220 ● ENFERMEDADES VIRALES

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Sección II

Fig.33.1: EM. Parálisis. Postura característica de parálisis aviar, un Fig.33.2: EM. Aumento asimétrico del plexo del nervio ciático
ala y una pata paralizada. (arriba), comparado al normal (abajo).

I Dinev - Ceva Santé animale

Sanders
Fig.33.3: EM. Este aumento es visto también en el nervio ciá- Fig.33.4: EM. Aumento del nervio neumogástrico.
tico. Comparado con el nervio normal (arriba).

HJ Barnes
Sanders

Fig.33.5: EM. Infiltración de células linfoides del iris, note la Fig.33.6: EM. Tumores en el bazo e hígado (el tamaño del bazo
forma irregular gris del iris. normal es 1/3 del proventrículo). F Coudert
HJ Barnes
Sanders

Fig.33.9: El VEM libre de células

(forma envuelta) liberado del
Fig.33.7 & 33.8: EM. “Leucosis cutánea” involucrando los folículos de la piel. Las lesiones nodulares epitelio del folículo plumoso es
pueden involucrar unos cuantos folículos dispersos o estos pueden coalescer, con frecuencia hay relativamente resistente a los
enrojecimiento de la piel. factores medio ambientales y es
completamente infeccioso.
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Enfermedades virales
33. ENFERMEDAD DE MAREK
INTRODUCCIÓN
El virus de la enfermedad de Marek (VEM) es un herpes-
virus (Gallid herpesvirus 2 o GaHV-2) que causa tumores
e inmunodepresión en pollos. También los pavos, fai-
sanes y codornices pueden ser afectados. La enfermedad
se encuentra caracterizada por una infiltración de células
linfoides pleomórficas en varios plexos nerviosos y órga-
nos. La introducción de la vacunación contra la enferme-
dad de Marek (EM) en los años 1970s represento la pri-
mera utilización efectiva y generalizada de una vacuna
que permitía prevenir una enfermedad tumoral de origen
viral en cualquier especie.
Antes de los años 1960s, la infección de la EM se carac-
terizaba clínicamente por una parálisis unilateral del ala
o de la pata, de allí la denominación conocida como
“Parálisis del pollo.” Sin embargo, con la intensificación
de la producción avícola, asociada a la reducción de la
diversidad genética en las aves comerciales, así como la
modificación de su medioambiente, pueden haber favore-
cido el desarrollo de nuevas cepas del VEM con incre-
mento de su virulencia. Las primeras vacunas contra la
EM, principalmente del serotipo 3 herpesvirus del pavo
(Herpesvirus turkey o HVT denominado Meleagrid her-
pesvirus 1 o MeHV-1) permitieron disminuir las pérdidas
por la enfermedad. A finales de los años 1970s se aislaron
VEM de incrementada virulencia. Estos aislamientos
virales fueron capaces de romper la protección inducida
por la primera generación de vacunas HVT, especial-
mente aquellas vacunas que fueron utilizadas en forma
liofilizada libres de células. En Europa una vacuna del
serotipo 1, CVI988/Rispens, fue introducida y utilizada
en combinación con la vacuna HVT, esta vacuna fue efec-
tiva en situaciones de campo. En USA una vacuna del
serotipo 2, la SB-1 fue desarrollada e introducida en los
años1970s, se utilizó en combinación con HVT, esta
vacuna fue exitosa en controlar las pérdidas. Sin
embargo, en USA continuaron aislándose nuevas cepas
virales más virulentas. En los años 1990s, se introdujo en
USA la vacuna CVI988/Rispens la cual fue utilizada en
combinación con HVT, la cual revelo ser muy eficaz.
Actualmente, las aves se vacunan contra el VEM en casi
todas las operaciones comerciales a través del mundo.
Las vacunas actuales contra la EM permiten el control de
la enfermedad en campo y reducen pero no previenen la
infección o su transmisión. De esta forma existe un reser-
vorio viral permanente en las aves vacunadas, lo cual per-
mite la selección y adaptación de nuevas cepas virales del
VEM. Las cepas más virulentas (muy virulentas más)
producen una infección citolítica temprana aguda con alta
mortalidad temprana y una severa atrofia del timo y bolsa
de Fabricio así como una fuerte mortalidad de los pollos.
Recientemente también se han documentado brotes de
campo de la EM en pavos comerciales en Francia,
Alemania, Israel y el Reino Unido. La estimación del
E N F E R M E D A D D E M A R E K ● 221
impacto económico mundial de la enfermedad es de 1 a 2
billones de dólares por año.
ETIOLOGÍA
Los virus de la EM (GaHV-2) se encuentran asociados a
Capítulo 33
células, pertenecen a la familia Herpesviridae (order
Herpesvirales), la subfamilia Alphaherpesvirinae y
Mardivirus de género. Estos virus se encuentran estrecha-
mente relacionados antigénicamente, han sido clasificados
en tres serotipos. El serotipo 1 (VEM 1) es oncogénico y es
el agente etiológico de la EM. Los aislamientos del serotipo
2 (Gallid herpesvirus 3 o GaHV-3) son comunes en pollos
y son no-oncogénicos. Los aislamientos del serotipo 3 son
considerados como ubicuos en los pavos y son no-oncogé-
nicos. Los tres serotipos del VEM muestran antigénica-
mente una reacción cruzada.
Las cepas virales del serotipo 1 se pueden dividir dentro de
cuatro grupos en función de su aparente virulencia y la capa-
cidad de diferentes preparaciones vacunales para prevenir la
formación de tumores en pollos susceptibles. Las cepas de
mediana virulencia (mVEM) solo causan lesiones mínimas
en las líneas susceptibles de pollos. Las cepas virulentas
(vVEM) causan lesiones más severas, sin embargo, las aves
son protegidas efectivamente contra estas cepas por medio
de vacunas monovalentes como la HVT. Las cepas muy
virulentas (vvVEM), son las causantes de una patología más
significativa, las aves son protegidas contra estas cepas con
vacunas bivalentes tales como HVT/SB-1. Finalmente, las
cepas muy virulentas más (vv+VEM), ocasionan los efectos
patológicos más grandes. La vacunación con HVT/CVI988
ofrece una protección mejorada contra las cepas vv+VEM.
El VEM se propaga y evalúa habitualmente en el laborato-
rio en cultivos celulares, huevos embrionados o pollitos.
Los medios de cultivo celular como las células de riñón de
pollo de 1-2 semanas de edad, o los fibroblastos de embrión
de pato son los mejores medios que permiten el aislamiento
y propagación de nuevas cepas virales. Los cultivos celu-
lares infectados desarrollan lesiones focales discretas,
constituidas de acúmulos de células redondeadas degenera-
das y refráctiles. Los viriones se observan comúnmente
dentro del núcleo y ocasionalmente en el citoplasma de las
células infectadas. Las nucleocápsides hexagonales (85-
100 nm de diámetro) y las envolturas de las partículas
virales (150-160 nm de diámetro) pueden ser visualizadas
en delgadas secciones de los cultivos celulares infectados.
La replicación de los virus de la EM se efectúa en células
vivas y esta multiplicación se realiza en su forma asociada
a células, la cual es muy inestable. Sin embargo, la forma
libre del virus liberada del epitelio del folículo plumoso
(EFP) es relativamente resistente a los factores medio
ambientales. Las dos formas del virus (asociado a células o
forma libre) son susceptibles a muchos desinfectantes
comunes.
Manual de patología aviar
 222 ● ENFERMEDADES VIRALES

I Dinev-Ceva Santé animale

«Muerte célular»
Replicación Células B Células T
temprana en activadas «Muerte célular»
pulmones

Fase citolítica
temprana Una semana
Infección

Infección por
inhalación de Células T infectadas
Sección II

polvo avícola Medio ambiente tardíamente

Transformación
Fase latente:
de linfocitos
linfocitos
(3-4 semanas)

Infiltración de nervios

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Difusión del virus a partir del

epitelio del folículo plumoso
Linfoma EM
Fig.33.10: Diagrama esquemático mostrando los diferentes estadíos de la patogénesis de la enfermedad de Marek.

HJ Barnes
I Dinev - Ceva Santé animale
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Fig.33.11 & 33.12: EM. Tumores en hígado y corazón. La hepatomegalia en aves adultas puede ser Fig.33.13 & 33.14: EM.
muy similar a lo observado en la Leucosis linfoide. La infiltración tumoral puede ser difusa o nodu- Involucramiento linfomatoso
lar como en estas dos figuras. del bazo (Pollo).
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Sanders

Fig.33.15: Involucramiento linfomatoso del páncreas Fig.33.16 & 33.17: EM. Involucramiento linfomatoso del proventriculo
(Pollo). (Pollo). Proventriculo normal debajo de la Fig.33.16.

Manual de patología aviar

A Miles
EPIDEMIOLOGÍA
Muchos factores pueden influenciar la incidencia de VEM;
estos incluyen la edad al momento de la exposición, la consti-
tución genética, el nivel de anticuerpos maternos, la virulen-
cia de la cepa viral, el sexo del hospedero y factores compli-
cantes tales como la infección con otros agentes inmunosu-
presivos.
La infección inicial y la propagación dentro del huésped se
producen por contacto directo de célula a célula. La vía de
entrada del virus es vía respiratoria, después viaja a los prin-
cipales órganos linfoides (bazo, timo y bolsa de Fabricio). El
mecanismo de transferencia del tracto respiratorio a los órga-
nos linfoides aún no es bien entendido; sin embargo, se cree
que los macrófagos se encuentran involucrados. A los tres
días post infección se puede detectar una infección produc-
tiva-restrictiva en los órganos linfoides. El término de infec-
ción productiva-restrictiva se utiliza debido a que la infección
se encuentra estrictamente asociada a células. La infección
citolítica temprana in vivo ocurre principalmente en células B
y en muchos cultivos celulares in vitro, donde los viriones
producidos son no envueltos y no infecciosos. Las infec-
ciones citolíticas estimulan una respuesta inflamatoria del
huésped, conduciendo a una activación de células T. En los
órganos linfoides primarios, la infección productiva-restric-
tiva se caracteriza por una reticulitis aguda con infiltración de
macrófagos y granulocitos. Puede ocurrir una hiperplasia de
células reticulares resultando en una esplenomegalia.
Después de la primo-infección, el herpesvirus generalmente
cambia a una forma latente de la infección y se puede reacti-
var periódicamente a lo largo de la vida del huésped. Cerca de
los 5-7 días post-infección con el VEM, hay un cambio en el
tipo de infección observada en los linfocitos. Mientras que la
infección citolítica involucra a muchos linfocitos B y pocos
linfocitos T afectados, la infección latente se produce princi-
palmente en los linfocitos T. Estos linfocitos T infectados de
forma latente portan el antígeno, indicando que son células T
activadas. En la fase latente de la EM, es difícil de medir la
evidencia de antígenos asociados al virus o partículas del
virus in vivo, aún cuando los virus pueden recobrarse in vitro.
La expresión del genoma viral se encuentra limitado a pocos
transcriptos transcritos de regiones repetidas del genoma.
En las aves susceptibles, puede ocurrir una segunda oleada de
infección citolítica a las dos o tres semanas post-infección, lo
cual resulta en una inmunosupresión permanente. Esta infec-
ción productiva-restrictiva conduce a la formación de cuerpos
de inclusión intranucleares, a la destrucción de células y a la
formación de lesiones necróticas en tejidos epiteliales
incluyendo el riñón, proventrículo y el EFP. Los linfocitos
pueden volverse citolíticamente infectados en estos sitios, así
como también en los órganos linfoides principales. La infec-
ción productiva completa que ocurre solamente en el EFP,
permite el desarrollo de viriones infecciosos envueltos com-
pletamente. La gran concentración de viriones en el EFP
puede ser hallado en muestras colectadas de pollos a las tres
o cinco semanas post-inoculación.
La infección transformante ocurre en los linfocitos T CD4+
de pollos y ha sido demostrada solo con cepas virulentas del
E N F E R M E D A D D E M A R E K ● 223
serotipo 1. La investigación actual indica que los productos de
uno o más genes del VEM pueden actuar en forma concer-
tada con factores celulares para inducir la transformación. El
análisis de la trascripción de genes del VEM en linfomas
inducidos por el VEM y en linfoblastoides transformados por
el VEM en líneas celulares, demuestran que la transcripción
del gen viral se encuentra limitada a una repetición acompa-
ñada de una sola secuencia larga y una sola secuencia corta.
Así, se debe poner mucha atención sobre la identificación y
caracterización de transcriptos virales codificados dentro de
estas regiones. Los candidatos virales implicados en la trans-
Capítulo 33
formación incluyen a Meq, vIL-8, pp38 y dos pequeños
armazones de lectura abierta, pp14 y p7.
La infección plenamente productiva resulta de la excreción
del virus presente en los folículos plumosos, la descamación
de los folículos conteniendo el VEM envuelto permite la
contaminación e infección de otras aves. Las aves infectadas
pueden presentar o no los signos clínicos de la enfermedad y
pueden excretar el virus de forma esporádica a lo largo de
toda su vida. La descamación infecciosa de los folículos plu-
mosos puede propagarse a largas distancias y es muy conta-
giosa. No existe trasmisión vertical a través del huevo. La
transmisión horizontal desde la incubadora debido a la conta-
minación del cascarón es poco probable, esto en razón a las
condiciones medioambientales adversas.
SIGNOS CLÍNICOS & LESIONES
Los signos clínicos de la EM aparecen generalmente cerca de
las 3 semanas de edad y muestran un pico entre los 2 y 7
meses, sin embargo, estos no permiten establecer un diagnós-
tico fácilmente. La proliferación linfoide multifocal en diver-
sos tejidos aparece precozmente tan solo 1 semana post-infec-
ción, volviéndose progresivamente más pronunciados y
conducen a una linfomatosis macroscópica fatal. Las aves
con tumores viscerales pueden parecer deprimidas y frecuen-
temente antes de la muerte están caquécticas.
La infiltración celular de los nervios periféricos, conduce a
una importante hipertrofia, pérdida de estriación y parálisis
que es característica de la EM clásica. Las aves con infiltra-
ción linfoide de los nervios periféricos asimétrica conducen a
una parálisis parcial y una dilatación del divertículo esofágico
debido a una parálisis del nervio vago. El VEM puede infec-
tar también el cerebro dirigiendo a una parálisis transitoria o
una enfermedad neurológica persistente. La ceguera se
encuentra asociada con la infiltración linfoide del iris. La
forma cutánea (denominada Leucosis cutánea) usualmente se
localiza en los folículos de la pluma. Las lesiones nodulares
pueden involucrar unos pocos folículos dispersos o bien pue-
den coalescer, frecuentemente hay un enrojecimiento de la
piel. Los tumores viscerales son las lesiones de mayor fre-
cuencia, sin embargo, las combinaciones con diferentes
patrones de lesión son comunes. Los tumores son comunes en
el hígado, bazo, gónadas, riñones, corazón y proventrículo.
Al examen microscópico, los linfomas de la EM se caracteri-
zan por una mezcla de linfocitos pleomórficos. Algunas de
estas células probablemente son verdaderas células tumorales
que portan los antígenos de superficie de las células T y el
antígeno de Marek asociado al tumor; otras son probable-
Manual de patología aviar
 224 ● ENFERMEDADES VIRALES

I Dinev - Ceva Santé animale

Sección II

Sanders

Sanders
Fig.33.18: EM. Involucra- Fig.33.19: Tumores multicéntricos de la EM (flechas) pro- Fig.33.20: EM. Involucramiento linfo-
miento linfomatoso del cora- minentes o vistos a través de los músculos pectorales matoso de los riñones (Pollo).
zón (Pollo). superficial y profundo (Pollo).

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Sanders

Fig.33.21: EM. Típica aparien- Fig.33.22: EM. Marcada asimetría de los Fig.33.23: Involucramiento linfomatoso del pulmón (Pavo).
cia del ovario similar a la coli- testículos en un gallo posterior a una pro-
flor, distintiva de la EM (Pollo). liferación celular linfoide de tipo unilateral.
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J Brugère-Picoux
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Fig.33.24 & 33.25: Lesiones microscópicas de la enfermedad de Marek en nervios peri- Fig.33.26: EM. Infiltración extensiva de
féricos. A la izquierda, lesión del tipo A del nervio braquial caracterizado por una infiltra- linfocitos alrededor los vasos sanguí-
ción marcada por numerosas células linfoblásticas sin edema. En la derecha, linfocitos neos en el neuropilo del cerebelo.
pleomórficos en un nervio hipertrófico.
J Brugère-Picoux
HJ Barnes

Fig.33.27: EM. Linfocitos pleomórficos en un linfoma de hígado Fig.33.28: EM. Linfocitos pleomórficos en un linfoma del pro-
(Pavo). ventrículo (Pollo).

Manual de patología aviar

A Miles
mente linfocitos T y B reaccionando contra los antígenos
virales o tumorales.
PROCEDIMIENTOS DE DIAGNÓSTICO
La enfermedad de Marek se caracteriza por una infiltración
de células mononucleares en los nervios periféricos, gónadas,
varias vísceras, iris, músculo y piel. Aunque la hipertrofia de
los nervios periféricos y los linfomas viscerales son comunes
en la EM, ninguna lesión ocurre consistentemente. Los crite-
rios como la edad (4-20 semanas, excepto en aves reproduc-
toras donde los tumores del VEM incrementan al principio de
la postura), la distribución de las lesiones y la ausencia de
otros tumores debido a otros virus como el virus de la
Leucosis aviar (VLA) y el virus de la Reticuloendoteliosis
(VRE) también deben ser considerados.
El examen histológico puede aumentar la exactitud para el
diagnóstico diferencial entre el VLA y el VEM. Los tumores
de la EM presentan una población mezclada de linfocitos
pequeños a grandes. Pueden ser observados linfoblastos y
células plasmáticas. Los tumores linfoides causados por el
VLA se encuentran típicamente compuestos de linfoblastos
de tamaño similar conteniendo un nucléolo prominente, habi-
tualmente ocurre en aves mayores a 20 semanas y común-
mente ocurre en la bolsa de Fabricio. Los tumores causados
por el VEM y VRE pueden parecer similares en el análisis
macroscópico e histológico. De esta forma el diagnóstico de
la etiología de una neoplasia crónica en las aves, en la cual
hay ausencia de tumores en la bolsa de Fabricio y el periodo
de latencia es muy corto para el VLA, deberá hacerse por
medio de pruebas serológicas y virológicas. La enfermedad
clínica es mucho más común con el VEM que con el VRE,
además el VRE no es considerado como un problema econó-
mico mayor para la industria avícola.
El virus inicialmente puede aislarse uno o dos días después de
la inoculación de los pollos con el VEM, cinco días después
de la exposición por contacto y de allí en adelante a lo largo
de la vida del ave. El virus se puede obtener de muestras
infectadas de sangre completa, suspensiones de linfocitos,
células aisladas de tumor, así también como algunas prepara-
ciones no celulares de piel, de los folículos plumosos o de la
base de las plumas de aves infectadas.
Para el aislamiento del serotipo 1 del VEM típicamente se uti-
lizan cultivos de células renales de pollos y fibroblastos de
embrión de pato. Los fibroblastos de embrión de pollo son
utilizados generalmente como sustratos para los serotipos 2 y
3. Los cultivos desarrollan típicas placas dentro de los 4-14
días. La identificación del serotipo se puede determinar por
medio de tinción de inmunofluorescencia con anticuerpos
monoclonales específicos de serotipo. Actualmente, el diag-
nóstico del patotipo de VEM requiere pruebas experimentales
de desafío in vivo.
TRATAMIENTO & CONTROL
No existe un tratamiento efectivo contra la EM, sin
embargo, la administración correcta de una vacuna
apropiada y una buena bioseguridad pueden prevenir la
enfermedad clínica. Las parvadas comerciales de pollos
E N F E R M E D A D D E M A R E K ● 225
se vacunan usualmente al día 18 de desarrollo embrio-
nario (in ovo) o a la eclosión. De las vacunas disponi-
bles, la mejor protección contra cepas de desafío alta-
mente virulentas es proporcionada por la vacuna
CVI988 (Rispens). Ninguna de las vacunas actuales
provee una inmunidad al 100% y las parvadas vacuna-
das aún pueden infectarse con una cepa virulenta del
VEM, el cual puede replicarse y eliminarse por medio
de las descamaciones del EFP y así infectar otros pol-
los. Esto seguramente ha contribuido a incrementar la
virulencia de las cepas de campo. En áreas con alta den-
Capítulo 33
sidad avícola y desafío con las cepas más virulentas,
para prevenir exposiciones tempranas de los pollos al
VEM deben mantenerse altos niveles de bioseguridad y
se debe considerar el uso de vacunas multivalentes
(HVT + CVI988 o HVT + RB1B + CVI988).
Una de las principales razones para el incremento de la
mortalidad por el VEM es el manejo inapropiado de la
vacuna. Las vacunas contra la EM más efectivas y
ampliamente utilizadas son las asociadas a células,
estas deberán mantenerse a -196°C durante el trans-
porte y hasta su descongelamiento antes de su utiliza-
ción. Las ampolletas de la vacuna deberán desconge-
larse rápidamente en agua fría y una vez descongelada
y diluida la vacuna deberá mantenerse fría y usarse den-
tro de las 2 horas subsecuentes. La adición de aditivos,
tales como antibióticos pueden dañar la vacuna, por lo
cual deberán evitarse.
Las vacunas introducidas desde los años 1970s han
ayudado a controlar las pérdidas económicas por el
VEM, sin embargo, ninguna de estas vacunas proveen
inmunidad al 100%, el virus se propaga junto con la
industria avícola comercial a través del mundo. Las
vacunas actualmente proveen protección contras las
cepas actuales, aunque en el futuro se requerirán nuevas
estrategias. Las prácticas de bioseguridad y una buena
vacunación deberán ayudar a retardar la aparición de
cepas virales cada vez más virulentas.
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Disease: An Evolving Problem, 2004. Elsevier.
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Manual de patología aviar