REALIZACION DE POOLES DE GLOBULOS ROJOS PARA LA DETERMINACION DE

GRUPO SANGUINEO SERICO

Para la determinacion del grupo sanguineo serico (solo ABO) se debe confeccionar en
nuestro laboratorio los pooles o diluciones de globulos rojos (Ag) que seran enfrentados al suero o
plasma del paciente o solicitante (Ac).

Cada servicio de laboratorio al estar incluido dentro de una intitucion hospitalaria o

sanatorio esta en contacto con el area de hemoterapia lo cual seria beneficiosa para la realizacion
de estos pooles debido a que se tendria a disposicion unidades de sangre para soliciar alicuotas de
estos grupos (A y B); de cualquier manera de no contar con esa alternativa tambien hay pooles
comerciales bastantes costosos que se pueden adquirir.

REACTIVOS GLOBULARES SERI DIANA – GRIFOLS

En este caso solicitaremos al banco de sangre dos alicuotas (colillas) por cada una de las
unidades de globulos rojos A y B, si bien solo se trabaja con estos grupos podriamos agregar
tambien una alicuota de globulos de grupo O como opcion dependiendo de la tecnica
inmunohematologica que debamos realizar.

UNIDADES DE DONANTES A Y B

Cuando ya tenemos estas alicuotas o colillas de globulos rojos y los elementos necesarios
iniciamos el procedimiento.

TECNICA PARA ELABORACION DE POOLES

Materiales
 tubos de hemolisis y de khan
 centrifuga para tubos
 solucion fisiologica isotonica de cloruro de sodio
 pipetas descartables o de 100 microlitros

Procedimiento

En primer lugar se rotulan convenientemente los tubos de hemolisis con las siglas “A” y “B”
luego colocamos en cada uno de los tubos correspondientes el contenido de las colillas de los
globulos rojos A en el tubo rotulado como A y los GR B en el tubo rotulado como B.

collilas A colillas B
 Posteriorment empezamos con los lavados celulares con solucion isotonica de cloruro de
sodio o solucion fisiologica, vamos a colocar en cada uno de los tubos cantidad necesaria de
solucion fisiologica

solucion fisiologica

Colocamos ambos tubos en la centrifuga con una velocidad de 1500 a 2000 rpm durante 2
minutos retiramos los tubos y eliminamos el sobrenadante EJEMPLO en el tubo A

Como se puede observar el sobrenadante no es limpido debe tener un color rojiso o rosado
señal que estamos haciendo unos buenos lavados, no es hemolisis, en INMUNOHEMATOLOGIA
NO EXITE EL SOBRENADANTE LIMPIDO. Despues de retirar el sobrenadante se debe
continuar con los lavados por lo menos 2 a 3 veces mas. Este lavado celular se realiza para eliminar
cualquier resto de globulos, proteinas u otras sustancias que puedan interferir en la realizacion de la
prueba de determinacion de grupo sanguineo serico por ello esto es critico es decir que un lavado
insuficiente implica la no validacion de la misma. r
Despues de haber finalizado con los lavados y retirado el ultimo sobrenadante,
encontaremos en el fondo del tubo el paquete globular. De aquí se sacara una alicuota de aprox 100
a 200 microlitros y vamos a realizar una dilucion del 2 al 5% de los globulos lavados A y B en otros
2 tubos rotulados convenientemente con la fecha de cuando se realizo la dilucion.

DILUCIONES DE GR 2 AL 5%
COLORACION ROJO TOMATE

POOLES REALIZADOS EN
FRASCOS RECICLADOS DE
HEMOCLASIFICADORES

Cabe aclarar que estos pooles o diluciones de GR solo duran el terino de la guardia o el
turno despues de este tiempo se deben desechar y realizar uno nuevo cada ves que se reciba la
guardia.