Syllabus Inmunologia

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA
RED NACIONAL UNIVERSITARIA

UNIDAD ACADÉMICA DE SANTA CRUZ
BIOQUÍMICA Y FARMACIA
QUINTO SEMESTRE
SYLLABUS DE LA ASIGNATURA DE
INMUNOLOGÍA
Elaborado por:
Dr. Diego Nicolas Sanchez Canedo
Dr. Fernando Sandoval Dorado
Gestión Académica II/2023
1
UNIVERSIDAD DE AQUINO BOLIVIA
UDABOL
Acreditada como PLENA mediante R.M. 288/01
Estimado(a) estudiante:
El Syllabus que ponemos en tus manos es el fruto del trabajo intelectual de tus docentes,
quienes han puesto sus mejores empeños en la planificación de los procesos de
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servirá de guía para que organices mejor tus procesos de aprendizaje y los hagas mucho
más productivos. Esperamos que sepas apreciarlo y cuidarlo.
Aprobado por:
2
SYLLABUS
Asignatura: INMUNOLOGÍA
Código: BCL - 522
Requisito: BCL - 422
Carga Horaria: 100 horas
Horas teóricas 60 horas
Horas Prácticas 40 horas
Créditos: 10
I. OBJETIVOS GENERALES DE LA ASIGNATURA.
Analizar las características, biológicas, fisiológicas y morfológicas de los órganos, células y moléculas
del cuerpo humano, que le permitirán realizar estudios Inmunológicos, mediante la utilización de
técnicas y procedimientos confiables y actualizados, desarrollando habilidades y destrezas para una
correcta determinación e interpretación laboratorial en el diagnóstico clínico.
II. PROGRAMA ANALÍTICO DE LA ASIGNATURA.
UNIDAD I: RESPUESTA INMUNOLÓGICA INESPECÍFICA
TEMA 1: INTRODUCCIÓN
1. Historia de la inmunología
1.1. Inmunidad contra la viruela.
1.2 Vacuna.
1.3. Descubrimiento de elementos que participan en la respuesta inmune
1.3.1. Órganos de la respuesta inmune
1.3.2. Células de la respuesta inmune
1.3.3. Moléculas de la respuesta inmune
1.4. Inmunodiagnóstico.
1.4.1. Reacción anafiláctica.
1.4.2. Síndrome de Inmunodeficiencia Adquirida
1.5. Sistema Inmune
1.6. Respuesta inmunológica de acuerdo a su especificidad.
1.6.1. Respuesta inmune inespecífica.
1.6.2. Respuesta inmune específica.
1.7. Respuesta inmunológica de acuerdo a los componentes involucrados.
1.7.1. Respuesta inmune celular
1.7.2. Respuesta inmune humoral.
1.8. Inmunidad protectora.
1.8.1. Inmunidad activa.
1.8.2. Inmunidad pasiva.
1.9. Factores que afectan la respuesta inmunológica.
1.9.1. Genética.
1.9.2. Edad.
1.9.3. Hormonas.
1.9.4. Nutrición.
1.9.5. Químicos.
1.9.6. Estado nervioso.
TEMA 2: ÓRGANOS DEL SISTEMA INMUNOLÓGICO INESPECÍFICO

2. Introducción
3
2.1. Órganos del Sistema Inmune Inespecífico
2.1.1. Piel.
2.1.2. Mucosa.
2.2. Mecanismos de la respuesta inmunológica inespecífica mediada por órganos:
2.2.1. Barreras físicas
2.2.2. Anexos de la piel y mucosa.
2.2.3. Descamación.
2.2.3. Movimientos mecánicos.
2.2.3.1. Tos
2.2.3.2. Movimiento ciliar.
2.2.3.3. Peristaltismo intestinal.
2.2.3.4. Cierre de orificios naturales.
2.2.3.5. Expulsión de líquidos.
2.3.4. Secreciones.
2.3.4.1. Melanina.
2.3.4.2. Queratina.
2.3.4.3. Lizozima.
2.3.4.4. Lactoferrina.
2.3.4.5. Ácido graso.
2.3.4.6. Ácido láctico.
2.3.4.7. Mucina.
2.3.4.8. Ácido clorhídrico.
2.3.4.9. Amilasa.
2.3.4.10. Lactoperoxidasa.
2.3.5. Flora normal.
TEMA 3: CÉLULAS DEL SISTEMA INMUNOLÓGICO INESPECÍFICO

3.1. Hematopoyesis.
3.1.1. Evolución de la hematopoyesis
3.1.2. Hematopoyesis extramedular
3.1.3. Célula “stem”
3.1.4. Unidad formadora de colonias
3.1.5. Estroma y microambiente hematopoyético
3.1.5.1. Producción de la matriz extracelular
3.1.5.2. Producción de citocinas.
3.1.6. Factores de crecimiento hematopoyéticos
3.1.7. Mantenimiento de la homeostasis en el control de la hematopoyesis
3.2. Principales células de defensa
3.2.1. Basófilos
3.2.1.1. Función.
3.2.1.2. Activación celular
3.2.1.3. Regulación de la producción y maduración
3.2.1.4. Mediadores de la inflamación aguda
3.2.1.5. Clasificación de los mediadores de la inflamación
3.2.1.5.1. Mediadores primarios
3.2.1.5.2. Mediadores secundarios
3.2.1.6. Diferencia entre basofilo y mastocitos
3.2.2. Monocitos
3.2.2.1. Sistema fagocitico mononuclear
3.2.2.2. Función
3.2.2.3. Integración de la respuesta inmunológica inespecífica-específica
3.2.3. Neutrófilos
3.2.3.1. Gránulos primarios
3.2.3.2. Gránulos secundarios
3.2.3.3. Gránulos terciarios
3.2.3.4. Función
4
3.2.3.5. Diferencia entre neutrófilos y macrófagos
3.2.4. Eosinófilos
3.2.4.1. Gránulaciones citoplasmáticas.
3.2.4.2. Función
3.2.4.3. Acción antiparasitaria
3.2.5. Linfocitos
3.2.5.1. Función.
3.2.5.2. Perforinas.
3.2.5.3. Condroitin Sulfato A
3.2.5.4. Citotoxicidad mediada por células NK.
3.3. Cuadro de la hematopoyesis celular
TEMA 4: MOLÉCULAS DEL SISTEMA INMUNOLÓGICO INESPECÍFICO

4. Moléculas que integran el sistema inmune inespecífico
4.1. Proteinas de Fase Aguda
4.1.1. Proteína “C” Reactiva
4.1.2. Alfa 1 Antitripsina
4.1.3. Alfa 2 Macroglobulina
4.1.4. Fibrinógeno
4.1.5. Ceruloplasmina
4.1.6. Proteina Amiloide A Sérica
4.1.7.Haptoglobulina
4.1.8. Proteina Fijadora de Manosa
4.2. Sistema Complemento
4.2.1. Componentes y nomenclaturas del sistema complemento.
4.2.1.1. Activación del Sistema Complemento Vía Clásica.
4.2.1.2. Activación del Sistema Complemento Vía Alterna.
4.2.1.3. Activación del Sistema Complemento Vía de las Lectinas
4.2.2. El Complejo de Ataque a la Membrana.
4.2.3. Consecuencias biológicas de la activación del complemento
4.2.3.1. Inflamación
4.2.3.1.1. Carácter Protector
4.2.3.1.2. Carácter Perjudicial
4.2.3.1.3. Elementos que intervienen en la inflamación
4.2.3.1.4. Fases de la inflamación
4.2.3.1.4.1. Inflamación Aguda
4.2.3.1.4.2. Inflamación Crónica
4.2.3.1.5. Mediadores químicos de la inflamación
4.2.3.1.6. Evolución de la inflamación aguda
4.2.3.1.7. Características histológicas de la inflamación crónica
4.3. Interferón
4.3.1. Interferon Alfa
4.3.2. Interferon Beta
4.3.3. Interferón Gamma
4.4. Transferrina
UNIDAD II: RESPUESTA INMUNOLÓGICA ESPECÍFICA
5
TEMA 5: ÓRGANOS Y TEJIDOS DEL SISTEMA INMUNOLÓGICO ESPECÍFICO

5.1. Órganos de la respuesta inmunológica específica.
5.2. Órganos Linfoides Primarios
5.2.1. Médula Ósea.
5.2.1.1. Factores Estimuladores de Colonias en la Médula Ósea
5.2.2. Timo
5.2.2.1. Corteza
5.2.2.2. Médula
5.2.2.3. Hormonas Tímicas

5.2.2.3.1. Timopoyetina
5.2.2.3.2. Factor Humoral del Timo
5.2.2.3.3. Timosinas
5.2.2.3.4. Factor Tímico del Suero
5.3. Órganos Linfoides Secundarios
5.3.1. Ganglios Linfáticos
5.3.1. Estructura Ganglios Linfáticos
5.3.1.1. Corteza Paracortical
5.3.1.2. Médula
5.3.2. Bazo
5.3.2.1. Estructura del Bazo
5.3.2.1.1. Pulpa Roja
5.3.2.1.2. Pulpa Blanca
5.3.2.2. Función Hematológica
5.3.2.3. Función Inmunológica
5.3.3. Tejido Linfoide Asociados a las Mucosas (MALT)
5.3.3.1. Estructura
5.3.3.2. Función Inmunológica
5.3.3.3. Recirculación Linfocitaria.
TEMA 6: CÉLULAS DEL SISTEMA INMULÓGICO ESPECÍFICO

6. Linfocitos
6.1. Linfocitos T
6.1.1. Oncogénesis de los Linfocitos T
6.1.1.1. Maduración de los Linfocitos en el Timo
6.1.1.2. Selección Tímica positiva y negativa
6.1.1.3. Expansión clonal versus anergia clonal
6.1.2. Funciones de los Linfocitos T
6.1.2.1. Linfocitos TCD+4. Helper
6.1.2.2. Linfocitos TCD+8 Citotóxicos.
6.1.2.2.1. Citotoxicidad mediada por linfocitos T cititóxicos (CTL).
6.1.2.3. Linfocitos TCD+8 Supresores
6.1.3. Recirculación linfocitaria
6.1.4. Moléculas de superficie de los linfocitos T
6.1.4.1. Estructura del TCR
6.1.4.2. Organización y reordenación de los genes del TCR
6.1.4.3. El complejo receptor de las células T (TCR-CD3)
6.1.4.4. Moléculas accesorias de membrana: los correceptores CD4 y CD8
6.1.4.5. La interacción ternaria TCR-antígeno-MHC
6.2. Linfocitos B
6.2.1. Oncogénesis de los Linfocitos B
6.2.2. Maduración de los Linfocitos en Órganos Secundarios
6.2.3. Funciones de los Linfocitos B
6.2.4. Fases de la activación, proliferación y diferenciación de los linfocitos B
6.2.5. La respuesta humoral in vivo
6.2.6. Cinética: respuesta primaria y secundaria
6.2.7. Memoria Inmunológica
6
6.3. Regulación de la Respuesta Inmune

6.3.1. Regulación por el antígeno
6.3.2. Retrorregulación por anticuerpos
6.3.3. Regulación por complejos inmunes
6.3.4. Regulación por citoquinas
6.3.5. Regulación por células T
6.3.6. Redes idiotípicas
6.3.7. Posibilidad de circuitos regulatorios inmunoneuroendocrinos
6.3.8. Tolerancia inmunológica
TEMA 7: INMUNOGLOBULINAS
7.1. Respuesta Inmunológica Específica mediada por moléculas
7.2. Inmunoglobulinas
7.3. Estructura y función de los dominios variables y constantes
7.4. Clasificación Isotipos de inmunoglobulinas
7.4.1. Inmunoglobulina G
7.4.1.1. Subtipos IgG: IgG1, IgG2, IgG3 e IgG4
7.4.2. Inmunoglobulina A
7.4.2.1. Subtipos IgA: IgA1 e IgA2
7.4.3. Inmunoglobulina M
7.4.3.1. Subtipos IgG: IgM1 e IgM2
7.4.4. Inmunoglobulina D
7.4.5. Inmunoglobulina E
7.5. El receptor de membrana de los linfocitos B
7.6. Interacción Antígeno- Anticuerpo
7.7. Citotoxicidad celular dependiente de anticuerpos (ADCC).
UNIDAD III: LAS RESPUESTAS INMUNITARIAS Y SUS MECANISMOS EFECTORES
TEMA 8: INTERACCIONES ANTÍGENO- ANTICUERPO

8.1. Propiedades de los antígenos.
8.2. Adyuvantes.
8.3. Epitopos
8.4. Haptenos
8.5. Mitógenos y superantígenos.
8.6. Fuerzas físicas implicadas en la unión antígeno-anticuerpo.
8.6.1. Afinidad
8.6.2. Avidez.
8.7. Cinética de las reacciones antígeno-anticuerpo.
8.8. Procesamiento y Presentación del Antígeno
8.8.1. Restricción de las células T por el haplotipo MHC propio
8.8.2. Papel de las células presentadoras de antígeno
8.8.3. Rutas de procesamiento del antígeno
8.8.4. Presentación del antígeno
TEMA 9: MOLECULAS EFECTORAS LEUCOCITARIAS

9.1. Complejo Principal de Histocompatibilidad (MHC)
9.1.1. Organización general y genética del complejo MHC
9.1.2.1. Moléculas y genes MHC de clase I
9.1.2.2. Moléculas y genes MHC de clase II
9.1.2.3. Moléculas y genes MHC de clase III
9.1.3. Polimorfismo de las clases MHC-I MHC-II y MHC-III
9.1.4. Expresión de las moléculas MHC
9.1.5. Influencia del MHC sobre la respuesta inmune
9.2. Citoquinas
9.2.1. Propiedades generales de las citoquinas
9.2.2. Estructura y función de las principales citoquinas
7
9.2.3. Receptores y antagonistas de citoquinas

9.2.4. Citoquinas implicadas en la inmunidad natural
9.2.5. Regulación cruzada de las citoquinas secretadas por las subpoblaciones Th1 y Th2
9.2.6. Quimiocinas
TEMA 10: INMUNIDAD FRENTE A INFECCIONES

10.1. Estrategias enfrentadas entre hospedador y parásitos
10.2. Respuesta inmune frente a virus
10.3. Respuesta inmune frente a bacterias
10.4. Respuesta inmune frente a protozoos
10.5. Respuesta inmune frente a helmintos
10.6. Mecanismos de evasión de los microorganismos frente al sistema inmune
TEMA 11: PROFILAXIS Y VACUNACIÓN
11.1. Inmunización pasiva y activa
11.2. Vacunas de microorganismos vivos atenuados
11.3. Vacunas de microorganismos inactivados
11.4. Vacunas subunitarias (macromoléculas purificadas)
11.5. Vacunas recombinantes
11.6. Vacunas anti-idiotípicas
11.7. Papel de los adyuvantes
TEMA 12: SEMINARIO TALLER: ALTERACIONES DEL SISTEMA INMUNE

12.1. Reacciones de hipersensibilidad
12.1.1. Hipersensibilidad Tipo I: Inmediata (o atópica, o anafiláctica)
12.1.2. Hipersensibilidad Tipo II: Dependiente de anticuerpos
12.1.3. Hipersensibilidad Tipo III: Complejo inmune
12.1.4. Hipersensibilidad Tipo IV: Mediada por células (Hipersensitividad Tardía)
12.2. Inmunodeficiencias
12.2.1. Causas, incidencia y factores de riesgo
12.2.2. Síntomas
12.2.3. Signos y exámenes
12.2.4. Tratamiento
12.2.5. Expectativas (pronóstico)
12.2.6. Complicaciones
12.2.7. Situaciones que requieren asistencia médica
12.2.8. Prevención Volver al comienzo
12.3. Autoinmunidad
12.3.1. Criterios que definen las enfermedades autoinmunes
12.3.1.1. Factores genéticos y enfermedades autoinmunes
12.3.1.2. Factores ambientales y enfermedades autoinmunes
12.3.1.3. Agentes infecciosos
12.3.1.4. Sustancias químicas.
12.3.1.5. Factores hormonales
12.3.2. Tipos de enfermedades autoinmunes
12.3.2.1. Autoanticuerpos y enfermedades autoinmunes sistémicas
12.3.2.2. Enfermedades autoinmunes específicas de órgano
12.3.3. Mecanismos patogénicos en las enfermedades autoinmunes
12.4. Transplante y rechazo
12.4.1. Ética y Transplantes
12.4.2. Definición e historia de los transplantes
12.4.3. Historia de los problemas éticos
12.4.4. Muerte cerebral
12.4.5. Técnica de transplante
12.4.6. Rechazo
12.4.6.1. Rechazo hiperagudo
12.4.6.2. Rechazo agudo
12.4.6.3. Rechazo tardío o crónico
8
12.4.7. Inmunosupresión
12.4.7.1. Azatioprina
12.4.7.2. Corticoides
12.4.7.3. Ciclosporina A
12.4.7.4. Preparaciones antilinfociticas
12.4.8. Consentimiento para la donación
12.4.9. Escasez de órganos
12.5. Inmunidad frente a tumores

12.5.1. Malignización celular y sistema inmune
12.5.2. Mecanismos efectores antitumorales
12.5.2.1. Acción antitumoral linfocitos T
12.5.2.2. Acción antitumoral de células NK
12.5.2.3. Acción antitumoral de macrófagos
12.5.2.4. Acción antitumoral de mediadores solubles de la respuesta inmune
12.5.3. Antígenos tumorales
12.5.3.1. Antígenos específicos de tumores
12.5.3.2. Antígenos asociados a tumores
12.5.3.2.1. Antígenos de origen viral.
12.5.3.2.2. Antígenos procedentes de reactivación de genes embrionarios.
12.5.3.2.3. Proteinas oncogénicas
12.5.3.2.4. Idiotipos
12.5.4. Mecanismos de escape de la respuesta inmunológica
12.5.4.1. Ignorancia de los antígenos tumorales
12.5.4.2. Baja inmunogenicidad
12.5.4.3. Supresión de la respuesta inmune inducida por el tumror
12.5.4.4. Inducción de tolerancia por parte del tumor
12.5.4.5. Sobreesxpresión de FASL por las células tumorales
12.5.5. Aspectos inmunológicos de las metastasis
12.5.6. Inmunologia y diagnóstico tumoral
12.5.6.1. El diagnóstico precoz de tumores es de espacial importancia y en ello puede contribuir
la inmunología
12.5.6.2. Estudio de los productos específicos de tumor
12.5.7. Localización anatómica de tumores y metástasis.
12.5.8. Inmunoterapia
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II. ACTIVIDADES A REALIZAR DIRECTAMENTE EN LA COMUNIDAD.

i. Tipo de asignatura para el trabajo social.
Inmunología 5to semestre
ii. Resumen de los resultados del diagnóstico realizado para la detección de los
problemas a resolver en la comunidad.
La enfermedad de Chagas es una infección parasitaria producida por el Trypanosoma cruzi. El
diagnóstico de laboratorio depende del estadio en el cual se encuentre la enfermedad. Durante la
fase aguda, el diagnóstico se efectúa directamente mediante la comprobación de los parásitos en
sangre o por métodos inmunológicos que detecten anticuerpos específicos. Durante la fase crónica,
se pueden usar métodos inmunológicos como el test de cromatografía rápida, reacción de
aglutinación de látex, hemoaglutinación, aglutinación directa, inmunofluorescencia y últimamente
ELISA. En la población de 109 estudiantes de la carrera de Bioquímica y Farmacia de la UDABOL
sede Santa Cruz de la Sierra se ha identificado una prevalencia del 8.3% en personas
aparentemente sanas portadoras de Chagas mediante test Inmunológico de HAI Chagas. Las
principales complicaciones de esta enfermedad están relacionadas con cardiopatías y problemas
gastrointestinales los cuales disminuyen la calidad de vida de las personas al igual que su
rendimiento laboral.
iii. Nombre del proyecto al que tributa la asignatura.

“PREVALENCIA DE CHAGAS EN ALUMNOS DE 5° SEMESTRE DE LA CARRERA DE
BIOQUÍMICA Y FARMACIA DE LA UDABOL GESTIÓN Y/2016”
iv. Contribución de la asignatura al proyecto.

Se determinará la prevalencia de Chagas en alumnos de 5° semestre de la carrera de Bioquímica y
Farmacia de la Udabol gestión II/2023 mediante técnica de Inmuno Hemaglutinación Indirecta, la
participación activa de los alumnos no solo será como pacientes sino también en la realización
metodológica de dicha identificación autofinanciada.
v. Actividades a realizar durante el semestre para la implementación del proyecto

Trabajo a realizar por los Localidad, aula o Incidencia social Fecha.
estudiantes laboratorio
Organización de actividades A definir 7 de
agosto de
2023
Elaboración de material Aula Capacitación de los actores 10 de

didáctico audiovisual informativo involucrados. septiembre
de 2023
Charlas de Orientación en salud Aula Concienciación sobre los

sobre la enfermedad de chagas cuidados a tener sobre las 27 de
repercusiones que conlleva el ser septiembre
un portador y manifestar la de 2023
enfermedad de chagas
Toma de muestras y análisis Laboratorios Udabol 15 de
octubre de
2023
Entrega y Orientación sobre Aula Actores involucrados en el

resultados positivos de proceso orientación sobre 30 de
laboratorio para chagas y resultados positivos a los noviembre
aplicación de encuestas pre exámenes de laboratorio de 2023
elaboradas
10
IV. EVALUACIÓN DE LA ASIGNATURA.
● PROCESUAL O FORMATIVA.
A lo largo del semestre se realizarán 2 tipos de actividades formativas:
Las primeras serán en aula, que consisten en clases teóricas, exposiciones, repasos cortos, trabajos
grupales. Las Brigadas Solidarias UDABOL, tendrán puntaje de evaluación final en la parte práctica
de laboratorio antes, durante y después de los exámenes laboratoriales para la identificación de
presencia de anticuerpos anti-Trypanosoma cruzi.
Las segundas serán actividades de “aula abierta”. Las Brigadas Solidarias UDABOL tendrán
puntuación procesual en la parte teórica, referente a su preparación y desempeño durante el proceso
de elaboración y orientación sobre la enfermedad de chagas
ACTIVIDAD PARÁMETROS PONDERACIÓN FECHA

EVALUATIVA
Preguntas orales Conocimiento del tema. 20 puntos En todas las clases
Originalidad 20 puntos prácticas de Laboratorio
TOTAL 40 puntos
Preguntas escritas Conocimiento del tema. 20 puntos Todas las semanas de
Originalidad 20 puntos todo lo avanzado
TOTAL 40 puntos
Presentación y defensa Conocimiento del tema. 20 puntos Cada tres temas
de work paper Originalidad 20 puntos concluidos
TOTAL 40 puntos
Presentación y defensa Presentación 10.Puntos Cada tres temas
de los GIP Originalidad de los conceptos. 10 Puntos concluidos
Exactitud de los conocimientos 10 Puntos
Destreza en la práctica 10 Puntos
TOTAL 40 Puntos
Examen final de Defensa 10.Puntos Dos semanas antes del
Laboratorio Originalidad de los conceptos. 10 Puntos examen final teórico
Exactitud de los conocimientos 10 Puntos
Destreza en la práctica 10 Puntos
TOTAL 40 Puntos
El trabajo, la participación y el seguimiento realizado a estos dos tipos de actividades se tomarán

como evaluación procesual calificándola entre 0 y 50 puntos independientemente de la cantidad de
actividades realizadas por cada alumno.
La nota procesual o formativa equivale al 40% de la nota de la asignatura.
● DE RESULTADOS DE LOS PROCESOS DE APRENDIZAJE O SUMATIVA (examen

parcial o final)
Se realizarán 2 evaluaciones parciales con contenido teórico y práctico sobre 50 puntos cada una. El
examen final consistirá en un examen escrito con un valor de 70 puntos, Defensa Final de Work Paper
10 puntos y el examen práctico de laboratorio con su respectiva defensa es 20 puntos.
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V. BIBLIOGRAFÍA
BIBLIOGRAFÍA BÁSICA
- Abbas A., Lichtman A., Pober J.: Inmunología Celular y Molecular 5ª edición. Ed. McGraw Hill –
Interamericana. España 2004. Signatura Topográfica 616.079 Ab19 c.4
- Rojas W.: Inmunología 13ª edición. Investigaciones biológicas. Colombia 2004. Signatura
Topográfica 616.079 R63
BIBLIOGRAFÍA COMPLEMENTARIA
- Regueiro J.López: Inmunología, Biología y Patología del Sistema Inmune Editorial Panamericana.
1996
- Russell T.: Inmunología 2ª edición. 1999
12
VI. PLAN CALENDARIO
SEMANA FECHA Nº DE LA TEMARIO OBSERVACIONES

UNIDAD
07 al 12 de 1 Introducción a la Inmunologia Elaboración de glosario
agosto 1. Historia de la inmunología con los conceptos
1 1.2 Vacuna. básicos utilizados en
1.3. Descubrimiento de elementos que inmunología
participan en la respuesta inmune
1.4. Inmunodiagnóstico.
1.5. Sistema Inmune
1.6. Respuesta inmunológica de acuerdo a
su especificidad.
1.7. Respuesta inmunológica de acuerdo a
los componentes involucrados.
1.8. Factores que afectan la respuesta
inmunológica.
Órganos del sistema inmunológico

específico
2. Introducción
2.1. Órganos del Sistema Inmune
2 14 al 19 de 2 Inespecífico Elaboración de atlas de
agosto 2.2. Mecanismos de la respuesta de hematopoyesis.
inmunológica inespecífica mediada por
órganos:
Expulsión de líquidos.
2.3. Secreciones.
Lactoperoxidasa.
2.4. Flora normal.
Células del sistema inmunológico

Observación microscópica
específico
y reconocimiento de las
células del sistema
3 21 al 26 de 3 3.1. Hematopoyesis.
inmune
agosto 3.2. Principales células de defensa
3.3. Cuadro de la hematopoyesis
celular
Moléculas del sistema inmunológico
específico
4. Moléculas que integran el

sistema inmune inespecífico
4 28 al 2 de 4 4.1. Proteínas de Fase Aguda
septiembre 4.2. Sistema Complemento
4.3. Interferón
4.4. Transferrina
13
Órganos y Tejidos del sistema

inmunológico específico
5 4 al 9 de 5 5.1. Órganos de la respuesta

septiembre inmunológica específica.
5.2. Órganos Linfoides Primarios
5.3. Órganos Linfoides Secundarios
EVALUACION PRIMER PARCIAL DEL 11 AL 23 DE SEPTIEMBRE

Células del sistema inmunológico
específico
6. Linfocitos
6 18 al 23 de 6 6.1. Linfocitos T
septiembre 6.2. Linfocitos B
6.3. Regulación de la Respuesta
Inmune
Inmunoglobulinas
7.1. Respuesta Inmunológica Específica

mediada por moléculas
7.2. Inmunoglobulinas
7.3. Estructura y función de los dominios
7 25 al 30 de 7 variables y constantes
septiembre 7.4. Clasificación Isotipos de
inmunoglobulinas
7.5. El receptor de membrana de los
linfocitos B
7.6. Interacción Antígeno- Anticuerpo
7.7. Citotoxicidad celular dependiente de
anticuerpos (ADCC).
Interacciones antigeno - anticuerpo
8.1. Propiedades de los antígenos.

8.2. Adyuvantes.
8.3. Epítopos
8.4. Haptenos
8 2 al 7 de 8 8.5. Mitógenos y superantígenos.
octubre 8.6. Fuerzas físicas implicadas en la unión
antígeno-anticuerpo.
8.7.Cinética de las reacciones
antígeno-anticuerpo.
8.8. Procesamiento y Presentación del
Antígeno
Moléculas efectoras Leucocitarias
9 9 al 14 de 9 9.1. Complejo Principal de

octubre Histocompatibilidad (MHC)
9.2. Citoquinas
14
Inmunidad frente infecciones
10.1. Estrategias enfrentadas entre

hospedador y parásitos
10 16 al 21 de 10 10.2. Respuesta inmune frente a virus
octubre 10.3. Respuesta inmune frente a bacterias
10.4. Respuesta inmune frente a protozoos
10.5. Respuesta inmune frente a helmintos
10.6. Mecanismos de evasión de los
microorganismos frente al sistema inmune
SEGUNDO PARCIAL 23 AL 4 DE NOVIEMBRE
Vacunación y profilaxis
11.1. Inmunización pasiva y activa

11.2. Vacunas de microorganismos vivos
atenuados
11.3. Vacunas de microorganismos
inactivados
11 7 al 11 de 11 11.4. Vacunas subunitarias
noviembre (macromoléculas purificadas)
11.5. Vacunas recombinantes
11.6. Vacunas anti-idiotípicas
11.7. Papel de los adyuvantes
Alteraciones del sistema inmune
12.1. Reacciones de hipersensibilidad

12.2. Inmunodeficiencias
12 13 al 30 de 12 12.3. Autoinmunidad
noviembre 12.4. Transplante y rechazo
12.5. Inmunidad frente a tumores
EVALUACIÓN FINAL 4 AL 16 DE DICIEMBRE
15
WORK PAPER # 1
UNIDAD II: TEMA 6

TÍTULO: Aloinmunización a los Antígenos del Sistema Rh
FECHA DE ENTREGA: 10ª semana
PERIODO DE EVALUACIÓN: 17º semana
La incidencia de la isoinmunización materna al Rh, depende de la frecuencia génica del Rh en la población de estudio.
Se estima que aproximadamente de 3% de la población mestiza es RhD negativo. El riesgo para la salud perinatal de
las mujeres Rh negativo, ocurre cuando están embarazadas y su feto es Rh positivo. Así, si no se toman las medidas
de prevención correspondientes, entre 1 y 2% de estas mujeres resultarán isoinmunizadas en la etapa prenatal;
aproximadamente 5-15% presentarán esta alteración, al momento del nacimiento de su bebé, y de 3 a 6% lo harán
después de un aborto. No obstante, la amenaza de aborto rara vez se asocia a la isoinmunización, pues en menos de
10% de los casos se documenta hemorragia fetomaterna significativa. El impacto de la isoinmunización se refleja en
estimaciones de que aproximadamente 25% de los hijos de las mujeres afectadas fallecen en la etapa perinatal.
Sin embargo, se tienen informaciones de que en población caucásica la probabilidad de isoinmunización materna con
fetos Rh incompatibles ocurre entre 9 y 22% de las mujeres en riesgo. A pesar de los serios problemas de subregistro
que existe en los informes hospitalarios, se sabe que la prevalencia de isoinmunización al RhD ha declinado
significativamente, a partir de la introducción de nuevas modalidades de tratamiento en la década de los setenta.
La acción preventiva más importante para evitar la sensibilización materna, consiste en:
- Detectar la incompatibilidad sanguínea y a la vez identificar el grupo sanguíneo ABO y el RhD
- Identificar la existencia de la isoinmunización mediante la detección de anticuerpos antieritrocitarios irregulares en
el suero materno, con la prueba de la antiglobulina indirecta (Coombs indirecto)
- Aplicar la g-globulina anti-D
A pesar de los beneficios comprobados de la g-globulina anti-D, en nuestro país persiste la isoinmunización de mujeres
Rh negativo por razones socioeconómicas (por el alto costo del producto y la baja disponibilidad en el mercado),
médicas (criterio e indicaciones para su empleo) y biológicas (respuesta inmunológica individual, momento de la
sensibilización, etc.). Con las dosis de 100 mg o 200 mg de g-globulina anti-D, administradas a primigrávidas en riesgo,
el desarrollo de anti-D se notifica en el 0.10% de las mujeres tratadas. Sin embargo, la evidencia señala que las dosis
con mayor costo-efectividad varía entre 200 mg, y 300 mg, pues propicia una reducción significativa en la incidencia de
la isoinmunización a los seis meses posparto y en el siguiente embarazo.
Es una práctica difundida el empleo prenatal de una dosis estándar de g-globulina anti-D (300 mg) en la semana o bien,
el uso de dosis más bajas (100 mg o 250 mg la semana 28 y en la 34 de embarazo, para reducir la tasa de
isoinmunización
16
CUESTIONARIO
1. En la incompatibilidad madre e hijo en el sistema Rh, ¿Qué importancia tiene el grupo sanguineo del padre?
Ejemplifique.
2. ¿Qué tipo de daños se producen en el bebe por incompatibilidad Rh? Describa
3. ¿Qué otros grupos sanguineos estan implicados en la incompatibilidad sanguinea?
4. ¿A qué grupo sanguineo se le llama donante Universal? ¿Por qué del nombre? Justifique
5. ¿A qué grupo sanguineo se le llama receptor universal? ¿Por qué del nombre? Justifique
6. ¿Cuál es la función de la vacuna Anti Rh?
17
WORK PAPER # 2
UNIDAD II: TEMA 7

TÍTULO: Inmunodeficiencias Adquiridas
PERIODO DE EVALUACIÓN 17ª semana
No hay duda de que la malnutrición es la causa más común de inmunodeficiencia adquirida en todo el mundo,
incluyendo a México. Una dieta pobre en proteínas resulta en involución tímica, linfopenia y disminución de linfocitos en
las zonas T-dependientes del tejido linfoide; los linfocitos obtenidos de sangre periférica de sujetos malnutridos tienen
respuestas disminuidas tanto in vivo como in vitro; en la desnutrición infantil de 3er. grado (kwashiorkor) la inmunidad
celular está disminuida y aunque los niveles séricos de Igs son normales, la formación de anticuerpos también se
encuentra afectada. Las relaciones entre la malnutrición y las infecciones son complejas y de reforzamiento mutuo: un
niño desnutrido se infecta con facilidad, y un niño infectado puede caer en desnutrición rápidamente. Sin embargo, es
realmente poco lo que se sabe al nivel de mecanismos moleculares, del papel de la IgA en la defensa de los aparatos
respiratorios y digestivos en la desnutrición, de los efectos específicos de varios constituyentes esenciales de la dieta, y
de otras cosas más.
El síndrome linfoproliferativo ligado al cromosoma X o enfermedad de Duncan es una reacción poco frecuente a la
infección por virus de Epstein-Barr (EBV); en 3 de los 6 pacientes originalmente descritos, la muerte ocurrió unas
cuantas semanas después del inicio y en la autopsia se encontró proliferación masiva de linfocitos atípicos que
infiltraron los espacios perivasculares de la corteza cerebral, mientras que los otros tres sujetos vivieron tiempos más
prolongados. Se han descrito otras familias afectadas, como la de tres hermanos posiblemente portadores que tuvieron
70 descendientes masculinos, de los que 20 murieron de mononucleosis infecciosa o desarrollaron complicaciones
como hipogammaglobulinemia, linfoma de Burkitt, anemia aplástica. Es posible que los linfocitos B sean los afectados
en este síndrome en vista de que son los que proliferan después de la infección por el virus de EBV. El SIDA se
reconoció como un brote epidémico de neumonía por Pneumocystis carinii, infecciones por citomegalovirus y otros
gérmenes oportunistas, en jóvenes homosexuales masculinos de los Estados Unidos de América e Inglaterra, a
mediados de 1981. En los quince años transcurridos la epidemia ha crecido en importancia y en distribución geográfica;
al primero de enero de 1996 se habían informado 25 746 casos en México. Con el aumento en la experiencia se han
identificado otros grupos de población con alto riesgo de desarrollar SIDA, además de los hombres jóvenes
homosexuales: también se observa en drogadictos especialmente los que usan la vía intravenosa para administrarle la
droga, en hemofílicos y en general todos los receptores de productos sanguíneos. El SIDA también afecta a mujeres
cuyas parejas sexuales tengan el padecimiento, así como niños nacidos de padres con SIDA. En África la enfermedad
tiene características epidemiológicas y clínicas peculiares: es igualmente frecuente en mujeres que en hombres y no
existe preferencia por homosexuales; de hecho no existe duda de que el SIDA puede ocurrir en sujetos heterosexuales,
aunque todavía se acepta que su frecuencia es mayor en hombres homosexuales, lo que probablemente tenga
importancia epidemiológica.
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El SIDA es una inmunodeficiencia que afecta principalmente a los linfocitos ayudantes o promotores, que se identifican
por expresar los antígenos CD3 y CD4, cuyas cifras disminuyen porque progresivamente se destruyen con la evolución
de la enferme dad; los mecanismos de la destrucción de las células CD3/CD4 por la infección viral parecen ser
múltiples:
- Por efecto citopático directo

- Por formación de sincicios
- Por citotoxicidad celular dependiente de anticuerpos de las células infectadas en un intento de eliminar la infección.
- Por apoptosis mediada por mecanismos no bien definidos por productos de las células CD8. Como consecuencia de
la destrucción masiva de las células CD4, elementos centrales de la activación de la respuesta inmune, los
individuos infectados van perdiendo progresivamente la capacidad de responder a todo tipo de antígenos, lo que es
relativamente fácil de demostrar clínicamente por medio de pruebas cutáneas con distintos antígenos como
trichophyton, cándida, virus de la parotiditis y otros: además, el bloqueo de la res puesta inmune explica
satisfactoriamente toda la fisiopatología del SIDA, que consiste en dos tipos de complicaciones, ambas igualmente
graves:
-
Infecciones oportunistas, producidas por los gérmenes ya mencionados, a los que deben agregarse el bacilo
tuberculoso y la amiba, que en México ya se han reconocido como oportunistas
Neoplasias malignas, como el sarcoma de Kaposi, linfomas de linfocitos B y otras, que aparecen en uno de cada tres
pacientes con SIDA y que tienen un comportamiento especialmente agresivo: de hecho el sarcoma de Kaposi es 100
veces más frecuente en individuos con SIDA que en la población general.
En 1984 se identificó el agente etiológico del SIDA; se trata de un retrovirus con especial afinidad por linfocitos
ayudantes o pro motores, conocido como VIH (Virus de la Inmunodeficiencia Humana) del que se distinguen dos
subtipos, el 1 y el 2. Las propiedades características de estos retrovirus son tropismo por linfocitos T, su capacidad para
producir células gigantes, una transcriptasa inversa de alto peso molecular que depende de Mg2+, una proteína central
de peso relativamente bajo (24,000 Daltons), cierta homología de sus ácidos nucleicos y ciertos antígenos comunes,
así como un posible origen africano. Este virus se ha identificado no sólo en los tejidos, sino también en la sangre, la
saliva y el semen de pacientes con SIDA y de sujetos seropositivos asintomáticos.
Se calcula que actualmente hay varios millones de personas en todo el mundo infectadas por el VIH, y que del 10 al
30% de estos individuos desarrollarán SIDA en los próximos 5 a 10 años. El cuadro clínico del SIDA es diferente en
distintos países: en los E.U.A., México y Europa se caracteriza por linfadenopatía generalizada, fiebre, pérdida
involuntaria de peso, infecciones respiratorias oportunistas y síntomas de afección cerebral, mientras que en Haití y
Africa prevalecen las manifestaciones gastrointestinales y dermatológicas con gran adelgazamiento y fiebre elevada. La
mayoría de los casos de SIDA, en cualquier localización geográfica, desarrollan neumonía por Pneumocystis carinii,
habitualmente cuando sus células CD3/CD4 se encuentran en niveles inferiores a 200 por microlitro, a la vez que
ocurren otras infecciones oportunistas como candidiasis orofaríngea, criptococosis meníngea y herpes zoster
recurrente. Actualmente se distinguen tres grupos de sujetos infectados con HIV:
● Los asintomáticos, infectados por el VIH y que se identifican por tener anticuerpos específicos dirigidos contra
proteínas virales, o por tener secuencias genómicas del VIH.
● Los que muestran linfadenopatía y fiebre, pero toda vía conservan números normales de linfocitos T CD3/CD4
y que se conocen como pre-SIDA o como el complejo relacionado al SIDA (CRESI) .
● Los que ya tienen inmunodeficiencia franca (células CD3/CD4 en sangre menores de 200/µl), infecciones
oportunistas, síntomas respiratorios o cerebrales y sarcoma de Kaposi u otros tumores malignos, que es el
SIDA.
El padecimiento es, hasta ahora, mortal en el 100% de los casos y en la actualidad sólo existen tratamientos a base de
19
sustancias inhibidoras de la transcriptasa inversa y/o de algunos inhibidores de proteinasas de más reciente
introducción en la terapéutica que, aunque mejoran la cantidad y calidad de vida de los sujetos afectados, no pueden
considerarse todavía como realmente efectivos. En vista de lo anterior se considera que el SIDA es la enfermedad
epidémica más grave que ha ocurrido en todo el mundo en los últimos 50 años. Otro grupo grande de
inmunodeficiencias adquiridas son las iatrogénicas, que resultan de tratamientos con drogas inmunosupresoras en tres
tipos de pacientes:
- Los portadores de neoplasias malignas generalizadas que reciben quimioterapia,

- Los enfermos con procesos autoinmunes como el LED, el síndrome de Goodpasture o la granulomatosis de
Wegener
- Los receptores de trasplantes alogénicos.
En todos estos casos la inmunodeficiencia es un riesgo calculado que corre a cambio de poder usar un tratamiento
efectivo para situaciones clínicas muy graves; por lo tanto, sólo debe hacerse en pacientes hospitalizados en
instituciones con las facilidades necesarias y con personal experimentado en el manejo de lo que eufemísticamente ha
dado en llamarse "el huésped comprometido".
CUESTIONARIO
1. Investigue el origen teórico de la enfermedad del SIDA

2. Mencione y describa las vías de infección del SIDA
3. ¿Cuál es la relación que existe entre VIH y SIDA?
4. ¿Cuál es el mecanismo de acción del VIH en nuestro organismo para que esté estrechamente relacionado con la
muerte?
5. ¿Por qué motivo a la fecha aún no se ha logrado descubrir un tratamiento efectivo contra el SIDA?
6. ¿A qué otras enfermedades está asociado la enfermedad del SIDA? ¿Por qué?
7. ¿En nuestro medio cuáles son las pruebas de laboratorio de escrutinio y confirmatorias para enfermedad del SIDA?
8. ¿En nuestro medio existen instituciones que realicen tratamiento o seguimiento a los pacientes portadores del VIH?
¿Cuáles son?
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WORK PAPER # 3
UNIDAD II: TEMA 11

TÍTULO: Lupus Eritematoso Sistémico
PERIODO DE EVALUACIÓN: 17ª semana
El Lupus Eritematoso Sistémico, también llamado por sus iniciales LES, o simplemente Lupus, es una enfermedad que
origina un amplio espectro de problemas y puede simular diversos procesos en el transcurso del tiempo, en el mismo
paciente. Puede originar erupciones cutáneas, artritis, anemia, convulsiones o problemas psiquiátricos y, a menudo,
afecta a otros órganos internos entre los que se incluyen el riñón, los pulmones y el corazón.
Causas: El LES es una alteración del sistema inmunitario, que es el sistema que, normalmente, protege al organismo
frente a infecciones y cánceres. En el LES, dicho sistema inmunitario es hiperactivo, y se producen importantes
cantidades de anticuerpos anormales que reaccionan con los tejidos del propio paciente. La causa exacta del Lupus es
desconocida, pero juegan un papel importante la herencia, factores del entorno y ciertos cambios hormonales. Así, la
prevalencia del LES varía en los distintos grupos de población, oscilando entre 300 y 400 pacientes por cada 100.000
habitantes. Es más frecuente en ciertos grupos étnicos, especialmente los negros, y más del 90% de los pacientes son
mujeres.
Diagnóstico: A causa de la amplia variedad de síntomas, el diagnóstico de Lupus puede ser difícil, y requiere cierta
perspicacia por parte del médico que ve inicialmente al paciente. Entre las manifestaciones típicas del LES se incluyen:
- Erupción en las mejillas con aspecto de "alas de mariposa".
- Erupción cutánea en las zonas expuestas al sol.
- Úlceras en el paladar y en las fosas nasales.
- Artritis de una o más articulaciones.
- Inflamación de riñón (nefritis).
- Afectación del sistema nervioso, incluyendo convulsiones, alteraciones mentales o accidentes vasculares cerebrales
(ictus).
- Pueden verse fiebre, adelgazamiento, pérdida del cabello, problemas circulatorios en los dedos de las manos y de
los pies, dolor en el pecho al andar o con inspiración profunda o dolor abdominal.
Pruebas de laboratorio: son determinantes para establecer el diagnóstico de LES, y se pueden encontrar una serie de
alteraciones juntas o por separado:
- Pancitopenia
- Anomalías en análisis de orina.
- Disminución de las proteínas del complemento (un sistema de proteínas del plasma sanguíneo que forma parte del
sistema inmunitario).
- Presencia de anticuerpos que no se encuentran en las personas sanas. En especial, los anticuerpos antinucleares
(ANA) son casi siempre positivos en el LES.
- A veces el diagnóstico exacto se retrasa, porque la enfermedad puede evolucionar gradualmente, simulando a su
vez otras enfermedades.
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Tratamiento: El tratamiento del LES depende de las manifestaciones clínicas y de la actividad de la enfermedad en
cada momento. Un diagnóstico precoz y preciso, el mejor conocimiento de las anomalías inmunológicas en el LES y
diversos ensayos terapéuticos, han contribuido a mejorar el tratamiento de los pacientes con Lupus. Las revisiones
médicas periódicas y los controles analíticos son importantes para monitorizar el LES. El tratamiento medicamentoso
debe individualizarse para cada paciente, dependiendo de sus problemas particulares y de la gravedad de su
enfermedad.
Cuando solo existe una discreta inflamación articular, puede ser suficiente el empleo de los llamados
antiinflamatorios no esteroideos. Los fármacos más importantes en el tratamiento del LES son los corticoesteroides,
empleados adecuadamente y bajo un estrecho control del médico o el reumatólogo.
Los medicamentos antipalúdicos (empleados contra la malaria o paludismo) como la Hidroxicloroquina o Difosfato de
Cloroquina, reducen la actividad del LES y están especialmente indicados en las manifestaciones cutáneas y
articulares.
El LES grave puede requerir tratamiento con drogas inmunosupresoras como Azatioprina y Ciclofosfamida.
A menudo la enfermedad pasa por períodos quiescentes o de escasa o nula actividad, durante los cuales puede
reducirse, o incluso suspenderse, la medicación. El Lupus Eritematoso Sistémico es una enfermedad que origina un
amplio espectro de problemas y, a menudo, afecta a órganos internos entre los que se incluyen el riñón, los pulmones y
el corazón, y que debe ser manejada por un médico especialista en Reumatología o Medicina Interna, con experiencia
en el manejo de las distintas medicaciones disponibles para tratarlo. Aunque en general es crónica, es importante
recordar que el LES es una enfermedad que pasa por períodos de escasa o nula actividad, en los que puede no hacer
falta la medicación y en los que se podrá hacer una vida normal. El Lupus Eritematoso inducido por medicamentos tiene
un mejor pronóstico, ya que mejora al retirar la causa.
CUESTIONARIO
1. ¿Por qué se produce la reacción autoinmune en el lupus eritematoso sistémico?

2. ¿Cómo se realiza el inmunodiagnóstico del LES?
3. ¿Qué relación tienen las siguientes pruebas de laboratorio en las personas portadoras del LES:
- Factor Antinuclear FAN
- Proteína “C” Reactiva
- C3 y C4
- Anticuerpos Antifosfolipídicos
4. Por qué cree que se utilizan drogas inmunosupresoras en el tratamiento del LES
5. Investigue las principales características de las siguientes enfermedades autoinmunes:
- Enfermedad de Addison
- Dermatomiositis
- Síndrome de Sjogren
- Síndrome de Reiter
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WORK PAPER # 4
UNIDAD III: TEMA 14

TÍTULO: Trasplante de Médula Ósea
El trasplante de médula ósea es un procedimiento quirúrgico para trasplantar médula ósea sana a un paciente cuya
médula ósea no está funcionando apropiadamente. Los problemas en la médula ósea frecuentemente son causados
por un tratamiento de quimioterapia o radioterapia contra el cáncer. Este procedimiento también se realiza para corregir
enfermedades sanguíneas hereditarias. La médula ósea sana puede tomarse de un paciente antes de un tratamiento
de quimioterapia o radioterapia (autoinjerto) o de un donante (aloinjerto).
DESCRIPCIÓN. La médula ósea es un tejido adiposo suave que se encuentra en la parte interior de los huesos, lugar
donde se producen y desarrollan células sanguíneas (glóbulos rojos, plaquetas y glóbulos blancos). Cuando el paciente
desarrolla una enfermedad en las células sanguíneas, en especial tipos de cáncer como leucemia, requiere altas dosis
de quimioterapia para combatir el cáncer; lo cual, sin embargo, destruye también las células sanguíneas normales.
En otros casos en los cuales los trastornos hereditarios o adquiridos provocan una producción anormal de células
sanguíneas, el trasplante de médula ósea sana puede salvar la vida del paciente. La médula trasplantada restaura la
producción de glóbulos blancos, glóbulos rojos y plaquetas. Los pacientes con trasplante de médula ósea generalmente
se tratan en centros especializados y permanecen en una unidad de enfermería especial (unidad de trasplante de
médula ósea: BMT, por sus siglas en inglés) para limitar la exposición a las infecciones.
La médula ósea donada debe ser compatible con el tipo de tejido del paciente. Puede tomarse del paciente o de un
familiar vivo (generalmente un hermano o hermana) o de un donante sin parentesco (que se puede encontrar a través
del programa nacional de donantes de médula ósea). Los donantes se escogen a través de exámenes de sangre
especiales llamados tipificación HLA.
La médula ósea se toma del donante en el quirófano mientras está inconsciente y libre de dolor (bajo anestesia
general). Algunas de las médulas óseas de los donantes se extraen de la parte superior del hueso de la cadera. La
medula ósea se filtra, se trata y se trasplanta inmediatamente o se refrigera y almacena para su uso posterior. El
material de trasplante se transfunde dentro del paciente a través de la vena (vía IV) y desde allí se transporta en forma
natural hacia las cavidades óseas, donde crece rápidamente para reemplazar a la médula ósea vieja.
Por otra parte, con el uso de medicamentos especiales, se puede inducir a los precursores sanguíneos denominados
células madre, para que se muevan de la médula ósea al torrente sanguíneo, de donde pueden luego ser retiradas a
través de un proceso llamado leucaféresis. El paciente es preparado para el trasplante por medio de altas dosis de
quimioterapia y/o radiación (acondicionamiento), lo cual tiene dos propósitos: primero, destruir las células sanguíneas
anormales o el cáncer del paciente y, segundo, inhibir su respuesta inmune contra la médula ósea del donante (rechazo
al injerto).
23
Después del acondicionamiento, el paciente está listo para la infusión de médula ósea, la cual toma de 10 a 20 días
para establecerse por sí misma. Durante este tiempo el paciente requiere apoyo con transfusiones de células
sanguíneas.
INDICACIONES. El trasplante de médula ósea se recomienda para personas con:
- Enfermedad por insuficiencia de la médula ósea causada por:
- Producción anormal de glóbulos rojos, como talasemia o enfermedad de células falciformes
- Tratamientos agresivos contra el cáncer (quimioterapia, radioterapia) en especial para casos de leucemia o linfoma
- Falta de producción normal de células sanguíneas (anemia aplásica)
- Trastornos del sistema inmune (inmunodeficiencia) tales como:
- Neutropenia congénita
- Síndrome de inmunodeficiencia combinada severa
- La cirugía de trasplante de médula ósea no se recomienda para:
- Pacientes con enfermedades cardíacas, renales, pulmonares y hepáticas
- Pacientes con otras enfermedades que pueden limitar la supervivencia
-
RIESGOS. Los riesgos que implica cualquier tipo de procedimiento con anestesia son:
- Reacciones a los medicamentos
- Problemas respiratorios
- La quimioterapia antes del trasplante de médula ósea (acondicionamiento) puede generar toxicidad significativa que
se manifiesta con úlceras bucales, diarrea, daño hepático o daño pulmonar. Mientras la médula ósea se desarrolla,
el paciente presenta un alto riesgo de infección.
- El problema principal con los trasplantes de médula ósea (cuando proviene de un donante y no del paciente) es
enfermedad injerto-contra-huésped
Las células de la médula ósea sana trasplantada pueden atacar a las células huésped del paciente, como si fueran
organismos extraños; en cuyo caso se deben tomar medicamentos que supriman el sistema inmune, lo que también
disminuye la capacidad del cuerpo para luchar contra las infecciones.
Expectativas después de la cirugía. El trasplante de médula ósea prolonga perfectamente la vida de un paciente que, a
no ser por esto, podría morir. Las actividades relativamente normales se pueden reanudar tan pronto como el paciente
se sienta lo suficientemente bien y haya consultado con su médico. Otros problemas de relevancia con relación al
trasplante de médula ósea son los que se presentan en la mayoría de los trasplantes de órganos principales: la
búsqueda de un donante y el costo de la cirugía. El donante es generalmente un hermano con tejido compatible, por lo
tanto, los pacientes con más hermanos tienen más oportunidades de encontrar el donante adecuado.
CONVALECENCIA. El período de hospitalización es de cuatro a seis semanas, tiempo durante el cual el paciente es
aislado y puesto bajo control estricto debido al aumento del riesgo de infección. El paciente requiere de un seguimiento
cuidadoso durante dos o tres meses después de que es dado de alta. El sistema inmune puede tomar de seis meses a
un año para lograr una recuperación completa de este procedimiento.
CUESTIONARIO
1. ¿Qué entendemos por inmunología tumoral?

2. ¿Por qué es importante la evaluación inmunología en los trasplantes de órganos?
3. ¿Cuáles son los riesgos inmunológicos qué puede suceder en un paciente al que se le realiza el trasplante de
médula?
4. ¿Cuáles son los requisitos que debe cumplir una persona para ser donante de médula ósea?
5. ¿De qué lugar de nuestro cuerpo se extrae la médula ósea para poder realizar el trasplante?
24
WORK PAPER # 5
UNIDAD III: TEMA 14

TÍTULO: Origen del Cáncer
Tabaquismo, alcoholismo y malos hábitos alimentarios se ocultan tras la máscara de una de las enfermedades más
temidas e investigadas. Qué hay de cierto en las tradiciones del saber popular. La angustia que acompaña al
diagnóstico de cáncer suele conectarse con la obligación de afrontar el combate con un enemigo misterioso. El
desconocimiento absoluto del enemigo y lo que es aún peor, el conocimiento erróneo o desactualizado transmitido por
el saber popular atenta contra la posibilidad de librar la batalla en igualdad de condiciones. Inclusive, en una buena
parte de los casos de cáncer, puede anular oportunidades ciertas de triunfo.
Hasta hace unas pocas décadas, los procesos que llevaban a la aparición y desarrollo de un tumor eran poco
comprendidos. Hoy se sabe que el cáncer engloba a un grupo de enfermedades bastante variado, pero
sorprendentemente similares cuando se analizan las alteraciones moleculares y celulares que las provocan. Con
frecuencia, los agentes que causan cáncer “denominados carcinógenos” llegan al aire que respiramos, en la dieta que
consumimos y bajo la forma de radiaciones. Pero la naturaleza de la exposición a estos agentes es lenta y sostenida,
como la gota que horada la piedra. Aunque pocos lo imaginen, los casos de cáncer relacionados con el tabaquismo, el
alcoholismo y los hábitos dietéticos perjudiciales, suman en conjunto más del 70% del total.
De una manera simple, puede decirse que los carcinógenos que se respiran explican los casos de cáncer pulmonar y
vías respiratorias y, en menor medida, del aparato urinario. Se conoce que el alcoholismo está relacionado con los
cánceres de la cavidad oral y el esófago -en especial cuando se combina con el hábito de fumar, además del cáncer de
hígado.
Cuando los carcinógenos llegan al organismo con la dieta, se asocia principalmente con cáncer de intestino grueso y
estómago, entre otros. Las variantes más comunes de cáncer en órganos que dependen de hormonas, como la
glándula mamaria en la mujer o la próstata en el hombre, parecen surgir de ciertos hábitos dietéticos particulares
sumados al estímulo hormonal prolongado y excesivo.
Una proporción bastante menor de cánceres guarda relación con la exposición laboral a agentes dañinos, las
radiaciones ultravioletas contenidas en la luz solar o ciertos agentes infecciosos. Entre estos últimos, el virus del
papiloma encabeza la lista, como el causante sobresaliente del cáncer de cuello uterino en la mujer. Los cánceres
asociados de manera estrecha con la herencia están por debajo del 10% del total, reflejando el origen mayormente
ambiental de la enfermedad.
25
Se sabe que las instrucciones genéticas contenidas en el ADN de cada célula pueden dañarse con el envejecimiento.
El cáncer se nos presenta ahora como una enfermedad semejante a tantas otras, donde ciertos agentes agreden al
organismo, en este caso fomentando los daños del ADN. Los carcinógenos actúan silenciosamente, escondidos en
nuestros hábitos de toda la vida, y el elemento agredido son los genes de las células más expuestas.
Estas células dañadas, portadoras ahora de mensajes genéticos equivocados, tienden a desconocer las reglas que el
organismo les impone, crecen sin control y pueden diseminarse por todo el cuerpo. Una vez que el cáncer se ha
desatado, el alejamiento de los factores nocivos o el abandono de los hábitos perjudiciales ya no tienen un impacto
relevante en la progresión de la enfermedad. Este es un rasgo muy característico de la enfermedad, que ratifica a la
prevención y la detección temprana como los pilares en la lucha contra el cáncer.
CUESTIONARIO
1. ¿Qué entendemos por inmunología tumoral?

2. ¿Mencione y describa 5 tipos de cáncer más frecuentes en nuestro medio?
3. ¿Qué pruebas inmunológicas existen en nuestros medios con capacidad de identificar la presencia de cáncer?
Describa cada una de ellas.
4. ¿Existe algún tipo de tratamiento ante la presencia del cáncer?
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GUIA DE INVESTIGACIÓN PRÁCTICA - GIP # 1
UNIDAD I
TÍTULO: Microscopia
FECHA DE ENTREGA:
PERIODO DE EVALUACIÓN:
FUNDAMENTO
Aunque, como es lógico, la forma y partes de un microscopio pueden variar de un modelo a otro, existen unas partes
comunes, que aparecen representadas a manera de esquema en el dibujo adjunto. Facilita la observación de células no
distinguibles a la capacidad visual del hombre, indispensable en la investigación y en el trabajo rutinario de laboratorio
clínico.
OBJETIVOS
● Identificar y describir las partes que forman el microscopio, mediante la manipulación objetiva del mismo
● Conocer las normas básicas del uso y cuidado del microscopio
● Conocer los principios de funcionamiento de los microscopios
● Desarrollar destreza y habilidad en el manejo de microscopio
MATERIAL
Microscopio óptico
Portaobjetos
Paños limpios
Aceite de inmersión
MÉTODOS Y PROCEDIMIENTO
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SISTEMA ÓPTICO
- Ocular: Lente situada cerca del ojo del observador. Amplía la imagen del objetivo.
- Objetivo: Lente situada cerca de la preparación. Amplía la imagen de ésta.
- Condensador: Lente que concentra los rayos luminosos sobre la preparación.
- Diafragma: Regula la cantidad de luz que entra en el condensador.
- Foco: Dirige los rayos luminosos hacia el condensador.
SISTEMA MECÁNICO
- Soporte: Mantiene la parte óptica. Tiene dos partes: el pie o base y el brazo.
- Platina: Lugar donde se deposita la preparación.
- Cabezal: Contiene los sistemas de lentes oculares. Puede ser monocular, binocular.
- Revólver: Contiene los sistemas de lentes objetivos. Permite, al girar, cambiar los objetivos.
- Tornillos de enfoque: Macrométrico que aproxima el enfoque y micrométrico que consigue el enfoque correcto.
-
MANEJO DEL MICROSCOPIO ÓPTICO
1. Colocar el objetivo de menor aumento en posición de empleo y bajar la platina completamente.

2. Colocar la preparación sobre la platina sujetándola con las pinzas metálicas.
3. Comenzar la observación con el objetivo de 4x o colocar el de 10 aumentos (10x) si la preparación es de bacterias.
4. Para realizar el enfoque:
➢ Acercar al máximo la lente del objetivo a la preparación, empleando el tornillo macrométrico. Esto debe hacerse
mirando directamente y no a través del ocular, ya que se corre el riesgo de incrustar el objetivo en la preparación
pudiéndose dañar alguno de ellos o ambos.
➢ Mirando, ahora sí, a través de los oculares, ir separando lentamente el objetivo de la preparación con el
macrométrico y, cuando se observe algo nítido la muestra, girar el micrométrico hasta obtener un enfoque fino.
5. Pasar al siguiente objetivo. La imagen debería estar ya casi enfocada y suele ser suficiente con mover un poco el
micrométrico para lograr el enfoque fino. Si al cambiar de objetivo se perdió por completo la imagen, es preferible
volver a enfocar con el objetivo anterior y repetir la operación desde el paso 3. El objetivo de 40x enfoca a muy
poca distancia de la preparación y por ello es fácil que ocurran dos tipos de percances: incrustarlo en la
preparación si se descuidan las precauciones anteriores y mancharlo con aceite de inmersión si se observa una
preparación que ya se enfocó con el objetivo de inmersión.
6. Empleo del objetivo de inmersión:
➢ Bajar totalmente la platina.
➢ Subir totalmente el condensador para ver claramente el círculo de luz que nos indica la zona que se va a visualizar
y donde habrá que echar el aceite.
➢ Girar el revólver hacia el objetivo de inmersión dejándolo a medio camino entre éste y el de x40.
➢ Colocar una gota mínima de aceite de inmersión sobre el círculo de luz.
➢ Terminar de girar suavemente el revólver hasta la posición del objetivo de inmersión.
➢ Mirando directamente, subir la platina lentamente hasta que la lente toca la gota de aceite.
➢ Enfocar cuidadosamente con el micrométrico. La distancia de trabajo entre el objetivo de inmersión y la
preparación es mínima, aun menor que con el de 40x por lo que el riesgo de accidente es muy grande.
➢ Una vez se haya puesto aceite de inmersión sobre la preparación, ya no se puede volver a usar el objetivo 40x
sobre esa zona, pues se mancharía de aceite. Por tanto, si desea enfocar otro campo, hay que bajar la platina y
repetir la operación desde el paso 3.
➢ Una vez finalizada la observación de la preparación se baja la platina y se coloca el objetivo de menor aumento
girando el revólver. En este momento ya se puede retirar la preparación de la platina. Nunca se debe retirar con el
objetivo de inmersión en posición de observación.
➢ Limpiar el objetivo de inmersión con cuidado empleando un papel especial para óptica. Comprobar también que el
objetivo 40x está perfectamente limpio.
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ENFOQUE DEL MICROSCOPIO
OBJETIVOS DIAFRAGMA CONDENSADOR
4X CERRADO ABAJO
10X
40X SEMIABIERTO AL MEDIO
100 X TOTALMENTE ABIERTO ARRIBA
TIPOS DE MUESTRA
MUESTRAS OBJETIVOS CUBREOBJETOS ACEITE DE INMERSIÓN
FRESCA 4X
10X SI NO
40X
TEÑIDA 4X
10X SOLO CON EL
40X NO OBJETIVO DE 100X
100X
MANTENIMIENTO Y PRECAUCIONES
- Al finalizar el trabajo, hay que dejar puesto el objetivo de menor aumento en posición de observación, asegurarse
de que la parte mecánica de la platina no sobresale del borde de la misma y dejarlo cubierto con su funda.
- Cuando no se está utilizando el microscopio, hay que mantenerlo cubierto con su funda para evitar que se
ensucien y dañen las lentes. Si no se va a usar de forma prolongada, se debe guardar en su caja dentro de un
armario para protegerlo del polvo.
- Nunca hay que tocar las lentes con las manos. Si se ensucian, limpiarlas muy suavemente con un papel de filtro.
- No dejar el portaobjetos puesto sobre la platina si no se está utilizando el microscopio.
- Después de utilizar el objetivo de inmersión, hay que limpiar el aceite que queda en el objetivo con pañuelos
especiales para óptica o con papel de filtro (menos recomendable). En cualquier caso se pasará el papel por la
lente en un solo sentido y con suavidad. Si el aceite ha llegado a secarse y pegarse en el objetivo, hay que
limpiarlo con una mezcla de alcohol-acetona o xilol. No hay que abusar de este tipo de limpieza, porque si se
aplican estos disolventes en exceso se pueden dañar las lentes y su sujeción.
- No forzar nunca los tornillos giratorios del microscopio (macrométrico, micrométrico, platina, revólver y
condensador).
- El cambio de objetivo se hace girando el revólver y dirigiendo siempre la mirada a la preparación para prevenir el
roce de la lente con la muestra. No cambiar nunca de objetivo agarrándolo por el tubo del mismo ni hacerlo
mientras se está observando a través del ocular.
- Mantener seca y limpia la platina del microscopio. Si se derrama sobre ella algún líquido, secarlo con un paño. Si
se mancha de aceite, limpiarla con un paño humedecido en xilol.
- Es conveniente limpiar y revisar siempre los microscopios al finalizar la sesión práctica y, al acabar el curso,
encargar a un técnico un ajuste y revisión general de los mismos.
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RESULTADO
CONCLUSIONES
CUESTIONARIO
1. ¿Qué significa la palabra microscopio?
2. ¿Qué diferencias de uso tiene los diversos tipos de microscopio que existen?
3. Describa para que sirven cada uno de los diferentes objetivos que posee el microscopio óptico
4. ¿Investigue con que tipo de solución se debe limpiar los objetivos? ¿Por qué?
5. ¿Es posible observar al virus del VIH en el microscopio óptico? Justifique por qué
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GUIA DE INVESTIGACIÓN PRÁCTICA - GIP # 2
UNIDAD I
TÍTULO: Bioseguridad
FECHA DE ENTREGA:
FUNDAMENTACIÓN
La bioseguridad es un conjunto de normas, medidas y protocolos que son aplicados en múltiples procedimientos
realizados en investigaciones científicas y trabajos docentes con el objetivo de contribuir a la prevención de
riesgos o infecciones derivadas de la exposición a agentes potencialmente infecciosos o con cargas significativas
de riesgo biológico, químico y/ físicos, como por ejemplo el manejo de residuos especiales, almacenamiento de
reactivos y uso de barreras protectoras entre otros.
OBJETIVOS
● Presentar al estudiante los conceptos básicos de bioseguridad y las normas generales que deben seguirse
para trabajar en el laboratorio de inmunología.
● Presentar las características básicas de los diferentes niveles de contención con que se trabaja en los
laboratorios donde se manipulan muestras biológicas.
MATERIAL
●Etanol
●Hipoclorito de Sodio
●Contenedores de basura con bolsas de color: negro, azul , roja
●Recipiente de plástico resistente para descartar agujas
●Jabón
●Guantes descartables
Riesgos. El inadecuado manejo de los desechos hospitalarios puede causar diversos tipos de daños entre los que
están: Heridas pinchazos, Sensibilización a medicamentos, Infecciones, Intoxicaciones, Alergias, Cáncer u otros. La
exposición a desinfectantes, detergentes, medicamentos y reactivos de laboratorio pueden provocar alergia,
intoxicaciones y sensibilización. El contacto persistente con residuos de antibióticos podría desencadenar resistencia
bacteriana. La exposición persistente a medicamentos citostáticos aunque sea en dosis bajas debe ser considerada
potencialmente peligrosa por la posibilidad de provocar irritación local, alergia y sobre todo cáncer y efectos
mutagénicos y teratogénicos. A través pinchazos con agujas contaminadas con sangre se pueden transmitir varias
enfermedades como: SIDA, Hepatitis B, Hepatitis C, Malaria, Leishmaniasis, Tripanosomiasis, Toxoplasmosis, e
infecciones por Estafilococos aureus y Streptococcus pyogenes.
Normas generales de bioseguridad. La posible contaminación del personal de salud es producida como
consecuencia de cortes y pinchazos por objetos afilados o derrames y salpicaduras de materiales contaminados. Las
normas de protección son procedimientos que disminuyen la exposición a materiales contaminados y que incluyen la
utilización de protecciones o barreras que son de tres tipos:
● Barreras Físicas: Guantes, batas y cualquier otro equipo de protección individual que aísla al trabajador de las
secreciones de los pacientes
● Barreras Químicas: Desinfectantes como hipoclorito de sodio, formaldehído, glutaraldehído, yodo, gluconato de
clorhexidina, etc. que liberan a la piel o a los instrumentos de los contaminantes adquiridos luego de la exposición.
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● Barreras Biológicas: Vacunas, inmunoglobulinas y quimioprofilaxis. Dan protección al personal de salud generando
defensas para evitar el contagio o para combatir infección
Precauciones universales. Las precauciones universales son conductas que deben aplicarse permanentemente con
todo tipo de paciente, independientemente de su enfermedad y que no requieren de ningún cambio por el nivel de
infección del paciente. La exposición puede darse por varias vías: Inhalación, dérmica, digestiva, transcutanea y a
través de la mucosa. Para evitar riesgos se deben aplicar las siguientes conductas:
- Vacunación para Hepatitis B a todo el personal de salud.
- Utilizar batas blancas manga larga, con empuñadura.
- Cuando procese muestras biológicas o entre en contacto con el paciente colocarse siempre guantes
- Después de una extracción sanguínea, encapuchar la aguja con una sola mano para evitar pinchazos.
- En lugares con tendencia a formar aerosoles utilizar barbijos (Pacientes con TB)
- Nunca salir de la instalación hospitalaria o laboratorio con la bata ni guantes puestos
- Lavarse las manos después de haber entrado en contacto con sangre o fluidos corporales, después de retirarse
los guantes y en el cambio de un paciente a otro.
- Cubrir cortes y heridas con apósitos impermeables
- Retirar anillos y otras joyas para evitar heridas y depósito de gérmenes en los mismos
- Colocarse guantes cuando se maneja material infeccioso.
- Desechar los guantes contaminados
- No tocarse los ojos, nariz, y otras mucosas con las manos enguantadas.
- No circular por el establecimiento con las manos enguantadas.
- Una vez terminado el trabajo lavarse las manos con jabón.
- Colocar las agujas y otros objetos afilados en recipientes imperforables
- No pipetear líquidos con la boca
- En el ambiente de trabajo no comer, beber, fumar y tampoco guardar alimentos en dicho lugar.
- No maquillarse dentro los ambientes de laboratorio
Derrames y accidentes. Si se derrama material infectado cubrir con papel absorbente, verter un desinfectante
alrededor de la zona y sobre el material absorbente, dejando actuar 20 minutos. La mezcla de material derramado y el
desinfectante deben limpiarse con papel absorbente y se desechan, finalmente se limpia de nuevo. Durante todo este
proceso utilizar guantes. El desinfectante recomendado es el Hipoclorito de Sodio. En caso de pinchazos, cortes o
contaminación de la piel lavarse con agua y jabón. Si se produce una herida sangrante favorecerá la hemorragia.
Manipulación y evacuación de material y desechos contaminados

- El material reutilizable (pipetas, pinzas, tubos, etc.) deben de colocarse en un recipiente metálico o plástico
imperforable, para luego desinfectarlos por métodos químicos antes de limpiarlos.
- Antes de volver a usar los mandiles es preciso desinfectarlas y lavarlas.
- El material contaminado desechable como jeringas, agujas y otros objetos afilados, se deben poner en un recipiente
imperforable. Este material se desinfectará por métodos químicos.
- La incineración es el método de elección para eliminar desechos y materiales contaminados.
- El entierro de material y desechos es la única posibilidad cuando no se cuenta con un incinerador.
Soluciones antisépticas
- Asepsia. Significa libre de gérmenes o microorganismos.
- Antisepsia. Uso de agentes químico para evitar la infección, inhibiendo el crecimiento de los microorganismos.
- Desinfección. Procedimiento que permite destruir o matar a los gérmenes de la superficie.
Las soluciones antisépticas mas usadas en nuestro medio son las siguientes:
● Alcoholes de 60 a 90º: etílico e isopropílico
● Iodos, del 1 al 3%: acuosos y en tinturas, ejemplo: Lugol
● Iodóforos: Iodopovidona en diferentes concentraciones, por ejemplo: Isodine, Betadine, Yovisol, etc.
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Soluciones desinfectantes
● Desinfección de Alto Nivel (D.A.N.). Elimina a la mayoría de los microorganismos que causan enfermedades:
hongos, bacterias, virus e incluso al agente de la Tuberculosis. Se puede tener una Desinfección de Alto Nivel,
remojando los artículos en un Desinfectante de Alto Nivel (Hipoclorito de Sodio al 1%), por 20 minutos.
● ¿Cómo obtener hipoclorito de sodio al 1%?
El Hipoclorito de Sodio viene de forma comercial con el nombre de Lavandina en una concentración del 5 al 8%. Si
viene al 5% realizar una dilución 1:5, es decir 1 parte de lavandina con 4 partes de agua. Para preparar un litro de
Hipoclorito de Sodio al 1%, añadir a 200ml de lavandina, 800ml de agua.
Esterilización. Este proceso permite eliminar completamente de los objetos, todo microorganismo, bacterias, virus,
hongos y parásitos. La esterilización por Autoclave es el método más efectivo y de menor costo para esterilizar la
mayoría de los objetos y materiales. La esterilización por calor seco se logra por conducción del calor, desde la
superficie externa del artículo hacia las capas internas. Los microorganismos mueren por la quemadura lenta de sus
proteínas.
Desechos en laboratorio. Los desechos son de 2 tipos:

● Desechos Contaminados. Son los contaminados con sangre, pus, orina, heces, etc. Depositar en recipientes
resistentes que tenga en su interior una bolsa plástica color rojo.
● Desechos No Contaminados. papeles, cajas, etc. Depositar en recipientes resistentes que tenga en su interior una
bolsa plástica color negro. Los envases de reactivos y medicamentos serán eliminados de igual forma en
recipientes que contengan una bolsa de color amarillo.
Los desechos contaminados se recogen con doble embolsado. La incineración requiere, instalación especial que
garantice temperaturas alrededor de 1000ºC.
Eliminación de los desechos

● Eliminación de objetos afilados
- Usar guantes para hacerlo adecuadamente
- Colocar los objetos afilados en un recipiente imperforable (Ej.: Botellas de plástico)
- Cuando las ¾ partes estén ocupadas, agregar solución de Hipoclorito de Sodio al 1%, y enterrarla, si no es posible
su incineración.
● Eliminación de desechos líquidos contaminados
Para proceder a la eliminación siempre usar guantes durante su manipulación, posteriormente hay que tratarlos con
Hipoclorito de Sodio al 1% por 20 a 30 minutos.
CONCLUSIONES
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CUESTIONARIO
1.- Indique su concepto de Bioseguridad
2.- En el trabajo de laboratorio : ¿Cuáles son los medios de infección más frecuentes ?
3.- Observa a tu alrededor en laboratorio y describe las condiciones de bioseguridad, realiza sugerencias de ser
necesarias.
4.- Menciona 10 enfermedades que puedes adquirir, si no aplicas correctamente las normas de bioseguridad
5.- Describe la manera correcta para descartar todo el material que utilizaste al hacer una toma de muestra sanguínea
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PROGRAMA DE CONTROL DE CALIDAD

GUÍA DE INVESTIGACIÓN PRÁCTICA - GIP # 3
UNIDAD
TÍTULO: Toma de muestra sanguínea
FECHA DE ENTREGA:
FUNDAMENTACIÓN
Procedimiento para el que se usa una aguja para extraer sangre de una vena; habitualmente, para hacer
pruebas de laboratorio. Una flebotomía también se realiza para remover el exceso de glóbulos rojos de la
sangre, para tratar ciertos trastornos de la sangre. También se llama extracción de sangre y punción
venosa.
OBJETIVOS
● Realizar una correcta flebotomía aplicando las normas establecidas por OMS/OPS
● Describir e identificar materiales y procedimientos utilizados para la toma de muestra , manipulación y envío de
muestras biológicas.
MATERIALES Y EQUIPOS
- Torniquete
- Torundas humedecidas en etanol al 70%
- Jeringas de 5ml
- Guantes descartables
- Frasco de vidrio con Anticoagulante EDTA al 5%
- Gradillas
- Marcador
- Pipeta pasteur
- Micropipeta de 1000 ul
- Aplicadores de madera
- Centrifuga
- Preparación del Paciente. Si el paciente se encuentra en toma de muestra de laboratorio, haga que se siente de
manera que quede colocado paralelamente a la mesa de trabajo donde se hará la extracción de sangre. Ponga el brazo
del paciente sobre la mesa de trabajo apoyándolo en un pequeño cojín dispuesto bajo el codo, con la palma de la mano
vuelta hacia arriba. Si el paciente se encuentra en cama, extienda el brazo del paciente en una posición descansada.
- Puntos para la extracción de sangre. El sitio más adecuado es la vena que se encuentra en el pliegue anterior del
codo, en el punto donde sea más gruesa y fácilmente visible, aprovechando de preferencia, una de las ramas que
forman una “Y”, inmediatamente arriba del lugar donde se juntan. Si fuese necesario se pueden usar los puntos 2,3 ó 4
- Uso de la jeringa. Monte la aguja en la jeringa, sin tocar más que la base de la aguja. Pruebe aguja y jeringa para
cerciorarse de que no está obstruida y la jeringa es hermética. Cubra el extremo de la aguja con su capuchón estéril
hasta que se use.
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- Aplicación del torniquete

- Con la mano derecha coloque firmemente el torniquete alrededor del brazo y sujete los extremos
- Con la mano izquierda tire de un extremo, cruzándolo
- A continuación introduzca este extremo por debajo de la parte principal del torniquete. El torniquete se deberá
ajustar solo lo suficiente para aminorar la corriente sanguínea y dilatar las venas, sin apretarlo tanto que reduzca el
paso de sangre por las arterias
- Pida al paciente que abra si cierre la mano varias veces, para favorecer la dilatación de las venas.
- Con el dedo índice de la mano izquierda palpe la vena en que introducirá la aguja.
- Desinfecte la piel con una pieza de algodón humedecida en tintura de yodo o etanol.
- Tome la jeringa con la mano derecha, colocando la yema del dedo índice sobre la base de la aguja.
- Venoclisis
- Coloque la aguja sobre la vena, con el bisel hacia arriba, introduzca la aguja en el centro de la vena, sin titubeos
● Importante: Nunca se intente puncionar una vena por un lado, nunca se introduzca la aguja con el bisel hacia
abajo.
- Haga entrar la aguja a lo largo de la vena 1cm
- Con la mano izquierda tire hacia atrás el émbolo de la jeringa muy lentamente. Siga tirando el
émbolo hacia atrás hasta haber obtenido la cantidad de sangre que requiera
- Retire el torniquete el torniquete tirando del extremo doblado
- Aplique una pieza seca de algodón sobre la parte donde se encuentra oculta la punta de la aguja.
Saque la aguja con un movimiento rápido por debajo de la pieza de algodón
- Pida al paciente que presione firmemente la pieza de algodón durante 3 minutos, con el brazo
extendido. En la actualidad no se recomienda que se flexione el brazo sobre la pieza del algodón
(a causa del riesgo de que se forme un hematoma)
- Tape la aguja con su respectivo capuchón, aplicando las medidas de Bioseguridad.
- Separe la aguja de la jeringa. Llene el frasco con la muestra de sangre (escurrida por las
paredes) hasta la marca correspondiente. Invierta varias veces el frasco a manera de mezclar el
anticoagulante con la muestra sanguínea. Inmediatamente identificar el frasco con marcador para
vidrio.
- Descartar el material utilizado, como indica las normas de Bioseguridad
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- Principales causas de error en toma de las muestras.

- Empleo de tubos mal lavados o húmedos.
- Jeringas contaminadas, no esteriles
- Error en la identificación del paciente.
- Perforación accidental de la vena
- Anticoagulantes inadecuados o en proporción errónea.
- Extracción excesivamente lenta.
- Agitación excesiva o insuficiente.
- Mala técnica al vaciar la sangre de la Jeringa al tubo receptor
- Llenado insuficiente de los tubos que contienen anticoagulantes.
CONCLUSIONES
CUESTIONARIO
1. ¿Qué procedimiento debe seguirse para los desechos provenientes de la toma de muestra?
2. ¿En qué situaciones se debe rechazar la muestra ?
3. Indique la diferencia entre suero y plasma
4. ¿Cuál es la finalidad del uso del torniquete, en que situaciones no debería de utilizarse?
5. ¿Existen riesgos para el paciente en el acto de la flebotomía, descríbalo?
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UNIDAD I
TÍTULO: Frotis Sanguíneo
FECHA DE ENTREGA:
FUNDAMENTACIÓN.
El frotis sanguíneo es de vital importancia ya que a partir de este se identifican alteraciones morfológicas que nos dan
pautas del posible diagnóstico del paciente.
OBJETIVOS
Realizar un extendido delgado y uniforme para posteriormente teñirlo y poder apreciar sus constituyentes
MATERIAL
- Portaobjetos desengrasados limpios
- Cubreobjetos
- Lápiz
1. Depositar en el portaobjeto (próximo a un extremo) 15µl de sangre anticoagulada, puede también utilizarse la primer
gota de sangre directamente de la jeringa
2. Sujetar firmemente el portaobjeto
3. Aplicar el borde del cubreobjeto al portaobjeto, dejando que la gota de sangre se difunda por el área de contacto.
4. Con un ángulo de aproximadamente 45º se desplaza el cubreobjeto sobre la superficie del portaobjeto con un
movimiento uniforme sin titubear.
5. Dejar secar
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RESULTADO
CONCLUSIONES
CUESTIONARIO
1. Investigue en qué proporción se utilizan los diferentes tipos de anticoagulantes en laboratorio

2. ¿Cuáles son las desventajas de utilizar un frotis mal realizado?
3. En grupo de clase analice y describe si cumple con todas las condiciones de Bioseguridad que debe contar el
ambiente de laboratorio
4. ¿Describa qué detalles de importancia se pueden investigar en los hematíes, leucocitos y trombocitos en
un frotis sanguíneo?
5. ¿Existe diferencia en el frotis sanguíneo realizado con sangre con anticoagulante y otro sin
anticoagulante?
6. Dibuje los pasos correctos para realizar un buen frotis sanguíneo
39
UNIDAD I:
TÍTULO: Tinción y observación de células del sistema inmune
FECHA DE ENTREGA:
LEUCOCITOS: Los glóbulos blancos son células que están principalmente en la sangre y circulan por ella con la
función de combatir las infecciones o cuerpos extraños; pero en ocasiones pueden atacar los tejidos normales del
propio cuerpo. Es una parte de las defensas inmunitarias del cuerpo humano. Se llaman glóbulos blancos ya que éste
color es el de su aspecto al microscopio. Hay diferentes grupos de glóbulos blancos: los llamados polimorfonucleares
(neutrófilos, eosinófilos y los basófilos) y los mononucleares (los linfocitos y los monocitos).
NEUTRÓFILOS: Son células redondeadas, de tamaño entre 12 y 14 um. Su núcleo está segmentado en 2 a 5 lóbulos,
unidos por unos finos puentes cromatínicos. El citoplasma contiene numerosos gránulos neutrófilos que se tiñen de
color marrón con las coloraciones panópticas habituales, así como cierto número de gránulos primarios o azurófilos
dificilmente visibles al quedar enmascarados por los neutrófilos. Este leucocito polimorfonuclear está encargado de
formar la primera defensa del cuerpo contra las bacterias dañinas. Los neutrófilos se presentan con movimientos
activos ameboideos, deslizándose por la pared de los capilares entre las adyacentes. Son trascendentales en el
proceso de destrucción de bacterias y otros agentes infecciosos por fagocitosis. Los neutrófilos fagocitan también
restos de células muertas. Además, junto con otros glóbulos blancos, son guiados hasta los puntos de infección por
sustancias químicas liberadas por los tejidos infectados. Componen entre un 60% y un 70% de los glóbulos blancos en
la sangre.
EOSINÓFILOS: Tienen un tamaño semejante a los neutrófilos, se caracterizan morfológicamente por contener en su
citoplasma gránulos acidófilos. Tienen una forma redondeada, tamaño entre 0.5 y 1.5 μm, ocupan todo el citoplasma de
la célula y se tiñen de color naranja o marrón anaranjado con las coloraciones panópticas. A diferencia de los gránulos
basófilos nunca se disponen por encima del núcleo. Desde el punto de vista ultraestructural, los eosinófilos poseen
distintos tipos de granulación:
- Granulación Primaria, donde se localiza la lipofosfolipas, también denominada proteína del cristal de Charcot
Leyden. Estos gránulos no tienen centro cristaloide y constituyen aproximadamente un 5% de la granulación del
eosinófilo.
- Granulación Secundaria, con centro cristaloide, que representa más del 95% de la granulación en el eosinófilo
maduro
- Microgránulos o Estructuras Tubulovesiculares, que son ricos en fosfatasa ácida y proteínas catiónicas.
bioquímicamente se caracterizan por poseer gran cantidad de mieloperoxidasa y fosfatasa ácida. La peroxidasa se
dispone fundamentalmente en la matriz del gránulo.
También contienen proteínas catiónicas y mucosustancias sulfatadas; poseen, asimismo, un alto contenido en
fosfolipasa y lisofosfolípidos. Por el contrario, está desprovisto de fosfatasa alcalina y lactoferrina. Su papel biológico
principal es el de modulador de la reacción anafiláctica al ser capaz de inactivar sustancias liberadas por los mastocitos
y el control de la infestación por ciertos parásitos, cuyo ataque no tiene lugar por mecanismos de fagocitosis, sino por
adherencia y subsiguiente citotoxicidad al segregar diversas sustancias nocivas
40
BASÓFILOS: Son células redondeadas cuyo tamaño oscila entre 10 y 13 μm. El núcleo, de cromatina densa, posee
generalmente dos o tres lóbulos unidos por puentes cromatínicos, en ocasiones difíciles de visualizar dada la presencia
de las numerosas granulaciones basófilas propias de esta célula. Los gránulos basófilos se disponen encima del
núcleo. La granulación basófila, de tamaño entre 0.2 y 1 um, adquiere una coloración rojo-violácea oscura con las
tinciones panópticas. En ocasiones, los gránulos basófilos se disponen en el interior de vacuolas citoplasmáticas,
imagen óptica que traduce la disolución parcial de estos gránulos tras las maniobras de fijación. La característica
principal de los gránulos basófilos es su metacromasia con los colorantes azules (azul de metileno, azul de toluidina),
con los que adquiere una tonalidad rojiza, mientras que el resto de las estructuras celulares se tintilde; en de color azul.
La metacromasia se debe a la riqueza de estos gránulos en mucopolisacáridos ácidos sulfatados. Los gránulos
basófilos también son ricos en histamina, heparina, glucógeno y determinadas enzimas (peroxidasa). Otro enzima a
destacar es la omega exonucleasa, localizada en la zona intercelular, el citoplasma del basófilo aparece, a veces, con
numerosas vacuolas que no son más que gránulos parcialmente extraídos. Los Basófilos se originan en el mismo lugar
que el resto de los granulocitos, y son los menos numerosos, ya que constituyen sólo el 0,5% del total.
LINFOCITOS: Son células mononucleadas cuyo tamaño varía entre 6-8 a 10-20 micras dependiendo de su estado de
activación. Son los principales efectores de la respuesta inmune específica. Su núcleo es redondo y su citoplasma es
en general escaso, basófilo y, en ocasiones, contiene una discreta granulación azurófila. Los linfocitos son un tipo de
glóbulos blancos.Hay varios tipos de linfocitos:
- Linfocitos B: (respuesta humoral) producen anticuerpos inmunoglobulinas
- Linfocitos T: ayudan a detectar los antígenos: Linfocito T4, Linfocito T8
- Células NK “Asesinas naturales”/ linfocito grande granular.
MONOCITOS. Son las células de mayor talla halladas en la sangre periférica. Su tamaño oscila entre 15 y 30 μm de
diámetro, adquiriendo una forma irregular, cuadrangular u oval. El núcleo, situado en posición central, es voluminoso y
adopta formas abigarradas en herradura, indentado o doblado; la cromatina es densa y con aspecto como peinada en
finas franjas cromatínicas, lo cual es característico de estas células. Los monocitos están desprovistos de nucleolos. El
citoplasma es amplio con ocasionales mamelones periféricos, de color azul plomizo y contiene un número variable de
gránulos azurófilos. Los histiocitos y macrófagos constituyen el último estadio evolutivo de las células del sistema
mononuclear fagocítico. Originados a partir de los monocitos sanguíneos, los histiocitos adoptan un aspecto
morfológico característico y diferencial dependiendo del tejido u órgano donde finalmente se ubiquen.
OBJETIVOS
Diferenciar los tipos de leucocitos presentes en sangre venosa reveladas por tinciones hematológicas
MATERIALES:
- Sangre venosa o capilar.
- Portaobjetos
- Bandeja de tinción
- Etanol o metanol
- Colorante de tinción Giemsa
- Aceite de inmersión
- Microscopio.
PROCEDIMIENTO TINCIÓN DE GIEMSA

1. Colocar media gota de sangre, casi en un extremo de un portaobjeto.
2. Con un extensor, realizar el frotis sanguíneo de un solo toque.
3. Esperar que el extendido seque y cubrir por 5 minutos con etanol.
4. Una vez seco, cubrir la muestra con colorante Giemsa diluido 1:10 y dejar reposar 15 minutos
5. Lavar con agua, esperar a que seque y observar en el microscopio con una gota de aceite de inmersión con
objetivo 100X.
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RESULTADOS
CONCLUSIÓN
CUESTIONARIO
1. Dibuje y diferencie los 5 tipos de leucocitos existentes en la sangre
2. Investigue y describa además del Giemsa, otras dos técnicas de tinción utilizadas para el estudio de células
sanguíneas
3. Mencione las principales funciones que cumplen cada una de las células observadas al microscopio
4. ¿Qué patologías mas frecuentes es posible relacionar cuando se incrementa la presencia de cada uno de los
leucocitos?
5. ¿Qué patologías mas frecuentes es posible relacionar cuando se encuentra disminuida la presencia de cada uno de
los leucocitos?
6. ¿Por qué en las enfermedades virales generalmente se observa una Leucopenia y neutropenia?
7. ¿Qué significado tienen los siguientes términos, mencione dos situaciones en las que estos se presentan:
- Neutropenia
- Neutrofilia
- Linfopenia
- Linfocitosis
- Eosinofilia
- Monocitosis
- Desviación a la Izquierda
- Desviación a la derecha
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UNIDAD I:
TÍTULO: Diluciones
FECHA DE ENTREGA:
FUNDAMENTO
Una vez convertidas en tintura madre, si fuera necesario, procedemos a la preparación de las diluciones. Para ello
sometemos una mezcla de una parte de tintura madre con nueve o noventa y nueve, según el tipo de dilución. Hay
muchas situaciones en que las cantidades de sustancia necesarias para ver un efecto son extremadamente pequeñas
(por ejemplo un fármaco para tratar una enfermedad, una hormona para estudiar su efecto en un animal de
experimentación, etc.) y difícilmente se pueden pesar o medir en esas proporciones tan pequeñas. En esas situaciones
es necesario recurrir a la preparación de una solución de alta concentración (o solución de stock o solución madre) y
hacer diluciones seriadas a partir de ésta.
Una dilución esta formada por la siguiente representación:
Muestra + Diluyente = Muestra diluida
DILUCIÓN SIMPLE
Es utilizado de manera rutinaria en la mayoría de las pruebas inmunológicas y hematológicas de laboratorio al preparar
en un solo paso una dilución por ejemplo: dil. 1:10
Donde:
- 1 representa la proporción de lo que tú quieres diluir
- 10 representa la cantidad total de la muestra diluida (muestra + diluyente)
- La proporción del diluyente lo obtenemos por diferencia (Total de la dilución – muestra) =9
Estas proporciones las podemos reemplazar por otros volúmenes, con sus respectivas unidades de medida (ul, dl, L,
etc), obteniendo los datos a partir de una regla de tres simple. Ejemplo:
- Dilución 1:10, la representación es la siguiente: 1ml muestra + 9ml de diluyente = 10ml Dilución Total
- Dilución 1:2, la representación es la siguiente: 5ml muestra + 5ml de diluyente = 10ml Dilución Total
DILUCIÓN SERIADA
En general se parte de una muestra o solución concentrada y se preparan simultáneamente varias diluciones de la
misma una a partir de la anterior. Para ellos se utilizan un mismo volumen de diluyente en varios tubos de ensayo al
colocar en partes iguales con la muestra damos origen a la dilución 1:2, si de esta muestra ya diluida utilizamos una
cantidad identica a la del diluyente damos origen a la dilución 1:4, si volvemos a realizar la misma actividad damos
origen a la dilución 1:8, al utilizar volúmenes idénticos de forma continua y de la misma muestra tendremos una
DILUCIÓN DE LA SERIE 2, por que de una dilución a la otra a aumentado el doble ejemplo: 1:2, 1:4, 1:8, 1:16, 1:32,
etc.
43
MATERIALES:
- Tubos de ensayo
- Pipetas y micropipetas
- Punteras
- Agua destiladas
- Azul de metileno
- Gradilla
PROCEDIMIENTO:
Realizar en primera instancia los cálculos teóricos y esquemas en cuaderno o pizarra.
Aplicar dichos resultados a la práctica.
Realizar diluciones:
Dilución Simple 1: 5 donde el volumen total de la muestra diluida es 2.5ml

Dilución Simple 1: 5 donde el volumen de la muestra es 200 ul
Dilución de la serie 2, donde el volumen de la muestra es de 50 ul
Dilución de la serie 3, donde el volumen total de la muestra es de 1,5ml
RESULTADOS
CONCLUSIÓN
CUESTIONARIO
1. Describa la relación que existe entre las siguientes medidas volumétricas: litro, mililitro, decilitro, microlitro.
Centímetro cúbico,
2. Mencione por lo menos 4 pruebas de laboratorio en los que se utilizan diluciones.
3. Para realizar el recuento de leucocitos se utiliza sangre venosa más diluyente líquido de türck, investigue el tipo de
dilución que se realiza y los volúmenes utilizados.
4. En la determinación serológica de una enfermedad chagas en nuestro país qué significado tiene un resultado
positivo con dilución 1:8 a diferencia de otro paciente con dilución 1:512
5. ¿Investigue a qué se denomina hemodilución?
44
UNIDAD I: TEMA 4
TÍTULO: Antígenos Febriles
GENERALIDADES
Las Salmonellas se consideran patógenos entéricos obligados. Los alimentos y el agua contaminados son los
mecanismos de transmisión. La enfermedad puede presentarse como gastroenteritis, septicemia con lesiones en
diversos órganos o fiebre tifoidea. La Brucelosis se presenta en la mayoría de los casos con anorexia, fiebre,
decaimiento y escalofríos, pudiendo aparecer luego complicaciones importantes como son las óseas y neuropsíquicas.
A pesar de que el método definitivo para establecer la etiología de estas enfermedades es a través del aislamiento del
agente patógeno, esto resulta difícil debido a que la investigación se realiza frecuentemente en períodos tardíos de la
enfermedad y luego de una terapia antibiótica. Por este motivo es de gran importancia diagnóstica la detección de los
anticuerpos específicos producidos en el curso de cada una de estas patologías. Una prueba aislada es de escaso
valor, siendo necesarias 2 o más pruebas seriadas a fin de poner en evidencia cambios en el título de anticuerpos.
FUNDAMENTOS DEL MÉTODO.

El suero del paciente se pone en contacto con antígenos específicos. En este caso se utilizan suspensiones de
Salmonellas o Brucellas muertos. Si la muestra contiene los anticuerpos correspondientes se producirá una aglutinación
visible microscópicamente.
OBJETIVOS
Identificar la presencia de Salmonelosis a través de pruebas inmunológicas mediante procesos microscópicos de
aglutinación.
MUESTRA
- Recolección: debe obtenerse suero límpido en forma estéril. No inactivar ni calentar ya que los anticuerpos son
termolábiles.
- Sustancias interferentes conocidas: la hemólisis visible y los quilomicrones pueden dar reacciones inespecíficas.
- Estabilidad e instrucciones de almacenamiento: las muestras pueden conservarse 7 días en refrigerador (2-10 C).
MATERIALES Y REACTIVOS
- Placa de vidrio
- Micropipetas graduables
- Tubos de hemólisis
- Varilla
- Reloj o timer
- Reactivos Antígenos Febriles O - H - A – B
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PROCEDIMIENTO
I- TÉCNICA RÁPIDA EN PLACA
- Colocar en una placa una gota (50ul) de suero y agregar una gota (50ul) de suspensión de Antígeno. Mezclar y
agitar la placa en forma circular durante 2 minutos. Observar la presencia o ausencia de aglutinación utilizando una
luz indirecta sobre fondo oscuro.
II- TITULACIÓN RÁPIDA EN PLACA

- Dividir una placa de vidrio en sectores de 4cm2 aproximadamente.
- Empleando las micropipetas apropiadas colocar en estos sectores 80ul, 40ul, 20ul, 10ul y 5ul de suero límpido.
Repetir el procedimiento para un control negativo y uno positivo.
- Colocar 1 gota de Antígeno previamente agitado sobre cada gota de suero.
- Mezclar el suero y el Antígeno utilizando una varilla abarcando un área de 2cm de diámetro aproximadamente.
- Debe emplearse una varilla distinta para cada dilución de suero o la misma varilla mezclando a partir de la muestra
más diluida.
- Agitar la placa durante 2 minutos en forma circular.
- Observar la aglutinación utilizando luz indirecta sobre fondo oscuro.
Volumen de Suero Dilución aproximada en ml la prueba en tubo
0,08 1:20
0,04 1:40
0,02 1:80
0,01 1:160
0,005 1:320
INTERPRETACIÓN DE LOS RESULTADOS
4+: todos los microorganismos se aglutinan.

3+: aglutinan aproximadamente el 75%.
Negativo: no aparece aglutinación.
VALORES DE REFERENCIA
● Generalmente títulos de 1:40 ó 1:80 son sospechosos de enfermedad.

● Sólo títulos mayores de 1:80 pueden considerarse probatorios de diagnóstico de enfermedad cuando estén
acompañados de la sintomatología clínica.
● Títulos mayores de 1:320, son concluyentes.
LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO
Títulos significativos pueden obtenerse en individuos inmunizados por vacunas tifoideas. Pueden observarse
reacciones inespecíficas con antígenos de Salmonella O grupo D en suero de pacientes con influenza. También se
encontraron reacciones inespecíficas en pacientes con enfermedad hepática crónica activa y consumidores de
narcóticos.
RESULTADOS
46
CONCLUSIÓN
CUESTIONARIO
1. Mencione las características clínicas que presenta una persona que padece de una salmonelosis
2. ¿Qué significado tiene el predominio de positividad de los diferentes antígenos febriles?
3. ¿Con qué otro nombre se conoce a ésta prueba de laboratorio”Antígenos Febriles”? ¿Por qué?
4. ¿Por qué se pone en duda un resultado negativo de laboratorio cuando se realiza a los 3 días de iniciada la
enfermedad?
5. Mencione y describa otras pruebas de laboratorio capaces de identificar la presencia de una salmonelosis
6. ¿Cuáles son las ventajas y desventajas de ésta prueba de laboratorio en relación a las demás?
47
UNIDAD I:
TÍTULO: Artritis Reumatoidea Test
FECHA DE ENTREGA:
GENERALIDADES
La artritis reumatoidea es un síndrome crónico de etiología desconocida, caracterizado por una inflamación inespecífica
y generalmente simétrica de las articulaciones, que a veces evoluciona hacia la destrucción de las estructuras
articulares y periarticulares. En la articulación enferma se observa un engrosamiento de la membrana sinovial con
formación de pliegues y proliferación de linfocitos. Estas células, que forman folículos linfoides, son las responsables de
la síntesis de factores reumatoideos (FR) y otras inmunoglobulinas. Los FR son generalmente de tipo IgM anti-IgG, es
decir que reaccionan con las fracciones Fc de las IgG. También se han encontrado FR de tipo IgG, aunque en mucha
menor proporción de casos. Los FR de tipo IgM están presentes en el 85-90% de los adultos con artritis reumatoidea
aunque no es específico de la enfermedad puesto que también se han encontrado en individuos sanos (en un 3 a 5%
de los casos). Por tal motivo, cuando se sospecha la existencia de una enfermedad distinta de la artritis reumatoidea,
frente a una reacción de aglutinación positiva es aconsejable realizar la precipitación de las globulinas con sulfato de
amonio. De tal forma, se asegura la precipitación completa de los FR y se mantiene en solución cualquier aglutinina
responsable de una falsa reacción positiva, como así también algún posible inhibidor.
OBJETIVOS
Identificar con pruebas inmunológicas de laboratorio la presencia de enfermedades autoinmunes

El factor reumatoideo de tipo IgM se detecta en presencia de gammainmunoglobulina o fracción II de Cohn (que en este
caso es el antígeno) absorbida sobre un soporte inerte de látex-poliestireno. Este antígeno se une a los FR (anti-IgG)
produciendo una aglutinación de las partículas de látex poliestireno, visible macroscópicamente.
MUESTRA
- Recolección: obtener suero de la manera usual. No deben usarse muestras inactivadas por calor.
- Sustancias interferentes conocidas: hemólisis y ciertas proteínas (distintas del Factor Reumatoideo) pueden ser
causa de resultados erróneos.
- Estabilidad e instrucciones de almacenamiento: el suero debe ser preferentemente fresco. En caso de no
procesarse en el momento puede conservarse en el refrigerador (2-10ºC) durante no más de una semana contada
desde su recolección.
REACTIVOS
- Reactivo de Látex: suspensión de partículas de látex-poliestireno de 0,20 micrones de diámetro, que tienen
adsorbidas moléculas termo agregadas de gammainmunoglobulina.
- Control Positivo: dilución de suero positivo. Equivale a 2 (+).
- Control Negativo: dilución de suero negativo.
48
- Placa de vidrio fondo negro.
- Aplicadores de madera
- Cronómetro.
- Material volumétrico adecuado.
- Fuente de luz.
- Reactivo látex factor reumatoideo
- Solución fisiológica
- Micropipetas graduables
- Punteras
PROCEDIMIENTO
I- Técnica cualitativa
- En uno de los sectores delimitados de la placa de vidrio adjunta al equipo, colocar:
- Muestra 1 gota (50 ul)
- Reactivo de Látex 1 gota (50 ul)
- Mezclar con palillo o varilla de vidrio hasta obtener una suspensión uniforme en toda la superficie delimitada de la
placa. Inmediatamente, disparar un cronómetro, balancear suavemente la placa y observar microscópicamente el
resultado dentro de los dos minutos bajo un haz luminoso.
II- Titulación
- Los sueros positivos pueden titularse efectuando diluciones seriadas

- Colocar 0,5 ml de solución fisiológica en cada una de las placas .
- Agregar 0,5 ml de suero a la placa No 1 y mezclar.
- Transferir 0,5 ml de esta dilución al tubo No 2 y mezclar, continuando de esta forma las diluciones hasta el último
tubo ; descartar la última dilución.
- Las diluciones así obtenidas equivalen a 1:2; 1:4; 1:8; 1:16; etc.
- Ensayar cada dilución según la TÉCNICA CUALITATIVA.
Negativo: suspensión homogénea. ( NO AGLUTINACIÓN )

Positivo: aglutinación que aparece dentro de los dos minutos. ( AGLUTINACIÓN ).
Título: inversa de la máxima dilución a la que se produce aglutinación visible macroscópicamente.
Se consideran patológicos valores superiores a 20-30 UI/ml.:
RESULTADOS
49
CONCLUSIÓN
CUESTIONARIO
1. Mencione las características clínicas que presenta una persona que padece Artritis Reumatoide
2. Esquematiza el tipo de reacción que sucede en una prueba positiva y una prueba negativa para artritis reumatoides
3. ¿Qué relación tiene éste test con la prueba Proteína “C” Reactiva?
4. ¿Existen otras pruebas de laboratorio que puedan corroborar la presencia de la artritis reumatoide?
5. ¿Investigue quiénes generalmente adquieren esta enfermedad?
50
UNIDAD I:
TÍTULO: Floculación / VDRL
FECHA DE ENTREGA:
GENERALIDADES
La sífilis es una enfermedad venérea causada por el Treponema pallidum, que invade las mucosas intactas o la piel en
áreas de abrasión. El contacto sexual es la forma más común de transmisión. La detección y tratamiento de la
enfermedad en sus estadios tempranos es fundamental a fin de evitar complicaciones graves como sífilis
cardiovascular, neurosífilis y sífilis congénita. El diagnóstico de esta enfermedad sufre la carencia de un método para
cultivar el microorganismo en medios de laboratorio y la dificultad para detectarlo en estadios de la enfermedad en los
que no se observan lesiones epidérmicas. Sin embargo, desde el comienzo de la infección aparecen en el suero del
individuo infectado ciertas sustancias denominadas "reaginas", que reaccionan con antígenos de cardiolipina, lecitina y
colesterol. Estas reaginas junto a los signos clínicos son por lo tanto los procedimientos más rápidos y útiles disponibles
para el diagnóstico de sífilis.

Las "reaginas", presentes en individuos infectados por T. pallidum se detectan en suero por la reacción con un antígeno
cardiolipina purificado y estabilizado. Si la muestra contiene reagina, ésta se unirá al antígeno produciendo una
floculación visible en microscopio. Las reacciones inespecíficas se evitan con el empleo de antígeno altamente
purificado y el agregado de cloruro de colina característica de la técnica USR (Unheated Serum Reagin) en la que no es
necesario inactivar la muestra.
OBJETIVOS
● Identificar la presencia de sífilis mediante el estudio de reaginas con capacidad de producir floculación
● Determinar reaginas que reaccionan con antígenos de cardiolipinas
MATERIALES:
- Pipetas
- Micropipetas y punteras
- Solución salina
- Mezcladores
- Placas de vidrio o plástico
- Reactivo de trabajo V.D.R.L.
- Punteras
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PROCEDIMIENTO:
I- Prueba cualitativa.
- En cada uno de los sectores delimitados de la placa colocar:

- Muestra 50 ul
- Con gotero provisto colocar:
- Antígeno 1 gota
- Agitar horizontalmente la placa a 180 rpm durante 4 minutos. Observar inmediatamente en microscopio
II- Prueba semi cuantitativa
Preparar diluciones de la muestra 1:2, 1:4, 1:8, 1:16 y 1:32 con solución fisiológica y realizar para cada dilución la
prueba como se describe en el procedimiento I.
INTERPRETACIÓN
Se considera a un suero reactivo cuando presenta floculación característica que varía de leve pero definida o moderada
o intensa . Un suero es no reactivo cuando no muestra floculación , cualquiera sea el grado de reactividad ( mínima o
moderada ; con aglutinación leve pero definida ) .
El diagnóstico de la sífilis no debe basarse únicamente en el resultado reactivo , sin el respaldo de evidencia
clínica positiva.
RESULTADOS
CONCLUSIÓN
CUESTIONARIO
1. Mencione las características clínicas que presenta una persona que padece Sífilis
2. El VDRL no se considera una prueba confirmatoria para sífilis , indique en qué otra patología puede presentarse
resultados positivos para esta prueba.
3. Cual es la prueba confirmatoria para el diagnostico de sifilis
4. Que es el efecto prozona y que puede hacerse para evitarlo en esta prueba
52
UNIDAD :
TÍTULO: Antiestreptolisina “O” TEST
FECHA DE ENTREGA:
GENERALIDADES
El anticuerpo antiestreptolisina O se encuentra presente en casi todas las personas en títulos bajos, debido a que las
infecciones estreptocócicas son comunes. Sin embargo un título alto o creciente de antiestreptolisina O, indica una
infección reciente producida por un estreptococo beta hemolítico de grupo A, como amigdalitis, escarlatina, sepsis
puerperal, erisipela.
FUNDAMENTO
Los anticuerpos antiestreptolisina O se detectan en suero por su reacción con la estreptolisina O adsorbida sobre
soporte inerte de látex. Los anticuerpos antiestreptolisina reaccionan con la estreptolisina produciendo una aglutinación
visible macroscópicamente.
OBJETIVOS
Identificar la presencia de anticuerpos antiestreptolisina con capacidad de producir aglutinación visible
microscópicamente, en personas que han padecido amigdalitis
REACTIVOS
- Reactivo de Látex: suspensión de partículas de látex poliestireno recubiertas con estreptolisina O.
- Control Negativo: suero no reactivo con el Reactivo de Látex.
- Control Positivo: suero humano conteniendo antiestreptolisina O en concentración superior a 250 UI/ml.
- Solución fisiológica (para la técnica semicuantitativa).
MUESTRA
- Recolección: obtener suero de la manera usual.
- Sustancias interferentes conocidas: los sueros marcadamente lipémicos o contaminados pueden dar resultados
falsamente positivos.
- Estabilidad e instrucciones de almacenamiento: la antiestreptolisina en suero es estable 24 horas refrigerada
(2-10ºC) o congelada por períodos prolongados.
MATERIAL REQUERIDO
- Placa de vidrio
- Goteros o pipetas para dispensar los volúmenes indicados.
- Palillos mezcladores descartables
- Cronómetro
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PROCEDIMIENTO
En uno de los sectores delimitados de la placa de vidrio adjunta al equipo colocar:
- Reactivo de Látex 1 gota (50ul)
- Muestra 1 gota (50 ul)
- Mezclar con palillo descartable (uno para cada muestra) hasta obtener una suspensión uniforme en la superficie
delimitada de la placa. Inmediatamente disparar un cronómetro, balancear suavemente la placa y observar
macroscópicamente el resultado dentro de los 2 minutos.
II- Técnica semicuantitativa (titulación)

Los sueros positivos pueden titularse efectuando diluciones seriadas en tubos.
- Colocar 0,5 ml de solución fisiológica en cada uno de los tubos.
- Agregar 0,5 ml de suero al tubo No 1 y mezclar. Transferir 0,5 ml de esta dilución al tubo No 2 y mezclar,
continuando así las diluciones hasta el último tubo. Las diluciones así obtenidas equivalen a 1:2, 1:4, 1:8, 1:16, etc.
- Ensayar cada dilución según técnica I.

Positivo: aglutinación que aparece dentro de los 2 minutos. ( AGLUTINACIÓN )
Título: inversa de la máxima dilución a la que se produce aglutinación visible macroscópicamente.
El nivel aproximado de antiestreptolisina O en la muestra, puede ser calculada por la fórmula siguiente:
ASO (UI/ml) = Título x Sensibilidad de la reacción (200 UI/ml)
Ejemplo: la muestra presenta un título de 1:2. El nivel de ASO es de 2 x 200 = 400 UI/ml
Hasta 200 UI/ml. Se recomienda que cada laboratorio establezca sus propios valores de referencia.
- Tiempos de reacción mayores de 2 minutos pueden producir reacciones falsamente positivas por efecto del secado
de los reactivos.
- Se pueden producir falsos negativos en niños mayores de 6 meses y menores de 6 años o en infección reciente.
- Debe tenerse en cuenta que en este tipo de infecciones, un resultado aislado sólo constituye un dato auxiliar, por lo
que se recomienda efectuar determinaciones seriadas cada 15-20 días durante 4 ó 6 semanas.
- En una población adulta sana se obtienen títulos de antiestreptolisina O menores o iguales a 200Ul/ml en el 95% de
los casos. En una población infantil (mayores de 2 años) se pueden tener títulos de hasta 300 UI/ml.
RESULTADOS
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CONCLUSIÓN
CUESTIONARIO
1. Mencione otras pruebas de laboratorio que sean capaces de identificar la presencia de estreptococos
2. Esquematiza el tipo de reacción que sucede en caso de positividad y negatividad en la prueba de ASO
3. ¿Qué es estreptolisina, cuál es su relación con la presencia de la enfermedad?
4. ¿Cuál es la ventaja y desventaja de test ASO en relación a otras técnicas?
5. ¿Qué significado tiene los siguientes resultados de laboratorio: ASO positivo 200 UI/ml y 600 UI/ml?
6. ¿Qué se entiende por estreptococo beta hemolítico?
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UNIDAD II:
TÍTULO: Proteína C Reactiva / PCR LATEX
FECHA DE ENTREGA:
GENERALIDADES
La Proteína C Reactiva (PCR) es una proteína termolábil que no atraviesa la barrera placentaria y cuya movilidad
electroforética se encuentra entre las zonas de las alfas y beta globulinas. Su nombre se debe a la capacidad para
precipitar los polisacáridos C de los neumococos. Es una de las llamadas proteínas de fase aguda y se incrementa en
suero, en una gran variedad de enfermedades inflamatorias o como respuesta a necrosis tisular. Su determinación es
importante debido a que aumenta rápidamente al comienzo de la enfermedad, 14 a 26 horas luego de la inflamación o
injuria tisular y desaparece en la etapa de recuperación, apareciendo sólo durante la fase activa del proceso
inflamatorio. La PCR se encuentra comúnmente aumentada en: artritis reumatoidea activa, infecciones virales,
tuberculosis, fiebre reumática activa, infarto agudo de miocardio, etc. También se la puede hallar luego de una
operación quirúrgica y en gran porcentaje luego de transfusiones sanguíneas. La determinación de PCR no sólo indica
la intensidad de la enfermedad sino también la respuesta del paciente a un tratamiento dado. La PCR se detecta en
suero por reacción con un anticuerpo específico adsorbido sobre un soporte inerte de látex. La PCR se une a los
anticuerpos absorbidos produciendo la aglutinación de las partículas de látex.
FUNDAMENTO
El test de PCR está basado en la reaccion entre la proteína C reactiva ( PCR) y anticuerpos anti-PCR humana unidos a
partículas látex . La reacción positiva se evidencia por aglutinación visible de partículas de látex en la superficie del
pocillo de la lámina .
El test puede determinar PCR en concentraciones de 6 mg/L o mayores
OBJETIVOS
● Identificar la presencia incrementada de la Proteína “C” Reactiva, como un mecanismo de respuesta

inmunológica inespecífica
● Entender el concepto de aglutinación y su aplicación a los métodos de diagnóstico serológico
● Determinacion de proteinas de fase aguda : Proteína C reactiva
REACTIVOS
- Reactivo de Látex: suspensión de partículas de látex poliestireno sensibilizadas con anticuerpos anti-PCR.
- Control Negativo: dilución de suero negativo.
- Control Positivo: dilución de suero positivo.
- Solución fisiológica.
MUESTRA
- Recolección: obtener suero de la manera usual.
- Sustancias interferentes conocidas: los sueros marcadamente lipémicos o contaminados pueden dar resultados
falsamente positivos.
procesarse en el momento puede conservarse hasta 24 horas en refrigerador (2-10ºC) y hasta 4 semanas
congelado a -20ºC.
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MATERIAL REQUERIDO
- Placa de vidrio fondo negro
- Material volumétrico adecuado para efectuar mediciones y diluciones de las muestras
- Palillos mezcladores descartables
- Cronómetro
- Lámpara o fuente de luz
PROCEDIMIENTO
- Muestra 1 gota
- Reactivo de Látex 1 gota
- Mezclar con un palillo descartable hasta obtener una suspensión uniforme en toda la superficie del círculo.
- Inmediatamente disparar un cronómetro, balancear suavemente la placa y observar macroscópicamente el
resultado bajo un haz luminoso dentro de los 2 minutos.
II- Titulación
Los sueros positivos pueden titularse efectuando diluciones seriadas en 8 tubos de vidrio
- Colocar 0,5 ml de solución fisiológica en cada uno de los tubos.
- Agregar 0,5 ml de suero al tubo Nº 1 y mezclar. Transferir 0,5 ml de esta dilución al tubo Nº 2 y mezclar, continuando
así las diluciones hasta el último tubo. Las diluciones así obtenidas equivalen a 1:2, 1:4, 1:8, 1:16, etc.
- Ensayar cada dilución según la técnica I.
INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS
Positivo: aglutinación que aparece dentro de los 2 minutos. ( AGLUTINACIÓN )
Título: inversa de la máxima dilución a la que se produce aglutinación visible macroscópicamente. La concentración
aproximada de PCR en la muestra puede ser calculada por la fórmula siguiente:
PCR (mg/l) = Título x Sensibilidad de la reacción (6mg/l).
Ejemplo: la muestra presenta un título de 1:2. Su concentración de PCR es de 2 x 6 = 12mg/l.

Valores de referencia
Hasta 6 mg/l. Se recomienda que cada laboratorio establezca sus propios valores de referencia.
RESULTADOS
57
CONCLUSIÓN
CUESTIONARIO
1. Mencione a qué tipo de respuesta inmune pertenece la Proteína “C” Reactiva y de qué manera interactúa ésta con
los antígenos in vivo.
2. Indique el concepto de título
3. Mencione 5 enfermedades en los cuales sea positivo el test de PCR
4. ¿Qué relación tiene esta prueba en relación a la Artritis Reumatoide?
5. ¿Qué otras proteínas de la fase aguda se pueden investigar en el laboratorio clínico ?
6. ¿Qué significado tiene los siguientes resultados de laboratorio: PCR positivo 6 mg/l y 18 mg/l?
58
UNIDAD II:
TÍTULO: Hemoaglutinación Indirecta para Chagas
FECHA DE ENTREGA:
GENERALIDADES
La enfermedad de Chagas es una infección parasitaria producida por el Trypanosoma cruzi. El diagnóstico de
laboratorio depende del estadio en el cual se encuentre la enfermedad. Durante la fase aguda, el diagnóstico se efectúa
directamente mediante la comprobación de los parásitos en sangre o por métodos inmunológicos que detectan
anticuerpos específicos. Durante la fase crónica, se pueden usar métodos inmunológicos como la reacción de
aglutinación de látex, hemoaglutinación, aglutinación directa, inmunofluorescencia y últimamente ELISA. La
hemoaglutinación indirecta (HAI), también llamada hemoaglutinación reversa pasiva, se basa en la propiedad que
tienen los anticuerpos (que en este caso son anti-T. cruzi) de producir aglutinación específica en presencia de glóbulos
rojos sensibilizados con los correspondientes antígenos. En el suero existen anticuerpos inespecíficos (heterófilos) que
son capaces de aglutinar glóbulos rojos de distintas especies. Su presencia se investiga enfrentando el suero con GR
no sensibilizados. Los anticuerpos interferentes se eliminan mediante tratamiento con 2-mercaptoetanol.
FUNDAMENTO
La prueba de hemaglutinación indirecta consiste en una suspensión estabilizada de hematíes de carnero sensibilizados
con antígenos los cuales se aglutinan en presencia de diluciones de sueros humanos o de animales que contengan
anticuerpos específicos.
OBJETIVOS
Identificar la presencia de Chagas mediante el estudio serológico de hemoaglutinación indirecta
Utilizar un método de aglutinación indirecta para diagnosticar anticuerpos
REACTIVOS
- Reconstituyente HAI: solución fisiológica taponada a P.D. 7.
- Antígeno HAI: liofilizado de glóbulos rojos de carnero sensibilizados con antígenos citoplasmáticos de T. cruzi.
- Glóbulos rojos no sensibilizados: suspensión al 1% de eritrocitos de carnero no sensibilizados, para control de
heterofilia.
- Buffer HAI: solución fisiológica tamponada con fosfatos a pH 7,5, con colorante inerte. Agregar 0,2 ml de Solución
Proteica para cada 10ml de Buffer HAI. Mezclar, rotular y fechar (Preparado dura 5 días a 2 – 10ºC)
- Solución Proteica: solución de albúmina bovina al 10%.
- Control Positivo: suero inactivado conteniendo anticuerpos contra Trypanosoma cruzi.
- Control Negativo: suero no reactivo, inactivado.
- Solución fisiológica.
MUESTRA
- Recolección: el paciente debe estar preferentemente en ayunas. Obtener suero de la manera usual. No usar
plasma.
- Sustancias interferentes conocidas: hemólisis o hiperlipemia producen resultados erróneos.
procesarse en el momento, puede conservarse en el refrigerador (2-10ºC) durante no más de 72hs contadas a partir
del momento de la extracción. Para períodos más prolongados de conservación, congelar (a -20ºC), evitando
reiterar tal procedimiento.
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MATERIAL REQUERIDO
- Policubetas con pocillos en U (Para eliminar la carga electrostática es pasar un trapo húmedo por la base de la
misma)
- Micro Dilutores (25ul) o micropipetas automáticas (25 ul)
- Tubos de ensayo y material volumétrico adecuado
- Cinta adhesiva
- Papel de filtro
PROCEDIMIENTO
- Colocar 25 ul de Diluyente de Sueros HAI en todos los pocillos a usar de la policubeta.
- Tomar una alícuota de 25 ul de la muestra “suero” y colocar en el primer pocillo y rotarlo por lo menos 10 veces para
asegurar una correcta dilución de la muestra.
- Con una micropipeta automática de 25ul, homogeneizar por carga y descarga. Realizar diluciones seriadas a partir
del primer pocillo (dilución 1/2), pasando los microdilutores al pocillo siguiente (dilución 1/4) y así sucesivamente
hasta la dilución que se desea investigar (por ej.: 1/8, 1/16, 1/32)
- Transferir 25ul de pocillo a pocillo hasta la dilución que se desee investigar.
- Descartar los últimos 25ul.
- Colocar en los pocillos conteniendo las diluciones 1/2 y 1/4, la cantidad de 25ul de glóbulos rojos no sensibilizados
para control de heterofília.
- En el resto de los pocillos, agregar 25 ul de Antígeno HAI.
- Mezclar aplicando suaves golpes en los laterales de la policubeta.
- Dejar en reposo, a resguardo de vibraciones, durante 90 minutos.
- Leer a partir de los 90 minutos.
- Se puede aumentar la nitidez de la apreciación, leyendo sobre un espejo, iluminando la placa desde arriba e
interponiendo un papel blanco y traslúcido entre la policubeta y la fuente de luz.

NEGATIVO: presencia de un sedimento en forma de botón o pequeño anillo de bordes regulares.
POSITIVO: formación de una película o manto que cubre el 50% o más del fondo de los pocillos, hasta el último posillo,
informándose con el título en dilución (ejemplo Positivo del.1:64)
PROCEDIMIENTO: TÉCNICA SCREENING O DESCARTE POR 1 TÍTULO

- Colocar 25 ul de Diluyente de Sueros HAI en todos los pocillos a utilizar de la policubeta (un pocillo por cada
muestra).
- Colocar 5ul de la muestra “suero” en el pocillo que contiene el Diluyente de Sueros HAI, rotando la misma para
obtener un buen mezclado y distribuirlo sobre todo el fondo del pocillo.
- Agregar 25ul de Antígeno HAI reconstituido y homogeneizado a cada pocillo.
- Agitar la policubeta golpeando con los dedos en las paredes laterales, durante 30 segundos por lo menos, para
asegurar un buen mezclado.
- Dejar reposar, al resguardo de vibraciones durante 2 horas.
- Efectuar la lectura. En caso de que la lectura de los resultados se efectúe en un plazo mayor de 2 horas, la
policubeta deberá taparse con una cinta adhesiva transparente para evitar evaporaciones.

No reactivo: presencia de un sedimento en forma de botón.
Reactivo: formación de una película o manto en el fondo de los pocillos. En caso de observar la presencia de un
pequeño anillo de bordes regulares, la muestra se considerará dudosa y deberá ser ensayada por otro método.
60

- Vibraciones accidentales durante el reposo necesario para el desarrollo de la reacción.
- Sueros envejecidos o congelados y descongelados repetidamente.
- Contaminaciones accidentales de los reactivos o del material empleado en el ensayo.
- Exceso o defecto de Diluyente de Sueros HAI en los pocillos de la policubeta.
- Diluyente de Sueros HAI que tenga más de 5 días de preparación.
- En poblaciones endémicas, empleando el método de HAI, el 98% de los títulos menores a 1/8 y el 95% de los títulos
mayores o iguales a 1/8 fueron confirmados por los métodos tomados como referencia.
- En poblaciones no endémicas, el 100% de los individuos sanos presentó títulos menores a 1/8 determinados por
HAI.
- En el 100% de los individuos con serología positiva confirmada por los métodos tomados como referencia y con
parasitosis demostrada por xenodiagnóstico y/o hemocultivo, se observaron títulos mayores o iguales a 1/32
determinados con Chagatest HAI.
- Policubetas rayadas por uso reiterado. No se aconseja reutilizar pocillos.
- Falta de homogeneización de los reactivos antes de su uso.
RESULTADOS
61
CONCLUSIÓN
CUESTIONARIO
1. Mencione las características clínicas que presenta una persona que padece Chagas
2. Mencione otras pruebas de laboratorio que sean capaces de identificar la enfermedad de Chagas
3. Esquematiza el tipo de reacción que sucede en caso de positividad y negatividad en la prueba de HAI-Chagas
4. ¿Por qué se utilizan hematíes no sensibilizados en esta prueba?
5. ¿ Por qué se utiliza solución proteica en el diluyente de la muestra ?
6. ¿Qué significado tiene el informe de laboratorio Positivo dilución 1:32 y Positivo dilución 1:1024?
7. Que significa título de corte o dilución de corte
62
UNIDAD :
TÍTULO: Hemoaglutinación Indirecta para Toxoplasma
FECHA DE ENTREGA:
GENERALIDADES
La toxoplasmosis es una enfermedad infecciosa generalmente benigna y asintomática del hombre y de los animales,
cuyo agente etiológico es el Toxoplasma gondii, parásito intracelular obligado de distribución mundial. Cuando la
infección por T. gondii se adquiere durante la gestación, existe un alto riesgo de infección en el feto, pudiendo provocar
abortos o lesiones graves que son más severas cuanto más precoz sea la contaminación materna. La presencia de IgM
específica que indicaría infección activa. Las determinaciones serológicas son las más convenientes y certeras para el
diagnóstico de la toxoplasmosis y debe establecerse: La seroconversión de negativo a positivo y un aumento en el título
de anticuerpos
FUNDAMENTO
Toxotest HAI se basa en la propiedad que tienen los anticuerpos anti-T. gondii de producir aglutinación en presencia de
glóbulos rojos sensibilizados con antígenos citoplasmáticos y de membrana del parásito. El empleo de ambos tipos de
antígenos incrementa la sensibilidad del método permitiendo la detección precoz de la infección. Tanto la presencia de
anticuerpos heterófilos como la aparición de IgM, características del período agudo de la parasitosis, se investigan
empleando tratamiento con 2-mercaptoetanol (2-ME) y eritrocitos no sensibilizados para control y absorción de
heterofilia. Los anticuerpos heterófilos se absorben con eritrocitos no sensibilizados. En los sueros de pacientes con
infección aguda tratados con 2-ME, se observa una caída del título en por lo menos dos diluciones comparados con los
mismos sueros sin tratar con 2-ME.
OBJETIVOS
Identificar la presencia de Toxoplasmosis en sangre venosa a través de las pruebas inmunológicas de
Hemoaglutinación Indirecta.
REACTIVOS
- Reconstituyente HAI: solución fisiológica tamponada a pH 7.
- Antígeno HAI: liofilizado de glóbulos rojos de carnero sensibilizados con antígenos citoplasmáticos y de superficie
de T. gondii.
- GR no sensibilizados: suspensión al 1% de eritrocitos de carnero no sensibilizados, para control y absorción de
heterofilia.
- Buffer HAI: solución fisiológica tamponada con fosfatos a pH 7,5, con colorante inerte. Agregar 0,2ml de Solución
Proteica para cada 10ml de Buffer HAI. Mezclar, rotular y fechar
- Solución Proteica: solución de albúmina bovina.
- Control Positivo: suero inactivado conteniendo anticuerpos contra el Toxoplasma gondii.
- Control Negativo: suero no reactivo, inactivado.
63
MUESTRA
- Recolección: el paciente debe estar preferentemente en ayunas. Obtener suero de la manera usual. No usar
plasma.
- Sustancias interferentes conocidas: hemólisis o hiperlipemia son causa de resultados erróneos.
procesarse en el momento, puede conservarse en refrigerador (2-10ºC) durante no más de 72-96 horas contadas a
partir del momento de la extracción. Para períodos más prolongados de conservación, congelar (a -20ºC) evitando
reiterar descongelamientos y congelamientos.
MATERIAL REQUERIDO
- Policubetas con pocillos en U
- Microdilutores (25ul) o micropipetas automáticas (25 ul)
- Tubos de ensayo y material volumétrico adecuado
- Cinta adhesiva
- Papel de filtro
- Procedimiento
- Colocar 25ul de Diluyente de Sueros HAI en todos los pocillos a usar de la policubeta.
- Tomar una alícuota de 25ul de la muestra “suero” y colocar en el primer pocillo y rotarlo por lo menos 10 veces para
asegurar una correcta dilución de la muestra.
- Con una micropipeta automática de 25ul, homogeneizar por carga y descarga. Realizar diluciones seriadas a partir
del primer pocillo (dilución 1/2), pasando los microdilutores al pocillo siguiente (dilución 1/4) y así sucesivamente
hasta la dilución que se desea investigar (por ej.: 1/8, 1/16, 1/32)
- Transferir 25ul de pocillo a pocillo hasta la dilución que se desee investigar.
- Descartar los últimos 25ul.
- Colocar en los pocillos conteniendo las diluciones 1/2 y 1/4, la cantidad de 25ul de glóbulos rojos no sensibilizados
para control de heterofília.
- En el resto de los pocillos, agregar 25ul de Antígeno HAI.
- Mezclar aplicando suaves golpes en los laterales de la policubeta.
- Dejar en reposo, a resguardo de vibraciones, durante 90 minutos.
- Leer a partir de los 90 minutos.
- Se puede aumentar la nitidez de la apreciación, leyendo sobre un espejo, iluminando la placa desde arriba e
interponiendo un papel blanco y traslúcido entre la policubeta y la fuente de luz.

No Reactivo: presencia de un sedimento en forma de botón o pequeño anillo de bordes regulares.
Reactivo: formación de una película o manto que cubre el 50% o más del fondo de los pocillos.
Títulos ≥16 significan mayor probabilidad de infección toxoplásmica. A fin de determinar una primoinfección reciente
deben procesarse 2 muestras tomadas con un intervalo de 2-3 semanas. Un aumento de título mayor de 2 diluciones
entre la 1ra y 2da muestra indican infección recientemente adquirida.
Dentro de las técnicas inmunológicas, la HAI es considerada un método confiable para la determinación de anticuerpos
específicos. No obstante, sus resultados, al igual que los de cualquier método serológico, sólo constituyen un dato
auxiliar para el diagnóstico. Es por esta razón que los informes deben ser considerados en términos de probabilidad. En
este caso, mayor o menor probabilidad de parasitosis por T. gondii. Se consideran presumiblemente parasitados
aquellos individuos cuyos sueros son reactivos en diluciones mayores o iguales a 1/16. Se debe tener en cuenta que la
concentración de anticuerpos en suero varía en distintas poblaciones, razón por la cual es posible encontrar sueros
reactivos correspondientes a individuos no parasitados. Por esta razón es necesario determinar los valores de
referencia de la población en estudio.
64
LIMITACIONES DE PROCEDIMIENTO
- Falta de acondicionamiento previo de la policubeta. Para eliminar la carga electrostática es necesario pasar un trapo
húmedo por la base
- Deficiencias de mezclado.
- Vibraciones accidentales durante el reposo necesario para el desarrollo de la reacción.
- Sueros envejecidos o congelados y descongelados repetidamente.
- Contaminaciones accidentales de los reactivos o del material empleado en el ensayo.
- Policubetas rayadas por uso reiterado. No se aconseja reutilizar pocillos.
- Diluyente de Sueros HAI conservado más de 5 días.
- Exceso o defecto de Diluyente de Sueros HAI en los pocillos de la policubetas.
- No respetar los tiempos y temperaturas de incubación en el tratamiento con 2-ME al 1%.
RESULTADOS
CONCLUSIÓN
CUESTIONARIO
1. Mencione las características clínicas que presenta una persona que padece Toxoplasmosis
2. Mencione otras pruebas de laboratorio que sean capaces de identificar la enfermedad de Toxoplasma
3. Esquematice el tipo de reacción que sucede en caso de positividad y negatividad en la prueba de HAI-Toxo
4. ¿Cuáles son las ventajas y desventajas del test de HAI-Toxo?
5. Describa las características principales del agente causal de la enfermedad de la Toxoplasmosis
6. ¿Qué significado tiene el informe de laboratorio Positivo dilución 1:32 y Positivo dilución 1:1024?
65
UNIDAD :
TÍTULO: Prueba de Cromatografía Rápida en la Identificación de la HCG
FECHA DE ENTREGA:
GENERALIDADES
La Gonadotrofina Coriónica Humana (HCG) es una glicoproteína producida por las células trofoblásticas de la placenta.
Comienza a secretarse en la fase más temprana de la etapa gestacional y aumenta constantemente hasta alcanzar un
pico, alrededor de 9 semanas después del comienzo del último período menstrual normal, cuyos niveles son muy
variables de una mujer a otra. Su producción es índice de crecimiento placentario, hecho que permite establecer una
relación directa entre la aparición de HCG y el diagnóstico de embarazo.
FUNDAMENTO
El principio de este método se basa principalmente en lo siguiente :

Sobre una membrana de nitrocelulosa o nylon se encuentran absorbidos en la línea de reacción de anticuerpos contra
el antígeno que buscamos y sobre la línea de control anticuerpos anti-conjugado de forma que cuando la muestra
contiene antígeno este fluye por la membrana quedando retenido en la línea de reacción.
El conjugado , que también es un anticuerpo específico frente a antígeno que buscamos está marcado con una
molécula de oro coloidal , que también fluye por la membrana , es retenido por el antígeno en la línea de reacción y por
el anticuerpo en la línea control.
En caso de muestras negativas que no contienen antígeno , el conjugado es retenido únicamente en la línea de control
estas técnicas son rápidas , obteniéndose resultado de 15- 30 minutos
OBJETIVOS
Aplicar métodos inmunocromatográficos ( pruebas rápidas ) para la investigación de antígenos microbianos en
muestras biológicas.
Esta información se encuentra adjunta en el prospecto de reactivo.
PROCEDIMIENTO
Esta información se encuentra adjunta en el prospecto de reactivo.
66
INTERPRETACIÓN
RESULTADOS
CONCLUSIÓN
CUESTIONARIO
1. Mencione otras pruebas de laboratorio que sean capaces de identificar la presencia aumentada de HCG
2. Esquematiza el tipo de reacción que sucede en caso de positividad por presencia de HCG aumentada
3. ¿Cuáles son las ventajas y desventajas del Fecuntest directo?
4. ¿Qué significado tiene el informe de laboratorio como indeterminado?
5. A partir de las cuantas semanas de embarazo es posible identificar la presencia de HCG aumentada
6. ¿Cuál es la diferencia de la concentración de HCG determinada en muestras de sangre y la de orina?
7. ¿En qué situaciones es posible identificar HCG positivo y no estar relacionado a un embarazo?
8. ¿Con qué otras pruebas es posible identificar un embarazo en curso?
67
PROGRAMA DE CONTROL DE CALIDAD

UNIDAD III:
TÍTULO: Identificación de Antígenos Eritrocitario
FECHA DE ENTREGA:
FUNDAMENTO
La determinación de grupos sanguíneos del sistema ABO y Rh (Antígeno D) se efectúa enfrentado los hematíes
problemas con antisueros de especificidad conocida Anti-A, Anti-B, Anti-AB y Anti-D. La presencia o ausencia de
aglutinación o hemólisis de los hematíes ensayados frente a cada uno de los Antisueros, es indicativa de la presencia o
no de los correspondientes Antígenos Eritrocitarios.
OBJETIVOS
● Identificar la presencia de antígenos eritrocitarios del sistema ABO y Rh en sangre anticoagulada con EDTA
mediante las pruebas confirmatorias en tubo.
● Entender el concepto de aglutinación y su aplicación a la determinación de grupos sanguíneos.
MATERIAL
- Centrífuga
- Tubos de hemólisis
- Pipeta Pasteur
- Guantes de látex.
- Hemoclasificadores Anti-A, Anti-B, Anti-AB y Anti-D
- Solución salina isotónica
AGLUTINACION DIRECTA
1. Homogeneizar bien la muestra y depositar 3 gotas de sangre sobre el portaobjetos una en la derecha otra al
centro y otra en la izquierda.
2. Coloque una gota de sangre anti - A a la gota de la izquierda
3. Coloque una gota de sangre anti - B a la gota del centro
4. Colocar una gota de sangre anti - D a la gota de la derecha
5. Mezclar cada gota con un aplicador
6. Tomar el portaobjetos entre los dedos y realizar movimientos de agitación circular durante dos minutos.
7. Realizar la lectura , observando la presencia u ausencia de aglutinación
68
PROCEDIMIENTO ( LAVADO CONCENTRADO DE ERITROCITOS 3-5 % )

1. Obtener 3ml de sangre venosa
2. Depositar en un tubo de hemólisis que contenga una gota de anticoagulante EDTA
3. Mezclar suavemente
4. Realizar lavados de los glóbulos rojos
5. Preparar una suspensión de glóbulos rojos al 3 - 5%
6. Rotular los tubos con el número correspondiente y las letras A, B, AB y D
7. Agregar a cada tubo dos gotas del reactivo correspondiente Anti-A, Anti-B, Anti-AB y Anti-D.
8. Colocar una gota de los hematíes diluidos al 5% a cada uno de los tubos ya rotulados.
9. Centrifugar 1 minuto a 2.000 r.p.m. Y luego observar y examinar si hay o no aglutinación.
INTERPRETACIÓN
GRUPO ANTI - A ANTI - B ANTI - D
A - RH POSITIVO AGLUTINA NO AGLUTINA AGLUTINA
B - RH POSITIVO NO AGLUTINA AGLUTINA AGLUTINA
AB - RH POSITIVO AGLUTINA AGLUTINA AGLUTINA
O - RH POSITIVO NO AGLUTINA NO AGLUTINA AGLUTINA
A - RH NEGATIVO AGLUTINA NO AGLUTINA NO AGLUTINA
B - RH NEGATIVO NO AGLUTINA AGLUTINA NO AGLUTINA
AB - RH NEGATIVO AGLUTINA AGLUTINA NO AGLUTINA
O - RH NEGATIVO NO AGLUTINA NO AGLUTINA NO AGLUTINA
RESULTADO
Paciente ANTI-A ANTI-B ANTI-D GRUPO SANGUÍNEO FACTOR RH
Nº 1
Nº 2
Nº 3
Nº 4
69
CONCLUSIONES
CUESTIONARIO
1. ¿Por qué es recomendada la determinación de grupo sanguíneo en tubo como confirmatorio, en relación a la placa?
2. ¿Por qué generalmente sólo se identifica el sistema ABO y el Rh?
3. Menciona 10 sistemas sanguíneos diferentes a los identificados por rutina
4. ¿Cuándo y por qué es importante la identificación de todos los grupos sanguíneos clínicamente significativos?
70

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FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD

CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA

RED NACIONAL UNIVERSITARIA

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD

I. OBJETIVOS GENERALES DE LA ASIGNATURA.

II. PROGRAMA ANALÍTICO DE LA ASIGNATURA.

UNIDAD I: RESPUESTA INMUNOLÓGICA INESPECÍFICA

TEMA 2: ÓRGANOS DEL SISTEMA INMUNOLÓGICO INESPECÍFICO

2.1. Órganos del Sistema Inmune Inespecífico

TEMA 3: CÉLULAS DEL SISTEMA INMUNOLÓGICO INESPECÍFICO

3.2.3.5. Diferencia entre neutrófilos y macrófagos

TEMA 4: MOLÉCULAS DEL SISTEMA INMUNOLÓGICO INESPECÍFICO

UNIDAD II: RESPUESTA INMUNOLÓGICA ESPECÍFICA

TEMA 5: ÓRGANOS Y TEJIDOS DEL SISTEMA INMUNOLÓGICO ESPECÍFICO

5.2.2.3. Hormonas Tímicas

TEMA 6: CÉLULAS DEL SISTEMA INMULÓGICO ESPECÍFICO

6.3. Regulación de la Respuesta Inmune

UNIDAD III: LAS RESPUESTAS INMUNITARIAS Y SUS MECANISMOS EFECTORES

TEMA 8: INTERACCIONES ANTÍGENO- ANTICUERPO

TEMA 9: MOLECULAS EFECTORAS LEUCOCITARIAS

9.2.3. Receptores y antagonistas de citoquinas

TEMA 10: INMUNIDAD FRENTE A INFECCIONES

TEMA 12: SEMINARIO TALLER: ALTERACIONES DEL SISTEMA INMUNE

12.5. Inmunidad frente a tumores

II. ACTIVIDADES A REALIZAR DIRECTAMENTE EN LA COMUNIDAD.

iii. Nombre del proyecto al que tributa la asignatura.

iv. Contribución de la asignatura al proyecto.

v. Actividades a realizar durante el semestre para la implementación del proyecto

Elaboración de material Aula Capacitación de los actores 10 de

Charlas de Orientación en salud Aula Concienciación sobre los

Entrega y Orientación sobre Aula Actores involucrados en el

IV. EVALUACIÓN DE LA ASIGNATURA.

ACTIVIDAD PARÁMETROS PONDERACIÓN FECHA

El trabajo, la participación y el seguimiento realizado a estos dos tipos de actividades se tomarán

La nota procesual o formativa equivale al 40% de la nota de la asignatura.

● DE RESULTADOS DE LOS PROCESOS DE APRENDIZAJE O SUMATIVA (examen

VI. PLAN CALENDARIO

SEMANA FECHA Nº DE LA TEMARIO OBSERVACIONES

Órganos del sistema inmunológico

Células del sistema inmunológico

4. Moléculas que integran el

Órganos y Tejidos del sistema

5 4 al 9 de 5 5.1. Órganos de la respuesta

EVALUACION PRIMER PARCIAL DEL 11 AL 23 DE SEPTIEMBRE

7.1. Respuesta Inmunológica Específica

Interacciones antigeno - anticuerpo

8.1. Propiedades de los antígenos.

Moléculas efectoras Leucocitarias

9 9 al 14 de 9 9.1. Complejo Principal de

Inmunidad frente infecciones

10.1. Estrategias enfrentadas entre

11.1. Inmunización pasiva y activa

Alteraciones del sistema inmune

12.1. Reacciones de hipersensibilidad

EVALUACIÓN FINAL 4 AL 16 DE DICIEMBRE

UNIDAD II: TEMA 6

UNIDAD II: TEMA 7

- Por efecto citopático directo

- Los portadores de neoplasias malignas generalizadas que reciben quimioterapia,

1. Investigue el origen teórico de la enfermedad del SIDA

UNIDAD II: TEMA 11

1. ¿Por qué se produce la reacción autoinmune en el lupus eritematoso sistémico?

UNIDAD III: TEMA 14