concentracion ADN

obtención depastilla Cuantificación de acudos nuclercos

Concentraciones dac. nuclerco] 0D260 =

x 50LFD).x
50pg/pl
2.000
mg/pl Clasificacion de acidos nuclercos 100

0.202
mg/pl Electroforesis. FD factor de dilucion=V f= volumen total
=

va volumen alicuota

..160
mg/pt
pastilla.
->
Obtención de Coof. de extinción del ADN

Arriba de 1.8 tenemos ADN 50

Mg/ml
proteinas

Abajo de 1.3 son

net Fwn soc ARN ROMg/mh

fendles.
↓
confrifugamus 13,000 rpm x 10 mins.
e
-

⑧.-
Decantar
-100m->
Etcroot
sobrenadante boome

Decantar Sobrenudante

Despejar la pastilla

20 pl [ADNS
·x[Final]
=

para lavarla bien

I
odod
o

Absorbancas,

ARN:260 0.000 =
a 260 NM

A
A260
A
288
1.569
=
some
pt
I 100
Resuspender la

con He0> 5
pastilla
mins
-8
280 0.051
=
concentracion=
A
160Mg/m) Dejar secar pastillas en

ADNg 260 0.018AA 2 6 8

=
= 1.841
=

ADNp = 260
260 0.803 A 1.863
=
papel. Dejar que entre
A288 280

280 0.0*A
=concentracion 202Mg/m)
=
concentracion=2008
280=0.131A My/me arro.

Electroforesis Voltaje inicial de 80V. Estimarla concentracon. CADN/ARN/ADNp]=[ADNIx volumen diluido

Gel de
agaros a Preparar la camary a) Diluir 20 microlitros de muestra de a.c. en ml.

cl
Electroforesis TAE IX Fe 20pl
=
en 180 p H20 Ma

agarosa
al 0.7%
Dejar sol dif, can 1000p 50 ->
= 1 58
20 pt
cl TAE
IX * 100m1 b)Medirla absorbanera a 260 nm con celdas de cuarzo.
Colocar en un molde
↓
c) la concentración de ac. nuclercos 260 Nm= 1.0 en cada celda. de 1 cm equivale a 50
a
pg

man
Fundir en micropuls os
Dejar enfriar un de ADN por ml de agua.
por 15 seg
poco.

.
. .
* *
: