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UNIVERSIDAD NACIONAL DE JUJUY

LICENCIATURA EN CIENCIAS BIOLÓGICAS

FISIOLOGÍA VEGETAL
LABORATORIO 6

FITORREGULADORES

Alumnos:
Erazo B. Alejandra, Melendres Alejandro, Kehl I. Brian, Sanguino Gustavo, Sulca V.
Iris Ortiz A. Lucas, Vale A. Araceli, Valerio V. Natalia

Año: 2023
PRIMERA PARTE:
INFLUENCIA DE DOS AUXINAS EN EL ENRAIZAMIENTO DE SEGMENTOS DE ÓRGANOS

INTRODUCCIÓN Indolbutírico (Agurto, 2022; Aguilar


et al., 2007).
El crecimiento y desarrollo de las
plantas están determinados por la En el presente trabajo se utilizó una
asociación y control de factores variedad de papa Solanum spp para
nutritivos, metabólicos y hormonales observar los efectos de auxinas en el
(Sivori et al., 1980). enraizamiento. Las papas andígenas
Uno de los compuestos más constituyen un grupo que se cultiva a
importantes que se encargan de lo largo de los Andes, y forman
regular el metabolismo en plantas son tubérculos bajo condiciones de día
las fitohormonas u hormonas corto. (Rodriguez, 2010; Rojas, 2020)
vegetales conocidas como Auxinas, La papa (Solanum tuberosum subsp.
citoquininas, giberelinas, ácido andigena) es una planta herbácea,
abscísico, etileno, ácido salicílico, conformada por dos partes
poliaminas, ácido jasmónico, principalmente: sección subterránea
brasinoesteroides, y estrigolactonas que está compuesta por la raíz,
(Borjas et al.,2020). estolones, tubérculos y tubérculo
madre; y la sección aérea está
Las auxinas fueron las primeras conformada por tallos principales y
hormonas identificadas, donde la secundarios, hojas, flores y frutos.
mayoría son derivados indólicos y Existen pocos reportes sobre trabajos
consideradas importantes por su en especies de Solanum tuberosum sp.
participación activa en el desarrollo, andigena, cultivo que se limita a los
actuando en procesos de países de la región andina de
diferenciación celular, tropismos, Suramérica. (López et al, 2007)
inducción de floración, división,
formación de raíces adventicias, Las auxinas son importantes
elongación de tallos y coleoptilos, y el compuestos químicos presentes en las
fenómeno de dominancia apical; plantas por qué en altas
donde la característica más destacable concentraciones promueven la
está relacionada en su distribución inhibición del crecimiento de la raíz
entre las células y tejidos, en algunos primaria, y la estimulación de raíces
casos se acumula de manera local, en adventicias y laterales en el tallo,
una célula o grupo de células, así mediante la desdiferenciación de
como también en los tejidos células para formar un callo, el cual
vegetales, entre las auxinas más crece y forma los primordios
conocidas están el (ANA) radicales, mientras se produce la
Ácidonaftalenácetico, (AIA) diferenciación de los tejidos que
Ácidoindolacético y (IBA) Ácido forman la raíz.
Cada órgano presenta una fenómeno de dominancia apical, si en
sensibilidad diferente frente a la la yema apical se generan mayores
auxina según su concentración,se concentraciones de auxinas esto
establece que existe una relación genera dominancia sobre las yemas
cuantitativa entre la concentración axilares, reprimiendo su crecimiento,
exógena de hormona aplicada y la por lo que a medida que aumenta la
magnitud de la respuesta fisiológica, distancia en la planta de la yema
siendo las raíces más sensibles que las apical (basipeta), disminuye la
yemas, y estas más que los tallos de la concentración de auxinas y se
planta, por lo que a una concentración estimula la brotación o ramificación
−8
de 10 M una concentración más alta, (Azcón-Bieto & Taylon, 2008).
tiende a producir efectos de
crecimiento en las yemas, Los objetivos del trabajo son
estimulando levemente los tallos, comprender la importancia que
mientras que el crecimiento de raíces poseen los fitorreguladores sobre el
se inhibe. Mientras que una crecimiento vegetal y distinguir el
−10 efecto de las concentraciones de los
concentración de 10 M más baja,
distintos fitorreguladores tanto en el
sería propicia para inducir el
estímulo del enraizamiento de
enraizamiento, y que estimula
segmentos de brotes, como en el
levemente a las yemas (Azcón-Bieto &
crecimiento de tallos laterales
Taylon, 2008).
después de romper la dominancia
apical.
Otro proceso importante en la planta
que se encuentra regulado es el

MATERIALES Y MÉTODOS

Provistos por la Cátedra


-brotes de papa A traer por cada equipo:
Soluciones hormonales. -Alcohol 70 %
-Cajas de petri esterilizadas.(5) -Pinzas histológicas.(2).
-Macetas con sustrato -Cinta adhesiva o aisladora blanca.
-Hoja de afeitar nueva.(2). - 2 reglas milimetradas
- regla de papel con marcas de a mm
- hojas de papel absorbente de cocin
PROCEDIMIENTO
1- Se utilizaron 36 macetas con sustrato compuesto de una proporción 2:1
arena:abono
orgánico y 36 segmentos de brotes de papa de 2 cm aproximadamente que se
distribuirán en 4 tratamientos:
- Tratamiento 1: sin tratamiento hormonal.
- Tratamiento 2: con aplicación de ANA 1000 ppm
- Tratamiento 3: con aplicación de IBA 1000 ppm
- Tratamiento 4: con una combinación de ambas hormonas IBA + ANA.
2- Utilizando cajas de Petri y pinzas desinfectadas con alcohol 70 %, se obtuvieron
segmentos de brotes de papa.
3-Se sujetaron con la pinza el extremo apical del brote, y se sumergieron
aproximadamente 0.5 cm de extremo basal del brote en cada tratamiento
hormonal, durante 10 segundos. Posteriormente se sembró cada brote en una
maceta etiquetada con el tratamiento correspondiente.
5- Se regó manteniendo capacidad de campo durante 20 días, momento en que se
registró para cada tratamiento, el número de raíces, la longitud de raíces.
6- Luego de aproximadamente una semana se cortaron los ápices de las plantas
para la observación del fenómeno de dominancia apical.

RESULTADOS

Tabla I: Medias obtenidas de longitud de raíz y número de raíces, comparando los


resultados de las plantas tratadas con los del control.

TRATAMIENTO LONGITUD RAÍZ N° RAICES

Testigo 3,51 5

IBA 3,72 9,2

ANA 4,16 5,4

IBA / ANA 5,52 6,7

Figura 1: En este gráfico de barras, se pudo observar como las medias en los
tratamientos IBA sugiere un mayor número de raíces a comparación del testigo,
mientras que los tratamientos ANA e IBA/ANA tendría valores próximos al
testigo. En cuanto a la longitud de raíces habría diferencias entre IBA/ANA y el
testigo, se observa un aumento en la longitud promedio de las raíces con la
utilización de ambas auxinas, que disminuye al usar las auxinas por separado,
siendo más similares al testigo.

Análisis de la varianza

No hay resultados significativos para las variables longitud de raíz con un


p-valor de 0,2498 , y para el número de raíces con un p-valor de 0,3535 entre los
distintos tratamientos, con un nivel de significancia de alfa 0,05.
Figura 2: En este gráfico de barras se observan las medias de los tratamientos,
siendo IBA/ANA los que generaron mayor número de brotes laterales en plantas
de Solanum spp en respuesta al fenómeno de dominancia apical.

DISCUSIÓN Y CONCLUSIONES
Silva Agurto, (2022), investigó, bajo condiciones in vitro, el enraizamiento de
esquejes de papa con 3 concentraciones de las fitohormonas IBA, AIA y ANA (0.01
ppm, 0.05 ppm, 1 ppm) y las comparó con el testigo. Encontró que a menores
concentraciones de ANA en las primeras dos semanas aumentaba el número de
raíces y su longitud, pero a los 21 días dejaba de haber una diferencia significativa
entre los tratamientos. En cuanto al IBA, no reflejó diferencias a la semana en la
longitud, ni en el número de raíces. Sobre la base de estos resultados, concluye que
en el cultivo in vitro de la papa de esquejes de papa, no es necesaria la aplicación de
reguladores de crecimiento, y que esto es debido a las altas concentraciones de
auxinas y fotoasimilados en los meristemas apicales, que producen un
enraizamiento con cierta facilidad.

En relación al presente informe, se obtuvieron resultados que concuerdan con los


obtenidos por Silvia Agurto en 2022, aplicados a brotes de papa, debido a que no se
obtuvieron diferencias significativas entre la aplicación de una auxina u otra (ANA
e IBA) en altas concentraciones (1000 ppm) aplicadas mediante método rápido.
Sin embargo, aunque el análisis estadístico no detectó diferencias significativas
entre el efecto de los distintos tratamientos, se puede resaltar que IBA indujo un
mayor número de raíces y la interacción IBA/ANA, produjo una mayor longitud de
raíces.

Analizando el fenómeno de dominancia apical, una vez generado el corte del


meristema apical de la planta, a los 7 días se obtuvieron mayor cantidad de brotes
laterales en las plantas que presentaron las auxinas IBA/ANA en conjunto. Este
aumento se debería a la sensibilidad de la planta, ante una disminución en la
concentración de Auxinas en el ápice de la planta producto del corte, lo cual dejaría
de inhibir el crecimiento de las yemas laterales, incrementándose la acción de
citoquinas disponibles que estimulan la división celular y la brotación o
ramificación (Duval, 2006 ; Azcón-Bieto & Taylon, 2008).
SEGUNDA PARTE:
TRIPLE RESPUESTA AL ETILENO

INTRODUCCIÓN disminución de la elongación, el


aumento del desarrollo lateral, y el
El etileno a diferencia de las auxinas cambio de orientación, generando
es un compuesto hormonal gaseoso, estructuras como los hipocotilos más
considerado como molécula orgánica cortos, gruesos y el gancho plumular
con actividad biológica. Su efecto se cerrado. Esto se debe a que el etileno
produce a concentraciones muy bajas obstaculiza mecánicamente el
y se manifiesta en casi todas las crecimiento de las plantulas, el
etapas de su ciclo ontogénico, desde la gancho se forma por el desigual
germinación hasta la senescencia crecimiento de las células , las
(Cerezo, 2018). Es sintetizado en la internas tienen mayor capacidad de
mayoría de los tejidos de la planta, sintetizar etileno por lo tanto menor
está relacionada con procesos de velocidad de crecimiento, mientras
maduración, aceleración de la que la zona externa tiene una mayor
senescencia, abscisión de hojas y velocidad de desarrollo, teniendo en
frutos, germinación de las semillas, cuenta que la acción del etileno está
regulación de la floración, liberación regulada por la luz, el transporte y su
de la dormancia, síntesis de enzimas síntesis. En tallos afecta la elongación
para la defensa,el daño o a través de un cambio de la
estrés(Iguaran & Alzate, 2014; Aguilar orientación de los microtúbulos de
et al., 2007; Jordán & Casaretto, manera longitudinal, oponiéndose al
2006). Se destaca por ser producido eje, lo que genera el engrosamiento
en grandes cantidades, aunque no por expansión radial de las células.
tenga un transporte específico, (Azcón-Bieto & Taylon, 2008).
afectando a plantas aledañas
(Sánchez, 1985). Su producción es En el presente trabajo se utilizaron
regulada por diversidad de factores, semillas de Phaseolus vulgaris para
tanto endógenos (hormonas) como estudiar la triple respuesta al etileno.
exógenos (ambiente), y dependen de El poroto común (Phaseolus vulgaris
la especie vegetal, el tejido y su estado L.).
de desarrollo, aunque también es Los objetivos del trabajo son
capaz de estimular su propia síntesis comprender la importancia que
en un proceso denominado como poseen los fitorreguladores sobre el
autocatálisis. (Cerezo, 2018). crecimiento vegetal y distinguir el
efecto de la triple respuesta
Uno de los efectos más estudiados del ocasionada por las diferentes
etileno en Arabidopsis sp. es el de la concentraciones de etileno, evaluadas
triple respuesta, que consiste en la en las variables grosor, longitud y
peso seco de los hipocotilos en las
plántulas.

MATERIALES Y MÉTODOS
-Semillas de poroto germinadas -Pinzas metálica
-Manzanas (3) -21 macetas
-Bolsas negras (3) -Alcohol al 70%
-Arena cantidad necesaria -Camas de germinación

PROCEDIMIENTO
1-Las semillas de poroto (30 semillas) se desinfectan durante 2 min. con
hipoclorito de sodio al 1% y se lavaron 5 veces con agua destilada y se colocaron a
germinar en camas de germinación.
2-Pasados 4-5 días, cuando la mayoría de las semillas estén germinadas,
se introduce arena hasta un cuarto de la capacidad de cada recipiente se humedece
hasta saturación. A continuación, utilizando las pinzas, se hacen agujeros de 1 cm
de profundidad en cada recipiente, donde se colocan.
3-Se cubren con una fina capa de arena, posteriormente se introducen en bolsas
negras individuales, una de ellas se identifica como tratamiento 1 y se cierra, en la
otra se introduce 3 manzanas se identifica como tratamiento 2, se cierran ambas
bolsas.
4-Todo el material se debe mantener a 25°C.
5-Una semana después de iniciar el procedimiento se mide la longitud y grosor del
hipocótilo, así como el grado de la curvatura y anotar en Tabla II.

RESULTADOS

Tabla II: Medias obtenidas, comparando los resultados de las plantas tratadas con
los del control. *Tratamiento sin manzanas ; **Tratamiento con una manzana;
***Tratamiento con tres manzanas

TRATAMIENTOS LONGITUD GROSOR PESO SECO APERTURA DEL GANCHO PLUMULAR


HIPOCÓTILO HIPOCÓTILO HIPOCOTILO
(cm) (cm) (g)

T0* 21,54 0,32 0,084 Las plantulas presentaba curvaturas que van del
tipo 1 al 5

T1** 7,00 1,33 0,180 Las plantulas presentaban una curvatura de tipo
5 y 10 en el gancho de la plúmula, según la escala
subjetiva .

T2*** 9,50 1,71 0,1806 Todas las plantulas presentaban curvaturas de


diferentes tipos 2,3,4,5,6,8 y 10 en el gancho de
la plúmula, según la escala subjetiva .
Figura 3: En el gráfico de barras se puede observar como las medias de los
tratamientos sugieren tener diferencias con respecto a la longitud del hipocótilo,
siendo mayor en los tratamientos donde no aplicó etileno y menor en dónde se
aplicó la exposición a etileno.

En relación al grosor del hipocotilo, las medias de los tratamientos T1 y T2


sugieren tener diferencias en comparación con el testigo, siendo mayor en los
tratamientos donde se aplicó etileno.

Figura 4: En el gráfico se puede observar como las medias de los tratamientos T1


y T2 parecen tener diferencias con respecto al peso seco del hipocótilo en
comparación con el testigo, siendo mayor en los tratamientos donde se aplicó
etileno. Tanto en T1 como en T2 los valores son similares aunque hayan sido
expuestos a diferentes concentraciones de etileno.
Análisis de la varianza:

Para las tres variables analizadas se observaron diferencias altamente


significativas con un p-valor menor a 0,0001 para las variables grosor, y
longitud. Mientras que para la variable de peso seco el p-valor fue de 0,0005,
esto a un nivel de significancia de alfa 0,05.
LONGITUD HIPOCOT (cm)

GROSOR HIPOCOT (cm)

PESO SECO HIPOCOT (g)

Para las tres variables analizadas se observaron diferencias entre las medias de los
tratamientos con respecto al testigo. Sin embargo, no hay diferencia significativa
entre los tratamientos T1 y T2, esto para la variable longitud con un DMS de 3,5347,
para la variable grosor con un DMS de 0,6006 y para la variable peso seco con un
DMS de 0,0576, es decir, que no hay diferencia entre aplicar una manzana o tres,
esto con un nivel de significancia de alfa 0,05 .

DISCUSIÓN Y CONCLUSIONES

En el trabajo de Jordán et al. 2006, se especifica la triple acción que tiene el etileno
en las plantas, regulando la expansión celular en las hojas, y la expansión lateral en
plántulas en germinación, siendo también responsable en la inhibición de la
elongación del epicótilo y la radícula, causando incremento en la curvatura en la
porción cotiledonar.
En relación al presente informe, se obtuvieron resultados que van en concordancia
a los obtenidos por los autores mencionados, esto con respecto a la triple respuesta
del etileno al aumentar su concentración. En el análisis estadístico se obtuvieron
diferencias significativas en todas las variables, donde se pudo observar el aumento
de grosor del hipocótilo, y el acortamiento del mismo en relación al testigo, esto
trajo además un aumento del peso seco en aquellos tratamientos que se les aplicó
etileno. Por otra parte, se pudieron observar distintos grados en las curvaturas de la
porción cotiledonar, que indicaría un cambio en la dirección de crecimiento. Esto
además coincide con las observaciones realizadas en Arabidopsis sp. detalladas por
Azcon-Bieto, J. & Taylon, M. 2008.
Al realizar la comparación de medias, entre los tratamientos 1 y 2, no hubo
diferencias significativas, por lo que se puede afirmar que sería lo mismo utilizar 1
o 3 manzanas para obtener el mismo efecto.

BIBLIOGRAFÍA
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