“TRANSFERENCIA DE

OXÍGENO EN
BIORREACTORES”

Augusto Castillo Calderón

Ingº Químico – Dr., M.S. en Ingeniería Bioquímica
acascal20@hotmail.com
 Transferencia de oxígeno en
biorreactores
La velocidad de transferencia o suministro
de oxígeno VTO juega un papel
importante en el escalamiento y economía
en la mayoría de los procesos de
fermentación aerobia, desde que éste
frecuentemente es el factor limitante en la
determinación del YX/S, YP/S y QP del
biorreactor.
 OBJETIVOS
La aireación y agitación en los procesos
fermentativos aerobios cumple los
siguientes objetivos:
➢Suministrar oxígeno necesario a los
microorganismos para alcanzar sus
actividades metabólicas apropiadas.
➢Mantener a los m.o. en suspensión.
 Transferencia de oxígeno en
biorreactores
• En laboratorio: matraces Erlenmeyer-a
través del shaker.
• A escala piloto e industrial: fermentadores-
aire comprimido y dispositivos mecánicos.

– En la producción industrial de levadura de

panificación la agitación sólo se da por el aire
comprimido que se esparce.
 Transferencia de oxígeno en
biorreactores
• El oxígeno disuelto en el caldo se considera
como un nutriente análogo a otros nutrientes
disueltos, tales como: azúcar, aminoácidos,
sales inorgánicas etc. Sólo que se
diferencian grandemente en su solubilidad.
– Solubilidad de nutrientes>10 000 mg/L
– Solubilidad de oxígeno<10 mg/L. (La
solubilidad O2 en agua pura a 30°C es 7 mg/L)
– Razón suministro continuo del caldo con
oxígeno
 Ejemplos de fermentaciones
industriales aireadas

• Enzimas (pectinasas, celulasas, lactasa…)

• Biomasa (levadura de panificación,….)
• Aminoácidos (ácido glutámico,……)
• Tratamiento aerobio de efluentes,..
• Etc.
Caso: Transferencia de O2 en
Fermentaciones sumergidas:

Area Superficial
Relacion para Tranferencia (r) =
Volumen de líquido

O2
”Volumen del medio 20-30%
del volumen del matraz”

O2
Mecanismo para aumentar Área
Superficial:

Difusor

Figura 1. Biorreactor de Tanque Agitado típico. 1) Agitador; 2) Rodete;

3) Eje del agitador; 4) Difusor de aire;
5) Serpentín de calentamiento/enfriamiento; 6) Bafles; 7) Motor.
El fermentador provisto, de un electrodo de OD marca HAMILTON
OXYFERMFDA previamente calibrado; de un motor de agitación de 140W (50-
1200 rpm), un difusor de aire, un agitador con dos rotores de disco tipo turbina,
un rotámetro de 4,2 L/min y de un compresor de diafragma BIOTRON.
 Demanda de Oxigeno: (NA)
Velocidad de consumo de oxígeno
➢NA = f(μ, biomasa)
 .x  M g .O2 
NA =  L3t ; L.h 
YO2

Donde:
gramos de celula acumulada
YO : Rendimiento :
2
gramos de O 2 consumido

YO : 0.5 − 2.0 g .cel. g .O 

2 2
O2 Como nutriente, es de baja
solubilidad en el agua

N : Etapa de no limitación por O2

L: Etapa limitada por O2
El oxigeno es un aceptor de electrones
(mitocondrias de los procariotes) pero
se comporta como nutriente
CL μ
 = m
K S + CL

d O 1 dx
NA = =
dt YO dt
2

0
CL
Donde: CL ≥ 10 KS
CL = Concentración de Oxigeno disuelto CL = Crítico
(mg/L, mmol/L)
50 − 200 m. moles de O 2
 L.h
Valores Usuales de N A = 
g. O 2
 1,6 − 3.2
 L.h

Demandas sobre 120 mmoles /L*h son valores muy altos, difíciles de satisfacer
Consumo especifico (QO) y
concentración critica (CL critica) de
Oxigeno para algunos m.o.
QO
CL critica
Microorganismo (mmoles/
(mg/L)
g.h)
Penicillum
3.2 0.4
crisogenun
S. cerevisiae 8.0 0.6
E. coli. 10.8 0.3
C. utilis - 1.1
 Transferencia de Oxigeno

(1) (3) (7)

(5)
(9)
(2) (6)
(4) (8)

9. Transporte
4.3.Transporte
Difusión del
del
7. del
solutosoluto
soluto
a a hasta
través
través
Transporte de
hasta ella
de lugar
la
la capa de
masade
envolturala
de reacción
liquido
liquido bioquímica
hasta
aparente
celular lainmóvil
capa de
5.
1.6.
Transporte
Difusión
Difusióndel
dentro
del
2. seno
8.
soluto
Paso
del
de la
floculo
aa traves
burbuja
través
celular,
dede
delala
gas
capa
micelo
envoltura
hasta
adyacente
o la
partícula
celular
interfase
al agregado
del
gas-liquido
suelo celular
a laPaso
intracelular
liquido aparentemente
adyacente a través
burbuja de adyacente
inmóvil
de gas la interfasealgas-liquido
agregado celular
 Transferencia de Oxígeno
Burbuja de aire
El paso limitante:
L Célula
G O2

Interfase Flujo molar O2 que se transfiere

Gas Liquido de la fase G. a la fase L.
PG (G) (L)
W ´g = k g ( PG − Pi )
CLi>CL Flujo en el liquido:
CL i
pi W ´L = kL (CL − CL )
i

CL
En estado estacionario:
W ´= W ´g = W ´L = k g ( PG − Pi ) = kL (CL − CL )
E i

Perfil de presiones parciales y concentraciones de Oxigeno

Alrededor de la Interfase Gas-Liquido
 Uso de la ley de Henry: presiones
parciales con concentraciones de líquidos
Para eliminar Pi y CLi de la ecuación, haciendo uso de las
relaciones de equilibrio de la figura, de pendiente H:

PG

pi P = HC
P*
1
C= P = H ´P
CL CLi CL * CL H

C: Concentración del gas en equilibrio

con el liquido
H: Constante de Henry
Dividiendo, se obtiene un coeficiente global
de transferencia de masa KL en función de
variables medibles
W ´= k g ( PG − HCL ) = K L (CL − CL )
i i

 W´ PG
 H .k = − C Li
H
 W´
g

 = C Li − C L
 k L

 1 1  PG
W ´ + = − CL
k  H
 L H .k g 

1 1 1
= + , H muy grande K L = kL
K L k L H .k g
 P 
De gráfica: W ´= K L  G − C L   W ´= K L (C L* − C L )
H 

Por área interfacial A: W ´´= K L A(CL* − CL )

En función del volumen del liquido del reactor si se define
la relación: Area Interfacial
a=
Volumen de liquido del reactor

Se obtiene la ecuación de velocidad de transferencia de

oxigeno (VTO):
VTO = W = Wa ´´= K L a(C * − CL )

La ecuación general de balance de oxigeno para un fermentador,

esta dado por el cambio total de la concentración de oxigeno en
el liquido:
dCL X
= K L a(C * − C L ) −
dt YO 2
El parámetro KLa ( en h-1), representa una
medida de la capacidad de aireación de
un fermentador en las condiciones de
cultivo, geometría del fermentador, diseño
del agitador, etc.
El coeficiente volumétrico de transferencia
de oxígeno KLa ( en h-1), es un parámetro
fundamental para el diseño, escalamiento,
operación y optimización de un
biorreactor.
De ahí que los valores del KLa para un
fermentador con un medio de cultivo
específico, deban determinarse
experimentalmente o estimarse y
correlacionarse, usando ecuaciones
empíricas o adimensionales, con el
objetivo de obtener las herramientas
apropiadas de diseño y control de
bioprocesos aerobios.
 Métodos para Evaluar el KLa

Método de oxidación del sulfito: Na2SO3

➢ Por estequiometria:
Sulfito Inicial - Sulfito Final
VTO =
2 t

➢ Reacción: 2 Na 2 SO3 + O2 ⎯⎯ Co 2+
⎯→ 2 NaSO4

VTO
CL = 0
KLa = *
C

➢Limitación del método

 Método Dinámico de Humphrey
➢ Mide KLa en presencia de microorganismos
➢ Requiere de un electrodo de Oxigeno Disuelto, tipo
galvánico o polarográfico

Pb
(Ánodo) A

Microamperimetro
➢ Semireacciones:
Membrana de teflón
Ag semipermeable
(Cátodo)
 Calibración del OD: en dos Puntos

❑ Punto en saturación con aire: 100%

❑ Punto en cero concentración O2 , electrodo en
solución de Na2SO3
A

x
0 100 CL

Método 1) de Desgasificación
dCL X dCL X
= K L a(C − C L ) −
*
=−
dt YO VTO = 0 dt YO
2
2
 Método 2) de gasificación

dCL X
= K L a(C * − C L ) −
dt YO
2

(gas Out)
Sin aire
Despejando CL
CL 1  X dCL 
CL = C * − +
K L a  YO
2
dt 

−
X dCL Graficando
YO
2 dt CL CL*
0.1CL*

t 1
−
Con aire K La
(gas in)
 X dCL 
 
 Y + dt 
 O 2 
 Método de medición Directa basado en la
Operación en Estado Estacionario

➢ Medir NA y KLa ➢ Medir bien: Flujo de aire,

presión, temperatura: e.e.
➢ Medir oxígeno gaseoso
➢ Medida O2 in y O2 out, por un
sistema analítico.
Por balance de O2 se obtiene
NA ➢ Para Fermentadores grandes

NA NA
KLa = KLa =
C * − CL (C * − C L ) media log
 Factores que afectan al KLa

➢ Operativos o por los característicos del

medio.
✓Viscosidad
✓Temperatura
✓Presencia de antiespumantes
✓Deflectores, etc.
 Valores típicos de VTO y kLa
Biorreactor VTO kLa
(mmoles/L*h) (h-1)
Matraz 30 - 60 200 - 400

Fermentador laboratorio 60 - 120 60 - 500

(< = 20 L)

Fermentador industrial 70 – 100 100 - 400

(> 5 000 L)
 Diferentes unidades de kLa
NA ΔC kLa
Lb O2/ft3*h Lb O2/ft3 h-1

g O2/m3*h g O2/m3 ó ppm h-1

mM O2/L*h mM O2/L h-1

Lb O2/ft3*h at Lb O2/ft3*h*at

mM O2/L*h at mM O2/L*h*at
 Eficiencia de absorción (  )

Q2 in − Q2 ant
ε =  100
Q2 in

Valores de 
para sistemas industriales 5 - 25%
(13 – 15%)
En condiciones de e. e.
dCL
=0
dt
VTO = N A = Q 2 in −Q2 ant

K L a (C* − CL ) Al inicio VTO, grande CL , ↓

ε = Al final VTO, disminuye CL ,↑
Q2 in
 Velocidad de Aireación
Específica (vvm)
Volumen de aire Flujo de aire Q
vvm = = =
Volumen de líquido  min . Volumen del líq. del Fermentador VL

deducida NA: g O2 / L. h.
N AT T: K
vvm = 2.035  10-4
ε Q: Litros / min.
VL: Litros

Valores típicos de vvm:

❖Laboratorio: 0.5 – 2.0 vvm.

❖Industrial: 0.2 – 0.7 vvm.
Velocidad superficial del aire (vS)

Flujo de aire
vS =
Área transversal del Fermentador

Q
vS =
A

Da una idea de un tiempo de residencia de las

burbujas de aire en el fermentador

Valores de vS = 30 – 300 cm/min.

 Correlación general del KLa

Pg α
K L a = K( ) (vS )β N γ
V

❖ α, β, γ constantes que dependen del sistema.

❖KLa: ƒ(geometría del fermentador, reología,
parámetros ambientales, variables de operación)
 Correlaciones de KLa

CORRELACION SISTEMA VOLUMEN REFERENCIA

(L)
KLa = Ki (Pg/v)0.95 (Vs) 0.67 Aguna con 5-65 Cooper et al.
KLa = Ki (Pg/v)0.72 (Vs) 0.11 iones 20000 (1994)
KLa = 42,167 (Pg/v)0.4 (Vs) 0.50 N 0.5 Caldo levadura 100-42000 Cooper et al.
KLa = Ki (N)1.33 (D)0.24 (Vs) 0.50 Aguna con 100-1000 (1994)
KLa = Ki (Pg/v)0.56 (Vs)0.7 N0.7 iones 500-1000 Richards (1961)
KLa = Ki (T)0.20 (H)-1.3 N1.5 D2.3 Aguna con 100- Fukuda et al.
Vs0.60 iones 100000 (1968)
KLa = 6,76x10-3 (Pg/v)0.94 (Vs) 0.65 Aguna con 8 Fukuda et al.
iones (1968)
KLa = 3,2x10-3 (Pg/v)0.35 (Vs) 0.41 2-15
Aguna con Asai of Komo
KLa = Ki (Pg/v)0.33 (Vs) 0.56 iones 20-30000 (1982)
Aguna con Vilaca et al. (2000)
iones Montes et al.
Caldo levadura (1999)
Caldo micelial Taguchi et al.
(1968)
 Correlaciones de KLa
Para agua – sulfito (Newtoniano)
KLa = 6,76 x 10-3 (Pg / v)0,94 (Vs)0,65

Para solución acuosa sulfito – goma xantano (No Newtoniano)

KLa = 7,76 x 10-3 (Pg / v)0,80 (Vs)0,62

KLa = ( a + b Ni) ( Pg )0,77 (Vs)0,67 , Cooper et.al

v

KLa = ( a + b Ni) (Pg/v) 0,56 (Vs)0,7 (N)0,4 , Richards

Correlaciones de KLa
Se analiza: Pg = c ( Po2 ND3 ) 0,45

Q0,56

Mejor Correlación:

KLa = Ki (Vs) (N)