UNIVERSIDAD CENTRAL DEL ECUADOR

TÉCNICAS HISTOLÓGICAS.

Microtomía
Valery Caiza
Yailyn Escobar
Pamela Padilla
Madelen Paucar
Christofer Romero
Emily Valencia
 INDICE

¿Que es la microtomia?
Historia del microtomo
Microtomo
Elementos básicos del microtomo
Tipos de microtomo
Tipos de cuchillas
Tipos de diseño
Calibración
Fases de la Microtomia
Pesca de corte de Tejido
Problemas en la obtanción del corte
Microtomía
Técnica de producir cortes
suficientemente finos para la
observación en el microscopio,

Equipo a utilizar es el llamado

Microtomo.
HISTORIA DEL MICROTOMO

Wilhelm His

Se encargo de inventar el
micrótomo en 1866.
Primeros microtomos eran
simples cuchillas con los que se
hacían cortes de forma manual.
En 1870 se desarrollaron los
microtomos que tenemos en la
actualidad

 Microtomo
Es un aparato que
permiten realizar cortes
muy finos a tejidos que
por lo general están
previamente endurecidos
por métodos como la
congelación, inserción en
parafina o en celoidina.
ELEMENTOS
BÁSICOS DEL
MICROTOMO

1. Porta bloques 2. Porta cuchillas

3. Mecanismo de avance 4. Base
5. Caja 6. Manivela
 TIPOS DE
MICROTOMO
 Microtomo de
Criostato
congelación
Consigue secciones a partir de
Realiza cortes de 20-50 µm de
material congelado y se obtienen
grosor y consiste en una
grosores de 8 a 40 µm, para observar
plataforma que se enfría a bajas
con el microscopio óptico.
temperaturas sobre la que se
coloca la muestra. A una temperatura entre -20 y -30°C
Microtomo de
deslizamiento
Los micrótomos de
deslizamiento permite cortes
con un espesor de 1 a 60 µm.
Se componen de un sujeta-
muestras fijo y una cuchilla que
está fijada sobre una corredera.
Microtomo de rotación
Universal
Los micrótomos de
rotación permiten preparar
muestras entre 1 y 60
µm.disponen de una
cuchilla fija y un sujeta-
muestras móvil.
Ultramicrotomo
Se preparan muestras para los microscopios
electrónicos de transmisión. Debido a que los
preparados deben ser extremadamente finos,
estos microtomos disponen de cuchillas
especiales y de un avance muy fino.
El uso de estos micrótomos permite un grosor
de 10 a 500 nm.
 TIPOS DE 2. Cuchillas permanentes
CUCHILLAS DEL
Son cuchillas de acero que, tras una larga
MICROTOMO serie de cortes, se pueden afilar y volver a
utilizar.
1. Cuchillas desechables Tejidos congelados o muy duros.
Son cuchillas que solo se pueden
usar una vez y son eliminadas.
Tejidos blancos, biopsias.
 TIPOS DE 4 Cuchillas de vidrio
CUCHILLAS DEL El vidrio utilizado se da en
MICROTOMO condiciones especiales de
temperatura para evitar las
3 Cuchillas de acero y tensiones, y cuando se rompa
metal obtener un filo nitido y
5 Cuchillas de diamante
Son especiales para cortante.
Se emplean en cortes de tejidos
cortar secciones de
calicificados o impregnados
tejidos blandos de
metalicamente .
animales y/o vegetales.
 TIPOS DE 2. Plano - Cóncava

DISEÑOS
1. Bicóncava
 TIPOS DE 4. Biplana
DISEÑOS

3. Biplana con faceta

Calibración
COLOCACIÓN Y AJUSTE
DE LA CUCHILLA.

1. Aflojar tornillos de fijación de la cuchilla.

2. Aflojar los tornillos de fijación del ángulo de la cuchilla.

3. Sujetar la cuchilla por la base y con mucho cuidado insértela lateralmente en la base
portacuchillas.
4. Sujetar la cuchilla firmemente mediante los tornillos de fijación.
5. Ajustar el angulo de corte de la cuchilla y fijar mediante los tornillos de fijación del
ángulo.
6. La base de las portacuchillas puede desplazarse para la posición mas conveniente
7. Girar la palanca de fijación de la base de las portacuchillas a la posición deseada y gira
de nuevo la palanca
Fases de la
microtomía
FASES/TECNICA:

1. Corte

3. Separacion

2. Estiramiento

4. Muestra lista
 CORTE

En esta etapa, se utiliza

un microtomo, un
instrumento
especializado, para cortar
secciones delgadas y
uniformes del bloque de
tejido
 SEPARACION

Por la cuchilla se
forma una tira de
cortes, que debemos
separar
 ESTIRAMIENTO

Los cortes deben

estirarse ya que salen
arrugados
 MUESTRA LISTA PARA
TEÑIR

Para que los cortes se

fijen a la superficie del
portaobjetos se
extiende una sustancia
adhesiva
 Necesario estirar los cortes,
Los cortes salen del ya que salen arrugados
microtomo en forma de tiras

los cortes estirados se

pescan con un portaobjetos
CORTE
PESCA DE CORTE
DE TEJIDO
 BAÑO DE FLOTACIÓN

Son baños diseñados para evitar

arrugas y deformaciones durante la
preparación de cortes de tejido en
parafina
RECOMENDACIONES PARA SUMERGIR EN EL
BAÑO DE FLOTACIÓN.
1. Realizar un movimiento de 4. Extraiga los portaobjetos del
barrido suave. agua en posición vertical

2. Examine cada sección mientras 5. Eliminar los restos de

flota en la superficie del agua laminillas

3. Deje la muestra el tiempo

6. No debemos colocar láminas de
suficiente para que se alise
diferentes bloques de parafina
PESCA DE CORTE DE TEJIDO

Consiste en que el corte de tejido que fue

transportado hacia el baño de flotación sea
extraido hacia el portaobjetos luego de
eliminarse pliegues o deformaciones.

 ¿CÓMO REALIZAR LA
PESCA?

Introducir un portaobjetos en el baño hasta tocar la sección

en uno de los lados del corte.

Cuando empieza la adherencia de la sección sobre el cristal

se extrae poco a poco el portaobjetos del baño
Si la orientación o la disposición del corte no es la
adecuada, éste se puede volver a reflotar y orientar.

Al terminar el montaje vaciamos el baño y eliminamos

cualquier vestigio de contaminación con papel de filtro.
RECOMENDACIONES PARA UN CORRECTO
PROCESO DE PESCA DE LAS LÁMINAS
1. Drene el agua excedente de
debajo de la sección antes de
secarla
El portaobjetos se debe
2.
introducir en el agua de
manera horizontal
3. Siempre debemos
sostener el portaobjetos
desde la zona biselada.
4. No sacar bruscamente
el portaobjetos del baño
de flotación
 PROBLEMAS EN LA
OBTENCION DE CORTE

Defectos en los Defectos del Defectos

instrumentos bloque ambientales
Mala inclusión Altas temperaturas
De la cuchilla Material muy duro Vibraciones
Del microtomo
¡GRACIAS!
 Bibliografía
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https://www.pce-iberica.es/instrumentos-de-medida/instrumentos-laboratorios/equipos-
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De Aragón, G. (2023, 3 mayo). Exposición de equipos antiguos: microtomo. Portal de Aragon.
https://www.aragon.es/-/laboratorio-agroambiental-equipos-antiguos-microtomo