Biomarcadores

Aplicaciones de la inmunohistoquímico en ciencias veterinarias.

Formulación de algoritmos diagnósticos para tipificación neoplásica

Generalidades
INMUNOHISTOQUÍMICA: es una técnica mu sensible y muy especifica que detecta antígenos que se
expresan en una matriz celular o tisular.

Los BIOMARCADORES MOLECULARES son los anticuerpos que usamos para detectar estos
antígenos, para ello se usan algoritmos diagnósticos.

ALGORITMO: se trata de un ordenamiento sistemático estructurado en una serie de pasos para llegar
a la solución de un problema en particular, en este caso nuestro problema es la tipificación de un
tumor.

¿CÓMO CREAMOS UN ALGORITMO? → Utilizando los paneles inmunohistoquímicos

Diferencia entre un panel y un algoritmo diagnóstico

Existen 4 tipos de paneles (primarios, secundarios, terciarios y cuaternarios) y son conjuntos de
anticuerpos los cuales se clasifican de forma jerárquica para especificar cuál es el origen y que
marcadores expresa un tumor. El algoritmo contextualiza estos 4 paneles, distribuyéndolos según
jerarquía.

• Finalidades según orden jerárquico:

1. DETERMINACIÓN DE ESTIRPE TISULAR (PRIMARIO)
▪ Se utiliza para la determinación de la estirpe celular (origen embrionario)
2. CARACTERÍSTICAS DE INMUNOFENOTIPO (SECUNDARIO)
▪ El inmunofenotipo corresponde al conjunto de moléculas que expresa una
célula, lo cual va a definir su identidad bioquímica y funcional
3. PATRÓN CINÉTICO DE INVASIÓN Y METÁSTASIS (TERCIARIO)
▪ Aquí hay que considerar que una neoplasia nunca es un fenómeno estático, se
debe estudiar a la neoplasia como un fenómeno dinámico, en movimiento en
función del tiempo. Y por esto, los biomarcadores terciarios son todos aquellos
relacionados con el potencial angiogénico, metastásico y también la capacidad
que tienen las células de inducir el desarme conformacional del cinturón de
adhesión, es decir, proteínas de las zónula adherens como la e-cadherina y
también invasión perineural (esto se ve en los carcinomas espinocelulares)
4. PRONÓSTICO DEL COMPORTAMIENTO EN FUNCIÓN DEL TIEMPO (CUATERNARIO)
 ▪ Establece el comportamiento en función del tiempo, de un tumor en relación a
todos los marcadores nucleares que están en los puntos de control y restricción
de la progresión del ciclo celular (PROTEÍNAS DE PANEL CUATERNARIO→CICLINAS,
KI-67, P53, P16, P21, ETC .).

Utilizando estos 4 paneles podemos tipificar correctamente una neoplasia y pronosticar su

comportamiento.

Caracterización Morfológica

Explicación del Diagrama

Para diagnosticar una neoplasia debemos caracterizarla morfológicamente y para ello nos basta con
la tinción corriente, hematoxilina-eosina (H-E). Con esta tinción podemos determinar si una lesión es
neoplásica o no neoplásica, en caso de que sea no neoplásica tenemos 3 posibilidades, puede ser una
patología INFLAMATORIA, INFECCIOSA O INMUNOMEDIADA (como una hipersensibilidad o una
reacción autoinmune → complejo pénfigo, isoeritrolisis neonatal, glomerulonefritis
mesangioproliferativa, etc.).

Las neoplasias pueden ser

̶ Malignas
• Bien diferenciada→ el tejido nos produce una semejanza a como era originalmente,
podemos ver fácilmente de donde proviene, su estirpe.
 • Pobremente diferenciada → vamos a tener ciertos problemas en diagnosticarlo
únicamente con la H-E y vamos a tener que tipificar con biomarcadores.
• hay un término medio pero el profe dijo que en este caso nos quedáramos con los
extremos
̶ Benignas

LAS LESIONES NEOPLÁSICAS, YA SEAN BENIGNAS O MALIGNAS, SE DEBEN TIPIFICAR SEGÚN SU ORIGEN EN PRIMER
LUGAR Y AQUÍ TENEMOS MORFOLOGÍA CONCORDANTE CON ORIGEN:

• EPITELIAL
o Pavimentosa: nos referimos a los epitelios de revestimiento pluriestratificados, ya
sean cornificados o no cornificados (piel, mucosa esofágica y epitelio
pseudoestratificado ciliado de bronquios)
o Glándula exocrina (glándulas que vierten su contenido a cavidades o exterior): acá
tenemos todos lo epitelios prismáticos y cúbicos simples o bicapas (el estómago)→
todos los adenocarcinomas de origen exocrino.
o Germinativo/embrionario: acá esto es bastante particular porque ambos expresan
CASI los mismos biomarcadores.
▪ Cuando hablamos de germinativo nos referimos al epitelio especializado que reviste
los túbulos seminíferos (en el caso del testículo) y al epitelio folicular ovárico
▪ Cunado hablamos de embrionario hacemos alusión a todo el tejido que se
encuentra en desarrollo, en crecimiento.
▪ OJO PIOJO: existen unas neoplasias llamadas indiferenciadas que tienen
comportamiento anaplásico, rasgos anaplásicos o primitivos. Por esto es que se
llaman embrionarios porque resemblan (asemejan) una morfología muy primitiva y
expresan los mismo biomarcadores que los germinales.
• MESENQUIMAL→todos los derivados del mesodermo
o FUSOCELULARES: fibrosarcoma bien diferenciado o fibrosarcoma atípico, originado a partir de
los fibroblastos
o CÉLULAS REDONDAS: todas derivadas de la línea hematopoyética, ya sea de linaje linfoide o
mieloide.
o PLEOMÓRFICOS: aquellas neoplasias con una anisocitosis severa y que adoptan una
morfología de variopinto, por ejemplo: células estrelladas, espiculadas triangulares, cubicas
→liposarcomas, osteosarcomas y condrosarcomas. (Hay ALGUNOS fibrosarcomas que
originados en fibroblastos también son pleomórficos→ esto tomarlo solo a modo de dato
freak)
o MIOEPITELIALES/MIOFBROBLÁSTICOS: son todas las neoplasias derivadas de las células que se
originaron en parte del neuroectodermo PERO que evolucionaron en tejido mesenquimal,
por lo tanto, son células con potencial contráctil, muy parecidas a las musculares, por eso se
llaman mioepiteliales (células mesangiales que se encuentran en el glomérulo o en el
yuxtaglomerular, las células mioepiteliales mamarias, etc.)
o MESOTELIAL: el mesotelio es aquellas capa bifoliada que reviste las cavidades serosas (pleura,
peritoneo, pericardio) y la neoplasias originadas en mesotelio son los mesoteliomas. Acá la
nomenclatura cambia del resto de las neoplasias derivadas de mesénquima.
o MIOGÉNICOS: derivados de musculatura lisa o estriada.
• NEUROENDOCRINO→ derivan tanto de neuroectodermo como del neurodermo. Hay 2 tipos:
o Endocrino: todos aquellos derivados del endodermo→tenemos todas las neoplasias que
antes se denominaban carcinoides (feocromositoma de la glándula adrenal, adenocarcinoma
endocrino pancreático (de los islotes de Langerhans y células de kulchitsky).
o Nervioso: de estirpe glial o neuronal
• NEUROECTODÉRMICO→ esta ligado al nervioso, precisamente porque cuando es de morfología
nerviosa, derivan del neuroectodermo (este es su origen embrionario)
o ¿POR QUÉ NO ESTÁ TOTALMENTE UNIDO?: porque el neuroectodermo origina muchísimos más
tipos celulares que solamente las nerviosas. Gran parte de las células que forman parte del
mesénquima se originan en la cresta neural.
o Para nuestro efectos, la única neoplasia que vamos a considerar como de un puro linaje
neuroectodérmico y que puede presentarse en distintos hitos anatómicos es el MELANOMA
que deriva de la cresta neural (al igual que otras células), pero que por su morfología tan
particular y por ser un gran simulador (EN POCAS PALABRAS SE CREE CAMALEÓN PERO LO DELATA LA
MELANINA QUE PRODUCE, A MENOS QUE SEA MELANOMA AMELANICO, ESE SÍ QUE SE SABE ESCONDER Y
PARA ESTE ES NECESARIO HACER EXAMENES COMPLEMENTARIOS) para el resto de las neoplasias, lo
vamos a considerar una entidad aparte aunque deriva de la cresta neural al igual que las
células gliales por ejemplo, y muchas de las células que están aquí.
Con respecto a la caracterización molecular debemos considerar que existen dos paneles de forma
global

1. PANELES DE CARACTERIZACIÓN:
o Se refiere a definir la identidad del tumor (como cuando a una persona le hace un
control de identidad, para saber quién es y también su información), quién es de
donde deriva el tumor.
i. Primario: determinar su estirpe mediante unas moléculas llamadas filamentos
intermedios. Gracias a esto podemos discernir si esta neoplasia es de origen
ectodérmica, endodérmica, mesodérmica o neuroectodérmica.
ii. Secundario: caracterizamos el inmunofenotipo (definimos lo que es) a través de una
moléculas denominadas productos celulares específicos. Con esto definimos la
identidad del tumor.
2. PANELES DE PRONOSTICO:
o Como crece, como se desarrolla, cual es su potencial angiogénico, su potencial
metastásico.
i. Terciario: se utilizan los marcadores de cinética invasiva, en donde tenemos los de
invasión perineural, cohesión y angiogénesis.
ii. Cuaternario: todos aquellos marcadores, predominantemente nucleares, que van a
controlar la progresión o detención del ciclo celular en caso de alguna mutación o
ruptura bicatenaria del ADN que puede desembocar en una neoplasia.

Embriogénesis
Después de la modulación, empezamos con la
formación del blastocisto, el cual es un disco
embrionario bastante sencillo que esta compuesto
inicialmente por una única capa de células que se
conoce como blastodermo y una cavidad que se
denomina blastocele. Con el tiempo el
blastodermo se va invaginando para formar una
segunda capa de células a la vez que este disco se
comienza a aplanar y se forma como se ve el disco
bilaminar (blástula) que está en la imagen de aquí
al lado.

La blástula esta compuesta de una capa externa llama epiblasto y una capa más interna denominada
hipoblasto. A posterior comienza la gatrulación y en la gástrula formamos un disco trilaminar,
ectodermo, mesodermo, endodermo. El ectodermo y el endodermo se juntan en los extremos del
gatropolo produciéndose la juntura mucocutánea formando al cavidad llamada gastrocele.
Embriogénesis trilaminar
De la gástrula tributamos a la neurula,
comenzando con la neurulación.

En la imagen se ve un corte axial media

de un embrión en el cual podemos ver
todas las hojas embrionarias más una
cuarta

̶ GASTROCELE: equivale a todo el

lumen del tubo digestivo, de boca
a orificio anal (ojo no confundir
esto NO ES hoja embrionaria)
̶ ENDODERMO: va a formar posteriormente el epitelio de revestimiento de toda la mucosa del tubo
digestivo adema de órganos como pulmón, riño, hígado, páncreas, algunas glándulas endocrinas
como la suprarrenal.
̶ MESODERMO: va a tributar a la formación de tejido conectivo (tejido óseo, muscular, endotelio,
vasos sanguíneos y linfáticos)
̶ ECTODERMO: va a formar la piel y los anexos cutáneo y las faneras(?) (piel, uñas, garras, etc.)

En el ectodermo dorsal comienza una invaginación para forma una estructura tubular que se va a ir
cavicando(?) posteriormente para formar una cuarta hoja embrionaria que se le conoce como
neuroectodermo.

Neuroectodermo (audio: 02:26:29 – 03:40:02)