Diferenciación celular y apoptosis

UNIDAD 10

PROCESOS CELULARES BÁSICOS EN ORGANISMOS MULTICELULARES

Para que pueda darse la conformacion de tejidos y posterior formacion de
organos en organismos multicelulares debe ocurrir lo siguiente:
 Diversificar los tipos celulares: capacidad de producir diversidad de
células.
 Coordinar la producción de celulas: la division se debe producir en el
momento adecuado y en cantidades adecuados de lo contrario
pueden derivar en cáncer.
 Regular el tamaño y la forma celular: esto es basico para que pueda
cumplir su función o sino puede entrar en procesos patológicos
como la hipertrofia.
 Organizar sus celulas en tejidos: que las celulas tengan la capacidad de asociarse a otra celulas para producir tejidos.
 Eliminar celulas senecenter (viejas) o extrañas: por ejemplo células infectadas con virus o celulas malignas.
Estos procesos se cumplen gracias a que la célula tienen capacidad de proliferación, especialización, interacción entre ellas y por último
capacidad de movimiento.
POLARIDAD CELULAR Y DIVISION ASIMETRICA
Con respecto a la división se produce la polaridad celular y la división asimétrica.
La división puede ser de dos tipos:
 División asimétrica: en este tipo de división le tenemos como ejemplo a la célula
madre, en la célula madre, antes de la división se produce una polaridad en cuanto a
componentes intracelulares, moléculas de señalización intracelular, ARN mensajero,
proteínas, inclusive organelos, cuando ocurre la mitosis, una de las células conserva
las características de célula madre y la otra, la que tiene estas señales va a terminar
diferenciándose, a esto se refiere una división asimétrica, ya que cada célula recibe
una composición diferente interna.
 División simétrica: la célula madre produce dos células idénticas, sin embargo, ocurre
una presión en el medio ambiente, por ejemplo, en la membrana extracelular, células
vecinas, hormonas u otras moléculas de señalización que hacen que una de estas
células se diferencie en la siguiente línea, en la figura de la derecha tenemos un
ejemplo que la diferenciación de un enterocito.

Posibles efectos:
 Asimetría ambiental: las células hijas
nacen iguales (división simétrica), pero
resultan en una célula diferenciada por
factores externos.
 Asimetría divisional: las células hijas
nacen diferentes (división asimétrica),
debido a factores internos.
 La división asimétrica tiene los posibles resultados para la diferenciación:
 En la primera división obtenemos una célula madre y una célula diferenciada
 En una segunda división la célula madre otra vez produce dos células, una que mantiene
las características de la célula madre y otra que es la diferenciada, aquí ya tenemos dos
células diferenciadas y una con característica de célula madre que va a seguir el ciclo.
OBS: Las células terminales diferenciadas no se dividen más.
Cuando existe la asimetría ambiental, los
factores ambientales pueden afectar a una
o ambas células hijas, entonces hay varias
opciones durante las divisiones celulares
Durante la primera división de las células
madre pueden resultar:
 Dos células que conservan sus
características de célula madre
 Dos células, una que mantienen sus características y otra que por factores
ambientales se diferencia
 Dos células diferenciadas en este caso no se puede renovar la población de
células madre
Los tejidos pueden tener más de un tipo celular que es lo frecuente ¿Cómo es que se produce más de un tipo celular a partir de la misma
célula madre? Está demostrado que una misma célula madre puede producir prácticamente todos los linajes del tejido, nuestro ejemplo
clásico es la célula hematopoyética que produce todas las células sanguíneas.
Se propuso lo siguiente:
1. Tenemos la célula madre A que produce la célula hija B, esta célula hija
puede mantener ciertas características, por ejemplo, cuando no llegó aún
al estadio final de diferenciación estas células intermedias pueden tener
aun la capacidad de dividirse, la célula B produce una señal a la célula A y
produce que ésta vuelva a dividirse.
2. Teniendo en cuenta el factor producto de la célula B que es la célula C, esta
nueva célula que produjo la célula madre tiene características diferentes.
3. Esta célula C a su vez puede producir otros factores que afecten a la célula
A original como también a la célula B e induce a que la célula A produzca
una célula del tipo D y que B produzca una célula tipo E y así básicamente
se consiguen todos los linajes celulares.

Muchos de los conocimientos se obtuvieron estudiando

Caenorhabditis elegans que es un nemátodo, tiene 950
células derivadas del cigoto y pudo ser estudiado el destino
de cada una de las células. Este es el árbol genealógico de
todas las células que se obtuvieron del cigoto y se analizaron
la expresión de sus genes que está calculado en 19000 genes,
para saber cuáles son los mecanismos involucrados o la vía de
señalización celular involucrada, forma parte de la biología de
desarrollo

RECAMBIO TISULAR
En el recambio tisular debemos tener en cuenta que para mantener
un tejido se debe involucrar:
 La proliferación celular: para el reemplazo de células que se van
perdiendo
 La diferenciación: porque las células nuevas suelen surgir de una
célula madre y tiene que diferenciarse a lo que el tejido necesita
 La muerte celular: para la célula que ya no se necesita o esta
lesionada.
Según el tejido y el tipo de célula, tienen una vida media diferente por ejemplo los hematíes viven 120 días en el torrente sanguíneo, hay
células que tienen que durar toda la vida como las neuronas y células musculares; hay otras células que tiene un recambio rapidísimo como
las células del epitelio de la mucosa, tenemos miles de millones de células nuevas por día.
El epitelio del intestino delgado donde se absorben los nutrientes de
los alimentos consta de un tejido conectivo laxo y el epitelio que esta
sobre él. En este caso se puede ver que hay unas cavidades que se
denominan criptas y a su vez unas proyecciones llamadas
vellosidades. En las criptas están las células madre que se dividen
cada 24 horas, y un tipo celular que deriva de la célula madre llamada
célula de paneth que ya es diferenciada y no se divide más y una
célula intermedia en diferenciación que tiene un rápido ciclo de
división celular de más o menos 12 horas y que producen el resto de
las células, los enterocitos o las células faliciforme, dos tipos celulares
que derivan de esta célula madre para el epitelio de la vellosidad.
Esto se va desplazando por las vellosidades, las células que se hayan
dañado o hayan terminado su función sufre algún tipo de muerte
celular y son eliminadas a través de la luz intestinal.

VÍAS DE SEÑALIZACIÓN INVOLUCRADA

Dentro de las criptas se han detectado que la vía Wnt es la
encargada de mediar la proliferación de la célula, la célula madre
expresan la señal WNt, también la célula de panes expresan la señal
Wnt y eso mantiene un ciclo de división celular dentro de la cripta
pero una vez fuera la señal disminuye y la célula deja de dividirse, las
que ya están diferenciadas pierden la capacidad de dividirse, no
reaccionan a la señal Wnt, la vía no está activa, tenemos dos
ejemplos, las células caliciformes y la célula epiteliales absorbentes.

Proceso para producir estos dos tipos de célula: La célula madre

tuvo que sufrir la división, generar células hijas que son de alta
proliferación, luego ocurre un mecanismo de inhibición lateral con
posterior diferenciación, esta diferenciación es mediada por la via
Notch.

INHIBICIÓN LATERAL
En el epitelio las células están pegadas unas a otras y hay una competencia entre la expresión del
ligando delta y el receptor de Notch.
Estas dos células en principio iguales productos de una misma división, expresan Notch y delta, pero
la activación de Nocth por delta de la célula vecina tiende a inhibir su propia expresión de delta, no
va a estimular a la célula vecina.
¿Quién gana la competencia?
Gana el que termina con la mayor cantidad de Notch activada, cuando la célula que tiene mayor
cantidad de receptores Notch activado produce una señal más fuerte, tiende a inhibir la producción
propia de delta, al no tener delta la célula que expresa Notch la célula vecina no es estimulada,
entonces la señalización Notch para y la producción de proteínas delta sube, entonces se forma un
ciclo. La célula que tiene expresión alta y activación de Notch, tiene una vía de especialización y la que
tiene la vía Notch inactivada tiene otra especialización diferente, esta es la forma que ocurre la
inactivación lateral y permite que las células vayan diferenciándose en distintos tipos celulares
necesarias en el tejido. Entonces la vía de delta produce células secretorias en el epitelio, la célula que
tiene Nocth activado produce la célula absortivas y esa es la forma que se constituye este epitelio del
epitelio delgado.
En la proliferación está involucrada la vía Wnt, la células paneth produce el ligando Wnt, este ligando
Wnt tiene efectos en la célula de rápida proliferación y mantienen esta proliferación y expresión de
receptor de efrina, que es una vía de señalización encargada de la proliferación celular y se forma un
gradiente de señal wnt, donde menor es la señal menor es la expresión de efrina hasta que llega un
punto donde la expresión es bastante baja y deja de haber expresión, entonces en este caso tenemos
que en las células en división se expresa el receptor de efrina que va disminuyendo y va aumentando
el ligandos de efrina que es EfrinB, en el momento que hay muchos ligandos pero no hay receptores
la división se detiene.
 En el epitelio hay 4 tipos de células a parte de la célula madre:
 Células absortivas
 Células caliciformes
 Células paneth
 Células enteroendrocinas, que también regulan el proceso de
digestión y motilidad intestinal.

FIBROBLASTOS
El fibroblasto tiene una gran plasticidad, tiene la capacidad de producir varias
células:
Célula del musculo esquelético: se forman vasos sanguíneos y estos vasos
están recubiertos en muchos casos por musculo liso, por ejemplo, en la
cicatrización de heridas se puede requerir vasos, estos vasos requieren
músculos y estos derivan del fibroblasto, pero el fibroblasto al estar en un
tejido conectivo no son células que están adheridas entre sí, si no que
dependen mucho de su membrana extracelular y de las señales dependen quemucho
estén de
en su
el membrana extracelular
líquido extracelular. (Esyladeúnica
las señales
que noque estén
es de en
tejido
conectivo) el líquido extracelular. (Es la única que no es de tejido conectivo)
Células condrocíticas: producen cartílagos, y también está demostrado que las células condrocíticas pueden producir fibroblasto, entonces
por ejemplo en lesiones en el cartílago producen fibroblasto y forman cicatriz, el tejido conectivo tiene mucho colágeno y la cicatrización
de heridas producen tejido conectivo nuevo
Osteoblastos y osteocitos: producen hueso, el huevo cuando hay fractura estimula para la producción de más osteocitos a partir del tejido
circundante y esos producen nuevos huesos.
Células adiposas: porque las células adiposas se encuentran en muchos casos, más allá de nuestro tejido, pueden estar en tejido conectivo
y como ya les dije el musculo liso para los vasos sanguíneos.

En el caso de las células hematopoyéticas, tenemos a la célula madre hematopoyética

multipotente, que es la que se obtiene de la medula ósea para el trasplante que se
usan como tratamiento para leucemias y linfomas.
Estos producen un progenitor multipotente que se divide en dos linajes:
 El linaje de precursores linfoides: producen las células T, NK y las células B
 El linaje de precursores mieloides, que van a producir prácticamente todas las
células de la sangre y del sistema inmune, eritrocitos y plaquetas por un lado y las
células dendríticas, macrófagos eosinófilos, basófilos y blastocitos.
MUERTE CELULAR PROGRAMADA
Cuando una célula cumple su función fisiológica tienden a
morir, estas células dejan de recibir señales que les dicen
que cumplan una función o también en casos patológicos
como infección por virus se activa la muerte celular progra-
-mada que es un tipo de muerte producto de la propia célula y que genera la fragmentación de
esta y su eliminación por células fagocíticas, hay dos tipos de muerte celular, la que es
programada denominada apoptosis, que es un proceso concertado y totalmente regulado por la
célula y no produce inflamación y la necrosis que es un tipo de muerte celular por lesión directa,
donde esta se rompe, suelta su contenido citoplasmática y estas moléculas que están en el
contenido citoplasmático producen activación del sistema inmune e inflamación, lo cual
generalmente termina dañando aún más al tejido.
Este proceso es indispensable para controlar el crecimiento y desarrollo de organismos
multicelulares y eliminar células dañadas.

APOPTOSIS
En muchos casos es fisiológico, por ejemplo, el ser humano en estadios embrionarios y fetales tiene
membranas entre los dedos, estas membranas se van reabsorbiendo por apoptosis de la célula. Luego
otros órganos que están en estadios embrionarios y fetales que también van a involucionar.
La apoptosis esta mediada por:
 Proteínas efectoras,
 Proteínas adaptativas
 Proteínas reguladoras que pueden ser pro-apoptóticas (Bax) y anti-apoptóticas (Bcl-2)
 LA SEÑAL DE APOPTOSIS
Recluta a la señal adaptadora que sirve para reclutar unas proteínas
denominadas caspasas iniciadoras 8 y 9 estas caspasas son proteasas de
Cys y Asp, como cualquier proteasa son peligrosas y están inactivadas,
estas se tienen que dimerizar y solo se dimerizan en presencia de la
proteína adaptadora, una vez dimerizado, sufren un corte proteolítico
que liberan el sitio activo y este sitio activo es específico para activar otras
caspasas llamadas caspasas ejecutoras como la 3, la 6 y la 7 estas una vez
dimerizadas y con el corte proteolítico activa a su vez su sitio catalítico
que va a ejercer función sobre muchas otras proteínas que desencadenan
la apoptosis.
La más conocida es la ICAD, inhibidor de CAD que es una DNAasa activada
por caspasa, la caspasa ejecutora va a degradar al ICAD, va a dejar a la
DNAassa activa y esta DNAasa es la que se encarga de hacer la
degradación del ADN de la célula que va a sufrir apoptosis.

SEÑALES DE ACTIVACIÓN
1. VÍA EXTRÍNSECA MEDIADA POR RECEPTOR
El receptor normalmente está en otra célula, por ejemplo, una célula
citotóxica que tiene un ligando fas que es un receptor de muerte
celular, se encuentra en otra célula que sería la célula diana. El ligando
fas una vez unido al receptor fas se forma un complejo con una
proteína adaptadora que se denomina FADD, y esta a su vez recluta a
la caspasa iniciadora 8 a través del dominio de muerte, se forma un
complejo en la membrana llamadas DISC que es un complejo de
inducción a muerte celular por señalización y esto produce que la
caspasa iniciadora se active, en este caso para la vía extrínseca la caspasa 8 va a actuar sobre las demás caspasas ejecutoras.
2. VÍA INTRÍNSECA O MITOCONDRIAL
Es interna de la célula, por estímulos apoptóticos, como daño al ADN,
radicales libres altos, radiaciones gamma, todos estos terminan
dañando proteínas o materiales genéticos, entonces la mitocondria
puede liberar citocromo c de su espacio intermembrana al citoplasma,
al estar en el citoplasma se une a una proteína que se denomina Apaf1
esta libera un contenido denominado CARD que permite el ensamblaje
de 7 proteínas Apaf1 con citocromos, denominados apoptosoma, el
dominio CARD queda en la parte central del complejo y gracias a eso
puede reclutar a la caspasa 9 esta luego activa a las caspasas ejecutoras
en el complejo.

FAMILIA Bcl-2 (PROTEÍNAS REGULADORAS)

Es una familia de proteínas en la cual comparten un dominio llamado BH
 Las anti-apoptóticas (Bcl2, BclXL) tienen el dominio BH4, BH3, BH2, BH1
Las proteínas anti-apoptóticas de la familia Bcl2, como Bcl2 en sí y BclXL también
están ubicados en la superficie citosólica de la membrana mitocondrial externa,
donde ayudan a prevenir la liberación inapropiada de proteínas anti-apoptóticas
en la intermembrana.
 Las pro-apoptóticas efectoras (Bax, Bak) carecen del dominio BH4 pero
tienen BH3, BH2, BH1.
Las proteínas pro-apoptóticas de la familia Bcl2 constan de dos subfamilias: las
proteínas efectoras de la familia Bcl2 y las proteínas BH3-only. Las principales
proteínas efectoras son Bax y Bak, que son estructuralmente similares a Bcl2
pero carecen del dominio BH4. Las proteínas BH3-only comparten homología de
secuencia con Bcl2 solo en el dominio BH3.
 La pro-apoptóticas BH3-only (Bim, Bad) solo tienen este dominio.
Las proteínas Bax y Bak están en la membrana de la mitocondria y sus funciones
están inhibidas por las proteínas anti-apoptóticas Bcl-2, si por algún mecanismo
de inhibición las Bcl-2 se inhiben, las proteínas pro-apoptóticas Bax y Bak forman
un complejo poro en la membrana mitocondrial y se libera el citocromo c.
Las proteínas BH3-only son la subclase más grande de proteínas de la familia Cuando se activa por un estímulo apoptótico, las
Bcl2. La célula las produce o las activa en respuesta a un estímulo apoptótico, y proteínas efectoras de la familia Bcl2 se agregan en la
se cree que promueven la apoptosis principalmente al inhibir las proteínas de la membrana mitocondrial externa y liberan el citocomo c
familia Bcl2 anti-apoptóticas. y otras proteínas del espacio intermembrana al citosol
por un mecanismo desconocido.
 (A) En ausencia de un
estímulo apoptótico,
las proteínas anti-
apoptóticas de la
familia Bcl2 se unen
e inhiben las
proteínas efectoras
de la familia Bcl2 en
la membrana
externa
mitocondrial.

(B) En presencia de un estímulo apoptótico, las proteínas BH3-only se activan y se unen a las proteínas anti-apoptóticas de la familia Bcl2 de modo que
ya no pueden inhibir las proteínas efectoras de la familia Bcl2; estas últimas luego se activan, se agregan en la membrana mitocondrial externa y
promueven la liberación de proteínas mitocondriales intermembrana en el citosol. Algunas proteínas BH3-only activadas pueden estimular la liberación
de proteínas mitocondriales más directamente uniéndose y activando las proteínas efectoras de la familia Bcl2. Aunque no se muestra, las proteínas
anti-apoptóticas de la familia Bcl2 están unidas a la superficie mitocondrial.

EN LA VÍA MITOCONDRIAL LAS SEÑALES DE DAÑO DE LA CÉLULA:

 Activan las proteínas de tipo BH3 como Bin estas se encargan de inhibir a
las anti apoptóticas Bcl2 y BclX una vez inhibidas estas, la Bak y Bax pueden
formar el complejo poro y de esta manera liberar el citocromo c que junto
con la Apaf1 forman el apostosoma.
 También se liberan unas pequeñas moléculas que son inhibidoras
(SMAC/DIABLO) de un inhibidor de la apoptosis, conocidas como anti IAPs.
 Las vías extrínsecas e intrínsecas se interrelacionan a través de las caspasas
8 que tiene la capacidad de activar a la proteína BID que también fomenta
la formación del complejo poro en la mitocondria.
 La vía extrínseca tiene que activar a la vía intrínseca para que ocurra la
apoptosis, pero la apoptosis intrínseca por si sola puede activarla.

ACTIVACIÓN DE LAS CASPASAS

Las caspasas son proteínas que están inactivadas por una estructura y necesitan
de un corte proteolítico para su activación. En caso de que haya pequeñas
cantidades de caspasas activadas hay unas proteínas citoplasmáticas que son las
inhibidoras de la apoptosis, denominada IAPs, que se encargan de bloquear.
Debemos tener en cuenta el equilibrio, cuál de ellas hay más, si hay suficiente
estímulo se activarán suficientes caspasas y las IAPs no serán suficientes para
bloquearlas. Una vez que se activa la vía intrínseca, significa que hay mucha señal
de activación; del espacio intermembrana también salen las anti-IAPs, moléculas
que se encargan de inhibir a los inhibidores de la apoptosis, entonces con esto se
desencadena finalmente la apoptosis.
(A) VÍA INTRÍNSECA INACTIVA
En ausencia de un estímulo apoptótico, los IAP previenen la apoptosis accidental causada por la
activación espontánea de procaspasas. Los IAPs se encuentran en el citosol y se unen e inhiben cualquier
caspasas activadas espontáneamente. Algunos IAPs también son ligasas de ubiquitina, que ubiquitinan
caspasas a las que se unen, marcándolos para la degradación en los proteasomas.
(B) ACTIVACIÓN DE VÍA INTRÍNSECA
Cuando un estímulo apoptótico activa la vía intrínseca, entre las proteínas liberadas del espacio
intermembranal mitocondrial son proteínas anti-IAP, que se unen y bloquea la actividad inhibidora del
IAP. Al mismo tiempo, el liberado el citocromo c desencadena el ensamblaje de apoptosomas, que ahora
pueden activar una cascada de caspasas, que conduce a la apoptosis.

SUPERVIVENCIA CELULAR MEDIADA POR FACTORESEXTRACELULARES

Las células necesitan señales que activen los mecanismos anti apoptóticos,
y estas señales son los factores de supervivencia.
Tenemos 3 tipos básicos de actividad:
(A) El receptor de un factor de supervivencia que puede aumentar la
expresión de genes que codifican proteínas anti apoptóticas de la
familia Bcl-2, ayudando a inhibir la apoptosis.
(B) La inhibición de las proteínas BH3 por receptores de factores de
supervivencia, pero en este caso mediado por la vía PI3K-AKT, en el
cual la fosforilación de la proteína BH3 permite el aumento de la
concentración efectiva de proteínas anti apoptóticas y por ende el
bloqueo de la apoptosis.
(C) Por último, también el mecanismo de inactivación de los inhibidores
de las anti-IAPs, donde en este caso receptores de factores de
supervivencia, pero mediada
mediadaporporlalaMAP
MAPquinasa
quinasapueden
pueden fosforilar ciertas proteínas anti-IAPs como la Hid (cuando no está fosforilado
fosforilar
ciertas proteínas anti-IAPs como la Hid (cuando no está fosforiladoanti-IAPs las IAPS quedan libres y pueden bloquear la apoptosis.
promueve la muerte celular inhibiendo a IAP), una vez fosforilada la
promueve la muerte celular inhibiendo a IAP), una vez fosforilada la
anti-IAPs las IAPS quedan libres y pueden bloquear la apoptosis.