s analito.
Electrones p
Electrones n

Rehman, K., & Akash, M. S. H.

(2020). Essentials of
Pharmaceutical Analysis.
https://doi.org/10.1007/978-
981-15-1547-7
 TIPOS
Espectrofotómetro UV-VIS de haz único
Espectrofotómetro UV-VIS de doble haz

Reglas de
woodward-fieser
Efectos batocrómicos d e los grupos alquilo
Cada grupo alquilo unido al cromóforo sirve
como un auxocromo, produciendo un
pequeño desplazamiento batocrómico de
alrededor de 5 nm.

Wade, L. G., & Simek, J. W. (2017).

Química orgánica (Vol. 1, p. 803).
Pearson.
Para los dienos que están de manera predominante en la conformación s-trans (ya sea libre de rotar o mantenida en
la conformación s-trans), Woodward y Fieser usaron un valor base de 217 nm, la A ,^ para el buta-1,3-dieno no
sustituido. A este valor, adiciónele 5 nm por cada sustituyeme alquilo. Para los dienos que se mantienen en la
conformación s-cis por medio de una anillo de seis miembros, el valor base es de 253 nm para el dieno, más 5 nm por
cada sustituyeme alquilo.

Para los tríenos y sistemas conjugados más grandes, agregue 30 nm al valor base por cada enlace
doble adicional. Sin embargo, el enlace doble adicional debe unirse en el extremo del sistema
conjugado para extender la longitud del sistema de polieno para tener esta contribución grande
de 30 nm.

Wade, L. G., & Simek, J. W.

(2017). Química orgánica
(Vol. 1, p. 803). Pearson.
Wade, L. G., & Simek, J. W. (2017). Química orgánica (Vol. 1, p. 803). Pearson.
ALDEHIDOS Y CETONAS

Wade, L. G., & Simek,

J. W. (2017). Química
orgánica (Vol. 1, p.
803). Pearson.
LEY DE LAMBERT-BEER
La ley de Beer-Lambert (o ley de Lambert-Beer) describe una relación lineal
entre la absorbancia de la luz y la concentración de especies absorbentes. La
ley de Beer-Lambert se escribe como:

o
Asocia la absorción de luz con las propiedades de la
muestra a través de la cual viaja la luz.
TRANSMITANCIA ABSORVANCIA

Rehman, K., & Akash, M. S. H. (2020). Essentials of Pharmaceutical Analysis.

https://doi.org/10.1007/978-981-15-1547-7
CRUVAS DE CALIBRACIÓN
Es una representación gráfica de una propiedad cuantitativa en función de otra, generalmente la
concentración del analito. La calibración tiene como objetivo elegir unos parámetros que permitan
obtener una linealidad en la curva, respecto a las 2 propiedades en estudio del analito, con el fin de
obtener resultados que sean directamente proporcionales a la concentración de dicho compuesto en
una muestra, generalmente en un intervalo de tiempo determinado.

y = + mx b
y= nivel de absorbancia
m=pendiente de la curva de calibración
x= concentración de la solución
b= parámetro de ajuste de la curva

Uso de los minimos

cuadrados
Según la ley de Beer, una curva de calibración lineal para la absorbancia de luz monocromática
versus la concentración de analito en una serie de soluciones estándar debe ser una línea recta
con una intersección de 0, pero en la práctica, la curva de calibración no es lineal
CURVA DE CALIBRACIÓN DE
LA HESPERIDINA
A partir de una disolución Stock de 0.4 mg/mL en MeOH, se prepararon 7 disoluciones
en un intervalo de concentraciones de 0.008 a 0.04 mg/ml. Estas disoluciones fueron
analizadas en un espectrofotómetro UV-Vis a una longitud de onda de 280 nm en un
rango de 0.1 a 1 u.a.

Julia, C. H. (2023). Cuantificación de

flavonoides en complejos flavonoide-
ciclodextrina formados mediante el uso de
fluidos supercríticos.
https://repositorio.xoc.uam.mx/jspui/handle/
123456789/40220