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Como es bien sabido la base conceptual en que se sustenta gran parte de la Bioquímica
es la Química. Esto adquiere especial significado en el laboratorio donde se deben
preparar soluciones por ejemplo de proteínas, Dilución de enzimas, bufferes, soluciones
salinas, ácidos, soluciones standares, etc. Por lo tanto es fundamental volver a repasar
conceptos básicos como son los de concentración, volumen y cantidad.
Y expresiones tales como moles, milimoles, %P/V, mg/ml, g/L, etc.
Soluciones acuosas
En una solución acuosa se distinguen 2 componentes: soluto y solvente.
El solvente en mayor proporción, normalmente corresponde al agua. El soluto en cambio
es el que se encuentra en menor proporción.
SOLUCION = SOLUTO + SOLVENTE
EXPRESIONES DE VOLUMEN
Litro (l)
milílitro ( ml ) = 10 - 3 litros
microlitro ( μl ) = 10 - 6 litros o 10 - 3 μl
EXPRESIONES DE CANTIDAD
moles
milimoles (10 - 3 moles)
μmoles (10 - 6 moles)
nmoles (10-9 moles)
EXPRESIONES DE CONCENTRACION
Por ejemplo una solución 1M de NaCl, contiene 1 mol de esta sal en 1000 ml de solución.
Es decir 58,5 g ( su masa molecular) disueltos en 1 litro.
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El mol es la unidad que emplean los químicos para expresar número de átomos, iones o moléculas.
El mol también llamado molécula-gramo, corresponde al peso molecular (PM) de una sustancia en gramos y
que corresponde a 6,02 x 10 23 moléculas ( Número de Avogadro). Por ejemplo el PM del NaCl es 58,5
g /mol. O sea 1 mol de esta sal contiene 6,02 x 10 23 iones Na+ y 6,02 x 10 23 iones Cl -
En la célula la concentración molar de las moléculas es muy pequeña, por ello en
Bioquímica se utilizan las siguientes expresiones:
Milimolar (mM) = 10 – 3 M
Micromolar (μM) = 10 - 6 M
Nanomolar (nM) = 10 – 9 M
2 g = M x l x PM
3 V1 x C1 = V2 x C2
Razonando
Por definición 0,04M significan 0,04 moles en 1l. Pero sólo nos piden preparar 0,5 l
Entonces:
Pero como no podemos pesar moles de NaOH , debemos relacionarlo con los gramos.
¿Cómo? A través de la formula 1. En ella despejamos g y tenemos:
3.- Preparar 30 ml de NaCl al 2% P/V a partir de la solución 20% P/V del problema
Anterior.
Razonando
Ahora ¿En qué volumen de la solución original (20% P/V) están contenidos estos 0,6g de
NaCl?
20g…………………… 100 ml
0,6g……………………. X X = 3ml
Por fórmula
V1 x C1 = V2 x C2
X 20%P/V 30 ml 2%
X = 30 x 2 / 20 = 3 ml
¿Cómo se prepara esta solución en el laboratorio una vez que hemos hecho los cálculos?
Procedimiento
Se pipetean 3ml de la solución NaCL 20% y se ponen en una probeta. Se enraza a 30ml
con 27 ml de agua.
10 mg / ml X 50 ml = 0,5g
10 mg……………… 1ml
X……………… 2ml X = 20 mg
20 mg……………………. 250 ml
X ………………………. 1 ml X = 0,08 mg/ml ( 80 μg / ml)
Hay otra forma mucho más directa para resolver este problema que considera el
factor de dilución. Es decir cuantas veces se diluyó la solución original:
250 / 2 = 125 veces.
Por lo tanto lo único que hacemos es dividir la concentración original (10mg / ml) por el
factor de dilución, o sea : 10 / 125 = 0,08 mg / ml
Por fórmula
Utilizamos la formula 3
V1 x C1 = V2 x C2
2ml 10 mg/ ml 250 ml X
X = 0,08 mg / ml
Solución a: 0,1 mg / ml
Solución b: 10 mg / l
Solución c: 50 μg / 0,1 ml
Respuesta correcta:
La más concentrada es la c 0,5 mg / ml le sigue la solución a 0,1 mg/ ml y la más diluida
corresponde a la b 0,01 mg / ml.
6.- Ud. Necesita preparar 25 ml de buffer fosfato de sodio pH 7,5 a una concentración
150mM para un medio de incubación de células. Tiene suerte porque en el
Laboratorio hay una botella con el mismo buffer, pero más concentrado 0,5M
¿Cómo lo haría?
Este un típico problema de dilución. Es decir debo preparar una solución diluida a
partir de una solución concentrada.
1º Razonamiento
0,5M por definición significan 0,15moles en 1000 ml. Pero nos piden prepara 25 ml.
Por lo tanto
0,15 moles…………………….. 1000ml
X ………………………25 ml
X= 0,00375 moles
¿En qué volumen de la solución concentrada ( 0,5M) están contenidos esta cantidad
de moles?
0,5 moles………………………..1000ml
0,00375moles……………………X
X= 7,5 ml
3º Por fórmula
V1 x C1 = V2 x C2
X 0,5M 25ml 0,15M
X = 7,5ml
Razonando
Sol A 10% P/V por definición significan 10g en 100 ml de solución, pero sólo hay 20ml
por lo tanto hay 2g de la sal.
Sol B 20% P/V son 20g en 100 ml , pero tenemos 500ml de esta solución por lo tanto
la cantidad total de NaCl en la sol B son 100g
102g……………..520ml
X………………100ml X = 19,6% P/V
Por fórmula
C1 = 10% P/V
V1 = 20ml
C2 = 20% P/V
V2 = 500ml
V3 = 20ml + 500ml
C3 = X
(V1 x C1 ) + (V2 x C2 ) = C3 x V3
20 10 500 20 X 520
200 x 10.000
= 19,6% P/V
520
Si bien a través de estas “fórmulitas mágicas” se llega rápidamente a un
resultado, es muy probable que este resultado esté incorrecto debido a que no se
tiene clara la parte experimental y los conceptos de química de soluciones.
1.- Para la inyección de la vacuna Sinovac, se inyectan por persona 0,5ml que contienen
1,5ug del virus inactivo.
1.2 Cuántos ml habría que aplicarle a una persona para que reciba 6ug?