PRÁCTICA N°

CICLO CELULAR: DIVISION MITOTICA

INTRODUCCIÓN:

Una célula correspondiente a un organismo animal o vegetal, sea unicelular o pluricelular, tiene
la propiedad fundamental cual es, de reproducirse, o multiplicarse a través del ciclo de
proliferación celular, es decir que la célula duplica sus estructuras fundamentales, trasmitir el
ADN con los sistemas nuclear y citoplasmático precisos a las células hijas o descendientes.
En este proceso la célula tiene una doble función copiarse a si misma y que su copia sea
regulada es decir diferenciada según las necesidades del organismo a la que pertenece.

El ciclo celular comprende dos periodos fundamentales: Interfase y División. Esta última, en
organismos eucarióticos generalmente tiene lugar por la mitosis o meiosis.
La Interfase es un periodo de máxima actividad biosintética, donde se produce el ADN,
proteínas básicas (histonas), la mayor parte de ARN, proteínas no básicas y nuevas
membranas. La mayoría de las células permanecen, sin embargo, la mayor parte de su vida en
interfase, periodo en el cual se duplica su masa y se autorreplica el ADN, lo que conlleva la
duplicación del complemento cromosómico.
El periodo de la división se puede dar a través de la mitosis o meiosis, donde la célula madre
o célula germinal se dividirá para dar lugar a dos células hijas diploides (2n) o a 4 gametos
haploides (n) respectivamente.
El ciclo celular puede dividirse en 4 periodos G1, S, G2 y mitosis.
La interfase comprende: G1, S, G2. Se realizaron estudios con isótopos radioactivos así como la
Timidina Tritiada TdR-H3 durante la interfase, este hecho permitió determinar el período
exacto en que se produce la duplicación de ADN, demostrándose que la sin tesis se lleva a
cabo durante una parte limitada de la interfase denominada periodo S o sintético que a su vez
esta precedido y seguido por dos espacios que son los gaps o periodo de la interfase G 1 y G2
en los que evidentemente no hay síntesis de ADN, por este hecho es que Howard y Pelc
dividieron el ciclo celular en 4 intervalos G1, S, G2 y Mitosis, en el periodo G2 las células
contienen el doble (4 C) de la cantidad de ADN presente en la célula diploide original (2C).

Durante el periodo S de Interfase se produce la síntesis de ADN, lo que conlleva al

mecanismo de duplicación de ADN, al que se puede considerar como una consecuencia directa
del modelo propuesto por Wastson y Crick en 1953, en la cual las dos cadenas de ADN se
desenrollan de la doble hélice a manera de una bifurcación que forma una Y, cada cadena
paterna u original actúa como molde o patrón, en esta forma se produce dos cadenas hijas con
apareamiento especifico de bases, A T, G C como resultado cada molécula hija es una
réplica exacta de la molécula paterna. La síntesis de ADN y por ende la replicación es semi
conservadora.
El ADN se sintetiza en presencia de tres enzimas las ADN polimerasas, que no solo actúan
en la replicación de ADN sino también en su reparación, estas actúan solo en dirección 5’ →
3’.
MITOSIS O PERIODO DE DIVISIÓN DEL NÚCLEO.

Se lleva a cabo inmediatamente después de finalizar el período G2 y se realiza en forma

asincrónica, durante la mitosis la síntesis de ARN se detiene en los cromosomas condensados,
la velocidad de síntesis proteica disminuye. En general la síntesis de proteínas empieza en la
telofase y continua hasta la profase temprana.

La descondensación y condensación de los cromosomas se efectúa en la Interfase y mitosis.

La mitosis conserva el número diploide de cromosomas 2n, a su vez presenta 4 fases o
estadios: Profase, Metafase, Anafase y Telofase.

Ciclo de condensación y descondensación. En G1 los cromosomas se encuentran totalmente

dispersos, en S se produce la duplicación, y en G2 comienza la condensación y los cromómeros
se hacen visibles, La condensación es máxima en la metafase y la anafase, oportunidad en que
los dos centrómeros son claramente visibles.

PROFASE: Los cromosomas comienzan a visualizarse, mientras que los nucleólos inician el
proceso de desorganización. Los tenues filamentos cromosómicos, anteriormente extendidos,
se enrollan a manera de un rezorte cilíndrico y en espiral, volviéndose más cortos y gruesos.
En la profase tardía se aprecia que cada cromosoma está constituido por dos elementos
denominados cromátides. La envoltura nuclear empieza a desaparecer y al finalizar profase
desaparece totalmente.

PROMETAFASE: Los cromosomas se encuentran en el citoplasma sin orden aparente. Esta

fase es de corta duración.

METAFASE. Se caracteriza por la aparición del huso mitótico. Esta estructura consta de un
conjunto de microtúbulos que se extienden entre los polos de la célula. Los cromosomas
alcanzan el plano ecuatorial, donde se disponen radialmente en la periferie del huso como si se
rechazarán los unos a los otros. En las células vegetales los cromosomas se distribuyen
irregularmente y ocupan toda la superficie del plano ecuatorial del huso. Los cromosomas están
vinculados con las fibras del huso (casquetes polares) por medio de los centrómeros.

ANAFASE: Comienza en el momento en que las cromátides se separan una de otra. Cada
cromátide está unida a la fibra del huso a través del dominio cinetocórico del centrómero y se
dirigen hacia los polos opuestos.

TELOFASE: El final de la emigración polar de los cromosomas hijos indica el comienzo de

esta fase. Los cromosomas empiezan a desarrollarse, los nucléolos están en fase de
reorganización y la envoltura nuclear se forma paulatinamente alrededor de los cromosomas.
Simultáneamente se produce la citocinesis.

En esta práctica se estudiará la mitosis y el ciclo de división celular en las células meristemáticas
de la raíz de Allium cepa (cebolla). Este sistema es muy adecuado porque, la población celular
está en equilibrio dinámico y los cromosomas son relativamente grandes, con número
diploide, 2n =8 pares, es decir 16 cromosomas.

COMPETENCIA:
1. Reconoce la célula en sus diferentes fases del ciclo celular.
2. Identifica, diferencia y analiza las diferentes fases de Mitosis (profase, metafase, anafase
y telofase).

MATERIALES:
- Microscopio.
- Pinzas,
- Hojas de afeitar o bisturí.
- Tijeras.
- Gotero o pipeta Pasteur.
- Portaobjetos y cubreobjetos.
- Alcohol corriente.
- Luna de reloj.
- Mechero.
- Papel filtro.
- Estiletes.
- Lápiz con punta.
- Papel secante.
- Orceina acética clorhídrica 2%.
- Material biológico: Bulbos de cebolla con meristemos frescos.

PROCEDIMIENTO:

CULTIVO DE MERISTEMOS DE CEBOLLA:

- Llenar un vaso o vaso de precipitados con agua y colocar un bulbo de cebolla (Allium
cepa) sujeto con dos o tres palillos de manera que la parte inferior quede inmersa en el
agua (ver figura). Al cabo de 3 a 4 días aparecerán numerosas raicillas en crecimiento de
unos3o4cm.
de longitud.

- Obtenidas las raicillas, se cortan con tijeras 2cm a medir desde el ápice o cono, colocar
en el vidrio de reloj que contenga el colorante Orceina acética clorhidra al 2%.
- Mediante una pinza tomar el vidrio de reloj, someter al mechero cortando la llama y
controlando la temperatura en el dorso de la mano, hasta que el colorante emita vapores
blancos sin llegar a la ebullición, enseguida colocar sobre la mesa hasta que enfrié,
repetir el mismo proceso dos veces más, en la última vez se debe dejar enfriar totalmente
por lo menos 20 minutos de tal manera que el colorante actúe intensamente sobre las
células.
- Teñidas las raicillas, se colocan en portaobjetos con una gota de Orceina acética
clorhidra al 2%.
- Mediante estilete y bisturí realizar el corte del ápice o cono vegetativo a 2-3mm)
descartando el resto de la raíz, quedando solo el ápice.
- Cubrir con un cubreobjetos, luego realizar golpeteos con un lápiz de punta empezando de
la periferie hacia la parte central del cubre, estos golpeteos se efectúan con el fin de que
las células se disocien.
- Proceder al Squash es decir al aplastamiento, colocando papel filtro o absorbente entre el
dedo pulgar y la preparación, presionar fuertemente en plano perpendicular de tal manera
que las células queden en un solo plano.
- Observar en el microscopio a inmersión, distinguir células en interfase y Mitosis (profase,
metafase, anafase y telofase).
- Realizar esquemas de las fases observadas.
 RESULTADOS Y DISCUSION:
Realice dibujos, esquemas, observaciones microscópicas y comentarios de la práctica:

Observaciones microscópicas:

Aumentos: 100x
Estructura visible: Raíz de cebolla

CONCLUSIONES:
El ciclo celular es de gran importancia para la célula ya que tiene como función la formación
completa de una nueva célula, evitando en lo posible la creación de células con múltiples
errores, lo cual le permite al organismo permanecer en un constante equilibrio y evita los
problemas de salud. Existen diversos mecanismos de control encargados de proteger a la célula
de posibles alteraciones, entre estos los puntos de control que son muy eficientes como
reguladores y se encuentran ubicados en el paso entre una etapa y otra del ciclo.
Lamentablemente no son infalibles.

CUESTIONARIO:
1. ¿Dónde se encuentran los cromosomas en la célula?, ¿siempre están presentes?
Los cromosomas son estructuras que se encuentran en el centro (núcleo) de las células
que transportan fragmentos largos de ADN.

2. ¿Por qué se observan las fases de la mitosis en las raíces? Se verían fácilmente en
otra parte de la planta?
En las plantas las raíces continúan creciendo mientras buscan agua y nutrientes. Estas
regiones de crecimiento sirven para estudiar el ciclo celular porque en cualquier
momento se pueden encontrar células que están sufriendo mitosis.
En las plantas la mitosis se produce sobre todo en los meristemos, que son los tejidos
que permiten el crecimiento de la planta y que se encuentran, entre otros lugares, en los
extremos de los tallos y de las raíces.

3. ¿ En qué periodo del ciclo celular se produce la síntesis de ADN, ARN, Proteínas
básicas y no básicas?
La fase G1 es la primera fase del ciclo celular, en la que existe crecimiento celular con
síntesis de proteínas y de ARN.
Fase S:Es la segunda fase del ciclo, en la que se produce la replicación o síntesis del
ADN, como resultado cada cromosoma se duplica y queda formado por dos cromátidas
idénticas. Con la duplicación del ADN, el núcleo contiene el doble de proteínas
nucleares y de ADN que al principio.