Norma Española

UNE-EN ISO 13843

Marzo 2018

Calidad del agua

Requisitos para el establecimiento de las
características de funcionamiento de los métodos
microbiológicos cuantitativos
(ISO 13843:2017)

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 UNE-EN ISO 13843

Calidad del agua

Requisitos para el establecimiento de las características de funcionamiento de los
métodos microbiológicos cuantitativos
(ISO 13843:2017)

Water quality. Requirements for establishing performance characteristics of quantitative

microbiological methods (ISO 13843:2017).

Qualité de l'eau. Exigences pour l'établissement des caractéristiques de performance des méthodes
microbiologiques quantitatives (ISO 13843:2017).

Esta norma es la versión oficial, en español, de la Norma Europea EN ISO 13843:2017, que
a su vez adopta la Norma Internacional ISO 13843:2017.

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 Índice

Prólogo europeo .................................................................................................................................6

Declaración ...........................................................................................................................................6

Prólogo ...................................................................................................................................................7

0 Introducción ........................................................................................................................8

1 Objeto y campo de aplicación........................................................................................8

2 Normas para consulta ......................................................................................................9

3 Términos y definiciones..................................................................................................9

4 Conceptos básicos .......................................................................................................... 14

4.1 Generalidades .................................................................................................................. 14
4.2 Caracterización ............................................................................................................... 14
4.3 Verificación ....................................................................................................................... 16
4.4 Comparación de métodos ............................................................................................ 17
4.5 Muestras ............................................................................................................................ 17

5 Especificaciones: algunos valores guía ................................................................... 18

6 Diseños para la determinación de las características de

funcionamiento de un método................................................................................... 19
6.1 Consideraciones generales ......................................................................................... 19
6.2 Determinación de la sensibilidad, especificidad, eficiencia,
selectividad y tasas de falsos positivos y de falsos negativos......................... 19
6.2.1 Tipo de muestras a utilizar ......................................................................................... 19
6.2.2 Número de muestras ..................................................................................................... 19
6.2.3 Procedimiento ................................................................................................................. 20
6.2.4 Características de funcionamiento de categoría ................................................. 20
6.2.5 Ejemplo práctico ............................................................................................................. 22
6.3 Determinación del límite superior y consideración del límite
inferior de detección ..................................................................................................... 23
6.3.1 Rango de trabajo ............................................................................................................. 23
6.3.2 Límite superior en relación con la linealidad ...................................................... 23
6.3.3 Tipo y número de muestras a utilizar ..................................................................... 24
6.3.4 Ejemplo práctico ............................................................................................................. 25
6.3.5 Límite inferior de detección ....................................................................................... 26
6.4 Estimación de la precisión: determinación de la repetibilidad y de la
reproducibilidad............................................................................................................. 26
6.4.1 Generalidades .................................................................................................................. 26
6.4.2 Repetibilidad.................................................................................................................... 27
6.4.3 Reproducibilidad intralaboratorio .......................................................................... 29
6.5 Robustez ............................................................................................................................ 31
6.5.1 Generalidades .................................................................................................................. 31
6.5.2 Diseños experimentales para efectos debidos al tiempo y a la
temperatura ..................................................................................................................... 31
6.6 Tasa de recuperación relativa ................................................................................... 32
6.6.1 Generalidades .................................................................................................................. 32
6.6.2 Determinación de la tasa de recuperación relativa ........................................... 33
6.7 Incertidumbre del recuento ....................................................................................... 33
6.7.1 Generalidades .................................................................................................................. 33

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 6.7.2 Diseño experimental para la evaluación de la incertidumbre del
recuento de colonias ..................................................................................................... 34
6.7.3 Ejemplo de incertidumbre individual (o personal) del recuento de
las colonias........................................................................................................................ 34
6.7.4 Ejemplo de incertidumbre intralaboratorio del recuento de las
colonias .............................................................................................................................. 35
6.7.5 Ejemplo de incertidumbre intralaboratorio de lectura de NMP ................... 35

7 Diseños para la verificación de un método por un solo laboratorio ........... 36

7.1 Consideraciones generales ......................................................................................... 36
7.2 Cálculo de la sensibilidad, especificidad, eficiencia, selectividad, tasa
de falsos positivos y tasa de falsos negativos ....................................................... 37
7.2.1 Tipo de muestra a utilizar ........................................................................................... 37
7.2.2 Número de muestras ..................................................................................................... 37
7.2.3 Procedimiento para la confirmación ...................................................................... 37
7.2.4 Características de funcionamiento de categoría ................................................. 37
7.3 Determinación de la repetibilidad ........................................................................... 39
7.4 Incertidumbre del recuento ....................................................................................... 39
7.5 Procedimiento para la verificación por un único laboratorio ....................... 39

Anexo A (Informativo) Modelos matemáticos de variación........................................ 43

Anexo B (Normativo) Evaluación de los límites inferiores ....................................... 53

Anexo C (Normativo) Evaluación del límite superior................................................. 57

Anexo D (normativo) Determinación de la variabilidad operacional en las

condiciones de repetibilidad y de reproducibilidad
intralaboratorio ............................................................................ 58

Anexo E (Normativo) Incertidumbre de recuento ....................................................... 62

Anexo F (Normativo) Determinación de la variabilidad operacional

(reproducibilidad interlaboratorios) en un estudio
colaborativo de funcionamiento ............................................. 64

Anexo G (Informativo) Glosario de los principales símbolos ..................................... 73

Bibliografía ........................................................................................................................................ 75

1 Objeto y campo de aplicación

Este documento trata sobre la caracterización de los métodos microbiológicos. En lo que respecta a
este documento caracterización significa el estudio de parámetros que pueden medirse para describir
el modo en el que los métodos son susceptibles de aplicación en un conjunto de condiciones dado, que
pueden ser descritas como características de funcionamiento. El documento describe procedimientos
para la determinación de características de funcionamiento que pueden utilizarse en la validación o en
la posterior verificación de los métodos.

Este documento pone el énfasis sobre los métodos cuantitativos selectivos y es aplicable a todos los
tipos de agua. Para los métodos que no están basados en el recuento microscópico directo, en el
recuento de colonias o en número más probable, la aplicabilidad de los procedimientos descritos en
este documento debería verificarse en profundidad.

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2 Normas para consulta
En el texto se hace referencia a los siguientes documentos de manera que parte o la totalidad de su
contenido constituyen requisitos de este documento. Para las referencias con fecha, solo se aplica la
edición citada. Para las referencias sin fecha se aplica la última edición (incluida cualquier
modificación de esta).

ISO 17994:2014, Calidad del agua. Requisitos para la comparación de la tasa de recuperación relativa de
microorganismos por dos métodos cuantitativos.

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