Ingenieria Biomedica

Dereck Palafox Luna

22330930
Grupo: B3A

Materia: Bioquimica

Maestra: Maria Lidianys Lewis Lujan

BIOQUÍMICA ESTRUCTURAL Y METABÓLICA
Clase Práctica No. 17

EJERCICIOS TEMA III. ENZIMAS

1.- Responder si las siguientes cuestiones son verdaderas o falsas. Explicar

porqué

a) La velocidad inicial de una reacción catalizada enzimáticamente, es

independiente de la concentración de sustrato.
Falsa: la velocidad inicial cambia de acuerdo con la cantidad de sustrato

b) A niveles de saturación de sustrato, la velocidad de una reacción catalizada

enzimáticamente es proporcional a la concentración de enzima.
Falsa: No es proporcional a la concentración de la enzima, sino que es a la
del sustrato

c) La constante de Michaelis, Km, es igual a la concentración de sustrato para

la cual v0=1/2Vmax.
Verdadera

d) La Km de una enzima varía con la concentración de enzima.

Falsa: La Km varía conforme la concentración del sustrato

e) La velocidad de una reacción catalizada por una enzima en presencia de

una concentración de sustrato limitante de la velocidad decrece con el
tiempo.
Verdadera

f) Adicionando suficiente cantidad de sustrato se puede obtener la Vmax. en

presencia de un inhibidor no competitivo.
Verdadera

g) La Km puede alterarse por la presencia de metabolitos estructuralmente

relacionados con el S.
Verdadera
2.- Para estudiar la dependencia de la v frente a [S] de una reacción catalizada
enzimáticamente, una cantidad constante de enzima se adiciona a una serie de
medios de reacción de 10 ml de volumen conteniendo diferente [S]. Las
velocidades iniciales de reacción se han determinado midiendo el número de
moles de producto formado por minuto, obteniéndose los siguientes resultados:

[S] moles/L 5 x 10-2 5 x 10-3 5 x 10-4 5 x 10-5 5 x 10-6 5 x 10-7

V0 0.25 0.25 0.25 0.20 0.071 0.0096
(μmoles/min
)

Empleese el cálculo numérico para responder a las siguientes cuestiones:

a) ¿Cuál es la Vmax. para esta [E]?.

b) ¿Cuál es la Km de ésta enzima?.
c) Demostrar si ésta reacción sigue o no la cinética de Michaelis-Menten.
d) ¿Cuales serán las velocidades iniciales a [S]=1x10-6 M y a [S]=1x10-1 M?.
e) Calcular la cantidad total de producto formado durante los primeros cinco
minutos para [S]=2x10-3 M. ¿Se podría hacer lo mismo para [S]=2x10-6 M?.
f) Suponiendo que la [E] se incrementase en cada medio de reacción multiplicando
por un factor 4. ¿Cuál sería el valor de Km y de la Vmax.?
¿Cuál sería la velocidad inicial para [S]=5x10-6 M?.
3.- La cinética de una enzima viene medida como función de la [S] en ausencia y
presencia del inhibidor a una [I]=10-4 M. A partir de los siguientes resultados:

[S] x10-5 M 0.3 0.5 1 3 9

V0 (μmoles/min) 10.4 14.5 22.5 33.8 40.5
sin Inhibidor
V0 (μmoles/min) 2.1 2.9 4.5 6.8 8.1
con Inhibidor

a) Representar v0 frente a [S] y 1/Vmax. frente a 1/[S].

 b) Calcular Vmax. y Km en ausencia y presencia de inhibidor.
c) ¿Qué tipo de inhibición es esta?.
d) Calcular la KI.

4.- La enzima aspartato transcarbamilasa cataliza la primera reacción propia de la

síntesis de pirimidinas. En un estudio de ésta enzima, utilizando aspartato como
sustrato, en presencia de CTP 0,5 M y en ausencia del mismo, se obtuvieron los
siguientes datos:

Aspartato 1 2 3 4 5 7 9 10 12 15 16 17
(mM)
V0 sin CTP 0.45 0.8 1.7 2.9 3.4 4.3 5.1 5.3 5.6 5.8 5.8 5.8
(u.a.)
V0 con CTP 0.2 0.4 0.7 1 1.4 2.4 3.7 4.2 4.8 5.5 5.6 5.6
0.5 M

a)Calcule el valor de KM
b) Utilizando la ecuación de Michaelis-Menten, calcular V0 para una [S]=3
mM. ¿Existe alguna discrepancia entre éstos datos y los experimentales?.
Justificarlo.

Los resultados son aproximados ya que la Km se debió obtener por la Vmax que
se obtuvo mediante el experimento, los resultados son similares pero no iguales.

c) ¿Qué efecto tiene el CTP sobre la actividad enzimática?.

Actúa como inhibidor debido al cambio negativo en la velocidad de reaccion
5.- Completar las siguientes frases:

a) La región de una molécula de enzima con la cual debe interaccionar el sustrato

se llama ____Sitio ACTIVO__________________
b) La especie química de vida corta que se forma después de que enzima y
sustrato interaccionen se llama _____Complejo Enzima-Sustrato_______
c) Debido a su estructura, un inhibidor _____Competitivo_____se une al centro
activo de una enzima.
d) Un inhibidor que no altera la KM de una enzima es un inhibidor de tipo
______No competitivo____
e) A mayor valor de KM, ______Menor_______________ es la afinidad de una
enzima por su sustrato.

6.- Explicar cuál será la ocupación del centro activo de una enzima en las
siguientes situaciones:

a) En presencia de sustrato a una concentración muy inferior a la KM del

enzima.
A menor Km mayor afinidad, el centro activo se adapta fácilmente a la
enzima

b) En presencia de sustrato a una concentración 100 veces superior a la KM.

La Km estará sobresaturada por lo que no se adaptara bien el centro activo

c) En presencia de un inhibidor competitivo a una concentración de sustrato

muy inferior a la KM
No cambia pero la Vmax es mayor, el centro activo no cambia su estructura
ya que el inhibidor competitivo toma el lugar del sustrato

d) En presencia de un inhibidor no competitivo a una concentración de sustrato

muy inferior a la KM.
La reacció n alcanza la mitad de su nueva Vmax en la misma concentració n de
sustrato, por lo que no cambia, esto refleja que el inhibidor no afecta la unió n
de la Km de la enzima con el sustrato, solo disminuye la concentració n de
enzima utilizable
7.- Los moduladores de los enzimas alostéricos pueden ser inhibidores o
estimuladores. ¿Qué efecto tiene (aumenta o disminuye) cada clase de
moduladores sobre el valor de K0,5 (es similar a kM en modelo de Michaelis-
Menten), Vmáx y cooperatividad?.

Modulador K0,5 Vmáx Cooperatividad

Estimulante Disminuye (Menor Aumenta (Aumentan Aumenta (Aumentan la

concentración de Vmáx, permitiendo que la cooperatividad, haciendo que la
sustrato requerida para enzima alcance mayores enzima sea más sensible a
alcanzar la mitad de la velocidades. ) cambios en la concentración de
velocidad máxima.) sustrato.)
Inhibidor Disminuye (Pueden
Aumenta (Esto disminuir o no cambiar Disminuye (Suelen reducir
significa que se necesita significativamente Vmáx, la cooperatividad, haciendo que
una mayor concentración dependiendo del tipo de la enzima sea menos sensible a
de sustrato para alcanzar inhibición (competitiva, no cambios en la concentración de
la mitad de la velocidad competitiva, etc.). sustrato.)
máxima.)

8.- Indicar si las siguientes afirmaciones son ciertas o no. Justificar la respuesta.

a) En una ruta metabólica en la que participan diferentes enzimas, el producto

final puede controlar la ruta mediante retroalimentación PORQUE en estos
Verdadero : En algunas rutas metabólicas, el producto final de la ruta puede inhibir
la acción de una enzima temprana en la vía, controlando así la velocidad global de
la ruta. Esto ayuda a regular la producción de productos finales y evita la
sobreproducción.

b) sistemas el producto final siempre es un análogo estructural del sustrato

inicial. b) En la regulación enzimática mediante modificación covalente
pueden participar quinasas, fosfatasas, adenilaciones y mutilaciones.
Verdadero : La regulación enzimática mediante modificación covalente es un
mecanismo común. Las quinasas añaden grupos fosfato a las enzimas,
mientras que las fosfatasas los eliminan. La adenilación implica la adición o
eliminación de grupos adenina (como en el caso de la adenilación de
proteínas), y la mutilación implica la eliminación de ciertas partes de una
molécula. Estos procesos pueden alterar la actividad enzimática y, por lo tanto,
regular la función celular.

9.- Decir si son verdaderas o falsas las siguientes afirmaciones sobre las
isoenzimas:

a) Son enzimas idénticas que que catalizan la misma reacción química y

presentan la misma secuencia de aminoácidos. Falso: no tienen la misma
secuencia de aminoacidos
b) Son enzimas que catalizan la misma reacción química y suelen mostrar
diferentes parámetros cinéticos (i.e. diferentes valores de KM), o
propiedades de regulación diferentes.
 Verdadero: Las isoenzimas, a pesar de catalizar la misma reacción, pueden
tener diferentes afinidades por el sustrato (diferentes valores de KM) o
diferentes velocidades máximas (diferentes valores de Vmáx). Esto les
permite desempeñar roles específicos en diferentes tejidos o condiciones.

c) La existencia de las isoenzimas permite el ajuste del metabolismo para

satisfacer las necesidades particulares de un determinado tejido o etapa del
desarrollo.
Verdadero : Las isoenzimas son una forma de adaptación metabólica.
Diferentes tejidos o etapas del desarrollo pueden expresar isoenzimas con
propiedades ligeramente diferentes para satisfacer las demandas específicas
de esa situación, permitiendo así una regulación fina del metabolismo.