CLASE 10

FOSFORILACIÓN
OXIDATIVA Y CADENA
TRANSPORTADORA DE
ELECTRONES

Bioquímica
Ing. Qco. Selvyin Solórzano
AGENDA
FOSFORILACION
OXIDATIVA
La fosforilación oxidativa es la culminación del metabolismo
productor de energía en los organismos aeróbicos.

Todos los pasos oxidativos en la degradación de glúcidos,

grasas y aminoácidos convergen en esta etapa final de la
respiración celular en la que la energía de la oxidación
impulsa la síntesis de ATP.

El descubrimiento de Eugene Kennedy y Albert Lehninger en

1948 de que la mitocondria es el sitio en donde se realiza la
fosforilación oxidativa en los eucariotas marcó el inicio de la
fase moderna de los estudios sobre las transducciones
biológicas de energía.
La membrana mitocondrial externa es fácilmente
permeable a pequeñas moléculas e iones, que se
mueven libremente a través de canales
transmembrana compuestos por una familia de
proteínas integrales membrana llamadas porinas.

La membrana interna es impermeable a la mayoría

de moléculas pequeñas e iones, incluido el protón
(H^+); las únicas especies que cruzan esta
membrana lo hacen a través de transportadores
específicos. La membrana interna aloja los
componentes de la cadena respiratoria y la ATP
sintasa.

La matriz mitocondrial, el espacio acotado por la

membrana interna, contiene el complejo de la
piruvato deshidrogenasa y los enzimas del ciclo del
ácido cítrico,de la ruta de la b-oxidación de los
ácidos grasos y de las rutas de oxidación de los
aminoácidos, es decir, todas las rutas de oxidación
de combustibles excepto la glucólisis, que tiene lugar
en el citosol.
La fosforilación oxidativa empieza con la entrada de electrones en la cadena
respiratoria. La mayor parte de dichos electrones provienen de la acción de
deshidrogenasas que captan electornes de vías catabólicas y los canalizan hacia
aceptores universales de electrones: nucleótidos de nicotinamida (NAD+ o NADP+)
o nucleótidos de flavina (FMN o FAD).

Las deshidrogenasas ligadas a nucleótidos de nicotinamida catalizan reacciones

reversibles de los tipos generales siguientes:
La cadena respiratoria mitocondrial consta de una serie de transportadores
electrónicos que actuan secuencialmente, la mayoría de ellos proteínas
integrales con grupos prostéticos capaces de aceptar y ceder uno o dos
electrones.

Hay tres tipos de transferencias electrónicas en la fosforilación oxidativa:

(1) transferencia directa de electrones, tal como sucede en la reducción
de Fe+3 a Fe+2
(2) transferencia de un átomo de hidrógeno (H+ + e-)
(3 ) transferencia de un ión hidruro (:H-) portador de dos electrones.
Ademas del NAD y de las flavoproteinas, hay otros tres tipos de moleculas
tiansportadoras de electrones que funcionan en la cadena respiratoria: una
quinona hidrofóbica (ubiquinona) y dos tipos diferentes de proteínas con
hierro (citocromos y proteínas ferro-sulfuradas).

Ubiquinona Citocromos Proteinas ferro-sulfuradas

(Coenzima Q)
Es una benzoquiriona liposoluble que
contiene una larga cadena lateral
isoprenoide.
Puede aceptar un electron,
transformandose en el radical
semiquinona
(*QH), o dos electrones, formando
ubiquinol (QH2)
Proteínas con una intensa
absorción
de la luz visible característica,
debida a la presencia del grupo
prostético hemo que contiene
hierro (Fe).
El hierro está presente no en forma de hemo sino
en asociación con átomos de azufre inorgánico o
con átomos de azufre de residuos Cys de la
proteína,
o con los dos al mismo tiempo. Estos centros
ferro-sulfurados (Fe-S) van desde estructuras
sencillas con un solo átomo de Fe coordinado a
cuatro residuos Cys—SH con centros Fe-S más
complejos con dos o cuatro átomos de Fe
Los transportadores de electrones
actúan en complejos
multienzimáticos
Los transportadores de electrones de la cadena respiratoria están organizados en complejos
supramoleculares incrustados en membranas que se pueden separar físicamente. El tratamiento
suave de la membrana mitocondrial interna con detergentes permite la resolución de cuatro
complejos distintos de transportadores electrónicos, siendo cada uno de ellos capaz de catalizar
la transferencia electrónica a través de una porción de la cadena.
COMPLEJO I: NADH hasta
ubiquinona
También llamado NADH: ubiquinona
oxidorreductasa o NADH deshidrogenasa, es un
enzima enorme compuesto por 42 cadenas
polipeptídicas diferentes, entre las que se encuentra
una flavoproteína que contiene FMN y como
mínimo seis centros ferro-sulfurados.

El Complejo I cataliza dos procesos simultáneos

forzosamente acoplados:
(1) la transferencia exergónica hacia la ubiquinona
de un ión hidruro del NADH y un protón de la matriz
expresado por:

(2) la transferencia endergónica de cuatro protones

de la matriz hacia el espacio intemiembrana.
Por lo tanto, el Complejo I es una bomba de protones impulsada por la energía de la
transferencia electrónica, y la reacción que cataliza es vectorial: mueve los pistones en una
dirección específica desde una localización (la matriz, que se carga negativamente con la
salida de los protones) hacia otra (el espacio intermembrana, que se carga positivamente).
 COMPLEJO II: Succinato a
ubiquinona
Succinato deshidrogenasa; es el único enzima del ciclo del ácido
cítrico ligado a membrana.

Contiene cinco grupos prostéticos de dos tipos y cuatro

subunidades proteicas diferentes.

Las subunidades C y D son proteínas integrales de membrana,

cada una de ellas con tres hélices transmembrana.
Contienen un grupo hemo (hemo b) y un sitio de unión para la
ubiquinona, que es el aceptor final de electrones en la reacción
catalizada por el Complejo II. Las subunidades A y B se
extienden hacia la matriz; contienen tres centros 2Fe-2S, FAD
unido y un sitio de unión para el sustrato succinato). La ruta de
transferencia de electrones desde el sitio de unión del succinato
al FAD, y a continuación a través de los centros Fe-S hasta al
sitio de unión de Q, tiene más de 40 Á de longitud, si bien
ninguna
de las distancias de transferencia electrónica individuales excede
unos 11 Á, una distancia razonable para una transferencia
electrónica rápida
COMPLEJO III: Ubiquinona a
citocromo c
También denominado complejo citocromo bci o ubiquinona: citocromo c oxidorreductasa.

Acopla la transferencia de electrones desde el ubiquinol (QH2) al citocromo c con el transporte

vectorial de protones de la matriz al espacio intermembrana.

La unidad funcional del Complejo III es un dímero con las dos unidades monoméricas del citocromo b
rodeando una “caverna” en el centro de la membrana, en la que la ubiquinona tiene libertad para
moverse desde el lado de la matriz de la membrana (sitio en un monómero) al espacio
intermembrana (sitio Qn del otro monómero) a medida que lanza electrones y protones a través de la
membrana mitocondrial interna.
Se ha propuesto un modelo razonable para el paso de electrones y protones a través del Complejo III a partir de su
estructura y de detallados estudios bioquímicos de las reacciones redox, el ciclo Q.

La ecuación neta de las reacciones redox del ciclo Q es

QH2 +2 cit c1 (oxidado) + 2Hn+ — ► Q + 2 cit c1 (reducido) + 4Hp+

El ciclo Q adapta el cambio entre el transportador de dos electrones, la ubiquinona, y los transportadores de un
electrón, los citocromos b562, b566, C1 ye, y explica la estequiometría medida
de cuatro protones translocados por cada par de electrones que pasan del Complejo III al citocromo c. Aunque la
vía de los electrones por este segmento de la cadena respiratoria es complicada, el efecto neto de la transferencia
es simple: QH2 se oxida a Q, al tiempo que se reducen dos moléculas de citocromo c.
El citocromo c es una proteína soluble del espacio intermembrana. Después de que su único hemo acepte un
electrón del Complejo III, el citocromo c se desplaza hacia el Complejo IV para ceder el electrón a un centro de
cobre binuclear.
COMPLEJO IV: Citocromo c a O2
En el último paso de la cadena respiratoria, el Complejo IV, también llamado citocromo
oxidasa, transporta electrones desde el citocromo c al oxígeno molecular, reduciéndolo
a H2O. El Complejo IV es un enzima muy grande (13 subunidades; Mr 204,00) de la
membrana mitocondrial interna.
Las bacterias poseen una forma mucho más sencilla con sólo tres o cuatro
subunidades, pero que sigue siendo capaz de catalizar tanto la transferencia de
electrones como el bombeo de protones. La comparación de los complejos
mitocondrial y bacteriano sugiere que son esenciales tres subunidades para la función
La subunidad II mitocondrial contiene dos iones Cu que
forman complejo con los grupos —SH de dos residuos Cys
en un centro binuclear (Cua) que se parece a los centros
2Fe-2S de las proteínas ferro-sulfuradas.
La subunidad I contiene dos grupos hemo, designados a y
a3, y otro ión cobre (Cub). El hemo a3 y el Cub forman un
segundo centro binuclear que acepta los electrones del
hemo a3 y los transfiere al O2 unido al hemo a3.

La transferencia de electrones a través del complejo IV va

del citocromo c al centro Cua, al hemo a, al centro hemo
Og-CuB y finalmente al O2.
Por cada cuatro electrones que pasan a través del
complejo, el enzima consume cuatro “sustrato” de la
matriz (lado n), convirtiendo el O2 en 2H2O.
También utiliza la energía de esta reacción redox para
bombear un protón hacia el espacio intermembrana (lado
p) por cada electrón que pasa, añadiéndose al potencial
electroquímico producido por el transporte del protón
impulsado por el potencial redox a través del los
complejos I y III. La reacción global catalizada por el
complejo IV es:
El flujo de electrones a traves de los Complejos I, III y IV da lugar al bombeo de
protones a traves de la membrane mitocondrial intema haciendo que la matriz sea
alcalina con respecto al espacio intermembrana. Este gradiente de protones suministra
la energia (en la forma de fuerza proton-motriz) para la sintesis del ATP a partir del ADP
y Pi por la ATP sintasa (complejo FoF1) de la membrana interna.
SINTESIS DE ATP
El modelo quimiosmótíco propuesto por Peter Mitchell, la energía electroquímica
inherente a la diferencia en la concentración de protones y a la separación de cargas
a través de la membrana mitocondrial interna (la fuerza protónmotriz) impulsa la
síntesis de ATP a medida que los protones fluyen de manera pasiva de vuelta hacia la
matriz a través de un poro asociado a la ATP sintasa. Para resaltar el papel crucial
de la fuerza protón-motriz, la ecuación de la síntesis de ATP se escribe algunas veces
como:
Tarea
• Hacer un esquema a mano de la fosforilacion oxidativa y la
cadena transportadora de electrones
Gracias por su atención