RIDASCREEN® CLENBUTEROL (R1711)

Descripción del cálculo de los factores de dilución

A continuación, se pretende explicar el cálculo de los factores de dilución reportados en el apartado 11 de las
instrucciones del producto, los cuales derivan del proceso de extracción descrito en el apartado 9, para cada
matriz. En el Cuadro 1 se describe brevemente el proceso de extracción aplicado en la muestra, indicando la
secuencia de cálculo aplicada durante cada etapa, para llegar al factor de dilución final.

Cuadro 1. Cálculo del factor de dilución

Secuencia de cálculo
Matriz Proceso de Por proporción másica Por diluciones
extracción acumuladas
Leche de
Aplicación directa Sin dilución, el resultado es absoluto, pues el factor es 1.0
bovino

Músculo 1 2 g. muestra + 6 ml 2.0 g + 6.0 ml  Vol Total 8.0 ml (sol. A) Dilución 1:4
Acetonitrilo
(agitar y centrifugar)

2
Transferir 4 ml del Si en 8 ml de sol. A hay 2 g de muestra, Dilución 1:4
sobrenadante entonces en 4 ml (el sobrenadante obtenido)
hay 1 gramo de muestra.

3 Secar Se evapora la fase acuosa, pero no el No hay dilución adicional o

contenido de clembuterol que había en el consecutiva.
gramo de muestra, así que se considera que el
residuo secado es equivalente a 1 gramo de
muestra.

4 Reconstituir en 2 ml 1.0 g (equivalente) en 2.0 ml  Vol. Total 2 ml Dilución 1:2 = 2.0

Así, el factor de dilución final se calcula:

2.0 / 1.0 = 2.0

Hígado 1 3 g muestra + 1.5 ml 3.0 g + 1.5 ml  Vol Total 4.5 ml (sol. A) Dilución 1:1.5 (Factor 1)
de Acetonitrilo
(Incubar + Vortex +
Centrifugar)

2 Tomar 250 µl del Si en 4.5 ml de sol. A hay 3 g de muestra, en 0.250 ml de un volumen

sobrenadante 0.250 ml (el sobrenadante obtenido) hay total de 0.750 ml hacen
+ 350 µl de React 1 0.1667 gramos de muestra, entonces: una dilución 1:3 (Factor 2)
+ 100 µl de React 2
(Incubar y centrifugar) 0.1667 g -------- 0.250 ml
+ 50 µl de React 3 sobrenadante
+ 0.350 ml
Reagent 1
+ 0.100 ml
Reagent 2
+ 0.050 ml
Reagent 3
Al final, la dilución resultante es: Se multiplican los factores
0.1667 g en 0.750 ml de dilución acumulados
(1 y 2):
Así, el factor de dilución final se calcula:
0.750 / 0.1667 = 4.499 ≈ 4.5 1.5 x 3.0 = 4.5

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Descripción del cálculo de los factores de dilución

Cuadro 1. Cálculo del factor de dilución (Continuación)

Secuencia de cálculo
Matriz Proceso de Por proporción másica Por diluciones
extracción acumuladas
Riñón 1 3 g muestra + 1.5 ml 3.0 g + 1.5 ml  Vol. Total 4.5 g (sol. A) Dilución 1:1.5 (Factor 1)
de Acetonitrilo
(Incubar, Vortex y
Centrifugar)

2 Tomar 300 µl del Si en 4.5 ml de sol. A hay 3.0 g de muestra, en 0.300 ml de un volumen
sobrenadante + 600 0.300 ml (el sobrenadante obtenido) hay 0.2 total de 0.900 ml hacen
µl de bufer de lavado gramos de muestra, entonces: una dilución 1:3 (Factor 2)

0.2 g -------- 0.300 ml

sobrenadante
+ 0.600 ml
Buffer de lavado
Al final, la dilución resultante es: Se multiplican los factores
0.2 g en 0.900 ml de dilución acumulados
(1 y 2):
Así, el factor de dilución final se calcula:
0.900 / 0.2 = 4.5 1.5 x 3.0 = 4.5

Orina Usar directamente en 0.025 ml + 0.025 ml  Vol. Total 0.05 ml

el pocillo:
25 µl de muestra Así, el factor de dilución final se calcula:
+ 25 µl de buffer de
lavado
0.05 / 0.025 = 2.0 Dilución 1:2 = 2.0

Pelo 1
(Lavar, enjuagar y 0.5 g + 5.0 ml  Para esta matriz, Dilución 1: 10 (Factor 1)
secar) se considera que el pelo no
0.5 g muestra +5.0 se disuelve, así que no se
ml de HCL 0.2 M toma como parte del
(Hervir y centrifugar) volumen total, que sería
5.0 ml (sol. A)

2 Tomar 200 µl del Si hay 0.5 g en 5.0 ml (total), en 0.200 ml hay 0.200 de un volumen total
sobrenadante 0.02 gramos de muestra original, entonces: de 0.500 ml hacen una
+ 100 µl de NaOH dilución 1:2.5 (Factor 2)
+ 200 µl de Na2HPO4 0.02 g -------- 0.200 ml
sobrenadante
+ 0.100 ml
NaOH
+ 0.200 ml
Na2HPO4
Al final, la dilución resultante es: Se multiplican los factores
0.02 g en 0.500 ml de dilución acumulados
(1 y 2):
Así, el factor de dilución final se calcula:
0.500 / 0.02 = 25 10 x 2.5 = 25

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Descripción del cálculo de los factores de dilución

Cuadro 1. Cálculo del factor de dilución (Continuación)

Secuencia de cálculo
Matriz Proceso de Por proporción másica Por diluciones
extracción acumuladas
Globo ocular (Extraer, recolectar y
1
homogeneizar el
cuerpo vítreo, humor
acuoso y epitelio de
retina)

2 0.5 g muestra + 0.5 0.5 g + 0.5 ml  Vol. Total 1.0 ml (sol. A) Dilución 1:2 (Factor 1)
ml de HCL 0.2 M
(Agitar y centrifugar)

3 Tomar 300 µl del Si en 1.0 ml de sol. A hay 0.5 g de muestra, en 0.300 de un volumen total
sobrenadante 0.300 ml (el sobrenadante obtenido) hay 0.15 de 0.450 ml hacen una
+ 50 µl de NaOH gramos de muestra, entonces: dilución 1:1.5 (Factor 2)
+ 100 µl de Na2HPO4
0.15 g -------- 0.300 ml
sobrenadante
+ 0.050 ml
NaOH
+ 0.100 ml
Na2HPO4
Al final, la dilución resultante es: Se multiplican los factores
0.15 g en 0.450 ml de dilución acumulados
(1 y 2):
Así, el factor de dilución final se calcula:
0.450 / 0.15 = 3.0 2.0 x 1.5 = 3.0

Alimento 1
2 g muestra + 5 ml de 2.0 g + 5.0 ml  Para esta matriz, Dilución 1:2.5 (Factor 1)
balanceado Acetonitrilo se considera que el feed
(Feed) (Agitar, enfriar y no se disuelve, así que no
centrifugar) se toma como parte del
volumen total, que sería
5.0 ml (sol. A)

2 Tomar 200 µl del Si en 5.0 ml de sol. A hay 2.0 g de muestra, en 0.200 ml de un volumen
sobrenadante 0.200 ml (el sobrenadante obtenido) hay 0.08 total de 0.800 ml hacen
+ 300 µl de React 1 gramos de muestra, entonces: una dilución 1:4 (Factor 2)
+ 200 µl de React 2
(Incubar y centrifugar) 0.08 g -------- 0.200 ml
sobrenadante
+ 100 µl de React 3 + 0.300 ml
React 1
+ 0.200 ml
React 2
+ 0.100 ml
React 3
Al final, la dilución resultante es: Se multiplican los factores
0.08 g en 0.800 ml de dilución acumulados
(1 y 2):
Así, el factor de dilución final se calcula:
0.800 / 0.08 = 10.0 2.5 x 4.0 = 10.0

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