PROTOCOLO DE TRATAMIENTO DE MUESTRAS PARA EL

ANÁLISIS MEDIANTE CITOMETRÍA DE FLUJO

1. Homogeneizamos las muestras para conseguir una distribución uniforme de las células.

Volteamos suavemente para  Agitamos en el vórtex nuestras 
mezclar la sangre  células conjuntivales 

2. Alicuotamos las muestras en 5 tubos (50 μl para sangre y 200 μl para células conjuntivales). A
continuación, lavamos las células conjuntivales con 2 mL de Cell Wash Solution y centrifugamos
durante 5 minutos a 1.200 r.p.m. a 4ºC.

3. Añadimos los siguientes anticuerpos a cada tubo (la mitad para las células conjuntivales)

4. Agitamos e incubamos 15 minutos en oscuridad a Tª Ambiente y añadimos 0,5 ml de FACS-

LYSING 1X (Becton Dikinson 349202).

5. Por último, agitamos e incubamos 15 minutos en oscuridad a Tª Ambiente y realizamos la lectura

en el citómetro.

Figura 21. Protocolo utilizado para el análisis celular de las muestras de sangre periférica y conjuntiva. Únicamente la muestra de células
conjuntivales es la que se lava, la muestra de sangre periférica no necesita lavados.

MATERIALES Y MÉTODOS 
 
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