Clase II, Parte 2

Tay Sach’s Disease

• Enfermedad de
acumulación lisosomal
– Debido a una mutación en la
enzima
Β-N-hexosaminidase-A*
• Acumulación de glicolípidos
sin degradar dentro del
lisosoma
• Encontrado en neuronas del
SNC
Whorled inclusions (lamellar bodies)
help I.D.Tay Sach’s
Deficiencia en enzimas lisosomales
Endocitosis:

Fagocitosis

Pinocitosis

Endocitosis Mediada por Receptor:

Via Clatrina
Vía Cavéolas
No dependiente de clatrina ni caveolina
¿Cómo la célula internaliza moléculas y otras células?

Pinocitosis: beber celular

 Fagocitosis: Comer celular

Macrófago Neutrófilo
 Phagocytosis (cell eating)
Delivery of extracellular material to lysosome
(250 nm or more)
Amoebas, Ciliates -- food particles + smaller organisms
Macrophages and Neutrophils -- invaders + damaged cells
Etapas en el proceso de Fagocitosis

Atrapamiento de la bacteria

Internalización de la bacteria

Degradación de la bacteria
Formación y función de las fovélas cubiertas con clatrina:
 Funciones de la Endocitosis

1. Incorporación de Nutrientes

2. Limpieza

3. Regulación de respuestas activadas por ligandos

4. Inmunidad

5. Infección viral
Tabla: Clases de EMR

Ligando Funció
Función
Clase I
LDL2 Provee a la cé
célula de colesterol
α2-macroglobulina Remueve agentes nocivos
Cobalamina Proporciona vitamina B12
Vitelogelina Provee proteí
proteínas al embrió
embrión
Insulina Internaliza insulina
Manosa-
Manosa-6-fosfato Remueve enzimas lisosomales
Asialoglicoproteí
Asialoglicoproteína Remueve glicoproteí
glicoproteínas
Fibronectina Provee fibronectina
Interferó
Interferón Actividad antiviral

Clase II
Transferrina Provee a la cé
célula de hierro

Clase III
EGF2 Transducció
Transducción de señ
señales, mitosis
NGF2 Transducció
Transducción de señ
señales, mitosis
Glucagó
Glucagón Cambios en la actividad metabó
metabólica
Insulina Cambios en la actividad metabó
metabólica
Hormona del Crecimiento Transducció
Transducci ón de señ
señ ales, mitosis
TSH Síntesis y secreció
secreción de proteí
proteínas
GC Producció
Producción hormonal
Interleuquinas Comunicació
Comunicación intercelular

Clase IV
IgA Transcitosis de IgA en intestino
IgG Transcitosis de IgG en hí
hígado, placenta
Insulina Transcitosis de insulina
EGF Transcitosis de FCE
Fibronectina Transcitosis de fibronectina
____________________________________||_________________________
Adaptado de Pastan et al., 1985 y Brown y Greene,
Greene, 1991. LDL, lipoproteí
lipoproteína de baja
densidad;
EGF, factor de crecimiento epidé
epidérmico; NGF, factor de crecimiento neural;
neural;
TSH h ti l t d l ti óid GC d t fi ió i
 LDL Receptor-
related Protein (LRP) Megalin/gp330
NH2 NH2
ApoE Receptors

Receptores Clase I
Ligand Binding Repeat (Class A Motif)
EGF Repeat (Class B.1 Motif)
Growth Factor Repeat (Class B.2 Motif)

O-linked Sugar Domain

RHRR Furin Cleavage Site
Transmembrane Domain

LRP
515

VLDL Receptor ApoER2

LDL Receptor
NH2
NH2 NH2

LRP
85
NPVY NPVY NPVY NPTY

COOH COOH NPVY NPMY

COOH NQNY

COOH NPIY

COOH
Receptores Clase III: Señalización celular
Estudio de la presencia de un receptor para un ligando
Etapas de la endocitosis mediada por clatrina
Formación de la vesícula cubierta
 COEFICIENTES DE DIFUSION LATERAL DE
COMPLEJOS LIGANDO - RECEPTOR

Ligando D (cm2x10-10 sec-1)

EGF 3.4
Insulina 4.8
α2-macroglobulina 7.8
Triiodotironina 2.8
IgE 1.8
Lipid (DiI) 100

Endocytosis;
Endocytosis; Edited by Ira Pastan ans Willingham 1985
Efecto de la temperatura :1
 Unión de ligando:
reclutamiento de receptores

Yemación

Fisión

Vesícula cubierta
Estructura y Ensamblaje de clatrina
Fisión de vesículas cubiertas con clatrina es dependiente de dinamina
y de la hidrólisis de GTP
Desnudamiento de la cubierta requiere de energía: hidrólisis ATP

Hsc70
ATP
 Endosoma temprano se forma por
fusión homotípica de vesículas sin
la cubierta

(Hsc70)

(EEA1, Rabaptin5)
Fusión homotípica de vesículas endocíticas
FORMACION DE VESICULAS CON CLATRINA
ESTRUTURA DE LA CLATRINA Y SU ENSAMBLAJE
Receptor Segmento de internalización
____________________________________
____
LDL NPVY (NPXY)
LRP YATL (Yxxf), LL
Manosa NTLY (NXLY)
Fosf. ácida YRHV (YRHX)
Transferrina YTRF (YXRF)
Poli IgG SAF (YSXF)
Manosa-6-F YRGV (YRGX)
M-6-F/IGFR YSKV (YSKX)
____________________________________
___
Secuencias consenso de internalización son:
NPxY; YxxP; LL
Receptor de LDL e Hipercolesterolemia Familiar
Estructura del LDL-R

NPVY/NPVC
Ciclo endocítico de LDL por el LDL-R
Compartimientos endocíticos : Gradiente de pH
pH 7.0-7.4

pH 6.0-6.5

pH 6.0-6.5

pH 5.0-6.0

pH 6.0-6.5

pH 4.5-5.0

Sorkin & von Zastrow, 2002, NR

Efecto del pH en la asociación/disociación de ligando-receptor
Ciclo de transferrina y dependencia del pH
Visualización de compartimientos endocíticos por inmunofluorescencia

Transferrina Transferrina y EEA1

 Transcitosis: Internalización sin degradación
que ocurre en células epiteliales y endoteliales

Rutas endocíticas en células epiteliales

 Transcitosis

Ligandos
IgA Transcitosis de IgA en intestino
IgG Transcitosis de IgG en hígado, placenta
Insulina Transcitosis de insulina
EGF Transcitosis de EGF
Fibronectina Transcitosis de fibronectina
Endocitosis mediada por cavéolas
Distintas vías de internalización de macromoléculas a la célula