TEMA-1.

pdf

user_3064528

Biología

1º Grado en Odontología

Facultad de Medicina
Universidad CEU San Pablo

Reservados todos los derechos.

No se permite la explotación económica ni la transformación de esta obra. Queda permitida la impresión en su totalidad.
 TEMA 1 CONCEPTOS BÁSICOS EN BIOLOGÍA CELULAR E HISTOLOGÍA
• Célula. Se define como la unidad básica de vida.
• Tejido. Grupo de células que se unen para llevar a cabo una función común.
• Citología o biología celular. Ciencias o disciplinas que estudian la célula.
• Histología. Estudio de la estructura y función de los tejidos.
La Histología representa un nexo de unión entre la bioquímica (estudio de átomos y moléculas), la
fisiología (estudio de órganos y sistemas), la anatomía, la genética, la clínica y La patología

HISTORIA DEL DESCUBRIMIENTO DE LAS CÉLULAS:

1665 ROBERT HOOKE: Observó células en un trozo de corcho y les dio el nombre de células.
1675 ANTON VAN LEEUWENHOEK: Padre de la microbiología e hizo más de 500 microscopios.
Fue el primero en observar células o fibras musculares, bacterias, espermatozoides y el flujo
sanguíneo capilar.
1833 ROBERT BROWN: Descubrió el núcleo
1838/9 SCHLEIDEN Y SCHWANN: Defendieron que los organismos estaban formados por
células. Teoría celular
1855 RUDOLF VIRCHOW: todas las células vienen de otras. Descubrió la reproducción celular
Célula: unidad estructural básica en todos los organismos
y también la unidad básica con capacidad de reproducción
TEORÍA CELULAR:
Postulados Teoría Celular Postulados Teoría Celular
CLÁSICA MODERNA
Todos los seres vivos conocidos se componen de una Los organismos multicelulares dependen de la
o más célula actividad total de cada célula.
La célula es la unidad estructural y funcional En las células tienen lugar todas las reacciones
fundamental de todos los organismos vivo metabólicas
Todas las células vivas derivan de células Las células contienen información hereditaria
preexistentes (se dividen) (ADN) que se transmite de célula a célula
durante la división célula
Todas las células tienen, básicamente, la misma
composición química en organismos de especies
similares

Las células eucariotas tienen un núcleo rodeado de membrana, posee muchos orgánulos e incluye hongos,
protistas, células vegetales y animales.
Las células procariotas no poseen envoltura nuclear y corresponde a bacterias y arqueobacterias.
Presentan nucleoide: ADN

a64b0469ff35958ef4ab887a898bd50bdfbbe91a-8949082
Reservados todos los derechos. No se permite la explotación económica ni la transformación de esta obra. Queda permitida la impresión en su totalidad.
 MICROSCOPÍA:
Técnica que utiliza microscopios (instrumento que aumenta el tamaño de una imagen y permite
observar los detalles) para ver muestras y objetos que no se pueden ver a simple vista.

Conceptos importantes:

■ Resolución ■ Magnificación ■ Contraste

MICROSCOPIOS:

Tipos:
– Estereomicroscopios: típica lupa que nos da imágenes de 3 dimensiones

– Microscopios electrónicos: (La fuente son los electrones)

Tipos:
• De transmisión:
- Imágenes 2 D de la muestra en rodajas finas
- Se observa el interior de la célula
• De barrido:
- Imágenes 3D
- Se observa la superficie
– Microscopios ópticos: (la fuente es la luz)
Ámbito académico, investigación, patología y clínica
Tipos:
• De campo claro
• De fluorescencia
Estudia la distrib intracél de moléculas
Tiñe una parte específica de la célula

Partes:

a64b0469ff35958ef4ab887a898bd50bdfbbe91a-8949082
Reservados todos los derechos. No se permite la explotación económica ni la transformación de esta obra. Queda permitida la impresión en su totalidad.
 Magnificación:
- Cambio de tamaño aparente
- Capacidad ocular /10X) multiplicado por las lentes del objetivo = aumento total.

TÉCNICAS HISTOLÓGICAS

a64b0469ff35958ef4ab887a898bd50bdfbbe91a-8949082
Reservados todos los derechos. No se permite la explotación económica ni la transformación de esta obra. Queda permitida la impresión en su totalidad.
 1. Preparación de los tejidos
2. Histoquímica
3. Inmunohistoquímica
4. Interpretación de cortes histológicos

– PREPARACIÓN DE LOS TEJIDOS:

1. Extracción del tejido (contiene parte de agua)
2. Fijación (utilizamos reactivos químicos formaldehido)
3. Deshidratación (alcohol (etanol) de distintos grados)
4. Lavado/aclaramiento
5. Inclusión (bloque) añadir parafina al tejido, se va a integrar ocupando los sitios ocupados
anteriormente por agua y se forma un bloque, que se puede almacenar.
6. Sección (corte) con microtomo, vamos rebanando el tejido
7. Tinción y montaje. Cristal grande Portaobjetos tiene la muestra y el pequeño es el cubre objetos,
siempre va hacia arriba

– HISTOQUÍMICA:
Histo (tejido) + Química (reacción)
Los colorantes sirven para:
- identificar estructura celular y tisular.
- Identificar morfología celular y tisular.
- Identificar cuantificar y localizar sustancias químicas.
HEMATOXILINA O EOSINA, primeros colorantes en generar
• Colorante ácido (eosina) tonos rosáceos. Tiñe estructuras básicas, CITOPLASMA.
• Colorante básico (hematoxilina) tonos morados. Tiñe estructuras ácidas, NÚCLEO.
Acidofilia: afinidad por colorante ácido. Electrodenso (microscopía electrónica)
Basofilia: afinidad por colorante básico. Electrolúcido (microscopía electrónica)

Aspectos a considerar Hematoxilina-Eosina (H-E) Tinciones especiales

Cuestiones a las que dan Muchas 1- muchas

respuesta
Interés principal Núcleo y citoplasma Núcleo y citoplasma Diagnóstico
Diagnóstico médico enfermedades infecciosas y cáncer
(composición química)
Estudio Morfología Morfología/color
Frecuencia de uso Rutinaria Según necesidad
Cuantitativa No No
Necesidad de control No Si
Sustrato específico No Si
Sustrato específico No Si

Tinción Tiñe Aplicación clínica Especificidad

Hematoxilina-Eosina (H-E) Núcleo: azul/morado Tinción de rutina Tinción de rutina
Citoplasma: rosa

a64b0469ff35958ef4ab887a898bd50bdfbbe91a-8949082
Reservados todos los derechos. No se permite la explotación económica ni la transformación de esta obra. Queda permitida la impresión en su totalidad.
 Tinciones especiales:

Tinción especial Tiñe Aplicación clínica Especificidad

Tricrómico de Masson Fibras de colágeno: azul / Técnica de tinción de Músculo, fibras de
verde tejido conectivo, colágeno, fibrina y
Rojo: epitelio, citoplasma, tinción de colágeno eritrocitos
etc.
Orceína Rojo oscuro: fibras elásticas Cromosomas y tejido Fibras elásticas
conectivo, tinción para
elastina
Tinción de plata para Negro: Fibras reticulares Tejido conectivo Fibras reticulares
reticulina y mb basales (colágeno tipo III) y
colágeno tipo IV
Reacción del ácido Rosa: carbohidratos, Tiñe compartimentos Carbohidratos
peryódicoSchiff cartílago, colágeno, celulares
(PAS) glucógeno específicamente
Violeta de cresilo Púrpura-Azul: núcleo y Cuerpos Gránulos de Nissl (RER +
gránulos de Nissl Púrpura- neuronales/gránulos ribosomas)
Azul claro: otros
Impregnación de plata Negro, marrón u oro: Tejido nervioso Neurofilamentos y
y oro prolongaciones axones principalmente
citoplasmáticas
Negro Sudán (LM) y Mielina = lípidos Mielina Mielina
osmio (LM y EM)

– INMUNOHISTOQUÍMICA Un organismo crea anticuerpos frente a moléculas

extrañas, antígenos. Un Ag puede tener diferentes
Inmuno (Ag-Ac) + Histo (tjejidos) + Química (reacción)
regiones (epítopos), que serán reconocidas por un
Se utiliza para:
único Ac.
• Identificar células en división.
• Localizar células activas. Policlonal. = Ac que reconocen el mismo Ag.
• Localizar células apoptóticas. (muerte celular) Reconoce + epítopos, pero es - específico.
• Identificar diferentes estados de activación.
• Identificar los diferentes tipos de células en un tejido. Monoclonal. 1 tipo de Ac que reconoce solo 1
• Examinar la estructura del citoesqueleto. epítopo en un Ag. Es +específico, pero será +
difícil de ver al microscopio

Antígeno: sustancia específica a nivel tisular o celular que se quiere localizar.

Anticuerpo: un organismo crea anticuerpos frente moléculas extrañas, antígenos

a64b0469ff35958ef4ab887a898bd50bdfbbe91a-8949082
Reservados todos los derechos. No se permite la explotación económica ni la transformación de esta obra. Queda permitida la impresión en su totalidad.
 Aplicaciones: identificar, localizar, diagnosticar.
Métodos:
- Directo (1Ac): marcador conjugado directamente al anticuerpo que se une a la molécula de interés.
Tiene mayor especificidad y menor sensibilidad si tiene menor concentración.
- Indirecto (2Ac): marcador unido al anticuerpo que unirá al anticuerpo que se une a la
molécula que nos interesa. Ampliación de señal y que se puede usar un mismo secundario
marcado con diferentes anticuerpos primarios.
Complejo adivina-biotina-peroxidasa (ABC):
El anticuerpo primario reconoce nuestro antígeno tisular y establece una unión, pero no podremos ver
nada, entonces utilizamos el anticuerpo secundario (policlonal) que se une al anticuerpo primario. Por el
microscopio, tampoco es visible. Para verlo, utilizaremos el complejo enzimático que lleva una molécula
de avidina y otra de biotina. Cuando se produzca la unión podremos realizar un revelado y sabremos que
se ha producido reacción gracias a la aparición de un color marrón.

¿Qué Ag celulares/tisulares podemos marcar?

■ Ag de membrana celular
■ Ag citoplasmáticas
■ Ag nucleares
■ Ag de membrana nuclear
■ Lípidos
■ Proteínas

– INTERPRETACIÓN CORTES HISTOLÓGICOS:

Artefactos (complicaciones):
• Retracción
• Incremento de volumen
• Precipitados de colorante
• Plegamientos
• Burbujas de aire Polvo
• Imperfecciones de la cuchilla
• Rotura del tejido
• Procesado pobre o insuficiente (fijación, etc)
Interpretación de las secciones:
Paso de 3D a 2D al cortar. Tenemos una muestra mucho más fina para su posterior observación al
microscopio.
Tipos de secciones:

Secciones de estructuras huecas:

Sección transversal: Sección longitudinal:

a64b0469ff35958ef4ab887a898bd50bdfbbe91a-8949082
Reservados todos los derechos. No se permite la explotación económica ni la transformación de esta obra. Queda permitida la impresión en su totalidad.
 Según a la altura a la que corte obtengo distintas partes. Obtengo dos partes iguales
Ej: vasos sanguíneos, intestino, órganos tubulares.

Secciones de objetos sólidos:

Corte de una célula con un núcleo céntrico. Algunos cortes no tienen el núcleo de la célula.
En algunos, el núcleo es más pequeño.
Por el medio es más precisa la muestra.
Preparaciones no-seccionadas:
Extensión/frotis: extensión de la muestra sobre el porta. Ej: sangre, semen…

a64b0469ff35958ef4ab887a898bd50bdfbbe91a-8949082
Reservados todos los derechos. No se permite la explotación económica ni la transformación de esta obra. Queda permitida la impresión en su totalidad.