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PROCEDIMIENTO OPERATIVO PARA EL MONITOREO DE


LA INMUNIDAD CONFERIDA POR LA VACUNA
COMERCIAL PROVIDEAN HIDATIL EG95
EN OVINOS DE PERÚ.

Ha sido demostrado en ovinos, caprino y bovinos que la inmunidad contra


Echinococcus granulosus es mediada por anticuerpos del tipo IgG –complemento-
dependiente y que existe una correlación válida entre los niveles de anticuerpos
séricos y la potencia antigénica de la vacuna.

El propósito de éste documento es explicitar las estrategias sanitarias, acciones y


actividades generales que competen al monitoreo serológico de ovinos vacunados
con PROVIDEAN HIDATIL EG95 en las distintas regiones del Perú.

1.- Objetivo

a. Medir la inmunidad conferida por la vacuna PROVIDEAN HIDATIL EG95, en


muestras de sangre tomadas a los 30 – 60 – 120 y 180 días post vacunación,
mediante un ELISA para detección de anticuerpos séricos anti-EG95

Se quiere conocer si:

a.- Puede Providean Hidatil EG95 estimular respuesta inmunológica

b.- Causa alguna reacción sistémica en detrimento de los animales.

2. Instituciones participantes

x.- Perú
x.- Institución coordinadora del/los lugar (es) donde se realizaran los ensayos.
Laboratorio Tecnovax SA. Argentina
Centro de Virología Animal CEVAN-ICT Milstein –CONICET
Departamento de Investigación en Salud, de la Provincia del Chubut.

3. Referentes

x.- Perú
x.- Responsable por la institución coordinara donde se realice el ensayo. Perú

a.- Doctora Verónica Poggio.


Centro de Virología Animal - CEVAN - ICT Milstein - CONICET
Buenos Aires . Argentina

b.- Veterinario Oscar Jensen.


Departamento Investigación en Salud.
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Provincia de Chubut. Argentina

c.- Licenciado Matías Grossman


Tecnovax SA.
Buenos Aires. Argentina

4.- Número de ensayos y lugar de realización.

Se realizarán tres (3) ensayos.


En tres zonas geográficas diferentes de Perú

5.- Inicio y finalización de los ensayos.

Según la zona geográfica, cuando se dispongan de corderos de tres meses.

Finalizarán con la toma de muestra sérica de los 6 meses, post-vacunación.

6.- Materiales y Métodos

6.1.- Animales del ensayo

Cincuenta (50) ovinos (Ovis aries) de cualquier raza, con aproximadamente tres
meses de edad.

Se formarán 2 grupos de 25 animales, tomados al azar del corral.


Serán identificados con doble caravana.

6.2.- Manejo y plan sanitario

Los animales seguirán el plan de manejo sanitario del establecimiento donde se


realice el ensayo.

6.3.- Vacunas a monitorear e institución proveedora.

a.- Vacuna Providean Hidatil EG95, 50ug/dosis


Laboratorio Tecnovax SA

b.- Placebo. Control Negativo, adyuvante oleoso, sin antígeno proteico EG95
Centro de Virología Animal - CEVAN - ICT Milstein - CONICET

6.4 Vía de aplicación y dosis

La vacuna será administrada por vía subcutánea


La primera dosis en el interior de la paleta derecha y la segunda en la paleta
izquierda, con jeringas individuales descartables.

Se aplicarán 2 dosis con un volumen de 1 ml/dosis por animal.


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6.5 Observaciones post-vacunales

Cambios en el comportamiento, temperatura corporal y reacciones en el sitio de


inoculación, serán observados y recopilados, a los dos, cuatro y siete días de
colocada la primera y segunda dosis de la vacuna.

6.6.- Toma de muestras séricas.

Se tomarán muestras séricas en los días 0, 30, 60, 120 y 180 días para determinar
la respuesta inmunológica a la vacuna.

Las muestras de sangre se extraerán de la vena yugular (10 ml /animal), con


material descartable. La sangre se colocará en tubos secos graduados y serán
remitidas al laboratorio para posterior separación del suero.

Las muestras séricas se conservarán en tubos crioviales de 2 ml a -20°C separadas


en dos alícuotas.

6.7 Cronograma de vacunación.

Cronograma Grupo 1 Grupo 2


Día Providean EG95 Placebo

Día 0 Identificación ganado Identificación ganado


Plan Sanitario Plan sanitario

Sangrado T0 Sangrado T0
Día 0 Aplicación 1ra dosis Aplicación 1ra dosis

Observaciones Observaciones
Día 2, 4 y 7 sistémicas sistémicas
Sangrado T1 Sangrado T1
Día 30 Aplicación 2da dosis Aplicación 2da dosis

Observaciones Observaciones
Día 32, 34 y 37 sistémicas sistémicas

Día 60 Sangrado T3 Sangrado T3

Día 120 Sangrado T4 Sangrado T4

Día 180 Sangrado T5 Sangrado T5


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6. 8 Monitoreo de la producción de anticuerpos anti-EG95

El monitoreo de producción de anticuerpos IgG anti-EG95 en los animales


vacunados y controles será realizado mediante estudios serológicos seriados por
técnica de ELISA

Una alícuota de la muestra sérica será conservada en la institución local,


participante del ensayo.

El duplicado será remitido conservando la cadena de frio,*** (con identificación del


N° de muestra, pero sin identificar el grupo al que pertenece), al laboratorio del
Centro de Virología Animal CEVAN-ICT Milstein a nombre de la Dra. Veronica
Poggio, calle Saladillo 2468 (C1144FFX) Ciudad de Buenos Aires - (CP 1440 FFX).
Buenos Aires. Argentina. TE: 46866225-46876751-46872542 int 2314.
E-mail: vpoggiocevan@centromilstein.org.ar

*** Se acordará previamente la forma de envió, permisos necesarios de salida del


país, lugar de procesamiento de las muestras.

7. Bibliografía

1.- Lightowlers MW, Jensen O, Fernández E, Iriarte JA, Woollard, DJ, Gauci CG,
Jenkins DJ, Heath DD. Vaccination trials in Australia and Argentina confirm the
effectiveness of the EG95 hydatid vaccine in sheep. Internacional Journal for
Parasitology. 1999; 29: 531-534

2.- Heath DD, Jensen O, Lightowlers MV. Progress in control of hydatidosis using – a
review of formulation and delivery of the vaccine and recommendations for practical
use in control programmemes. Acta Tropica. 2003; 85 133-143

3.- Lightowlers MW, Flisser A, Gauci CG, Heath DD, Jensen O, Rolfe R. Vaccination
Against Cisticercosis and Hydatid Disease. Parasitology Today. 2000; 179: 191-196

4.- Lightowlers, M.W., Lawrence, S.B., Gaucci, C.G., Young, J.,Ralston, M.J., Maas,
D., Heath, D.D., 1996. Vaccination against hydatidosis using a defined recombinant
antigen. Parasit. Immunol. 18, 457- 462.

5.- Vacuna Recombinante EG95 en el hospedero intermediario. Jensen O, Sanchez


P, Laightowels M, Heath D, La Torre D, Iriarte J, Fernández R, Martínez G, Mosello
M, Lopardo J, Sandoval A, Scarpati A, Souto M, Vaccaro M. XXIII International
Congress of Hydatidology Colonia-Uruguay 2009.

6. Serological monitoring of protection of sheep against Echinococcus


granulosus induced by the EG95 vaccine. Heath D,Koolaard J. Parasite
Immunology, 2012, 34, 40–44

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