Fundamentos de Bioquimica Metabolica

© Editorial Tébar.
Prohibida la reproducción sin la autorización expresa de la editorial

FUNDAMENTOS
DE BIOQUÍMICA
METABÓLICA
© Editorial Tébar. Prohibida la reproducción sin la autorización expresa de la editorial

FUNDAMENTOS
DE BIOQUÍMICA
METABÓLICA
COORDINACIÓN Y DIRECCIÓN CIENTÍFICA
Amando Garrido Pertierra José Mª Teijón Rivera
Catedrático de Bioquímica y Biología Molecular. Catedrático de Bioquímica y Biología Molecular.
Doctor en Ciencias Químicas y Farmacia. Universi- Catedrático de Física y Química de I.B. Doctor en
dad Complutense de Madrid. Académico de la Real Ciencias Químicas. Universidad Complutense de
Academia de Doctores y de la Real Academia de Madrid.
Farmacia.
AUTORES
Amando Garrido Pertierra José Mª Teijón Rivera
Catedrático de Bioquímica y Biología Molecular. Catedrático de Bioquímica y Biología Molecular.
Doctor en Ciencias Químicas y Farmacia. Universi- Catedrático de Física y Química de I.B. Doctor en
dad Complutense de Madrid. Académico de la Real Ciencias Químicas. Universidad Complutense de
Academia de Doctores y de la Real Academia de Madrid.
Farmacia.
Carlos Mendoza Otras
Carmen Villaverde Gutiérrez Catedrático de Ciencias Fisiológicas. Doctor en
Catedrática de Fisiología. Doctora en Medicina y Ciencias Biológicas. Escuela Universitaria de Cien-
Cirugía. Escuela Universitaria de Ciencias de la Sa- cias de la Salud. Universidad de Granada.
lud. Universidad de Granada.
Jesús Ramírez Rodrigo
Mª Dolores Blanco Gaitán Profesor de Bioquímica y Fisiología. Doctor en
Profesora Titular de Universidad de Bioquímica y Ciencias Biológicas. Escuela Universitaria de Enfer-
Biología Molecular. Doctora en Ciencias Biológicas. mería de Ceuta. Universidad de Granada.
Universidad Complutense de Madrid.
COLABORADORES
Ramón Bordes González César Teijón López
Catedrático de Bioquímica. Doctor en Ciencias Quí- Profesor de Bioquímica y Biología Molecular. Doc-
micas. E.U. de Ciencias de la Salud. Universidad de tor en Medicina y Cirugía. Colaborador Honorífico
Granada. Dpto. de Bioquímica. Universidad Alfonso X El Sa-
bio. Madrid.
Francisco Javier Calderón Montero
Profesor Titular de Fisiología. Doctor en Medicina y Ricardo Ruiz Villaverde
Cirugía. INEF. Madrid. Doctor en Medicina y Cirugía. Facultativo Especia-
lista del Complejo Hospitalario de Jaén.
Fernando de Jesús Franco
Profesor Titular de Farmacología. Doctor en Farma- Jesús Javier Rojo González
cia. Universidad Alfonso X el Sabio. Madrid. Profesor Titular de Anatomía. Doctor en Medicina y
Cirugía. INEF. Madrid.
Rosa Olmo López
Profesora de Bioquímica y Biología Molecular. Es-
cuela Universitaria de Enfermería y Fisioterapia.
“San Juan de Dios” integrada en la Universidad
Pontificia de Comillas. Doctora en Ciencias Quími-
cas (Bioquímica).
Belén Castel Segui
Médico Adjunto del Hospital Universitario San Du-
reta. Palma de Mallorca.

Datos de catalogación bibliográfica:
FUNDAMENTOS DE BIOQUÍMICA METABÓLICA

3ª edición
Amando Garrido Pertierra
José María Teijón Rivera
EDITORIAL TÉBAR, S.L., Madrid, año 2006
ISBN digital: 978-84-7360-459-8

Materias: 577, Bioquímica
Formato: 165 × 240 mm Páginas: 422
www.editorialtebar.com
Todos los derechos reservados.

Queda prohibida, salvo excepción prevista en la Ley, cualquier forma de reproduc-
ción, distribución, comunicación pública y transformación de esta obra sin contar
con la autorización expresa de Editorial Tébar. La infracción de estos derechos pue-
de ser constitutiva de delito contra la propiedad intelectual (arts. 270 y siguientes
del Código Penal).
Fundamentos de Bioquímica Metabólica

3ª edición 2009
© 2006 Editorial Tébar, S.L.
C/ de las Aguas, 4
28005 Madrid (España)
Tel.: 91 550 02 60
Fax: 91 550 02 61
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ISBN digital: 978-84-7360-459-8

Depósito legal:
Diseño editorial: Rebeca Irazábal

Diseño de portada: Omega Estudio Gráfico

Prólogo
La Ciencia avanza, por una parte con nuevos conceptos y
teorías y, por otra, con la invención de nuevos métodos e ins-
trumentos. El afán y la curiosidad natural de los hombres por
conocer la naturaleza de los seres vivos les llevó, desde los al-
bores de su existencia, a la observación directa de los organis-
mos enteros y sus partes más visibles y, en la mayoría de las
ocasiones, se ayudaban de materiales que utilizaban en sus ta-
reas domésticas como cuchillos y tijeras. Siglos después, la in-
vención y el desarrollo del microscopio permitió estudiar los te-
jidos y establecer el hecho general de que todos los seres están
formados por un gran número de unidades vivas denominadas
células y surgió la teoría celular. Estas observaciones aunque
importantes no proporcionaron respuestas a cuestiones funda-
mentales como ¿qué sustancias componen los seres vivos? y
¿cómo obtienen los organismos la energía y la utilizan para
manifestar las propiedades de la vida? Las respuestas a estas
preguntas se encuentran en la Bioquímica.
La Bioquímica es una ciencia que estudia los seres vivos a
nivel molecular. Uno de sus objetivos es el aislamiento de com-
puestos de los seres vivos y la determinación de sus estructuras;
esto es, un tipo de microanatomía que dilucida la estructura a
la diminuta escala molecular. Por ello su desarrollo ha estado
muy condicionado a la invención y desarrollo de nuevas técni-
cas e instrumentos. Éstos han permitido a esta ciencia identifi-
car las moléculas que constituyen los organismos, las reaccio-
nes que transforman unas sustancias en otras y los procesos
que les permiten desarrollar las actividades vitales. De esta for-
ma, la descripción y el estudio de la inmensa mayoría de los
procesos vitales pueden expresarse mediante conceptos, méto-
dos y procedimientos bioquímicos. Se ha comprobado que a
nivel molecular no hay grandes diferencias entre los organis-
mos y ello ha dado lugar a la teoría de la unidad bioquímica de
la vida. En los últimos años la utilización de refinadas técnicas
moleculares ha permitido caracterizar la naturaleza del material
hereditario. Los estudios sobre los genomas de los organismos
han refrendado la utilización de moléculas para describir los

procesos de la vida, su evolución y su variedad. El conocimien-
tos de los genes, su descripción y, sobre todo, su comprensión
está posibilitando entender los aspectos morfológicos, la evolu-
ción de las especies, el comportamiento de sus productos y la
función y disfunción de ellos. Además está permitiendo contro-
lar el desarrollo y la diferenciación de los órganos, el metabolis-
mo y proliferación de las células y, lo que es muy importante,
descifrar la causa y el origen de muchas enfermedades.
Con la idea de facilitar la comprensión de dichos procesos y
mecanismos vitales a los estudiantes de las licenciaturas y di-
plomaturas de Ciencias de la Salud y, basado en la experiencia
como profesores de la materia, han surgido estos libros de Bio-
química. El primero se dedica a los aspectos estructurales y en
él se describen las sustancias, sus propiedades y las funciones
que realizan en el organismo; en el segundo se tratan los aspec-
tos metabólicos, y en él se estudian las transformaciones de las
sustancias las cuales sirven para el funcionamiento normal del
organismo. Al inicio de cada tema se incluye una pequeña in-
troducción que fija el (o los) objetivo(s) a cumplir y, al final, un
resumen que repasa los conceptos más importantes y un apar-
tado dedicado a aplicaciones clínicas en el que se describen al-
gunos casos prácticos relativos al contenido del mismo.
Los autores desean expresar su agradecimiento a todos los
que han participado en la elaboración de la obra. Las críticas,
sugerencias y comentarios acerca de los contenidos de la mis-
ma serán bien recibidos y tenidos en cuenta en ediciones pos-
teriores.
Queremos agradecer la magnífica labor editorial desarrolla-
da por Beatriz Heras de Editorial Tébar, y la excelente maque-
tación de Rebeca Irazábal.

Índice
Tema 1: Metabolismo ...................................................................... 13
Introducción al metabolismo ................................................. 13
Reacciones catabólicas y anabólicas: etapas ......................... 14
El flujo de energía en las células ........................................... 16
La localización de las rutas metabólicas en la célula ............. 17
Regulación del metabolismo ................................................. 18
Resumen ............................................................................... 19
Aplicaciones clínicas .............................................................. 19
Tema 2: La ruta glucolítica ............................................................. 21
La ruta glucolítica ................................................................. 21
Las rutas de los átomos de carbono, la de la energía y la
de los electrones ............................................................. 27
Rutas afluentes de la glucolítica ............................................. 28
La regulación de la glucólisis ................................................. 30
Resumen ............................................................................... 31
Tema 3: El ciclo de Krebs ............................................................... 33
La reacción del complejo piruvato deshidrogenasa ............... 33
El ciclo de Krebs: reacciones y regulación ............................. 37
Reacciones anapleróticas ...................................................... 40
Resumen ............................................................................... 42
Tema 4: La ruta de las pentosas fosfato ...................................... 45
La ruta de las pentosas fosfato .............................................. 45
Etapa I .................................................................................. 45
Etapa II ................................................................................. 46
Rendimiento energético ........................................................ 49
Regulación de la ruta ............................................................ 51
Resumen ............................................................................... 51
Tema 5: Gluconeogénesis Glucogénesis-glucogenólisis ............ 53
Gluconeogénesis ................................................................... 53
Regulación de la ruta gluconeogénica ................................... 57
Glucogénesis y glucogenólisis ................................................ 59
Los ciclos de substrato .......................................................... 65
Resumen ............................................................................... 67
Tema 6: Metabolismo Lipídico ....................................................... 71
Digestión, movilización y transporte de los lípidos ................ 71
E-oxidación de los ácidos grasos ........................................... 75
Rendimiento energético de la oxidación de los ácidos
grasos ............................................................................. 81
Control de la oxidación de los ácidos grasos ......................... 86
Resumen ............................................................................... 88

Tema 7: Formación de cuerpos cetónicos. Cetosis o
cetogénesis .................................................................. 91
Formación de cuerpos cetónicos. Cetosis o cetogénesis ........ 91
Resumen ............................................................................... 96
Tema 8: Biosíntesis de ácidos grasos ........................................... 99
Biosíntesis de ácidos grasos .................................................. 99
Biosíntesis de ácidos grasos saturados a partir de
Acetil-CoA ...................................................................... 100
El complejo ácido graso sintasa ............................................ 110
Control de la síntesis de ácidos grasos .................................. 111
Resumen ............................................................................... 113
Tema 9: Metabolismo de acilgliceroles y esfingolípidos ........... 115
Metabolismo de triacilgliceroles ............................................. 115
Hidrólisis y movilización de triacilgliceroles ........................... 117
Metabolismo de glicerofosfolípidos ........................................ 118
Metabolismo de esfingolípidos .............................................. 123
Resumen ............................................................................... 126
Tema 10: Metabolismo del colesterol ............................................. 129
Biosíntesis del colesterol ........................................................ 129
Transporte y excreción de colesterol ...................................... 132
Regulación de la biosíntesis de colesterol .............................. 133
Resumen ............................................................................... 134
Tema 11: Metabolismo de los derivados del colesterol ............... 137
Síntesis de hormonas esteroideas .......................................... 137
Síntesis de ácidos biliares ...................................................... 139
Circulación enterohepática de las sales biliares ..................... 141
Síntesis de vitamina D ........................................................... 141
Resumen ............................................................................... 142
Tema 12: Lipoproteínas ..................................................................... 145
Lipoproteínas ........................................................................ 145
Receptores de lipoproteínas .................................................. 147
Metabolismo de las lipoproteínas .......................................... 148
Regulación de los depósitos de colesterol en el organismo .... 153
Resumen ............................................................................... 155
Tema 13: Aspectos bioquímicos de la nutrición ........................... 157
Requerimientos proteicos de la dieta ..................................... 158
Digestión de las proteínas. Activación de enzimas
proteolíticas .................................................................... 160
Absorción de péptidos y aminoácidos ................................... 164
Resumen ............................................................................... 165
Tema 14: Degradación de los aminoácidos ................................... 169
Transaminación y degradación oxidativa .............................. 169
Destino de los esqueletos carbonados de los aminoácidos .... 173
Resumen ............................................................................... 190
Tema 15: Excreción del nitrógeno proteico ................................... 193
Excreción del nitrógeno proteico ........................................... 193
Ciclo de la urea ..................................................................... 196
Conexión entre el ciclo de la urea y el ciclo de Krebs ............ 198

Resumen ............................................................................... 198
Tema 16: Biosíntesis de aminoácidos ............................................. 203
Biosíntesis de amioácidos no esenciales ................................ 203
Biosíntesis de amioácidos esenciales ..................................... 208
Resumen ............................................................................... 215
Tema 17: Biosíntesis de porfirinas .................................................. 217
Biosíntesis de porfirinas y del grupo hemo ............................ 217
Regulación ............................................................................ 220
Formación de pigmentos biliares ........................................... 221
Resumen ............................................................................... 223
Tema 18: Metabolismo de los nucleótidos: biosíntesis y
degradación ........................................................................ 225
Digestión de purinas y pirimidinas: vías de recuperación o
salvamento ..................................................................... 226
Biosíntesis de novo de los nucleótidos de purina .................. 228
Biosíntesis de novo de nucleótidos de pirimidina .................. 234
Síntesis de desoxirribonucleótidos ......................................... 237
Biosíntesis de los desoxirribonucleótidos de timina ............... 242
Degradación de purinas: síntesis de ácido úrico .................... 243
Degradación de pirimidinas .................................................. 246
Fármacos anticancerosos que bloquean las vías de
biosíntesis de nucleótidos ............................................... 246
Resumen ............................................................................... 249
Tema 19: Integración del metabolismo en mamiferos ................. 255
Absorción, transporte y regulación ........................................ 255
Bases bioquímicas de la nutrición ......................................... 261
Resumen ............................................................................... 266
Tema 20: Características metabólicas de los principales
órganos ............................................................................... 269
Hígado .................................................................................. 269
Cerebro ................................................................................. 272
Corazón ................................................................................ 273
Riñón .................................................................................... 273
Músculo esquelético .............................................................. 273
Resumen ............................................................................... 276
Tema 21: La regulación hormonal del metabolismo .................... 279
La acción de las hormonas ................................................... 279
Hormonas activas en la superficie celular ............................. 280
Receptores ............................................................................ 280
Segundos mensajeros ............................................................ 282
Hormonas activas en el interior de la célula .......................... 282
Efectos biológicos .................................................................. 283
Resumen ............................................................................... 285
Tema 22: Estructura de cromosomas y genes ............................... 289
Cromosomas ......................................................................... 289
Genes ................................................................................... 292
ADN: estructura y propiedades ............................................. 293
Mutaciones ............................................................................ 296
Resumen ............................................................................... 299

Tema 23: Replicación y transcripción del ADN ............................ 301
Replicación del ADN ............................................................. 301
ADN polimerasas .................................................................. 308
Transcripción ......................................................................... 311
Polinucleótido fosforilasa ....................................................... 316
Transcriptasa inversa y replicasas .......................................... 316
Resumen ............................................................................... 317
Tema 24: Síntesis de proteínas ........................................................ 321
Ribosomas ............................................................................ 322
Activación de aminoácidos ................................................... 323
Iniciación y ciclo de elongación ............................................. 325
Inhibidores de la síntesis de proteínas ................................... 329
El código genético ................................................................. 330
Resumen ............................................................................... 333
Tema 25: Tecnología de ADN recombinante ................................. 337
Fundamentos de la clonación ............................................... 337
Vectores de clonación ........................................................... 341
Estrategia de la clonación ..................................................... 346
Aplicaciones a las ciencias médicas ....................................... 350
Resumen ............................................................................... 351
Tema 26: Regulación de la expresión génica ................................. 353
El modelo del operón ........................................................... 353
Genomas eucarióticos ........................................................... 357
Proteínas reguladoras de la transcripción .............................. 361
Resumen ............................................................................... 364
Tema 27: Introducción a la inmunología molecular ..................... 367
Sistema Inmunitario .............................................................. 367
Inmunoglobulinas: estructura y función ................................. 376
Clases de inmunoglobulinas .................................................. 378
Resumen ............................................................................... 380
Tema 28: Estructura molecular del músculo ................................. 383
Estructura de la fibra muscular esquelética ............................ 383
Estructura molecular del músculo esquelético ....................... 384
Mecanismo de la contracción muscular ................................. 386
Control de la contracción muscular por calcio ....................... 389
El músculo cardíaco .............................................................. 392
El músculo liso ...................................................................... 393
Fuentes de energía en el músculo ......................................... 395
Resumen ............................................................................... 396
Tema 29: Estructura y función del nervio ...................................... 399
Estructura y función del nervio ............................................. 399
Sinapsis y neurotransmisores ................................................ 405
Resumen ............................................................................... 410
Tema 30: Bioquímica de la visión ................................................... 413
Fotorreceptores ..................................................................... 413
Resumen ............................................................................... 419
Bibliografía ........................................................................................... 421

TEMA 1 Metabolismo
Introducción al metabolismo. Reacciones catabóli-

cas y anabólicas: etapas. El flujo de energía en las
células. La localización de las rutas metabólicas
en la célula. Regulación del metabolismo.
En la bioquímica estructural hemos examinado las propie-

dades y estructura de las moléculas que constituyen las células.
En esta parte, Bioquímica metabólica, vamos a estudiar cómo
interaccionan esas moléculas para originar y mantener la pro-
piedad que denominamos vida. Para ello, las células realizan
un conjunto de reacciones catalizadas por enzimas que se de-
nomina metabolismo. Estas reacciones se llevan a cabo de for-
ma constante desde la absorción de nutrientes, su degradación
para obtener energía, la utilización de ésta, la síntesis de nue-
vos componentes y la liberación de productos de deshecho. To-
dos estos procesos los realiza la célula manteniendo un equili-
brio dinámico, autorregulándose y cumpliendo con el principio
de máxima economía.
INTRODUCCIÓN AL METABOLISMO
El metabolismo se puede definir como el conjunto de reac- El metabolismo es el

ciones catalizadas enzimáticamente que tienen lugar en la célu- conjunto de reaccio-
nes que tiene lugar
la viva. En él se pueden distinguir cuatro funciones específicas: en las células vivas.
1. Obtener la energía química de los nutrientes.
2. Transformar las moléculas de los nutrientes en unidades
constitutivas o sillares, precursores de los componentes
macromoleculares de las células.
3. Unir o ensamblar los sillares en proteínas, ácidos nu-
cleicos y lípidos, polisacáridos y otros componentes ce-
lulares.
4. Sintetizar y degradar las biomoléculas con funciones es-
pecializadas.

14 FUNDAMENTOS DE BIOQUÍMICA METABÓLICA
Estas funciones no se realizan de forma aislada o inde-

pendiente sino de forma coordinada y organizada. Cada
orgánulo o subunidad celular posee funciones específicas
para establecer y mantener la vida de la célula. Así, algunas
están comprometidas en generar energía para la absorción
de sustancias nutritivas, otras en la movilidad celular o en la
síntesis de biomoléculas. En los organismos superiores, como
el hombre, existen determinadas células o tejidos especializa-
dos en funciones como los glóbulos rojos para el transporte
de oxígeno, las células musculares para la locomoción, las
células glandulares endocrinas para la secreción de hormo-
nas y las células nerviosas (neuronas) para la coordinación
intercelular.
Las secreciones metabólicas están controladas con precisión
por sistemas intrínsecos y extrínsecos, estrechamente interrela-
cionados. El estado dinámico del metabolismo y sus mecanis-
mos reguladores son las características más excepcionales de la
vida, por ello su comprensión es primordial en el entendimien-
to e interpretación de los procesos vitales.
REACCIONES CATABÓLICAS Y
ANABÓLICAS: ETAPAS
El metabolismo tiene lugar a través de secuencias de reac-

ciones consecutivas en las que se transforman los intermedia-
rios químicos o metabolitos.
El metabolismo com- El metabolismo se divide en catabolismo y anabolismo. El
prende el anabolismo catabolismo es la fase degradativa del metabolismo en la que
o conjunto de reac-
ciones de síntesis y el los nutrientes (carbohidratos, lípidos, proteínas) provenientes
catabolismo o con- del medio externo o de los depósitos de la misma célula pue-
junto de reacciones den degradarse generalmente por reacciones oxidativas en pro-
de degradación.
ductos más sencillos como ácido láctico, ácido acético, amonía-
co, urea o CO2. El catabolismo va acompañado de liberación
de la energía inherente en la estructura compleja de las grandes
moléculas orgánicas. La energía es transformada en forma de
adenosina trifosfato (ATP).
El anabolismo es la fase constructiva o de síntesis del meta-
bolismo. También se denomina biosíntesis. En el anabolismo
las pequeñas moléculas precursoras de las células se ensam-
blan para originar componentes celulares como polisacáridos,
ácidos nucleicos, proteínas y lípidos. Puesto que del proceso de
biosíntesis resultan moléculas de mayor tamaño y complejidad
estructural, requiere energía libre, la cual es proporcionada por
la hidrólisis del ATP. El catabolismo y el anabolismo tienen lu-
gar simultáneamente en la célula.

METABOLISMO 15
El metabolismo se puede organizar en etapas: tres para el

catabolismo y tres para el anabolismo (Fig. 1.1). En la etapa I
del catabolismo los nutrientes de la célula (lípidos, carbohidra-
tos y proteínas) son degradados a sus unidades constituyentes:
grasas, monosacáridos y aminoácidos. En la etapa II estos pro-
ductos se convierten en moléculas más sencillas que convergen
en su intermediario común: acetil-CoA. En la etapa II el grupo La etapa III del cata-
acetilo del acetil-CoA entra en el ciclo de Krebs para ser oxida- bolismo es la misma
que la etapa I del
do a CO2 y H2O, los productos finales del proceso catabólico. anabolismo y se de-
nomina anfibólica.
Figura 1.1.– Las etapas del catabolismo y del anabolismo. La etapa III del
catabolismo y I del anabolismo coinciden, por ello se denomina anfibólica.
El anabolismo también transcurre en tres etapas. Co-

mienza con las pequeñas moléculas de la etapa III del cata-
bolismo, como son los intermediarios del ciclo de Krebs, los
cuales son aminados o transformados en aminoácidos, áci-

dos grasos o monosacáridos. En la etapa III del anabolismo

estas moléculas se ensamblan para formar proteínas, lípidos
y polisacáridos.
Hay que destacar dos hechos:
1º. Cada etapa en el catabolismo o en el anabolismo im-

plica una serie de reacciones catalizadas enzimática-
mente.
2º. La etapa III del catabolismo coincide con la etapa I del
anabolismo, por eso debido a su función doble se de-
nomina anfibólica.
EL FLUJO DE ENERGÍA EN LAS CÉLULAS
Cuando una molécula como la glucosa es degradada a CO2

y H2O, proporciona por cada mol 686 kcal; ésta es la misma
cantidad de calor que se libera cuando se quema en un calorí-
metro; y es que las oxidaciones biológicas son en esencia com-
bustiones. El calor no puede ser utilizado como fuente de
energía por los organismos vivos, los cuales son esencialmente
isotermos, por eso se dice que es energía degradada o degene-
rada. Como se sabe, el calor sólo puede producir trabajo desde
un recipiente a otro con menor temperatura. Por ello, la energía
contenida en los nutrientes celulares se conserva en forma de
energía química que puede realizar trabajo en condiciones iso-
termas. La energía química de los combustibles metabólicos se
transforma en adenosina trifosfato (ATP), el cual se forma a
partir de ADP y fosfato inorgánico mediante reacciones en-
zimáticas acoplados a reacciones oxidativas específicas durante
el catabolismo.
El ATP es la forma El ATP puede difundir a aquellos lugares de la célula en
universal de transpor- que se requiere. El ATP es en realidad una forma de transpor-
te de la energía que
transfiere al hidroli- te de energía química que se libera al hidrolizarse el fosfato
zarse en ADP y Pi. terminal y es transferido a aceptores específicos los cuales se
“energizan” y pueden reaccionar con facilidad y/o unirse a
otras moléculas para originar grandes moléculas durante el
anabolismo.
El NAD+ es la coenzi- Hay otra forma de transferir energía química desde las reac-
ma de la mayoría de ciones del catabolismo a aquellas que requieren energía de sín-
las reacciones de oxi-
dación. El NADPH, la tesis y es mediante la forma de átomos de hidrógeno o electro-
coenzima de la ma- nes. Estas moléculas portadoras son coenzimas como el
yoría de las reaccio- NADH, NADPH o FMNH2 y actúan reduciendo a otras molé-
nes de reducción.
culas o, en ocasiones, transformando su capacidad reductora
en moléculas de ATP.

METABOLISMO 17
LA LOCALIZACIÓN DE LAS RUTAS

METABÓLICAS EN LA CÉLULA
En las células de los organismos superiores las rutas me- Las enzimas de glu-
tabólicas se realizan en orgánulos o compartimentos, lo que fa- cólisis se encuentran
en el citosol y las del
cilita el desarrollo de las mismas y su regulación. Esta conclu- ciclo de Krebs, en las
sión se ha obtenido de trabajos de investigación en los que se mitocondrias.
han separado los orgánulos o subfracciones y, a partir de ellos,
aislado y purificado las enzimas correspondientes. Se ha com-
probado, por ejemplo, que las enzimas que catalizan la conver-
sión de glucosa en ácido láctico se encuentran en el citosol,
que es la porción soluble del citoplasma, mientras las del ciclo
de Krebs se localizan en las mitocondrias. De la misma forma
se ha comprobado que las enzimas del transporte electrónico
se encuentran en la membrana interna de las mitocondrias y
las que intervienen en la síntesis de las proteínas, en los riboso-
mas. Una visión más amplia de la localización de las enzimas
en una célula hepática se puede observar en la figura 1.2.
Figura. 1.2.– Localización de las enzimas de algunas rutas metabólicas

en una célula de hígado.

REGULACIÓN DEL METABOLISMO
Como se ha indicado anteriormente, la célula realiza todos

los procesos con la máxima eficacia y utilizando el menor con-
sumo de energía posible. Por ello, el metabolismo celular se en-
cuentra regulado de forma precisa y constante. En realidad y
de forma general se puede establecer que el ritmo del metabo-
lismo se controla por las necesidades energéticas de la célula,
esto es, las células oxidan las moléculas combustibles a la mis-
ma velocidad que requieren energía.
Existen tres mecanis- La regulación de las rutas metabólicas se puede efectuar
mos por los que se mediante tres clases diferentes de mecanismos. La primera y
regula el metabolis-
mo en células de or- más inmediata respuesta es a través de las enzimas regulado-
ganismos superiores. ras. Estas enzimas ejercen su acción próxima a la cabecera
de las rutas metabólicas catalizando la reacción limitante de
la secuencia. En las rutas catabólicas que conducen a la for-
mación de ATP o NADH estos compuestos son los inhibido-
res alostéricos, mientras en las rutas anabólicas es el produc-
to final de la ruta el que actúa de inhibidor. Como se ha des-
crito en el tema 16 de la Parte 1ª, las enzimas alostéricas
suelen ser activadas o estimuladas por moduladores positivos
específicos como ADP y NAD.
El segundo nivel de regulación metabólica se ejerce a través
del control de la concentración de una enzima. La concentra-
ción de una enzima en cualquier momento es el resultado de
un equilibrio entre la velocidad de síntesis y su degradación. La
velocidad de la síntesis de las enzimas varía dependiendo de
las condiciones. Las enzimas que se encuentran presentes en
cantidades constantes en la célula se denominan constitutivas.
Las que son sintetizadas en respuesta a la presencia de algunos
substratos se denominan inducibles. Los genes que especifican
la síntesis de las inducidas están generalmente reprimidas y
actúan únicamente solo en respuesta a la presencia de substra-
tos específicos.
El control metabólico se ejerce también a un tercer nivel
en los organismos superiores. Las hormonas, sintetizadas y
secretadas por varias glándulas endocrinas, son mensajeros
químicos que estimulan o inhiben actividades metabólicas en
otros órganos y tejidos. Por ejemplo, la deficiencia de la se-
creción de insulina por el páncreas origina un defecto en el
transporte de glucosa en las células del músculo y del hígado,
lo cual conduce a una serie de efectos metabólicos secunda-
rios como un descenso en la biosíntesis de ácidos grasos a
partir de glucosa y una excesiva formación de cuerpos cetóni-
cos por el hígado. La administración de insulina repara estos
defectos.

METABOLISMO 19
RESUMEN
El metabolismo es el conjunto de reacciones cataliza-

das enzimáticamente que tienen lugar en las células vivas.
Cumple con cuatro funciones específicas que se realizan
de forma coordinada: obtener energía química de los nu-
trientes, transformar estos en moléculas sencillas, unir y
transformar estos para obtener los componentes celulares
y sintetizar y degradar las biomoléculas especializadas. El
metabolismo se puede dividir en catabolismo o procesos
degradativos y anabolismo o procesos biosintéticos. Tanto
el catabolismo como el anabolismo se pueden ordenar en
tres etapas que implica cada una, una serie de reacciones
enzimáticas. La energía química que se obtiene de los nu-
trientes se transforma en ATP que es el compuesto porta-
dor de energía para los procesos que lo requieren: trabajo
mecánico, biosintético y de transporte. En las células ani-
males los procesos bioquímicos se localizan en diferentes
orgánulos o compartimentos, lo que facilita la regulación
que se realiza a tres niveles; mediante las enzimas alostéri-
cas, la síntesis de enzimas y las hormonas.
APLICACIONES CLÍNICAS
Las células animales no pueden llevar a cabo un metabolis-

mo completo como les sucede, por ejemplo, a las células bacte-
rianas, debido a que a lo largo de la evolución han perdido la
capacidad de sintetizar todos los compuestos que requieren
para la vida. Por ello dependen de otros organismos para el su-
ministro de dichos compuestos. Pero, además, en ocasiones las
células humanas sintetizan enzimas defectuosas o defectivas, o
bien producen cantidades insuficientes de una enzima que se
traduce en un suministro insuficiente de un compuesto me-
tabólico esencial. Por ello, una enfermedad metabólica puede
derivar de la incorrecta expresión de una enzima.
La determinación de la actividad de una enzima en los lí-
quidos biológicos o tejidos constituye un indicador valioso de
una determinada enfermedad metabólica.

Tabla 1.1.– Algunos ensayos enzimáticos que se utilizan en

el diagnóstico de enfermedades.
Actividad enzimática
Diagnóstico probable
disminuida
Amilasa Enfermedad pancreática
Alanina aminotransferasa Enfermedad cardíaca
Aspartato aminotransferasa Enfermedad cardíaca
Glutamato aminotransferasa Enfermedad cardíaca
Fosfatasa ácida Carcinoma prostático
Fosfatasa alcalina Enfermedad ósea
Creatina Enfermedad cardíaca o muscular
Glucosa 6-fosfato deshidrogenasa Anemia hemolítica
Lactato deshidrogenasa Enfermedad cardíaca
Hexosa 1-P uridil transferasa Galactosemia
Glutatión reductasa Anemia
Elastasa Enfermedad del colágeno

TEMA 2 La ruta glucolítica
La ruta glucolítica. Las rutas de los átomos de car-

bono, la de la energía y la de los electrones. Rutas
afluentes de la glucolítica. La regulación de la
glucólisis.
La glucólisis (hidrólisis de azúcar) es el proceso por el que

los organismos escinden la glucosa en ácido láctico en ausencia
de oxígeno molecular con el propósito de obtener energía.
Otros hidratos de carbono utilizan esta ruta para degradarse,
por eso se denomina también la ruta central del metabolismo
de carbohidratos, la ruta de Embden-Meyerhof o la fermenta-
ción glucolítica. Hay otros tipos de fermentación en que el pro-
ducto final no es el ácido láctico, como las fermentaciones al-
cohólicas o acética.
Los hidratos de carbono constituyen la principal fuente
de energía en la dieta humana (aprox. el 47%) y la mayor
parte corresponde a polisacáridos como glucógeno y al-
midón, el resto a la glucosa y disacáridos como lactosa, glu-
cosa y maltosa.
LA RUTA GLUCOLÍTICA
Los carbohidratos de la dieta son digeridos y absorbidos

en el intestino delgado pasando por vía portal a la sangre. En
un período de 30-60 minutos después de la comida se alcan-
za en sangre, generalmente, un nivel máximo de 130 mg/dl La glucólisis anaeró-
(7,2 mol/L) que disminuye a las dos o dos horas y media a bica (fermentación) y
la glucólisis aerobia
70-90 mg/dl. Por la sangre la glucosa llega al hígado donde se o r i g i n a n p i r u v a t o.
metaboliza más del 60%. En condiciones normales el hígado Después el destino
contiene poca glucosa libre ya que bien la convierte en glucó- de este compuesto es
diferente.
geno o la fosforila a glucosa 6-fosfato, que como es impermea-
ble a la membrana plasmática la mantiene retenida en la célula
y en el tejido muscular.

En el hígado y en el tejido muscular la glucosa se degrada

mediante una serie de intermediarios fosforilados que se deno-
mina ruta glucolítica o ruta de Embden-Meyerhof. En la ruta
glucolítica se pueden considerar dos etapas. La primera sirve
de preparación y en ella varias hexoras pueden entrar median-
te fosforilación a expensas de ATP. Estos compuestos se con-
vierten en fructosa 1,6-bisfosfato que se excinde para dar dehi-
doxiacetona fosfato y gliceraldehído 3-fosfato.
Fosforilación de la glucosa. Es la primera reacción de la

primera etapa y en ella la glucosa se fosforiza a glucosa 6-fosfa-
to a expensas de ATP. Esta reacción que es irreversible en con-
diciones intracelulares es catalizada por la hexoquinasa:
hexoquinasa
*D-glucosa ATP o
m D-glucosa-6-fosfato ADP
2
Mg
'G 0c 4,0 kcal/mol
La hexoquinasa cataliza también la fosforilación de otras

hexosas como fructosa y manosa. La enzima requiere iones
Mg2 que se combinan con ATP para formar el verdadero subs-
trato Mg ATP2, es inhibida por su propio producto y algunos
reactivos sulfhidrilos.
La glucoquinasa ac- El hígado funciona como un regulador de la glucosa sanguí-
túa cuando el nivel nea: cuando los niveles de glucosa son elevados, ésta se meta-
de glucosa es alto en
la sangre. boliza a través de la ruta glucolítica o almacenada como glucó-
geno; cuando los niveles son bajos, se moviliza a partir de
* A partir de ahora y mientras no se especifique lo contrario todos los mono-

sacáridos y sus derivados son D.

LA RUTA GLUCOLÍTICA 23
glucógeno. En el hígado hay una segunda enzima que fosforila

la glucosa en el hígado, la glucoquinasa, que es específica de la
glucosa; esta enzima tiene menor afinidad por la glucosa que la
hexoguinasa y actúa únicamente cuando el nivel de glucosa
sanguínea es anormalmente alto, como ocurre en la enferme-
dad diabetes mellitus.
Isomerización de la glucosa 6-fosfato. La conversión

de glucosa 6-fosfato a fructosa 6-fosfato es catalizada por la
fosfogluco isomerasa:
fosfogluco isomerasa
glucosa 6-fosfato o
m fructosa 6-fosfato
Mg2
'G 0c 0,4 kcal/mol
La reacción transcurre rápidamente en ambas direcciones

debido a su pequeña variación de energía libre. La enzima re-
quiere para su actividad Mg2 o Mn2.
Fosforilación de fructosa 6-P. Es la segunda reacción de

fosforilación por otra molécula de ATP y catalizada por la fosfo-
fructoquinasa (Fig. 2.1).
fosfofructo
quinasa
fructosa 6-fosfato ATP o
m fructosa 1,6-bisfosfato ADP
'G 0c 3,40 kcal/mol
Figura 2.1.– La primera etapa de la glucólisis. En ella se utiliza ATP

para fosforilar los azúcares.

La fosforilación de la fructosa 6-P es una reacción esen-

cialmente irreversible como corresponde al valor de 'G 0c y es
un punto clave en la ruta glucolítica. La fosfofructoquinasa es
una enzima reguladora alostérica, con un peso molecular alto
(360.000); es activada por moduladores positivos como ADP,
AMP y fructosa 2,6-bisfosfato, e inhibida por moduladores
negativos como ATP y citrato. La fructosa 1,6-bisfosfato au-
menta la afinidad de la enzima por la fructosa 6-fosfato y dis-
minuye la inhibición por ATP; además, su activación es sinér-
gica con el AMP.
Escisión de fructosa 1,6-bisfosfato. Esta reacción es

catalizada por la aldolasa:
aldolasa
La aldolasa rompe la fructosa 1,6-bisfosfato o
m dihidroxiacetona fostato
2
Mg
fructosa 1,6-bifosfato gliceraldehído 3-fosfato
en condiciones intra-
celulares a pesar de 'G 0c 5,73 kcal/mol
su DG0' positivo en
condiciones estándar. Aunque esta reacción tiene un 'G 0c muy positivo en condi-
ciones fisiológicas, la reacción transcurre hacia la formación de
las triosas fosfato porque el gliceraldehído 3-fosfato desaparece
rápidamente al seguir metabolizándose en la ruta glucolítica.
Interconversión de las triosas fosfato. Puesto que

únicamente el gliceraldehído 3-fosfato es metabolizado en la
glucólisis toda la dihidroxiacetona fosfato se transforma en
gliceraldehído 3-fosfato mediante la enzima triosa fosfato iso-
merasa:
triosa fosfato
isomerasa
dihidroxiacetona fosfato o
m gliceraldehído 3-fosfato
'G 0c 1,83 kcal/mol
La segunda etapa de la glucólisis. La segunda etapa

de la glucólisis incluye las reacciones de oxido-reducción y
aquellas de fosforilación en las que se genera ATP. Puesto que,
como hemos visto, una molécula de glucosa se escinde en dos
de gliceraldehído 3-fosfato que siguen la misma ruta, por lo
que se considera sólo una molécula.
Oxidación de gliceraldehído 3-fosfato. Esta reacción

está catalizada por la gliceraldehído 3-fosfato deshidrogenasa
que requiere como coenzima NAD.
La gliceraldehído 3- gliceraldehído 3-fosfato
deshidrogenasa
fosfato deshidrogena- gliceraldehído 3-fosfato NAD Pi o
sa cataliza la reac-
ción de oxidación de
o 1,3-bisfosfoglicerato NADH
la glucólisis. 'G 0c 1,5 kcal/mol

Ésta es una de las reacciones más importantes de la secuen-

cia glucolítica puesto que se conserva la energía de oxidación
del grupo aldehído del gliceraldehído 3-fosfato en la forma de
un compuesto rico en energía como es el 1,3-bisfosfoglicerato.
La función de NAD es la de portador de electrones o átomos
de hidrógeno. El mecanismo de acción de la enzima es bastan-
te complejo ya que el substrato primeramente se combina con
un grupo SH del centro activo de la enzima y ésta reacciona
con el NAD. El complejo acil-enzima reacciona posteriormente
con el fosfato para producir 1,3-bisfosfoglicerato. Un hecho
que apoya este mecanismo es que la enzima es inhibida por
aquellos reactivos que bloquean el grupo SH.
Transferencia del fosfato de 1,3-bisfosfoglicerato. El

1,3-bisfofoglicerato transfiere el fosfato al ADP mediante la en-
zima fosfoglicerato quinasa (Fig. 2.2).
fosfoglicerato
quinasa
1,3-bisfofoglicerato ADP o
m 3-fosfoglicerato ATP
'G 0c 4,50 kcal/mol
Figura 2.2.– La etapa segunda de la ruta de la glucólisis. Transformación de

gliceraldehído 3-fosfato en lactato y formación de 2 moléculas de ATP.

Ésta es la primera reacción glucolítica en que se forma ATP

y, aunque este proceso requiere 7,3 kcal/mol, la reacción global
es exergónica porque el 1,3-bisfoglicerato es un componente
muy rico en energía y su hidrólisis aporta suficiente energía
para la síntesis de ATP:
1,3-bisfosfoglicerato H2O o 3-fosfoglicerato Pi

'G 0c 11,8 kcal/mol
ADP Pi o ATP H2O

'G 0c 7,3 kcal/mol
Suma de las dos reacciones:
La fosfoglicerato qui-
nasa es la primera re- 1,3-bisfosfoglicerato ADP o 3-fosfoglicerato ATP
acción de la glucóli-
sis que proporciona
0
c
'G total 4,5 kcal/mol
ATP.
Isomerización del 3-fosfoglicerato. Esta reacción es ca-
talizada por la fosfoglicerato mutasa y requiere Mg2:
fosfoglicerato mutasa
3-fosfoglicerato o
m 2-fosfoglicerato.
2
Mg
'G 0c 1,06 kcal/mol
Deshidratación de 2-fosfoglicerato. Esta es la segunda

reacción de la secuencia glucolítica en la que se genera un en-
lace fosfato rico en energía; la enzima que cataliza la reacción
es la enolasa que requiere Mg2 o Mn2 para su actividad:
enolasa
2-fosfoglicerato o
m fosfoenolpirato H2O
2
Mg
'G 0c 0,44 kcal/mol
Transferencia del fosfato de fosfoenolpirato. El fosfato

rico en energía del fosfoenolpirato es transferido al ADP por la
piruvato quinasa:
La piruvato quinasa
piruvato quinasa
cataliza la segunda
reacción de la ruta
fosfoenolpirato ADP o
m pirurato ATP
glucolítica que pro- 'G 0c 7,5 kcal/mol
porciona ATP.
La enzima requiere Mg2 o Mn2 y K, y es una enzima regu-
ladora alostérica con la que actúa como modulador positivo la
fructosa 1,6-bisfosfato y como moduladores negativos el ATP, el
Ca2 y la alanina.
Reducción del piruvato. En el último paso de la glucóli-

sis el piruvato es reducido a lactato a expensas de los electro-
nes donados por el gliceraldehído 3-fosfato a NAD. Estos elec-

trones son transferidos por NADH y las reacciones catalizadas

por la lactato deshidrogenasa:
lactato
deshidrogenasa
piruvato NADH H o
m lactato NAD

'G c 6,0 kcal/mol

0
En el organismo humano existen al menos cinco formas di- La lactato deshidroge-

ferentes de lactato deshidrogenasa o isoenzimas. El corazón, hí- nasa cataliza la reac-
ción de reducción de
gado y riñones son especialmente abundantes en isoenzimas la glucólisis. En con-
del tipo H, que tienen relativamente baja afinidad por piruvato, diciones anaerobias o
mientras el músculo esquelético es rico en isoenzimas del tipo aerobias insuficientes
oxida el NADH para
M, que tienen gran afinidad por piruvato y tienden hacia la for- que la glucólisis con-
mación de ácido láctico. tinue funcionando.
LAS RUTAS DE LOS ÁTOMOS DE CARBONO,

LA DE LA ENERGÍA Y LA DE LOS
ELECTRONES
En la ruta glucolítica existen tres transformaciones químicas

que están interconectadas:
La transformación por la que el esqueleto carbonado de la
glucosa se transforma en el del ácido láctico, esto es, el destino
de los átomos de carbono; la de la energía, donde y cómo se
utiliza y forma ATP, y la de los electrones, las reacciones de óxi-
do-reducción.
1º. Destino de los átomos de C de glucosa. La molécula de
glucosa de seis átomos de carbono en la ruta glucolítica
se transforma en dos moléculas de ácido láctico. Si se
enumeran los carbonos asignando el nº 1 al del grupo
aldehído, al escindirse la fructosa 1,6-bisfosfato, los car-
bonos 1, 2 y 3 se confunden con los 6, 5 y 4, respecti-
vamente, en el gliceraldehído 3-fosfato y la posición en
el ácido láctico será:
1
COH
l
H 2C OH (1)(4)
COH (6)(3)
CH3
l l l
HO 3C H o 2 H C OH
(2) (5)
o 2 H COH
(5)(2)
En la glucólisis anae-
l l l robia no hay un cam-
H 4C OH (3)(6)
CH2OPO32 (1)(4)c
COOH bio neto del estado
l de oxidación de la
H 5C OH glucosa en compara-
6
l ción con el lactato.
CH2OH
glucosa gliceraldehído lactato
3-fosfato

2º. La secuencia de reacciones en las que se utiliza y se

forma ATP:
glucosa ATP o glucosa 6-P ADP
fructosa 6-P ATP o fructosa 1,6-bisfosfato ADP
2 1,3 bisfosfoglicerato 2 ADP o

o 2 3-fosfoglicerato 2 ATP
2 fosfoenolpiruvato 2 ADP o 2 piruvato 2 ATP
3º. La secuencia de reacciones de óxido-reducción:
2-gliceraldehído 3-fosfato 2 NAD 2 Pi o

o 2 1,3 difosfoglicerato 2 NADH 2 ATP
piruvato NADH H o lactato NAD
Teniendo en cuenta estos procesos, la ecuación global de la

glucólisis es:
glucosa 2 ATP 2 NAD 2 Pi 4 ADP

2 NADH 2 H o 2 lactato 2 ADP 2 NADH
2 H 2 NAD 4 ATP 2 H2O
cancelando los términos iguales en los dos miembros:
glucosa 2 Pi 2 ADP o 2 lactato 2 ATP 2H2O
Hay que destacar que, aunque existen dos reacciones de

óxido-reducción, no hay un cambio neto en el estado de oxi-
dación.
RUTAS AFLUENTES DE LA GLUCOLÍTICA
Además de la glucosa, otros carbohidratos entran en la ruta

glucolítica para ser degradados. La glucosa de los polisacáridos
glucógeno y almidón entran en la ruta a través de enzimas que
degradan las cadenas unitariamente y mediante procesos per-
fectamente regulados.
Los disacáridos maltosa, lactosa y sacarosa no se encuen-
tran en la sangre de los organismos superiores. Cuando se in-
gieren con la dieta, son hidrolizados enzimáticamente en el in-
testino delgado en sus componentes hexosas antes de pasar
por vía portal al corriente sanguíneo:
maltasa
maltosa H2O o glucosa glucosa

lactasa
lactosa H2O o galactosa glucosa
invertasa
sacarosa H2O o fructosa glucosa
Como la glucosa, la manosa es fosforilada en el hígado:

hexoquinasa
manosa ATP o manosa 6-fosfato ADP
La manosa es isomerizada a fructosa 6-fosfato por la fosfo-

manosa isomerasa:
fosfomanosa isomerasa
manosa 6-fosfato o
m fructosa 6-fosfato
En el hígado de vertebrados la fructosa entra en la glucólisis Todos los carbohidra-

por otra ruta. La fructoquinasa cataliza la fosforilación de la tos en último término
se transforman en
fructosa: fructosa 6-fosfato
fructoquinasa
fructosa ATP o fructosa 1-fosfato ADP
La fructosa 1-fosfato se escinde en gliceraldehído y dihidro-

xiacetona fosfato mediante la fructosa 1-fosfato aldolasa, una
enzima semejante a la aldolasa de la ruta glucolítica:
fructosa 1-fosfato aldolasa
fructosa 1-fosfato o
m
o gliceraldehído dihidoxiacetona fosfato
La dihidroxiacetona fosfato es un intermediario de la glucó-

lisis y el otro producto el gliceraldehído es fosforilado a gliceral-
dehído 3-fosfato, otro intermediario de la glucólisis, mediante
la reacción:
gliceraldehído
gliceraldehído ATP o
quinasa
gliceraldehído 3-fosfato
ADP
La galactosa 1-fosfato es convertida en glucosa 1-fosfato a

través de las siguientes reacciones:
galactosa 1-fosfato
uridil transferasa
UTP galactosa 1-fosfato o
m UDP-galactosa PP
UDP epimerasa
UDP-galactosa o
m UDP-glucosa
glucosa 1-fosfato-uridil
transferasa
UDP-glucosa PP o UTP glucosa 1-P
Como se puede observar, el UTP tiene, en estas reacciones,

una función muy importante como transferidor de grupos glu-
cosílicos.

LA REGULACIÓN DE LA GLUCÓLISIS
En la ruta glucolítica existen tres puntos importantes de con-

trol (Fig. 2.3). El primero es aquel en que la glucosa se fosforila
a glucosa 6-fosfato por ATP y la hexoquinasa. Otro importante
punto de control es la reacción catalizada por la fosfofructoqui-
nasa. Esta enzima reguladora es activada por AMP y ADP e in-
hibida por ATP y citrato. El tercer punto de regulación es la
reacción catalizada por la piruvato quinasa, que es activada
por fructosa 1,6-bisfosfato y AMP. Como se puede observar, las
tres enzimas de control están reguladas por un intermediario
metabólico, pero de una manera especial por la concentración
de AMP, ADP y ATP. De una manera simplificada se puede afir-
mar que la relación ADP/ATP regula el flujo metabólico de la
ruta. Si esta relación es alta porque la concentración de ATP es
baja, la glucólisis se activa para formar ATP. Si, por el contrario,
la relación ADP/ATP es baja, la célula inhibe la fosfofructoqui-
nasa y se interrumpe la glucólisis para no producir más ATP.
La hexoquinasa, fosfo-
fructoquinasa y piru-
vato quinasa son los
principales centros de
control de la glucóli-
sis.
Figura 2.3.– Las tres reacciones de control de la glucólisis y

sus efectores positivos y negativos.

RESUMEN
La glucólisis es un proceso para obtener energía de la

glucosa en ausencia de oxígeno. Tiene lugar en dos etapas
y están implicadas 11 reacciones catalizadas enzimática-
mente. En la primera etapa la glucosa es fosforilada por
ATP y, posteriormente, escindida en dos moléculas de D-
gliceraldehído 3-fosfato. Otras hexosas, pentosas y glicerol
entran en la ruta mediante otras reacciones en esta etapa
para converger también en D-gliceraldehído 3-fosfato.
En la segunda etapa el D-gliceraldehído 3-fosfato es
oxidado por NAD para formar un compuesto rico energé-
ticamente, el 1,3-difosfoglicerato, que cede su fosfato al
ADP para obtener ATP y 3-fosfoglicerato; este compuesto
se isomeriza a 2-fosfoglicerato, el cual se deshidrata a fos-
foenolpiruvato, que nuevamente dona su fosfato al ADP
para formar ATP y piruvato. El piruvato se reduce a lacta-
to por NADH procedente de la deshidrogeneración de la
triosa-fosfato. En la ruta glucolítica entran dos moles de
ATP en la primera etapa y se forman cuatro de ATP en la
segunda. Existen en la ruta tres puntos de regulación, uno
en la entrada y otros dos en la ruta, los cuales sirven de re-
acciones limitantes de la velocidad glucolítica.
Diabetes mellitus y glucólisis
La insulina y el glucagón son dos hormonas esenciales en

el control homeostático del nivel de glucosa sanguínea. Nor-
malmente después de cada comida experimentamos un au-
mento de glucosa en sangre. Las células E de los islotes de
Langerhaus del pancreas perciben estos niveles de glucosa cir-
culante y liberan insulina que disminuye el nivel de glucemia
principalmente estimulando el transporte activo de la glucosa a
través de las membranas celulares de los tejidos muscular y
adiposo. Esto es así porque la insulina se fija a una proteína re-
ceptora específica de la membrana celular y facilita la entrada
de glucosa. En la enfermedad de diabetes mellitus se produce
un nivel insuficiente de insulina o una hormona defectuosa
con una afinidad disminuida por los centros receptores. Debi-
do a que la glucosa no puede ser captada por las células de los
diabéticos, una característica de estos enfermos es que el nivel
de glucosa en sangre permanece alta y esto va acompañado

de una mayor excreción de orina (poliuria) con una constante

deshidratación. En la diabetes no hay un control de la lipasa,
por lo que se produce una movilización excesiva de ácidos
grasos que llegan a acumularse en el hígado. La ausencia de
insulina favorece la glucogenólisis y la gluconeogénesis por lo
que el estado hiperglucémico se ve exacerbado. El organismo
intenta compensar la falta de glucosa intracelular aumentando
su disponibilidad mediante la gluconeogénosis, aun cuando
haya un suministro adecuado de carbohidratos. Como el orga-
nismo es incapaz de utilizar la glucosa para obtener energía,
ésta debe ser obtenida de los lipidos. Los ácidos grasos son
movilizados y convertidos en acetil-CoA en el hígado, pero
este compuesto no puede ser oxidado a CO2 y H2O en el ciclo
de Krebs debido al inadecuado suministro de oxalacetato. Por
ello, el acetil-CoA es dirigido hacia la conversión de cuerpos
cetónicos como ácido acetoacético y E-hidroxibutírico. El teji-
do muscular puede utilizar los cuerpos cetónicos para su meta-
bolismo energético, pero generalmente su producción es tan
excesiva que hay una pérdida de estas sustancias por vía pul-
monar y renal. El aceto-acetato se degrada fácilmente a aceto-
na, que es exhalada con el aliento. La excreción urinaria de
acetoacetato y E-hidroxibuterato produce pérdida de Na ge-
nerándose un estado de acidosis.
La administración de insulina revierte estos efectos, aunque
se requiere un ajuste de la dieta y una dosis de insulina ade-
cuada.

TEMA 3 El ciclo de Krebs
La reacción del complejo piruvato deshidrogenasa.

El ciclo de Krebs: reacciones y regulación. Reac-
ciones anapleróticas.
Las células aerobias obtienen la mayor parte de su energía

de la respiración, esto es, de la transferencia de electrones
desde las moléculas combustibles hasta el oxígeno molecular.
La respiración implica la mayoría de las reacciones de la ruta
glicolítica, hasta el piruvato, pero el proceso oxidativo con-
tinúa hasta la transformación en dióxido de carbono y agua.
En este tema comenzaremos con la descripción de la reacción
catalizada por la piruvato deshidrogenasa, un complejo en-
zimático que transforma el piruvato en acetil-CoA. Éste es el
compuesto por el que la mayoría de los átomos de carbono
procedentes del catabolismo de carbohidratos, ácidos grasos
y aminoácidos entran en el ciclo de Krebs. El ciclo tiene como
funciones primordiales, el ser la ruta final de la oxidación de
las moléculas combustibles y el de proporcionar moléculas
precursoras para las rutas biosintéticas. Cuando actúa con
este último objetivo, requiere de reacciones denominadas
anapleróticas que le proporcionan metabolitos y evitan que
deje de funcionar.
LA REACCIÓN DEL COMPLEJO PIRUVATO

DESHIDROGENASA
En el tema anterior hemos estudiado la vía glicolítica en que

la glucosa se convierte en piruvato. Para que este compuesto
sea oxidado completamente a dioxido de carbono y agua en el
ciclo de Krebs se requiere:
a) Que el piruvato pase al interior de la mitocondria.
b) Que se transforme en acetil-CoA.

Las enzimas del ciclo de Krebs se localizan de forma orde-

nada en el interior de la mitocondria. La membrana mitocon-
drial es impermeable a los compuestos fosforilados y al acetil-
CoA, por lo que el piruvato de la ruta glicolítica, que se origina
en el citosol, es transportado, mediante difusión facilitada, al
interior de la mitocondria (Fig. 3.1). Posteriormente, el piruva-
to, a través de una descarboxilación oxidativa, se transforma en
acetil-CoA, según la ecuación global:
piruvato NAD CoA-SH o acetil-CoA

NADH H CO2
'G0c 8,0 kcal
Figura 3.1.– El piruvato procedente de la glicólisis atraviesa la membrana mi-

tocondrial para ser oxidado y descarboxilado a acetil-CoA en la matriz mito-
La oxidación del pi- condrial.
ruvato es una reac-
ción irreversible en la La reacción transcurre con una gran variación negativa de
que intervienen tres
enzimas y cinco co- energía libre estándar, lo que indica que en la célula viva es
enzimas. esencialmente irreversible. La reacción está catalizada por el

EL CICLO DE KREBS 35
complejo piruvato deshidrogenasa (PDH) constituido por tres

enzimas:
piruvato deshidrogenasa, dihidrolipoil transacetilasa y
dihidrolipoil deshidrogenasa
y cinco coenzimas:
pirofosfato de tiamina (TPP), ácido lipoico, coenzima A
(CoA-SH), nicotinamina adenina dinucleótido (NAD), y
flavinadenina dinucleótido (FAD).
Este complejo multienzimático ha sido aislado y purificado
de varios organismos. El de la especie humana tiene un peso
de 8,5 u 106 daltons y está constituido por 30 moléculas te-
traméricas de la piruvato deshidrogenasa, que contiene unida
una molécula de TPP, 60 moléculas de dihidrolipoil transaceti-
lasa cada una con una molécula de ácido lipoico y seis de dihi-
drolipoil deshidrogenasa, cada una de las cuales se encuentra
unida a una molécula de FAD. El proceso enzimático se es-
quematiza en la figura 3.2. Se ha postulado que la cadena late-
ral del ácido lipoico (lipoil-lisina) actúa como un brazo oscilan-
te para transferir grupos acetilo y átomos de hidrogeno (o los
electrones equivalentes), desde una enzima a la siguiente den-
tro del complejo enzimático.
Figura 3.2.– Descarboxilación oxidativa del piruvato a acetil-CoA por el com-

plejo piruvato deshidrogenasa. Las sustancias que entran y salen del complejo
aparecen enmarcadas. Las enzimas que intervienen son: E1 piruvato deshi-
drogenasa, E2 dihidrolipiol transacetilasa, E3 Dihidrolipoil deshidrogenasa.

La reacción catalizada por el complejo piruvato deshidroge-

nasa se encuentra en una posición clave del metabolismo, no
sólo porque sirve de conexión entre la ruta glicolítica y el ciclo
de Krebs sino porque el piruvato y el acetil-CoA son compo-
nentes de varias rutas biosintéticas y degradativas (Fig. 3.3).
Así, el piruvato, además de ser el producto final de la ruta gli-
colítica, se forma en el catabolismo de aminoácidos, en la oxi-
dación del lactato, y es un precursor de la síntesis de aminoáci-
dos, de la glucosa y del lactato. El acetil-CoA se forma en la de-
gradación de los ácidos grasos y de aminoácidos y es un
precursor de la síntesis de ácidos grasos, cuerpos cetónicos, co-
lesterol y otros lípidos de gran importancia biológica.
Figura 3.3.– La reacción catalizada por el complejo PDH se encuentra en una

posición clave del metabolismo. El piruvato y el acetil-CoA son productos fina-
les de varias rutas catabólicas y precursores de otras anabólicas.
No es de extrañar que, dada la posición tan estratégica del

complejo piruvato deshidrogenasa en el metabolismo, su activi-
dad se encuentre regulada con precisión. Exiten dos niveles de
regulación sobre el complejo: uno rápido, en el que los produc-
tos de la reacción (acetil-CoA y NADH) actúan de inhibidores
Figura 3.4.– El complejo (Fig. 3.4) y otro lento mediante modificación covalente y en el
PDH está regulado de que participan dos enzimas más: la PDH quinasa y la PDH fos-
manera rápida por fatasa (Fig. 3.5). Estas enzimas, que también constituyen parte
NADH y acetil-CoA que
lo hacen como efectores integral del complejo PDH, regulan la actividad del mismo a
negativos. través de un mecanismo de fosforilación y desfosforilación. Va-

Figura 3.5.– El complejo PDH está regulado de manera lenta por un sistema de
fosforilación/desfosforilación en el que intervienen la PDH-quinasa y la PDH-
fosfatasa.
lores elevados de las proporciones NADH/NAD, acetil-CoA/

CoA-SH y/o ATP/ADP actúan como efectores positivos de la
PDH quinasa, favoreciendo la formación de la PDH activa, no
fosforilada, en PDH fosforilada, poco activa. El resultado neto
de este proceso es el descenso del ritmo en la transformación
piruvato-acetil-CoA.
EL CICLO DE KREBS:
REACCIONES Y REGULACIÓN
El ciclo del ácido cítrico, de los ácidos tricarboxílicos, del El ciclo de Krebs es
ácido tricarboxílico o, simplemente, de Krebs, en honor de su la ruta de oxidación
de todos los combus-
descubridor Hans Krebs, fue la consecuencia de propuestas, tibles metabólicos en
experimentos y deducciones brillantes que han marcado un condiciones aeróbi-
hito en la historia y el desarrollo de la Bioquímica. Krebs basó cas.
sus estudios en los realizados previamente por Thumberg,
Szent Gyorgyi, Martius, Knoop y Ochoa y sus primeros resulta-
dos los publicó en 1937 en las revistas Enzymologia y Lanzet.
El carácter cíclico se debe a que, después de una serie de
reacciones, se regenera el compuesto de partida, el oxalacetato.
En cada vuelta del ciclo de Krebs una molécula de acetilo (del
acetil-CoA) de dos átomos de carbono se condensa con una
molécula de ácido oxalacético de cuatro átomos de carbono
para formar ácido cítrico, un compuesto de seis átomos de car-
bono. Este último se oxida mediante una secuencia de reaccio-
nes, de tal modo que se liberan dos moléculas de CO2 y se re-
genera una molécula de ácido oxalacetato. Este compuesto
puede combinarse con otra molécula de acetilo, iniciando el ci-
clo otra vuelta. En cada vuelta se incorpora una molécula de

En el ciclo entran dos acetilo y se eliminan dos de CO2. Cuando el ciclo está funcio-
átomos de carbono
con el acetil-CoA y se
nando con fines energéticos, una molécula de ácido oxalacéti-
pierden dos en las reco sería suficiente para lograr la oxidación de un número infi-
acciones 4 y 5 . nito de moléculas de acetilo. En estas condiciones, por cada
vuelta se liberan cuatro pares de hidrógeno (o sus electrones
equivalentes), los cuales pasarán al oxígeno molecular para ob-
tener energía en forma de ATP.
El conjunto de reacciones del ciclo se muestra en la figura 3.6.
Del funcionamiento del ciclo de Krebs se puede destacar los
siguientes hechos:
1. La primera reacción del ciclo es la condensación de una
molécula de acetil-CoA con otra de ácido oxalacético
por la acción catalítica de la citrato sintasa. La reacción
Figura 3.6.– Reacciones del ciclo de Krebs. Los números corresponden a las siguientas enzimas: (1) Citrato
sintasa. (2) Aconitasa. (3) Aconitasa. (4) Isocitrato deshidrogenasa. (5) Complejo D-cetoglutarato deshidro-
genasa. (6) D-cetoglutarato deshidrogenasa. (7) Succinil CoA sintetasa. (8) Succinato deshidrogenasa.
(9) Fumarasa. (10) Malato deshidrogenasa. Los átomos de carbono del acetil-CoA aparecen en color naran-
ja para que pueda observarse que después de las dos descarboxilaciones permanecen integrados en la
molécula de succinato.

es irreversible porque la hidrólisis del enlace tioéster del

acetil-CoA implica la liberación de una gran cantidad de
energía ('G0c 7,5 kcal) (Fig. 3.6).
2. Hay cuatro reacciones catalizadas por deshidrogenasas
que reducen tres moléculas de NAD y una de FAD: iso-
citrato deshidrogenasa, complejo D-cetoglutarato deshi-
drogenasa, succinato deshidrogenasa y malato deshidro-
genasa. En las dos primeras también se producen des-
carboxilaciones.
3. El complejo D-cetoglutarato deshidrogenasa que catali-
za la transfomación del D-cetoglutarato en succinil-CoA
tiene una estructura similar al de la piruvato deshidro-
genasa; como éste, está constituido por tres enzimas y
las mismas coenzimas: TTP, ácido lipoico, CoA-SH,
FAD y NAD.
4. La reacción catalizada por la succinil-CoA genera un en-
lace fosfato de alta energía en forma de GTP (equivalen-
te a ATP).
5. Los átomos de carbono que se liberan en forma de CO2
por cada vuelta del ciclo no son los mismos que los cap-
tados como acetilos.
6. Algunas sustancias inhiben el funcionamiento del ciclo
de Krebs, generalmente porque compiten con los sustra-
tos por las enzimas del ciclo. Así, el malonato inhibe la
succinato deshidrogenasa y el fluoracitrato la aconitasa.
Las sales de arsénico inhiben el complejo D-cetoglutara-
to deshidrogenasa.
La reacción neta del ciclo es:
acetil-CoA 3 NAD FAD GDP Pi H2O o

o 2CO2 3 NADH FADH2 GTP 2H CoA-SH
Las tres moléculas de NADH y la de FADH2 se oxidan en Cada vuelta del ciclo
la cadena de transporte electrónico, como hemos visto en el de Krebs genera un
fosfato de alta ener-
tema 28 de Fundamentos de Bioquímica Estructural. El oxí- gía por una fosforila-
geno molecular no participa directamente en el ciclo de ción a nivel de sus-
Krebs, pero éste sólo funciona en condiciones aeróbicas por- trato, 3 del NADH y 1
del FADH2. Estos úl-
que el NADH y el FADH2 únicamente transfieren sus electro- timos se reoxidarán
nes al oxígeno molecular en la cadena respiratoria (Fig. 3.7). en la cadena respira-
El ciclo está regulado por la acción de enzimas alostéricas toria.
que responden a las concentraciones de metabolitos celulares y
que son limitantes en la velocidad metabólica del ciclo. En ter-
minos estrictos, el complejo PDH no forma parte del ciclo, pero
su regulación potencia la sensibilidad del sistema de regulación
del ciclo al controlar la cantidad de acetil-CoA que se incorpora
al mismo. En el ciclo existen tres reacciones que se pueden

considerar claves en la regulación y

que son catalizadas por las siguientes
enzimas (Fig. 3.8):
• Citrato sintasa. Cuando aumentan
los niveles de NADH y/o ATP por
encima de lo normal, actúan dis-
minuyendo la actividad de la enzi-
ma y, por tanto, la formación de
citrato.
• Isocitrato deshidrogenasa. Esta
enzima alostérica es, como la an-
terior, inhibida por el NADH y
ATP y estimulada por NAD, ADP
y Ca2.
• D-Cetoglutarato deshidrogenasa.
Este complejo enzimático, como
se ha indicado, es análogo en su
estructura al del piruvato deshi-
drogenasa. Como este, es inhibi-
do por los productos finales de la
reacción que cataliza, que en el
caso del complejo D-cetoglutarato
deshidrogenasa, son: el succinil-
CoA y el NADH.
Se puede subrayar que la velocidad
metabólica del ciclo está regulada de
forma general por el producto final de
las reacciones de obtención de energía
de la respiración, el ATP, y el producto
final de las etapas de deshidrogenación
del ciclo, el NADH.
REACCIONES
ANAPLERÓTICAS
Figura 3.7.– El ciclo de Krebs y la cadena respiratoriaAunque el ciclo de Krebs es la vía de-
están acoplados por los electrones que fluyen desde
los intermediarios del ciclo a través de la cadena al gradativa más importante para generar
oxígeno molecular. ATP, el ciclo es esencial para la biosín-
tesis de compuestos celulares. Así, mu-
El ciclo de Krebs se
controla fundamen- chos aminoácidos derivan del D-cetoglutarato y del oxalaceta-
talmente por tres re- to, y la mayoría de los átomos de carbono de las porfirinas pro-
acciones y por las ceden del succinil-CoA. Cuando esos metabolitos son extraídos
concentraciones in-
tramitocondriales de del ciclo de Krebs, éste deja de funcionar, puesto que se inte-
NAD+ y NADH. rrumpe la formación de oxalacetato.

Figura 3.8.– Regulación del flujo metabólico a través del ciclo de Krebs. Las
tres enzimas alostéricas están controladas por los niveles de varios efectores po-
sitivos y negativos.
Para que el ciclo siga actuando a un ritmo normal, existen

reacciones denominadas anapleróticas (“de relleno”) que rees-
tablecen los niveles de los intermediarios del ciclo. La más im-
portante es la carboxilación del ácido piruvico para formar áci-
do oxalacético; catalizada por la piruvato carboxilasa
piruvato
carboxilasa
piruvato CO2 ATP o oxalacetato ADP Pi
'G0c 0,5 kcal
La piruvato carboxilasa, que se encuentra en el hígado y Los intermediarios

del ciclo de Krebs
riñón, es una enzima alostérica de peso molecular elevado (al- que se utilizan en
rededor de 650.000 daltons) y un elevado número de subuni- otras rutas biosintéti-
dades proteicas. Su modulador positivo es el acetil-CoA (Fig. cas deben reponerse
para que el flujo me-
3.9). Cuando esta sustancia alcanza un nivel por encima de lo tabólico a través del
normal, activa la reacción favoreciendo la formación de oxala- ciclo no se detenga.
cetatato, el cual se condensa con el acetil-CoA acumulado para
formar citrato y de esta forma permitir que el ciclo siga funcio-
nando.
En el corazón y en el tejido muscular actúa principalmente
la enzima málica (malato deshidrogenasa dependiente de
NADP) y que cataliza la reacción:
enzima
malica
piruvato CO2 NADPH H o
m L-malato NADP


Figura 3.9.– La reacción anaplerótica catalizada por la piruvato carboxilasa

permite la reposición de intermediarios del ciclo de Krebs para que éste conti-
núe funcionando. En condiciones biosintéticas, al aumentar el nivel de acetil-
CoA, este compuesto actúa como un efector positivo de la piruvato
De estas dos reacciones anapleróticas, la que tiene más im-

portancia cuantitativamente es la catalizada por la piruvato
deshidrogenasa, cuya actividad aumenta con el ejercicio, el
ayuno y la diabetes. Curiosamente la actividad de la enzima
málica se encuentra disminuida en diabetes y aumentada tras
la administración de insulina.
RESUMEN
La reacción catalizada por el complejo piruvato deshi-

drogenasa conecta las rutas glicolítica y el ciclo de Krebs,
ya que transforma el ácido pirúvico en acetil-Co. El com-
plejo está formado por tres enzimas y cinco coenzimas, y
está regulado por modificación covalente. El ciclo cumple
con dos funciones importantes:
1) Es la ruta degradativa final para la oxidación de
moléculas combustibles.

2) Es fuente de moléculas precursoras para las rutas

biosintéticas.
El ciclo está constituido por una serie de reacciones que
comienzan con la condensación del grupo acetilo del ace-
til-CoA con el ácido oxalacético, de cuatro átomos de car-
bono, para formar ácido cítrico de seis átomos de carbo-
no. En cada vuelta del ciclo, después de una secuencia de
reacciones que generan nuevamente ácido oxalacetato, se
liberan dos átomos de carbono en forma de CO2 y se ori-
ginan tres moléculas de NADH, una de FADH2 y otra de
GTP. El ritmo del ciclo está controlado, principalmente, por
ATP y NADH, que actúan como moduladores negativos
sobre tres enzimas alostéricas: citrato sintasa, isocitrato
deshidrogenasa y D-cetoglutarato deshidrogenasa. Cuan-
do el ciclo funciona con fines biosintéticos, la reposición
de los intermediarios se realiza mediante reacciones ana-
pleróticas. Las más importantes son las catalizadas por la
piruvato carboxilasa y la enzima málica.
Los casos clínicos derivados de una disfunción del complejo

piruvato deshidrogenasa, ciclo de Krebs y de las reacciones
anapleróticas son consecuencia de una insuficiente actividad
enzimática debido a una deficiencia en una coenzima o a un
defecto estructural de la proteína. Entre los primeros, el caso
más conocido es el de la deficiencia en vitamina B1, y entre los
segundos, la reducida actividad de las enzimas del complejo pi-
ruvato deshidrogenasa, de la fumarasa y de la citrato sintasa.
Deficiencia vitamínica B1
La deficiencia vitamínica B1 ocasiona una enfermedad neu-

rológica y cardiovascular descrita en 1630 por J. Bonitus que la
denominó “beriberi” (cordero), porque las personas que pade-
cian esa enfermedad andaban como los corderos. El problema
continúa siendo grave en el Extremo Oriente, donde el arroz
que es el alimento básico, contiene niveles muy bajos de tiami-
na y practicamente nulos cuando el arroz se descascarilla. Los
pacientes con esta enfermedad suelen tener niveles altos de pi-
ruvato, lactato y alanina en sangre, y baja actividad de los com-
plejos piruvato deshidrogenasa y de D-cetoglutarato deshidro-
genasa.

Los síntomas de esta enfermedad se originan como conse-

cuencia de una hipoavitaminosis B1 o tiamina. La tiamina en el
organismo se fosforila a pirofosfato de tiamina (TPP), que es
una de las coenzimas del complejo piruvato deshidrogenasa, y
del D-cetoglutarato deshidrogenasa, por eso las actividades de
estas enzimas en sangre están disminuidas en el beriberi.
Una terapia lógica es una dieta baja en carbohidratos y la
administración de tiamina. La administración de TPP no es
más eficaz que la de la tiamina, dado que la coenzima, al ser
un compuesto fosforilado, no atraviesa las membranas. En oca-
siones la terapia no es tan sencilla ya que la baja actividad del
PDH puede tener un origen genético.
Una deficiencia en piruvato carboxilasa produce tambien
un aumento de piruvato y alanina en sangre, ya que el piruva-
to no puede convertirse en oxalacetato, que es el aceptor de
grupos acetilo en el ciclo de Krebs.
Deficiencia en la actividad fumarasa

Las deficiencias en la actividad fumarasa del tejido cerebral
y del musculo esqueletico ocasionan miopatia mitocondrial.
Los pacientes con encefalomiopatía mitocondrial mueren a los
pocos meses de edad. Presentan cantidades anormalmente al-
tas de fumarato en sangre. Las mitocondrias de músculo es-
quelético y de hígado, obtenidas mediante biopsias, muestran
una actividad en fumarasa prácticante nula. Sin embargo,
mientras las primeras oxidan lentamente el glutamato y el suc-
cinato, las de hígado oxidan ambos sustratos a velocidad nor-
mal. La administración de sustratos gluconeogénicos, como el
lactato o la alanina, alivian los efectos de la enfermedad.

La ruta de las
TEMA 4 pentosas fosfato
La ruta de las pentosas fosfato. Etapa I. Etapa II.

Rendimiento energético. Regulación de la ruta.
La ruta de las pentosas fosfato es una ruta alternativa a la

glucolítica, cuyas funciones son obtener poder reductor para las
reacciones de biosíntesis y D-ribosa para la síntesis de nucleósi-
dos. La ruta consiste en dos etapas de naturaleza química dife-
rente, la primera implica reacciones de óxido-reducción, y la
segunda reacciones en equilibrio de isomerización y reagrupa-
miento molecular. La primera reacción de la primera etapa re-
gula el flujo del metabolismo a través de la ruta.
LA RUTA DE LAS PENTOSAS FOSFATO
La ruta de las pentosas fosfato, también denominada ruta La ruta de las pento-
de los hexosas fosfato o ruta del fosfogluconato, es otra vía de sas fosfato genera
NADPH para las
degradación de la glucosa con dos funciones primordiales: ori- biosíntesis reducto-
ginar poder reductor en forma de NADPH y obtener pentosas, ras y ribosa 5-P para
concretamente D-ribosa. La primera función es especialmente la biosíntesis de nu-
cleótidos.
importante en tejidos que realizan la síntesis de ácidos grasos y
esteroides, como son el hígado, las glándulas mamarias, los te-
jidos grasos y la corteza adrenal. En el músculo esquelético esta
vía no es activa. En la ruta se pueden considerar dos etapas:
una primera que implica reacciones de óxido-reducción y una
segunda que comprende reacciones de condensación e isome-
rizaciones moleculares.
ETAPA I
La primera reacción es la deshidrogenación enzimática de

la glucosa 6-fosfato por la glucosa 6-fosfato deshidrogenasa

para dar 6-fosfoglucolactona. En condiciones fisiológicas esta

reacción es reversible, pero el producto de la reacción rápida-
mente se hidroliza mediante la 6-fosfogluconolactonasa a 6-
fosfogluconato con una variación alta de energía libre, por lo
que el conjunto de las dos reacciones está desplazado clara-
mente hacia la derecha:
Las tres reacciones En la siguiente reacción el 6-fosfogluconato sufre una des-

de la fase oxidativa carboxilación oxidativa por la 6-fosfogluconato deshidrogenasa
(etapa I) incluyen dos
oxidaciones que pro- que requiere NADP para dar ribulosa 5-fosfato y CO2:
ducen NADPH.
ETAPA II
Esta etapa comprende una serie de condensaciones, iso-

nomerizaciones y reagrupamientos catalizados enzimática-
mente.

LA RUTA DE LAS PENTOSAS FOSFATO 47
El producto final de los procesos oxidativos de la etapa I, la

ribulosa 5-fosfato, es convertido en ribosa 5-fosfato por acción
de la ribulosa 5-fosfato epimerasa. En esta reacción el carbono
3 de la ribulosa es invertido para dar xilulosa 5-fosfato. Alterna-
tivamente, la ribulosa 5-fosfato puede ser convertida en la al-
dolasa correspondiente, la ribosa 5c-fosfato por la ribosa 5-fos-
fatoisomerasa, una reacción similar a la conversión de glucosa
6-fosfato en fructosa 6-fosfato.
Estas reacciones son:
Posteriormente aparecen reacciones de reordenamiento de Las reacciones de la

átomos mediante la acción de dos clases de enzimas: transal- etapa II son todas re-
versibles.
dolasas y transectolasas, en las cuales se lleva a cabo la transfe-
rencia de unidades de dos y tres átomos de carbono:

La sedoheptulosa 7-fosfato y el gliceraldehído 3-fosfato son

obtenidos de la reacción entre la xilulosa 5-fosfato y la ribosa
5-fosfato catalizada por la transcetolasa:
CH2OH
l
La transcetolasa transfiere el grupo C O de una molé-
l
cula a otra y requiere para su actividad pirofosfato de tiamina
TPP, la coenzima que requieren los complejos enzimáticos pi-
ruvato deshidrogenasa y a-cetoglutanato deshidrogenasa. La
transcetolasa cataliza dos reacciones en las que interviene la
xilulosa 5-fosfato, una es la transformación de xilulosa 5-fosfa-
to y ribosa 5-fosfato en sedoheptulosa 7-fosfato y gliceraldehí-
do 3-fosfato y la otra la transformación de xilulasa 5-fosfato y
eritrosa 4-fosfato en fructosa 6-fosfato y gliceraldehído 3-fosfa-
to. La sedoheptulosa 7-fosfato es un azúcar inusual de siete
átomos de carbono que también se encuentra en las reaccio-
nes del ciclo de Calvín en la fase de la fotosíntesis que no de-
pende de la luz.

La transaldolasa cataliza la reacción entre la sedoheptulosa

7-fosfato y el gliceraldehído 3-fosfato para producir fructosa 6-
fosfato y una tetrosa, la eritrosa 4-fosfato. La transferencia im-
CH2OH
l
C O
l
plica el fragmento de tres átomos de carbono HO C H y
no requiere coenzima. l
En la figura 4.1 se muestra una panorámica de la ruta de
las pentosas fosfato en la que se puede apreciar que los pro-
ductos de la ruta son el gliceraldehído 3-fosfato y la fructosa 6-
fosfato, dos intermediarios de la ruta glucolítica.
RENDIMIENTO ENERGÉTICO
Para conocer el rendimiento energético de la ruta de las

pentosas fosfato es necesario considerar tres moléculas de glu-
cosa 6-fosfato, ya que en la etapa II (Fig. 4.1) se requieren una
molécula de ribosa 5-fosfato y dos de xilulosa 5-fosfato. La ri-
Figura 4.1.– La ruta de las pentosas fosfato. Obsérvese que las reacciones de la
etapa I son irreversibles y las de la II, reversibles. Este hecho permite que si la
célula requiere ribosa 5-fosfato y no NADPH se pueda obtener a través de las
reacciones de la etapa II, mediante los intermediarios de la glucólisis.

bosa 5-fosfato y una de las dos moléculas de xilulosa 5-fosfato

sirven como precursores para la formación de una fructosa 6-
fosfato; la segunda, xilulosa 5-fosfato, más la eritrosa 4-fosfato
forman otra molécula de fructosa 6-fosfato y una de gliceral-
dehído 3-fostato. De forma resumida:
3 glucosa 6-fosfato
o
o 3 CO2
¯
2 fructosa 6-fosfato

1 gliceraldehído 3-fosfato
La degradación completa de una molécula de glucosa re-

quiere, para entender fácilmente el proceso, considerar seis
moléculas de glucosa 6-fosfato que originarán 6 CO2, esto es,
tantas moléculas de anhídrido carbónico como átomos de car-
bono tiene la molécula de glucosa (C6H12O6):
6 glucosa 6-fosfato 12 NADP o

o 5 glucosa 6-fosfato 6 CO2 12 NADP Pi
Dos características importantes de esta ruta es que no re-

quiere ATP una vez formada la glucosa 6-fosfato y que puede
funcionar en condiciones anaeróbicas. Ello es fácil de com-
prender ya que el NADP se puede regenerar en procesos de
biosíntesis, no requiere la cadena respiratoria, y, por tanto, la
ruta permite la producción anaerobia de pentosas.
En condiciones aeróbicas, para que el NADPH se reoxide a
NADP debe reaccionar con NAD, ya que el NADPH es im-
permeable a la membrana mitocondrial. La transferencia de
hidrógenos del NADPH al NAD se produce por un proceso de
transhidrogenación. Por consiguiente, cada mol de NADPH
produciría un mol de NADH y éste, en presencia de oxígeno,
3 moles de ATP. De esta forma la oxidación completa de 1 mol
de glucosa por la ruta de las pentosas fosfato produciría
12 u 3 36 ATP. A este número hay que descontarle un ATP
que se utilizaría en la fosforilación de la glucosa por la hexoqui-
nasa, luego en total serían 35 ATP.

REGULACIÓN DE LA RUTA
Las reacciones de la ruta de las pentosas fosfato tienen lu-

gar como las de la glucolítica, en el citosol, y la regulación se
produce en la primera enzima de la misma, la glucosa 6-fosfato
deshidrogenasa. La enzima se sintetiza en gran cantidad cuan-
do se ingieren dietas ricas en hidratos de carbono. Cuando una
persona pasa de un estado de inanición a otro en exceso de hi-
dratos de carbono, la glucosa 6-fosfato deshidrogenasa hepáti-
ca puede aumentar más de 10 veces la concentración.
La regulación de la síntesis coexiste con un control fino de La regulación del flu-
la actividad enzimática mediante el NADPH como inhibidor jo de la ruta de las
pentosas fosfato se
competitivo con una constante de inhibición muy baja realiza, fundamental-
(Ki 7 PM). La inhibición es superior al 90% cuando el cocien- mente, a nivel de glu-
te de la concentración NADPH/NADP es mayor de 10. cosa 6-P deshidroge-
nasa.
La concentración celular de la glucosa 6-fosfato es aproxi-
madamente 1 PM; esto limita en cierta medida la actividad de
la glucosa 6-fosfato deshidrogenasa, que tiene una Km en el
rango micromolecular.
Dependiendo de las demandas celulares, una combina-
ción del flujo de intermediarios de las rutas glucolítica y de las
pentosas fosfato puede estar regulada para producir propor-
ciones adecuadas de NADPH, ribosa 5-fosfato y gliceraldehí-
do 3-fosfato.
RESUMEN
La glucosa 6-fosfato puede ser oxidada a través de la

ruta de las pentosas fosfato por un conjunto de enzimas
que se encuentra en el citosol de, principalmente, células
hepáticas, glándulas mamarias, tejido adiposo y corteza
adrenal. Se distinguen dos etapas en función de la natura-
leza de las reacciones. En la I existen dos reacciones que
requieren como aceptor electrónico NADP, que pasa a
NADPH y es el principal compuesto reductor en la síntesis
de biomoléculas como ácidos grasos y colesterol. La oxi-
dación completa de una molécula de glucosa origina
12 NADPH y 6 CO2. Aunque la ruta puede actuar en con-
diciones anaeróbicas, cuando actúa en presencia de oxíge-
no puede producir 35 ATP. La primera enzima de la ruta la
glucosa 6-fosfato deshidrogenasa, controla el flujo a través
de la misma; la actividad y la síntesis de la enzima se en-
cuentran perfectamente reguladas.

Deficiencias de la glucosa 6-fosfato

deshidrogenasa
Se han identificado varios tipos de deficiencia hereditaria de

glucosa 6-fosfato, los cuales producen hipersensibilidad a cier-
tos fármacos, lo que conduce a una anemia hemolítica.
Aunque los primeros casos se descubrieron al tratar enfer-
mos de paludismo con la droga antimalaria primaquina, poste-
riormente se han descrito acciones similares en otros fármacos.
Las células deficientes en glucosa 6-fosfato deshidrogenasa
tienen una baja producción de NADPH, el cual es imprescindi-
ble para mantener el glutation en forma reducida (GSH). Este
compuesto es esencial para mantener la integridad de la mem-
brana de los eritrocitos o glóbulos rojos. Cuando el glutation no
se encuentra en forma reducida, las membranas no conservan
la estructura adecuada y pueden ser destruidas por los fárma-
cos, y esto sucede con mayor facilidad cuando más viejos son
los eritrocitos. Ello explica el alto porcentaje de eritrocitos jóve-
nes circulantes concentrados en las personas con deficiencia en
glucosa 6-fosfato deshidrogenasa.
Curiosamente esta deficiencia grave en el caso de trata-
miento con fármacos ofrece una ventaja a los pacientes que la
presentan y es que tienen menor probabilidad de contraer la
malaria. El parásito de la malaria, Plasmodium falciparum, re-
quiere esencialmente para su crecimiento y desarrollo
NADPH. Las personas con deficiencia enzimática no aportan
suficiente coenzima reducido para el desarrollo del parásito.
Esta “ventaja” ha provocado una selección natural de los defi-
cientes en la glucosa 6-fosfato deshidrogenasa que la padecen,
más de 400 millones de personas en el planeta, concentrando-
se en aquellos países en que la malaria es una enfermedad
endémica.

Gluconeogénesis
TEMA 5 Glucogénesis-
glucogenólisis
Gluconeogénesis. Regulación de la ruta gluconeo-

génica. Glucogénesis y glucogenólisis. Los ciclos
de substrato.
La gluconeogénesis es la biosíntesis de glucosa y otros hi-

dratos de carbono a partir de moléculas precursoras sencillas.
Es uno de los procesos más importantes de los organismos vi-
vos ya que las células requieren glucosa para el normal meta-
bolismo y algunas, como las del cerebro, de manera esencial.
La gluconeogénesis difiere de la glucólisis en unas pocas reac-
ciones.
La concentración de glucosa en sangre debe permanecer La mayoria de las re-
dentro de un intervalo adecuado y el control se consigue me- acciones de la ruta
glucolítica y glucogé-
diante la regulación precisa del metabolismo del glucógeno, un nica son las mismas.
modelo de regulación de dos rutas inversas. La diferente regu-
lación de las reacciones inversas conduce a la formación de ci-
clos de substrato, de gran importancia biológica en la regula-
ción de la velocidad del flujo metabólico.
GLUCONEOGÉNESIS
Hemos estudiado que la conversión de glucosa 6-fosfato en

piruvato es la ruta central del catabolismo de hidratos de car-
bono en la mayoría de los organismos, tanto en condiciones
aeróbicas como anaeróbicas. De manera similar, el proceso in-
verso, la conversión de piruvato en glucosa 6-fosfato es una
ruta esencial en la biosíntesis de monosacáridos y polisacáridos
en todas las células. Esta ruta se denomina gluconeogénesis
(Fig. 5.1).
Las fuentes de carbono para la gluconeogénesis las consti-
tuyen varios precursores obtenidos principalmente a partir de
L-aminoácidos, del ácido pirúvico o del ácido láctico. Por ejem-

Figura 5.1.– La gluconeogénesis es la biosíntesis de la glucosa

y otros hidratos de carbono.
plo, la síntesis de glucosa en el hígado a partir del ácido láctico

de la sangre que aparece durante una intensa actividad muscu-
lar y en la que la glucosa es degradada a ácido láctico por el
músculo esquelético.
La gluconeogénesis La mayoría de las reacciones en la ruta gluconeogénica des-
es esencial para el de el piruvato a la glucosa son catalizadas por las mismas enzi-
mantenimiento de las
concentraciones nor- mas de la ruta glucolítica y proceden a la inversa de los pasos
males de glucosa en utilizados en la glucólisis (Fig. 5.2). Sin embargo, hay tres pasos
sangre. irreversibles en dirección glucolítica que no pueden utilizarse en
dirección gluconeogénica. En esta dirección las reacciones de-
ben ser sobrepasadas por reacciones alternativas que son más
favorables para la síntesis. Estas reacciones son: la formación
de fosfoenolpiruvato, la formación de fructosa 6-fosfato y la
formación de glucosa.
Formación de fosfenolpiruvato
La primera de estas reacciones es la conversión de piruvato

en fosfenolpiruvato, la cual no puede llevarse a cabo en direc-
ción inversa a la reacción catalizada por la piruvato quinasa de-
bida a un elevado valor negativo de energía libre ('G 0c
7,5 kcal/mol). En vez de esta reacción, la fosforilación de pi-
ruvato es conseguida a través de una secuencia de reacciones
que requiere la cooperación de enzimas del citoplasma y de la
mitocondria. La primera reacción de esta secuencia está catali-
zada por la piruvato carboxilasa mitocondrial:

GLUCONEOGÉNESIS GLUCOGÉNESIS-GLUCOGENÓLISIS 55
piruvato carboxilasa
piruvato CO2 ATP o
Acetil-CoA ()
oxalacetato ADP Pi
La piruvato carboxilasa es una enzima reguladora que sólo

es activa en presencia de su modulador positivo, acetil-CoA, y
requiere como coenzima biotina, a la que se une covalente-
mente.
Figura 5.2.– La gluconeogénesis y la glucólisis y las etapas en que divergen.

El oxalacetato formado es reducido a malato en la mitocon-

dria a expensas de NADH y mediante la malato deshidrogenasa:
malato deshidrogenasa
oxalacetato NADH H o
m malato NAD

El malato difunde fuera de la mitocondria al citoplasma,

donde es reoxidado por la malato deshidrogenasa citosólica:
malato deshidrogenasa
malato NAD o
m oxalacetato NADH H

El oxalato es fosforilado a fosfoenolpiruvato por el GTP

(guanosina trifosfato) mediante la fosfoenolpiruvato carboxi-
quinasa:
oxalacetato GTP o
fosfoenolpiruvato carboxiquinasa
o fosfoenolpiruvato CO2 GDP
La enzima se ha encontrado en el citoplasma de células

hepáticas y requiere Mg2 para su actividad.
La ecuación global de este compuesto de reacciones nece-
sarias para la formación de fosfoenolpiruvato en piruvato es:
o
piruvato ATP GTP m
o
m fosfoenolpiruvato ADP GDP Pi
Se requiere, por tanto, dos enlaces fosfatos ricos en energía,

uno procedente del ATP y otro del GTP, esto es
2 u (7,3 kcal/mol) 14,6 kcal/mol
Hidrólisis de fructosa 1,6-bisfosfato
La gluconeogénesis La segunda reacción en que las rutas glucolítica y glucone-

utiliza enzimas es- ogénica divergen es la fosforilación de la fructosa 6-fosfato por
pecíficas para evitar
tres reacciones irre- la fosfofructoquinasa. Esta reacción irreversible es sobrepasada
versibles de la glucó- gluconeogénicamente por la fructosa 1,6-bisfosfatasa
lisis.
fructosa 1,6-
bifosfatasa
fructosa 1,6-bisfosfato H2O o fructosa 6-fosfato Pi
'G 0c 3,9 kcal/mol
La fructosa 1,6 bisfosfatosa es una enzima reguladora cuya

actividad es inhibida por AMP y ADP.
Hidrólisis de glucosa 6-fosfato
La glucosa 6-fosfato es hidrolizada a glucosa por la glucosa

6-fosfatasa:

glucosa 6-fosfatasa
glucosa 6-fosfato H2O o glucosa Pi
'G 0c 3,3 kcal/mol
La enzima se encuentra presente en el hígado pero no en

músculo ni cerebro.
La ecuación global de la gluconeogénesis que implica la
suma de las reacciones biosintéticas es:
2 piruvato 4 ATP 2 GTP 2 NADH 2 H 6 H2O o

o glucosa 2 NAD 4 ADP 2 GDT 6P
Por cada molécula de glucosa que se forma se requieren seis

enlaces fosfatos ricos en energía y dos moléculas de NADH.
La gluconeogénesis también puede tener lugar a partir de Los precursores glu-
algunos aminoácidos e intermediarios del ciclo de Krebs. Los coneogénicos más
importantes son el
compuestos como citrato, isocitrato, D-cetoglutarato, succinato lactato, la alamina, el
y fumarato pueden convertirse en malato, el cual puede pasar glicerol y el propiona-
al citosol, convertirse en fosfoenolpiruvato mediante la PEP to.
carboxiquinasa citoplásmica e incorporarse a la ruta glucone-
ogénica. El esqueleto carbonado de algunos aminoácidos
como alanina, glutámico o aspartico pueden convertirse en in-
termediarios del ciclo de Krebs o en PEP, por ello se les deno-
mina glucogénicos, y de esta forma entran en la ruta gluconeo-
génica (Fig. 5.3).
REGULACIÓN DE LA RUTA GLUCONEOGÉNICA
La gluconeogénesis está regulada en los tres puntos especí-

ficos de la ruta: la piruvato carboxilasa, la fructosa 1,6-bisfosfa-
tasa y la glucosa 6-fosfatasa. La primera está activada por ace-
til-CoA e inhibida por ADP; la fructosa 1,6-bifosfatasa es acti-
vada por ATP e inhibida por ADP y AMP, mientras que la
glucosa 6-fosfatasa está sujeta a la inhibición por los dos pro-
ductos: glucosa y fosfato inorgánico (Pi ).
Algunas hormonas juegan un papel clave en la regulación de
la ruta gluconeogénica y, en ocasiones, en la ruta glucolítica si-
multáneamente. Así, el glucagón estimula la gluconeogénesis
aumentando la actividad de las enzimas como la fosfenolpiruva-
to carboxiquinasa, al mismo tiempo que inhibe la ruta glucolíti-
ca. Este hecho se realiza por una disminución de la fructosa 2,6-
bisfosfato, que es un potente activador de la fosfofructoquinasa.
La síntesis de las enzimas claves de la gluconeogénesis está
también controlada por la acción de las hormonas insulina y
cortisol. La insulina reprime la síntesis de las enzimas mientras
el cortisol la induce. Esto es fácilmente entendible; así, en una

Figura 5.3.– Puntos de control en la ruta gluconeogénica.
dieta rica en grasas y pobre en glucosa, ésta tiene que ser sinte-
tizada a partir de lactato o glicerol (procedente de la hidrólisis
de trigliceridos), o de los aminoácidos glucogénicos. Todos es-
tos procesos son estimulados por el cortisol.
Por otra parte, en la ruta gluconeogénica existen reacciones
del óxido-reducción que son controladas por la disponibilidad
celular de coenzimas oxidadas y reducidas que se producen en
el proceso de oxidación de los ácidos grasos y en el ciclo de
Krebs.
De forma resumida podemos decir que el control fino de la
ruta gluconeogénica se lleva a cabo por las relaciones
NAD , NADP , ATP

NADH NADPH ADP
el acetil-CoA y algunos intermediarios del ciclo de Krebs, mien-

tras el control de la síntesis depende de señales hormonales.

GLUCOGÉNESIS Y GLUCOGENÓLISIS
El anabolismo y el catabolismo del glucógeno se producen

a través de diferentes rutas que están controladas con precisión
y relacionadas entre sí, con el fin de mantener los niveles de
glucosa sanguínea adecuados y disponer de glucosa 6-fosfato
para la producción de ATP.
Prácticamente todas las células de animales superiores con- Los polisacáridos de
tienen glucógeno pero las fuentes más ricas son el tejido mus- la dieta se metaboli-
zan mediante hidróli-
cular y el hígado. En un hombre de 70 kg de peso, el peso del sis a monosacáridos.
tejido muscular es aproximadamente la mitad y el del glucóge-
no 245 g (0,7%), mientras el hígado pesa aproximadamente
1.800 g y el glucógeno que contiene 110 g (6,1%). El hígado
es, pues, el principal reservorio de carbohidratos que se alma-
cena como glucógeno; este proceso anabólico se denomina
glucogénesis. El glucógeno es una fuente de glucosa mediante
un proceso catabólico que se conoce como glucogenólisis. Am-
bos procesos siguen rutas diferentes y están regulados indepen-
dientemente.
Como se ha estudiado anteriormente, el glucógeno es un
homopolisacárido de unidades de glucosa unidas mediante en-
laces D (1 o 4) glucosídicos con ramificaciones D (1 o 6) cada
7-12 unidades.
La glucógeno fosforilasa hidroliza los enlaces D (1 o 4) glu- El almidón y el glucó-
cosídicos del extremo no reductor de la cadena utilizando fosfa- geno se movilizan
mediante fosforila-
to inorgánico: ción.
(glucosa)n HPO42 o (glucosa)(n 1) glucosa 1-fosfato

'G 0c 0,73 kcal/mol
Aunque la reacción, de acuerdo con el valor de 'G 0c, es re-

versible, en condiciones intracelulares procede en la dirección
de hidrólisis. La glucógeno fosforilasa actúa repetidamente has-
ta encontrar una ramificación con enlaces D (1 o 6), entonces
entra en acción la enzima D (1 o 6) glucosidasa, una enzima
desramificante, que hidroliza la unión D (1 o 6).
La glucógeno fosforilasa está situada en un punto estratégi-
co entre el glucógeno almacenado como combustible y el siste-
ma enzimático para la utilización del mismo.
La actividad, como veremos, está regulada con precisión
por una serie de controles bioquímicos y fisiológicos interco-
nectados.
La fosforilasa del músculo esquelético, un dímero o un
tetrámero de 97 kcal, puede existir en dos formas interconverti-
bles: una fosforilasa a y una fosforilasa b; cada una de ellas,
según el modelo alostérico concertado, se puede encontrar en

dos formas: activa (R) e inactiva (T). La fosforilasa b se con-

vierte en a mediante fosforilación, un proceso catalizado por la
fosforilasa quinasa (Fig. 5.4). La fosforilasa a se desactiva por
hidrólisis del fosfato, una reacción catalizada por la proteína
fosfatasa 1, una fosfatasa que se encuentra en la célula abun-
dantemente.
Figura 5.4.– La fosforilasa puede adoptar en cualquiera de sus formas, a y b,

una conformación T (tensa, inactiva) o R (relajada, activa). La forma b está
casi siempre en el estado T y la forma a, en estado R.
La fosforilasa b muscular sólo se activa en presencia de ele-

vadas concentraciones de AMP, que actúa alostéricamente,
uniéndose al centro activo de la enzima y alterándo la confor-
mación de la fosforilasa b. El ATP y la glucosa 6-fosfato actúan
como efectores negativos. Cuando el músculo requiere energía
(AMP concentración alta), la fosforilasa b se activa. Por el con-
trario, la fosforilasa a es totalmente activa independientemente
de los niveles de AMP, ATP y glucosa 6-fosfato.
En la mayoría de las condiciones fisiológicas, la proporción
de enzima activa es determinada por las velocidades de fosfori-
lación y desfosforilación.
En la regulación de la La regulación alostérica de la fosforilasa hepática difiere de
degradación del glu- la muscular en dos aspectos importantes:
cógeno intervienen
tres factores o seña- 1. El AMP no activa la fosforilasa b hepática.
les: metabólicas, hor-
monales y neuromus- 2. La fosforilasa a del hígado se desactiva por la unión de
culares. glucosa.
Esto es, la glucosa desplaza el equilibrio de la forma a de R
a T. El hecho principal de la degradación del glucógeno hepáti-
co es liberar glucosa cuando el nivel de esta sustancia en san-
gre es bajo.
La fosforilasa existe también en dos formas: fosforilada,
que es activa y desfosforilada, inactiva. Esta enzima es calcio-
dependiente, en su estado no fosforilado, posee una Km ele-
vada gracias a la presencia del ión Ca2; a concentraciones ci-
tosólicas normales, la enzima es prácticamente inactiva. La

fosforilación de la enzima por una proteína quinasa de AMP-

cíclico aumenta la afinidad de la enzima Ca2 reduciendo el
valor de la Km.
Todas estas etapas de la glucogenólisis se relacionan de una
forma continua mediante factores en que la señal de regulación
inicial se va ampliando mediante un proceso en cascada (Fig.
5.5). Una molécula de AMP-c activa varias de las proteína qui-
nasas las cuales actúan transformando muchas de fosforilasa b
en a, y así sucesivamente.
Figura 5.5.– Reacciones en cascada. Sirven de control y para amplificar

la señal inicial hasta miles de veces.
De forma resumida se puede indicar que en la regulación

de la glucogenólisis intervienen tres factores:
a) Las señales metabólicas intracelulares como la relación
ATP/ADP; un valor alto de la misma inhibe la ruta gluco-
genolítica.
b) Señales hormonales. La epinefrina activa la adenil cicla-
sa, que a su vez activa la cascada glucogenolítica.
c) Estimulación renal. Los impulsos neuromusculares pro-
vocan la liberación de Ca2, el cual activa simultánea-
mente la contracción muscular y la fosforilasa quinasa
que inicia la activación de la glucogenólisis.

Las reacciones en El proceso inverso, la glucogénesis, comienza con el inter-

cascada controlan y mediario central del metabolismo de carbohidratos: la glucosa
amplifican la señal
hormonal en la degra- 6-fosfato. La primera reacción es la conversión de glucosa 6-
dación del glucógeno. fosfato en glucosa 1-fosfato por la fosfoglucomutasa:
fosfoglucomutasa
glucosa 6-fosfato o glucosa 1-fosfato
'G 0c 1,74 kcal/mol
Posteriormente, la glucosa 1-fosfato se convierte en UDP-

glucosa. Esta reacción, catalizada por la UDP-pirofosforilasa,
requiere UTP y es esencialmente irreversible porque el pirofos-
fato formado se hidroliza rápidamente por una pirofosfatasa a
dos moléculas de fosfato:
UDP-pirosforilasa
glucosa 1-fosfato UTP o
pirosfosfatasa
o UDP-glucosa PP o 2Pi
La UDP-glucosa es la En el segundo paso en la formación de glucógeno la UDP-

forma de glucosa ac- glucosa es transferido al extremo no reductor de la glucosa ter-
tivada para la síntesis
de glucógeno.
minal formando enlaces D (1 o 4) entre el átomo 1 del residuo
glucosílico añadido y el 4-hidróxilo del residuo glucosa de la
cadena. La reacción es catalizada por la glucógeno sintasa:
glucogeno sintasa
UDP-glucosa (glucosa)n o UDP (glucosa)n 1
La glucógeno sintasa existe en dos formas: una de ellas es

poco activa en ausencia de glucosa 6-fosfato. Cuando la con-
centración celular de glucosa 6-fosfato aumenta, actúa como
modulador positivo de la glucógeno sintasa elevando su activi-
dad por encima de 40 veces la inicial, favoreciendo la síntesis
de glucógeno.
La glucógeno sintasa no es capaz de originar enlaces D
(1 o 6) en los puntos de ramificación. Sin embargo, hay una
enzima ramificante, la oligo (1,4 o 1,6) glucosil transferasa,
que transfiere segmentos de cadena de seis a siete unidades
desde el extremo en crecimiento hasta otro punto de la misma
cadena o hasta una cadena vecina. La ramificación se fija me-
diante un enlace D-1,6-glucosílico. Cada ramificación puede
ser alargada por adición de más unidades de glucosa hasta que
haya suficientes para transferir otras secuencias de seis a 10
unidades. El crecimiento arboriforme continúa, hasta un deter-
minado tamaño sin que se conozca, hasta ahora, el mecanismo
que limita su tamaño final (Fig. 5.6).
La regulación de la biosíntesis de glucógeno está relaciona-
da coordinadamente con la de la degradación y cuando esta
ruta se encuentra activa, como en el ejercicio, la biosíntesis se
halla inhibida.

Figura 5.6.– La degradación y la síntesis de glucógeno están relacionadas

y reguladas indistintamente.
Cuando la epinefrina desencadena la producción de AMP-c, Las condiciones que

se activa la proteína quinasa dependiente de AMP-c. Esta enzi- activan la síntesis de
glucógeno inhiben su
ma ejerce dos efectos simultáneos: estimula la glucogenólisis degradación y vice-
aumentando la conversión de fosforilasa b en a, y al mismo versa.
tiempo inhibe la síntesis de glucógeno favoreciendo la conver-
sión de glucógeno sintasa forma I en la forma D, que es virtual-
mente inactiva en ausencia de suficiente glucosa 6-fosfato.
Si el ATP se utiliza en la extracción muscular, la acumula-
ción de AMP activa alostéricamente la fosforilasa b a fin de ac-
tivar el proceso glucogenolítico. Cuando desciende la actividad
muscular se reduce la utilización de glucosa 6-fosfato, aumen-
tando su concentración y activando alostéricamente la glucóge-
no sintasa D y favoreciendo la glucogénesis. Al mismo tiempo,
la glucosa 6-fosfato inhibe la fosforilasa quinasa AMP-depen-
diente. En el músculo en reposo, la mayor parte de la glucóge-
no sintasa se encuentra en la forma I (activa), mientras la fosfo-
rilasa se encuentra en la forma b (inactiva). En estas condicio-
nes, el estado metabólico del músculo es de síntesis de
glucógeno. Cuando se acumula el glucógeno, éste actúa como
un regulador activando la fosforilasa quinasa y por consiguien-
te la glucogenólisis, e inhibiendo la glucógeno sintasa y con ello
la síntesis de glucógeno.
En la figura 5.7 se muestra el control de la glucogénesis y la
glucogenólisis en el músculo. La proteína quinasa AMP-c de-
pendiente, la fructosa 6-fosfato y el propio glucógeno intervie-
nen en la regulación de la degradación y biosíntesis del glucó-
geno. Cuando éste se encuentra en exceso, activa la proteína
quinasa para favorecer la glucogenólisis e inhibe la fosfatasa
para que la glucógeno sintasa permanezca en la forma inactiva
y no tenga lugar la síntesis de glucógeno. Un efecto similar apa-

Figura 5.7.– El control de la glucogénesis y la glucogenólisis en el músculo.
rece cuando la célula requiere energía iniciado por la epinefri-

na. Por otra parte, un exceso de glucosa 6-fosfato activa el
paso de la forma D a la I favoreciendo la glucogénesis e inhibe
la fosfarilasa quinasa para impedir la glucogenólisis.
El control de los procesos glucogénico y glucogenolítico en
el hígado es muy similar al que tiene lugar en el músculo, aun-
que existen algunas diferencias estructurales. La hormona que
inicia los procesos de movilización de la glucosa del glucógeno
hepático es el glucagón. Esta hormona es liberada por las célu-
las D del páncreas en respuesta a un nivel bajo de glucosa san-
guínea y funciona a través del sistema proteína quinasa AMP-c

dependiente. Como en las células musculares, esta enzima acti-

va la glucogenólisis e inhibe la glucogénesis, aunque la epine-
frina también provoca estos efectos en el hígado.
En el hígado la glucosa libre actúa como una sustancia re-
guladora y, cuando alcanza niveles superiores a los normales,
inhibe la degradación de glucógeno y favorece la síntesis del
mismo. Así, un aumento de la concentración de glucosa activa
la fosforilasa a fosfatasa aumentando la fosforilasa b, que es la
forma poco activa en la ruta glucogenolítica, y, al mismo tiem-
po, activa la fosfoproteína fosfatasa para favorecer la forma I,
activa, de la glucógeno sintasa.
LOS CICLOS DE SUBSTRATO
Un par de reacciones en que el substrato de una enzima es

el producto de otra y viceversa constituye un ciclo de substrato.
Un claro ejemplo es la fosforilación de la fructosa 6-fosfato en
dirección glucolítica a fructosa 1,6-bisfosfato y la hidrólisis de
ésta nuevamente a fructosa 6-fosfato.
Antes a estos procesos se les denominaba ciclos fútiles o
inútiles, porque se creía que en este reciclado no se producía
una ganancia neta de ninguno de los compuestos implicados
para poder seguir siendo metabolizados. Sin embargo, en con-
diciones normales, al estar dichas reacciones catalizadas por
enzimas distintas, no son activas al mismo tiempo, ya que am-
bas suelen estar controladas por efectos alostéricos inversos.
Así en las reacciones anteriores se ha demostrado que, durante
la gluconeogénesis, se produce fosforilación de la fructosa 6-
fosfato a fructosa 1,6-bisfosfato. Este proceso cíclico se ha ob-
servado en otros pares de reacciones opuestas irreversibles.
Este hecho, que se entendió como un fallo o error en el control
metabólico, se considera ahora una ventaja metabólica desde
el punto de vista biológico. Así, una posibilidad es que los ci-
clos de substrato amplifiquen señales metabólicas (Fig. 5.8).
Figura 5.8.– El ciclo de sustrato fructosa 6-fosfato-fructosa 1,6-bisfosfato

Supongamos que la velocidad de conversión de fructosa

6-fosfato (F6P) en fructosa 1,6-bisfosfato (F1,6BP) sea 90 y la
de F1,6BP en GGP, 80, originando un flujo neto en dirección
glucolítica de 90 80 10. Imaginemos que un efector alosté-
rico, como puede ser el AMP, incrementa la velocidad
FGP o F1,6BP en 20% siendo, por tanto, ésta
90 80 u 20 108
100
y reduce inversamente la dirección F1,6BP FGP otro 20% en
80 80 u 20 64
100
El nuevo flujo será 64 10 54, de tal manera que se habría

producido un incremento en el flujo neto de
54 u 100 540%
10
Otra posible función de los ciclos de substrato es la genera-

ción de calor producido por la hidrólisis del ATP. Esto es, la
hidrólisis de ATP origina calor que sirve para mantener el en-
torno celular a una temperatura adecuada para que las enzi-
mas desarrollen una actividad óptima (Fig. 5.9).
o F1,6BP operando para producir ca-

Figura 5.9.– El ciclo de substrato FGP m
lor por hidrólisis del ATP, ya que la reacción neta es ATP o ADP Pi
('G0c 7,3 kcal/mol).
Este hecho es de gran importancia en algunas especies de

insectos que pueden volar aunque la temperatura ambiental
esté muy por debajo de la corporal.

RESUMEN
La gluconeogénesis es la ruta central para la biosíntesis

de carbohidratos a partir de precursores no hidrocarbona-
dos sencillos como lactato, piruvato o algunos aminoáci-
dos.
Esta ruta es común a la glucolítica salvo en las tres
reacciones irreversibles glucolíticamente y que son sobre-
pasadas en reacciones energéticamente favorables en di-
rección gluconeogénica. Así el piruvato es convertido en
fosfoenolpiruvato mediante la secuencia mitocondrial piru-
vato-oxalacetato-malato, seguida de la secuencia citosólica
malato-oxalacetato-fosfoenolpiruvato.
El segundo paso es la hidrólisis de fructosa 1,6-bisfos-
fato a fructosa 6-fosfato y el tercero es la hidrólisis de glu-
cosa 6-fosfato por la glucosa 6-fosfatosa para originar glu-
cosa. La ruta requiere seis enlaces fosfato ricos en energía
y es regulada, principalmente, por la primera enzima, la
piruvato carboxilasa. La gluconeogénesis también se pue-
de lograr a partir de algunos aminoácidos o intermediarios
del ciclo de Krebs.
Los procesos de degradación y síntesis del glucógeno
en células musculares y hepáticas están regulados con pre-
cisión y mediante señales metabólicas y hormonales. Los
ciclos de substrato sirven para amplificar señales metabóli-
cas y pueden generar calor muscular local.
Se conocen hasta ocho enfermedades en el almacenamien-

to del glucógeno (Tabla 5.1). La enfermedad de Cori o de tipo
III se origina como consecuencia de una deficiencia en la enzi-
ma desramificante y, por ello, la degradación del glucógeno
está limitada quedando moléculas mayores que las normales.
Esto es, las moléculas son mayores debido a que las regiones
internas del glucógeno no pueden ser degradadas por la glucó-
geno fosforilasa.
Después de una alimentación normal, el glucógeno hepáti-
co muestra una estructura normal, pero, a medida que el orga-
nismo requiere glucosa, produce glucosa 1-fosfato que la con-
vierte en glucosa 6-fosfato y que, por hidrólisis, libera glucosa a
la sangre. Las cadenas externas del glucógeno van disminuyen-
do progresivamente hasta que no se puede producir más glu-

68
Tabla 1.1– Algunas enfermedades por almacenamiento de glucógeno.
Tejido u órgano Glucógeno en el órgano

Enfermedad Defecto enzimático Características clínicas
afectado afectado
I Enfermedad de Glucosa-6-fosfatasa Hígado y riñón Cantidad aumentada; Alargamiento masivo del hígado. Falla para
von Gierke estructura normal desarrollarse. Hipoglucemia intensa, cetosis,
hiperlipemia
II Enfermedad de α-1,4-Glucosidasa Todos los órganos Aumento masivo en cantidad; Insuficiencia cardiorrespiratoria que causa la
Pompe (lisosómica) estructura normal muerte normalmente antes de los dos años edad.
III Enfermedad de Amilo-1,6-Glucosidasa Músculos e hígado Cantidad aumentada; ramas Parecidas a los del tipo I pero más leves
Cori (enzima desramificante) externas cortas
IV Enfermedad de Enzima ramificante Hígado y bazo Cantidad normal; ramas Cirrosis hepática progresiva. Insuficiencia hepática.
FUNDAMENTOS DE BIOQUÍMICA METABÓLICA

Anderson (α-1,4 → α-1,6) externas muy largas
V Enfermedad de Fosforilasa Músculo Cantidad moderadamente Capacidad limitada para realizar ejercicios intensos
Mc Ardle aumentada; estructura normal debido a calambres musculares dolorosos
VI Enfermedad de Fosforilasa Hígado Cantidad aumentada Parecidas a los del tipo I pero más leves
Hers
VII Enfermedad de Fosfofructoquinasa Músculo Cantidad aumentada; Parecidas a los del tipo V
Tauri estructura normal
VIII Fosforilasa quinasa Hígado Cantidad aumentada; Agrandamiento ligero del hígado. Hipoglucemia
estructura normal leve
cosa 1-fosfato porque las unidades de glucosa están unidas por

enlaces D (1 o 6). En este punto la hipoglucemia estimula la
secreción de glucagón y otras hormonas que estimulan la glu-
coneogénesis, se produce más glucosa y la liberación de ácidos
grasos de las células adiposas. Se origina cetonemia, ya que el
hígado capta una gran cantidad de ácidos grasos y los convier-
te en cuerpos cetónicos. A los pacientes con esta enfermedad
se debe suministrar alimentos ricos en carbohidratos en pe-
queñas y frecuentes tomas.

TEMA 6 Metabolismo lipídico
Digestión, movilización y transporte de los lípidos.

b-oxidación de los ácidos grasos. Rendimiento
energético de la oxidación de los ácidos grasos.
Control de la oxidación de los ácidos grasos.
Los lípidos, como grupo heterogéneo de sustancias, de-

sempeñan funciones muy diversas en el organismo, ya que
actúan como vitaminas, hormonas, componentes de membra-
nas biológicas o reserva energética, almacenándose principal-
mente en el tejido adiposo en forma de triacilglicéridos. En el
caso de los mamíferos, el metabolismo lipídico comienza con
la digestión de las grasas ingeridas en la dieta, su transporte a
través de las lipoproteínas, su posterior almacenamiento y su
movilización cuando son necesarios para la obtención de
energía. En este sentido, los ácidos grasos representan la prin-
cipal fuente de almacenamiento de energía en muchos orga-
nismos, ya que suponen una ventaja con relación a los poli-
sacáridos, puesto que en los ácidos grasos el carbono está casi
completamente reducido y, por lo tanto, su oxidación genera
más energía, en forma de ATP, que la de otros compuestos de
carbono como los glúcidos.
DIGESTIÓN, MOVILIZACIÓN
Y TRANSPORTE DE LOS LÍPIDOS
Digestión de los lípidos
La digestión de los lípidos comienza en el estómago me-

diante una lipasa estable frente a ácidos. La velocidad de
hidrólisis es muy lenta, los triacilglicéridos son apenas digeri-
dos a nivel gástrico, debido a que el pH del estómago es muy
ácido y no puede actuar la lipasa gástrica. En la región inferior
del estómago los triacilglicéridos se mezclan con proteínas, hi-

dratos de carbono, jugo gástrico y otras sustancias; la degrada-

ción de esta mezcla, junto con la acción motriz del estómago,
origina una sustancia denominada quimo. Al mismo tiempo
que el quimo pasa al duodeno, se mezcla con el jugo pancreá-
tico, el cual contiene sales biliares, lipasa pancreática y estea-
rasas, así como iones bicarbonato, que neutralizan la actividad
del quimo.
La hidrólisis de los La hidrólisis de los triacilglicéridos se produce fundamental-
triacilglicéridos se mente en el intestino delgado por acción de la lipasa pancreáti-
produce fundamental-
mente en el intestino ca, esta enzima se sintetiza en el páncreas en forma de zimóge-
delgado por acción no siendo secretada al duodeno a través del conducto linfático.
de la lipasa pancreá- El zimógeno es activado al ser hidrolizado de forma específica
tica.
por la tripsina, requiriendo para su actividad la presencia de sa-
les biliares e iones Ca2. La lipasa pancreática es específica
para ésteres en la posición D del glicerol, de manera que se es-
cinden ácidos grasos de las posiciones C-1 y C-3, dando como
resultado ácidos libres y E-monoacilgliceroles. La forma purifi-
cada de la enzima es fuertemente inhibida por los ácidos bilia-
res, normalmente presentes en el intestino delgado durante la
digestión de los lípidos, esta inhibición se supera mediante la
acción de la colipasa, una proteína de 12 kDa que se une tanto
a la interfase lípido-agua como a la lipasa, anclándose y acti-
vando a la enzima.
Los fosfolípidos son degradados mediante fosfolipasas es-
pecíficas, que se sintetizan en el páncreas en forma de zimóge-
nos, y son activadas como las lipasas por proteolísis mediada
por tripsina, y de igual modo que ellas requieren la presencia
de ácidos biliares e iones calcio para su actividad y son inhibi-
das por los ácidos biliares.
Las estearasas son una familia de enzimas menos específi-
cas, que catalizan la hidrólisis de otro tipo de lípidos tales como
ésteres de colesterol, monoacilgliceroles u otros ésteres como la
vitamina A con ácidos carboxílicos. A diferencia de las anterio-
res, estas enzimas requieren la presencia de los ácidos biliares
para su actividad.
Las sales biliares emulsionan los triacilglicéridos y ésteres
de los ácidos grasos de cadena larga, haciéndolos accesibles a
la acción hidrolítica de las lipasas y estearasas intestinales.
Este proceso de emulsión es posible gracias a la naturaleza
anfipática de las sales biliares, que pueden formar micelas y
éstas solubilizar otros lípidos, tales como fosfolípidos y ácidos
grasos.
Las micelas son transportadas desde el lumen del intestino
delgado hasta las microvellosidades de las células epiteliales del
mismo, localización en la cual los ácidos grasos de cadena larga
se disocian de las micelas y difunden a través de la membrana

METABOLISMO LIPÍDICO 73
hasta el citoplasma celular. Las sales biliares son reabsorbidas

en el íleon y transportadas vía vena mesentérica superior a la
porta y de ésta al hígado, donde entran de nuevo a formar par-
te de la bilis.
Los ácidos grasos que llegan a la superficie de las células
son captados y utilizados para la producción de energía princi-
palmente en las mitocondrias.
Transporte de los lípidos: Lipoproteínas
Las lipoproteínas son el sistema se transporte de lípidos Los ácidos grasos

por el organismo; ayudan a mantener en forma solubilizada que llegan a la super-
ficie de las células
unos 500 mg de lípidos por cada 100 mL de sangre. Los qui- son captados y utili-
lomicrones, que son las lipoproteínas que transportan a los zados para la produc-
triacilglicéridos exógenos, llevan la grasa del alimento desde el ción de energía prin-
cipalmente en las mi-
intestino a los tejidos periféricos, especialmente al corazón, el tocondrias.
músculo y el tejido adiposo (Fig. 6.1). Las VLDL (lipoproteí-
nas de muy baja densidad) desempeñan un papel muy pareci-
do pero para los triacilglicéridos endógenos (sintetizados en el
hígado) (Fig. 6.2). Los triacilglicéridos de ambas lipoproteínas
Figura 6.1.– Destino metabólico de los quilomicrones

Figura 6.2.– Destino metabólico de las VLDL. Formación de las LDL.
Las lipoproteínas son se hidrolizan a glicerol y ácidos grasos en las superficies inter-
el sistema se trans- nas de los capilares de los tejidos periféricos. Esta hidrólisis
porte de lípidos por
el organismo. comporta una activación de la enzima extracelular lipoproteí-
na lipasa por la apoproteína C-II. Algunos de estos ácidos gra-
sos liberados son absorbidos por las células próximas, mien-
tras que otros, debido a que son bastante insolubles, forman
complejos con la albúmina sérica para ser transportados a cé-
lulas más distantes. Tras la absorción en la célula, el glicerol y
los ácidos grasos pueden ser utilizados para obtener energía o,
en las células adiposas, utilizarse para volver a sintetizar triacil-
glicéridos.
Las HDL desempeñan A partir de la VLDL se obtienen las IDL, y los quilomicrones
el papel de eliminar se transforman en restos de quilomicrones; ambos tipos de res-
el exceso de coleste-
rol de los tejidos y tos son captados por el hígado a través de receptores específi-
devolverlo al hígado cos y degradados posteriormente en los lisosomas hepáticos.
para su metabolismo La apoproteína B-100 se utiliza para la síntesis de las LDL (a
o excreción.
partir de las IDL), siendo éstas las lipoproteínas que transpor-
tan el colesterol a los tejidos (Fig. 6.2). Las HDL desempeñan
el papel de eliminar el exceso de colesterol de los tejidos y de-
volverlo al hígado para su metabolismo o excreción.

Movilización de los lípidos almacenados
El transporte de la grasa de la dieta a los lugares de reserva,

generalmente, no está regulado. La falta de control en este pro-
ceso es evidente, como lo demuestra la existencia de la obesi-
dad en el ser humano, en la que la grasa se almacena en exce-
so respecto a la necesidad de aporte energético. Sin embargo,
la liberación de la grasa de los depósitos de almacenamiento
del tejido adiposo se controla hormonalmente, para satisfacer
las necesidades del organismo en la generación de energía.
La liberación de la energía metabólica almacenada en los
triacilglicéridos es comparable con la movilización de la energía
de los hidratos de carbono almacenada en el glucógeno de los
animales. El primer paso de la degradación de la grasa, su hidró-
lisis a glicerol y ácidos grasos, se regula hormonalmente. La pri-
mera reacción, que estudiaremos más adelante, se regula me-
diante una cascada enzimática en la que interviene el AMP cícli-
co (AMPc); según cuál sea el estado fisiológico del individuo,
intervienen distintas hormonas que activan la proteína quinasa,
que a su vez activa a una enzima sensible a las hormonas, deno-
minada triacilglicerol lipasa, que actúa sobre los triacilglicéridos.
Los productos de hidrólisis de los triacilglicéridos salen del
adipocito por difusión pasiva y llegan al plasma sanguíneo,
donde los ácidos grasos se unen a la albúmina. Posteriormente,
los ácidos grasos se liberan de la albúmina y son captados por
los tejidos. Esta captación de ácidos grasos al interior de las cé-
lulas está dirigida fundamentalmente por un gradiente de con-
centración. La mayor parte del glicerol liberado al torrente san-
guíneo se capta por las células hepáticas, donde se utiliza como
precursor gluconeogénico de la glucosa.
b-OXIDACIÓN DE LOS ÁCIDOS GRASOS
Una vez hidrolizados los triacilglicéridos, los ácidos grasos La b-oxidación con-
son oxidados por un mecanismo que Knoop (1905) denominó siste en la liberación
de dos átomos de
E-oxidación. La E-oxidación consiste en la liberación de dos carbono a la vez (en
átomos de carbono a la vez (en forma de acetil-CoA) del extre- forma de acetil-CoA)
mo carboxílico de la molécula, oxidándose para ello el carbono del extremo carboxí-
lico de la molécula,
E del ácido graso original. Es el principal proceso por el cual los oxidándose para ello
ácidos grasos generan energía. el carbono b del áci-
Varias enzimas, conocidas como oxidasas de los ácidos grado graso original.
sos, se encuentran en las mitocondrias, íntimamente asociadas
a las enzimas de la cadena respiratoria. Estas enzimas catalizan
la oxidación de los ácidos grasos con el consiguiente desprendi-
miento sucesivo de moléculas de acetil-CoA.

Secuencia de reacciones de la b-Oxidación
La secuencia de reacciones de la E-oxidación es la si-

guiente:
1ª reacción: Activación de los ácidos grasos mediante

su unión con el CoA. Es una reacción doble que requiere la
energía del ATP. Éste es el único paso en la degradación de los
ácidos grasos que precisa la energía de dicho compuesto:
E D Mg2
a) R C H2 C H2 COOH ATP o
tioquinasa
ácido graso
o R CH2 CH2 CO AMP PPi
acil-AMP
el PPi es hidrolizado por una fosfatasa.
PPi H2O o 2 Pi
b) R CH2 CH2 CO AMP CoA a SH o

acil-AMP
o R CH2 CH2 CO S CoA AMP
acil-CoA
o 2 ADP
AMP ATP m
El acil-CoA obtenido es el ácido graso activado.
Las enzimas acil-CoA sintetasas convierten a los ácidos
grasos libres en tioésteres de coenzima A, ricos en energía. La
formación de una molécula de acil-CoA de cadena larga tiene
lugar a través de un intermedio, el acil-adenilato unido a la
enzima, en esta reacción se requiere ATP, liberándose pirofos-
fato en el proceso. Posteriormente, el anión tiolato de la coen-
zima A reacciona con el átomo de carbono carbonílico del in-
termediario para generar el tioéster acil-CoA. Por último, el
acil-CoA y el AMP se liberan de la enzima, mientras que el pi-
rofosfato resulta hidrolizado en dos moléculas de fosfato (Fig.
6.3). Este proceso de activación tiene lugar en el citoplasma
La carnitina no sólo
es el transportador de celular.
ácidos grasos de ca-
dena larga al interior
mitocondrial, sino
que, además, cumple
Transporte de los Acil-CoA al interior
la función de mante- mitocondrial: Transferencia a la carnitina
ner separados el “al-
macén” de coenzima
A citoplasmático del Los acil-CoA generados en el citoplasma celular no pueden
mitocondrial. atravesar la membrana interna mitocondrial, ya que es imper-

Figura 6.3.– Esquema de la activación de un ácido graso. Ade Adenosina.
meable a estos compuestos. Sin embargo, las siguientes etapas

de la E-oxidación tienen lugar en la matriz mitocondrial.
Los ácidos grasos de cadena corta (2-10 átomos de C) pue-
den atravesar libremente las membranas mitocondriales, mien-
tras que los ácidos grasos de cadena larga tienen que ser trans-
portados a la matriz mitocondrial para ser oxidados.
El transportador de los grupos acilo es la L-carnitina (4-tri-
metilamino-3-hidroxibutirato). La carnitina aciltransferasa I, lo-
calizada en la cara externa de la membrana mitocondrial inter-
na, cataliza la transferencia del grupo acilo de cadena larga
desde la molécula de acil-CoA al grupo hidroxilo de la carniti-
na, formándose el respectivo éster O-acilcarnitina; esta molécu-
la es transportada al interior de la mitocondria por la proteína
carnitina-acilcarnitina translocasa. La carnitina aciltransferasa
II, localizada en la cara interna de la membrana mitocondrial
interna, cataliza la transferencia del grupo acilo graso de la O-
acilcarnitina a la coenzima A procedente del interior mitocon-
drial, regenerándose así la molécula de acil-CoA de cadena lar-
ga en el interior mitocondrial (Fig. 6.4), con lo que ya puede
comenzar la siguiente reacción de la E-oxidación.

Figura 6.4.– Transporte de los acil-CoA de cadena larga al interior de la

mitocondria. (A) Esquema del transporte. (B) Reacciones que se producen.
La carnitina aciltransferasa I es inhibida por el malonil-CoA,

metabolito intermedio de la lipogénesis, que actúa de elemento
de control para la E-oxidación.
Este mecanismo de lanzadera requiere la existencia de re-
servas de coenzima A citosólicas e intramitocondriales. La car-

nitina no sólo es el transportador de ácidos grasos de cadena

larga al interior mitocondrial, sino que además cumple la fun-
ción de mantener separados el “almacén” de coenzima A cito-
plasmático del mitocondrial.
Una vez que un ácido graso ha sido activado y transportado
a la matriz mitocondrial (lo que constituye la primera reacción
del proceso), cada ciclo de oxidación de un acil-CoA sigue la si-
guiente secuencia:
2ª reacción: Oxidación (deshidrogenación) para dar un
derivado enólico, el acil, D-E-insaturado-CoA;
3ª reacción: Hidratación del doble enlace resultante, dan-
do un E-hidroxiacil-CoA;
4ª reacción: Oxidación del E-hidroxiacil-CoA por deshi-
drogenación, formándose un cetoacil-CoA;
5ª reacción: Liberación o escisión de una molécula de
acetil-CoA mediante entrada de otra molécula de
CoA a SH, y quedando formado un acil-CoA con dos
átomos de carbono menos que el ácido graso original.
El acetil-CoA formado en la matriz mitocondrial procedente de
la E-oxidación de los ácidos grasos, al igual que el acetil-CoA
procedente del piruvato, entra en el ciclo de Krebs, donde se
oxida a CO2. Por lo tanto, la E-oxidación también genera trans-
portadores electrónicos reducidos, que, al reoxidarse en las mi-
tocondrias, producen ATP a través de la fosforilación oxidativa
del ADP.
2ª reacción: Oxidación (deshidrogenación). La acil-CoA

deshidrogenasa, que lleva como cofactor el FAD, cataliza la
deshidrogenación del acil-CoA entre los carbonos D y E.
3ª reacción: Hidratación del doble enlace. Es una reac-

ción catalizada por la enoil-hidrasa o enoil-CoA hidrasa, en la
que la aparición de un OH en el producto final dará lugar a
que exista una forma D y otra L.

enoil-hidrasa
R CH CH CO S CoA H2O o
acil-D-E-insaturado-CoA
OH
l
o R CH CH2 CO S CoA
L-E-hidroxiacil-CoA
ó
L-3-hidroxiacil-CoA
Los ácidos grasos se

oxidan mediante ci-
clos repetidos de oxi- 4ª reacción: Oxidación del hidroxiacil-CoA. La deshidro-
dación, hidratación, genación, catalizada por la E-hidroxiacil-CoA deshidrogenasa
oxidación y libera- con cofactor NAD, da lugar a la formación de un cetoacil-
ción o escisión de
una molécula de ace- CoA. Existen dos formas de la enzima, específicas para las for-
til-CoA mas D y L del hidroxiacil-CoA.
5ª reacción: Liberación o escisión de una molécula de

acetil-CoA. Se produce por entrada de una molécula de
coenzima A, lo que ocasiona la liberación de acetil-CoA, y se
forma un acil-CoA con dos átomos de carbono menos que el
acil-CoA original.
tiolasa
R CO CH2 CO S CoA CoA a SH o
E-cetoacil-CoA
o CH3 CO S CoA R CO S CoA
acetil-CoA acil-CoA
El acetil-CoA se in- El acetil-CoA se incorpora al ciclo de Krebs, mientras que el

corpora al ciclo de
Krebs, mientras que acil-CoA formado vuelve a pasar otra vez por el ciclo de la E-
el acil-CoA formado oxidación a partir de la 2ª reacción. De esta forma, un ácido
vuelve a pasar otra graso de cadena larga (y número par de átomos de carbono)
vez por el ciclo de la
b-oxidación a partir puede ser degradado completamente a acetil-CoA tras sucesi-
de la 2ª reacción. vas “vueltas” para seguir después el ciclo de Krebs.

RENDIMIENTO ENERGÉTICO DE LA
OXIDACIÓN DE LOS ÁCIDOS GRASOS
Para determinar el rendimiento energético de esta ruta me-

tabólica hay que tener en cuenta que cada conjunto de oxida-
ciones que da lugar a una molécula de acetil-CoA produce tam-
bién una molécula de FADH2 (flavoproteína reducida) y un
NADH. Cada una de las flavoproteínas reducidas puede origi-
nar 2 ATP, y cada uno de los NADH puede producir 3 ATP,
cuando son procesados por la cadena de transporte de electro-
nes. Si consideramos, por ejemplo, la oxidación del palmitoil-
CoA, en donde se dan siete vueltas al ciclo, ya que en la última
se forman dos moléculas de acetil-CoA, el rendimiento total de
la E-oxidación sería de 129 ATP. Se obtienen ocho moléculas de
acetil-CoA, que, al incorporarse al ciclo de Krebs, generaran
96 ATP, siete moléculas de FADH2 que dan 14 ATP, y siete
moléculas de NADH que generan 21 ATP. La suma total de
moléculas de ATP sería 131, pero hay que tener en cuenta que
para la activación del ácido palmítico a palmitoil-CoA se requie-
re la hidrólisis de una molécula de ATP para dar AMP y PPi; la
La reacción para la
molécula de AMP se transforma en ADP mediante hidrólisis de degradación global
otra molécula de ATP, por tanto, a los 131 ATP obtenidos hay del palmitoil-CoA a
que restarles 2 ATP de la activación del ácido graso. ocho unidades de
acetil-CoA es la si-
La reacción para la degradación global del palmitoil-CoA a guiente: Palmitoil-
ocho unidades de acetil-CoA es la siguiente: CoA + 7 CoA ~ SH +
7 FAD + 7 NAD+ + 7
H2O o 8 Acetil-CoA
palmitoil-CoA 7 CoA a SH 7 FAD 7 NAD+ + 7 FA D H 2 + 7
7 H2O o 8 acetil-CoA 7 FADH2 7 NADH 7 H NADH + 7 H+.
Y el esquema del proceso energético de la E-oxidación del

palmitil–CoA es:
Reacción ATPs producidos

Oxidación de 7 FADH2
o 7u 2 14
Oxidación de 7 NADH
o 7u 3 21
Oxidación de 8 acetil-CoA
o 8 u 12 96
Activación del ac. palmítico
o 2
Palmítico + 23 O2
o 16 CO2 + 16 H2O + 129 ATP
Hemos supuesto el proceso en condiciones ideales, es decir,

consideramos que la oxidación de acetil-CoA en una vuelta del
ciclo de Krebs rinde 12 ATP, y que las relaciones P/O para la
oxidación de FADH2 y NADH son 2 y 3, respectivamente.
NOTA: Otros autores consideran que cada FADH2 oxidado en la cade-
na respiratoria genera 1,5 ATP, mientras que por cada NADH
se forman 2,5 ATP, la oxidación del acetil-CoA a partir del ciclo

de los ácidos tricarboxílicos produce 10 ATP; de esta manera la

oxidación del palmítico produciría 106 ATP.
Otra forma de obtener el rendimiento energético es la si-

guiente:
• Cada vuelta produce 5 ATP, como son siete vueltas:
7u5 35 ATP
Hay que restar los 2 ATP consumidos en la activación del

ácido graso (1ª reacción)
35 2 33 ATP
• Cada acetil-CoA produce 12 ATP a partir del ciclo de

Krebs. Como en el caso del palmítico se producen ocho
moléculas de acetil-CoA, tenemos
12 u 8 96
Luego, la oxidación del palmítico produce:
E-oxidación o 33 ATP
ciclo de Krebs o 96 ATP
————
129 ATP
Si consideramos que cada ATP encierra una energía de

7,3 8 kcal, la energía total almacenada será:
7,3 ó 8 u 129 | 940 a 1.000 kcal
Oxidación de ácidos grasos de número

impar de átomos de carbono
Cuando se trata de un ácido graso de número impar de

átomos de carbono, la oxidación se realiza de forma análoga,
pero la última vuelta producirá una molécula de propionil-CoA
y otra de acetil-CoA en lugar de las dos de acetil-CoA.
El propionil-CoA se transforma en succinil-CoA, que ingresa
directamente en el ciclo de Krebs, mediante tres reacciones ca-
talizadas enzimáticamente (Fig. 6.5):
Los ácidos grasos de número impar de C son poco frecuen-
tes y generalmente tienen origen vegetal.
El rendimiento energético de la oxidación de un ácido
graso de número impar de átomos de carbono, como por
ejemplo el pentadecanoato (15 C), es: de la oxidación de las 6
moléculas de acetil-CoA obtenidas se generan 6 u 12 72 ATP,
otras 12 moléculas de ATP se obtienen de la oxidación de suc-

Figura 6.5.– Conversión del propionil-CoA en succinil-CoA.
cinil-CoA en el ciclo de los ácidos tricarboxílicos. Como en la

activación se consumen 2 ATP, y la propionil-CoA carboxilasa
utiliza 1 ATP, nos proporcionan 84 3 81 ATP. Cada vuelta al
ciclo produce 5 ATP, como son 6 vueltas, 5 u 6 30 ATP. El
rendimiento global es de 81 30 111 ATP.
Oxidación de ácidos grasos insaturados

Los ácidos grasos insaturados, como el oleico o el linoleico,
son oxidados por las mismas vías que los ácidos grasos satura-
dos, pero se presentan dos dificultades especiales.
a) En primer lugar, los dobles enlaces de los ácidos grasos
insaturados naturales se encuentran en posición cis,
mientras que los intermediarios de la E-oxidación que
llamamos genéricamente acil-D-E-insaturado-CoA han
de encontrarse en posición trans.
b) En segundo lugar, la mayoría de los ácidos grasos insa-
turados tienen colocados los dobles enlaces de forma
que la sucesiva eliminación de restos de acetil-CoA a
partir del extremo carboxílico acaba por producir un
compuesto acil-E-J-insaturado-CoA, en lugar de un acil-
D-E-insaturado-CoA, y la enzima enoil-hidrasa solamen-
te actúa sobre estos últimos.
Estos problemas se resolvieron con el descubrimiento de
una enzima, la 'E- J-cis- 'D-E-trans-enoil-CoA isomerasa, que ca-

taliza el desplazamiento del doble enlace desde la configura-

ción 'E-J-cis a la 'D-E-trans (Fig. 6.6). El producto resultante es
ya un acil-D-E-insaturado-CoA sobre el que puede actuar la
enoil-hidrasa, continuando el proceso de la E-oxidación.
Figura 6.6.– Enzimas accesorias para la E-oxidación de los

ácidos grasos insaturados.
Veamos como ejemplo la oxidación del ácido oleico: El

ácido oleico tiene 18 átomos de carbono y un doble enlace en
posición 9 (18: 1'9). El oleico comienza el ciclo de la E-oxida-

ción, y en las tres primeras vueltas se producen tres moléculas

de acetil-CoA y un acil-E-J-insaturado-CoA, también denomi-
nado acil-'3-cis-enoil-CoA
La 'E-J-cis-'D-E-trans-enoil-CoA isomerasa transforma este

E-J-insaturado-cis en un D-E-insaturado-trans
La enoil-hidrasa transforma el D-E-insaturado-trans en el Para calcular el ba-

correspondiente L-E-hidroxiacil-CoA, continuando el proceso lance energético de
la oxidación de un
de la E-oxidación sin modificaciones. ácido graso insatura-
Hay que tener presente que el D-E-insaturado-CoA formado do, se calcula prime-
comienza su vuelta en el proceso a partir de la 3ª reacción, con ro el balance energé-
tico de su homólogo
lo cual los 2 ATP que se forman normalmente a partir del saturado y se le res-
FADH2 de la 2ª reacción, no se forman en esta ocasión. Por lo tan 2 ATP por cada
tanto, para calcular el balance energético de la oxidación de doble enlace que ten-
ga el ácido graso in-
un ácido graso insaturado, se calcula primero el balance saturado.
energético de su homólogo saturado y se le restan 2 ATP por
cada doble enlace que tenga el ácido graso insaturado.
Cuando se trata de la oxidación de un ácido graso poliin-
saturado se necesita una segunda enzima auxiliar para com-

Mediante estas dos pletar la degradación. Veamos como ejemplo el ácido linolei-
enzimas auxiliares co (18: '9,12). Las tres primeras vueltas del ciclo desprenden
(D b-g -cis- D a-b -trans-
enoil-CoA isomerasa tres moléculas de acetil-CoA, llegándose a un doble enlace
y b-hidroxiacil-CoA 'E-J-cis o '3-cis, como en el caso del oleil-CoA. Por acción de la
epimerasa) pueden 'E-J-cis- 'D-E-trans-enoil-CoA isomerasa se forma el isómero
ser degradados todos
los ácidos grasos de 'D-E-trans, que se hidrata a continuación al correspondiente
la naturaleza. L-E-hidroxiacil-CoA, continuando el proceso de la E-oxidación
para desprenderse una nueva molécula de acetil-CoA. Llega-
mos así a la formación de un acil-D-E-insaturado, pero cuyo
doble enlace está en posición cis. La enoil-hidrasa actúa sobre
él igualmente pero el resultado de la hidratación es un '-hidro-
xiacil-CoA en lugar del L-hidroxiacil-CoA correspondiente. Esta
irregularidad se solventa con la actuación de una segunda enzi-
ma auxiliar, la E-hidroxiacil-CoA epimerasa, que cataliza la epi-
merización del carbono E. El compuesto resultante se oxida por
la deshidrogenasa correspondiente, y continúa el proceso nor-
mal de la E-oxidación (Fig. 6.7).
Mediante estas dos enzimas auxiliares ('E-J-cis- 'D-E-trans-
enoil-CoA isomerasa la E-hidroxiacil-CoA epimerasa) pueden
ser degradados todos los ácidos grasos de la naturaleza.
CONTROL DE LA OXIDACIÓN DE
LOS ÁCIDOS GRASOS
En la mayoría de las En la mayoría de las células, la oxidación de los ácidos gra-

células, la oxidación sos se controla por la disponibilidad de los propios ácidos gra-
de los ácidos grasos
se controla por la dis- sos para la oxidación. En los animales, esta disponibilidad se
ponibilidad de los regula mediante el control hormonal de la movilización de las
propios ácidos grasos grasas en los adipocitos, ya que la función del tejido adiposos
para la oxidación.
consiste en almacenar la grasa para que sea utilizada en otras
células, luego tiene sentido, desde el punto de vista metabólico,
que la liberación y la degradación de esta grasa almacenada se
regule por hormonas, que son mensajeros extracelulares.
En el hígado, la concentración de malonil-CoA constituye
otro mecanismo regulador que controla la captación de acil-
CoA desde el citosol a las mitocondrias. En este tejido, el malo-
nil-CoA es un inhibidor de la carnitina aciltrasferasa I, luego in-
hibe la oxidación de los ácidos grasos, al impedir el transporte
de éstos a las mitocondrias.

Figura 6.7.– E oxidación del ácido linoleico (C18, '9,12).

RESUMEN
La movilización de las grasas en las células adiposas

tiene lugar mediante la hidrólisis enzimática de los triacil-
gliceroles a ácidos grasos y glicerol, el proceso se controla
hormonalmente, a través de la fosforilación de la lipasa
dependiente de AMPc.
Una vez hidrolizados los triacilglicéridos, los ácidos
grasos son oxidados por un mecanismo denominados E-
oxidación, que es un proceso mitocondrial que com-
porta la oxidación escalonada y la liberación de dos áto-
mos de carbono simultáneamente en forma de acetil-
CoA. Los ácidos grasos se activan mediante su unión a
CoA ~ SH en una reacción doble que requiere la energía
del ATP. Esta reacción tiene lugar en la membrana mito-
condrial externa. Los acil-CoA son transportados a
través de la membrana interna mitocondrial por la carni-
tina, y son oxidados en la matriz mitocondrial por una
secuencia repetida de cuatro reacciones: oxidación (des-
hidratación) ligada al FAD, hidratación, oxidación (des-
hidrogenación) ligada al NAD, y liberación o fragmen-
tación tiólica por CoA ~ SH, de tal manera que cada ci-
clo produce una molécula de acetil-CoA. El FADH2 y el
NADH formados en las etapas de oxidación transfieren
sus electrones al O2 por medio de la cadena respiratoria,
mientras que el acetil-CoA formado en la reacción de li-
beración o tiólisis, entra, generalmente, en el ciclo de
Krebs por condensación con oxalacetato, y el acil-CoA
formado con dos átomos de carbono menos que el áci-
do graso original, repite ciclo en la primera reacción de
oxidación.
Varias enzimas, conocidas como “oxidasas de los áci-
dos grasos”, que se encuentran en las mitocondrias ínti-
mamente asociadas a las enzimas de la cadena respirato-
ria, catalizan la oxidación de los ácidos grasos.
En la oxidación de las cadenas de ácidos grasos con un
número impar de átomos de carbono se produce una
molécula de propionil-CoA.
En la oxidación de los ácidos grasos insaturados se ne-
cesitan dos enzimas auxiliares para transformar los dobles
enlaces de la forma cis a la trans y de la posición 'E-J a
'D-E, estas enzimas son la E-hidroxiacil-CoA epimerasa
(enoil-CoA isomerasa) y la 'E-J-cis- 'D-E-trans-enoil-CoA
isomerasa ('2-trans- '4-cis dienol-CoA-reductasa).

Enfermedad de Refsum
La ruta de la D-oxidación se descubrió mediante el análisis

de un trastorno neurológico congénito grave y poco frecuente,
denominado enfermedad de Refsum. El uso de la D-oxidación
es secundario en lo referente a producción de energía, pero sí
es significativo en el metabolismo de los ácidos grasos metila-
dos de la dieta, uno de los más importantes es el ácido fitánico,
que es un derivado del fitol, que forma parte de la clorofila.
CH3 CH (CH2)3 CH (CH2)3 CH (CH2)3 CH CH2 COOH

l l l l
CH3 CH3 CH3 CH3
El ácido fitánico es un constituyente de los lípidos lácteos y

de las grasas animales, se metaboliza generalmente mediante
una D-hidroxilación inicial, seguida de deshidrogenación y de-
carboxilación, ya que el carbono D puede oxidarse para dar el
ácido pristánico, que puede degradarse siguiendo el proceso de
la E-oxidación. En la enfermedad de Refsum, la D-oxidación es
defectuosa, y el ácido fitánico no puede convertirse en un sus-
trato que pueda degradarse debido al grupo 3 metilo de su
molécula. Es ésta una enfermedad genética poco común, los
enfermos que padecen este trastorno carecen de la enzima D-
hidroxilante, por lo que acumulan grandes cantidades de ácido
fitánico en los tejidos y en el suero. Este hecho origina proble-
mas neurológicos graves, tales como la retinitis pigmentosa, la
neuropatía periférica, la ataxia cerebelosa y la sordera de tipo
nervioso.
El tratamiento consiste en seguir una alimentación que con-
tenga poca o ninguna clorofila; es un tratamiento difícil ya que
descarta todos los vegetales de hoja verde, la carne y el consu-
mo de productos lácteos, sobre todo la leche procedente de
animales herbívoros, ya que estos alimentos contienen grandes
cantidades de ácido fitánico. La reducción en el consumo de
estos productos tiene como resultado la disminución del ácido
fitánico del plasma, así como la regresión de los síntomas neu-
rológicos.

Formación de cuerpos
TEMA 7 cetónicos.
Cetosis o cetogénesis
Formación de cuerpos cetónicos. Cetosis o cetogé-

nesis.
En los mamíferos se producen adaptaciones metabólicas en

situación de ayuno con el fin de mantener niveles adecuados
de glucosa en sangre, ya que este compuesto es el sustrato
energético principal del cerebro, y es imprescindible para otros
tejidos como la médula adrenal o los eritrocitos. Cuando la si-
tuación de ayuno está avanzada, la lipolisis del tejido adiposo
proporciona gran cantidad de ácidos grasos, parte de los cuales
son utilizados por el higado para su tranformación en actil-
CoA, gran parte del cual es convertido en cuerpos cetónicos.
Los cuerpos cetónicos sintetizados por el hígado son vertidos a
la sangre para ser utilizados como fuente de energía por dife-
rentes tejidos, como el músculo y el cerebro, con lo que dismi-
nuyen las necesidades de glucosa del organismo.
FORMACIÓN DE CUERPOS CETÓNICOS.

CETOSIS O CETOGÉNESIS
Si el metabolismo de glúcidos y lípidos está equilibrado, el

destino del acetil-CoA que proviene de la b-oxidación, será
su oxidación final a CO2 y H2O mediante el ciclo del ácido cí-
trico o bien a la biosíntesis de ácidos grasos. Existen circuns- Los cuerpos cetóni-
tancias especiales como el ayuno, la diabetes o cualquier sicos son acetoacetato
o ácido-acetoacético,
tuación de incapacidad de obtener glucosa, en las que el or- D-3-hidroxibutirato o
ganismo utiliza una ruta biosintética que garantice la ácido b-hidroxibutíri-
formación necesaria de glúcidos, de manera que el oxalaceta- co y acetona.
to, que es la molécula inicial del ciclo del ácido cítrico, se utili-
ce para la formación de glucosa. De esta forma la molécula
de oxalacetato no es accesible para su condensación con el
acetil-CoA obtenido a partir de la E-oxidación, ya que su oxi-

dación está limitada. En estas condiciones metabólicas, aso-

ciadas a una tasa elevada de oxidación de ácidos grasos, la
molécula de acetil-CoA se utiliza para la obtención de consi-
derables cantidades de sustancias denominadas en general
cuerpos cetónicos. Cantidades más altas de las normales pre-
sentes en sangre o en orina constituyen la cetonemia o ceto-
nuria, el estado metabólico general, en estas condiciones, se
denomina cetosis o cetogénesis, proceso que tiene lugar en
las mitocondrias, siendo el hígado el principal centro de pro-
ducción de estos compuestos.
Los cuerpos cetónicos son fundamentalmente el acetoaceta-
to o ácido acetoacético y su producto de reducción el D-3-hi-
droxibutirato o ácido b-hidroxibutírico que tiene caracter ácido,
solubles en agua, se sintetizan, como hemos dicho anterior-
mente, en el hígado. La acetona que procede de la decarboxi-
lación espontanea del acetoacetato, también se considera cuer-
po cetónico.
Cuando las concentraciones de acetil-CoA son elevadas, dos
moles de acetil-CoA se condensan para formar acetoacetil-CoA.
El acetoacetil-CoA puede reaccionar con otra molécula de

acetil-CoA para dar E-hidroxi-E-metilglutaril-CoA (HMG-CoA),
compuesto intermedio tanto en la biosíntesis del colesterol en
el citosol, como en la formación de cuerpos cetónicos, reacción
catalizada por la E-hidroxi-E-metilglutaril-CoA-sintasa, enzima
condensante.
En la mitocondria el HMG-CoA produce acetoacetato y

acetil-CoA a través de la HMG-CoA liasa, enzima desdoblante.

FORMACIÓN DE CUERPOS CETÓNICOS. CETOSIS O CETOGÉNESIS 93
El acetoacetato experimenta una reducción dependiente de

NADH para dar lugar a otro cuerpo cetónico, el E-hidroxibutira-
to o ácido-E-hidroxibutírico, o bien en cantidades pequeñas, se
produce una decarboxilación espontánea formándose acetona.
La acetona puede seguir metabolizándose de dos formas:

Transformándose en acético y fórmico por oxidación:
O
ll [OH]
CH3 C CH3 o CH3 COOH H COOH
o en piruvato e ingresar en el ciclo de Krebs.
Como hemos indicado anteriormente, la cetogénesis se pro-

duce fundamentalmente en el hígado, debido a las elevadas
concentraciones de HMG-sintasa de ese tejido. Los cuerpos
cetónicos difunden de la mitocondria hepática a la sangre y ésta
los transporta a los tejidos periféricos, siendo utilizados como

La cetogénesis se combustibles alternativos a la glucosa y los ácidos grasos, lo que

produce fundamental-
mente en el hígado,
es importante pues prolongan el período que un mamífero pue-
debido a las elevadas de sobrevivir ayunando, ya que los animales son incapaces de
concentraciones de convertir los ácidos grasos en glucosa. El acetil-CoA no puede
HMG-Sintasa de ese
tejido.
transformarse en piruvato u oxalacetato, reservando la glucosa
para el tejido que más la necesita, que es el cerebro, que nor-
malmente (en personas bien alimentadas con una dieta equili-
brada) utiliza glucosa como su principal combustible, sin embar-
go, en ayuno o diabetes, sufre una adaptación metabólica para
utilizar la energía que genera el catabolismo de los cuerpos cetó-
nicos, sobre todo en períodos prolongados de ayuno, los cuer-
pos cetónicos aportan aproximadamente el 75% de las necesi-
dades energéticas del cerebro (Fig. 7.1). No obstante, existen te-
jidos que utilizan el acetoacetato con preferencia a la glucosa
incluso en situaciones metabólicamente normales, estos tejidos
son el músculo cardíaco y la corteza renal.
Los cuerpos cetóni- Los cuerpos cetónicos son combustibles normales en el me-
cos son combustibles tabolismo aeróbico y son importantes como fuentes de energía.
normales en el meta-
bolismo aeróbico y El acetoacetato puede considerarse como una forma, transpor-
son importantes co- table e hidrosoluble, de unidades de acetilo. Tiene también el
mo fuentes de ener- acetoacetato una función reguladora, ya que niveles altos de
gía.
acetoacetato en sangre indican gran cantidad de unidades de
acetilo, y causan una disminución en la velocidad de lipólisis
del tejido adiposo.
Hemos visto anteriormente que, en condiciones normales,
la formación de acetona es mínima, pero cuando se producen
acumulaciones patológicas de acetoacetato, como por ejemplo
en la cetoacidosis diabética grave, puede ser suficiente para ha-
cer que sea detectable en el aliento de un enfermo. Luego, si el
acúmulo de estos compuestos es muy elevado, se produce un
aumento de los niveles de los cuerpos cetónicos en sangre, lo
que, debido a un carácter ácido, produce desequilibrios más o
menos graves, conocidos genéricamente con el nombre de ce-
tosis o cetoacidosis, siendo la cetoacidosis diabética la más co-
nocida, que lógicamente se caracteriza por una acumulación
excesiva de cuerpos cetónicos en sangre. El organismo reaccio-
na aumentando la excreción de cuerpos cetónicos en la orina,
lo que implica la necesidad de la eliminación simultánea de ca-
tiones, para mantener el equilibrio electrónico y de agua (hídri-
co y de electrolitos) en los tejidos, para mantener la osmolari-
dad, de no conseguirlo, pueden producirse deshidrataciones y
pérdidas electrolíticas que, en casos extremos, pueden llegar a
La cetogénesis es el producir colapsos.
resultado de una defi- Podemos concluir que la cetogénesis es el resultado de una
ciencia de los hidra-
tos de carbono dispo- deficiencia de los hidratos de carbono disponibles, esta defi-
nibles. ciencia tiene dos consecuencias:

Figura 7.1.– Esquema de la formación de cuerpos cetónicos
Causa un desequilibrio entre la esterificación y la lipólisis en

el tejido adiposo con la consiguiente liberación de ácidos gra-
sos libres a la circulación y elevación de la tasa de E-oxidación.
La carencia de glúcidos, que proveen D-glicerofosfato, produce
una falta de esterificación en los ácidos grasos libres, los que
quedan sin esterificar se oxidan a CO2 y cuerpos cetónicos.

RESUMEN
Existen circunstancias como el ayuno, la diabetes o

cualquier situación de incapacidad de obtener glucosa,
en las que el organismo utiliza una ruta biosintética que
garantice la formación necesaria de glúcidos, de manera
que el oxalacetato, que es la molécula inicial del ciclo
del ácido cítrico, se utilice para la formación de glucosa,
de esta forma la molécula de oxalacetato no es accesible
para su condensación con el acetil-CoA obtenido a par-
tir de la E-oxidación. En estas condiciones, dicha molé-
cula de acetil-CoA se utiliza para formar cuerpos cetóni-
cos. Este estado metabólico se denomina cetosis o ce-
togénesis.
Los cuerpos cetónicos, compuestos de carácter ácido,
solubles en agua, son el acetoacetato y el E-hidroxibutira-
to, se sintetizan fundamentalmente en el hígado, debido a
las elevados concentraciones de la HMG-sintasa de ese
tejido. El tercer cuerpo cetónico es la acetona que se for-
ma en cantidades bajas por descarboxilación del acetoa-
cetato. Son sustratos energéticos excelentes para algunos
órganos.
Los cuerpos cetónicos difunden desde la mitocondria
hepática a la sangre y ésta los transporta a los tejidos
periféricos. Son combustibles normales en el metabolis-
mo aeróbico y son importantes como forma de energía
en otros tejidos, en especial el músculo cardíaco y la
corteza renal.
La glucosa en condiciones normales es el combustible
principal del cerebro. No obstante, el cerebro sufre una
adaptación metabólica para utilizar cuerpos cetónicos du-
rante el ayuno y la diabetes.
Si el acúmulo de estos compuestos es muy elevado, se
produce un aumento excesivo de los niveles de los cuer-
pos cetónicos en sangre, y producen desequilibrios más o
menos graves, conocidos genéricamente con el nombre de
cetosis o cetoacidosis, siendo la cetoacidosis diabética la
más importante.
La cetogénesis es el resultado de una deficiencia de los
hidratos de carbono disponibles causando un desequilibrio
entre la esterificación y la lipólisis en el tejido adiposo, los
ácidos grasos que quedan sin esterificar se oxidan a CO2 y
cuerpos cetónicos.

Cetoacidosis diabética
Cuando la alimentación es normal, la producción hepática

de acetoacetato y E-hidroxibutirato es mínima, de tal forma
que la concentración sanguínea de estos compuestos es muy
baja 0,2 mM. Sin embargo, la falta de alimentación acelera
en gran medida la síntesis de estos compuestos, hasta una con-
centración del orden de 3 a 5 mM. Ésta constituye la respuesta
normal del organismo a la escasez de glúcidos y desempeña
una serie de misiones fundamentales. En las primeras fases del
ayuno, la utilización de los cuerpos cetónicos por parte del
músculo cardíaco y esquelético reserva la glucosa para el man-
tenimiento del sistema nervioso central. Cuando el ayuno se
prolonga, la concentración de cuerpos cetónicos en sangre au-
menta para ser utilizados por el cerebro, permitiendo un ahorro
de glucosa. Determinadas condiciones patológicas, de las que
la cetoacidosis diabética es la más importante, se caracterizan
por la producción y acumulación excesiva de cuerpos cetónicos
en sangre; no es extraño que se llegue a unos niveles sanguíne-
os de los ácidos acetoacético y E-hidroxibutirato de 20 mM. Al
ser ambos ácidos relativamente fuertes (pKa 3,5-4), esta situa-
ción produce una peligrosa acidosis metabólica. La acumula-
ción excesiva de cuerpos cetónicos en la sangre en la cetoaci-
dosis diabética, enfermedad muy general entre los pacientes
afectados por la diabetes mellitus dependiente de insulina, pro-
viene de su elevada tasa de producción hepática, por lo que
supera a la capacidad de otros tejidos para utilizarlos.
La cetoacidosis diabética es causada por una deficiencia
grande de insulina, junto con un exceso de glucagón, y viene
acompañada frecuentemente por aumento de otras hormonas
relacionadas con el estrés. Los principales transtornos metabóli-
cas son hiperglucemia, cetonemia excesiva y cetonuria. Aun-
que la tasa de mortalidad ha disminuido, el porcentaje oscila
entre el 6 y 10%. Al contrario que la cetosis fisiológica, produ-
cida por inanición, en la cual la secrección de insulina por las
células E del pancreas limita la disponibilidad de ácidos grasos
libres para el hígado, esta restricción está ausente en los indivi-
duos diabéticos y, como consecuencia de ello, la concentración
de ácidos grasos libres en el plasma llega a niveles muy eleva-
dos como 4 mM, lo cual impulsa la producción hepática de
cuerpos cetónicos a la máxima velocidad.
El tratamiento de la cetoacidosis diabética depende de la
gravedad de las anomalías metabólicas y del equilibrio hídrico
y de electrolitos en los tejidos. La insulina es básica, disminuye

los niveles plasmáticos de glucagón, se opone a los efectos ca-

tabólicos de éste en el hígado, inhibe el aporte de sustratos ce-
togénicos y glucogénicos (ácidos grasos libres y aminoácidos)
provenientes de la periferia, y en los tejidos diana estimula la
captación de glucosa.

Biosíntesis
TEMA 8 de ácidos grasos
Biosíntesis de ácidos grasos. Biosíntesis de ácidos

grasos saturados a partir de acetil-CoA. El comple-
jo ácido graso sintasa. Control de la síntesis de
ácidos grasos.
Cuando se ingiere un exceso de hidratos de carbono, que

supera la cantidad que puede ser catabolizada y almacenada
como glucógeno por el organismo, se convierten fácilmente en
grasa, que está constituida mayoritariamente por triacilglicero-
les. El exceso de glucosa se cataboliza hasta acetil-CoA mito-
condrial, que es transportado al citoplasma mediante la forma-
ción de citrato; una vez en el citoplasma celular, el acetil-CoA
es utilizado para la biosíntesis de ácidos grasos no esenciales,
que posteriormente pueden esterificarse con glicerol-3P para
formar triacilgliceroles, que se almacenan en el tejido adiposo.
De esta forma el exceso de hidratos de carbono es utilizado por
el organismo para incrementar sus reservas energéticas en for-
ma de depósitos de grasa en los adipocitos del tejido adiposo.
BIOSÍNTESIS DE ÁCIDOS GRASOS
En el organismo pueden ser sintetizados todos los ácidos

grasos considerados como ácidos grasos no esenciales; los
esenciales tienen que ser ingeridos necesariamente en la dieta ya
que el organismo no puede generarlos. La biosíntesis comienza
con el acetil-CoA proveniente del catabolismo de aminoácidos
cetogénicos o de los hidratos de carbono, la obtención de estos
precursores tiene lugar en la mitocondria, mientras que la
biosíntesis de ácidos grasos tiene lugar extramitocondrialmente,
por lo que es necesario la existencia de un sistema de lanzade-
ra. Aprovechando la abundancia que existe en las mitocondrias
de acetil-CoA, este compuesto se condensa con el oxalacetato

para formar citrato, el cual es transportado por el transportador

de ácidos tricarboxilicos al citosol; el citrato vuelve a escindirse
en acetil-CoA y oxalacetato. En la figura 8.1 se muestra un es-
quema de cómo funciona este sistema de lanzadera.
El proceso global de la síntesis de ácidos grasos tiene en ge-
neral tres etapas catalizadas por sistemas enzimáticos distintos:
1) Biosíntesis de palmitato a partir de acetil-CoA.
2) Elongación de la cadena a partir de palmitato.
3) Desaturación.
Figura 8.1.– Sistema de transporte de los precursores para la biosíntesis de áci-

dos grasos desde la mitocondria al citosol, y acetil-CoA como intermediario en-
tre el metabolismo de hidratos de carbono y grasas.
BIOSÍNTESIS DE ÁCIDOS GRASOS

SATURADOS A PARTIR DE ACETIL-COA
La biosíntesis de los La biosíntesis de los ácidos grasos saturados a partir de su

ácidos grasos tiene precursor principal el acetil-CoA tiene lugar en todos los orga-
lugar en el citosol,
mientras que la oxi- nismos, pero es especialmente importante en el hígado, en los
dación de los ácidos tejidos adiposos y en las glándulas mamarias de los animales
grasos se efectúa en superiores.
las mitocondrias.
La biosíntesis de los ácidos grasos tiene lugar en el citosol,
mientras que la oxidación de los ácidos grasos se efectúa en
las mitocondrias. La síntesis de ácidos grasos a partir del ace-
til-CoA se realiza gracias a un grupo de enzimas completamen-

BIOSÍNTESIS DE ÁCIDOS GRASOS 101
te diferente del que interviene en la oxidación de los ácidos

grasos.
En la reacción global de la síntesis de ácidos grasos, que es De las ocho unidades
catalizada por un agregado de siete proteínas en el citosol (seis de acetilo requeridas
para la biosíntesis
enzimas y una proteína portadora de ácidos), el complejo áci- del ácido palmítico,
do graso-sintasa, el acetil-CoA procedente de hidratos de car- solamente una es
bono o de aminoácidos es el precursor primordial de todos los aportada por el ace-
til-CoA, mientras que
átomos de carbono de la cadena del ácido graso. De las ocho las otras siete llegan
unidades de acetilo requeridas para la biosíntesis del ácido en forma de malonil-
palmítico, solamente una es aportada por el acetil-CoA, mien- CoA, formado a par-
tir de acetil-CoA y
tras que las otras siete llegan en forma de malonil-CoA, forma- CO3H– mediante una
do a partir de acetil-CoA y HCO3 mediante una reacción de reacción de carboxi-
carboxilación. Un resto de acetilo y siete de malonilo experi- lación.
mentan pasos sucesivos de condensación, con liberación de
7 CO2 para formar ácido palmítico, el poder reductor viene
proporcionado por el NADPH:
acetil-CoA 7 malonil-CoA 14 NADPH 14 H+ o

o palmitato 7 CO2 14 NADP 8 CoA a SH 6 H2O
Al calcular la energía necesaria para la conversión global de

acetil-CoA a palmitato, debemos considerar el ATP utilizado en
la formación del malonil-CoA:
7 acetil-CoA 7 CO2 7 ATP o

o 7 malonil-CoA 7 ADP 7 Pi 7 H
La estequiometría global para la biosíntesis de palmitato

(conversión del acetil-CoA en palmitato) es:
8 acetil-CoA 7 ATP 14 NADPH 14 H o

o palmitato 8 CoA a SH 7 ADP 7 Pi
14 NADP 6 H2O
La única molécula de acetil-CoA requerida en el proceso La estequiometría

sirve como iniciador, los demás átomos de carbono de su gru- global para la biosín-
tesis de palmitato
po acetilo se convierten en los átomos de carbono terminales (conversión del ace-
(15 y 16) del ácido palmítico formado. Por ello, el crecimiento til-CoA en palmitato)
de la cadena durante la síntesis de ácidos grasos comienza en es: 8 Acetil-CoA + 7
ATP + 14 NADPH +
el grupo carboxilo del acetil-CoA y continúa con la adición su- 14 H+ o Palmitato +
cesiva de restos de acetilo al extremo carboxilo de la cadena 8 CoA~SH + 7 ADP
en crecimiento. Cada resto acetilo sucesivo procede de dos de + 7 Pi + 14 NADP+ 6
H 2O
los tres átomos de carbono de un resto de ácido malónico que
penetra en el sistema en forma de malonil-CoA, el tercer car-
bono del ácido malónico, el del carboxilo no esterificado, se
pierde como CO2. El producto final es una molécula de ácido
palmítico.

Una característica que distingue al mecanismo de la biosín-

tesis del ácido graso consiste en que los productos intermedios
del proceso de alargamiento de la cadena son tioésteres, pero
no del CoA, como en la oxidación del ácido graso, sino de una
proteína conjugada, de bajo peso molecular, denominada pro-
teína portadora de acilos (ACP, Fig. 8.2). En la mayoría de las
células eucarióticas, las siete proteínas del complejo ácido gra-
so-sintetasa o sintasa, se encuentran asociadas formando un
agregado multienzimático. En la mayoría de los organismos, el
producto final es el ácido palmítico, precursor de todos los
demás ácidos grasos superiores saturados y de todos los ácidos
grasos no saturados.
Figura 8.2.– Fosfopanteteina como unidad reactiva en el ACP y el CoA.
Fuente de carbono y NADPH para

la síntesis del ácido graso
La fuente primordial de todos los átomos de carbono de los

ácidos grasos es el acetil-CoA, formado en las mitocondrias.
Éste no puede pasar desde las mitocondrias al citosol, pero sí
lo hace en forma de citrato gracias al sistema transportador de
tricarboxilatos. En el citosol, el acetil-CoA se regenera a partir
del citrato por la ATP-citrato-liasa, también denominada enzi-
ma citrato-escisor, que cataliza la reacción.
ATP-citrato-liasa
citrato ATP CoA a SH o
o acetil-CoA ADP Pi oxalacetato
Por una segunda ruta, el grupo acetilo del acetil-CoA es

transferido enzimáticamente a la carnitina. La acetilcarnitina
pasa de la matriz mitocondrial y a través de la membrana de la

mitocondria, al citosol; entonces se regenera el acetil-CoA por

transferencia del grupo acetilo de la acetilcarnitina al CoA del
citosol.
Por otra, parte el oxalacetato, formado en la transferencia
de grupos acetilo al citosol, debe retornar a la mitocondria. La
membrana mitocondrial es impermeable al oxalacetato, ya que
carece de transportador para este compuesto. Por ello, son ne-
cesarias una serie de reacciones para superar esa barrera (Fig.
8.3). Estas reacciones generan la mayor parte del NADPH ne-
cesario para la síntesis de ácidos grasos.
Figura 8.3.– Transporte de Acetil-CoA y generación de NADPH.
En la primera, el oxalacetato es reducido a malato por el

NADH, reacción catalizada por la malato deshidrogenasa ci-
tosólica.
o malato NAD
oxalacetato NADH H m
Seguidamente, el malato es descarboxilado oxidativamente

por la enzima málica dependiente de NADP+.
malato NADP o piruvato CO2 NADPH H
El piruvato obtenido se difunde de nuevo a las mitocon-

drias donde es carboxilado y se reconvierte en oxalacetato por
la piruvato carboxilasa.
piruvato CO2 ATP H2O o

o oxalacetato ADP Pi H
La reacción global es:

NADP NADH ATP H2O o

o NADPH NAD ADP Pi H
Se genera un NADPH por cada acetil-CoA transferido des-

de la mitocondria al citosol. Por lo tanto, se forman 8 NADPH,
al ser ocho moléculas de acetil-CoA las transferidas al citosol
para la síntesis de palmitato. Las seis moléculas restantes que
se requieren para este proceso se generan en el citosol a través
de las primeras reacciones de vía de las pentosas fosfato.
Pasamos a estudiar a continuación las reacciones enzimáti-
cas responsables de la biosíntesis de los ácidos grasos.
1. Formación de malonil-CoA:
Acetil-CoA-carboxilasa
En el citosol, el malonil-CoA se forma a partir del acetil-

CoA y el bicarbonato por acción de la acetil-CoA-carboxilasa,
complejo enzimático que cataliza la siguiente reacción:
O
ll
CH3 C S CoA ATP HCO3 o
acetil-CoA-carboxilasa
O
ll
o OOC CH2 C S CoA ADP Pi H

La acetil-CoA-carboxilasa contiene biotina como grupo

prostético; la biotina sirve como portador intermedio de una
molécula de CO2, según un ciclo de dos etapas:
La reacción cataliza- La reacción catalizada por la acetil-CoA-carboxilasa, que es

da por la acetil-CoA- una enzima alostérica, es la etapa reguladora primaria o limita-
carboxilasa, que es
una enzima alostéri- dora de la velocidad de la biosíntesis de ácidos grasos.
ca, es la etapa regula-
dora primaria o limi-
tadora de la veloci- Reacciones del sistema de la ácidograso-sintasa
dad de la biosíntesis
de ácidos grasos. Una vez formado el malonil-CoA a partir del acetil-CoA,
por la reacción bastante compleja de la acetil-CoA-carboxilasa,
las reacciones siguientes de la síntesis del ácido graso se reali-
zan por una secuencia de seis etapas sucesivas, catalizadas por
las seis enzimas del sistema de la ácido graso-sintasa. La sépti-
ma proteína de este sistema, que por sí misma no posee activi-

dad catalítica alguna, es la proteína portadora de acilo (ACP) a

la cual está unida covalentemente la cadena de ácido graso en
crecimiento.
La función de la proteína portadora del acilo (ACP) en la La función de la pro-
síntesis de ácidos grasos es análoga a la del CoA en la oxida- teína portadora del
acilo (ACP) en la sín-
ción de los mismos; sirve como ancla, a la cual están esterifica- tesis de ácidos grasos
dos los acilos intermedios. Las reacciones implicadas en la sín- es análoga a la del
tesis del ácido graso son las siguientes: CoA en la oxidación
de los mismos; sirve
como ancla, a la cual
están esterificados
2. Reacción cebadora o iniciadora los acilos interme-
dios.
En primer lugar el acetil-CoA reacciona con el grupo sulfhi-

drilo de la (ACP) por acción de una de las seis enzimas del sis-
tema sintasa, la acetil-CoA-ACP-transacilasa que cataliza la si-
guiente reacción:
o acetil-ACP CoA a SH
acetil-CoA ACP a SH m
Este grupo acetilo no permanece unido a la ACP, sino que

es transferido a un resto de cisteína específico perteneciente a
otra de las enzimas del complejo ácido graso-sintasa, la E-ceto-
acil-ACP-sintasa, según la reacción:
o ACP a SH acetil-sintasa
acetil-ACP sintasa a SH m
en la que, la E-cetoacil-sintasa se designa simplemente por

sintasa. Con esta reacción, el complejo de la ácido graso-
sintasa queda activado (iniciado) y dispuesto para llevar a
cabo la secuencia de reacciones requeridas para unir una
unidad de dos carbonos en el proceso de prolongación de la
cadena.
3. Etapa de la transferencia de malonilo
En la reacción siguiente, catalizada por la malonil-CoA-

ACP-transacilasa, el malonil-S-CoA formado en la reacción de
la acetil-CoA-carboxilasa, reacciona con el grupo -SH de la
ACP, para formar malonil-S-ACP:
o malonil-ACP CoA SH
malonil-CoA ACP SH m
Como resultado de esta etapa y de la reacción de cebado,

un grupo malonilo queda ahora esterificado a la ACP y un gru-
po acetilo lo está a un grupo-SH de la molécula de la E-cetoa-
cil-ACP-sintasa (Fig. 8.4).

Figura 8.4.– Las tres primeras reacciones de cada ciclo de adicción

a la síntesis de los ácidos grasos.
4. Reacción de condensación
Es la siguiente reacción de la secuencia, catalizada por la

E-cetoacil-ACP-sintasa, el grupo acetilo esterificado al resto de
cisteína de esta enzima es transferido al carbono 2 del grupo
malonilo de la ACP, con la liberación del grupo carboxilo libre
del resto del malonilo, en forma de CO2.
La molécula de CO2 así liberada contiene el mismo átomo
de carbono que fue introducido como HCO3, en la reacción de
la acetil-CoA-carboxilasa. En esencia, el HCO3 desempeña un
papel catalítico en la síntesis del ácido graso, puesto que se re-
genera en forma de CO2, a medida que cada unidad de dos
carbonos se inserta en la cadena de crecimiento del ácido graso.
5. Primera reacción de reducción
El Acetoacetil-ACP experimenta su reducción por el

NADPH, para formar E-hidroxibutiril-ACP. Esta reacción está
catalizada por la E-cetoacil-ACP-reductasa:

O O
ll ll reducción
H3C C CH2 C S ACP NADPH H o
m
acetoacetil-ACP
OH O
l ll
o
m H3C CH CH2 C S ACP NADP

D-b-hidroxibutiril-ACP
6. Etapa de deshidratación
El D-E-hidroxibutiril-ACP es deshidratado al correspondien-

te trans-'2-enoil-ACP, esto es, el crotonil-ACP, por acción de la
enoil-ACP-deshidratasa:
7. Segunda etapa de reducción
Después, el crotonil-ACP es reducido a butiril-ACP por la

enoil-ACP-reductasa NADPH, (en E.colí y en los tejidos anima-
les, el donador de electrones es el NADPH).
H O
l ll
H3C C C C S ACP NADPH o
l
H
crotonil-ACP
O
ll
o H3C CH2 CH2 C S ACP NADP
butiril-ACP
Esta reacción se diferencia también de la correspondiente

de oxidación del ácido graso en las mitocondrias que implica a
un nucleótido pirimídico en vez de una flavoproteína.
La formación de butiril-ACP completa el primero de los
siete ciclos que conducen al palmitoil-ACP. Para iniciar el ci-

clo siguiente, el grupo butirilo es transferido desde el ACP al

grupo SH de la molécula de la E-cetoacil-ACP-sintasa, per-
mitiendo así a la ACP que acepte un grupo malonilo de otra
molécula de malonil-CoA. Entonces se repite el ciclo y la eta-
pa siguiente consiste en la condensación del malonil-ACP
con la butiril-S-E-cetoacil-ACP-sintasa, rindiendo E-cetohexa-
noil-ACP y CO2.
• Después de siete ciclos completos, el producto final es el
palmitoil-ACP.
• Este grupo pamitoilo puede separarse para formar ácido
palmítico libre por la acción de una tiosterasa o ser trans-
ferido del ACP al CoA, o bien ser directamente incorpora-
do en el ácido fosfatídico, en la ruta que conduce a los
fosfolípidos y triacilglicéridos.
En la mayoría de los organismos, el sistema de la ácido
graso-sintasa se detiene en la producción de ácido palmí-
tico y no produce ácido esteárico, que tiene sólamente
dos átomos de carbono más.
• Esta especifidad de longitud catenaria se la confiere al sis-
tema la E-cetoacil-ACP-sintasa, que se muestra muy efec-
tiva en aceptar el grupo tetradecanoilo (14C) de la ACP,
pero que no acepta el grupo hexadecanoilo (16C).
Además, el Palmitoil-CoA funciona como retroinhibidor
del sistema de la ácido graso-sintasa (Fig. 8.5).
Los ácidos grasos con un número impar de átomos de car-
bono se forman también por el complejo de la ácido graso-sin-
tasa. En este caso, la síntesis es cebada por una molécula ini-
ciadora de propionil-ACP (en vez de acetil-ACP), a la cual se
adicionan sucesivas unidades de dos carbonos, por medio de
condensaciones con el malonil-ACP.
Las etapas enzimáticas que conducen a la biosíntesis del
ácido palmítico difieren de las implicadas en la oxidación del
palmítico en los siguientes aspectos fundamentales.
• La síntesis se produce en el citosol, la degradación en la
matriz mitocondrial.
• Los intermediarios en la síntesis de los ácidos grasos están
ligados a los grupos sulfihidrilos de una proteína portado-
ra de grupos acilo (ACP), mientras que los intermediarios
de la degradación de los ácidos grasos están ligados a la
coenzima A.
• En los organismos superiores muchas de las enzimas de la
síntesis de ácidos grasos están organizadas en un comple-
jo multienzimático llamado ácido graso-sintasa. Las enzi-
mas degradativas no parecen estar asociadas entre sí.

Los ácidos grasos

con un número impar
de átomos de carbo-
no se forman también
por el complejo de la
ácido graso-sintetasa.
En este caso, la sínte-
sis es cebada por una
molécula iniciadora
de propionil-S-ACP
(en vez de acetil-S-
ACP), a la cual se
adicionan sucesivas
unidades de dos car-
bonos, por medio de
condensaciones con
el malonil-S-ACP.
Figura 8.5.– Esquema de reacciones para la obtención de palmitato.
• La cadena de crecimiento del ácido graso se alarga por la

adición secuencial de unidades de dos carbonos derivados
del acetil-CoA. El donador activado de las unidades de
dos carbonos en la etapa de elongación es el malonil-ACP.

En las mitocondrias, • La reacción de elongación es empujada o está dirigida

el ácido palmítico y por la eliminación de CO2.
otros ácidos grasos
saturados son prolon- • El reductor de la síntesis de ácido graso es el NADPH,
gados mediante adi- mientras que los oxidantes en la degradación de los áci-
ciones sucesivas al dos grasos son el NAD y el FAD.
extremo carboxilo
terminal de unidades • La elongación por el complejo de la ácido graso-sintasa
acetilo en forma de se detiene en la formación del Palmitato (C16), la elonga-
acetil-CoA. El malo- ción posterior y la inserción de dobles enlaces adicionales
n i l -AC P n o p u e d e
sustituir al acetil- se lleva a cabo por otros sistemas enzimáticos.
CoA.
EL COMPLEJO ÁCIDO GRASO SINTASA
Como se ha comentado anteriormente, las enzimas que ca-

talizan la síntesis de ácidos grasos constituyen un complejo
multienzimático, estrechamente acoplado en células eucarióti-
cas, denominado ácido graso sintasa (Fig. 8.6). Este complejo
contiene seis moléculas, cada una de ellas tiene dos cadenas
polipeptídicas, denominadas subunidades A y B. La subuni-
dad A contiene a la proteína transportadora de acilo (ACP), la
enzima condensante y la E-cetotioéster reductasa, y la subuni-
Figura 8.6.– Mecanismo del complejo ácido graso sintasa.

dad B contiene las cuatro actividades restantes: la aciltransaci-

lasa, la maloniltransacilasa, la E-hidroxiacildeshidratasa y la
enoilreductasa, se trata de una proteína o enzima multifuncio-
nal. En los tejidos de los vertebrados el complejo es más pe-
queño, con dos subunidades idénticas, cada subunidad contie-
ne una región ACP, además de todas las actividades enzimáti-
cas implicadas, así como una actividad que cataliza la
liberación final del palmitato. El complejo de levaduras carece
de esta última actividad, ya que el producto final de la activi-
dad de la ácido graso-sintasa en las levaduras es el palmitoil-
CoA. En los complejos eucarióticos, la ACP no es una proteí-
na pequeña, como en el caso de las bacterias. Parece que la
fosofopanteteína unida actúa como brazo de oscilación para
poner en contacto la porción acilo con los distintos lugares ac-
tivos de la síntesis de los ácidos grasos. Actualmente se cree
que cada cadena está plegada formando tres dominios unidos
por regiones flexibles, el dominio 1 es el de entrada del sustra-
to y de la unidad de condensación. El dominio 2, la unidad de
reducción, contiene la proteína portadora de acilos (ACP). El
dominio 3, la unidad de liberación del palmitato. Al tener siete
enzimas diferentes podemos concluir que una cadena poli-
peptídica contiene siete centros catalíticos diferentes. La sínte-
sis catalizada por las diferentes enzimas se realiza de forma co-
ordinada, y las distintas enzimas que forman estos complejos
están unidos coovalentemente, quedando protegidos de reac-
ciones competitivas. El dominio 1 de cada una de las cadenas
del dímero interacciona con los dominios 2 y 3 de la otra ca-
dena, de esta manera, cada una de las unidades funcionales
de la ácido graso-sintasa consta de dominios formados por di-
ferentes cadenas, el lugar de acción catalítica es la interfase
entre los dominios de las cadenas opuestas. Resultan de gran
importancia para el funcionamiento de este complejo multien-
zimático, la flexibilidad y la longitud máxima, unos 20 Å, del
fosfopanteteinilo, brazo del ACP, el sustrato de esta manera se
encuentra en el extremo de un brazo largo y flexible que pue-
de llegar a cada uno de los diversos centros activos.
CONTROL DE LA SÍNTESIS
DE ÁCIDOS GRASOS
La biosíntesis de ácidos grasos se controla en gran medida

por mecanismos hormonales. La insulina actúa de diversas for-
mas, uno de sus efectos consiste en estimular la entrada de glu-
cosa en las células, este efecto aumenta el flujo a través de la
glucólisis y la reacción con la piruvato deshidrogenasa, que

proporciona acetil-CoA para la síntesis de ácidos grasos. Por

otro lado activa al complejo piruvato deshidrogenasa, median-
te su desfosforilación a la forma activa.
Otro punto de regulación es la transferencia de unidades
acetilo desde la matriz mitocondrial al citosol, de manera que la
actividad de la citrato liasa se controla por la fosforilación y
desfosforilación de la enzima, aunque no se conocen los meca-
nismos que intervienen en ello.
También está regulada la acetil-CoA carboxilasa; la regula-
ción es de dos tipos:
a) Regulación alostérica, realizada por distintos modulado-
res que actúan de forma muy puntual, así metabolitos
como el citrato activan la enzima y otros como el palmi-
toil-CoA o el AMP la inhiben.
b) Modificación covalente, existen dos formas de la enzima,
una activa y otra sin activar, el paso de una a otras está
regulado hormonalmente, la insulina la activa y el glu-
cagón y la adrenalina la inactivan.
La acetil-CoA carboxilasa juega un papel importante en la re-
gulación del metabolismo de los ácidos grasos (Fig. 8.7), ya
que esta enzima, como hemos dicho anteriormente, cataliza la
etapa limitante de la síntesis de los ácidos grasos. Se inactiva
por fosforilación, la modificación de un residuo de serina por
una proteína quinasa activada por AMP transforma a la carbo-
xilasa en una forma inactiva. El AMP cíclico no tiene efecto so-
bre esta quinasa, que es distinta a la proteína quinasa A. Esta
quinasa es estimulada por el AMP e inhibida por el ATP. El gru-
po fosforilo en la carboxilasa inhibida es eliminado por la pro-
teína fosfatasa 2A, una de las cuatro fosfatasas importantes que
actúan sobre las proteínas.
Figura 8.7.– La acetil-CoA carboxilasa se inactiva por fosforilación y se activa por unión al citrato.
Por último, también se regula la síntesis a partir de la dispo-

nibilidad de equivalentes reductores (NADPH), de los que una
gran parte provienen de la ruta de las pentosasfosfato.

RESUMEN
Los ácidos grasos se sintetizan en el citosol por una vía

diferente a la E-oxidación. La reacción basada en la for-
mación y ruptura del citrato transporta grupos acetilo des-
de la mitocondria al citosol para la biosíntesis. Se inicia la
síntesis con la carboxilación del acetil-CoA hasta malonil-
CoA, etapa limitante, catalizada por la acetil-CoA carboxi-
lasa, principal punto de control y regulación de la biosínte-
sis de los ácidos grasos. Los intermediarios de la síntesis
de ácidos grasos están unidos a una proteína portadora de
acilos (ACP).
El acetil-ACP y el malonil-ACP se condensan para for-
mar acetoacetil-ACP. A continuación sigue una reducción,
una deshidratación y una segunda reducción. El reductor
en estas etapas es el NADPH. Se forma de esta manera el
butiril-ACP, que inicia un segundo ciclo de elongación, co-
menzando con la adición de una unidad de dos carbonos
procedentes del malonil-ACP. Siete ciclos de elongación
producen palmitil-ACP, el cual se hidroliza hasta palmitato.
La síntesis de palmitato requiere ocho moléculas de
acetil-CoA, 14 de NADPH y siete de ATP. Otras siete
moléculas de HCO3, que realizan un papel catalítico, inter-
vienen en la formación de malonil-CoA y se recuperan en
forma de CO2 en la reacción de condensación. En organis-
mos superiores, las enzimas que realizan la síntesis de los
ácidos grasos, están unidas covalentemente formando un
complejo enzimático multifuncional, la acido graso sintasa.
La acetil-CoA carboxilasa, enzima limitante de la veloci-
dad del proceso, es regulada a través de las formas desfos-
forilada activa y fosforilada inactiva de la carboxilasa, el ci-
trato la activa alostéricamente.
Aplicaciones clínicas de los inhibidores

de la ácido graso sintasa
Muchos de los cánceres habituales del ser humano, como

los carcinomas de colon, próstata, ovario, mama y endome-
trio, expresan elevados niveles de ácido graso sintasa, la pri-
mera enzima de la síntesis de ácidos grasos. Así, la distinta ex-
presión de esta enzima en los tejidos normales y los neoplási-

cos ha llevado a pensar que la ácido graso sintasa es una dia-

na importante en la terapia anticancerígena. Estudios realiza-
dos en pacientes con carcinoma de mama indican que los ni-
veles de la ácido graso sintasa se elevan en las células neoplá-
sicas, y este incremento de concentración es proporcional al
estadio clínico del tumor, por lo que se relaciona con la viru-
lencia del mismo.
Uno de los inhibidores de la ácido graso sintasa, que actual-
mente se encuentra en fase de estudio, es el denominado C75,
una pequeña molécula sintética que presenta una actividad an-
titumoral significativa, paralela a la inhibición de la síntesis de
ácidos grasos en los tejidos tumorales, así como en los norma-
les. Este inhibidor no produce efectos adversos en la prolilfera-
ción celular normal de médula ósea, el tracto gastrointestinal,
la piel o los tejidos linfoides. Ello hace pensar en la utilidad de
C75 como agente antitumoral.
Por otra parte, recientes estudios realizados con ratones,
han puesto de manifiesto el efecto de los inhibidores de la áci-
do graso sintasa, concretamente de C75 y de cerulenín, en la
inhibición de la alimentación y en una dramática pérdida de
peso. Parece que C75 inhibe la expresión de un neuropéptido
hipotalámico decisivo en la señal profágica. Por lo tanto, la áci-
do graso sintasa puede jugar un papel importante en la regula-
ción de la alimentación, y así ser una diana terapeútica decisi-
va en el control de la obesidad.

Metabolismo
TEMA 9 de acilgliceroles
y esfingolípidos
Metabolismo de triacilgliceroles. Hidrólisis y

movilización de triacilgliceroles. Metabolismo de
glicerofosfolípidos. Metabolismo de esfingolípidos.
Los acilgliceroles son los lípidos más abundantes en el ser

humano, ya que dentro de ellos se encuadran dos de los princi-
pales grupos lipídicos. Así, son acilgliceroles los triacilgliceroles,
principales depósitos grasos del ser humano, almacenándose
principalmente en el tejido adiposo. También forman parte de
los acilgliceroles los glicerofosfolípidos, componentes esenciales
de las membranas biológicas. Por su parte, el grupo de los
esfingolípidos, componentes de la membrana plasmática y ca-
racterizados por la presencia de esfingosina en su estructura, in-
cluye los cerebrósidos y los gangliósidos, cuyas moléculas
incorporan ácidos grasos, así como diferentes residuos de mo-
nosacáridos u oligosacáridos complejos.
METABOLISMO DE TRIACILGLICEROLES
Biosíntesis de triacilgliceroles
Los acil-CoA, junto con el glicerol-3-fosfato, son los princi-

pales precursores de los triacilglicéridos. La primera ruta predo-
mina en el tejido adiposo, el glicerol-3-fosfato sufre dos esterifi-
caciones sucesivas con acil-CoA, para producir diacilglicerol-3-
fosfato (ácido fosfatídico), que es el precursor tanto de los
triacilglicéridos como de los fosfoglicéridos. La ruta hacia los
triacilgliceroles implica la eliminación hidrolítica del fosfato, se-
guida de una transferencia de otro grupo acilo procedente de
un acil-CoA.
El producto de partida es el glicerol-3-fosfato, formado
principalmente por reducción de la hidroxiacetona fosfato y en
menores proporciones por la fosforilación del glicerol. Puede

también formarse a partir de la glicerina procedente de la de-

gradación de los triacilglicéridos por la acción de la glicerol-
quinasa.
La primera etapa en la formación de triacilgliceroles es la

esterificación de los carbonos D y E de la glicerina (glicerol) con
dos ácidos grasos, lo que da lugar a un ácido fosfatídico o fos-
fadiato. Estas acilaciones están catalizadas por la glicerofosfato
aciltransferasa.
A continuación, mediante una fosfatasa específica, el ácido
fosfatídico se transforma en el diacilglicérido o diacilglicerol.
Este último reacciona con una tercera molécula de acil-CoA

para formar un triacilglicérido, reacción catalizada por la di-
glicérido aciltransferasa. Estas enzimas están asociadas a un
complejo triacilglicerol sintetasa ligado a una membrana del
retículo endoplasmático (Fig. 9.1).
En las células intestinales, las grasas neutras (triacilglicéri-
dos) se absorben como ácidos grasos libres y monoglicéridos.
Una vez dentro de la célula, los triacilglicéridos son resintetiza-
dos a partir de los monoglicéridos, sin que tengan que pasar
por la fase de ácido fosfatídico (Fig. 9.2).

METABOLISMO DE ACILGLICEROLES Y ESFINGOLÍPIDOS 117
Figura 9.1.– Principales rutas en la biosíntesis de triacilgliceroles en tejidos

de mamífero. MAG: Monoacilglicerol; 1,2 DAG: 1,2-Dialglicerol
HIDRÓLISIS Y MOVILIZACIÓN DE
TRIACILGLICEROLES
El primer paso en la recuperación de los ácidos grasos al-

macenados para la producción de energía es la hidrólisis de los
triacilgliceroles, la cual es catalizada por una serie de lipasas del
tejido adiposo. La lipasa que libera el primer ácido graso está
sometida a control por una serie de hormonas. Este control de
la hidrólisis de los triacilgliceroles debe guardar un equilibrio

Figura 9.2.– Síntesis de triacilglicéridos en las células intestinales.
con el proceso de la síntesis de triacilgliceroles, para así poder

asegurar unos depósitos energéticos adecuados y evitar la obe-
sidad. Los ácidos grasos y el glicerol producidos por las lipasas
del tejido adiposo se liberan a la sangre circulante, en donde
los ácidos grasos se unen a la albúmina sérica y son transporta-
dos a los tejidos para su uso. El glicerol regresa al hígado, en
donde se transforma en dihidroxiacetona fosfato y entra en la
vía glucolítica o gluconeogénica.
METABOLISMO DE GLICEROFOSFOLÍPIDOS
Degradación de fosfoglicéridos
La degradación de los fosfolípidos corre a cargo de las fos-

folipasas, enzimas que liberan los ácidos grasos componentes
de estos compuestos. Tiene lugar de forma continua, en todos
los tejidos del organismo. Estas fosfolipasas se clasifican según

la posición en la molécula del ácido graso que liberen, en fosfo-

lipasas A1, A2, C y D.
Las fosfolipasas están ampliamente distribuidas en la natu-
raleza: se localizan tanto en el jugo intestinal como en las secre-
ciones bacterianas o en los venenos actuando como enzimas
digestivas; por ejemplo, al fosfolipasa A2 es muy abundante en
el veneno de ciertas especies de serpientes. Estas enzimas tam-
bién actúan en la síntesis de lípidos importantes para el orga-
nismo, por ejemplo la fosfolipasa A2, que libera ácido ara-
quidónico, precursor de las prostaglandinas.
Los fosfoglicéridos, mediante la acción conjunta de varias
fosfolipasas, pueden ser catabolizados hasta la formación de
glicerol-3-fosfato. Los ácidos grasos libres, como los demás pro-
ductos que se van liberando en esta degradación, pueden ser
reutilizados para la síntesis de nuevos fosfolípidos o dirigirse
hacia otras rutas metabólicas.
Síntesis de fosfoglicéridos
Las dos clases principales de glicerolípidos son los triacil-

glicéridos, ya estudiados, y los glicerofosfolípidos, y dentro de
estos nos centraremos en la síntesis de los fosfoglicéridos y los
esfingolípidos.
Como metabolito intermediario utilizan la molécula de áci-
do fosfatídico al igual que los triacilgliceroles. Para la síntesis de
los fosfoglicéridos se une un nucleótido activado CTP (citidina
trifosfato), formando un intermediario CDP-diacilglicerol. La
porción fosfatidilo reacciona con alcoholes de naturaleza polar,
obteniéndose los fosfoglicéridos como la fosfatidilserina o el
fosfatidil inositol; a partir de la fosfatidilserina se obtienen la
fosfatidil etanolamina o la fosfatidilcolina.
La síntesis de estos dos últimos puede también realizarse
por otra vía: la colina o la etanolamina son activadas mediante
su unión a CTP y en una reacción posterior se unen al fosfati-
dato para formar los dos fosfoglicéridos.
Síntesis de fosfoglicéridos: Reacciones
Existen varias vías para la síntesis de fosfoglicéridos, una de

las rutas de síntesis de novo comienza con la formación de citi-
dina difosfato diacilglicerol (CDP-diacil-glicerol) a partir de fos-
fotidato o ácido fosfatídico y de un nucleótido activado, citidina
trifosfato (CTP). Esta reacción está favorecida por la hidrólisis
del pirofosfato (PPi).

La porción fosfatídico activado reacciona con el grupo hi-

droxilo de un alcohol polar, cuando el alcohol es serina se ob-
tiene la fosfatidilserina. Igualmente, el fosfatidil inositol se for-
ma por transferencia del fragmento diacilglicerolfosfato desde
el CDP-diacilglicerol al inositol.
En las bacterias, a partir de la fosfatidilserina se obtienen la

fosfatidil etanolamina o la fosfatidilcolina.
La descarboxilación de la fosfatidilserina por una enzima
que tiene como coenzima el piridoxol fosfato produce la fosfati-
diletanolamina, posteriormente el grupo amino de la fosfatidil-

etanolamina sufre tres metilaciones consecutivas para formar

fosfatidilcolina. Siendo la S-adenosilmetionina, el dador de me-
tilo en estas metilaciones.
La síntesis de estos dos últimos compuestos puede también

realizarse por otra vía; la colina o la etanolamina son activadas
mediante su unión a CTP, y en una reacción posterior se unen
al fosfatidato para formar los dos fosfoglicéridos.
En los mamíferos, la fosfatidilcolina se sintetiza a partir de la
colina, la colina es fosforilada por el ATP hasta fosforilcolina,
que reacciona con el CTP para formar CDP-colina. La fosforil-
colina de la CDP-colina se transfiere de un diacilglicerol.
Igualmente, la fosfatidiletanolamina, puede obtenerse a par-

tir de etanolamina, que origina un intermediario CDP-etanola-
mina, por una serie de reacciones similares (Fig. 9.3).
Algunos fosfolípidos tiene en el C1 un radical éter en lugar
de un radical acilo, se denominan glicerileterfosfolípidos, su sín-
tesis comienza con la hidroxicetona fosfato que es acilada con

Figura 9.3.– Esquema de las rutas de biosíntesis de los glicerofosfolípidos.
un acil-CoA, donde un derivado 1-acilo se intercambia con un

alcohol de cadena larga para formar un éter. El grupo ceto del
C2 se reduce con NADPH y el alcohol resultante se acila con un
acil-CoA de cadena larga, se elimina el grupo fosfato del C3
dando lugar a 1-aquil-2-acilglicerol, que con la CDP-colina for-
mará un análogo de la fosfatidilcolina, el 1-alquil-2-acil-fosfati-
dilcolina (éter-fosfolípido) (Fig. 9.4).

Figura 9.4.– Formación de éter fosfolípido.
METABOLISMO DE ESFINGOLÍPIDOS
Degradación
El catabolismo de los esfingolípidos se produce en los liso-

somas, por la acción de una familia de enzimas hidrolíticas. Es-
tas rutas tienen un gran interés a nivel médico dada su relación
con un grupo de enfermedades congénitas denominadas esfin-
golipidosis, cada una de las enfermedades se caracteriza por el
déficit de una de las enzimas de la degradación (Tabla 9.1).
Tabla 9.1.– Esfingolípidos
Enfermedad Enzima deficitaria Intermedio acumulado

Gangliosidosis GM1 β-Galactosidasa Gangliósido GM1
Tay-Sachs β-N-acetilhexosaminidasa Gangliósido GM1
Fabry β-Galactosidasa A Trihexosilceramida
Gaucher β-Glucosidasa Glucosilceramida
Niemann-Pick Esfingomielinasa Esfingomielina
Lipogranulomatosis de Farber Ceramidasa Ceramida
Leucodistrofia de células globoides β-Galactosidasa Galactosilceramida
Leucodistrofia metacromática Arilsulfatasa A 3-sulfogalactosil-ceramida
Sandhoff N-acetilhexosaminidasas A y B Gangliósido GM1 y Globósido

Los esfingolípidos, y especialmente la esfingomielina, son

componentes abundantes de la vaina de mielina que protege y
aísla a las células del sistema nervioso central. Las esfingolipi-
dosis o enfermedades de almacenamiento de lípidos se carac-
terizan por déficit de una de las enzimas de degradación, con la
acumulación dentro del lisosoma del sustrato de la enzima defi-
citaria.
La mayoría de estas enfermedades son autosómicas recesi-
vas. Debido a la gran cantidad de esfingolípidos existente en el
tejido nervioso, la mayoría de las esfingolípidosis comportan un
deterioro grave de la función del sistema nervioso central. Una
de las más conocidas esfingolipidosis es la denominada enferme-
dad de Tay-Sachs, en la que existe un déficit de la N-acetilhexo-
saminidasa A liposómica; fue una de las primeras enfermedades
genéticas que se diagnosticó con éxito mediante amniocentesis.
Síntesis de esfingosina
La síntesis de esfingosina, un componente común de los es-

fingolípidos, se realiza mediante la condensanción del palmi-
toil-CoA y serina, formando una amina de 18 átomos de car-
bono denominada esfingonina. A través de una decarboxila-
ción y dos reducciones posteriores se obtiene la esfingosina
(Fig. 9.5). La incorporación de un acil-CoA da origen a la
Figura 9.5.– Síntesis de esfingosina.

molécula de ceramida (N-acil-esfingosina). Las esfingomielinas

(N-acilesfingosina fosforilcolina) se obtienen por adición de un
grupo fosforilo esterificado con colina, procedente de la fosfati-
dilcolina. Si en lugar del grupo fosfato y la colina, se produce la
incorporación secuencial de monosacáridos, se forman los dis-
tintos glucoesfingolípidos. La incorporación de los monosacári-
dos se realiza a través de intermediarios activados mediante
unión a CTP o UTP, y está catalizado por las glucosil-transfera-
sas que forman enlaces glucosídicos para producir gangliósidos
y cerebrósidos. La ceramida actúa como precursor tanto de la
estingomielina como de los glucoesfingolípidos (Fig. 9.6).
Figura 9.6.– Estructura general de un esfingolípido (A). Estructura de la

molécula de ceramida (X H) y de sus distintos derivados (B).
En los cerebrósidos, la glucosa o la galactosa están unidos

al grupo hidroxilo terminal de las ceramidas. Las UDP-glucosa
o UDP-galactosa son los dadores de azúcar en la síntesis de los
cerebrósidos. En los gangliósidos, un oligosacárido está unido a
la ceramida por un residuo de glucosa, son los esfingolípidos
más complejos, el azúcar ácido N-acetilneuramínico (NAN) o el
N-glicolinneuramínico. Estos azúcares ácidos se denominan
ácidos siálicos. Se sintetizan a partir de fosfoenol piruvato y

N-acetilmanosamina-6-fosfato. Los gangliósidos se sintetizan

mediante la adición paso a paso de residuos de azúcares al
cerámido. La UDP-glucosa, UDP-galactosa, UDP-N-acetilgalac-
tosamina y el CMP-N-acetilneuraminato son los dadores activa-
dos de estos residuos de azúcares. Las enzimas que intervienen
en el proceso son las glucosiltransferasas de la célula. Se han
identificado más de 15 gangliósidos diferentes. Los gangliósi-
dos son receptores de agentes específicos, como la toxina del
cólera, que se une al gangliósido GM1, o el virus de la gripe
que reconoce la porción de ácido siálico de ciertos gangliósi-
dos. Se desconocen las funciones bioquímicas de estos esfin-
golípidos, se cree que los gangliósidos podrían jugar un papel
informador en las interacciones intercelulares, proporcionando
determinantes de reconocimiento específicos en la superficie de
las células.
RESUMEN
Los triacilgliceroles se sintetizan mediante rutas senci-

llas en las que los grupos acilo de los acil-CoA se transfie-
ren a los grupos hidroxilo del glicerol-3-fosfato, que sufre
dos esterificaciones sucesivas para formar diacilglicerol-3-
fosfato, también denominado ácido fosfatídico, que es pre-
cursor tanto de los fosfolípidos como de los triacilglicéri-
dos. La posterior formación de los triacilglicéridos implica
la eliminación hidrolítica del fosfato seguida de una nueva
esterificación con un acil-CoA.
Los glicerofosfolípidos, lípidos predominantes en las
membranas, se sintetizan mediante vías que parten del
fosfatidato y activan intermediarios mediante la reacción
con la citidina trifosfato (CTP). La S-adenosilmetionina es
el donador de grupos metilo para la síntesis de la fosfatidil-
colina a partir de fosfatidiletanolamina.
Los esfingolípidos (glucoesfingolípidos) se sintetizan a
partir de ceramida, es decir, del ceramido, que se forma
por acilación de esfingosina, y la adición sucesiva de azú-
cares mediante la acción sucesiva de glucosiltransferasas,
que actúan sobre los azúcares ligados a nucleótidos. Los
gangliósidos son esfingolípidos que contienen un oligo-
sacárido con al menos un residuo de N-acetilneuraminato
o un ácido siálico derivado de él.
Las esfingolipidosis, también conocidas como enferme-
dades de almacenamiento de lípidos, son mayoritariamen-
te enfermedades autosómicas recesivas, que se caracteri-

zan por el déficit de una de las enzimas de degradación de

estos compuestos, los principales síntomas son retraso en
el desarrollo psicomotor, retraso mental, ceguera y en mu-
chos casos la muerte antes de los 3 ó 4 años de edad.
Enfermedad de Tay-Sachs
Es la mejor conocida de las esfingolipidosis, se caracteriza

porque hay un déficit o ausencia de la N-acetilhexosaminidasa
A liposómica. Las irregularidades o anomalías en la degrada-
ción de los gangliósidos pueden tener serias consecuencias clí-
nicas. El déficit enzimático causa una elevada concentración de
gangliósidos, concretamente el denominado GM2, fundamen-
talmente en el cerebro. Esta concentración de gangliósidos GM2
es mucho más alta de lo normal porque un residuo N-acetilga-
lactosamina terminal se elimina muy lentamente o no se elimi-
na. Los cambios patológicos más sorprendentes tienen lugar en
el sistema nervioso, ya que las neuronas se hinchan enorme-
mente y los lisosomas aparecen repletos de lípidos.
En la enfermedad de Tay-Sachs los síntomas, por lo gene-
ral, son evidentes antes de que los niños tengan un año, la en-
fermedad causa por lo general degeneración del sistema ner-
vioso central, debilidad y retraso del desarrollo psicomotor, lo
que conlleva retraso mental, ceguera y la muerte entre el se-
gundo y tercer año.
Se produce en esta enfermedad una desaparición de las cé-
lulas ganglionares y la proliferación de las células gliales, y la
desmielinización de los nervios periféricos. El hallazgo patognó-
mico es una mancha rojo cereza en la mácula causada por el
hinchamiento y la necrosis de las células ganglionares del ojo.
Esta enfermedad, como la mayoría de almacenamiento de lípi-
dos, se transmite en forma de anormalidades genéticas recesi-
vas, la anormalidad se encuentra en un cromosoma autosómi-
co. Por lo general, los síntomas son evidentes antes de que los
niños afectados tengan un año, a la edad de 2 años, el niño
está demente y ciego, la muerte generalmente se produce antes
de los 3 años de edad, como indicamos anteriormente. Dado
que no hay ninguna forma de curación conocida de esta enfer-
medad, se ha centrado la atención en la detección prenatal,
ésta fue una de las primeras enfermedades genéticas que se
diagnosticó con éxito durante el desarrollo del feto. Se obtiene
el líquido amniotico por amniocentesis y se analiza para ver la

actividad de la N-acetilhexosaminidasa A. La única forma co-

nocida de abordar la enfermedad cuando se detecta es la inte-
rrupción del embarazo.
Aunque la enfermedad de Tay-Sachs es rara en la pobla-
ción general, es relativamente frecuente en los judíos america-
nos procedentes del centro y del este de Europa, aproximada-
mente 1 de cada 30 individuos es portador del gen defectuoso
y 1 de cada 300 en los americanos no judíos.

Metabolismo
TEMA 10 del colesterol
Biosíntesis del colesterol. Transporte y excreción

del colesterol. Regulación de la biosíntesis del co-
lesterol.
El colesterol forma parte de las membranas plasmáticas de

las células eucariotas, siendo un componente esencial para su
estabilidad estructural y funcional. Es el precursor de otros este-
roides que cumplen importantes funciones fisiológicas, tales
como ácidos biliares, hormonas esteriodeas, vitamina D, etc.
Sin embargo, el aumento de los niveles de colesterol en plasma
es causa de morbilidad y de mortalidad por enfermedad car-
diovascular. El deposito de colesterol en la pared arterial es el
responsable de la formación de las placas de ateroma. Resulta
pues evidente la necesidad de una regulación cuidadosa que
garantice todos los destinos metabólicos del colesterol, sin ge-
nerar patología.
BIOSÍNTESIS DEL COLESTEROL
Junto al colesterol exógeno procedente de la dieta que se

absorbe en el tubo digestivo, las células del organismo forman
una cantidad incluso superior de colesterol endógeno. Casi todo Casi todo el coleste-
el colesterol endógeno que circula unido a las lipoproteínas del rol endógeno se sin-
tetiza en el hígado.
plasma se forma en el hígado. Todas las células del cuerpo pue-
den sintetizar algo de colesterol, lo que estaría justificado por el
hecho de ser un componente estructural de todas las membra-
nas. La síntesis de colesterol se realiza a partir del acetil-CoA.
Las células de la mucosa intestinal, glándulas suprarrenales y
gónadas pueden sintetizarlo a partir del acetil-CoA, aunque fun-
damentalmente lo obtienen del plasma unido a las LDL.
En el hígado, principal centro de síntesis de colesterol, el
acetil CoA pasa a 3-hidroxi-3-metilglutaril-CoA (HMG-CoA),

que puede reducirse a mevalonato por una reductasa que ne-

cesita NADPH. Esta reacción es limitante y constituye la clave
para regular la velocidad de síntesis del colesterol. El HMG-
CoA se encuentra tanto en el citoplasma como en la mitocon-
dria del hepatocito, aunque en esta última constituye funda-
mentalmente un precursor de los cuerpos cetónicos (Fig. 10.1).
Figura 10.1.– Formación del mevalonato.
El mevalonato sufre dos fosforilaciones catalizadas por

quinasas para producir pirofosfomevalonato, que es descar-
boxilado mientras que se produce la hidrólisis de ATP para
producir isopentenilpirofosfato (Fig. 10.2). Este compuesto es
Figura 10.2.– Síntesis de isopentenil-pirofosfato.

METABOLISMO DEL COLESTEROL 131
un intermediario importante para la síntesis de vitamina D, la

cual requiere de la acción de la luz ultravioleta en uno de los
pasos.
A partir de este compuesto se sintetiza el escualeno me-
diante una serie de reacciones que comienzan con la isomeri-
zación del isopentenil-pirofosfato hasta dimetil-alil-pirofosfato
(Fig. 10.3).
Figura 10.3.– Síntesis del escualeno.
A continuación, ambas molécuIas se ensamblan de forma

característica con perdida del resto pirofosfato de ésta última
para dar lugar al geranil-pirofosfato. Este compuesto reacciona
de nuevo con otra molécula de isopentenil-pirofosfato, para
producir farnesil-pirofosfato. A partir de aquí, por condensa-
ción reductora de dos moléculas de farnesil-pirofosfato, me-
diante el concurso de NADPH se llega a la formación del es-
cualeno con pérdida de pirofosfato.
La etapa final de la síntesis de colesterol se inicia con la ci- El isopentenil piro-
clación del escualeno en presencia de oxígeno molecular y fosfato (IPP) es tam-
bién un intermediario
NADPH, para dar lanosterol por medio de una ciclasa. En esta en la síntesis de vita-
etapa se producen además reajustes de electrones, cambios en mina D.
los dobles enlaces, eliminación de grupos metilo, etc. de gran
complejidad (Fig. 10.4).

Figura 10.4.– Síntesis de colesterol a partir de escualeno.
TRANSPORTE Y EXCRECIÓN DE COLESTEROL
El colesterol, junto con los triglicéridos y fosfolípidos, alta-

mente hidrofóbicos, es transportado en los líquidos corporales
unido a proteínas, en forma de agregados macromoleculares o
lipoproteínas (ver tema 12).
El colesterol hepático de origen exógeno, procedente de la
dieta, llega hasta el hepatocito vehiculizado en los remanentes
de los quilomicrones. El colesterol endógeno, por su parte, es
sintetizado en la célula hepática a partir del acetil-CoA proce-
dente de azúcares, ácidos grasos y aminoácidos. Una parte de
este colesterol endógeno sale del hígado en forma de LDL,
para regresar formando parte de diferentes lipoproteínas y re-
La incorporación del manentes de las mismas. Su incorporación está mediada por
colesterol a las célu- receptores específicos. El colesterol de los tejidos llega al higa-
las hepáticas depen-
de de receptores es- do a través de las LDL, IDL y HDL. Finalmente el exceso de
pecíficos. colesterol hepático actúa como mecanismo de autorregulación
y es excretado en la bilis como tal o en forma de ácidos bilia-
res (Fig. 10.5).

VLDL, LDL, HDL e

IDL son lipoproteínas
de densidad muy ba-
ja, de densidad baja,
de densidad elevada
y de densidad inter-
media respectivamen-
te.
Figura 10.5.– Esquema del transporte de grasas.
REGULACIÓN DE LA BIOSÍNTESIS
DE COLESTEROL
El acetil CoA es un metabolito intermediario tanto de azú- La síntesis del coles-

cares como de ácidos grasos y de algunos aminoácidos, por lo terol se regula en el
hígado.
que su disponibilidad está asegurada, lo que por otra parte es
comprensible dada la importancia fisiológica del colesterol. La
regulación de la biosíntesis es compleja y, aunque no está total-
mente dilucidada, parece depender tanto del propio colesterol,
como de sus metabolitos intermediarios que actuarían sobre las
enzimas reguladoras del proceso.
El órgano donde se regula fundamentalmente la síntesis del
colesterol es el hígado. Los niveles de colesterol en plasma pue-
den modificarse por efecto de la dieta. El colesterol de la dieta
disminuye la síntesis y actividad de la 3-hidroxi-3-metilglutaril-
CoA reductasa, como hemos visto, enzima clave en la primera El exceso de grasas
etapa de la síntesis, que cataliza la formación de mevalonato a en la dieta influye so-
bre los niveles de co-
partir del acetil CoA. El control de la reductasa es bastante lesterol en sangre.
complejo y puede hacerse a distintos niveles que incluyen la
transcripción de la información del DNA, la traducción del
RNA o síntesis de la enzima y la degradación o pérdida de su
actividad biológica. A estos niveles actúan metabolitos deriva-
dos del ácido mevalónico o del colesterol, a través de enzimas
específicas que pueden reconocerlos y actuar en consecuencia.
El exceso de grasas en la dieta tiene efecto sobre los niveles
plasmáticos de colesterol. Mientras que las grasas saturadas lo
elevan de forma importante al aumentar los niveles de acetil-
CoA en el hepatocito, las grasas poliinsaturadas lo disminuyen
moderadamente. Estas observaciones son la base de muchas
de las estrategias dietéticas actuales. Por otra parte, el aumento

de colesterol en el hepatocito, aumenta la actividad de la enzi-

ma acil-colesterol-acil-transferasa (ACAT), que se encarga de
esterificar el colesterol libre. Las LDL son las principales trans-
portadoras del colesterol en plasma, regulando la síntesis “de
novo” de colesterol en los tejidos. Estas lipoproteínas son cap-
tadas por el hígado a través de receptores específicos, regula-
bles por la propia concentración intracelular de colesterol.
Cuando ésta es elevada, no sólo se impide la entrada de LDL-
colesterol, sino que se bloquea la síntesis de colesterol endóge-
no por inhibición enzimática.
Una buena parte de los fármacos utilizados en el control de
los niveles plasmáticos de colesterol, las estatinas, actúan como
inhibidores específicos de la HMG CoA.
Una de las teorías más aceptadas sobre la patogenia de la
aterosclerosis es la hipótesis de la reacción de la lesión, según
la cual, el endotelio vascular estaría sometido a lesiones de re-
petición que pondrían en peligro su integridad. Entre las causas
de lesión endotelial, se encuentran las de tipo químico, siendo
la hipercolesterolemia crónica la más importante. Cuando se
pierde la integridad funcional del endotelio de revestimiento, el
tejido subendotelial queda expuesto a una serie de factores, en-
tre otros, factores plaquetarios, lipoproteínas del plasma, hor-
monas, que estimulan la migración de células del músculo liso
desde la túnica media arterial hacia la íntima, proliferando en
los focos de lesión donde constituyen un núcleo de tejido co-
nectivo con acumulación de lípidos. Es probable que el trastor-
no celular inicial sea la adhesión al foco aterogénico de los mo-
nocitos circulantes capaces de almacenar lípidos y su transfor-
mación posterior en macrófagos tisulares. Los principales focos
aterogénicos se localizan en los puntos más débiles del árbol
circulatorio, sus bifurcaciones. Esto es debido a que en dichas
zonas el riesgo de lesión de la célula endotelial es mayor.
RESUMEN
La regulación de la biosíntesis del colesterol se ejerce

fundamentalmente en el hígado. El aumento de colesterol
en la dieta produce una inhibición de la síntesis hepática,
que se lleva a cabo en la primera etapa de formación de
mevalonato, por inhibición de la HMG-CoA reductasa,
que actúa como enzima limitante.
Por otra parte, la síntesis de colesterol también se ve in-
hibida como consecuencia del efecto que ejercen sus nive-
les intracelulares sobre la síntesis y expresión del receptor

celular para LDL, que bloquea la incorporación de coles-

terol desde dichas lipoproteínas plasmáticas.
1. Hipercolesterolemia primaria
Es una patología que se produce como consecuencia de un

defecto en el receptor de las LDL (proteína codificada por un
gen localizado en el brazo corto del cromosoma 19). Es la en-
fermedad monogénica más frecuente: 1/1500 de herencia
autosómico dominante. Cursa con elevación de LDL-Coleste-
rol. En la clínica se caracteriza por presentar ateroesclerosis co-
ronaria precoz, xantomas tendinosos, tuberosos, xantelasmas y
arco corneal. Las manifestaciones cutáneas, como en otras en-
fermedades, están en relación con el tiempo de evolución de la
enfermedad. Requiere tratamiento dietético (dieta pobre en co-
lesterol y grasas saturadas y rica en grasas poliinsaturadas).
Cuando este tratamiento fracase se empleará un tratamiento
combinado de colestiramina (de primera elección en niños y en
mujeres en edad fértil que no usen anticonceptivos) e inhibido-
res de la HMG-CoA reductasa.
2. Aterosclerosis
Es un proceso patológico conocido ya en la antigüedad, ha-

biéndose descrito cambios compatibles con la aterosclerosis en
las momias de la XI dinastía de los faraones. Crawford la define
como una lesión arterial muy prevalente, caracterizada por un
engrosamiento focal de la íntima constituido por acúmulos de
grasas y capas de fibras finas semejantes a colágeno en propor-
ciones variables. Mediante esta definición puso de manifiesto
sus tres aspectos fundamentales:
• La distribución focal de las lesiones, determinada por fac-
tores hemodinámicos.
• La afección predominante de la íntima.
• La naturaleza compleja de los elementos que forman las
lesiones ateroescleróticas consistentes en lípido, tejido
conectivo necrótico y tejido fibromuscular fibroprolifera-
do, formando este último un recubrimiento que separa
los demás constituyentes del flujo sanguíneo en la luz ar-
terial.

La hiperlipidemia, y en especial la hipercolesterolemia, es

un importante factor de riesgo para el desarrollo de cardiopatía
coronaria y accidente cerebrovascular. El colesterol y sus diver-
sas fracciones son importantes factores predictores de estas en-
fermedades y la mortalidad que se deriva de ellas. Su capaci-
dad predictiva depende en gran medida de la edad. En cual-
quier caso, el tratamiento de estas entidades comienza por la
prevención y control de los factores de riesgo asociados.

Metabolismo
TEMA 11 de los derivados
del colesterol
Síntesis de hormonas esteroideas. Síntesis de áci-

dos biliares. Circulación enterohepática de las sa-
les biliares. Síntesis de Vitamina D.
El destino metabólico del colesterol, además de formar par-

te de las membranas celulares, es servir de precursor para la
síntesis de hormonas esteroideas, ácidos biliares y vitamina D.
Las hormonas esteroideas tienen efectos significativos sobre el
metabolismo de los glúcidos y de las proteínas de muchos teji-
dos. Los ácidos biliares, que se sintetizan en el hígado y se al-
macenan y concentran en la vesícula biliar, solubilizan los lípi-
dos de la dieta y pueden ser reabsorbidos por el hígado o eli-
minados por el intestino delgado. La vitamina D, que actúa
sobre la calcificación de los huesos, se almacena en el hígado y
se excreta por el mismo camino que los ácidos biliares.
SÍNTESIS DE HORMONAS ESTEROIDEAS
Todas las hormonas esteroideas proceden del colesterol. La

importancia de estos compuestos se debe a su actividad bioló-
gica como hormonas, más que a la utilización de colesterol
para su síntesis, que ocurre en cantidades pequeñas. Los prin- Las hormonas este-
cipales tejidos implicados en la síntesis hormonal son los ova- roideas, los ácidos
biliares y la vitamina
rios, los testículos y la corteza adrenal. D proceden del coles-
El colesterol para la síntesis procede del plasma de donde terol.
es captado en forma de LDL-colesterol, o bien se obtiene a
partir del colesterol esterificado que almacenan las células. En
ausencia de estas dos fuentes, se produce la síntesis "de novo”
a partir de acetil-CoA.
El primer paso es la escisión de la cadena lateral para for-
mar pregnenolona. La hidroxilación previa en C-20 y C-22 re-
quiere de la intervención de una monooxigenasa dependiente

del citocromo P450. La ruptura entre ambos carbonos hidroxila-

dos se produce por una desmolasa. Las tres reacciones necesi-
tan NADPH y O2. La reacción ocurre en la mitocondria, hasta
donde es conducido el colesterol por medio de un transporta-
dor específico.
La corticotropina o ACTH secretada por la adenohipófisis
estimula la síntesis de pregnenolona a partir de colesterol. La
pregnenolona es el precursor de las demás hormonas esteroide-
as mediante una serie de transformaciones químicas sencillas.
La pregnenolona es La progesterona se sintetiza a partir de pregnenolona en
precursora de varias dos etapas, en la primera el grupo hidroxilo del C-3 se transfor-
hormonas con gran
significado biológico. ma en 3-ceto y en la segunda, el doble enlace de C-5 pasa a
C-4 (Fig. 11.1). El cortisol se obtiene a partir de la progestero-
na por hidroxilación en C-17, C-21 y C-11 (Fig. 11.2). Las en-
zimas que catalizan estas reacciones son muy específicas. La hi-
droxilación en C-21 de la progesterona inicia la síntesis de al-
dosterona mientras que la hidroxilación en C-17 inicia la
síntesis de andrógenos (Fig. 11.3).
Figura 11.1.– Síntesis de progesterona y de los corticoides.
La cadena lateral formada por C-20 y C-21 se escinde para

proporcionar androstendiona, y la testosterona se obtiene por
reducción del grupo 17-ceto de la androstendiona. Los estróge-
nos se obtienen a partir de los andrógenos por aromatización
del anillo A y pérdida del grupo metilo C-19.
En la eliminación de Los productos terminales del metabolismo de las hormonas
las hormonas esteroi- esteroideas pueden determinarse en orina y constituyen indica-
deas intervienen los
ácidos biliares. dores importantes del nivel hormonal.
La inactivación y eliminación de estas hormonas requiere
de su solubilidad en hígado y riñón, donde son conjugadas con
ácido glucurónico o sulfatos para su excreción final. Los pro-
ductos terminales difieren según la hormona de que se trate.
En algunos casos existen varios metabolitos terminales proce-
dentes de una misma hormona. Su determinación analítica es
importante en clínica.

METABOLISMO DE LOS DERIVADOS DEL COLESTEROL 139
Figura 11.2.– Síntesis de progesterona y corticoides.
SÍNTESIS DE ÁCIDOS BILIARES
Con diferencia, el destino más importante del colesterol no

membranoso es la formación de ácidos biliares (Fig. 11.4). Es-
tos se obtienen a partir del colesterol por escisión de la cadena
lateral. Como en el caso de las hormonas esteroideas, las hi-
droxilaciónes juegan un papel fundamental. El proceso se lleva
a cabo en hígado y en una primera etapa el colesterol es con-
vertido en 7-hidroxicolesterol por acción de una hidroxilasa es-
pecífica sobre la que actúan los productos terminales que regu-
lan la síntesis por inhibición. A partir de este compuesto, por Los ácidos biliares se
sucesivas hidroxilaciones, se obtiene colil-CoA, intermedio de almacenan en la vesí-
cula biliar, donde se
los démas ácidos biliares. El grupo carboxílico terminal de la encuentran en forma
cadena lateral activado, reacciona con el grupo amino de la gli- de sales.

Figura 11.3.– Síntesis de andrógenos y estrógenos.
Figura 11.4.– Síntesis de ácidos biliares.

cina o de la taurina para formar ácido glicocólico o taurocólico

respectivamente.
Los ácidos biliares se almacenan en la vesícula biliar for-
mando parte de la bilis; dado el pH alcalino de la misma, se
encuentran en forma de sales biliares. Otros componentes de la
bilis son la bilirrubina, producto final de la destrucción de los
hematies, y el exceso de colesterol sintetizado en el hígado, que
utilizan este medio de transporte para su eliminación. Lo mis-
mo ocurre con otra serie de productos de desecho procedentes
de la sangre. Pero, además, la bilis participa en la digestión y
absorción de las grasas por su contenido en sales biliares que
facilitan el transporte de los lípidos en el intestino y los emulsio-
nan facilitando la acción de las lipasas.
La bilis se sintetiza de forma continua y se almacena en la
vesícula biliar hasta su secreción al duodeno por estimulación
hormonal cuando se requiere su acción por la presencia de
grasas en el quimo.
CIRCULACIÓN ENTEROHEPÁTICA
DE LAS SALES BILIARES
El 90% aproximadamente de las sales biliares que llegan al Más del 90% de las
intestino delgado durante la digestión son recuperadas en el sales biliares vuelven
al hígado.
mismo, en parte por difusión y en parte por transporte activo.
Una vez absorbidas pasan a la sangre y vuelven por la vena
aorta al hígado, donde son captadas de nuevo por el hepatoci-
to para su almacenamiento en la vesícula biliar.
La recuperación de las sales biliares permite su reutiIiza-
ción al menos 18 veces antes de su eliminación definitiva por
las heces. Esta recirculación de las sales biliares desde el in-
testino al higado, recibe el nombre de circulación entero-
hepática y es el proceso más importante para la formación
de bilis.
SÍNTESIS DE VITAMINA D
La vitamina D se obtiene a partir del 7-dehidrocolesterol

por acción de la luz ultravioleta (Fig. 11.5). En el hígado es hi-
droxilada pasando a 25-hidroxicolecalciferol y posteriormente
en el riñón, bajo la acción de la parathormona (PTH), es con-
vertida en la forma biológicamente activa, la 1,25 dihidroxico-
lecalciferol, considerada una hormona esteroidea con funcio-
nes sinérgicas a la PTH de gran importancia en la homeostasis
de calcio y fosfato.

Figura 11.5.– Síntesis y conversiones químicas de la vitamina D.
RESUMEN
Además de formar parte de las membranas celulares, el

colesterol es el precursor de las hormonas esteroideas, vit.
D y ácidos biliares. Estos compuestos desempeñan funcio-
nes importantes en el organismo. Las hormonas esteroide-

as y la vit. D, que tras su hidroxilación hepática y renal se

convierte también en una hormona esteroidea, desem-
peñan funciones reguladoras de gran transcendencia para
el desarrollo normal del organismo, Esta es sin duda su
gran importancia, más que el destino metabólico del coles-
terol, que apenas supone una mínima proporción del mis-
mo. No ocurre lo mismo para los ácidos biliares, que sí re-
presentan una importante fuente de utilización metabólica
del colesterol y su destino final como forma de excreción.
Los ácidos biliares desempeñan, además, importantes fun-
ciones a través de su incorporación a la bilis, participando
en la digestión y absorción de los lípidos y autorregulando
la producción y secreción biliar a través de la circulación
enterohepática.
1. Colelitiasis biliar
En determinadas condiciones el colesterol de la bilis puede

precipitar formando cálculos. Una de las causas más frecuentes
es la secreción excesiva de colesterol en la bilis, determinada
en parte por el exceso de colesterol en la dieta, ya que las célu-
las hepáticas lo sintetizan como parte del metabolismo orgáni-
co de las grasas. Otras veces se trata de inflamación e infección
crónica del epitelio vesicular, que altera sus características per-
mitiendo una absorción excesiva de agua y sales biliares nece-
sarias para mantener disuelto el colesterol. El tratamiento far-
macológico se basa en la administración exógena de ácido
quenodesoxicólico, uno de los ácidos biliares naturales cuyo
efecto consiste en aumentar la formación de bilis y reducir la
concentración de colesterol, ayudando a su disolución y dismi-
nuyendo la formación de ácidos biliares por el hígado, lo que
reduce simultáneamente la secreción hepática de colesterol a la
bilis. Es importante la disminución de grasas en la dieta. En
muchas ocasiones el tratamiento debe ser quirúrgico.
2. Déficit de 21-hidroxilasa
La anomalía congénita más frecuente de la producción de

hormonas esteroideas es la deficiencia de la 21-hidroxilasa,
necesaria para la síntesis de glucocorticoides y mineralcorticoi-
des. La disminución en la síntesis de estos esteroides aumenta

la secreción de ACTH hipofisaria al disminuir el freno que rea-

lizan habitualmente las hormonas periféricas por retrocontrol.
La consecuencia es un aumento en la síntesis de progesterona
que deriva hacia la síntesis de andrógenos, produciendo virili-
zación en la niña. En los niños se producen signos de madurez
sexual prematura y en ambos sexos aceleración del crecimien-
to y calcificación temprana de los nucleos de osificación con
tallas finales pequeñas. El tratamiento se basa en la adminis-
tración de glucocorticoides como terapia de sustitución, entre
cuyas acciones se produce la disminución de ACTH por inhi-
bición negativa.

TEMA 12 Lipoproteínas
Lipoproteínas. Receptores de lipoproteínas. Meta-

bolismo de las lipoproteínas. Regulación de los
depósitos de colesterol en el organismo.
Las lipoproteínas están constituidas por proteínas y lípidos.

Se sintetizan en el hígado y su función principal es la de trans-
portar lípidos por la sangre. Las lipoproteínas se clasifican en
cinco tipos atendiendo a su densidad. Las células las recono-
cen mediante receptores específicos de membrana. Su metabo-
lismo es bastante complejo ya que sufren numerosas transfor-
maciones en los tejidos, incluida la sangre, y su eliminación o
reutilización depende del tipo de lipoproteína.
LIPOPROTEÍNAS
Representan la única forma reconocida de transporte de los La función principal

lípidos circulantes, desde su aislamiento e identificación por de las lipoproteínas
es la de transportar
Macheboeuf. lípidos.
Formación y funciones. Son proteínas conjugadas, con

una parte proteica o apoproteína y un grupo prostético de na-
turaleza lipídica. Se forman en el hígado mayoritariamente,
que es donde se sintetizan fundamentalmente el colesterol, los
fosfolípidos y los triglicéridos, a excepción de los quilomicro-
nes de origen intestinal que contienen los lípidos exógenos ob-
tenidos a través de la dieta mediante la digestión. Una de sus
principales funciones es el transporte de lípidos en sangre,
dado su caracter hidrófobo, que les impide circular de forma
libre. Las lipoproteínas de muy baja densidad transportan tri-
glicéridos sintetizados en el hígado fundamentalmente, hasta
el tejido adiposo, mientras que las demás lipoproteínas inter-
vienen en el transporte de colesterol y fosfolípidos desde el hí-

gado a los tejidos periféricos o desde estos al hígado Las lipo-

proteínas se encuentran formadas por un núcleo esférico inte-
grado por los componentes más apolares, triglicéridos y coles-
terol esterificado, envueltos por una capa de fosfolípidos y co-
lesterol libre, de forma que las porciones más polares se
orientan hacia fuera, mientras que el núcleo hidrófobo es to-
talmente inaccesible a las enzimas plasmáticas y será necesario
que las lipoproteínas penetren en las células para que el coles-
terol y los triglicéridos puedan ser utilizados. Envolviendo este
complejo se sitúan las apoproteínas. Los lípidos y las proteínas
no están unidos covalentemente, sino que mantienen estable
su estructura gracias a interacciones hidrofóbicas entre las por-
ciones apolares de ambos, que de esta forma quedan protegi-
das del contacto con el agua, pero que también les permiten
intercambiar sus componentes entre sí y con las membranas
celulares. Estos intercambios son la base del metabolismo de
las lipoproteínas. Existen una gran variedad de apoproteínas
con diferentes funciones, además de vehiculizar los lípidos,
como servir de cofactores a enzimas plasmáticas que intervie-
nen en el metabolismo de las lipoproteínas, o contener señales
para las células diana de los tejidos que han de captarlos me-
Hay cinco tipos de li- diante receptores específicos. Se han aislado y caracterizado
poproteínas: Quilo- distintos tipos de apoproteínas formadas por polipéptidos mo-
micrones, VLDL,
LDL, IDL y HDL. nocatenarios sintetizadas y secretadas todas ellas en el hígado
y en el intestino.
Apo-A: I ,II y III
Apo-B: B-48 y B-100
Apo-C: I, II, III
Apo-D
Apo-E
Apo-F
Apo-G
En las lipoproteínas, varias apoproteínas primarias se aso-
cian para dar lugar a apoproteínas secundarias.
Tipos de lipoproteínas
La separación por ultracentrifugación nos permite diferen-

ciar las lipoproteínas en cinco tipos diferentes según la densi-
dad, que depende de la relación lípido/proteína. De menor a
mayor densidad son las siguientes:
1. Quilomicrones: Compuestos fundamentalmente por tri-
glicéridos. Contienen colesterol y fosfolípidos en pe-

LIPOPROTEÍNAS 147
queña proporción. Se originan tras la digestión y absor-

ción de las grasas.
2. Lipoproteínas de muy baja densidad (VLDL): Contienen
concentraciones elevadas de triglicéridos y moderadas
de colesterol y fosfolípidos. El origen de los glicéridos es
fundamentalmente endógeno, asegurando su transporte
desde el hígado hacia los tejidos periféricos.
3. Lipoproteínas de baja densidad (LDL): Son lipoproteínas
de baja densidad de las que se han extraído todos los tri-
glicéridos, dejando una concentración elevada de coles-
terol y fosfolípidos.
4. Lipoproteínas de densidad intermedia (IDL): Son lipo-
proteínas de densidad intermedia de las que se han ex-
traído gran parte de los triglicéridos, de forma que las
concentraciones de colesterol y fosfolípidos están au-
mentadas.
5. Lipoproteínas de alta densidad (HDL): Contienen una
alta proporción de proteínas y menor concentración de
colesterol y fosfolípidos. Depuran parcialmente el coles-
terol de los tejidos periféricos, transportándolo al hígado
para su eliminación.
Los quilomicrones y las VLDL son ricos en triglícéridos,
mientras que las LDL y IDL lo son en colesterol. Aunque las
distintas lipoproteínas difieren por la naturaleza y proporción
de sus componentes lipídico y proteico, se establece entre ellas
un continuo intercambio que es la base del transporte y meta-
bolismo lipídico.
RECEPTORES DE LIPOPROTEÍNAS
Se encuentran en la membrana de las células implicadas en Los receptores de

el metabolismo de las lipoproteínas. Su presencia permite iden- membrana de las li-
poproteínas son de
tificar de forma específica la porción proteica de las lipoproteí- tres clases E/B-100,
nas y desencadenar los mecanismos que en cada caso permi- E y de HDL.
tan la incorporación de los lípidos a la célula diana.
Receptores E/B-100. Se encuentran en la membrana del he-
patocito y de la mayoría de los tejidos periféricos. Su
mecanismo de acción es el mejor conocido. Reconocen
las apoproteínas B-100 y E. La unión apoproteína-re-
ceptor provoca la invaginación de la membrana plasmá-
tica y la incorporación del complejo recién formado al
interior celular por endocitosis. Ya en el citoplasma se
produce la fusión de la vesícula neoformada con un liso-
soma para la degradación de su contenido. Los produc-

tos resultantes pasan al citoplasma, donde el colesterol,

cuando es elevado, ejerce un mecanismo de autocon-
trol, disminuyendo la síntesis y expresión de los recepto-
res en la membrana, con lo que se impide la entrada de
nuevas lipoproteínas cargadas de colesterol. En el hepa-
tocito los niveles intracelulares elevados de colesterol
provocan además la inhibición del sistema enzimático
que cataliza la síntesis endógena de nuevo colesterol.
Receptores E. Se encuentran exclusivamente en el hígado y
reconocen las apo-E de las VLDL e IDL y remanentes de
los quilomicrones. Estos receptores no están sometidos a
ningún tipo de regulación, por lo que el hepatocito pue-
de captar las lipoproteínas mencionadas sin limitación
alguna.
Receptores para HDL. Son los receptores menos conocidos.
Se encuentran en el hígado, macrófagos, fibroblastos y
músculo liso de la pared arterial. Al parecer, reconocen
las apoproteínas A-I de las HDL.
Receptores scavenger. Denominados también basureros
por recoger las partículas alteradas, como p.e. las LDL
oxidadas que permanecen un tiempo excesivo en la cir-
culación. Se les relaciona con el reconocimiento y cap-
tación de radicales libres. No reconocen lipoproteínas
funcionantes y no son regulables por los niveles de co-
lesterol. Se localizan fundamentalmente en los macrófa-
gos tisulares.
METABOLISMO DE LAS LIPOPROTEÍNAS
Los quilomicrones Las lipoproteínas sufren numerosos cambios y transforma-

son las lipoproteínas ciones tanto en la circulación, como en los tejidos.
de mayor tamaño; el
90% son triglicéridos
que proceden de la Metabolismo de los quilomicrones. Se trata de los
dieta. complejos lipoproteicos circulantes de mayor tamaño. Trans-
portan lípidos de la dieta desde el intestino. Alrededor del 90%
de su contenido son triglicéridos y el resto se trata de fosfolípi-
dos y algo de colesterol libre y esterificado, con proteínas de
tipo apo-B. Su origen es exclusivamente intestinal. Después de
la ingesta de grasas en la dieta, se produce su hidrólisis a nivel
intestinal con el concurso de las lipasas pacreáticas. Las sales
biliares contribuyen a la digestión emulsionando las grasas y fa-
cilitando la acción de las enzimas. Concluida la hidrólisis se
produce la absorción en forma de colesterol libre, ácidos grasos
libres, glicerol y monoglicéridos, que pasan al interior del ente-
rocito, donde se produce nuevamente su esterificación para

LIPOPROTEÍNAS 149
formar triglicéridos y ésteres de colesterol. En el retículo en-

doplásmico de éstas células, son envueltos en apoproteínas A y
B para hacerlos hidrosolubles. El paso a través de la membra-
na basal del enterocito requiere de las apoproteínas, sin las
cuales se acumularían en su interior. Desde aquí, en forma de
quilomicrones nacientes, son recogidos por el sistema linfático
y conducidos a través del conducto torácico hasta la vena cava
superior sin sufrir el filtro hepático. Una vez en la circulación se
produce la interacción con las HDL realizándose un intercam-
bio entre ambas. Las HDL les ceden colesterol esterificado y las
apo-C-III, C-II y E, de gran importancia para su degradación,
mientras que los quilomicrones ceden a éstas triglicéridos, fos-
folípidos y colesterol libre. Los triglicéridos de los quilomicrones
proceden exclusivamente de la dieta. A nivel capilar, funda-
mentalmente en el tejido adiposo, músculo, glándula mamaria
y pulmón se produce la hidrólisis de los triglicéridos, ya que de
esta forma no pueden pasar al interior de ninguna célula. La
enzima responsable es la lipoproteína lipasa extrahepática, si-
tuada en la cara externa del endotelio vascular y activada por
la apo-C-Il. Esta enzima se libera por la heparina activada por
la insulina. Los ácidos grasos liberados son captados por las cé-
lulas de los tejidos circundantes, mientras que el glicerol es
transportado por la sangre hasta el hígado para su metabolis-
mo. La vida media de los quilomicrones en la circulación es
muy corta, menos de una hora en el hombre, aunque desde la
ingesta de grasas en la dieta hasta su presentación en el plasma
pueden pasar varias horas. Como producto final del metabolis-
mo de los quilomicrones, se forman unas partículas denomina-
das remanentes de quilomicrones, que apenas contienen tri-
glicéridos y sí una proporción elevada de colesterol esterificado
y apo-E que recibieron de las HDL. Las apo C-II y C-III son
ahora devueltas a las HDL de origen.
Los remanentes de los quilomicrones son captados por el En el hepatocito los
hígado gracias a la presencia de apo-E, a través de receptores remanentes de los
quilomicrones se hi-
específicos para dicha apo-proteína. Ya en el interior del hepa- drolizan y liberan co-
tocito se produce la hidrólisis para liberar el colesterol y los áci- lesterol y ácidos gra-
dos grasos, que serán utilizados en la síntesis de nuevas lipo- sos.
proteínas y de ácidos biliares. Cuando los remanentes de los
quilomicrones exceden su concentración fisiológica en plasma,
o permanecen más tiempo del acostumbrado, son fagocitados
por macrófagos del sistema reticuloendotelial.
Metabolismo de las VLDL. Además de la dieta, otra

fuente importante de triglicéridos en el hombre es la síntesis
hepática por esterificación de ácidos grasos con glicerol. Otros
tejidos además del hígado pueden sintetizar triglicéridos, pero

Los ácidos grasos del no contribuyen a su liberación a la sangre, a excepción de los

hígado proceden de enterocitos. Los ácidos grasos que utiliza el hígado son captados
la sangre y de la sín-
tesis a partir de ace- de la circulación, o bien proceden de los remanentes de los qui-
til-CoA por la acil- lomicrones. En su defecto son sintetizados “de novo” a partir de
CoA sintasa. acetil-CoA y liberados a la circulación en forma de VLDL, cuyas
principales apoproteínas acompañantes son la apo-B-100, apo-
E y apo-C-II. Estos complejos lipoproteicos son de menor ta-
maño que los quilomicrones y contienen también menor pro-
porción de triglicéridos (60%) colesterol y fosfolípidos. En la cir-
culación se produce la activación de la lipoproteína lipasa de
superficie de los capilares bajo la estimulación de la apo C-II,
que hidroliza los triglicéridos. El resultado es similar al descrito
para los quilomicrones. Tras la hidrólisis de los triglicéridos se
producen cambios en la configuración de las VLDL, que ceden
colesterol no esterificado, apoproteínas y fosfolípidos a las HDL,
recibiendo de ellas ésteres de colesterol. Las partículas residua-
les son más pequeñas, apenas contienen triglicéridos y son ricas
en ésteres de colesterol. Se denominan remanentes de VLDL y
lipoproteínas de densidad intermedia o IDL. Estos remanentes
son captados por el hígado a través de las apo-E y metaboliza-
dos. Las IDL son hidrolizadas por la lipasa hepática, enzima si-
milar a la lipoproteína lipasa extrahepática, pero localizada en el
endotelio de los capilares del hígado. Tras la hidrólisis, las IDL
Las LDL son las prin- son convertidas finalmente en LDL, cuyo contenido básico está
cipales lipoproteínas integrado por colesterol esterificado y escasa proporción de co-
transportadoras de
colesterol en la san- lesterol libre y de triglicéridos. Como apoproteínas para su reco-
gre. nocimiento, sólo contienen apo B-100 (Fig. 12.1).
Figura 12.1.– Formación de quilomicrones en la mucosa intestinal.

LIPOPROTEÍNAS 151
Metabolismo de las LDL. Su formación resulta de la de-

gradación intravascular de las VLDL. Son los principales trans-
portadores de colesterol en la sangre. Su función consiste en re-
gular la síntesis de colesterol “de novo” en los tejidos periféricos.
La mayor parte de las LDL van a ser captadas por el hígado a
través de receptores específicos en la membrana del hepatocito.
El receptor de LDL reconoce la apo-B-100 de su estructura inte- El aumento de coles-
raccionando entre sí para formar el complejo lipoproteína-re- terol inhibe su sínte-
sis porque actúa a ni-
ceptor que a continuación se internaliza en la membrana tras la vel de la hidroximetil-
formación de una vesícula que pasa al citoplasma celular por glutaril-CoA y del re-
endocitosis. Las vesículas que contienen LDL se fusionan en el ceptor para las LDL.
interior celular con lisosomas para su degradación. La porción
proteica produce aminoácidos libres. Los ésteres de colesterol
son hidrolizados para producir colesterol libre y el receptor suele
reciclarse volviendo a la superficie celular, para repetir el trans-
porte de nuevas moléculas. El colesterol no esterificado es utili-
zado para la renovación de la membrana, o reesterificado y al-
macenado en la célula. Estos ésteres contienen ácidos grasos
monoinsaturados, a diferencia de los ésteres de colesterol en las
LDL, que son poliinsaturados. Por su parte, la síntesis y expre-
sión del receptor para la LDL están sometidos a un mecanismo
de retroalimentación según el cual, cuando aumenta el coleste-
rol dentro de la célula, se produce la inhibición de la transcrip-
ción y traducción de la información necesaria para la síntesis del
receptor y en consecuencia se bloquea la incorporación de más
colesterol desde las LDL plasmáticas.
El aumento de colesterol en la célula inhibe la síntesis y ex-
presión del receptor para LDL, con lo que se evita la captación
de más colesterol circulante. También se inhibe la síntesis de la
reductasa de hidroximetilglutaril-CoA, enzima clave en la for-
mación de colesterol. Por otra parte se estimula la actividad de
la enzima acil-colesterol-acil-transferasa, encargada de reeste-
riflcar el colesterol dentro del hepatocito. El resultado de estas
acciones es disminuir la síntesis y aumentar el colesterol esterifi-
cado, que es utilizado por el hígado para la formación de áci-
dos biliares y nuevas lipoproteínas (Fig. 12.2). La interacción
de las LDL en los tejidos periféricos es similar a lo descrito para
el hepatocito, ya que está mediada por el mismo tipo de recep-
tores, regulables por los niveles de colesterol intracelular. Esta
posibilidad de captación tisular nos da idea de su capacidad
aterogénica en potencia, ya que pueden ceder en determina-
das circunstancias una gran cantidad de lípidos en la pared
vascular. Una pequeña proporción de las LDL es captada por
las suprarrenales y las gónadas que también disponen de re-
ceptores específicos y utilizada en la síntesis de hormonas este-
roideas. El resto de las LDL es aclarado en otros tejidos perifé-

Figura 12.2.– Estructura de una lipoproteína de baja densidad (LDL).
ricos por mecanismos independientes de receptor. Se trata de

células endoteliales y macrófagos que no reconocen las LDL
normales, pero sí cuando estas se alteran por oxidación.
Las LDL que perma- Metabolismo de las HDL. Se trata de lipoproteínas de

necen en sangre pier- alta densidad que contienen fundamentalmente fosfolípidos y
den triglicéridos y
aumentan el coleste- poco colesterol, como si se tratase de una fracción de la mem-
rol. brana plasmática. Su función consiste en captar el colesterol li-
berado en el plasma por las células que mueren y por el recam-
bio de las membranas. Se generan tanto a nivel intestinal como
hepático en forma de HDL nacientes. La forma intestinal con-
tiene apo-A y la hepática apo-E.
Su función se relaciona con un efecto protector frente a la
enfermedad coronaria, de tal forma que el riesgo es menor con
niveles elevados de HDL. Las HDL nacientes del intestino del-
gado se denominan HDL3, tienen forma esférica y están forma-
das por fosfolípidos, apo A-I, A-II y A-IV, encargadas de captar
y esterificar el colesterol libre de los tejidos periféricos mediante
la acción de la enzima lecitín-colesterol-acil-transferasa (LCAT)
presente en el plasma, que se encuentra unida a las HDL. El
colesterol esterificado es almacenado en el interior de las apo-
proteínas dando lugar a una forma madura o HDL2. Por otra
parte, las HDL intercambian colesterol esterificado y apoproteí-
nas por triglicéridos, colesterol libre y fosfolípidos que les ceden
las lipoproteínas ricas en triglicéridos, es decir, los quilomicro-

LIPOPROTEÍNAS 153
nes, VLDL, IDL y remanentes, mediante la acción de una pro-

teína de transferencia de ésteres de colesterol (CETP). Las HDL
enriquecidas con triglicéridos llegan hasta el hígado, en donde Las HDL incorporan
van a ser degradadas por la lipasa hepática que las convierte la mayor parte del co-
lesterol que transpor-
en HDL3, y finalmente son catabolizadas. Cuando el contenido tan al hígado, redu-
en triglicéridos de las HDL es bajo, se extraen los fosfolípidos y ciendo el riesgo ate-
se liberan de nuevo a la circulación para seguir desempeñando rogénico.
su función.
REGULACIÓN DE LOS DEPÓSITOS DE

COLESTEROL EN EL ORGANISMO
El factor más importante para el desarrollo de aterosclerosis

es una concentración elevada de colesterol en plasma en forma
de LDL. La concentración de éstas lipoproteínas aumenta en
relación con la ingesta de grasas saturadas y, en menor propor-
ción, con la ingesta de grasas insaturadas.
Las LDL, junto con las IDL y VLDL, transportan colesterol
a los lugares de depósito en los tejidos, actuando como un sis-
tema integrado. De ellas sólo las VLDL se originan en el hígado
y contienen básicamente triglicéridos, pero a medida que circu-
lan en plasma los liberan en los tejidos periféricos (especial-
mente en el tejido adiposo) para su almacenamiento o consu-
mo energético, bajo la acción de la lipoproteína lipasa. Tras la
liberación de los triglicéridos su densidad aumenta, trans-
formándose en IDL. Al menos la mitad de las lDL son captadas
por el hígado (receptores apo-B-100). Las que permanecen en
sangre continúan perdiendo triglicéridos, aumentando su den-
sidad y la concentración de colesterol y fosfolípidos para con-
vertirse en LDL (Fig. 12.3).
La composición mayoritaria de las LDL es colesterol esterifi-
cado, fosfolípidos y colesterol libre; además contienen apo-B-
100 para su reconocimiento por receptores presentes en las
membranas de la mayoría de las células del organismo. La cap-
tación y el metabolismo de las LDL en los tejidos no sólo pro-
duce su degradación, sino también el aporte de colesterol ne-
cesario para la síntesis y renovación de la membrana celular.
Sin embargo, cuando la velocidad de producción de colesterol
libre por este proceso supera la velocidad de utilización, su
concentración en el citoplasma aumenta. Se produce en estos
casos la esterificación y almacenamiento para otros destinos.
Además, dentro de la célula existen dos mecanismos regulado-
res para evitar la síntesis de nuevo colesterol y la entrada de
más LDL, que actúan en estas situaciones conforme ya se ha
descrito.

Figura 12.3.– Esquema de la configuración de las HDL.
Por su parte el hígado capta LDL, como cualquier otra célu-

la del organismo, además de las IDL, con lo que se elevan los
niveles de colesterol en el hepatocito. El exceso de coleslerol in-
tracelular inhibe el sistema enzimático para la síntesis de nuevo
colesterol. Éste es el mecanismo hepático que funciona cuando
a nivel periférico no se consume colesterol.
El papel de las HDL se conoce bastante menos. Su síntesis
ocurre en el hígado y en menor proporción en el intestino du-
rante la absorción intestinal de las grasas. Contienen apo-A-I y
II y no contienen apo-B, lo que las diferencia respecto a las
LDL. Son reconocidas por receptores distintos y el mecanismo
de acción también es diferente. Recogen colesterol y apoproteí-
nas de las lipoproteínas degradadas y de los tejidos, además de
intercambiar coleslerol esterificado con las VLDL y quilomicro-
nes durante su metabolismo. Las HDL incorporan la mayor
parte del colesterol, probablemente desde las membranas de
muchos tejidos y paredes arteriales, esterificándolo por la
LCAT. Este transporte inverso de colesterol desde los tejidos
hasta el hígado, al contrario del que realizan las LDL, le confie-
re su carácter de lipoproteína antiaterogénica. La relación
HDL/LDL es por tanto un indicador inportante de riesgo ate-
rogénico.

LIPOPROTEÍNAS 155
RESUMEN
Las lipoproteínas son complejos macromoleculares

constituidos por lípidos y proteínas que representan la
única forma de transporte de los lípidos circulantes. La
porción lipídica está integrada por fosfolípidos, coleste-
rol libre y esterificado, triglicéridos y ácidos grasos no es-
terificados. La parte proteica, denominada apoproteína,
está compuesta por cadenas peptídicas designadas con
las primeras letras del alfabeto en mayúsculas. Las lipo-
proteínas se diferencian entre sí por la naturaleza y pro-
porción de su contenido en lípidos y proteínas, que les
proporcionan distinta densidad y nos permiten clasificar-
las en:
Quilomicrones, de origen intestinal, ricos en triglicéri-
dos procedentes de la dieta.
VLDL, de origen hepático, ricas en glicéridos de origen
endógeno.
IDL y LDL son lipoproteínas ricas en colesterol proce-
dente de la degradación de las anteriores. Pueden
entrar en las células hepáticas y en los tejidos pe-
riféricos gracias a receptores específicos, lo que las
hace especialmente patógenas en caso de altera-
ción metabólica.
Los triglicéridos de los quilomicrones y de las VLDL
son catabolizados en los capilares de los tejidos por la li-
poproteínlipasa extrahepática para suministrar ácidos
grasos para su consumo o almacenamiento. Los quilo-
micrones remanentes son reciclados en otras lipoproteí-
nas o captados por el hígado. Las IDL y LDL resultantes
de la degradación periférica de las VLDL transportan
colesterol al hígado o a los tejidos que disponen de re-
ceptores para ellas. Los niveles de colesterol intracelula-
res regulan estos receptores, así como la síntesis hepáti-
ca de nuevo colesterol cuando los niveles intracelulares
son altos.
Las HDL se sintetizan a nivel hepático e intestinal. Su
función es captar colesterol de los tejidos, esterificarlo y
transportarlo hasta el hígado para su utilización o degra-
dación.
El metabolismo de las lipoproteínas se produce a base
de intercambios y transformaciones que aseguran el trans-
porte de los lípidos.

Deficiencia familiar de lipoproteína lipasa
Es una enfermedad de herencia autosómica recesiva (el gen

alterado está situado en el cromosoma 8) cuya prevalencia es
1/1.000.000. Los quilomicrones están elevados en sangre pe-
riférica.
Se inicia en la infancia presentando crisis de dolor abdomi-
nal recidivante (pancreatitis aguda). Asimismo se observa la
presencia de xantomas eruptivos, lipemia retinalis y hepatoes-
plenomeglia. El suero extraído es de aspecto pálido y cremoso
(suero lipémico), pero sin embargo no existe riesgo de ateros-
clerosis precoz.
El tratamiento consiste en una reducción drástica de las gra-
sas de la dieta (triglicéridos de cadena media) y aportar suple-
mentos de vitaminas liposolubles.
Hiperlipoproteinemia familiar tipo 3

o Disbetali-poproteinemia familiar
Enfermedad de herencia autosómica recesiva en la que el

paciente muestra xantomas palmares y tuberoeruptivos, así
como xantelasmas, arco corneal y ateroesclerosis precoz.
En estos individuos es pertinente descartar un hipotiroidis-
mo oculto y/o diabetes. En sangre periférica estarán elevados
lDL y partículas residuales de quilomicrones.
El tratamiento se fundamenta en la toma de Gemfibrozilo
pautado o Ácido nicotínico en personas que no respondan al
primero.
Hiperlipidemia familiar combinada

o Hiperlipidemia múltiple
Enfermedad de herencia autosómica dominante de preva-

lencia 1/100 que se constituye como la causa metabólica más
importante de ateroesclerosis prematura. El defecto bioquímico
primario es desconocido y determina la elevación de VLDL y
LDL. En este caso los xantomas y xantelasmas son menos fre-
cuentes que en otras hiperlipidemias.

Aspectos bioquímicos
TEMA 13 de la nutrición
Requerimientos proteicos de la dieta. Digestión de

las proteínas. Activación de las enzimas proteolíti-
cas. Absorción de péptidos y aminoácidos.
Para el crecimiento y desarrollo del cuerpo, así como para el

mantenimiento de la vida, el ser humano ha de ingerir nutrien-
tes, cuya digestión, absorción y metabolismo le permitan la ob-
tención de energía y le provean de los sillares de construcción
necesarios. Estos nutrientes son sustancias químicas que se en-
cuentran en los alimentos, y algunos de ellos son considerados
nutrientes esenciales, ya que el organismo no puede sintetizar-
los. Entre estos están algunos aminoácidos y ácidos grasos, así
como minerales y vitaminas, que han de ingerirse con la dieta
en cantidades adecuadas.
Los nutrientes se clasifican en dos grandes grupos: macro-
nutrientes y micronutrientes. Los macronutrientes se requieren
diariamente en grandes cantidades, y están constituidos por
macronutrientes orgánicos, que son proteínas, lípidos y glúci-
dos, así como por algunos minerales como el calcio. Los ma-
cronutrientes orgánicos son los compuestos que utiliza el orga-
nismo para la obtención de energía y la formación de tejidos.
Todos ellos son digeridos en el tracto gastrointestinal para ge-
nerar unidades básicas: aminoácidos, monosacáridos, ácidos
grasos y glicerol, que son absorbidos y utilizados para la biosín-
tesis de macromoléculas y la obtención de energía. El catabo-
lismo de monosacáridos y aminoácidos proporciona 4 kcal/g, y
el de ácidos grasos 9 kcal/g. Las necesidades energéticas de un
ser humano varían entre 1.000 y 4.000 kcal/día dependiendo
de su edad, sexo y actividad. Si la dieta proporciona más
energía que la que se consume, el exceso se almacena en for-
ma de grasas. Sin embargo, una dieta que no proporciona sufi-
ciente energía conduce a la pérdida de peso como consecuen-
cia de la movilización de las grasas y la destrucción de las pro-

teínas musculares. Por otra parte, los macronutrientes inorgáni-

cos son el calcio, fósforo, sódio, cloro, potasio y magnesio, así
como el agua. Todos ellos han de ingerirse diariamente en
grandes cantidades, es decir, de uno a dos gramos diarios de
minerales, y unos 2,5 litros de agua.
El grupo de micronutrientes está constituido por vitaminas y
oligoelementos, que han de ingerirse en pequeñas cantidades,
pero que son esenciales en el mantenimiento de la actividad
bioquímica, ya que participan en un gran número de reaccio-
nes catalizadas enzimáticamente, las cuales no se producirían
en su ausencia y por tanto no se podrían metabolizar los ma-
cronutrientes. Las vitaminas son imprescindibles, y pueden ser
de dos tipos: vitaminas hidrosolubles, que incluyen la vitamina
C y ocho del complejo vitamínico B; y las vitaminas liposolu-
bles: A, D, E y K. En cuanto a los oligoelementos esenciales, se
encuentran el hierro, zinc, cobre, manganeso, molibdeno, sele-
nio, yodo y flúor, que en su mayoría son imprescindibles para
que muchas enzimas sean activas.
Una correcta nutrición se basa en una dieta apropiada, que
aporte los nutrientes necesarios para que el ser humano man-
tenga su composición corporal y obtenga energía para desarro-
llar su actividad física. Una disminución en la ingestión o un
aporte excesivo de nutrientes conduce a la malnutrición, como
consecuencia de un desequilibrio entre las necesidades corpo-
rales y el consumo de nutrientes.
REQUERIMIENTOS PROTEICOS DE LA DIETA
Las proteínas son uno de los principales macronutrientes de

la dieta y, junto con los hidratos de carbono y las grasas princi-
palmente, constituyen una fuente de energía y de nutrientes
esenciales. Desde un punto de vista energético, las proteínas
proporcionan 4 kcal/g cuando son completamente oxidadas.
Si las fuentes energé- Las proteínas sólo se emplean como fuente energética cuando
ticas de un individuo faltan las grasas o los hidratos de carbono exógenos o endóge-
son suficientes, las
proteínas de la dieta nos; si estos son suficientes, las proteínas se utilizan para el
se utilizan para el mantenimiento, reposición o crecimiento de los tejidos, así
mantenimiento, repo- como para mantener un balance positivo de nitrógeno.
sición o crecimiento
de los tejidos. Algunos de los aminoácidos que constituyen las proteínas
de la dieta son esenciales para los seres humanos, concreta-
mente nueve aminoácidos no pueden ser sintetizados por el
hombre: Fenilalanina, Histidina, Isoleucina, Leucina, Lisina,
Metionina, Treonina, Triptófano y Valina. La Histidina puede
ser sintetizada por los adultos pero no por lactantes. Esta impo-
sibilidad hace que sea necesario ingerir proteínas. La cantidad

ASPECTOS BIOQUÍMICOS DE LA NUTRICIÓN 159
de proteínas que, desde un punto de vista dietético, se reco-

mienda ingerir varía con la edad; mientras que para los lactan-
tes se recomienda 2,2 g/kg, ya que comienzan su etapa de cre-
cimiento, para los adultos sólo es de 0,8 g/kg. Estas cantidades
lógicamente están directamente relacionadas con la cantidad
de aminoácidos esenciales que necesita un individuo en creci-
miento que ha de sintetizar una gran cantidad de proteínas
para sus tejidos, y un adulto que esencialmente sólo ha de
mantener sus tejidos. El Food and Nutrition Board (FNB) de la
National Academy of Sciences/National Research Council de
Estados Unidos de América ha estimado que la cantidad total
de aminoácidos esenciales necesaria para un lactante es de
unos 715 mg /kg diarios, mientras que la de un adulto es de
unos 86 mg /kg diarios (Tabla 13.1). En este sentido, no todas
las proteínas que se ingieren tienen el mismo valor biológico, lo
que está relacionado con su coincidencia en aminoácidos con
los tejidos humanos; así una coincidencia total (100%) es la de
la ovoalbúmina, mientras que esta similitud es menor para las
proteínas de la leche o la carne (90%), disminuyendo notable-
mente en el caso de cereales y verduras (40%).
Tabla 13.1.– Cantidad de aminoácidos esenciales (mg/kg peso corporal/día)

en función de la edad.
Lactante Niño
Adulto
(4-6 meses) (10-12 años) Para el ser humano
Phe y Tyr 120 24 14 hay nueve aminoáci-
dos esenciales que ha
His 020 – – de ingerir con la die-
ta: Phe, His, Ile, Leu,
Ile 088 28 10 Lys, Met, Tre, Trp y
Leu 150 44 14 Val.
Lys 099 49 12
Met y Cys 072 24 13
Tre 074 30 07
Trp 019 04 03
Val 093 28 13
Food and Nutrition Board, National Academy of Sciences/National Resear-
ch Council 1989.
La cantidad diaria de proteínas dietéticamente recomenda-

da que ha de ingerirse varía con la edad, el sexo, la estatura,
peso corporal y actividad metabólica y física de los individuos;
según el FNB en su informe de 1989, los lactantes necesitan
13-14 g, los niños 16-28 g, los hombres 45-63 g y las mujeres
46-50 g (Tabla 13.2).

Tabla 13.2.– Cantidades dietéticas recomendadas de proteínas (g/día)

en función de la edad y el sexo.
Edad Peso Proteínas

(años) (kg) (g/día)
0,0-0,5 6 13
Lactantes
0,5-1,0 9 14
0,1-3,0 13 16
Niños 0,4-6,0 20 24
0,7-10, 28 28
11-14 45 45
15-18 66 59
Hombres 19-24 72 58
25-50 79 63
> 51 77 63
11-14 46 46
15-18 55 44
Mujeres 19-24 58 46
25-50 63 50
> 50 65 50
Food and Nutrition Board, National Academy of Sciences/National Resear-
ch Council 1989.
Si se consumen más Si se consumen más proteínas de las necesarias, el exceso

proteínas de las nece- de proteínas se emplea como fuente de energía, convirtiéndose
sarias, el exceso de
proteínas se emplea los aminoácidos en glucosa o ácidos grasos y cetoácidos, que
como fuente de ener- finalmente generan triacilgliceroles en el tejido adiposo si el or-
gía, convirtiéndose ganismo tiene suficiente grasa y glúcidos para cubrir sus necesi-
los aminoácidos en
glucosa o ácidos gra- dades energéticas. De esta forma, un exceso de proteínas pue-
sos y cetoácidos de transformarse en un incremento del tejido adiposo.
En una situación de ayuno, las proteínas corporales de al-
macenamiento se degradan, y sus aminoácidos se emplean
para la producción de glucosa, la síntesis de compuestos nitro-
genados no proteicos y para la síntesis de proteínas secretoras,
como las enzimas digestivas o las hormonas peptídicas, así
como proteínas plasmáticas esenciales, incluyendo las de la de-
fensa inmunitaria.
Aunque el estado nutricional de un individuo sea el adecua-
do, parte de las proteínas de algunos tejidos experimentan un
recambio proteico normal, es decir, son degradadas y los ami-
noácidos se emplean, entre otros destinos, para la nueva sínte-
sis de proteínas.
DIGESTIÓN DE LAS PROTEÍNAS.

ACTIVACIÓN DE ENZIMAS PROTEOLÍTICAS
Las proteínas de la dieta no pueden ser absorbidas, por ello

han de ser hidrolizadas hasta aminoácidos libres y pequeños

péptidos (di y tripéptidos), los cuales pueden ser absorbidos en

el intestino y, de esta forma, pasar a la sangre. En el proceso
digestivo participan diferentes peptidasas, algunas de las cuales
actúan como endopeptidasas, hidrolizando enlaces peptídicos Las proteínas de la
internos y generando fragmentos peptídicos grandes, y otras de dieta no pueden ser
absorbidas y por ello
estas enzimas como exopeptidasas, hidrolizando los péptidos han de ser digeridas
desde su extremo carboxiterminal (carboxipeptidasas) o desde hasta aminoácidos li-
el amino-terminal (aminopeptidasas). La gran mayoría de estas bres y pequeños pép-
tidos (di y tripépti-
enzimas se producen como zimógenos, y han de ser activadas dos), los cuales pue-
hidrolíticamente antes de ejercer su acción. den ser absorbidos en
el intestino y, de esta
La digestión de las proteínas comienza en el estómago, forma, pasar a la san-
donde el jugo gástrico origina un pH inferior a 2 debido a la gre.
presencia de HCl. El HCl desnaturaliza la proteínas, desestabili-
zando su estructura terciaria y haciéndolas, de esta forma, más
accesibles a los ataques enzimáticos. La pepsina A es la princi-
pal proteasa del estómago, es activa a pH ácido y se inactiva a
pH neutro. Es una endopeptidasa que hidroliza los enlaces
peptídicos en los que el grupo amino es aportado por Phe, Tyr
o Leu. Esta enzima es una aspartato proteasa que contiene dos
residuos de aspartato en su centro catalítico, los grupos car-
boxílicos de ambos son decisivos en el mecanismo catalítico.
La pepsina A se produce en el estómago en forma de zimóge-
no, el pepsinógeno, que tiene un péptido adicional de 44 resi-
duos en el extremo amino-terminal, que se elimina espontáne-
amente a pH ácido por hidrólisis del enlace entre Leu e Ile, ge-
nerándose pepsina; la pepsina a su vez puede activar otras
moléculas de pepsinógeno por autocatálisis.
El proceso digestivo continúa con el paso del contenido del
estómago (quimo) al duodeno, donde se vierten la secreción
pancreática y la biliar. Ambas tienen pH alcalino (7,1-7,3 la bi-
lis y 7,5-8 la secreción pancreática), lo cual modifica el pH del Las enzimas digesti-
quimo y favorece la acción de las enzimas de la secreción pan- vas se sintetizan en
forma de precursores
creática. En esta secreción hay numerosas enzimas, algunas de inactivos o zimóge-
las cuales actúan sobre proteínas y polipéptidos: tripsina, qui- nos, que se activan
motripsina, elastasa y carboxipeptidasas A y B. Las enzimas y por hidrólisis de enla-
ces peptídicos.
zimógenos se sintetizan en las células acinares del páncreas y se
almacenan en el interior de gránulos unidos a membranas, los
cuales se acumulan en el ápice de la célula acinar. El contenido
de los gránulos se libera en el conducto colédoco que lleva al
duodeno como respuesta a una señal hormonal o nerviosa.
Tripsina, quimotripsina y elastasa son endopeptidasas
que se secretan como zimógenos, pertenecen a la familia de las
serina proteasas, esto es, enzimas que tienen en el centro activo
un residuo de serina activado que toma parte en la catálisis, hi-
drolizando enlaces peptídicos. La activación del tripsinógeno
genera tripsina (Fig. 13.1), y está catalizada por la enteropep-

Figura 13.1.– Activación del tripsinógeno por la enteropeptidasa

en el duodeno.
tidasa (o enteroquinasa), producida por las células epiteliales

del duodeno, que hidroliza un único enlace peptídico Leu-Ile
del tripsinógeno cuando éste entra en el duodeno procedente
del páncreas, liberando un hexapéptido amino-terminal y
transformándolo en tripsina. La tripsina activa a otras molécu-
las de tripsinógeno, así como a otros zimógenos de la secreción
pancreática: quimotripsinógeno, proelastasa y procarboxi-
peptidasa; generándose de esta forma quimotripsina, elasta-
sa y carboxipeptidasa.
Tripsina, quimotripsi- La activación del quimotripsinógeno (Fig. 13.2), proteína
na y elastasa hidroli- formada por una única cadena polipeptídica de 245 residuos
zan enlaces peptídi-
cos en el lado carbo- de aminoácidos, se produce por hidrólisis del enlace Arg15-
xilo de residuos de Ile16 por la tripsina, formándose p-quimotripsina, enzima ac-
aminoácidos específi- tiva que actúa sobre otras moléculas de S-quimotripsina libe-
cos.
rando dos dipéptidos (14-15 y 147-148) y generando la forma
estable de la enzima, denominada a-quimotripsina, constitui-
da por tres cadenas peptídicas unidas entre ellas por dos puen-
tes disulfuro intercatenarios.
Figura 13.2.– Activación del quimotripsinógeno por la tripsina en

el intestino delgado.
La tripsina hidroliza enlaces peptídicos de aminoácidos

básicos (Arg, Lys), la quimotripsina hidroliza aquellos en los

que participan aminoácidos sin carga (Tyr, Trp, Phe, Met, Leu)
y la elastasa hidroliza los enlaces en lo que intervienen ami-
noácidos pequeños (Gly, Ala, Ser). Estas enzimas actúan sobre
las proteínas y polipéptidos liberados del estómago al intestino
y generan polipéptidos y péptidos de menor tamaño. Por su
parte, las carboxipeptidasas A y B son exopeptidasas que
actúan sobre el extremo carboxi-terminal de los péptidos gene-
rados por las endopeptidasas pancreáticas, liberando aminoá-
cidos simples. Se trata de metalo proteasas, concretamente de
zinc. El resultado final de la acción de estas enzimas es la for-
mación de aminoácidos libres y péptidos pequeños de 2-8 re-
siduos.
Puesto que el proceso de activación de zimógenos es irre-
versible, la regulación de la actividad enzimática se realiza me-
diante inhibidores específicos. El inhibidor de tripsina, que se
encuentra en la secreción pancreática, es una proteína pe-
queña de 6 kDa, que se une fuertemente al centro activo de la
tripsina, dada su analogía con el sustrato, fomándose un com-
plejo muy estable.
El proceso digestivo se completa con las enzimas presentes El proceso digestivo
en las secreciones intestinales (Fig. 13.3), producidas por las se completa con las
aminopeptidasas de
glándulas de Brunner y de Lieberkühn. Estas enzimas son ami- las secreciones intes-
nopeptidasas, exopeptidasas que hidrolizan los enlaces peptí- tinales
dicos próximos al extremo amino-terminal de los oligopéptidos;
entre ellas están la aminopeptidasa A, que hidroliza oligopép-
tidos con residuo amino-terminal ácido, y aminopeptidasa N
que actúa cuando el citado residuo es neutro. También existen
Figura 13.3.– Etapas de la digestión de las proteínas de la dieta.

dipeptidasas de diversas especificidades; algunas de estas en-

zimas se encuentran en el citoplasma de las células del epitelio
intestinal, donde pueden pasar los dipéptidos vía sistemas de
transporte específicos, y es en el citoplasma donde son hidroli-
zados hasta aminoácidos libres.
ABSORCIÓN DE PÉPTIDOS Y AMINOÁCIDOS
Las proteínas de la dieta, a la vista de lo expuesto, se trans-

forman finalmente en aminoácidos libres y algunos dipéptidos
en el intestino delgado, donde son absorbidos, pasando al sis-
tema portal hepático que conduce al hígado.
El transporte de L- El transporte de L-aminoácidos (Fig. 13.4), a través de la
aminoácidos a través membrana luminal de las células en cepillo del intestino delga-
de la membrana lumi-
nal de las células en do, es un transporte facilitado por un transportador, que se
cepillo del intestino produce a favor de gradiente de concentración, y en muchos de
delgado es un trans- los casos es dependiente de Na+, con un mecanismo semejan-
porte facilitado por
un transportador. te al de transporte de glucosa, esto es, se genera un gradiente
electroquímico de Na, que es mantenido por la Na/K ATPasa
con hidrólisis de ATP. Se han descubierto distintos tipos de
transportadores específicos para L-aminoácidos y dipéptidos:
a) para aminoácidos neutros con cadenas laterales polares
o cortas (Ala, Ser, Thr);
Figura 13.4.– Transporte de aminoácidos y dipéptidos a través del epitelio intestinal.

b) para aminoácidos neutros con cadenas laterales aromá-

ticas o hidrófobas (Phe, Tyr, Met, Ile, Leu, Val);
c) para iminoácidos (Pro, Hyp);
d) para E-aminoácidos (E-Ala, taurina);
e) para aminoácidos básicos y cistina (Arg, Lys, Cys-Cys);
f) para aminoácidos ácidos (Asp, Glu);
g) para dipéptidos.
Los dipéptidos neutros son cotransportados con un ión H a Una vez en el interior
través de la membrana luminal, y ya en el interior celular hi- citoplasmático, los
aminoácidos son
drolizados por dipeptidasas. Una vez en el interior citoplasmáti- transportados fuera
co, los aminoácidos son transportados fuera de la célula intesti- de la célula intestinal
nal a través de la membrana contraluminal, mediante trans- a través de la mem-
brana contraluminal,
porte facilitado por transportador, que en muchos casos es mediante un trans-
independiente de Na+. De esta forma los aminoácidos se in- porte facilitado por
corporan a la sangre por la vena porta. transportador.
RESUMEN
Uno de los principales macronutrientes de la dieta son

las proteínas, que constituyen una fuente tanto de energía,
proporcionando 4 kcal/g cuando se oxidan completamen-
te, como de nutrientes esenciales. En este sentido, las pro-
teínas de la dieta aportan los nueve aminoácidos esencia-
les para el hombre: Phe, His, Ile, Leu, Lys, Met, Tre, Trp y
Val. La cantidad de proteínas que, desde un punto de vis-
ta dietético, se recomienda ingerir varían con la edad, ya
que se relaciona con la cantidad de aminoácidos esencia-
les que necesita un individuo para sintetizar las proteínas
para sus tejidos. Si se consumen más proteínas de las ne-
cesarias, el exceso se transforma en glucosa o ácidos gra-
sos y cetoácidos, que finalmente pueden producir triacilgli-
ceroles. En situación de ayuno, algunas proteínas se de-
gradan y sus aminoácidos se emplean para producir
compuestos esenciales para el organismo como glucosa,
algunas enzimas y hormonas.
Las proteínas de la dieta han de ser digeridas hasta
aminoácidos y pequeños péptidos, que pueden ser absor-
bidos en el intestino, y de esta forma pasar a la sangre. En
el proceso digestivo participan diferentes peptidasas, la
gran mayoría de las cuales se producen como zimógenos.
La digestión comienza en el estómago por acción del
carácter ácido del jugo gástrico y de la pepsina A, que se
produce en el estómago en forma de zimógeno, el pep-

sinógeno. El proceso continúa en el duodeno, donde se

vierten la secreción pancreática y la biliar, que alcalinizan
el pH del quimo para favorecer la acción de las enzimas
de la secreción pancreática, de ellas tripsina, quimotripsi-
na, elastasa y carboxipeptidasas A y B hidrolizan proteínas
y polipéptidos. Todas estas enzimas se secretan como
zimógenos; la activación del tripsinógeno por la entero-
peptidasa duodenal genera tripsina, la cual activa a otras
moléculas de tripsinógeno y a los otros zimógenos de la
secreción pancreática: quimotripsinógeno, proelastasa y
procarboxipeptidasa. El resultado de la acción de las enzi-
mas de la secreción pancreática es la formación de ami-
noácidos libres y péptidos pequeños de 2-8 residuos. La
actividad de las enzimas pancreáticas está regulada por in-
hibidores específicos. El proceso digestivo se completa con
las enzimas de las secreciones intestinales: aminopeptida-
sas y dipeptidasas; algunas dipeptidasas están en el cito-
plasma de las células del epitelio intestinal.
Por lo tanto, las proteínas de la dieta se transforman fi-
nalmente en aminoácidos libres y algunos dipéptidos en el
intestino delgado, donde son absorbidos, pasando al siste-
ma portal hepático que conduce al hígado. El transporte
de L-aminoácidos a través de la membrana luminal de las
células en cepillo del intestino delgado es un transporte fa-
cilitado por un transportador, en muchos casos, depen-
diente de Na; el gradiente electroquímico de Na necesa-
rio para el sistema se mantiene por acción de la Na/K
ATPasa con hidrólisis de ATP. Los dipéptidos neutros son
cotransportados con un protón, y en el interior celular son
hidrolizados por dipeptidasas. Ya en el interior citoplasmá-
tico, los aminoácidos son transportados fuera de la célula
intestinal a través de la membrana contraluminal mediante
transporte facilitado por transportador, generalmente, in-
dependiente de Na. Así los aminoácidos se incorporan a
la sangre de la vena porta.
Malnutrición proteicoenergética
La malnutrición proteicoenergética (MPE) o proteicocalóri-

ca se debe a una deficiencia no sólo de todos los macronu-
trientes, sino también de muchos micronutrientes. Existen va-

rios niveles de este síndrome, según sea la insuficiencia protei-

ca, desde la inanición a la alimentación insuficiente. Puede
producirse en personas de cualquier edad y procedencia, aun-
que los más afectados son los lactantes y niños de países en
vías de desarrollo. Existen tres formas clínicas de MPE:
a) la forma seca, deshidratada o marasmo;
b) la forma húmeda, edematosa o kwashiorkor; y
c) una forma combinada o kwashiorkor marásmico.
La forma clínica depende del equilibrio de la ingesta no
proteica y proteica. A su vez, dentro de cada forma, existen di-
versos grados: leve, moderado y grave.
El marasmo o forma seca se produce por ingesta casi nula
de nutrientes proteicos y no proteicos; los niños que la padecen
están muy delgados debido a la pérdida de músculo y grasa
corporal, y tienen hambre. La ingesta energética es insuficiente
para las necesidades corporales y el organismo las cubre con
sus propias reservas. El glucógeno hepático se agota rápida-
mente, y las proteínas del músculo esquelético se utilizan vía
gluconeogénesis para mantener el nivel de glucosa plasmática.
Simultáneamente, los triacilglicéridos del tejido adiposo se de-
gradan a ácidos grasos para proporcionar energía a algunos te-
jidos, pudiendo transformarse en cuerpos cetónicos para que
los utilice el cerebro.
El kwashiorkor o forma húmeda se produce al destetar al
niño antes de lo necesario, generalmente por el nacimiento de
un segundo hijo, y alimentarlo con nutrientes de baja calidad,
como gachas diluidas, por lo que frena su desarrollo; en este
caso, más que una deficiencia energética, se produce un defi-
ciencia proteica importante, lo que origina el edema. Dado que
estos niños ingieren hidratos de carbono y pocas proteínas, dis-
minuye la síntesis de proteínas por las vísceras, lo que provoca
hipoalbuminemia, que es la causante del edema. Este síndro-
me se caracteriza por edema generalizado, dermatosis escamo-
sa, adelgazamiento, decoloración y enrojecimiento del pelo; hí-
gado graso agrandado, y apatía irritable además de retraso del
crecimiento.
Los niños que padecen el kwashiorkor marásmico tienen
algo más de edema y de grasa corporal que los que padecen
marasmo.
En todas las formas de MPE se presentan infecciones, con
diversas bacterias productoras de neumonía, otitis media, dia-
rrea, enfermedad genitourinaria y sepsis. La infección se pre-
senta a causa de una inmunidad deprimida. Asimismo, en la
MPE leve o moderadamente grave, hay una deplección de los
electrólitos, en especial potasio y magnesio, y una disminución

de la urea sanguínea; existe anemia por falta de hierro, y acido-

sis metabólica.
En cuanto al tratamiento de niños y adultos con MPE gra-
ve, inicialmente se corrigen las anomalías de líquidos y
electrólitos y se tratan las infecciones con antibióticos; poste-
riormente, se proporcionan macronutrientes como tratamiento
dietético, generalmente se utilizan fórmulas basadas en la le-
che y, finalmente, tras una semana, se puede administrar la
dieta completa.

Degradación
TEMA 14 de los aminoácidos
Transaminación y degradación oxidativa. Destino

de los esqueletos carbonados de los aminoácidos.
La mayor parte de la energía la obtiene el ser humano del Los aminoácidos que
catabolismo de carbohidratos y grasas, pero hay un 10% que exceden las necesida-
des de la síntesis pro-
proviene de la oxidación del esqueleto carbonado de los ami- teica no pueden al-
noácidos. Si la cantidad de proteínas que se ingieren en la die- macenarse y han de
ta o la cantidad de aminoácidos provenientes del recambio ser catabolizados.
proteico normal del organismo, exceden al de aminoácidos ne-
cesarios para la síntesis proteica, entonces este exceso de ami-
noácidos ha de ser catabolizado, ya que los aminoácidos no
pueden almacenarse, a diferencia de los glúcidos o las grasas.
Por otra parte, las proteínas del organismo también pueden uti-
lizarse como combustible cuando la ingesta de hidratos de car-
bono es insuficiente, o hay alguna patología que impide su uti-
lización, como la diabetes mellitus.
La degradación de aminoácidos en los mamíferos se produ- La degradación de
ce esencialmente en el hígado. Inicialmente se produce la elimi- aminoácidos comien-
za con la eliminación
nación del grupo D-amino de los aminoácidos, y entonces el de su grupo a-amino,
esqueleto carbonado resultante es catabolizado, transformán- quedando el esquele-
dose en intermediarios metabólicos importantes, los cuales to carbonado, que es
catabolizado hasta
pueden generar ácidos grasos, cuerpos cetónicos y glucosa. En intermediarios meta-
cuanto a los grupos D-amino, se transforman mayoritariamente bólicos importantes.
en urea, que es excretada.
TRANSAMINACIÓN Y
DEGRADACIÓN OXIDATIVA
La transaminasas o aminotransferasas son enzimas que

catalizan la transferencia de un grupo D-amino desde un
D-aminoácido a un D-cetoácido. En muchos casos el D-cetoáci-
do es el D-cetoglutarato (DKG), que se transforma en glutamato

simultáneamente a la formación del D-cetoácido del D-aminoá-

cido dador del grupo D-amino. De esta forma, mediante la for-
mación de glutamato a partir de D-cetoglutarato, se elimina el
grupo D-amino de muchos aminoácidos.
O NH
ll l
H C COO O H C COO
l l ll l
H3N C COO CH2 o C COO
m
l l l CH2
R CH2 R l
l CH 2
aminoácido COO D-cetoácido l
COO
D-cetoglutarato
glutamato
Una de las formas de Entre las transaminasas, una de las más importantes es la
eliminar el grupo a- aspartato aminotransferasa (AST), que cataliza la transferencia
amino de los aminoá-
cidos está catalizada del grupo D-amino del aspartato al D-cetoglutarato:
por aminotransfera-
sas que transfieren
un gr upo a-amino o oxalacetato glutamato
aspartato D-cetoglutarato m
desde un aminoácido
a un a-cetoácido.
Otra transaminasa importante es la alanina aminotransfera-
sa (ALT), que cataliza la transferencia del grupo D-amino de la
alanina al D-cetoglutarato:
En muchas reaccio-
nes de transamina- o piruvato glutamato
alanina D-cetoglutarato m
ción se forma gluta-
mato.
En general, una reacción de transaminación sigue el si-
guiente esquema:
NH O O NH
l ll ll l
H C COO C COO m
o C COO H C COO
l l l l
R1 R2 R1 R2
amino- D-ceto- D-ceto- amino-
ácido-1 ácido-2 ácido-1 ácido-2
El mecanismo catalítico de las transaminasas incluye la for-

mación de bases de Schiff intermediarias debido a la participa-
ción del grupo prostético de estas enzimas, el piridoxal fosfato
(PLP). El piridoxal fosfato procede de la Vitamina B6 o piridoxi-
na, y en el curso de la reacción se transforma en piridoxamina
fosfato:

DEGRADACIÓN DE LOS AMINOÁCIDOS 171
El PLP, a través de su grupo aldehído, está unido en forma

de base de Schiff inicialmente a la transaminasa a través del
grupo H-amino de una Lys específica del centro activo (aldimi-
na interna). En presencia de un aminoácido, que es el sustrato
de la enzima, el grupo D-amino del mismo desplaza al H-amino
de la Lys, formándose una unión por base de Schiff con el ami-
noácido (aldimina externa), que permanece unida a la enzima
por enlaces no covalentes. Esta aldimina externa, tras una des-
protonación, seguida de una reprotonación y posterior hidróli-
sis, genera un D-cetoácido y piridoxamina fosfato:

La segunda etapa de la reacción es justo el proceso contrario

al descrito. Un segundo D-cetoácido reacciona con la piridoxa-
mina fosfato unida a la transaminasa, liberándose un segundo
aminoácido y regenerándose el complejo transaminasa-PLP:
o aminoácido2 E-PLP
D-cetoácido2 E-PMP m
El glutamato produci- La reacción catalizada por las transaminasas es completa-

do en las reacciones mente reversible. El glutamato producido en las reacciones de
de transaminación
puede sufrir una de- transaminación puede sufrir una desaminación oxidativa, cata-
saminación oxidati- lizada por la glutamato deshidrogenasa, formándose ión amo-
va, catalizada por la nio (NH4):
glutamato deshidro-
genasa, formándose
ión amonio (NH4+).
Esta reacción se produce en ambos sentidos. En la reacción

de degradación, en la que se libera amonio, se utiliza NAD,
mientras que en la de síntesis participa NADP. Lo más proba-
ble es que in vivo la reacción se produzca en la dirección de
producción de amonio. La glutamato deshidrogenasa, que en
los vertebrados está constituida por seis subunidades idénticas,
está regulada alostéricamente por nucleótidos purínicos. La de-
gradación del glutamato para formar amonio se favorece por
ADP y GDP, indicadores de una carga energética celular baja, y
por tanto de una necesidad de obtener energía por oxidación
de aminoácidos. Por el contrario, cuando la carga energética es
alta, y abundan ATP y GTP, éstos actúan como activadores
alostéricos para la síntesis de glutamato.
Si se consideran conjuntamente las reacciones catalizadas
por las transaminasas y por la glutamato deshidrogenasa, se
observa la producción de amonio libre, que en la mayoría de
los vertebrados terrestres se convierte en urea en el hígado, y es
excretada por el riñón.

Los D-cetoácidos resultantes de la transaminación son de-

gradados hasta intermediarios metabólicos, los cuales pueden
utilizarse en la biosíntesis de ácidos grasos, cuerpos cetónicos y
glucosa.
DESTINO DE LOS ESQUELETOS

CARBONADOS DE LOS AMINOÁCIDOS
El esqueleto carbonado de los aminoácidos obtenido tras la Los esqueletos carbo-

transaminación, es decir, el D-cetoácido correspondiente, se de- nados de los 20 ami-
noácidos se transfor-
grada, transformándose en intermediarios metabólicos. Los es- man en una o varias
queletos carbonados de los 20 aminoácidos se transforman en de las siguientes
una o varias de las siguientes moléculas: piruvato, acetil-CoA, moléculas: piruvato,
acetil-CoA, acetoace-
acetoacetil-CoA, D-cetoglutarato, succinil-CoA, fumarato y oxa- til-CoA, a-cetogluta-
lacetato. Los aminoácidos que al degradarse producen acetil- rato, succinil-CoA,
CoA o acetoacetil-CoA se denominan cetogénicos, ya que fumarato y oxalaceta-
to.
estos compuestos generan cuerpos cetónicos. Por su parte,
aquellos aminoácidos que se transforman en piruvato, D-ceto-
glutarato, succinil-CoA, fumarato u oxalacetato, se denominan
glucogénicos, ya que estos compuestos pueden transformarse
en glucosa por la vía gluconeogénica. Los aminoácidos pura-
mente cetogénicos son leucina y lisina. Otros aminoácidos
como isoleucina, fenilalanina, triptófano y tirosina son tanto ce-
togénicos como glucogénicos (Fig. 14.1).
Figura 14.1.– Degradación de asparagina y aspartato. D-KG D-cetoglutarato
1. Aminoácidos que se convierten en oxacelato:

asparagina y aspartato
La asparagina se transforma en aspartato por acción de

la asparaginasa. El aspartato se transamina hasta oxalacetato,
el cual puede transformarse en glucosa vía gluconeogénesis o
ser oxidado en el ciclo del ácido cítrico para obtener energía
(Fig. 14.2).

Figura 14.2.– Esquema general del destino metabólico de los esqueletos carbonados de los aminoácidos.
2. Aminoácidos que se convierten en piruvato:

alanina, treonina, cisteína, serina y glicina
La alanina se transforma en piruvato en un único paso ca-

talizado por la alanina transaminasa. La reacción es reversible
(Fig. 14.3). El piruvato puede seguir la vía gluconeogénica, ge-
Figura 14.3.– Transformación de alanina en piruvato.

nerando glucosa; o bien puede transformarse en acetil-CoA e

incorporarse al ciclo del ácido cítrico.
La treonina se degrada por tres rutas diferentes (Fig. 14.4). El piruvato formado
Una de estas rutas conduce a la formación de propionil-CoA, en la degradación de
Ala, Tre, Cys, Ser y
el cual puede transformarse en succinil-CoA, que es un inter- Gly, puede transfor-
mediario del ciclo del ácido cítrico. Las otras dos vías degrada- marse en glucosa por
tivas conducen a la formación de piruvato; una de ellas consis- la vía gluconeogéni-
ca, transformarse en
te en la oxidación y descarboxilación de treonina, que se trans- acetil-CoA e incor-
forma en aminoacetato, el cual finalmente produce piruvato. porarse al ciclo de
La tercera ruta degradativa se inicia con la hidrólisis del ami- Krebs.
noácido en acetaldehído y glicina; el acetaldehído se transfor-
ma en acetil-CoA, el cual puede utilizarse para la síntesis de
Figura 14.4.– Rutas degradativas de treonina, glicina y serina.

cuerpos cetónicos, lo que hace de la treonina un aminoácido

con cierto carácter cetogénico; por su parte la glicina se trans-
forma en serina en una reacción de transaminación reversible
en la que participa el tetrahidrofolato. La serina finalmente se
desamina transformándose en piruvato.
La cisteína puede degradarse por dos rutas (Fig. 14.5).
Una de ellas conduce a la formación de cisteinsulfinato, com-
puesto a partir del que se forma taurina con destino a la sínte-
sis de ácidos biliares. El cisteinsulfinato se transamina a E-sulfi-
nilpiruvato, que por desulfuración no enzimática genera piruva-
to y dióxido de azufre (SO2). El dióxido de azufre se transforma
en sulfito (SO3 ), y por acción de la oxidasa de sulfitos, con co-
factor de Mo, se forma sulfato (SO4 ). La deficiencia de oxi-
dasa de sulfitos o del cofactor de Mo, produce en los niños
vómitos, convulsiones y retraso mental grave a las pocas sema-
nas del nacimiento, y fallecen en los dos primeros años. Estos
niños excretan gran cantidad de sulfitos, tiosulfatos, 5-sulfocis-
teína, xantina e hipoxantina por la orina.
La otra ruta de degradación de cisteína consta de una tran-
saminación y posterior desulfuración, formándose piruvato.
Figura 14.5.– Degradación de la cisteína hasta piruvato.

3. Aminoácidos que se convierten en

a-cetoglutarato: prolina, arginina, glutamina,
histidina y glutamato
Prolina, arginina, glutamina e histidina se transforman en

glutamato, el cual es convertido en D-cetoglutarato bien por
transaminación o bien por desaminación oxidativa (Fig. 14.6).
La degradación de la prolina comienza con una oxidación
catalizada por la prolina oxidasa. Una patología relacionada
con esta ruta es la hiperprolinemia, que se caracteriza por un
aumento de L-prolina en los fluidos corporales, y se transmite Pro, Arg, Gln e His se
con carácter autosómico recesivo. La hiperprolinemia puede metabolizan a gluta-
mato, el cual se tran-
ser de dos tipos: samina a a-cetogluta-
rato, que es un inter-
a) Tipo I, producida por un déficit de prolina oxidasa, y mediario del ciclo del
cursa con crisis convulsivas y retraso mental; ácido cítrico.
b) Tipo II, debida a una deficiencia en la deshidrogenasa,
se observa una excreción urinaria de pirrolina-carboxila-
to, y la hiperprolinemia es más elevada en este caso.
Figura 14.6.– Degradación de prolina, arginina, glutamina, histidina y glutamato hasta D-cetoglutarato.

Se produce hiperaminoaciduria específica que comprende Pro,

Hyp y Gly, y su grado es directamente proporcional a la con-
centración de Pro en sangre. El tratamiento no es eficaz porque
no se puede hacer una verdadera restricción dietética.
Sobre la arginina actúa la arginasa, transformándola en or-
nitina y urea; la ornitina sufre una transaminación y genera
J-semialdehído glutámico, convergiendo así con la ruta degra-
dativa de la Pro. La deficiencia en arginasa produce arginine-
mia, que se hereda con carácter autosómico recesivo. Hay dos
arginasas genéticamente distintas en el hombre, una es citosóli-
ca y se expresa en hígado y hematíes, y la otra se localiza en
mitocondrias renales. La arginasa citosólica es la deficiente en
los enfermos con argininemia. Los lactantes suelen carecer de
síntomas los primeros meses o años de vida, después aparecen
progresivamente diplejia espástica con postura de tijeras de los
miembros inferiores, retraso mental progresivo, frecuentes con-
vulsiones e incluso hepatomegalia. Todo esto es consecuencia
de una elevación de Arg en plasma y líquido cefalorraquídeo.
La transformación de glutamina en glutamato se produce
por desaminación catalizada por la glutaminasa.
La primera etapa de la degradación de la histidina está ca-
talizada por la histidasa o histidina aminio liasa, fomándose
urocanato. La deficiencia en histidasa produce histidinemia,
que se transmite con carácter autosómico recesivo, y cuyas ma-
nifestaciones clínicas son transtornos en el lenguaje, retraso del
crecimiento o retraso mental. Sin embargo, existen individuos
con histidinemia que son asintomáticos. Los niveles de His en
plasma y líquido cefalorraquídeo están muy elevados, y en la
orina hay gran cantidad de His y ácido imidazolpirúvico, pro-
ducto de la transaminación de la His. Una dieta baja en His es
lo más adecuado para estos individuos, aunque no mejora a
los enfermos con síntomas. Otra patología asociada con esta
ruta degradativa es la acidemia urocánica, debida a deficien-
cia de urocanasa, y que provoca retraso mental y del creci-
miento así como aciduria urocánica masiva.
4. Aminoácidos que se convierten en

succinil-Co-A: metionina, valina e isoleucina
El esqueleto carbona- La degradación de la metionina (Fig. 14.7) comienza con
do de Met y de dos de
los aminoácidos ra- la reacción catalizada por la metionina adenosiltrasferasa, que
mificados (Val e Ile) conduce a la formación de S-adenosilmetionina, compuesto
se transforma en suc- dador de metilos que se utiliza para la metilación de diversos
cinil-CoA, un inter-
mediario del ciclo de compuestos del organismo. La homocisteína se condensa con
Krebs. una serina para formar cistationina, reacción catalizada por la

Figura 14.7.– Ruta degradativa de metionina.
cistationina E-sintasa; la cistationina es el sustrato de la cista-

tionina J-liasa que la desamina formando cisteína y D-cetobu-
tirato. Se genera propionil-CoA, que finalmente se transforma
en succinil-CoA, que se incorpora al ciclo del ácido cítrico. La
deficiencia en metionina adenosiltransferasa produce hiper-
metioninemia, una patología benigna ya que no se han de-
tectado pacientes con ausencia completa de la enzima. La de-
ficiencia en cistationina E-sintasa produce homocistinuria
clásica o tipo I, y es el error congénito más frecuente del
metabolismo de la metionina, que se transmite como autosó-

mico recesivo. Se produce una elevación de homocisteína, y,

como consecuencia de ello, también de metionina en los lí-
quidos corporales. Las manifestaciones clínicas son numero-
sas, a partir de los 3 años se produce desprendimiento del
cristalino y otras anomalias oculares, es frecuente un retraso
mental progresivo, y también trastornos psiquiátricos y con-
vulsiones en algunos pacientes. También se producen altera-
ciones esqueléticas como escoliosis, así como una osteoporo-
sis generalizada. Se presenta tromboembolia de vasos gran-
des y pequeños, especialmente cerebrales. En cuanto al
tratamiento, pasa por la restricción en la ingesta de metioni-
na, y en algunos casos hay una mejoría con la ingesta de vi-
tamina B6 (piridoxal fosfato).
La valina constituye, junto con la isoleucina y la leucina, el
grupo de los aminoácidos de cadena ramificada, cuyas prime-
ras etapas de degradación son equivalentes, y la deficiencia de
alguna de sus enzimas produce patologías comunes.
El catabolismo de los aminoácidos de cadena ramificada
tienen lugar en hígado, riñón, músculo, corazón y tejido adi-
poso, y se inicia con la entrada de estos aminoácidos a la cé-
lula a través de un transportador de membrana celular. Des-
pués de la transaminación reversible, catalizada por una úni-
ca transaminasa, los D-cetoácidos resultantes entran en las
mitocondrias, donde sufren una descarboxilación oxidativa
catalizada por una única D-cetoácido deshidrogenasa de ca-
dena ramificada, que es un complejo multienzimático, seme-
jante al complejo piruvato deshidrogenasa, formado por una
D-cetoácido descarboxilasa, una transacilasa y una dihidroli-
poil deshidrogenasa. Los tioésteres de cadena ramificada re-
sultantes de la descarboxilación oxidativa se catabolizan por
diferentes vías.
La valina (Fig. 14.8) sufre una transaminación y se forma el
D-cetoácido, D-cetoisovalerato, que sufre la descarboxilación
oxidativa generándose isobutiril-CoA, el cual experimenta una
oxidación catalizada por una deshidrogenasa dependiente de
FAD, formándose metilacrilil-CoA, compuesto que, tras una se-
rie de pasos metabólicos catalizados enzimáticamente, se trans-
forma en metilmalonil-CoA, el cual por acción de una mutasa
se convierte en succinil-CoA.
La isoleucina (Fig. 14.8) es otro de los aminoácidos de
cadena ramificada, su catabolismo comienza con una transa-
minación para producir el correspondiente D-cetoácido, el D-
ceto-E-metilvalerato, que experimenta la descarboxilación
oxidativa, transformándose en D-metilbutiril-CoA, que por
acción de la deshidrogenasa dependiente de FAD se transfor-
ma en tiglil-CoA, compuesto que, tras una serie de transfor-

Figura 14.8.– Rutas degradativas de los aminoácidos de cadena ramificada: valina, isoleucina y leucina.

maciones catalizadas enzimáticamente, produce D-metilace-

toacetil-CoA, compuesto que sufre una tiolisis y se escinde
en acetil-CoA y propionil-CoA, el cual finalmente genera
succinil-CoA.
5. Aminoácidos que se convierten en acetil-CoA:

leucina, lisina y triptófano
La leucina (Fig. 14.8) es la tercera de los aminoácidos de

cadena ramificada, y su catabolismo conduce a la formación
de acetil-CoA y acetoacetato.
Errores congénitos del metabolismo de

los aminoácidos de cadena ramificada
1. Enfermedad de la orina con olor a jarabe de arce: EOJA

La valina constituye, Esencialmente, se produce por una deficiencia en el com-
junto con la isoleuci- plejo deshidrogenasa de D-cetoácidos de aminoácidos ramifi-
na y la leucina, el
grupo de los aminoá- cados (Val, Ile y Leu), que puede implicar a uno o a todos sus
cidos de cadena ra- componentes (D-cetoácido descarboxilasa, transacilasa y dihi-
mificada, cuyas pri- drolipoil deshidrogenasa), o bien puede afectar al pirofosfato
meras etapas de de-
gradación son equiva- de tiamina (TPP), que es el cofactor de la enzima. Esta pato-
lentes, y la deficien- logía se denomina EOJA por el olor dulzón propio del jarabe
cia de alguna de sus de arce que exhalan los líquidos corporales, sobre todo la ori-
enzimas produce pa-
tologías comunes. na. Existen viarios tipos de EOJA:
a) EOJA clásica: Es la más grave. Los lactantes son norma-
les al nacer pero presentan vómitos y poca tendencia a
alimentarse, y a los pocos días letargia y coma, junto
con rigidez muscular, convulsiones, hipoglucemia y aci-
dosis metabólica. Si no se tratan, los pacientes fallecen a
las pocas semanas o meses de vida. La orina, el sudor y
el cerumen exhalan olor a jarabe de arce, lo cual es indi-
cativo de la patología, que cursa con elevados niveles
plasmáticos de Leu, Ile y Val y descenso de los niveles
de Ala. En orina se detectan elevados niveles de Leu, Ile
y Val, así como de sus correspondientes D-cetoácidos. El
tratamiento de la fase aguda consiste en eliminar los
aminoácidos de cadena ramificada y sus metabolitos de
los líquidos corporales y de los tejidos mediante diálisis
peritoneal; una vez superada esta fase, ha de ingerirse
una dieta pobre en aminoácidos de cadena ramificada,
para lo cual existen preparados comerciales carentes de
estos aminoácidos, sin embargo, puesto que Val, Leu e

Ile son aminoácidos esenciales para el ser humano hay

que añadir pequeñas cantidades controladas a la dieta,
la cual ha de mantenerse toda la vida del paciente. Estos
individuos frecuentemente presentan daños neurológicos
y retraso mental.
b) EOJA intermitente: En estos pacientes la actividad del La EOJA se produce,
complejo deshidrogenasa es del 8 al 16% de la normal. esencialmente, por
una deficiencia en el
Los niños son aparentemente normales, pero en situa- complejo deshidroge-
ciones de estrés (infecciones u operaciones quirurgicas, nasa de a-cetoácidos
por ejemplo) presentan vómitos, letargia, coma y olor a de aminoacidos rami-
ficados (Val, Lev, Ile),
jarabe de arce, llegando a una situación equivalente a la o por carencia de
de la EOJA clásica. TPP.
c) EOJA leve: La actividad del complejo deshidrogenasa
es 2-8% de la normal, por lo que el cuadro clínico es
más leve que el de la forma clásica, sin embargo los ni-
veles plasmáticos de Val, Leu e Ile son elevados, y eli-
minan por orina los D-cetoácidos correspondientes, por
lo que tienen olor a jarabe de arce. Su retraso es ligero
o moderado.
d) EOJA con respuesta a tiamina: Algunas formas de EOJA
leves o intermedias mejoran notablemente con dosis al-
tas de tiamina (10 a 200 mg/24 h).
Todas las formas de EOJA se transmiten con carácter au-
tosómico recesivo. La existencia de numerosas variedades es
debido a la deficiencia en las diversas subunidades del comple-
jo de la deshidrogenasa.
2. Acidemias orgánicas
Todos los metabolitos intermediarios del catabolismo de los Todos los metaboli-
aminoácidos de cadena ramificada son ácidos orgánicos, y el tos inter mediarios
del catabolismo de
deficit de cualquiera de las enzimas de estas vías metabólicas, los aminoácidos de
excepto de las transaminasas, origina acidosis; los ácidos orgá- cadena ramificada
nicos que preceden al bloqueo enzimático se acumulan en los son ácidos orgánicos
y, el deficit de cual-
líquidos corporales y se eliminan por la orina, ocasionándose quiera de las enzimas
una acidosis metabólica intensa en los primeros días de vida. de estas vías metabó-
Así, existen algunas enfermedades asociadas con el catabolismo licas, excepto de las
transaminasas, origi-
de la leucina: na acidosis
a) Acidemia isovalérica: se produce por deficiencia de

isovaleril-CoA deshidrogenasa, por lo que se acumula
isovaleril-CoA, que da lugar a isovalerato, que es excre-
tado en la orina y el sudor, produciendo un olor a que-
so o a sudor de pies en el aliento y los líquidos corpora-
les. Se transmite como un carácter autosómico recesivo.
Los pacientes presentan vómitos, acidosis metabólica,

letargia, convulsiones, coma, y puede sobrevenir la

muerte.
b) Aciduria 3-metilglutacónica: Se produce por una
deficiencia en la hidratasa, eliminándose por orina áci-
do metilglutacónico; los síntomas pueden ser leves con
un ligero retraso motor hasta graves deficiencias neu-
rológicas.
c) Acidemia 3-hidroxi-metilglutárica (HMG): Hay un
deficit de liasa de hidroximetilglutaril-CoA que origina,
desde los primeros días o meses de vida, vómitos, hipo-
glucemia, acidosis metabólica, deshidratación, letargia y
coma; hay una excreción urinaria de ácido 3-hidroxime-
tilglutárico y otros metabolistos intermedios.
También se producen acidosis por deficiencias enzimáticas
en el metabolismo de la isoleucina, tal es el caso del deficit de
b-cetotiolosa, es decir de la enzima que hidroliza el metilace-
toacetil-CoA, que puede llegar a ocasionar una acidosis grave
en el primer año de vida.
La lisina se degrada hasta acetil-CoA por diversas rutas
metabólicas (Fig. 14.9). La ruta mayoritaria en el hígado co-
mienza con la formación de '-semialdehído D-aminoadípico
en dos etapas a traves de sacaropina. La primera, catalizada
por una reductasa, consiste en la condensación de la lisina con
D-cetoglutarato para formar sacaropina, sobre la que actúa una
deshidrogenasa y libera glutamato, con lo cual se ha producido
la desaminación del grupo H-amino de la Lys y la transforma-
ción en aldehído. El '-semialdehído D-aminoadípico experi-
menta una oxidación y una transaminación dando lugar a D-
cetoadipato, que por descarboxilación oxidativa catalizada por
una deshidrogenasa genera glutaril-CoA, que se descarboxila
para formar crotonil-CoA, compuesto que se incorpora a la
ruta de la E-oxidación de ácidos grasos para formar dos molé-
culas de acetil-CoA. Otra de las rutas degradativas comienza
con la desaminación de la lisina, catalizada por la aminoácido
oxidasa, y confluye con la anterior en la formación de '-se-
mialdehído D-aminoadípico; esta ruta degradativa se produce
en el cerebro.
El catabolismo de Entre los errores congénitos del metabolismo de la lisina
Lem produce acetoa- está la hiperlisinemia persistente, debida a una deficiencia
cetato y acetil-CoA, y
el de Lys genera ace- de la enzima reductasa de D-cetoglutarato-deshidrogenasa de
til-CoA, por lo que sacaropina, que se cree están controlados por un único gen, y
ambos aminoácidos que se transmite con carácter autosómico recesivo; los síntomas
son estrictamente ce-
togénicos. van desde retraso mental y físico grave con convulsiones, hasta
la normalidad completa de los niños. La mayoría de los enfer-
mos presentan hiperlisinemia, sacaropinemia, lisinuria y saca-

Figura 14.9.– Ruta degradativa de lisina.
ropinuria. Otra patología es la acidemia a-cetoadípica, debi-

da a una deficiencia en la descarboxilación del D-cetoadipato,
que produce niveles elevados de D-cetoadípico en plasma y
orina del recien nacido, causando convulsiones, acidosis me-
tabólica leve e intenso retraso mental.
La degradación del triptófano se produce mayoritariamen-
te en el hígado hasta acetil-CoA. En esta ruta en la reacción ca-
talizada por la quinureninasa se forma alanina, que puede
transformarse en piruvato y 3-hidroxiantranilato, que es un pre-
cursor de la biosíntesis de NAD y NADP. Se genera D-cetoa-
dipato, metabolito común con la ruta degradativa de lisina, y
desde este punto ambas vías presentan los mismos pasos me-
tabólicos hasta acetil-CoA.

6. Aminoácidos que se convierten en fumarato

y acetoacetato: fenilalanina y tirosina
La fenilalanina es un aminoácido esencial, y el exceso de

este aminoácido ingerido en la dieta que no se utilice para la
síntesis de proteínas se degrada mediante su transformación
en tirosina (Fig. 14.11), cuyo catabolismo desemboca en la
formación de fumarato y acetoacetato. La primera reacción
está catalizada por la fenilalanina 4-monooxigenasa o fenilala-
nina hidroxilasa, que utiliza como cofactor tetrahidrobiopteri-
na, y transforma fenilalanina en tirosina, la cual se transamina
por la tirosina transaminasa para formar 4-hidroxifenilpiruva-
to, que se transforma en homogentisato, que por acción de la
homogentisato 1,2-dioxigenasa produce 4-maleilacetoacetato,
compuesto que en último término genera fumarato y acetoa-
cetato.
La deficiencia de fenilalanina 4-monooxigenasa (fenilalani-
na hidroxilasa) origina uno de los errores congénitos del meta-
bolismo más conocido e importante, la fenilcetonuria clásica.
Esta patología se caracteriza por una hiperfenilalaninemia
plasmática, con valores de Phe en sangre superiores a
20 mg/dL; el exceso de Phe se transforma en ácido fenilpirúvi-
co por desaminación o en feniletilamina por descarboxilación,
a su vez el ácido fenilpirúvico puede transformarse en ácido fe-
nilacético o en ácido fenil-láctico, y todos estos metabolitos
aparecen elevados en sangre, orina y, en general, en los fluidos
corporales. El aumento de los niveles de Phe produce efectos
tóxicos sobre el transporte y metabolismo de otros aminoácidos
aromáticos en cerebro, lo cual junto con los metabolistos se-
cundarios que se originan provocan la lesión cerebral. El lac-
tante es normal al nacer, y, si no se somete a tratamiento, el re-
traso mental se produce lentamente. Se presentan síntomas
neurológicos graves, y los individuos afectados tienen una co-
loración clara de piel, ojos y tejidos internos por la falta de me-
lanina, cuyo nivel desciende por la falta de tirosina, ya que la
proveniente de la dieta no es suficiente; esta deficiencia de tiro-
sina ejerce un efecto nocivo sobre la síntesis proteica, imposibi-
En la degradación de litando el desarrollo cerebral. La determinación de los niveles
Trp se produce acetil- de Phe en sangre es una prueba que se realiza a todos los re-
CoA y Ala, la cual
puede transformarse cien nacidos, ya que la deficiencia genética de esta enzima es
en piruvato. elevada, y la detección a tiempo permite prevenir el retraso
mental con que cursa esta enfermedad mediante el control de
la cantidad de Phe de la dieta; el tratamiento consiste en ali-
mentar a los niños con una dieta sintética baja en Phe durante
los primeros cinco años aproximadamente, y después conti-
nuar con restricciones en la cantidad de proteínas de la dieta.

Figura 14.10.– Degradación del triptófano.

Figura 14.11.– Ruta degradativa de fenilalanina y tirosina.
Esta deficiencia enzimática se transmite con carácter autosómi-

co recesivo.
Algunos de los lactantes con niveles elevados de fenilalani-
na en plasma no tienen deficiencia en la hidroxilasa, sino un

deficit de una de las enzimas que sintetiza o reduce el cofac-

tor tetrahidrobiopterina (BH4). Este cofactor tambien participa
en la reacción catalizada por las hidroxilasas de triptófano y
de tirosina, que son esenciales para la biosíntesis de los neu- La deficiencia de fe-
rotransmisores dopamina y serotonina, por lo que la deficien- nilalanina 4-monoo-
xigenasa (fenilalanina
cia en BH4 afecta gravemente a las funciones del sistema ner- hidroxilasa) origina
vioso central. Las manifestaciones clínicas son indistinguibles uno de los errores
de las de la fenilcetonuria clásica, pero, aunque se aplique congénitos del meta-
bolismo más conoci-
una dieta adecuada, los lactantes desarrollan manifestaciones do e importante, la
neurológicas. El tratamiento consiste en la administración de fenilcetonuria clási-
precursores de los neurotransmisores, como L-dopa y 5-dihi- ca.
droxitriptófano.
La tirosina se utiliza no sólo para la síntesis de proteínas,
sino como precursor de dopamina, noradrenalina, adrenalina,
melanina y tiroxina, y sólo aquella en exceso se metaboliza por
la ruta degradativa hasta fumarato y acetoacetato; el fumarato
se incorpora al ciclo de los ácidos tricarboxílicos y el acetoace-
tato se transforma finalmente en acetil-CoA. Entre los errores
congénitos del metabolismo de la tirosina están las tirosine-
mias, caracterizadas por niveles elevados de Tyr en los líquidos
corporales, y que pueden ser de dos tipos:
a) Tirosinemia oculocutánea o tipo II: hay una deficien-

cia de tirosina transaminasa citosólica hepática, que se
transmite con carácter autosómico recesivo, y provoca
un aumento de los niveles de Tyr en plasma (20-
50 mg/dL) y en orina, así como de metabolitos secunda-
rios N-acetiltirosina, p-hidroxifenilpirúvico y p-hidroxife-
nilacético, que producen retraso mental leve a modera-
do y lesiones cutáneas y oculares. El tratamiento
consiste en una dieta pobre en tirosina y fenilalanina.
b) Tirosinemia hepatorrenal o tipo I: es un proceso au-
tosómico recesivo, causado por una deficiencia en fuma-
ril acetoacetasa que ocasiona la acumulación y excre-
ción de Tyr y de metabolitos intermedios, ya que se acu-
mula fumarilacetoacetato, que conduce a la de
maleilacetoacetato, compuesto químicamente reactivo
que se une a compuestos sulfhidrilos; también se produ-
ce succinilacetona, a partir de fumarilacetato, que es res-
ponsable, probablemente, de las alteraciones bioquími-
cas. Se origina una afectación grave del hígado, riñones
La tirosina se utiliza
y sistema nervioso central. La forma aguda de la enfer- no sólo para la sínte-
medad se manifiesta en los seis primeros meses de vida, sis de proteínas, sino
y puede conducir a la muerte por fallo hepático en los como precursor de
dopamina, noradre-
primeros dos años. La forma crónica se manifiesta des- nalina, adrenalina,
pués del primer año de vida, y la muerte suele producir- melanina y tiroxina.

se a los diez años de edad por fallo hepático. El trata-

miento con dieta baja en Tyr, Phe y Met no suele ser
efectivo, y el único recurso es el transplante hepático.
La alcaptonuria se debe a una deficiencia de homogenti-
sato 1,2-dioxigenasa, que provoca que los pacientes excreten
prácticamente toda la Tyr que ingieren en exceso en forma de
ácido homogentísico por la orina. Se transmite con carácter au-
tosómico recesivo. El ácido homogentísico es incoloro, pero
con el tiempo se oxida generando un compuesto que polimeri-
za adquiriendo un intenso color oscuro. Inicialmente sólo se
produce una orina de color oscuro, pero con el tiempo los pig-
mentos procedentes de la oxidación del ácido homogentísico
se depositan en los huesos, tejido conjuntivo y diveros órganos
produciendo en ellos una pigmentación generalizada denomi-
nada ocronosis, pudiéndose producir artritis.
RESUMEN
Los aminoácidos que exceden las necesidades de la

síntesis proteica no pueden almacenarse, y han de ser ca-
tabolizados, al igual que aquellos procedentes de las pro-
teínas del organismo que se utilizan como combustible en
algunas circustancias metabólicas.
La degradación de aminoácidos se produce mayoritari-
tamente en el hígado. Comienza con la eliminación del
grupo D-amino de los aminoácidos, quedando el esquele-
to carbonado de los mismos, que es catabolizado hasta
formar intermediarios metabólicos importantes.
La eliminación del grupo D-amino se puede producir
por transaminación, llevada a cabo por transaminasas o
aminotransferasas que catalizan la transferencia de un gru-
po D-amino desde un D-aminoácido a un D-cetoácido. El
mecanismo catalítico de las transaminansas incluye la for-
mación de bases de Schiff intermediarias. El glutamato
producido en las reacciones de transaminación puede su-
frir una desaminación oxidativa, catalizada por la glutama-
to deshidrogenasa, formándose ión amonio (NH4), el cual,
en la mayoría de los vertebrados terrestres, se convierte en
urea en el hígado, y es excretada por el riñón.
Los D-cetoácidos resultantes de la transaminación son
degradados hasta intermediarios metabólicos, los cuales
pueden utilizarse en la biosíntesis de ácidos grasos, cuer-
pos cetónicos y glucosa. Los esqueletos carbonados de los

20 aminoácidos se transforman en una o varias de las si-

guientes moléculas: piruvato, acetil-CoA, acetoacetil-CoA,
D-cetoglutarato, succinil-CoA, fumarato y oxalacetato. Los
aminoácidos que al degradarse producen acetil-CoA o
acetoacetil-CoA se denominan cetogénicos; mientras que
los que se transforman en cualquiera de los otros interme-
diarios son glucogénicos. Los aminoácidos puramente ce-
togénicos son leucina y lisina. Otros aminoácidos como
isoleucina, fenilalanina, triptófano y tirosina son tanto ce-
togénicos como glucogénicos.
Se han descubierto numerosos errores congénitos del
metabolismos en las rutas catabólicas de los aminoácidos,
que traen consigo deficiencias en determinadas enzimas.
Estas deficiencias enzimáticas pueden producir patologias
de diversa gravedad.
Por el gran número de trastornos metabólicos que se apli-

can a lo largo de este tema, y por su especial importancia, los
casos clínicos se han integrado en los apartados correspondien-
tes a este capítulo.

Excreción del
TEMA 15 nitrógeno proteico
Excreción del nitrógeno proteico. Ciclo de la urea.

Conexión entre el ciclo de la urea y el ciclo de
Krebs.
En la especie humana el nitrógeno que se excreta procede

de las proteínas de la dieta y del recambio proteico normal. La
principal forma de excreción del nitrógeno es la urea, que se
produce en el hígado como consecuencia de un conjunto de
reacciones estructuradas cíclicamente, que se denomina ciclo
de la urea. Este ciclo esta conectado con el de Krebs a través
del fumarato y del aspartato que procede del oxalacetato por
transaminación.
EXCRECIÓN DEL NITRÓGENO PROTEICO
En los individuos sanos correctamente alimentados, el nitró- En condiciones de

geno que se excreta proviene de la digestión del exceso de pro- inanimación se de-
gradan las proteínas
teínas ingeridas en la dieta y del recambio proteico normal, musculares.
puesto que la proteínas del organismo sufren un recambio re-
gular, ya que la vida media de las proteínas del organismo
varía de unas horas a varios días, y además se produce una
degradación proteica procedente de la apoptosis celular nor-
mal del organismo. Por otra parte, en determinadas situaciones
metabólicas como la inanición, se produce degradación de las
proteínas del organismo, principalmente de las musculares, con
el fin de obtener energía mediante la incorporación de las ca-
denas carbonadas de los aminoácidos a la gluconeogénesis, y
los grupos amino de los aminoácidos son transferidos a la glu-
tamina y a la alanina. La glutamina y la alanina formadas en el
músculo pasan a sangre y son transportadas principalmente al
hígado, pero también al riñón (Fig. 15.1).
En el músculo esquelético y en el cardiaco se sintetiza crea-
tina-fosfato, como fuente de fosfato de alta energía para la con-

Figura 15.1.– Transporte del nitrógeno producido en el músculo por

degradación de proteínas al hígado y al riñón.
tracción muscular, a partir de glicina y arginina, y ATP como

dador de fosfato y de energía. La creatina-fostato posee dos
grupos amino en su estructura. La cantidad de creatina en el
organismo depende de la masa muscular, y diariamente se re-
nueva un porcentaje concreto. Alrededor del 1-2% de la creati-
na-fosfato se cicla de forma no enzimática dando creatinina,
que pasa a la sangre y es excretada por el riñón, con lo cual se
elimina nitrógeno (Fig. 15.2).
En el hígado, la alanina por acción de la alanina amino-
transferasa genera glutamato, y la glutamina por acción de la
glutaminasa libera NH4 y produce glutamato. El glutamato es
catalizado por la glutamato deshidrogenasa, transformándose

EXCRECIÓN DEL NITRÓGENO PROTEICO 195
Figura 15.2.– Síntesis de creatina y formación de creatinina.
en D-cetoglutarato y liberando NH4. El NH4 producido en el hí-

gado es transformado en urea, mediante el ciclo de la urea,
que es excretada por el riñón.

Una parte de la alanina y la glutamina producidas en el

músculo, llega vía sanguinea al riñón y, mediante los mismos
sistemas enzimáticos descritos en el hígado, generan amoniaco,
que es protonado a ion amonio (NH4) y excretado.
CICLO DE LA UREA
La urea es la princi- La urea es la principal forma de excreción de nitrógeno en

pal forma de excre- los vertebrados terrestres, y su síntesis se produce a través de
ción de nitrógeno en
los vertebrados te- una vía metabólica denominada ciclo de la urea, que tiene lu-
rrestres. gar en el hígado, y fue la primera ruta cíclica que se descubrió.
Los científicos que la propusieron fueron Hans Krebs y Kurt
Henseleit en 1932, cinco años antes del descubrimiento del ci-
clo de los ácidos tricarboxílicos o ciclo de Krebs. La molécula
de urea posee dos átomos de nitrógeno (CO(NH2)2), uno de
ellos procede del aspartato, y el otro se incorpora en forma de
NH4; a su vez, el átomo de carbono de la molécula es aportado
por una molécula de bicarbonato (HCO3).
La urea se sintetiza En el ciclo de la urea (Fig. 15.3) participan cinco sistemas
en el hígado a través enzimáticos, los dos primeros catalizan reacciones en la mito-
de una ruta metabóli-
ca cíclica. condria, y los tres restantes en el citosol. El ciclo de la urea ini-
cia y finaliza en ornitina.
La formación de car- La primera reacción consiste en la condensación del amo-
bamoil fosfato por la nio con el bicarbonato en la mitocondria, catalizada por la car-
carbamoilfosfato sin-
tetasa I, y la de citru- bamoil o carbomil fosfato sintetasa I (CPSI), para formar car-
lina, catalizada por la bamoil o carbomil fosfato, un aldehído mixto de alta energía.
ornitina transcarba- Esta reacción, estrictamente, no forma parte del ciclo de la
moilasa, se producen
en el interior mito- urea, pero es esencial para la síntesis de este compuesto, ya
condrial. que el carbamoil fosfato es la molécula que va a incorporar
uno de los nitrógenos de la molécula de urea. La reacción ca-
talizada por esta enzima necesita de dos moléculas de ATP,
uno para activar el bicarbonato y otro como dador del fosfato,
así como de la presencia de N-acetilglutamato como activador
alostérico. Existe otra isoenzima citosólica, denominada carba-
moil fosfato sintetasa II, que participa en la biosíntesis de piri-
midinas.
La arginasa, que ca- La primera reacción del ciclo consiste en la formación de ci-
taliza la escisión de trulina por la ornitina transcarbamoilasa, que cataliza la transfe-
arginina para formar
urea en el citosol, es rencia del grupo carbamoilo del carbamoil fosfato a la ornitina,
una enzima exclusi- en la matriz mitocondrial. La ornitina que participa en la reac-
vamente hepática. ción se produce en el citosol, y es transportada al interior mito-
condrial mediante un transportador de intercambio citrulina/or-
nitina situado en la membrana interna mitocondrial. Así mis-
mo, la citrulina formada en la mitocondria pasa al citosol
mediante el citado transportador.

Figura 15.3.– Ciclo de la urea.
En el citosol, la citrulina se condensa con aspartato forman-

do argininosuccinato, reacción catalizada por la argininosucci-
nato sintetasa, con hidrólisis de ATP a AMP y PPi, el cual es en-
zimáticamente hidrolizado a 2Pi.
El argininosuccinato se hidroliza, por acción de la arginino- La urea sintetizada
succinato liasa, en arginina y fumarato. El fumarato es el punto en el hígado es trans-
portada al riñón para
de conexión entre el ciclo de la urea y el ciclo de los ácidos tri- su excreción por la
carboxílicos. orina.
La arginina es escindida en ornitina y urea por la arginasa,
una enzima exclusivamente hepática. La ornitina producida en
el citosol vuelve a entrar en la mitocondria mediante su trans-
portador, y así se incorpora nuevamente al ciclo. La urea es
transportada al riñón para su excreción por la orina.
Para la biosíntesis de una molécula de urea es necesaria la
hidrólisis de cuatro enlaces fosfato de alta energía: tres ATP y
un PPi:

HCO3 NH4 Asp 2 H2O 3 ATP o urea 2 ADP

2 Pi AMP PPi fumarato
Las cuatro primeras reacciones enzimáticas de esta vía, que

conducen a la síntesis de arginina, también se producen en
riñón y mucosa intestinal, por lo que en estos tejidos la argini-
na formada se utiliza para la biosíntesis de proteínas.
El ciclo de la urea El ciclo de la urea está regulado a través de la carbamoil
está regulado a través fosfato sintetasa I mediante N-acetilglutamato, que actúa como
de la carbamoil fosfa-
to sintetasa I median- activador alostérico de la enzima. La síntesis de N-acetilgluta-
te N-acetilglutamato, mato por la N-acetilglutamato sintetasa a partir de acetil-CoA y
que actúa como acti- glutamato, está regulada por arginina; de forma que la presen-
vador alostérico de la
enzima. cia de N-acetilglutamato indica la existencia de intermediarios y
energía disponibles para el ciclo de la urea. Además, el ciclo se
En el riñon y en la regula mediante la inducción de las enzimas que participan en
mucosa intestinal él, lo cual se produce al aumentar los niveles de amoniaco o de
existen las enzimas
que permiten la sínte- aminoácidos en el hígado, lo que se origina al ingerir una dieta
sis de arginina. rica en proteínas o en situaciones de inanición.
CONEXIÓN ENTRE EL CICLO DE LA UREA

Y EL CICLO DE KREBS
El fumarato formado El fumarato formado en el ciclo de la urea en el citosol, y

en el ciclo de la urea cuyos átomos de carbono provienen del aspartato, puede en-
en el citosol puede
entrar en la mitocon- trar en la mitocondria, donde por acción de la fumarasa se
dria, donde finalmen- transforma en malato, que por la malato deshidrogenasa forma
te se transforma en oxalacetato. El oxalacetato puede tener varios destinos:
oxalacetato, que pue-
de incorporarse al ci- A) por una parte puede transaminarse hasta aspartato, que
clo de Krebs.
se incorporaría nuevamente al ciclo de la urea;
B) también puede incorporarse a la gluconeogénesis me-
diante su transformación en fosfoenolpiruvato por la fos-
foenolpiruvato carboxiquinasa, y dar lugar a glucosa;
C) puede continuar en el ciclo de los ácidos tricarboxílicos,
oxidándose completamente vía cadena de transporte
electrónico, para producir ATP.
RESUMEN
La excreción del amoniaco que se produce en el proce-

so de degradación proteica es esencial para el organismo,
ya que las deficiencias en su eliminación provocan hipera-
monemia, con elevación de los niveles plasmáticos y en lí-

quido cefalorraquideo del amonio, y las graves consecuen-

cias neurológicas que puede ocasionar.
La degradación de proteínas, procedentes del exceso
ingerido en la dieta, del recambio proteico y la apoptosis
normales del organismo, así como de la degradación de
proteínas musculares en situaciones de inanición, conduce
a la formación de alanina y glutamina, que en el hígado
originan finalmente NH4, que es transformado en urea, la
cual es excretada por el riñón. También en el riñón se pro-
duce NH4, procedente de alanina y glutamina, que es ex-
cretado. Otra forma de excreción de nitrógeno es la forma-
ción de creatinina en el músculo, este compuesto pasa a la
sangre y es excretado por el riñón.
La formación de urea en el hígado a partir de NH4 se
produce mediante una ruta metabólica cíclica denomina-
da ciclo de la urea, parte del cual se desarrolla en la matriz
mitocondrial, y que comienza y termina en ornitina. Parti-
cipan cinco sistemas enzimáticos, el primero de los cuales,
que conduce a la formación de carbamoil fosfato, no es
estrictamente parte de ciclo, pero introduce en el mismo, a
través de esta molécula, el nitrógeno procedente del NH4.
El otro nitrógeno se incorpora a través del grupo amino
del aspartato mediante la formación de argininosuccinato,
compuesto que se escinde para formar arginina y fumara-
to. La arginasa, que escinde la arginina en urea y ornitina,
es específica del hígado. La regulación del ciclo se produce
por un activador alostérico, el N-acetilglutamato, de la car-
bamoil fosfato sintetasa I, así como por inducción enzimá-
tica por incremento de los niveles de amoniaco o aminoá-
cidos en el hígado.
El fumarato producido en el ciclo es el nexo de unión
con el ciclo de Krebs, ya que este compuesto puede pasar
al interior mitocondrial y transformarse en oxalacetato, el
cual puede utilizarse para la síntesis de glucosa por gluco-
neogénesis, transaminarse a aspartato y con ello incorpo-
rarse nuevamente al ciclo de la urea, o degradarse en el ci-
clo de Krebs para producir finalmente ATP.
Hiperamonemia
La hiperamonemia es la elevación de los niveles de amonio

en sangre por encima de 30-60 PM, y conduce a pérdida de

conciencia, lesiones cerebrales, anoxia y, en último término,

puede provocar un estado de coma, ya que el amonio atravie-
sa la barrera hematoencefálica. Lo más probable es que la ele-
vación de los niveles de amonio modifiquen el equilibrio de la
reacción catalizada por la glutamato deshidrogenasa, ocasio-
nando una síntesis elevada de glutamato, con el consiguiente
descenso de los niveles de D-cetoglutarato, lo que provocaría
un mal funcionamiento del ciclo de Krebs, que sería incapaz de
suministrar suficientes electrones para mantener la producción
normal de ATP mediante fosforilación oxidativa, produciéndo-
se un daño celular irreparable y la muerte de las células nervio-
sas. Además, el aumento de glutamato conduce a la formación
de glutamina, produciéndose una deplección de glutamato,
que es necesario en el tejido nervioso, ya que el glutamato es
tanto un neurotransmisor como un precursor de la síntesis de
J-aminobutirato (GABA), otro neurotransmisor. Por lo tanto, la
disminución de los niveles de glutamato en el cerebro afectan
tanto a la producción de energía como a la neurotransmisión.
La hiperamonemia se produce por una incapacidad para
formar urea, lo que motiva la elevación de los niveles de amo-
nio, y puede tener diversas causas:
• Deficiencia hereditaria de alguna de la enzimas del
ciclo de la urea. Se conocen casos de deficiencia en
cada una de las enzimas del ciclo, lo que afecta de diver-
sas formas al metabolismo del nitrógeno, ya que algunos
de los intermediarios que se acumulan pueden difundir
de los hepatocitos a la sangre y pasar a la orina. En gene-
ral son enfermedades graves y provocan una elevada in-
cidencia de retraso mental y muerte prematura.
A) La deficiencia en carbamoilfosfato sintetasa I, cuya ac-
tividad puede ser de 0-50% de la normal, se transmite
como autosómica recesiva, y produce hiperamonemia
de tipo I, que conduce a los neonatos a un estado
letárgico con incapacidad para alimentarse, vómitos,
hipotermia e hiperventilación; sin tratamiento para
disminuir el nivel de amonio plasmático se produce la
muerte. El tratamiento, mediante diálisis y administra-
ción de benzoato y fenilacetato como fórmula general,
incluye administración de suplementos de arginina
con el fin de que active la N-acetilglutamato sintetasa
y de esta forma el activador alostérico producido actúe
sobre la carbamoilfosfato sintetasa I residual.
B) La deficiencia en N-acetilglutamato sintetasa produce
de moderada a severa hiperamonemia, con estado de
coma, acidosis, hiperglicemia e hiperornitinemia. El

tratamiento incluye la administración de carbamoil

glutamato, un análogo de N-acetilglutamato, que acti-
va la carbamoilfosfato sintetasa I.
C) La deficiencia en ornitina transcarbamoilasa es la más
frecuente, y puesto que el gen de esta enzima está en
el cromosoma X, la deficiencia afecta más a los varo-
nes. Cursa con retraso mental y muerte, aunque pue-
de evitarse si se reducen a tiempo los niveles de amo-
niaco. La deficiencia enzimática hace que se acumulen
glicina y glutamina, que pueden eliminarse mediante
una dieta pobre en proteínas suplementada con ben-
zoato y fenilacetato. El benzoato reacciona con la
glicina para formar hipurato, y el fenilacetato reaccio-
na con la glutamina para formar fenilacetilglutamina;
tanto el hipurato como la fenilacetilglutamina pueden
ser excretados por la orina, y con ello se elimina el
nitrógeno.
D) La deficiencia en argininosuccinato sintetasa o citruli-
nemia se hereda con carácter autosómico recesivo, y
conduce a la elevación de los niveles de citrulina en
sangre y a su excreción por la orina. Las manifestacio-
nes clínicas varian desde las formas graves (con los
síntomas descritos para la deficiencia en ornitina trans-
carbamoilasa) a la ausencia de síntomas, aunque el re-
traso mental ligero a moderado es una secuela fre-
cuente.
E) La deficiencia en argininosuccinato liasa se hereda con
carácter autosómico recesivo. En la forma grave se
produce intensa hiperamonemia neonatal que puede
llevar a la muerte; en la forma subaguda se produce
retraso mental, vómitos y hepatomegalia. Todos los
síntomas son consecuencia de la elevación de los nive-
les de argininosuccinato en plasma y líquido cefalorra-
quídeo, también está elevado en orina; asimismo hay
niveles plasmáticos altos de glutamina y alanina. Una
forma de tratamiento de esta deficiencia, y de la defi-
ciencia en argininosuccinato sintetasa, es la restricción
de las proteínas de la dieta junto con la administración
de suplementos de arginina, cuya función es formar ci-
trulina o argininosuccinato, que puede ser excretado
por la orina, y con ello se elimina nitrógeno; y además
la arginina se utiliza para la síntesis de proteínas y de
creatina.
F) La deficiencia en arginasa produce hiperargininemia,
una patología muy poco frecuente, que se hereda con
carácter autosómico recesivo, en la que se produce

una progresiva cuatriplejia espástica y retraso mental.

Los niveles de arginina están elevados en plasma y li-
quido cefalorraquídeo, así mismo los niveles de argini-
na, lisina y ornitina están elevados en orina, pero no
suele haber episodios de hiperamonemia intensa. El
tratamiento incluye una dieta baja en proteínas que
excluya la arginina.
• En los neonatos puede desarrollarse un estado de hipe-
ramonemia temporal si se retrasa la aparición de las
enzimas del ciclo. Gran parte de los prematuros con bajo
peso al nacer tienen hiperamonemia transitoria leve
(amonio 40-50 PM) durante seis a ocho semanas, son
asintomáticos y no presentan deficiencias neurológicas.
En los casos de hiperamonemia transitoria grave se alcan-
zan niveles de amonio en plasma de 400 PM, se puede
conseguir una recuperación sin secuelas si se inicia rápi-
damente el tratamiento para la eliminación del amoniaco,
que incluye hemodiálisis y diálisis peritoneal.

Biosíntesis
TEMA 16 de aminoácidos
Biosíntesis de aminoácidos no esenciales. Biosín-

tesis de aminoácidos esenciales.
Para un organismo, los aminoácidos no esenciales son Los aminoacidos

aquellos que puede sintetizar a partir de precursores fácilmente esenciales para el ser
humano son His, Ile,
accesibles, mientras que los aminoácidos esenciales son los Lem, Lys, Met, Phe,
que ha de tomar en la dieta, ya que es incapaz de sintetizarlos. Tre, Trp y Val, y han
Para los seres humanos existen nueve aminoácidos esenciales: de ingerirse con la
dieta.
histidina, isoleucina, leucina, lisina, metionina, fenilalanina,
treonina, triptófano y valina.
Los compuestos precursores de los aminoácidos, a partir de
los que se sintetizan sus cadenas carbonadas, son intermedia-
rios de la glucólisis, de la vía de las pentosas fosfato o del ciclo
de los ácidos tricarboxílicos. Los aminoácidos se pueden agru-
par en seis familias según el intermediario metabólico que
actúa de precursor: familia del D-cetoglutarato, familia del
3-fosfoglicerato, familia del oxalacetato, familia del piruvato, fa-
milia de fosfoenolpiruvato y eritrosa-4-fosfato, familia de la ri-
bosa-5-fosfato (Fig. 16.1).
BIOSÍNTESIS DE AMINOÁCIDOS
NO ESENCIALES
En los siguientes epígrafes se describen las rutas biosintéti-

cas de los aminoácidos no esenciales para los seres humanos.
A) Familia del a-cetoglutorato
Los aminoácidos que derivan del D-cetoglutarato, que es un El a-cetoglutarato es

el precusor de la bio-
intermediario del ciclo de los ácidos tricarboxílicos, son: gluta- sintesis de Glu, Gln,
mato (Glu), glutamina (Gln), prolina (Pro) y arginina (Arg). Pro y Arg.

Figura 16.1.– Agrupamiento de los aminoácidos en familias según el intermediario metabólico que
actúa de precursor en la biosíntesis.
El glutamato se sintetiza a partir de NH4 y D-cetoglutarato

por acción de la glutamato deshidrogenasa, con NADPH
como reductor. La síntesis de glutamato es una forma de in-
corporación directa de amonio y con ello contribuye a su eli-
minación. La glutamato deshidrogenasa se localiza en las mi-
tocondrias del hígado, y está regulada alostéricamente; el GTP
y el ATP son activadores alostéricos de la síntesis de glutama-
to, mientras que el ADP y el GDP activan la degradación de
glutamato.
La glutamina actúa La glutamina se sintetiza a partir de glutamato y NH4, en
como dadora de ni- una reacción catalizada por la glutamina sintetasa (Fig. 16.2);
trógeno en numero-
sas biosíntesis.
Figura 16.2.– Síntesis de glutamina a partir de glutamato y NH4

catalizada por la glutamina sintetasa.

BIOSÍNTESIS DE AMINOÁCIDOS 205
también en este caso se incorpora amonio directamente a la

glutamina, lo cual hace de este aminoácido un compuesto da-
dor de nitrógeno en numerosas biosíntesis, como la de bases
púricas o de citosina. La glutamina sintetasa se encuentra en el
hígado.
La biosíntesis de prolina (Fig. 16.3) parte de glutamato y
tiene lugar mediante varios pasos metabólicos, con consumo
de ATP y de NADPH. La regulación de la ruta se produce por
retroinhibición de la primera enzima de la vía, la J-glutamil qui-
nasa, por el producto final, la prolina.
Figura 16.3.– Biosíntesis de prolina.
La síntesis de arginina (Fig. 16.4), necesaria para la sínte-

sis de proteínas, se produce en el riñón (que carece de argina-
sa), pero la primera etapa de la ruta biosintética hasta la for-
mación de citrulina desde glutamato tiene lugar en la mucosa
intestinal; la citrulina es transportada al riñón para producir ar-
ginina. La biosíntesis se produce con consumo de ATP y de
NADPH. El control de la vía es mediante retroinhibición por
arginina sobre la primera enzima de la ruta, la N-acetilgluta-
mato sintasa.

Figura 16.4.– Biosíntesis de arginina.
B) Familia del 3-fosfoglicerato
La ruta biosintética El 3-fosfoglicerato es un intermediario de la glicolisis que

de arginina se produ- aporta el esqueleto carbonado de la serina, cuyo grupo amino
ce en mucosa intesti-
nal hasta citrulina y proviene del glutamato por transaminación (Fig. 16.5). La re-
después en riñón.
Figura 16.5.– Ruta biosintética de la serina.

gulación de la vía es por el producto final, la serina, que es un

inhibidor alostérico tanto de la primera enzima de la vía, la 3-
fosfoglicerato deshidrogenasa, como de la última, la 3-fosfose-
rina fosfatasa, ya que la 3-fosfoserina se utiliza en otros proce-
sos biosintéticos.
La glicina se forma a partir de serina en una reacción re-
versible (Fig. 16.6), catalizada por la serina hidroximetiltransfe-
rasa, dependiente de piridoxal fosfato (PLP), y que requiere te-
trahidrofolato (THF) como coenzima.
Figura 16.6.– Biosíntesis de glicina a partir de serina.
La serina y la glicina son precursores de numerosos com-

puestos. Etanolamina y colina, ambas componentes de los lípi-
dos, son derivados de la serina. La glicina participa en la bio-
síntesis de purinas, así como en la de los sistemas cíclicos por-
firínicos de la clorofila, el grupo hemo y la vitamina B12;
igualmente, está implicada en la biosíntesis de glioxilato, el cual
puede oxidarse a oxalato, y en la de ácidos biliares, creatina y
glutation.
La biosíntesis de cisteína a partir de serina es una vía me-
tabólica que consta de dos etapas (Fig. 16.7). La vía se regula
por producto final, ya que la cisteína ejerce retroinhibición so-
bre la serina acetil transferasa, además de inhibir, junto con el
sulfuro, la síntesis de esta enzima.
También se forma cisteína en la ruta degradativa de metio-
nina (Fig. 16.7).
Figura 16.7.– Biosíntesis de cisteína a partir de serina.

C) Familia del oxalacetato
El oxalacetato es un intermediario del ciclo de los ácidos tri-

carboxílicos, y a partir de él se sintetizan dos aminoácidos no
esenciales, el aspartato y la asparagina (Fig. 16.8). El asparta-
to se produce por transaminación con el par glutamato/D-ceto-
glutarato, y a partir de él se sintetiza asparagina en una reac-
ción catalizada por la asparagina sintetasa, con gasto de ATP y
con glutamina como dador de grupo amino. La asparagina se
sintetiza en la mayoría de las células, una excepción son algu-
nas células leucémicas, que carecen de asparagina sintetasa.
Figura 16.8.– Biosíntesis de aspartato y asparagina a partir de oxalacetato.
D) Familia del piruvato
El aminoácido no esencial que se

sintetiza a partir de piruvato es la alani-
na mediante una transaminación rever-
sible dependiente del par glutamato/D-
cetoglutarato, catalizada por la alanina
transaminasa (Fig. 16.9). En el músculo,
Figura 16.9.– Biosíntesis de alanina a partir de piruvato. el piruvato proveniente de la glucólisis
se transforma en alanina, que es trans-
portada hasta el hígado, donde es transformada en piruvato,
que se incorpora a la gluconeogénesis para generar glucosa,
necesaria para los tejidos periféricos; estas transformaciones
constituyen el ciclo de la alanina.
BIOSÍNTESIS DE AMINOÁCIDOS ESENCIALES
Los aminoácidos esenciales para el ser humano, los cuales

ha de ingerir en la dieta, pueden ser sintetizados por otros or-

ganismos, entre ellos las bacterias y las plantas, a partir de los

precursores comentados anteriormente (Fig. 16.1).
A) Familia del oxalacetato
Las plantas superiores y las bacterias poseen una ruta de

síntesis que parte de aspartato, el cual proviene del oxalacetato,
y que se ramifica para conducir a la síntesis de lisina, treonina y
metionina. La isoleucina se sintetiza a partir de treonina.
El aspartato se transforma, por acción de una quinasa y Serina y glicina son
una deshidrogenasa, en E-semialdehído aspártico, que por ac- precursores de nume-
rosos compuestos.
ción de la homoserina deshidrogenasa produce homoserina
(Fig. 16.10). En la bacteria E. coli existen tres aspartato quina-
sas y dos homoserina deshidrogenasas. La aspartato quinasa
I-homoserina deshidrogenasa I es, en realidad, una sola enzima
bifuncional que cataliza la primera etapa de la biosíntesis de
treonina e isoleucina, así como la formación de homoserina a
partir de E-semialdehído aspártico; la aspartato quinasa II-ho- Tanto glicina como
moserina deshidrogenasa II también es una enzima bifuncio- cisteína se sintetizan
a partir de serina.
nal, que cataliza las dos reacciones descritas, en el metabolismo
de la metionina; la aspartato quinasa III cataliza la primera eta-
pa de la biosíntesis de lisina.
La biosíntesis de lisina parte de E-semialdehído aspártico, La biosíntesis de lisi-
que reacciona con piruvato para formar 2,3-dihidrodipicolinato na parte de b-semial-
dehído aspártico, que
por acción de la dihidrodipicolinato sintasa, a partir de este procede de aspartato.
punto se suceden otros siete pasos metabólicos que conducen
a la formación de lisina. La lisina inhibe alostericamente a la
aspartato quinasa III y además reprime su biosíntesis; igual-
mente, la lisina también inhibe alostericamente la primera eta-
pa de la ramificación que conduce a su biosíntesis, es decir, la
catalizada por la dihidrodipicolinato sintasa.
La biosíntesis específica de metionina comienza en homo-
serina, que reacciona con succinil-CoA por acción de la homo-
serina succiniltransferasa para formar O-succinilhomoserina,
cuyo grupo succinilo es desplazado por la cisteína, formándose
cistationina por acción de la cistationina J-sintasa, a continua-
ción se forma homocisteína por liberación de piruvato, y se in-
corpora un grupo metilo, donado por el N5-metiltetrahidrofola-
to, formándose metionina. La metionina inhibe la síntesis de la
aspartato quinasa II-homoserina deshidrogenasa II, y además
inhibe alostéricamente a la homoserina succiniltransferasa.
La homoserina también es el precursor de la treonina. La
homoserina sufre una fosforilación dependiente de ATP catali-
zada por la homoserina quinasa, y se forma O-fosfohomoseri-
na, cuyo fosfato es eliminado por acción de la treonina sintasa

Figura 16.10.– Transformación del aspartato en homoserina, y ramificaciones que conducen a

la síntesis de lisina, treonina y metionina. Biosíntesis de isoleucina.
para formar treonina. Tanto la treonina como la homoserina in-

hiben alostéricamente la actividad quinasa de la aspartato qui-
nasa I-homoserina deshidrogenasa I, y la treonina también pro-
duce represión génica sobre esta enzima, además de inhibir
alostéricamente la homoserina quinasa.
La isoleucina se biosintetiza a partir de treonina, cuya de-
saminación, catalizada por la treonina desaminasa, genera
D-cetobutirato, al cual se transfiere un grupo hidroxietilo prove-
niente del pirofosfato de hidroxietiltiamina, catalizada por la
acetohidroxiácido sintasa, para formar D-ceto-D-hidroxibutira-

to, que, tras una reducción, seguida de deshidratación y transa-

minación, genera isoleucina. La regulación se produce por re-
troinhibición de la primera etapa específica, así, la isoleucina
inhibe a la treonina desaminasa.
B) Familia del piruvato
El piruvato es el precursor de la biosíntesis de valina y leuci-

na en plantas y bacterias en una ruta que es común hasta la
formación de D-cetoisovalerato (Fig. 16.11). La ruta comienza
con la transferencia de un grupo hidroxietilo del pirofosfato de
hidroxietiltiamina al piruvato, catalizada por la acetohidroxiáci-
do sintasa, para formar D-acetolactato, que se reduce en pre-
sencia de NADPH, y posteriormente se deshidrata para formar
D-cetoisovaletato. La biosíntesis de valina se produce a partir
de D-cetoisovaletato por transaminación con glutamato. En
cuanto a la biosíntesis de leucina, el D-cetoisovaletato se aceti-
la, reacción catalizada por la D-isopropilmalato sintasa, para
formar D-isopropilmalato, que, tras una isomerización y una
descarboxilación oxidativa, sufre una transaminación depen-
diente de glutamato para formar leucina. La regulación se pro-
duce por retroinhibición, la leucina inhibe a la D-isopropilmala-
to sintasa.
C) Familia de fosfoenolpiruvato y eritrosa 4-fosfato
Los aminoácidos aromáticos (fenilalanina, tirosina y triptó-

fano) se sintetizan a partir de fosfoenolpiruvato (PEP) y eritrosa
4-fosfato, en una ruta que conduce a la formación de corisma-
to, compuesto a partir del que se ramifican las rutas que con-
ducen a fenilalanina, tirosina y triptófano (Fig. 16.12).
La síntesis de corismato comienza con la condensación de
fosfoenolpiruvato (un intermediario de la glicolisis) y eritrosa
4-fosfato (intermediario de la ruta de las pentosas fosfato), cata-
lizada por la 2-ceto-3-desoxi-D-arabino-heptulosonato 7-fosfato
sintasa (DHAP sintasa), para formar 2-ceto-3-desoxi-D-arabino-
heptulosonato 7-fosfato (DHAP), que se cicla en una reacción
dependiente de NAD, catalizada por la deshidroquinato sinta-
sa, para formar 3-deshidroquinato, compuesto que, tras varios
pasos metabólicos, se transforma finalmente en corismato. Las
bacterias como E. coli poseen tres deshidroquinato sintasas dis-
tintas, una se inhibe por Phe, otra por Tyr y otra por Trp.
La síntesis de fenilalanina y tirosina pasa por la transfor-
mación del corismato en prefenato, catalizada por la corismato

Figura 16.11.– Biosíntesis de valina y leucina.

Figura 16.12.– Ruta biosintética de fenilalanina, tirosina y triptófano.

mutasa. El prefenato puede sufrir una deshidratación y descar-

boxilación, catalizada por la prefenato deshidratasa, que con-
duce a fenilpiruvato, el cual por transaminación genera fenilala-
nina; pero si el prefenato experimenta una descarboxilación
oxidativa dependiente de NAD, catalizada por la prefenato
deshidrogenasa, se transforma en 4-hidroxifenilpirúvico, el cual
se transamina para formar tirosina.
La biosíntesis bacteriana de triptófano parte de corismato,
que se transforma en antranilato por acción de la antranilato
sintasa, con glutamina como dador de nitrógeno. El antranila-
to reacciona con el 5-fosforribosil-1-pirofosfato (PRPP),
formándose N-(5c-fosforribosil)-antranilato por acción de la
antranilato fosforribosil-transferasa, que tras isomerización,
descarboxilación y eliminación de gliceraldehído 3-fosfato, da
lugar a triptófano.
En cuanto a la regulación de estas biosíntesis, el corismato
inhibe alostéricamente a la DHAP sintasa; en E. coli hay tres
isoenzimas de la DHAP sintasa, cada una de las cuales se inhi-
be por cada uno de los tres aminoácidos aromáticos. El prefe-
nato inhibe a la corismato mutasa. La fenilalanina y la tirosina
inhiben también el primer paso de sus biosíntesis específicas: la
Phe inhibe a la prefenato deshidratasa, y la Tyr inhibe a la pre-
fenato deshidrogenasa. Igualmente, el triptófano inhibe a la an-
tranilato sintasa.
D) Familia de la ribosa 5-fosfato.
La histidina puede ser sintetizada por la mayoría de los mi-

croorganismos, en una ruta compleja que parte de ribosa
5-fosfato (Fig. 16.13) y tienen 11 pasos metabólicos. La vía co-
mienza con la formación de 5-fosforribosil-1-pirofosfato
Figura 16.13.– Biosíntesis de histidina.

(PRPP) a partir de ribosa 5-fosfato y ATP, catalizada por la

PRPP sintetasa. El siguiente paso está catalizado por la fosforri-
bosil transferasa, con incorporación de ATP, para formar N1-
(5c-fosforribosil)-ATP; compuesto que experimenta la pérdida
del pirofosfato, una deshidratación y una isomerización para
formar N1-(5c-fosforribosilformimino)-5-aminoimidazol-4-car-
boxamida-1-ribonucleótido, que, por eliminación de 5-aminoi-
midazol- 4-carboxamida-1-ribonucleótido y entrada de nitróge-
no procedente de la glutamina, da lugar a imidazol glicerol fos-
fato, que, tras diversos pasos metabólicos, que incluyen
transaminación y oxidación, origina histidina. La histidina es
un retroinhibidor alostérico de la fosforribosiltransferasa, que
cataliza la primera etapa específica de su biosíntesis.
RESUMEN
De los 20 aminoácidos que constituyen las proteínas,

nueve de ellos son esenciales para el ser humano, estos
son histidina, isoleucina, leucina, lisina, metionina, fenila-
lanina, treonina, triptófano y valina. Los seres humanos
deben ingerir estos aminoácidos esenciales en la dieta.
Sin embargo, el hombre es capaz de sintetizar los otros 11
aminoácidos (alanina, arginina, aspártico, asparagina, cis-
teína, glutámico, glutamina, glicina, prolina, serina y tiro-
sina, éste último a partir de fenilalanina) a partir de inter-
mediarios de la glucólisis y del ciclo de los ácidos tricar-
boxílicos.
Los precursores de los aminoácidos no esenciales para
el hombre son:
A) el D-cetoglutarato, del cual procede el esqueleto
carbonado de glutamato, glutamina, prolina y ar-
ginina;
B) el 3-fosfoglicerato, intermediario glicolítico a partir
del que se sintetizan la serina, la glicina y la císteina;
C) del oxalacetato proceden el aspartato y la aspa-
ragina;
D) y a partir de piruvato se sintetiza la alanina.
La regulación de estas vías biosínteticas suele ser mediante
retroinhibición de la primera enzima de la ruta por el pro-
ducto final.
Los aminoácidos esenciales para el ser humano pue-
den ser sintetizados por otros organismos, entre ellos las

bacterias y las plantas, a partir de precursores que son

compuestos intermediarios del ciclo de los ácidos tricar-
boxílicos, de la glucólisis o de la vía de las pentosas fosfa-
to. Así, a partir de oxalacetato se sintetiza aspartato, a par-
tir del cual se producen lisina, metionina y treonina, y a
partir de ésta se sintetiza isoleucina. El piruvato es el pre-
cursor de la síntesis de valina y leucina. Los aminoácidos
aromáticos, fenilalanina, tirosina y triptófano, se sintetizan
a partir de fosfoenolpiruvato y eritrosa 4-fosfato, en una
ruta que conduce a corismato, punto de ramificación para
la síntesis de estos aminoácidos. La histidina se sintetiza
mediante una ruta compleja que parte de ribosa 5-fosfato.
La regulación de estas vías es compleja, en general se pro-
duce mediante inhibición de las enzimas clave de las rutas
por el producto final.
Hiperglicinemia no cetósica
La glicina es un aminoácido no esencial para el ser humano

que se sintetiza a partir de serina, y también en la ruta degra-
dativa de treonina. El catabolismo de la glicina consiste en su
escisión en CO2 y en un grupo monocarbonado que es transfe-
rido al tetrahidrofolato para formar N5,N10-metilentetrahidrofo-
lato, compuesto que actúa como dador de grupos metilo en di-
versas reacciones; esta reacción de degradación de la glicina
está catalizada por el sistema enzimático de degradación de gli-
cina, cuya deficiencia causa la hiperglicinemia no cetósica. Este
sistema enzimático consta de cuatro subunidades polipeptídi-
cas, en tres de las cuales se han detectado deficiencias. En esta
patología, que se hereda como autosómica recesiva, se produ-
ce una elevación de los niveles de glicina en los líquidos corpo-
rales, es decir, hay hiperglicinemia e hiperglicinuria moderadas
a intensas, y un aumento de la concentración de glicina en el lí-
quido cefalorraquídeo. Puesto que la glicina es uno de los neu-
rotransmisores inhibidores, su incremento en líquido cefalorra-
quídeo puede ser una de las causas de las alteraciones neuroló-
gicas que se observan, que incluyen retraso mental y
convulsiones. No se conoce ningún tratamiento eficaz, la re-
ducción de los niveles de glicina mediante transfusiones sanguí-
neas, y la restricción del aminoácido de la dieta, así como la
administración de folato, no modifican las alteraciones neuroló-
gicas. En los casos más graves, la enfermedad es mortal.

Biosíntesis
TEMA 17 de porfirinas
Biosíntesis de porfirinas y del grupo hemo. Regula-

ción. Formación de pigmentos biliares.
La principal función de los glóbulos rojos o hematíes consis-

te en servir de transportadores de hemoglobina, la cual es res-
ponsable a su vez del transporte de oxígeno desde los pulmo-
nes a los tejidos. En algunos animales inferiores la hemoglobi-
na circula como una proteína libre en el plasma, pero en los
animales superiores y en el hombre debe viajar dentro de los
hematíes o eritrocitos, para evitar su filtración a través de los
capilares tisulares y renales. Los eritrocitos poseen la capacidad
de concentrar la hemoglobina en el líquido intracelular hasta
unos 34 g/dL. Cuando la formación de hemoglobina es defi-
ciente, el transporte de oxígeno disminuye y el tamaño de los
hematíes puede verse reducido, alterando el valor hematocrito
(porcentaje de la sangre que corresponde a las células, normal-
mente entre el 40-45%).
BIOSÍNTESIS DE PORFIRINAS Y
DEL GRUPO HEMO
Los anillos porfirínicos o grupos hemo, son grupos prostéti- Los anillos porfiríni-
cos de proteínas conjugadas, hemoproteínas como hemoglobi- cos o grupos hemo
son grupos prostéti-
na, mioglobina y citocromos de la cadena de transferencia de cos de proteínas con-
electrones y de enzimas como catalasas y peroxidasas. jugadas.
La estructura de los grupos hemo consiste en un anillo por-
firínico plano constituido por cuatro anillos pirrol que rodean
un átomo de hierro, el cual puede establecer seis enlaces de co- El grupo hemo consta
ordinación con atomos diferentes. Cuatro de ellos son atomos de un anillo porfiríni-
de nitrógeno de los anillos pirrol, cuya unión permite mantener co plano, formado
por cuatro anillos pi-
el hierro en el plano del anillo de porfirina. Los otros dos enla- rrol que rodean un
ces pueden establecerse con distintos ligandos dependiendo átomo de hierro.

del tipo de hemoproteína. En la cadena de transporte de elec-

trones existen distintos tipos de citocromos, por su estructura
proteica y por la naturaleza de los grupos sustituyentes en el
hemo. Los enlaces se producen con atomos de los aminoácidos
de la cadena peptídica del citocromo. En las hemoproteínas fi-
jadoras de oxígeno, sólo uno de estos dos enlaces se establece
con la porción apoproteica, ya que el otro es ocupado por la
molécula de oxígeno (Fig. 17.1).
Figura 17.1.– Estructura del grupo hemo. Los sustituyentes son:

H3C , Metil o metilo (M); CH CH2, vinil o vinilo (V);
CH2 CH2COO ó CH2 CH2 COOH, propionilo o propionato (P)
La biosíntesis del La biosíntesis del anillo porfirínico comienza por condensa-

anillo porfirínico co- ción del aminoácido glicina y succinil-CoA, intermediario del
mienza por condensa-
ción del aminoácido ciclo de Krebs, para formar delta-aminolevulinato (Fig. 17.2).
glicina y succinil-
CoA, que rinden del-
ta-aminolevulinato.
Figura 17.2.– Comienzo de la biosíntesis del anillo porfirínico.
La reacción es catalizada a nivel mitocondrial por una sinta-

sa, limitante de la velocidad de reacción. El grupo hemo inhibe
la síntesis de la enzima y bloquea su transporte hasta la mito-
condria, donde se produce la catálisis.

BIOSÍNTESIS DE PORFIRINAS 219
Figura 17.3.– Síntesis de porfobilinógeno.
La segunda etapa se produce por condensación de dos

moléculas de delta-aminolevulinato para proporcionar por-
fobilinógeno, reacción de deshidratación con liberación de
dos moléculas de agua. Esta reacción ocurre en el citoplas-
ma celular.
Cuatro moléculas de porfobilinógeno se unen para rendir
un tetrapirrol lineal con pérdida de cuatro grupos amonio. A
continuación, por acción de otra sintasa, se produce la forma-
ción del anillo o uroporfirinógeno III. Cuando esta reacción es
catalizada por una sintasa simple se produce en su lugar uro-
porfirinógeno I, isómero de carácter no fisiológico. La etapa
siguiente es catalizada por una descarboxilasa para propor-
cionar coproporfirinógeno III, que vuelve a la mitocondria
para ser oxidado hasta protoporfirina IX, por transformación
de dos restos de propionato en vinilo e instauración del anillo
porfirínico.
La incorporación del hierro se produce en forma ferrosa
por acción de una ferroquelatasa, lo que produce finalmente el
grupo hemo, al que confiere las características de coloración
que presentan las hemoproteínas (Fig. 17.4).

Figura 17.4.– Formación del grupo hemo. Los sustituyentes son: A: acetilo o acetato, CH2 COOH;
P: propionilo o propionato, CH3 CH2 COOH; V: vinilo, CH CH2; M: metil o metilo, CH3.
REGULACIÓN
La incorporación del Se realizada fundamentalmente por inhibición de la enzima

hierro se produce en d-aminolevulínico-sintasa (Fig. 17.2), que lleva a cabo el pro-
forma ferrosa
pio grupo hemo. Este mecanismo opera de igual forma en to-

dos los tejidos que sintetizan hemoproteínas. En los eritrocitos

o glóbulos rojos, la enzima es inducida por la eritropoyetina,
hormona responsable de la regulación de la eritropoyEsis o for-
mación de los hematíes en la médula ósea. La enzima estimula
también la síntesis de la apoproteína por parte de los riboso-
mas, que se unirá al grupo hemo en el citoplasma. En el híga-
do es el hierro el que lleva a cabo la inducción enzimática,
aunque puede producirse por algunos esteroides e incluso en
situaciones de ayuno.
FORMACIÓN DE PIGMENTOS BILIARES
Los eritrocitos son células anucleadas, por lo que no pue- La regulación de la

den reproducirse, ni renovar las enzimas necesarias para la síntesis del hemo se
produce por inhibi-
obtención de energía. Tras su formación en la medula ósea, ción de la enzima
pasan a la circulación, donde permanecen aproximadamente delta-aminolevulíni-
120 días antes de su destrucción, que se produce como conse- co-sintetasa.
cuencia de su propio desgaste y envejecimiento. La fragilidad
de la membrana celular facilita la ruptura al pasar por capilares
sinusoidales como los del bazo, lugar preferente de la destruc-
ción o eritrocatéresis. También es frecuente su ruptura en hí-
gado y médula ósea. La hemoglobina es captada por los
macrófagos y desdoblada en sus dos componentes. La porción
proteica es hidrolizada hasta aminoácidos para su utilización
metabólica, mientras que el grupo hemo es degradado inicial-
mente a biliverdina por acción de una hemooxigenasa depen-
diente del citocromo P450. La reacción requiere oxígeno y
NADPH, el cual también es necesario para la reducción de bili-
verdina a bilirrubina (Fig. 17.5).
La bilirrubina es insoluble en el plasma sanguíneo, por lo La bilirrubina insolu-
que necesita de la albúmina para su transporte hasta el hígado, ble requiere de la al-
búmina para su trans-
donde es solubilizada por unión al ácido glucurónico, derivado porte hasta el hígado.
de la glucosa. La bilirrubina conjugada recibe el nombre de di-
glucurónido de bilirrubina y es almacenada en la vesícula biliar
formando parte de la bilis (Fig. 17.6).
El hierro liberado, pasa al plasma donde es captado por La bilirrubina soluble
una proteína específica para su trasporte, la transferrina, capaz o conjugada forma
parte de la bilis.
de fijar dos atomos de hierro en estado férrico y conducirlos
hasta los lugares de utilización, fundamentalmente médula
ósea e hígado, o bien será captado por la apoferritina para su
almacenamiento en forma de ferritina como hierro de depósi-
to. Cuando la cantidad total de hierro en el organismo supera
la capacidad de almacenamiento por parte de la apoferritina,
la ferritina se condensa formando hemosiderina, compuesto
muy poco soluble que carece casi por completo de intercam-

La vida media de los

eritrocitos en la cir-
culación es aproxi-
madamente de 120
días.
La fragilidad de la
membrana celular fa-
cilita la eritrocatére-
sis o rotura de los eri-
trocitos a su paso por
los capilares sinusoi-
dales.
Figura 17.5.– Formación de la bilirrubina.
Figura 17.6.– Solubilización de la bilirrubina
bio metabólico. Las pérdidas fisiológicas de hierro son míni-

mas y su regulación se produce a nivel de la absorción digesti-
va. Sólo se absorbe el hierro necesario para equilibrar las pér-
didas. La disminución de los depósitos de hierro favorecen la
absorción de la vit. C, aminoácidos y citratos, mientras que la
saturación de los depósitos inhibe la absorción junto con los
tanatos, fitatos y fosfatos que se comportan como antinutrien-
tes de tipo mineral.

La regulación del hie-

RESUMEN rro se produce a nivel
de su absorción di-
gestiva.
Las porfirinas se sintetizan a partir de glicina y succinil
CoA por condensación dando delta-aminolevulinato. La
condensación de dos moléculas de dicho compuesto, rin-
den porfobilinógeno y cuatro moléculas de este último
compuesto, se acoplan para formar un tetrapirrol lineal,
que se cicla para formar uroporfirinógeno III. La oxidación
y modificación de las cadenas laterales producen proto-
porfirina IX, la cual adquiere un átomo de hierro por que-
lación para formar el grupo hemo. La regulación se lleva a
cabo por inhibición de la síntesis de la enzima delta-ami-
nolevulinato sintetasa, limitante de esta vía, inhibición que
realiza el propio grupo hemo.
La destrucción de los hematíes viejos produce la libera-
ción del grupo hemo y su degradación a biliverdina, que
será reducida para formar bilirrubina soluble a nivel hepá-
tico y facilitar su excreción a través de la secreción biliar.
Porfirias
Incluyen un grupo de enfermedades adquiridas o congéni-

tas, de carácter autosómico dominante o recesivo, causadas
por el déficit de una enzima que interviene en la síntesis del
grupo hemo. La Porfiria eritropoyética congénita o Enfer-
medad de Günther es una enfermedad de carácter autosómi-
co recesivo, caracterizada por un defecto en la síntesis de la
enzima uroporfirinógeno III cosintetasa, necesaria para la for-
mación de uroporfirinógeno III. La enfermedad cursa con
aumento del isómero uroporfirinógeno I afuncional y de sus
derivados. La destrucción prematura de los eritrocitos y la ex-
creción renal del uroporfirinógeno I colorea la orina de forma
importante al nacimiento. El deposito en los dientes ocurre tar-
diamente, provocando fluorescencia rojiza o eritrodoncia por
acción de la luz ultravioleta. Existe fotosensibilidad muy grave.
El tratamiento consiste en evitar la exposición solar y adminis-
tración de derivados hémicos que inhiben la síntesis de la enzi-
ma delta-aminosintasa y el acúmulo de intermediarios no fi-
siológicos. A veces es necesario la extirpación quirúrgica del
bazo para evitar la hemolísis exagerada.

Ictericias hereditarias
Incluyen un grupo de enfermedades congenitas de tipo

autosómico dominante. La más frecuente es el síndrome de
Gilbert, que se caracteriza por un déficit parcial de glucuronil
transferasa, necesario para la conjugación y consiguiente solu-
bilización hepática de la bilirrubina. El aumento de bilirrubina
no conjugada o indirecta en plasma, es moderado y suele ser
intermitente, aumentando con el ayuno, ejercicio físico, fiebre,
infecciones, etc. El fenobarbital disminuye los niveles plasmáti-
cos de bilirrubina por inducción enzimática, aunque no se re-
quiere tratamiento.

Metabolismo
TEMA 18 de los nucleótidos:
biosíntesis
y degradación
Digestión de purinas y pirimidinas: vías de recupe-

ración o salvamento. Biosíntesis de novo de los nu-
cleótidos de purina. Biosíntesis de novo de nucleó-
tidos de pirimidina. Síntesis de desoxirribonucleó-
tidos. Biosíntesis de los desoxirribonucleótidos de
timina. Degradación de purinas: síntesis de ácido
úrico. Degradación de pirimidinas. Fármacos anti-
cancerosos que bloquean las vías de biosíntesis de
nucleótidos.
La biosíntesis de los nucleótidos constituye un proceso

muy importante en todas las células, puesto que son los pre-
cursores del ADN y ARN, el ATP y en gran medida del GTP;
son los principales transmisores de la energía química, e
igualmente componentes de cofactores como NAD, FAD,
coenzima A, así como de intermedios biosintéticos activados
como UDP-glucosa o CDP-diacilglicerol. Algunos nucleótidos,
tales como el cAMP y el cGMP, actúan también como segun-
dos mensajeros.
Las rutas metabóli-
Las rutas metabólicas que conducen a la formación de nu- cas que conducen a
cleótidos son: las vías de novo y las vías de recuperación. La la formación de nu-
síntesis de novo de los nucleótidos empieza a partir de sus cleótidos son: las
vías de novo y las
precursores metabólicos, aminoácidos, ribosa-5-fosfato, CO2 y vías de recuperación.
NH3. Las rutas de recuperación reciclan las bases libres y los La síntesis de novo
nucleósidos liberados a partir de la ruptura de los ácidos nu- de los nucleótidos
empieza a partir de
cleicos. sus precursores me-
El anillo de purina se forma a partir de la ribosa-5-fosfato, tabólicos, aminoáci-
sobre el que se forma paso a paso un núcleo purínico, lo que dos, ribosa-5-fosfato,
CO2 y NH3. Las rutas
conduce a la formación de un nucleótido. El de pirimidina se de recuperación reci-
sintetiza como ácido orótico u orotato, unido a ribosa-5-fosfato, clan las bases libres
y se transforma en los nucleótidos de pirimidina. y los nucleósidos li-
berados a partir de la
Muchas células disponen de mecanismos de recuperación ruptura de los ácidos
o salvamento para recuperar las bases libres que resultan de la nucleicos.

degradación hidrolítica de los nucleótidos. Tanto las purinas

como las pirimidinas comparten varios precursores importan-
tes en las vías de síntesis de novo. El 5-fosfo-D-D-ribosa-1-pi-
rofosfato (PRPP), resulta esencial para ambos tipos de bases;
en ambas vías hay un aminoácido como precursor importante:
la glicina en el caso de las purinas y el aspartato en el caso de
las pirimidinas, siendo la glutamina y el aspartato o aspártico
la fuente más importante de grupos amino. Las concentracio-
nes intracelulares de nucleótidos están reguladas mediante
una serie de enzimas controladas alostéricamente. Los 2-deso-
xirribonucleótidos se generan directamente a partir de los ribo-
nucleótidos.
DIGESTIÓN DE PURINAS Y PIRIMIDINAS:

VÍAS DE RECUPERACIÓN O SALVAMENTO
La mayoría de los organismos pueden sintetizar los nucleó-

tidos a partir de los nucleósidos o las bases de las que disponen
por haberlas ingerido con los alimentos o por haberlas obteni-
do mediante la degradación enzimática de los ácidos nucleicos.
En las vías de recupe- Estos procesos se denominan vías de recuperación o rutas de
ración o rutas de sal- salvamento, ya que en estas vías se utilizan los compuestos de
vamento utilizan los
compuestos de puri- purinas y pirimidinas preformadas para de nuevo sintetizar nu-
nas y pirimidinas pre- cleótidos que, de lo contrario, se perderían como bases libres
formadas para de mediante la biodegradación.
nuevo sintetizar nu-
cleótidos que, de lo La degradación de los ácidos nucleicos puede producirse
contrario, se perde- intracelularmente, como consecuencia de la muerte celular o,
rían como bases li- en los animales, por la digestión de los ácidos nucleicos ingeri-
bres mediante la bio-
degradación. dos en los alimentos.
En los animales, la hidrólisis extracelular de los ácidos nu-
cleicos ingeridos constituye la principal vía de obtención de ba-
ses y nucleósidos. Los procesos de degradación son similares a
los que intervienen en la digestión proteica.
La fragmentación se inicia en los enlaces fosfodiéster inter-
nos, catalizada por endonucleasas, como la ribonucleasa o la
desoxirribonucleasa pancreática, que actúan digiriendo los áci-
dos nucleicos en el intestino delgado; así se generan oligonu-
cleótidos, que se fragmentan de forma exonucleotídica por ac-
ción de las enzimas denominadas fosfodiesterasas, generándo-
se mononucleótidos.
Los nucleótidos pueden fragmentarse de forma hidrolítica
mediante un grupo de fosfomonoesterasas denominadas nucle-
otidasas, dando ortofosfato y el correspondiente nucleósido,
que sufre ruptura para dar la base por acción de la nucleósido
fosforilasa.

METABOLISMO DE LOS NUCLEÓTIDOS: BIOSÍNTESIS Y DEGRADACIÓN 227
Estas reacciones son reversibles, de manera que una nu-

cleósido fosforilasa puede catalizar también el primer paso de
síntesis de salvamento o recuperación de nucleótidos a partir
de bases libres. Cuando esto ocurre, el nucleósido producido
puede fosforilarse por el ATP, por la acción de una nucleósido
quinasa. Si las bases o los nucleósidos no se reutilizan para la
síntesis de ácidos nucleicos a través de las rutas de salvamento,
las bases púricas y pirimidínicas continúan degradándose, has-
ta ácido úrico o E-ureido propionato.
Otra ruta de salvamento o recuperación es la que sintetiza
nucleósidos 5c-fosfato directamente a partir de las bases libres.
En esta ruta interviene una clase de enzimas denominadas fos-
forribosiltransferasas y un azúcar fosfato activado, el 5-fosfo-D-
D-ribosil-1-pirofosfato (PRPP). El PRPP es un intermediario El PRPP es un inter-
clave en la síntesis de novo de los nucleótidos púricos y piri- mediario clave en la
síntesis de novo de
midínicos. Se forma por acción de la PRPP sintetasa que activa los nucleótidos púri-
el C1 de la ribosa-5-fosfato mediante la transferencia al mismo cos y pirimidínicos.
del grupo pirofosfato del ATP (Fig. 18.1).
Figura 18.1.– Síntesis de 5-fosfo-D-D-ribosil-1-pirofosfato (PRPP).

La fosforribosiltransferasa cataliza la transferencia reversible

de una base libre a la ribosa del PRPP, dando lugar a un nu-
cleósido monofosfato y pirofosfato.
El pirofosfato se transforma en fósforo inorgánico por ac-

ción de la pirofosfatasa. Ello hace que las fosforribosil transfe-
rasas actúen la mayor parte de las veces en la dirección de la
biosíntesis de nucleótidos.
pirofosfatasa
PPi o 2 Pi
Igualmente
adenosina fosforribosil
transferasa
PRPP adenina o AMP PPi
BIOSÍNTESIS DE NOVO DE LOS

NUCLEÓTIDOS DE PURINA
Los dos precursores de los nucleótidos

purínicos de los ácidos nucleicos son la
adenosina 5c-monofosfato (AMP) y la
guanosina-5c-monofosfato (GMP). Estos
nucleótidos contienen respectivamente
las bases púricas adenina y guanina.
El anillo purínico se sintetiza de novo
en las células de los mamíferos utilizando
aminoácidos como dadores de C y N, y
CO2 como dador de C (Fig. 18.2).
La vía de biosíntesis de las purinas,
Figura 18.2.– Origen de los átomos de las purinas. que conduce a la síntesis de inosina

5c-monofosfato (IMP) o ácido inosínico, fue descrita por J. Bu-

chanan y G. Robert Greenberg en la década de los cincuenta
consiste en diez pasos metabólicos. Varias de las reacciones re-
quieren la hidrólisis de ATP, por lo cual es un proceso caro
energéticamente.
Todas las enzimas implicadas en la síntesis de los nucleóti- El anillo purínico se
dos purínicos se encuentran en el citosol de la célula. No obs- sintetiza de novo en
las células de los
tante, no todas las células (por ejemplo, los eritrocitos) son ca- mamíferos utilizando
paces de realizar esta síntesis. La ruta biosintética parte del 5- aminoácidos como
fosfo-D-D-ribosil-1-pirofosfato (PRPP) (Fig. 18.3). dadores de C y N, y
CO2 como dador de C.
El paso limitante en la síntesis de novo de los nucleótidos
de purina es la formación de 5-fosforribosilamina (PRA) a par-
tir de PRPP y glutamina (reacción 1). El grupo amina, proce-
dente de la cadena lateral de la glutamina, desplaza al grupo El paso limitante en
pirofosfato unido al C1 del PRPP. En esta reacción la configura- la síntesis de novo de
los nucleótidos de
ción del C1 se invierte de D a E. El enlace C-N-glicosídico resul- purina es la forma-
tante tiene la configuración E, característica de los nucleótidos ción de 5-fosforribo-
que tienen lugar en la naturaleza. Esta reacción se ve favoreci- silamina (PRA) a par-
tir de PRPP y gluta-
da por la hidrólisis del pirofosfato por la pirofosfatasa para for- mina.
mar ortofosfórico.
pirofosfatasa
PPi o 2 Pi
En contra de lo que parece lógico, esto es, que el anillo

purínico se formaba en primer lugar y que después se le unía la
cadena lateral de la D-ribosa-fosfato, se ha descubierto que el
material de partida es una forma activada de la ribosa-5-fosfa-
to, sobre el que se forma, paso a paso, un núcleo purínico, lo
que conduce directamente a la producción de un nucleótido.
Para la formación del ácido inosínico (IMP) a partir de la Para la formación del
D-ribosa-5-fosfato se han utilizado 5 ATP y en conjunto seis ácido inosínico (IMP)
a partir de la D-ribo-
grupos fosfato de alta energía, teniendo en consideración que sa-5-fosfato se han
el grupo pirofosfato desplazado del 5-fosforribosil-1-pirofosfa- utilizado 5 ATP y en
to resulta finalmente hidrolizado a ortofosfato por una pirofos- conjunto seis grupos
fosfato de alta ener-
fatasa. gía.
En la vía de síntesis del IMP, existen tres etapas que son in-
hibidas por agentes antibacterianos específicos. El antibiótico
azaserina bloquea las dos transferencias enzimáticas del grupo
amino de la glutamina y compite con ella, reacciones 1 y 4.
Las sulfonamidas que inhiben el crecimiento de muchas bacte- Las células de los
rias, impiden la formación de ácido fólico, reacciones 3 y 9, así, vertebrados contie-
nen las actividades
al inhibir indirectamente la última etapa, impiden la biosíntesis enzimáticas que cata-
purínica. lizan varios de los pa-
Las células de los vertebrados contienen las actividades en- sos de esta ruta en
dominios separados
zimáticas que catalizan varios de los pasos de esta ruta en do- de enzimas multifun-
minios separados de enzimas multifuncionales. Así en las reac- cionales.

Figura 18.3.– Síntesis del IMP (ácido inosínico). R 5 P representa el grupo 5-fosfo-D-ribosilo.

Figura 18.3.– (Continuación).
ciones 2, 3 y 5 las actividades enzimáticas forman parte de una

enzima o proteína trifuncional. Las actividades de las reaccio-
nes 6 y 7 y las de los pasos 9 y 10 están presentes en otras pro-
teínas bifuncionales.
Síntesis de AMP Y GMP
El ácido inosínico (IMP) es el primer ribonucleótido forma- El ácido inosínico

do en la ruta de novo, es el precursor común de la síntesis de (IMP) es el primer ri-
bonucleótido forma-
los ácidos adenílico (AMP) y guanílico (GMP). do en la ruta de novo,
La conversión de IMP en AMP precisa la incorporación de es el precursor co-
un grupo amino procedente del aspartato. Una diferencia im- mún de la síntesis de
los ácidos adenílico
portante consiste en la utilización de GTP, en lugar de ATP, (AMP) y guanílico
como fuente de energía en la síntesis del adenil succinato. El (GMP).
GMP se forma por oxidación del IMP utilizando NAD e in-
corporando a continuación un grupo amino procedente de la
glutamina, necesitando ATP que se hidroliza a AMP PPi
(Fig. 18.4).

Figura 18.4.– Síntesis de AMP y GMP a partir de IMP. Las enzimas son:
(1) adenilsuccinato sintetasa; (2) adenilsuccinato liasa; (3) IMP deshidrogenasa;
(4) XMP-glutamina amidotransferasa o GMPsintetasa. R 5 P es ribosa-5-
fostato.
La formación de GMP Hemos visto que la formación de GMP a partir de IMP re-
a partir de IMP requiere ATP como fuente de energía, mientras que la formación
q u i e r e AT P c o m o
fuente de energía, de AMP a partir de IMP requiere GTP. Esto puede interpretarse
mientras que la for- como una relación recíproca, es decir, cuando hay suficiente
mación de AMP a ATP en la célula, se sintetizará GMP y viceversa, cuando hay
partir de IMP requie-
re GTP. suficiente GTP se sintetizará AMP.
En el metabolismo, los nucleótidos son activos, principal-
mente, en forma de nucleósidos trifosfato. El GMP y el AMP se
convierten en sus correspondientes trifosfatos a través de dos
reacciones de fosforilación sucesivas. La conversión en los di-
fosfatos comporta la acción de quinasas específicas dependien-
tes de ATP:

guanilato
quinasa
GMP ATP o
m DGP ADP
adenilato
quinasa
AMP ATP o
m 2 ADP
La fosforilación del ADP a ATP se produce a través del me-
tabolismo energético o a partir de ADP por acción de la adeni-
lato quinasa. El ATP es el donador de fosfato para la conver- El ATP es el donador
sión del GDP y otros nucleótidos difosfato al nivel de trifosfa- de fosfato para la
conversión del GDP y
tos, mediante la acción de la nucleósido difosfoquinasa: otros nucleótidos di-
fosfato al nivel de tri-
nucleósido
difosfoquinasa fosfatos, mediante la
GDP ATP o
m GTP ADP acción de la nucleósi-
do difosfoquinasa.
Regulación de la síntesis de
nucleótidos purínicos
Tres mecanismos importantes de retroinhibición cooperan

en la regulación de la velocidad de la síntesis de novo de nu-
cleótidos purínicos. El punto clave de regulación es la forma- El punto clave de re-
ción de 5-fosforribosilamina a partir de 5-fosforribosil-1-piro- gulación es la forma-
ción de 5-fosforribo-
fosfato, reacción catalizada por la glutamina-PRPP amidotrans- silamina a partir de
ferasa, que está regulada alostéricamente por los productos 5-fosforribosil-1-piro-
finales de la ruta IMP, GMP y AMP, estos nucleótidos actúan fosfato, reacción ca-
talizada por la gluta-
como efectores negativos. El PRPP es un efector positivo. mina-PRPP amido-
La glutamina-PRPP-amidotransferasa, enzima alostérica, es transferasa, que está
un monómero de 135 Kda enzimáticamente activo. En presen- regulada alostérica-
mente por los pro-
cia de IMP, AMP o GMP, la enzima forma un dímero mucho ductos finales de la
menos activo. La presencia de PRPP favorece la forma mo- ruta IMP, GMP y AMP.
nomérica activa de la enzima. La enzima de tejidos humanos
tiene dos centros de fijación de nucleótidos. Uno de ellos fija
específicamente los nucleótidos oxopurínicos (IMP y GMP), y el
otro fija nucleótidos aminopurínicos (AMP). La fijación simultá-
nea de AMP y GMP o IMP produce una inhibición sinérgica de
la enzima.
El segundo mecanismo de control en la síntesis del GMP a
partir del IMP es la IMP deshidrogenasa, enzima limitante de la
velocidad y regulada por el GMP, que actúa como un inhibidor
competitivo e inhibe la formación de XMP. De la misma forma,
una acumulación de AMP inhibe la formación de adenilsucci-
nato por la adenilsuccinato sintetasa, que es la enzima limitante
de la velocidad, actuando el AMP como inhibidor competitivo.
El tercer mecanismo consiste en que se precisa GTP para la Tanto el AMP como
el GMP son inhibido-
conversión de IMP en AMP, y se precisa ATP para la conver- res de su propia sín-
sión de IMP en GMP, un control recíproco que tiende a mante- tesis.

ner un balance entre la síntesis de los dos ribonucleótidos.

Tanto el AMP como el GMP son inhibidores de su propia sín-
tesis (Fig. 18.5).
Figura 18.5.– Regulación de la síntesis de las bases púricas.
La síntesis de novo BIOSÍNTESIS DE NOVO DE

conduce a UMP en
seis pasos metabóli- NUCLEÓTIDOS DE PIRIMIDINA
cos, se necesita la
presencia de carba- Los ribonucleótidos de pirimidina son la uridina 5c-mono-
moil fosfato, asparta-
to y PRPP, tiene lugar fosfato (UMP) o uridilato y la citidina 5c-monofosfato (CMP) o
de forma distinta a la citidilato, que contienen las pirimidinas uracilo y citosina, res-
síntesis de purinas, pectivamente. La síntesis de novo conduce a UMP en seis pa-
puesto que el anillo
de pirimidina se for- sos metabólicos, se necesita la presencia de carbamoil fosfato,
ma en primer lugar y aspartato y PRPP, tiene lugar de forma distinta a la síntesis de
a continuación se en- purinas, puesto que el anillo de pirimidina se forma en primer
gancha la ribosa-5-
fosfato procedente lugar y a continuación se engancha la ribosa-5-fosfato proce-
del PRPP. dente del PRPP (Fig. 18.6).

Figura 18.6.– Biosíntesis de UMP.
La carbamoil fosfato sintetasa II es citosólica, y diferente de

la carbamoil fosfato sintetasa I mitocondrial del ciclo de la urea.
El carbamoil fosfato reacciona con el aspartato para dar N-car-
bamoilaspartato en el primer paso de la síntesis de pirimidinas.
Esta reacción está catalizada por la aspartato carbamoil transfe-
rasa o aspartato transcarbamoilasa, y constituye la etapa deter-
minante de la biosíntesis de pirimidinas.
La formación de orotato a partir de dihidroorotato está ca-
talizada por una enzima mitocondrial, dihidroorotato deshidro-
genasa. Las otras enzimas de la ruta se encuentran en el citosol

El carbamoil fosfato formando parte de proteínas multifuncionales. Así, las activida-

reacciona con el as- des de la carbamoil fosfato sintetasa II, la aspartato carbamoil
partato para dar N-
carbamoilaspartato transferasa y la dihidrooratasa están presentes en una única
en el primer paso de proteína trifuncional (CAD), que está formada por tres cadenas
la síntesis de pirimi- polipeptídicas idénticas, de manera que cada una de ellas con-
dinas. Esta reacción
está catalizada por la tiene los centros activos para las tres reacciones. Por otra parte,
aspartato carbamoil las actividades de la orotato fosforribosil transferasa y OMP
transferasa o asparta- descarboxilasa se encuentran en una proteína bifuncional, defi-
to transcarbamoilasa,
y constituye la etapa nida como UMP sintasa; un defecto en esta proteína bifuncio-
determinante de la nal conduce a un raro trastorno clínico conocido como aciduria
biosíntesis de pirimi- orótica hereditaria; se caracteriza por fuerte anemia, retraso en
dinas.
el crecimiento y elevados niveles de excreción del ácido oróti-
co. A los pacientes se les suministra uridina, que disminuye la
formación de ácido orótico. La uridina es captada por las célu-
las y transformada en UMP por la uridina fosfotransferasa, y
ésta en UDP y posteriormente en UTP. El UTP inhibe la carba-
moil fosfato sintetasa II, con lo cual la formación de ácido oró-
tico disminuye a niveles prácticamente normales.
El UTP es también un El UTP es también un sustrato para la síntesis de CTP, por
sustrato para la sínte- lo cual la célula tiene UTP y CTP suficientes para la síntesis de
sis de CTP, por lo
cual la célula tiene ácidos nucleicos.
UTP y CTP suficien-
tes para la síntesis de
ácidos nucleicos.
La CTP sintetasa cataliza la formación de CTP a partir de

UTP y la glutamina como dador del grupo amino (Fig. 18.7).
Regulación de la síntesis de
nucleótidos pirimidínicos
En las células de los En las células de los mamíferos la regulación de la síntesis

mamíferos la regula- se produce a nivel de la carbamoil fosfato sintetasa II, que es
ción de la síntesis se
produce a nivel de la inhibida por UTP, un producto final de la vía, y activada por el
carbamoil fosfato sin- PRPP. El UMP no inhibe la carbamoil fosfato sintetasa II pero sí
tetasa II, que es inhi- compite con el OMP, inhibiendo la OMP descarboxilasa. La
bida por UTP, un pro-
ducto final de la vía, conversión de UTP en CTP está regulada, ya que éste último
y activada por el inhibe la enzima (CTP sintetasa), de forma que las células pue-
PRPP. den mantener un equilibrio entre nucleótidos de uridina y citi-
dina. La regulación de la velocidad de la síntesis en las bacte-
rias tiene lugar a través de la enzima aspartato transcarbamoi-
lasa, o aspartato carbamoil transferasa, que cataliza la primera
reacción de la secuencia, la formación de N-carbamoil asparta-
to. Esta enzima resulta inhibida por el CTP, que es el producto

Figura 18.7.– Biosíntesis de CTP.
final de esta secuencia de reacciones. La aspartato transcarba- La regulación de la

moilasa bacteriana consta de seis subunidades catalíticas y seis velocidad de la sínte-
sis en las bacterias
subunidades reguladoras. Las moléculas de sustrato se unen a tiene lugar a través
las subunidades catalíticas, mientras que el inhibidor alostérico de la enzima asparta-
CTP se une a las subunidades alostéricas. La enzima existe en to transcarbamoilasa,
o aspartato carba-
dos conformaciones, una activa y otra inactiva. Cuando las su- moil transferasa, que
bunidades reguladoras están vacías, la actividad enzimática re- cataliza la primera
sulta máxima. Cuando aumentan las concentraciones de CTP, reacción de la se-
cuencia, la formación
que se une a las subunidades reguladoras, se origina un cam- de N-carbamoil as-
bio en su conformación, y como consecuencia de este cambio partato. Esta enzima
se produce una conformación inactiva de la enzima (Fig. 18.8). resulta inhibida por
el CTP, que es el pro-
La presencia de ATP previene los cambios inducidos por el ducto final de esta
CTP y por ello evita la inhibición (Fig. 18.9). secuencia de reaccio-
nes.
SÍNTESIS DE DESOXIRRIBONUCLEÓTIDOS
Los desoxirribonucleótidos, las piezas de construcción del

ADN, contienen 2c-desoxirribosa en vez de ribosa como pento-
sa, no se sintetizan a partir de la desoxirribosa como elemento
de construcción, derivan de los correspondientes ribonucleóti-
dos a través de unas reacciones en que el átomo de carbono
en posición 2c de la D-ribosa del ribonucleótido se reduce di-

Figura 18.9.– Efecto de los moduladores alostéricos CTP y

Figura 18.8.– Regulación de la síntesis de las ATP en la velocidad de transformación del aspartato en
bases pirimidínicas. N-carbamoilaspartado por la aspartato transcarbamoilasa.
Los desoxirribonu- rectamente para dar lugar al derivado 2c-desoxi. Los sustratos
cleótidos contienen para esta reacción, catalizada por la enzima ribonucleótido re-
2'-desoxirribosa en
vez de ribosa, no se ductasa (NDP-reductasa), son ribonucleótidos difosfato (ADP,
sintetizan a partir de GDP, UDP y CDP). Éstos son reducidos directamente a los co-
la desoxirribosa, deri- rrespondientes desoxi-análogos (dADP, dGDP, dUDP y dCDP)
van de los correspon-
dientes ribonucleóti- por un sistema enzimático múltiple (Fig. 18.10).
dos a través de unas La reducción de la D-ribosa de los ribonucleósidos difosfato
reacciones en que el a 2c-desoxi-D-ribosa precisa un par de átomos de hidrógeno
átomo de carbono en
posición 2' de la D-ri- que, en último término, proporciona el NADP, pero son trasla-
bosa del ribonucleóti- dados a la NDP-reductasa a través de un intermedio proteico
do se reduce directa- que actúa como transportador de hidrógenos, la tiorredoxina.
mente para dar lugar
al derivado 2'-desoxi. La tiorredoxina es una pequeña proteína termoestable, contie-
ne 108 restos de aminoácidos, de masa molecular 12000, tiene
dos grupos tioles en la secuencia Cys-Gly-Pro-Cys. Estos tioles
experimentan una oxidación reversible a disulfuro, con lo que
reducen los azufres del sitio activo de la NDP-reductasa, es de-
cir, los grupos SH transportan átomos de hidrógeno desde el
NADPH hasta el ribonucleósido difosfato. La tiorredoxina oxi-
dada o disulfuro se reduce por el NADPH por acción de la tio-

Figura 18.10.– Reducción de los ribonucleótidos a desoxirribonucleótidos.
rredoxina reductasa (M 68000), que contiene dos moléculas La reducción de la D-

de FAD como cofactor. La tiorredoxina reducida es utilizada a ribosa de los ribonu-
cleósidos difosfato a
continuación por la NDP reductasa para reducir los nucleósidos 2 ' - d e s o x i -D -r i b o s a
difosfato (NDP) a desoxirribonucleósidos difosfato (Fig. precisa un par de áto-
18.11A). mos de hidrógeno
que, en último térmi-
Otra fuente de equivalentes de reducción para la NDP-re- no, proporciona el
ductasa es el glutatión (GSH), que actúa como reductor de una NADP+, pero son tras-
proteína relacionada con la tiorredoxina, denominada glutarre- ladados a la NDP-re-
ductasa a través de
doxina. La glutarredoxina reducida transfiere a continuación el un intermedio protei-
poder reductor del glutatión a la NDP-reductasa (Fig. 18.11B). co que actúa como
Sea cual sea el transportador que actúe como cofactor prin- transportador de hi-
drógenos, la tiorredo-
cipal para la NDP reductasa, el origen último de los electrones xina.
es el NADPH.
El mecanismo de reacción de la NDP reductasa es el ejem-
plo mejor caracterizado de la implicación de radicales libres en
transformaciones bioquímicas.
La enzima presente en E. coli y en la mayor parte de los
eucariotas está formada por dos subunidades (R1 y R2). La su-
bunidad R1 está formada por dos cadenas polipeptídicas D

Figura 18.11.– Reducción de los ribonucleótidos por la ribonucleótido reductasa (NDP reductasa).
(M 87000), y la subunidad R2 por dos cadenas E (M

43000) (Fig. 18.12).
• Cada una de las cadenas D de la subunidad R1 tiene los
siguientes sitios de unión:
A) Sitio catalítico, en el que existen tres Cys, dos de las
cuales participan en reacciones redox. Es el sitio don-
de se unen los sustratos: ADP, CDP, GDP y UDP.
B) Sitio de actividad: es uno de los centros reguladores
de la enzima; en este sitio se unen ATP o dATP.
C) Sitio de especificidad: es el segundo de los centros re-
guladores de la enzima, en el que se unen ATP, dATP,
dGTP o dTTP.
D) Sitio redox: donde se une glutarredoxina o tiorredo-
xina.
• En cada una de las cadenas E de la subunidad R2 hay un
radical libre de Tyr, que participa en la catálisis, y un cen-
tro de hierro dinuclear, constituido por un átomo de oxí-
geno que forma un puente entre dos iones férricos.
La regulación se realiza mediante la unión de efectores nu-
cleósido trifosfato a dos clases de sitios reguladores en la subu-
nidad R1. Los sitios de actividad unen ATP o dATP con una
afinidad relativamente baja, mientras que los sitios de especifi-
cidad unen ATP, dATP, dGTP o dTTP con una alta afinidad
para todos ellos.

Figura 18.12.– Esquema de la ribonucleótido difosfato reductasa (NDPreductasa).
La unión de ATP a los sitios de actividad tienden a aumen-

tar la eficiencia catalítica de la NDP reductasa para todos los
sustratos; mientras que el dATP actúa como inhibidor general
de las cuatro reacciones. La unión de los nucleótidos a los si-
tios de especificidad modula las actividades de la enzima res-
pecto a diferentes sustratos, de manera que se mantiene un
equilibrio en la producción de los cuatro dNTP. Así, por ejem-
plo, la unión de dTTP (con ATP unido en el sitio de actividad)

activa la enzima para la producción de GDP, pero reduce su ca-

pacidad de reducir UDP o CDP (Tabla 18.1).
Tabla 18.1.– Regulación de las actividades de la ribonucleótido

reductasa de los mamíferos.
Nucleótido unido en
Activa la Inhibe la
Lugar de Lugar de reducción de reducción de
actividad especificidad
ATP ATP o dATP CDP, UDP
ATP dTTP GDP CDP, UDP
ATP dGTP ADP CDP, UDP*
ADP, GDP,
dATP Cualquier efector
CDP, UDP
* la unión de dGTP inhibe la reducción de los nucleótidos de pirimidina por
la enzima de mamíferos pero no por la enzima de E. coli.
BIOSÍNTESIS DE LOS
DESOXIRRIBONUCLEÓTIDOS DE TIMINA
La primera reacción metabólica destinada específicamente

a la síntesis de ADN es la formación de los desoxirribonucleóti-
dos difosfato catalizada por la NDP reductasa.
Una vez formados, tres de los difosfatos (dADP, dGDP y
dCDP) se convierten directamente en los correspondientes tri-
fosfatos por acción de la nucleósido difosfatoquinasa.
La biosíntesis de de- La biosíntesis de desoxitimidina trifosfato (dTTP) se produ-
soxitimidina trifosfa- ce, en parte, a partir del dUDP producido mediante la NDP re-
to (dTTP) se produce,
en parte, a partir del ductasa, y en parte, a partir de los nucleótidos de desoxicitidi-
dUDP producido me- na; la proporción varía en distintas células y organismos.
diante la NDP reduc- Las dos rutas de novo conducen a desoxiuridín monofosfa-
tasa, y en parte, a
partir de los nucleóti- to (dUMP), que es el sustrato para la síntesis de nucleótidos de
dos de desoxicitidina. timina:
1) El dUDP se fosforila a dUTP, que se rompe por una di-
fosfohidrolasa muy activa, la dUTPasa.
2) El dCDP se defosforila a dCMP, que sufre entonces una
desaminación a dUMP por una aminohidrolasa denomi-
nada dCMP desaminasa.
Esta última reacción constituye un punto de ramificación
para la síntesis de los dNTP pirimidínicos; la enzima requiere
dCTP como activador alostérico y se inhibe por dTTP. E. coli y
algunas otras bacterias utilizan una ruta diferente hasta dUMP:
la desaminación se realiza a nivel del trifosfato por la dCTP de-
saminasa, y el dUTP resultante se rompe por la dUTPasa a
dUMP y PPi (Fig. 18.13).

Figura 18.13.– Formación del timidilato (dTMP).
El dUMP actúa como sustrato para la formación de deso- El dUMP actúa como
xitimina monofosfato (dTMP) catalizada por la timidilato sin- sustrato para la for-
mación de desoxiti-
tasa. Esta enzima transfiere una unidad de un carbono, al ni- mina monofosfato
vel de oxidación de metileno, y lo reduce a nivel de metilo. (dTMP) catalizada
El donador del carbono es el N 5, N 10-metilentetrahidrofolato, por la timidilato sin-
tasa. El dTMP, una
que en esta reacción poco habitual actúa también como co- vez formado se con-
factor redox, para dar dihidrofolato, como el otro producto vierte en dTTP me-
de la reacción. El cofactor debe reducirse luego, por la dihi- diante dos fosforila-
ciones sucesivas.
drofolato reductasa, y ha de captar otro grupo metileno, la
mayor parte de las veces a través de la serina transhidroxi-
metilasa o serina hidroximetil transferasa. La interrupción de
cualquiera de estos pasos del ciclo interfiere con la forma-
ción de nucleótidos de timina. El dTMP, una vez formado, se
convierte en dTTP mediante dos fosforilaciones sucesivas
(Fig. 18.14).
DEGRADACIÓN DE PURINAS:
SÍNTESIS DE ÁCIDO ÚRICO
El catabolismo de los nucleótidos de purina da lugar a áci- El catabolismo de los

do úrico a través de las siguientes rutas (Fig. 18.15): nucleótidos de purina
da lugar a ácido úri-
Las rutas específicas utilizadas varían en los diversos orga- co.
nismos y en distintos tejidos del mismo organismo. Así, por
ejemplo, el AMP o bien se desamina para producir ácido
inosínico (IMP) o se hidroliza para transformarse en adenosi-
na. La desaminación es activa en el músculo, mientras que la
hidrólisis predomina en la mayor parte de los demás tejidos La guanina se desa-
mina a xantina por la
animales. guanina desaminasa.
En las rutas de degradación, la adenosina se desamina por La hipoxantina se
la adenosina desaminada (ADA) para dar inosina. Sobre la oxida a xantina, y la
xantina a ácido úrico,
inosina y la guanosina actúa la nucleósido de purina fosforilasa por acción de la xan-
para formar hipoxantina y guanina, respectivamente. tina oxidasa.

Figura 18.14.– Transformación del dUMP en dTMP por la timidilato sintasa

y la dihidrofolato reductasa.
La guanina se desamina a xantina por la guanina desami-

nasa, una enzima abundante en el cerebro y el hígado de los
mamíferos.
La hipoxantina se oxida a xantina, y la xantina a ácido úri-
co, por acción de la xantina oxidasa, una flavoenzima que con-
tiene FAD, un átomo de molibdeno y cuatro centros Fe-S. Los
electrones obtenidos de la oxidación de los sustratos se transfie-
ren a cada uno de estos transportadores, que finalmente redu-
cen el O2 a H2O2, sobre la que actúa una catalasa que la des-

Figura 18.15.– Degradación de nucleótidos de purina. Formación de ácido úrico.
compone en H2O y O2, luego es el oxígeno molecular el acep-

tor de electrones en esta reacción.
La forma ceto del ácido úrico está en equilibrio con la for-
ma enólica, la cual a pH 7 pierde un protón para formar ura-
to. El urato es el producto final de la degradación de las puri-
nas y se excreta como tal por la orina.
El ácido úrico es el producto final de excreción del catabo-

lismo de purinas en los primates, aves, reptiles e insectos. Pero
en muchos otros vertebrados el ácido úrico se degrada dando
La degradación de
alantoina y finalmente urea. los nucleótidos de pi-
Una sobreproducción de ácido úrico es la causa de la gota rimidina se produce
(ver aplicación clínica). La gota es una enfermedad que afecta por diversas rutas,
que conducen a la
a las articulaciones y a los riñones, provocada por una concen- producción de uracilo
tración elevada de ácido úrico en la sangre y en los tejidos. y timina.

DEGRADACIÓN DE PIRIMIDINAS
El recambio de los ácidos nucleicos da lugar a la liberación
de nucleótidos de pirimidina y purina. La degradación de los
nucleótidos de pirimidina se produce por diversas rutas (Fig.
18.16-A), que conducen a la producción de uracilo y timina.
El uracilo y la timina El uracilo y la timina continúan degradándose mediante re-
continúan degradán- acciones análogas, aunque los productos finales son diferentes
dose mediante reac-
ciones análogas, aun- (Fig. 18.16-B).
que los productos fi- La citosina y el uracilo se degradan finalmente hasta E-ala-
nales son diferentes. nina, NH4 y CO2. La E-alanina se utiliza en la biosíntesis del
coenzima-A.
La degradación de timina conduce a E-aminoisobutirato,
NH4 y CO2. El E-aminoisobutirato es excretado en la orina hu-
mana, y se origina exclusivamente a partir de la degradación
de timina. Se puede, por tanto, estimar el recambio de ADN o
de los nucleótidos de timina midiendo la excreción de E-ami-
noisobutirato. Pacientes de cáncer sometidos a quimioterapia o
Las células cancero- radioterapia, procesos en los que se produce una elevada
sas suelen ser más muerte celular y se degrada ADN, excretan niveles aumentados
sensibles que las cé-
lulas normales a inhi- de E-aminoisobutirato.
bidores de la biosín-
tesis de nucleótidos.
Existe un gran núme- FÁRMACOS ANTICANCEROSOS QUE
ro de agentes quimio-
terapeúticos que ac- BLOQUEAN LAS VÍAS DE BIOSÍNTESIS DE
túan por inhibición NUCLEÓTIDOS
de una o más enzi-
mas de las rutas de
biosíntesis de nucleó- Las células cancerígenas se multiplican más rápidamente
tidos. que las células de los tejidos normales y por ello requieren ma-
Figura 18.16.– (A) Rutas catabólicas en el metabolismo de los nucleótidos de pirimidina.

Figura 18.16.– (B) Degradación de pirimidinas. (Continuación).
yor suministro de nucleótidos para la síntesis de ADN y ARN.

Es por ello que las células cancerosas suelen ser más sensibles
que las células normales a inhibidores de la biosíntesis de nu-

cleótidos. Existe un gran número de agentes quimioterapeúti-

cos que actúan por inhibición de una o más enzimas de las ru-
tas de biosíntesis de nucleótidos. Estudiaremos algunos ejem-
plos de estos agentes que representan a la vez una posibilidad
de tratamiento del cáncer y una opción para la mejor compren-
sión del mecanismo de acción de estas enzimas.
La primera serie de ejemplos se refiere a los compuestos
que inhiben las glutamina amidotransferasas. La glutamina
actúa como dador de nitrógeno en distintas reacciones de la
biosíntesis de nucleótidos. Los centros de unión de la gluta-
mina son parecidos en muchas de estas enzimas, y la ma-
yoría resultan fuertemente inhibidas por análogos de la glu-
tamina como la azaserina y la acivicina. Ambos son ejemplos
de inhibidores suicidas, y parecen ser buenos agentes anti-
cancerígenos.
Enzimas que resultan Otras enzimas que resultan útiles para la acción de agentes
útiles para la acción farmacológicos son la timidilato sintasa y la dihidrofolato re-
de agentes farmacoló-
gicos son la timidila- ductasa (Figs. 18.17-A y 18.17-B). Estas enzimas representan la
to sintasa y la dihi- única vía celular para la síntesis de timina. Un inhibidor que
drofolato reductasa. actúa sobre la timidilato sintasa es el 5-fluorouracilo (5-FU)
(Fig. 18.17-B), un importante agente quimioterápico. En la cé-
lula, a través de las vías de recuperación, el 5-FU se convierte
en 5-fluorodesoxiuridilato (desoxinucleósido monofosfato)
(F-dUMP). Este análogo de dUMP inhibe irreversiblemente a la
timidilato sintasa después de actuar como sustrato normal du-
rante una parte del ciclo catalítico. Durante la catálisis se forma
un complejo covalente entre F-dUMP, metilentetrahidrifolato y
el grupo sulfhidrilo de la enzima, que inhibe la timidilato sinta-
sa. Es un ejemplo de inhibición suicida, en la que una enzima
transforma un sustrato en inhibidor reactivo, que inmediata-
mente inactiva su propia actividad catalítica.
Analogos estructura- La síntesis de dTMP también puede bloquearse inhibiendo
les del dihidrofolato, la regeneración del tetrahidrofolato. Analogos estructurales del
como el metotrexato
(ameptoterina) y la dihidrofolato, como el metotrexato (ameptoterina) y la aminop-
aminopterina son po- terina son potentes inhibidores competitivos de la dihidrofolato
tentes inhibidores reductasa (Fig. 18.17-B). El metotrexato es un fármaco valioso
competitivos de la di-
hidrofolato reductasa. en el tratamiento de muchos tumores de crecimiento rápido, ta-
les como leucemia aguda y coriocarcinoma. Sin embargo, es
muy tóxico, mata rápidamente células en reproducción, tanto si
son malignas como si no lo son. Las células de la médula ósea,
las epiteliales del tubo digestivo y los folículos pilosos son espe-
La utilización en me-
cialmente vulnerables a la acción de este antagonista del folato.
dicina de los inhibi- La utilización en medicina de los inhibidores de la biosínte-
dores de la biosínte- sis de nucleótidos no se limita al tratamiento del cáncer. Existen
sis de nucleótidos no
se limita al trata- otro tipo de inhibidores de la hidrofolato reductasa, como por
miento del cáncer. ejemplo la trimetoprima, que es un análogo del folato con una

Figura 18.17.– Síntesis del timidilato y metabolismo del folato como dianas de
acción quimioterápica. FdUMP nucleótido derivado del Fluorouracilo.
potente actividad antibacteriana y antiprotista (protozoos fun-

damentalmente). La combinación de trimetoprima y sulfameto-
xazol (inhibidor de la síntesis de folato) se utiliza ampliamente
para tratar procesos infecciosos.
RESUMEN
Las rutas metabólicas que conducen a la formación de

nucleótidos son: las vías de novo y las vías de recupera-
ción. La síntesis de novo de los nucleóticos empieza a par-
tir de sus precursores metabólicos, aminoácidos, ribosa-5-
fosfato, CO2 y NH3. Las rutas de recuperación reciclan las

bases libres y los nucleósidos liberados a partir de la ruptu-

ra de los ácidos nucleicos.
El PRPP es un intermedio clave en la síntesis de novo
de los nucleótidos purínicos y pirimidínicos. El anillo de
purina se forma a partir de la ribosa-5-fosfato, sobre el que
se genera paso a paso un núcleo purínico, lo que conduce
a la formación de un nucleótido. El de pirimidina se sinte-
tiza como ácido orótico unido a ribosa-5-fosfato y se trans-
forma en los nucleótidos de pirimidina.
El ácido inosínico (IMP) es el primer ribonucleótido for-
mado en la ruta de novo, es el precursor común en la sín-
tesis de los ácidos adenílico (AMP) y guanílico (GMP); la
formación de GMP requiere ATP como fuente de energía,
mientras que la formación de AMP requiere GTP.
El punto clave en la regulación de los nucleótidos purí-
nicos es la formación de 5-fosforribosilamina a partir de 5-
fosforribolsil-1-pirofosfato, reacción catalizada por la gluta-
mina-PRPP amidotransferasa, que está regulada alostéri-
camente por los productos finales de la ruta, IMP, GMP y
AMP. Tanto el AMP como el GMP son inhibidores de su
propia síntesis.
La síntesis de novo de nucleótidos de pirimidina con-
duce a UMP, se necesita la presencia de carbamoil fosfato,
aspartato y PRPP, tiene lugar de forma distinta a la síntesis
de purinas, el anillo de pirimidina se forma en primer lugar
y a continuación se engancha la ribosa-5 fosfato proce-
dente del PRPP. El primer paso de la síntesis de pirimidi-
nas es la reacción entre el carbamoil fosfato y el aspartato
para dar N-carbamoil-aspartato, esta reacción está catali-
zada por la aspartato carbamoil transferasa y constituye la
etapa determinante de esta biosíntesis. Esta enzima resulta
inhibida por CTP, que es el producto final de esta sucesión
de reacciones.
Los desoxirribonucleótidos contienen 2c-desoxirribosa
en vez de ribosa, no se sintetizan a partir de 2c-desoxirri-
bosa, sino de los correspondientes ribonucleótidos a través
de unas reacciones en que el átomo de carbono en posi-
ción 2c de la D-ribosa del ribonucleótido se reduce directa-
mente para dar lugar al derivado 2c-desoxi, para ello se
necesitan un par de átomos de hidrógeno que, en último
término, proporciona el NADP, pero son transportados a
la NDP-reductasa a través de un intermedio proteico que
actúa como transportador de hidrógenos, la tiorredoxina.
La biosíntesis de la desoxitimidina trifosfato (dTTP) se pro-

duce, en parte, a partir de dUDP producida mediante la

NDP-reductasa, y en parte a partir de los nucleótidos de la
desoxicitidina.
La degradación de los nucleótidos de purina da lugar a
ácido úrico. Una sobreproducción de ácido úrico es la cau-
sa de la gota. La gota es una enfermedad que afecta a las
articulaciones y a los riñones. La degradación de los nu-
cleótidos de pirimidina se produce por diversas rutas, que
conducen a la formación de uracilo y timina, los cuales
continúan degradándose mediante reacciones análogas
dando productos finales diferentes.
La gota
La hiperuricemia puede producir la gota, que es una enfer-
medad provocada por una elevada concentración de ácido úri-
co en la sangre y en los tejidos, y que afecta a las articulaciones
y a los riñones, sobre todo en los varones. Las articulaciones se
inflaman debido a la precipitación de cristales de urato sódico
en el líquido sinovial de las mismas, lo que produce dolor y
conduce al desarrollo de artritis. Los riñones también resultan
afectados ya que los cristales de urato precipitan en los túbulos
renales.
La gota se debe, o bien a una sobreproducción de nucleóti-
dos de purina, que como sabemos da lugar a una síntesis exce-
siva de ácido úrico, o bien a un deterioro de la excreción de
ácido úrico a través de los riñones como consecuencia de una
enfermedad renal, o incluso por una muerte celular excesiva
que conduce a un incremento de la degradación de ácidos nu-
cleicos, como sucede en los tratamientos de tumores malignos.
La sobreproducción de ácido úrico como consecuencia de
un exceso de síntesis de purinas puede producirse por diversas
deficiencias enzimáticas como actividad elevada de PRPP sin-
tetasa, pérdida de retroinhibición de PRPP amidotransferasa y
por déficit en la enzima de recuperación hipoxantina guanina
fosforribosiltransferasa (HGPRT).
En cuanto al desarrollo de la gota por causas no relaciona-
das con deficiencias enzimáticas, puede citarse el deterioro de
la excreción de ácido úrico. Un ejemplo es el de los pacientes
que sufren algunas formas de enfermedad de almacenamiento
de glucógeno, los cuales son generalmente gotosos. Una hipo-
glucemia prolongada produce la acumulación de ácidos orgá-

nicos (lactato y similares), lo cual interfiere con la excreción tu-

bular del ácido úrico en el riñón.
También la gota es una consecuencia de la quimioterapia y
la radioterapia del cáncer, debido a una sobrecarga de purinas
causada por la degradación de los ácidos nucleicos tras la
muerte celular.
La gota puede tratarse de manera eficaz por medio de una
combinación de terapia nutricional (restricción de la ingesta de
alimentos ricos en purinas; hígado, productos glandulares, an-
choas, vino, etc.) y farmacológica. Se consigue una mejoría im-
portante tras la utilización del fármaco alopurinol, un análogo
de la hipoxantina, que inhibe la xantina oxidasa. Esta inhibi-
ción produce la acumulación de hipoxantina y xantina, sustan-
cias más solubles en agua que el ácido úrico, y por tanto más
fáciles de excretar que dicho ácido. Se produce por ello una
mejoría de la artritis
Síndrome de Lesch-Nyhan:
deficit grave de HGPRT
La ausencia total de la enzima hipoxantina-guanina fosforri-
bosil transferasa (HGPRT) tiene consecuencias devastadoras
para el ser humano. Este trastorno fue descrito por primera vez
en 1964 por el estudiante de medicina Michael Lesch y su tutor
en la Facultad, William Nyhan.
El síndrome de Lesch-Nyhan es un rasgo ligado al sexo, ya
que el gen estructural de la HGPRT está situado en el cromoso-
ma Y, por lo que la deficiencia prácticamente sólo se presenta
en varones. Los pacientes con este trastorno presentan una ar-
tritis gotosa grave, pero también sufren una disfunción aguda
del sistema nervioso, que se manifiesta en trastornos de con-
ducta, discapacidad para el aprendizaje y comportamientos
hostiles o agresivos, a menudo contra sí mismos. En los casos
en los que la deficiencia de la actividad enzimática de HGPRT
es casi completa, los pacientes se muerden las puntas de los
dedos o los labios, causándose automutilaciones.
Existen diferentes grados de gravedad en esta enfermedad
debido al gran número de mutaciones distintas que afectan al
gen de la HGPRT. La hiperuricemia que se observa en este sín-
drome como consecuencia de una elevada síntesis de ácido
úrico es claramente debida a la deficiencia de la enzima
HGPRT, que impide la recuperación de hipoxantina y guanina,
lo que trae como consecuencia un incremento de los niveles in-
tracelulares de PRPP y la disminución de IMP o GMP, lo que se
traduce en una mayor síntesis de novo de nucleótidos puríni-

cos. Lo que todavía está por dilucidar es la causa de los proble-

mas neurológicos asociados a esta deficiencia enzimática. Se
piensa en la posibilidad de que los productos de degradación
de las purinas, hipoxantina, xantina y ácido úrico, que no son
tóxicos para el sistema nervioso central de un adulto, sí podrían
resultar tóxicos para dicho sistema nervioso en el caso de un
individuo en desarrollo. Otra posibilidad es que el descenso de
la actividad HGPRT junto con un descenso de la actividad IMP
deshidrogenasa condujesen a una caída de los niveles intrace-
lulares de GTP, lo que afectaría a la transducción de señales vía
proteínas G, a los niveles de tetrahidrobiopterina, necesaria
para la síntesis de neurotransmisores, y a la síntesis proteica.
Todo ello podría tener como resultado los trastornos neurológi-
cos que acompañan a este síndrome.

Integración
TEMA 19 del metabolismo
en mamíferos
Absorción, transporte y regulación. Las bases bio-

químicas de la nutrición.
Todas y cada una de las células de un organismo llevan una

dotación genética completa, sin embargo, sólo se expresa una
parte de ella y, por ello, aparecen células y tejidos especializa-
dos. No obstante los diferentes tejidos y órganos se encuentran
interconectados entre sí a través de sustancias o mensajeros
químicos que permiten al organismo funcionar como un con-
junto coordinado. En los organismos superiores existen cuatro
sistemas de regulación a diferentes niveles.
Los nutrientes son sustancias químicas que se encuentran
en los alimentos, muchos pueden ser sintetizados en el organis-
mo, mientras otros no pueden serlo y se denominan esenciales.
Entre estos últimos se encuentran los oligoelementos y algunos
aminoácidos y vitaminas. Los organismos también requieren la
oxidación de los nutrientes para obtener energía para sus fun-
ciones vitales. Las necesidades energéticas se distribuyen en
tres bloques que juntos representan los requerimientos totales
en condiciones fisiológicas.
ABSORCIÓN, TRANSPORTE Y REGULACIÓN
La absorción de nutrientes se produce fundamentalmente

en la mitad proximal del intestino delgado, aunque las porcio-
nes más distales también son aptas para la absorción (Fig.
19.1). Los mecanismos implicados en este importante proceso
La absorción de iones
son difusión pasiva y difusión facilitada, aunque para algu- Na+ y Ca2+ por el in-
nos nutrientes es necesario el transporte activo acoplado al Na testino delgado se
como ocurre p.e. con la glucosa y los aminoácidos. produce por transpor-
te activo. Los iones
Las grasas se absorben en el intestino delgado previa sepa- K+, Cl– y HCO3– por
ración de las sales biliares que las transportan en el medio difusión facilitada.

Figura 19.1.– Mecanismos implicados en la absorción de nutrientes.
acuoso en forma de micelas. Su difusión se ve facilitada por su

solubilidad en la bicapa lipídica de la membrana del enterocito.
Una pequeña proporción de péptidos se absorben como tales
sin sufrir hidrólisis, y los disacáridos son hidrolizados a mono-
sacáridos, aunque la digestión se completa por disacaridasas
en el borde en cepillo de los enterocitos. La absorción del agua
se produce de forma pasiva siguiendo a los solutos a nivel del
intestino delgado. Su procedencia es de origen alimentario
(unos 2 L) y del gran volumen de secreciones digestivas verti-
das a la luz de los distintos tramos en los que se produce la di-
gestión (7-10 L). La absorción de iones se produce por trans-
porte activo para el Na, lo que ocurre fundamentalmente en
intestino delgado. Los iones de potasio, cloruro y bicarbonato
se absorben por difusión en el duodeno y el yeyuno. El cloro
puede intercambiarse de forma activa por ión bicarbonato en
el colon, para neutralizar el exceso de ácido producido en las
fermentaciones bacterianas. La absorción de calcio se produce
por transporte activo mediado por la vitamina D, mientras que
el hierro se absorbe también a nivel del intestino delgado, pero
sólo consume energía su paso desde el enterocito a la sangre,
donde es ligado a la transferrina para su transporte. La vitami-
na C y el HCl del jugo gástrico facilitan la absorción intestinal
de hierro al pasar la forma férrica Fe3 a ferrosa Fe2. Las vita-
minas liposolubles se absorben como las grasas. La vitamina C
dispone de un transportador específico y se absorbe en el íleon
terminal. Las vitaminas del complejo B, a excepción de la B12,
se absorben en el intestino delgado mediante cotransporte aco-
plado al Na. El complejo vitamina B12 factor intrínseco se ab-
sorbe a nivel del colon por endocitosis. El tránsito intestinal a
nivel del colon es bastante más lento que en los tramos prece-

INTEGRACIÓN DEL METABOLISMO EN MAMÍFEROS 257
dentes del intestino delgado. Aquí se produce la recuperación

del exceso de agua presente en el quimo, lo que representa
aproximadamente un volumen de 500-1.000 mL. En este seg-
mento del intestino existen diferentes grupos de bacterias intes-
tinales que en conjunto determinan la flora bacteriana intes-
tinal con importantes funciones fisiológicas, entre otras la pro-
ducción de vitamina K y la transformación final de los ácidos
biliares, bilirrubina etc. El uso indiscriminado de los antibióticos
establece auténticos desequilibrios en la flora intestinal con re-
percusiones clínicas de interés.
En líneas generales el proceso de absorción se produce en
dos etapas bien diferenciadas, la primera de ellas incluye el
paso de los nutrientes hasta el interior del enterocito, y la se-
gunda que determina su paso desde el enterocito a través del
espacio intersticial hasta la circulación sanguínea. Esta segunda
etapa es la que puede regularse en relación con las necesidades
del individuo. Los depositos de sustancias a nivel de las células
intestinales pueden perderse al cabo de varios días si no pasan
a la sangre, ya que estas células están sometidas a un proceso
de renovación cíclico, cuya vida media es de unos 4-5 días. La
descamación de las células de pared puede acarrear la perdida
de elementos nutricionales esenciales y, en consecuencia, gene-
rar enfermedades carenciales (Fig. 19.2).
Figura 19.2.– Lugares de absorción de los principales nutrientes.

Las grasas pasan al La mayoría de los nutrientes absorbidos pasan de la muco-

sistema linfático pri- sa intestinal a la circulación sanguínea, a través de la vena por-
mero y después a la
sangre, salvando el ta que los conduce en primer lugar al hígado. El filtro hepático
filtro hepático. se constituye como un paso esencial para la transformación de
la mayoría de los nutrientes, transformación que permite la
adaptación de los mismos a las necesidades del organismo, y
que inicia un proceso fisiológico clave para la supervivencia del
organismo, el mantenimiento de la homeostasis. El hígado
es pues un órgano metabólico de gran trascendencia, localiza-
do estratégicamente entre el intestino y la circulación sanguí-
nea. No obstante algunos nutrientes, como la mayoría de las
grasas, eluden el filtro hepático al pasar del enterocito directa-
mente a la linfa, que finalmente alcanza el torrente circulatorio
a través del conducto torácico.
Los nutrientes así absorbidos van a ser utilizados por el or-
ganismo, sometidos previamente a pequeñas o grandes trans-
formaciones metabólicas, que van a permitir su utilización para
obtener energía, monómeros para la síntesis de moléculas pro-
pias, o simplemente su almacenamiento.
El metabolismo de los nutrientes es un conjunto de reaccio-
nes químicas íntimamente relacionadas, de forma que cada
una de las vías metabólicas está cuidadosamente regulada y to-
das ellas en conjunto están íntimamente relacionadas e integra-
das en el denominado metabolismo corporal.
El metabolismo se ha modificado a lo largo de la evolución,
de forma que se han ido seleccionando las especies que dis-
ponían de la mayor eficacia metabólica, al disponer de meca-
nismos adecuados para sintetizar en cada momento las bio-
moléculas necesarias, tanto desde el punto de vista cualitativo
como cuantitativo, y con el menor coste energético. El resulta-
do producido es una mayor adaptación al medio.
Existen distintos niveles de regulación:
1. Nivel somático.
2. Nivel de órganos.
3. Nivel celular.
4. Nivel molecular.
1. Nivel somático: En los mamíferos, las funciones del

organismo están reguladas por dos importantes sistemas de co-
municación intercelular o sistemas de control: el sistema ner-
vioso (SN) y el sistema endocrino (SE), y entre ambos existen
importantes interacciones.
En el SN, cada neurona va a transmitir información a un
conjunto de neuronas a través de la sinapsis, liberando un neu-
rotransmisor que causa efectos eléctricos inmediatos en la

membrana post-sináptica. Por su parte, las glándulas del siste- Las hormonas se sin-
ma endocrino, van a liberar sustancias muy activas, las hormo- tetizan en un órgano
y ejercen su acción
nas. Estas sustancias de composición química muy variada se en otro órgano o teji-
van a distribuir por todo el organismo a través de la sangre, do diana.
produciendo cambios metabólicos en las células efectoras, las
cuales se sitúan lejos del punto de liberación de la hormona,
siendo sus efectos de lenta aparición y larga duración en com-
paración con los producidos en la comunicación sináptica. De
esta forma el sistema endocrino cumple una función regulado-
ra e integradora del metabolismo de los diferentes órganos,
modificando armónicamente la velocidad de los procesos en
los diferentes tejidos, para que de su actividad multifuncional
resulte una mejor adaptación al medio que permita la supervi-
vencia del organismo.
El conocimiento del control que ejerce el Sistema Nervioso
Central (S.N.C.) sobre la secreción endocrina ha experimenta-
do profundos cambios en los últimos años. Todas las hormo-
nas hipofisarias son susceptibles de ser reguladas por el hi-
potálamo. Esto implica que la actividad de otras estructuras
cerebrales, incluyendo la corteza, pueden modificar el equili-
brio endocrino.
Además y por otra parte los datos publicados acerca de la
importancia de los estímulos psicofisiológicos sobre la secreción
hormonal, son aún escasos y los conocimientos sobre estos as-
pectos van avanzando muy lentamente en relación a los avan-
ces sobre la descripción de importantes vías y conexiones cere-
brales. No obstante, el gran impulso actual de la investigación
sobre la bioquímica y fisiología de los péptidos ha permitido
clarificar procesos endocrinos poco conocidos, y ha obligado a
replantearnos las bases de la regulación neuroendocrina.
2. Nivel de órganos: La regulación va a depender tam- En las células somá-

bién de las especializaciones metabólicas de algunos órganos. ticas sólo se expresa
una parte de la infor-
En los humanos la regulación metabólica varía según el órgano mación genética que
del que se trate. poseen.
Durante el proceso de diferenciación se producen cambios
acentuados en la estructura y en la función celular, que se
acompañan de marcados cambios en el contenido enzimático.
Cada célula, a excepción de las células sexuales maduras (ha-
ploides) y células muy especializadas como los eritrocitos, po-
see la información genética necesaria para la síntesis de todas
las enzimas presentes en el organismo y con ello la posibilidad
de llevar a cabo las diferentes rutas metabólicas, sin embargo,
sólo una proporción de los genes se expresa, y lo hace en for-
ma diferente según el tipo de célula del que se trate. Esto im-
plica la existencia de mecanismos precisos de control de la ex-

presión génica. El mecanismo de control se encuentra bajo la

influencia de algunas hormonas. Así las células susceptibles de
estimulación hormonal son capaces de aumentar notablemen-
te y de forma especifica el contenido celular de ciertas enzi-
mas, recibiendo este fenómeno el nombre de inducción hor-
monal.
Aunque todas las células del organismo humano son ca-
paces de llevar a cabo las rutas principales del metabolismo,
los distintos tejidos y órganos muestran características me-
tabólicas relativas a su grado de especialización que les hace
muy eficaces.
La presencia de dife- 3. Nivel celular: La presencia de compartimentos en la

rentes compartimen- célula eucariótica permite la realización de diferentes rutas me-
tos en la célula euca-
riótica es otra forma tabólicas en los diferentes compartimentos. A modo de ejem-
de regulación. plo, la glicólisis anaerobia, la vía de las pentosas fosfato y la
síntesis de ácidos grasos tienen lugar en el citoplasma celular,
mientras que la oxidación de los ácidos grasos, el ciclo de los
ácidos tricarboxílicos y la fosforilación oxidatíva se llevan a
cabo en la mitocondria. Sin embargo, otros procesos, como
ocurre con la gluconeogénesis, se van a llevar a cabo en ambos
compartimentos. De esta forma, el destino final de una bio-
molécula va a depender de dónde esté ubicada, es decir, si se
encuentra en el citoplasma celular o en la matriz mitocondrial.
En efecto, los ácidos grasos que se encuentren en el interior de
la mitocondria serán degradados rápidamente, mientras que
los que se encuentren en el citoplasma serán esterificados. De
esta forma, la compartimentación celular produce un ahorro
La compartimenta- energético importante en lo que se refiere a la síntesis proteica.
ción celular permite Así, un conjunto de enzimas podrá ser utilizado en diferentes
que rutas inversas,
como glucólisis y glu- procesos metabólicos al situarse en diferentes compartimentos
coneogenesis, actúen celulares, dando lugar a productos finales diferentes según el
simultáneamente. compartimento considerado. Para lograrlo, los procesos me-
tabólicos tendrán una regulación diferente, salvando de esta
forma el inconveniente que supondría la activación o la inhibi-
ción simultaneas.
La regulación en- 4. Nivel molecular: Las moléculas susceptibles de regu-

zimática se realiza a lación son las enzimas. La regulación a este nivel va a ser ejer-
nivel de actividad y a
nivel de síntesis. cida por interacciones alostéricas y modificaciones covalentes.
La concentración de enzimas disponible por las células en un
momento determinado depende de la velocidad con que son
sintetizadas, pudiendo ser modificada por mecanismos de in-
ducción y/o represión.
Todo el laborioso proceso de regulación e integración del
metabolismo carece de sentido sino existe un aporte de nu-

trientes adecuado a las necesidades del organismo. Es preciso

por lo tanto introducir los aspectos bioquímicos de la nutrición.
BASES BIOQUÍMICAS DE LA NUTRICIÓN
El organismo humano precisa el aporte de alimentos desde

el nacimiento para su crecimiento, desarrollo y mantenimiento
de las funciones corporales y mentales, lo que requiere a su vez
el control de la homeostasia o mantenimiento de las condicio-
nes vitales del medio interno.
La ingesta nutricional de un individuo debe aportar los ele-
mentos necesarios para un adecuado balance calórico, protei-
co, hídrico, mineral y vitamínico.
Los alimentos cumplen tres funciones básicas:
1. Aporte de la energía necesaria, proporcionando los sus-
tratos oxidables.
2. Formación y mantenimiento de la estructura corporal,
aportando los monómeros necesarios para la síntesis de
moléculas propias.
3. Regulación de la actividad metabólica, aportando los
elementos necesarios para la catálisis enzimática.
Un mismo alimento puede cumplir las tres, dos o sólo una
de dichas funciones, por lo que se aconseja el consumo varia-
do de alimentos y en las cantidades adecuadas según su com-
posición, para hacer frente a las demandas individuales, las
cuales varían con la edad, sexo, peso, talla, nivel de actividad
física, circunstancias personales como embarazo y lactancia, así
como circunstancias medioambientales como humedad, tem-
peratura, altitud, etc.
Composición química de los alimentos: Desde un

punto de vista nutricional los alimentos contienen una serie de
elementos nutritivos o nutrientes, que son utilizados por el or-
ganismo para sus procesos vitales. Incluyen los azucares, lípi-
dos, proteínas, agua, vitaminas y minerales. Sólo los tres pri-
meros aportan la energía química necesaria para los distintos
tipos de trabajo celular, mientras que todos ellos contribuyen a
la formación y renovación de las estructuras corporales y a la
regulación de la compleja actividad metabólica que tiene lugar
en todas las células del organismo.
Las vitaminas y minerales se requieren en cantidades muy
pequeñas, por lo que se denominan micronutrientes en contra-
posición a los demás elementos que se requieren en cantidades
muy superiores y que se denominan macronutrientes.

Los nutrientes pue- Aunque todos los nutrientes deben ser aportados en una
den ser de dos clases: alimentación equilibrada, es preciso distinguir entre elementos
esenciales y no esen-
ciales. Los esenciales esenciales y no esenciales. Son nutrientes esenciales aquellos
no son sintetizados que necesariamente hay que ingerir para no generar carencias,
por el organismo y su ya que no pueden sintetizarse en el organismo. Se consideran
falta en la dieta pue-
de originar carencias no esenciales aquellos nutrientes que pueden sintetizarse de
o deficiencias. forma endógena.
Los requerimientos energéticos constituyen uno de los
objetivos de la nutrición con el fin de proporcionar energía al
organismo para su actividad vital. Para ello se requiere la oxi-
dación de los nutrientes por parte de las células (Fig. 19.3).
Figura 19.3.– Esquema general de las vías catabólicas de

los nutrientes de la dieta.
El valor calórico de los nutrientes y de los alimentos que los

aportan se expresa en kilocalorías (kcal). Una kcal es la canti-
dad de calor necesaria para aumentar en un grado centígrado
la temperatura de un kg de agua que esté a 14,5 ºC. Actual-
mente también se emplea el kilojulio, que es una unidad de tra-
bajo (1 kcal 4,18 kJul).
El valor energético de los componentes de la dieta se deter-
mina midiendo la energía liberada tras la combustión completa
de los mismos en presencia de oxígeno y en una bomba calo-
rimétrica. Con este procedimiento se demuestra que todos los
nutrientes no poseen el mismo valor energético, así:
1 g de azucares proporciona 4 kcal, 1 g de grasas 9 kcal y
1 g de proteínas 5,3 kcal, de las que sólo se aprovechan 4 por

el organismo, ya que durante el metabolismo se produce urea

que aún conserva cierto contenido energético, además de por
el efecto térmico de las proteínas, que es bastante elevado.
También se puede determinar el gasto energético de una perso-
na por calorimetría directa midiendo en una cámara aislada el
calor generado por el organismo, o bien calculando el calor
producido a partir del oxigeno consumido y del anhídrido
carbónico producido, esto es por calorimetría indirecta.
Las necesidades diarias de energía del organismo se distri-
buyen en tres grandes bloques, cuya suma representa los re-
querimientos totales en condiciones fisiológicas:
a) Metabolismo basal.
b) Actividad física.
c) Acción dinamico-específica de los alimentos.
Metabolismo basal (MB) es la energía que necesita el or- Metabolismo basal es

ganismo para mantener las funciones vitales en condiciones de la energía utilizada
por el organismo en
reposo físico y mental y en ayunas, en un medio de temperatu- unas condiciones de-
ra confortable. Se calcula a partir del oxígeno consumido, consi- terminadas.
derando que un litro de oxígeno equivale a 4.825 kcal por me-
tro cuadrado de superficie corporal y por hora. En la clínica se
suele utilizar la variación en porcentaje sobre un valor medio de
referencia. Las variaciones entre 15 y 15 se consideran nor-
males para un valor estándar de 40 kcal/m2 · h, calculado como
promedio para varones jóvenes. El MB varía con la edad, sexo,
equilibrio hormonal, etc., por ser factores que inciden en la
composición corporal individual, alcanzando los valores máxi-
mos en períodos de crecimiento. Aumentan el metabolismo ba-
sal las dietas hipercalóricas e hiperproteicas, el hipertiroidismo,
la acromegalia, el S. de Cushing, la fiebre, los fármacos como la
adrenalina, la cafeína, las anfetaminas y la hormona del creci-
miento. Disminuyen el MB la desnutrición, el hipotiroidismo, la
insuficiencia hipofisaria, el E. de Addison y ciertos fármacos
(hipnóticos, anestésicos, hipotiroideos y sedantes).
Actividad física: El gasto energético que genera la activi-

dad física, para un mismo individuo, es variable y puede con-
trolarse voluntariamente, a diferencia de lo que ocurre con la
energía del MB. Existen numerosos cálculos generalmente
aceptados que tratan de orientar acerca de las necesidades de
energía para los distintos tipos de trabajo físico en adultos nor-
males de ambos sexos. De forma sencilla se resumen los distin-
tos tipos de trabajo físico en tres grupos, teniendo en cuenta las
necesidades de energía (kcal) con relación al peso corporal (kg)
y tiempo de duración del trabajo (horas):

• Trabajo ligero (oficina, comercio,

estudiantes): 3,24 kcal/kg/hora.
• Trabajo moderado (agricultura,
industria ligera): 5,70 kcal/kg/hora.
• Trabajo pesado (leñador, metalúrgico,
atleta): 8,04 kcal/kg/hora.
De los 20 aminoáci- Además del tiempo empleado en la actividad laboral, es
dos protéicos nueve preciso contabilizar el tiempo dedicado a aquellas actividades
son esenciales, y de-
ben ser propociona- de ocio y tiempo libre que implican también un extra de
dos por la dieta. energía y que, del mismo modo, han sido calculadas y recogi-
das en tablas para su conocimiento y control.
En valores medios, las mujeres presentan una menor de-
manda de energía que los hombres debido a su composición
corporal y, en líneas generales, a una menor tasa de trabajo fí-
sico, que suele ser menos intenso que el del varón con todas
las reservas que suponen las excepciones. El gasto energético
medio para mujeres adultas sanas es de 2.000-2.300 kcal, de
las cuales unas 1.200 se requieren para el metabolismo basal y
el resto para el trabajo físico. En el hombre las necesidades me-
dias de energía se calculan en torno a 2.100-2.400, siendo la
mitad aproximadamente para el MB y la otra mitad para el tra-
bajo físico.
Acción dinamico-específica de los alimentos, también

denominada termogénesis inducida por la dieta, incluye las
necesidades de energía planteadas por la ingesta, digestión, ab-
sorción y metabolismo de los alimentos. Este efecto se encuen-
tra corregido en los cálculos dietéticos normales por lo que no
es necesario tenerlos en cuenta a la hora de calcular las necesi-
dades de energía individuales.
Además de los requerimientos energéticos diarios, el orga-
nismo necesita un aporte mínimo de proteínas para mantener
el balance nitrogenado. Este concepto se basa en la idea de
que las proteínas son los únicos macronutrientes que poseen
nitrógeno en su estructura y por lo tanto es posible establecer el
balance entre el aporte y la eliminación de nitrógeno, el cual
será positivo cuando la ingesta supere la eliminación y negativo
cuando las pérdidas superen la ingesta, siendo deseable un ba-
lance cero, es decir, que la ingesta y las pérdidas estén en equi-
librio. Los requerimientos de proteínas obedecen fundamental-
mente a la necesidad de aminoácidos para la síntesis proteica,
por lo que es fácilmente comprensible que en determinadas
etapas del crecimiento y desarrollo (infancia, adolescencia, em-
barazo, lactancia), la demanda de los mismos esté aumentada,
mientras que en los adultos que ya han completado las etapas

de crecimiento, las necesidades de mantenimiento y renova-

ción van a ser menores. A este respecto es preciso recordar que
aproximadamente el 50% de los aminoácidos proteicos son
esenciales, por lo que en caso de suministrar proteínas que no
los aporten en cantidad suficiente, será preciso suplementarlas
adecuadamente. También es importante considerar que las
proteínas pueden ser utilizadas para abastecer las necesidades
de energía en ausencia de otros sustratos energéticos, por lo
que la función plástica en estos casos aumenta los requerimien-
tos proteicos.
Para poder establecer un aporte nutricional equilibrado que
no genere ni carencias ni excedentes y que contemple los re-
querimientos individuales para los distintos nutrientes, es preci-
so tener en cuenta a modo de conclusión general lo siguiente:
Determinar el aporte energético diario, lo que puede hacer-
se de forma sencilla calculando el MB y el tipo de actividad la-
boral y de ocio que el sujeto lleva a cabo a lo largo del día.
Una vez establecidas las Kcal/día, se distribuyen entre los
macronutrientes, teniendo en cuenta las necesidades proteicas
para mantener el balance nitrogenado. Aunque en nuestro
país no se han establecido objetivos nutricionales, se recogen
los porcentajes que en opinión de los expertos están amplia-
mente aceptados, así:
azúcares ............................ 57%
grasas ............................... 30%
proteínas ........................... 13% (Fig. 19.4)
Figura 19.4.– Porcentaje de aporte de kcal por las distintas biomoléculas.
Los azúcares deben aportar la mayor parte de la energía en

cualquier tipo de dieta, administrados mayoritariamente en for-
ma de almidones, y pequeñas cantidades en forma de azucares
sencillos de absorción rápida. El aporte de fibra debe asegurar-
se a través del consumo de pan integral y legumbres, así como
de frutas y verduras crudas, que también van a aportar vitami-
nas y minerales esenciales y por tanto su consumo resulta im-
prescindible en una alimentación equilibrada.

Del 30% de grasas debe reservarse un 14-15% para el áci-

do monoinsaturado oleico y sólo un 7-8% para los ácidos gra-
sos poliinsaturados y grasas saturadas respectivamente. La in-
gesta de colesterol debe reducirse por debajo de los 300 mg.
La ingesta de proteínas para hacer frente al balance nitro-
genado, supone alrededor del 14% de las necesidades totales
de energía, la mitad de las cuales deben aportarse como ali-
mentos de origen animal y la otra mitad de origen vegetal, de-
biendo reducirse de forma especial el consumo de carnes rojas
y huevos.
Existen múltiples combinaciones para satisfacer estas nece-
sidades y numerosas tablas sobre la composición de los alimen-
tos que recogen además las necesidades mínimas diarias de es-
tos nutrientes y los alimentos que los contienen. Una recomen-
dación general, respetando la distribución porcentual descrita,
sería la de consumir alimentos variados, e incluir de manera
abundante alimentos crudos del grupo de las frutas y verduras,
ya que la cocción destruye muchas vitaminas.
RESUMEN
La absorción de nutrientes se produce fundamental-

mente en la mitad proximal del intestino delgado, aunque
en tramos inferiores también se produce absorción, funda-
mentalmente de iones y del excedente de agua presente
en el quimo. La mayoría de los nutrientes absorbidos pa-
san de la mucosa intestinal por la vena porta hasta el híga-
do, donde son inicialmente transformados según las nece-
sidades del organismo. Los lípidos sin embargo eluden
mayoritariamente el filtro hepático, alcanzando la circula-
ción sanguínea a través de la linfa.
Los nutrientes absorbidos son utilizados por los tejidos
para la obtención de energía, la síntesis de moléculas pro-
pias o para su almacenamiento y posterior utilización. To-
dos los procesos metabólicos están íntimamente relaciona-
dos, integrados y cuidadosamente regulados a diferentes
niveles. El sistema endocrino a través de la secreción hor-
monal controla el metabolismo celular especializado según
el tipo de tejido, órgano, y hasta compartimento celular
donde tienen lugar las reacciones químicas, controlando
fundamentalmente la síntesis de determinadas enzimas
que juegan un papel clave en la producción de las diferen-
tes vías metabólicas.

Enfermedad de Hirschsprung
Se trata de un trastorno congénito que se manifiesta en la

lactancia. Cursa con distensión abdominal, ausencia de movi-
mientos intestinales y alteraciones nutricionales como conse-
cuencia de la obstrucción crónica del colon. La ampolla rectal
se presenta vacía a la exploración, siendo normal el esfínter del
ano. La información que se obtiene tras la exploración con
enema opaco, pone de manifiesto un segmento estrechado,
normalmente a nivel de recto o sigma, con dilatación por enci-
ma del mismo. El tratamiento para restaurar la defecación nor-
mal debe ser quirúrgico.
Abetalipoproteinemia
La enfermedad, de carácter autosómico recesiva, se carac-

teriza por la falta de síntesis de apoproteína B, necesaria para
la formación de quilomicrones VLDL y LDL, que se presen-
tan muy disminuidas en el plasma. Los triglicéridos exógenos
se acumulan en las células intestinales epiteliales al no poder
pasar a la linfa, lo que provoca un cuadro de mala absorción
exclusiva de las grasas, con el consiguiente déficit en el desa-
rrollo del paciente. Se manifiesta en el primer año de vida
con una clínica de diarreas, distensión abdominal, anorexia y
desarrollo anormal. Más tarde se presentan alteraciones neu-
rológicas con ataxia y en la adolescencia suele aparecer reti-
nitis pigmentaria. La clínica responde a alteraciones en las
membranas celulares por hipo y dislipemia. El análisis bioquí-
mico muestra niveles reducidos de colesterol y triglicéridos.
La biopsia intestinal confirma el depósito de lípidos en los en-
terocitos. El tratamiento consiste en reducir las grasas de la
dieta, aportando triglicéridos de mediana cadena y vitaminas
liposolubles.
Obesidad infantil
El progresivo aumento de la obesidad infantil es actual-

mente uno de los problemas más importantes de salud públi-
ca. La inactividad creciente y el consumo excesivo de alimen-
tos de naturaleza grasa son las principales causas. La interven-
ción en estos niños debe hacerse lo más pronto posible y
deben tenerse presentes las necesidades nutricionales que im-

plica el propio proceso de crecimiento y desarrollo a estas

edades. El éxito del tratamiento rádica en la educación y com-
promiso de la familia en la modificación de los hábitos nutri-
cionales y de ejercicio.

Características
TEMA 20 metabólicas de los
principales órganos
Hígado. Cerebro. Corazón. Riñón. Músculo esque-

lético.
Todas las células del cuerpo humano son capaces de llevar a

cabo las rutas principales del metabolismo, si bien los distintos te-
jidos y órganos están especializados en determinadas funciones,
participando de esta forma en un reparto del trabajo metabólico,
cuya finalidad es mantener la máxima economía y regulación.
Una característica esencial de los organismos pluricelulares
es la diferenciación celular que les proporciona estructuras pro-
pias, con una actividad metabólica singular. No obstante todas
las células del cuerpo humano son capaces de llevar a cabo las
rutas principales del metabolismo, si bien, y como resultado de
la diferenciación, los distintos tejidos y órganos están especiali-
zados en determinadas funciones y presentan requerimientos
energéticos y patrones metabólicos característicos. La especiali-
zación, por tanto, confiere a las células diferencias en su capaci-
dad metabólica que constituyen un aspecto esencial de la regu-
lación metabólica de los diferentes órganos en el hombre. Estas
diferencias permiten una cooperación entre tejidos y órganos
participando de esta forma en el reparto del trabajo metabóli-
co, que a su vez exige la existencia de mecanismos de comuni-
cación intercelular, los cuales, a través de mensajeros químicos
que interaccionan con receptores celulares adecuados, modifi-
can e integran el funcionamiento metabólico cuya finalidad es
la de conseguir la máxima eficacia y economía. En el presente
tema se describen brevemente las características metabólicas
principales de los tejidos y órganos.
HÍGADO
Una vez absorbidos del tracto intestinal, los diferentes nu-

trientes son conducidos hasta las células hepáticas. En el híga-

El hígado desempeña do, los azúcares, aminoácidos y lípidos serán sometidos a dife-
muchas funciones vi- rentes procesos para ser posteriormente distribuidos a través de
tales, desde sintetizar
proteínas, regular la la sangre a los diferentes órganos.
producción de com-
puestos y transformar Azúcares: La mezcla de azúcares libres que llegan al híga-
o eliminar sustancias
tóxicas. do van a ser transformados en glucosa 6-fosfato. Tal es el caso
de las hexosas fructosa, manosa y galactosa. La glucosa 6-fos-
fato puede seguir, al menos, cinco destinos metabólicos:
El hígado tiene un 1. Parte de esta biomolécula puede ser desfosforilada por
papel central debido medio de la enzima glucosa 6-fosfatasa, y la glucosa li-
al procesamiento y
distribución de sus- bre resultante pasará a la circulación periférica mante-
tancias, y es por ello niendo así la normoglucemia, cuyos niveles resultan del
que los demás órga- equilibrio entre el consumo de glucosa por los diferentes
nos y tejidos se refie-
ren como “extrahepá- órganos y su producción por el hígado. De esta manera,
ticos” o “periféricos”. el hígado es el principal responsable del mantenimiento
de un nivel constante de glucosa en sangre.
2. Otra fracción será degradada mediante glicólisis anaero-
bia, ciclo de los ácidos tricarboxílicos y fosforilación oxi-
dativa, proporcionando energía a la célula hepática.
3. Otra parte será utilizada para la obtención de equivalen-
tes de reducción (NADPH) por medio de la vía de las
pentosas fosfato.
4. Otra fracción se transformará, en caso de no existir nece-
sidades energéticas, en glucógeno, polisacárido de reser-
va, mediante la acción catalítica de la glucógeno-sintetasa.
5. Finalmente y cuando exista excedente de glucosa-6-fos-
fato, ésta será inicialmente degradada hasta acetil-CoA y
posteriormente, a partir de este metabolito intermedia-
rio, serán sintetizados ácidos grasos para su almacena-
miento en el tejido celular subcutáneo o en la cavidad
abdominal previo transporte.
Lípidos: La grasa en forma de quilomicrones pasa desde

los enterocitos a la linfa para ser vertida en el torrente circulato-
rio. Una parte de los lípidos que alcanzan el hígado van a ser
utilizados:
1. En la síntesis de lipoproteínas, que viajarán por la sangre
hasta los tejidos periféricos.
2. Una parte de los triglicéridos será degradada hasta áci-
dos grasos, los cuales unidos a la albúmina plasmática
serán transportados mayoritariamente hasta el corazón y
músculo esquelético para su utilización.
3. Otra parte de los ácidos grasos producidos en el hígado
serán oxidados aeróbicamente para la obtención de
energía en el hepatocito.

CARACTERÍSTICAS METABÓLICAS DE LOS PRINCIPALES ÓRGANOS 271
4. Una pequeña parte del acetil CoA formado en la degra-

dación de los ácidos grasos va a rendir cuerpos cetóni-
cos: ácido acetoacético y ácido beta-hidroxibutírico. Es-
tos ácidos pasarán desde la célula hepática a la circula-
ción para alcanzar los tejidos periféricos, donde serán
oxidados a través del ciclo del ácido cítrico.
5. Finalmente otra fracción del acetil CoA, que se obtiene
de la degradación de los ácidos grasos en la célula hepá-
tica, será utilizada en la síntesis de colesterol, precursor
de otros esteroides.
Aminoácidos: Tras su absorción en el tracto intestinal, los

aminoácidos alcanzan el hígado, donde van a ser utilizados con
diferentes fines:
1. Parte de los mismos abandonarán la célula hepática al-
canzando otros órganos a través de la circulación perifé-
rica. Una vez en ellos serán utilizados en la síntesis de
nuevas proteínas.
2. Otra fracción será utilizada por el propio hígado para la
síntesis de proteínas intrínsecas y extrínsecas, que aban-
donarán la célula hepática para formar parte de las pro-
teínas plasmáticas.
3. El exceso de aminoácidos, si lo hubiere, podrá ser utili-
zado en la producción de glucosa mediante la gluco-
neogénesis, si se trata de aminoácios glucogénicos o
mixtos. Cuando las necesidades energéticas están cu-
biertas, la glucosa sintetizada de esta forma se emplea
en la síntesis de glucógeno hepático para su almacena-
miento. Otros aminoácidos, fundamentalmente los ce-
togénicos, serán transformados en acetil CoA, que
Figura 20.1.– Destinos metabólicos del piruvato.

podrá ser degradado a través del ciclo de los ácidos tri-

carboxílicos y la fosforilación oxidativa rindiendo CO2,
H2O y ATP. El acetil CoA también podrá ser utilizado
como precursor en la biosíntesis de lípidos. Estos dife-
rentes fines dependen de las necesidades energéticas
del organismo en cada momento. El amoniaco liberado
en la degradación de los aminoácidos podrá ser reutili-
zado en procesos de biosíntesis de moléculas nitroge-
nadas o bien será eliminado como urea a través del
proceso de urogénesis. Algunos de los aminoácidos
pueden transformarse en el propio hígado en otras bio-
moléculas tales como porfirinas.
CEREBRO
El combustible preferente de las células nerviosas es la glu-

cosa. El cerebro posee un metabolismo aerobio muy activo, de
tal forma que una persona adulta normal utiliza en estado de
reposo alrededor del 20% del consumo total de oxígeno. Las
neuronas apenas almacena glucógeno, lo que las hace depen-
dientes casi segundo a segundo de la glucosa que reciben des-
de el torrente circulatorio. Esta glucosa procede del hígado. En
En el ayuno prolonga- el ayuno prolongado el cerebro consume 2/3 de la glucosa que
do el cerebro consu- el hígado produce, alcanzando este consumo 100 g de glucosa
me 2/3 de la glucosa
que produce el híga- al día. Si el nivel de glucosa desciende por debajo de un nivel
do. crítico, aun siendo este descenso poco duradero, pueden apa-
recer síntomas de alteraciones cerebrales que resulten graves e
incluso lleguen a ser en ocasiones irreversibles. La glucosa es
utilizada por el cerebro de forma aeróbica. El ATP producido
va a ser utilizado para generar impulsos nerviosos y para la sín-
tesis de proteínas, ambos procesos son frecuentes en este órga-
no. El cerebro posee una concentración muy elevada de ami-
noácidos, algunos de los cuales son sintetizados in situ. Son es-
pecialmente abundantes el ácido glutámico, la glutamina, el
ácido aspártico, la glicina y el ácido aminobutírico, utilizados
como neurotransmisores en la sinápsis química. El cerebro no
tiene capacidad para metabolizar los ácidos grasos libres, sin
embargo en periodos de inanición en los que escasea la gluco-
sa, puede metabolizar cuerpos cetónicos y más concretamente
ácido E-hidroxibutírico. Este ácido se va a producir a nivel
hepático cuando exista degradación masiva de ácidos grasos li-
bres procedentes de la movilización de las reservas de triglicéri-
dos del tejido adiposo. El ácido E-hidroxibutírico se oxida en
las células nerviosas a través del ciclo de Krebs y posterior fos-
forilación oxidativa.

CORAZÓN
El músculo cardíaco presenta una intensa actividad metabó- El corazón tiene una
lica de forma permanente, la cual es de tipo aerobio. El com- intensa actividad me-
tabólica y sus com-
bustible que utiliza la célula cardíaca puede ser glucosa, ácidos bustibles son la glu-
grasos libres y cuerpos cetónicos. Todos ellos van a ser oxida- cosa, los ácidos gra-
dos a través del ciclo de Krebs y de la fosforilación oxidativa. sos y los cuerpos
cetónicos.
Debido a la permanente exigencia metabólica por parte del co-
razón, las células cardíacas contienen un gran número de mito-
condrias. La célula muscular miocárdica puede almacenar pe-
queñas cantidades de fosfato de creatina, aunque no almacena
glucógeno y tampoco grasa.
RIÑÓN
Este órgano posee un metabolismo aerobio muy activo y El riñón posee un me-
dispone de una importante flexibilidad metabólica, pudiendo tabolismo aerobio
muy activo, pudiendo
utilizar como combustible: glucosa, ácidos grasos, cuerpos cetó- emplear como com-
nicos y aminoácidos. Todos ellos van a ser degradados por el bustible: glucosa,
ciclo de los ácidos tricarboxílicos y fosforilación oxidativa para ácidos grasos, cuer-
pos cetónicos y ami-
la obtención de energía. La mayor parte de la misma será utili- noácidos.
zada en la producción de orina. Efectivamente, más de las 3/4
partes del ATP generado por el metabolismo aerobio renal
serán utilizadas para la formación de orina, mediante la acción
de mecanismos de transporte activo (Fig. 20.2).
Figura 20.2.– Interrelaciones metabólicas durante el ayuno.
MÚSCULO ESQUELÉTICO
Los músculos alma-
cenan cantidades im-
En condiciones de reposo el tejido muscular representa más portantes de fosfato
del 50% de la capacidad metabólica del cuerpo humano. Dicha de creatina.

El tejido muscular al- proporción aumenta considerablemente durante el desempeño

macena grandes can- de actividad física intensa. El metabolismo de la fibra muscular
tidades de fosfato de
creatina, una sustan- esquelética se ha especializado en la producción de ATP, para
cia de alto contenido satisfacer las demandas de energía durante la contracción mus-
energético. cular. El músculo esquelético puede emplear como combusti-
ble: glucosa, ácidos grasos libres y cuerpos cetónicos. Durante
el reposo, el combustible preferente son los ácidos grasos y en
menor proporción los cuerpos cetónicos, ambos son transfor-
mados en acetil-CoA ingresando así en el ciclo del ácido cítrico
donde serán totalmente degradados. Cuando el músculo
equelético se contrae activamente, como p.e durante una ca-
rrera veloz (100 m), la cooperación entre los distintos órganos
del cuerpo es muy limitada. De esta forma el músculo depende
de sus propias reservas de glucógeno, ATP preformado y fosfo-
creatina. La glucosa será degradada hasta piruvato mediante
glicólisis anaerobia. Una pequeña parte del piruvato producido
(dependiendo del grado de oxigenación del músculo que se
contrae) se transformará en acetil-CoA, siendo utilizado para la
obtención de energía a través del ciclo de Krebs y fosforilación
oxidativa, anque la mayor parte del ácido pirúvico producido
rendirá acido láctico en los músculos que se contraen con gran
intensidad. Posteriormente y en situación de reposo o tras la
disminución de la intensidad del esfuerzo, el ácido láctico pro-
ducido difundirá al torrente circulatorio para alcanzar el hígado,
donde a través de la gluconeogénesis rendirá de nuevo glucosa
que será recirculada hasta el músculo. Este ciclo se denomina
ciclo de Cori, cuyas relaciones se muestran en la figura 20.3.
El nivel de ácido láctico alcanzado está directamente rela-
cionado con la intensidad y duración del ejercicio físico, así
como con el grado de entrenamiento previo. El músculo es-
quelético contiene una cantidad variable de glucógeno que de-
pende del grado de entrenamiento previo y de la dieta seguida,
sobre todo cuando ésta es rica en azúcares. La cantidad de
glucógeno muscular es menor que la de glucógeno hepático
proporcionalmente, si bien el glucógeno muscular se emplea
sólo para proporcionar energía al músculo que se contrae de
forma rápida e intensa. Esta utilización exclusiva es debida a
que la célula muscular a diferencia de la hepática no contiene
glucosa-6-fosfatasa, lo que significa que el glucógeno muscular
no puede ser transformado en glucosa libre, no contribuyendo
por tanto al mantenimiento de la glucemia.
Los músculos almacenan también cantidades importantes
de fosfato de creatina. Esta biomolécula actúa como un impor-
tante tampón del nivel de ATP muscular, si bien las concentra-
ciones de ATP-preformado junto con las de fosfato de creatina
sólo pueden mantener la contracción muscular durante unos

Figura 20.3.– El ciclo de Cori.
pocos segundos, marcando el inicio de las contracciones que se

producen de manera rápida e intensa.
Por otra parte, durante el ejercicio aeróbico prolongado,
como p.e. una carrera de maratón, el cuerpo no dispone de un
almacen suficiente de glucógeno para proporcionar la energía
necesaria para este tipo de esfuerzo. Se sabe que el cociente
respiratorio (proporción entre CO2 exalado y O2 consumido)
muestra una disminución durante ejercicios físicos prolonga-
dos. Esto indica que, durante la actividad física sostenida, exis-
te un relevo progresivo de la utilización de glucosa hacia la uti-
lización de ácidos grasos libres. La lipolísis va aumentando a
medida que las reservas de glucosa disminuyen, hasta que pro-
bablemente se produce un descenso de la glucemia, a partir
del cual el músculo oxida ácidos grasos libres preferentemente,
situación similar a la que se observa en el estado de ayuno,
aunque en esta ultima situación la concentración de cuerpos
cetónicos en sangre aumenta considerablemente en contraposi-
ción a lo que ocurre durante el ejercicio físico sostenido, lo que
podría reflejar un equilibrio entre la producción hepática y el
consumo muscular de cuerpos cetónicos.

RESUMEN
Una característica esencial de los organismos pluricelu-

lares consiste en el reparto del trabajo metabólico entre los
distintos órganos y tejidos, lo que les confiere un relativo
grado de especialización. De esta forma el hígado desem-
peña un papel central en lo que se refiere al procesamien-
to y distribución de los nutrientes. Por su parte el cerebro
utiliza como sustrato preferente glucosa, pudiendo meta-
bolizar en situaciones fisiopatológicas cuerpos cetónicos.
La energía que obtiene en forma de ATP la emplea en ge-
nerar y transmitir impulsos nerviosos. El músculo cardíaco
presenta un metabolismo aeróbico en todo momento,
igual que el observado para el riñón. Éste a su vez exhibe
una importante flexibilidad metabólica al servicio de la for-
mación de orina fundamentalmente. Por último el músculo
esquelético está especializado en producir ATP para la
contracción muscular, pudiendo ser su metabolismo aero-
bio y/o anaerobio, dependiendo de la duración, intensidad
y grado de entrenamiento previo. De todo ello se despren-
de que el cerebro, corazón, riñón y músculo esquelético
poseen esquemas metabólicos característicos y están inte-
rrelacionados metabólicamente con el hígado.
Adaptaciones metabólicas al ayuno
Las reservas de glucosa en forma de glucógeno hepático y

muscular comienzan a disminuir a las 24 horas de no ingerir
alimento. Esta situación provoca un descenso en la secreción
de insulina concomitante a un aumento en la secreción de glu-
cagón. De esta forma las reservas grasas son movilizadas para
proporcionar energía al hígado y al músculo. Debido a la falta
de glucosa, la célula hepática degrada aquellas proteínas que
presentan menor utilidad. Tras la hidrólisis proteica, se utilizan
los aminoácidos glucogénicos y mixtos para la síntesis de glu-
cosa a través de la gluconeogénesis. La glucosa obtenida “de
novo” es utilizada preferentemente por las neuronas. Por otra
parte, el agotamiento de los intermediarios metabólicos del ci-
clo de Krebs que se utilizan en la producción de glucosa, pro-
voca la falta de degradación del acetil-CoA, metabolito que
procede de la E-oxidación de los ácidos grasos. El incremento

en la concentración de acetil-CoA en la célula hepática fuerza

la síntesis de cuerpos cetónicos que son exportados a la sangre
y utilizados como combustible por el músculo cardíaco, cerebro
y demás tejidos periféricos. La degradación de las reservas gra-
sas en un adulto normal puede proveer de energía durante un
periodo de tiempo aproximado de unos tres meses. Cuando las
reservas grasas se agotan se produce la degradación de proteí-
nas esenciales, lo que provoca la disfuncionalidad de corazón e
hígado y conduce finalmente a la muerte.
Diabetes Mellitus
Se trata de un síndrome crónico multifactorial, cuya princi-

pal manifestación es la hiperglucemia, la cual es responsable de
la sintomatología y de las complicaciones agudas y a largo pla-
zo que durante el transcurso de la enfermedad se van a ir pro-
duciendo. Las causas de hiperglucemia se pueden resumir en
una falta de producción de insulina o en un defecto periférico
de la misma. Aunque se pueden diferenciar distintos tipos de
diabetes según la etiología, la diabetes propiamente dicha pue-
de ser de dos clases: D.M. tipo I, también denominada juvenil
o insulina dependiente, en la cual la secreción de insulina es
inexistente debido a susceptibilidad genética (HLA), etiología
viral o autoinmune. La presentación suele ser brusca con evo-
lución hacia el coma cetoacidótico, debido a la oxidación in-
completa de ácidos grasos hasta cuerpos cetónicos, responsa-
bles de la cetosis. La segunda clase de diabetes es la D.M. tipo
II del adulto o no insulina dependiente, con una importante
carga hereditaria (alta incidencia en gemelos) y resistencia tisu-
lar a la insulina por exceso de peso. Presentación insidiosa
cuya evolución tardía puede conducir al coma hiperosmolar. El
estilo de vida juega un importante papel en la prevención de la
enfermedad. La determinación de los niveles de glucemia ba-
sales y tras sobrecarga oral con glucosa son particularmente
importantes para el diagnóstico, tratamiento y control de la en-
fermedad. En la diabetes tipo I la administración parenteral de
la hormona es imprescindible para mantener la normoglucemia
y evitar o retrasar en la medida de lo posible las complicacio-
nes. La diabetes tipo II se controla fundamentalmente con la
dieta, y antidiabéticos orales, excepcionalmente es necesaria la
administración de insulina.

La regulación
TEMA 21 hormonal
del metabolismo
La acción de las hormonas. Hormonas activas en

la superficie celular. Receptores. Segundos mensa-
jeros. Hormonas activas en el interior de la célula.
Efectos biológicos.
Las hormonas son mensajeros químicos sintetizados por

las glándulas endocrinas y liberados a la circulación sanguínea
para producir respuestas específicas. Sólo aquellos tejidos que
disponen de receptores específicos para su reconocimiento pue-
den responder al mensaje hormonal. Las hormonas juegan un
papel esencial en la regulación e integración del metabolismo,
como puede comprobarse en los capítulos precedentes. Aunque
muchas hormonas modifican el metabolismo, aquellas que
actúan sobre la síntesis proteica ejercen importantes efectos re-
guladores del mismo, a través de modificaciones en la síntesis y
concentración de proteínas clave, p.e. determinadas enzimas.
Las hormonas de naturaleza peptídica y proteica no penetran
en la célula y se unen a receptores específicos presentes en la
membrana. Las de naturaleza lipídica atraviesan la membrana
plasmática y ejercen su acción junto al receptor sobre el ADN.
LA ACCIÓN DE LAS HORMONAS
El mecanismo de acción de las hormonas se produce por fi-

jación a receptores celulares específicos, los cuales pueden en-
contrarse en la superficie celular o en su interior, bien en el nú-
cleo o en el citoplasma. Con independencia de la localización La acción de las hor-
de los receptores, su unión con la hormona específica es res- monas se realiza por
unión a receptores
ponsable de la puesta en marcha de una serie de reacciones específicos que se en-
metabólicas que constituyen la expresión biológica de la acción cuentran en la super-
hormonal. Esta unión hormona-receptor, además de específica, ficie o en el interior
de la célula.
es reversible y depende tanto de la concentración plasmática

de la hormona como del número de receptores disponibles.

Las concentraciones hormonales en plasma suelen ser muy ba-
jas y dependen del equilibrio entre la velocidad de síntesis y eli-
minación de la hormona, y de su unión a transportadores es-
pecíficos. Por otra parte, la concentración celular de receptores
también es variable, dependiendo de la concentración plasmá-
tica de la hormona específica, de forma que, cuando ésta dis-
minuye, se produce un aumento en el número de receptores y
viceversa. Las modificaciones en las concentraciones plasmáti-
cas de algúnas hormonas ejercen un importante efecto regula-
dor de su secreción por este mecanismo.
Dependiendo de la naturaleza química y, por tanto, de las
posibilidades de difusión a través de la membrana celular, las
hormonas interaccionan con receptores intracelulares o recep-
tores de membrana.
HORMONAS ACTIVAS EN LA
SUPERFICIE CELULAR
Muchas hormonas son de naturaleza peptídica y proteica

(hormonas hipofisarias y grandes péptidos no hipofisarios
como insulina, glucagón, PTH, calcitonina) lo que dificulta su
paso a través de la membrana plasmática. Para cumplir su fun-
ción hormonal de comunicación y control se unen a receptores
específicos presentes en la membrana de las células diana. La
unión hormona-receptor es la señal para que se produzcan una
serie de cambios en la propia membrana que permiten la trans-
misión de información hasta el interior celular.
En la transmisión de Este mecanismo que se conoce hoy detalladamente consta
la información hor- de los siguientes elementos:
monal participan tres
elementos: un recep- 1. Un receptor específico de naturaleza proteica capaz de
tor, una proteína de
membrana y un se- cambiar su configuración al unirse con la hormona y de-
gundo mensajero. sencadenar su acción.
2. Una proteína intrínseca de la membrana o proteína G,
denominada así por su capacidad para fijar nucleótidos
de guanina.
3. Segundos mensajeros capaces de transmitir la señal hor-
monal a la célula. Entre los mejor conocidos se encuen-
tran los nucleótidos cíclicos como el AMP cíclico (AMPc).
RECEPTORES
Los receptores de la superficie celular son de naturaleza

proteica y presentan al menos dos dominios diferentes, uno ex-

LA REGULACIÓN HORMONAL DEL METABOLISMO 281
tracelular para fijación a la hormona y otro transmembrana

para las proteínas G, encargadas de conectar los receptores
con proteínas efectoras responsables de una serie de reacciones
en cadena que culminan con modificaciones en la actividad
metabólica de la célula, objetivo final del mensaje hormonal.
Las proteínas efectoras suelen ser enzimas que catalizan la for-
mación de segundos mensajeros, los cuales difunden al interior
celular, o bien se trata de canales de paso para iones que tam-
bién alcanzan el citoplasma celular.
Las proteínas G están formadas por tres subunidades distin- Los receptores son
tas, una de ellas se encuentra unida a un nucleótido de guani- proteínas con, al me-
nos, dos dominios
na, de donde deriva su nombre. Dicho nucleótido puede estar funcionales diferen-
en forma difosfato (GDP) o trifosfato (GTP). La unión hormo- tes.
na-receptor provoca un cambio de conformación en el receptor
que desencadena la interacción con la proteína G y el inter-
cambio del nucleótido GDP por GTP, con la consiguiente acti-
vación de la proteína. El complejo activo proteína G-GTP pue-
de modular positiva o negativamente la proteína efectora. La
duración del complejo activo es muy reducida (segundos) debi-
do a la actividad GTPasa del propio complejo que produce la
transformación de GTP en GDP y la consiguiente inactivación.
Una de las proteínas efectoras más importante es la enzima El AMPc se sintetiza
de membrana adenilato-ciclasa responsable del aumento in- a partir del ATP por
la adenilato ciclasa.
tracelular de AMPc que actúa como segundo mensajero.
Figura 21.1.– Mecanismo de acción de las hormonas peptídicas.

SEGUNDOS MENSAJEROS
Existen distintas cla- Existen distintas clases de segundos mensajeros, pero los me-
ses de segundos men- jor estudiados son los nucleótidos cíclicos. Otros segundos
sajeros: AMPc, GMPc,
Ca2+, etc. mensajeros son los iones calcio o determinados intermediarios
metabólicos producidos en la respuesta hormonal, que modifi-
can la permeabilidad al calcio como ocurre con el inositol-tri-
fosfato, formado a partir de fosfatidil-inositol por acción de la
fosfolipasa C. La entrada de calcio en la célula desde el líquido
extracelular o desde el retículo endoplásmico donde se almace-
na, ejerce diversas funciones, p.e. es responsable de la contrac-
ción muscular, secreción hormonal, liberación de neurotransmi-
sores, etc. El calcio también puede activar una proteína intracelu-
lar, la calmodulina, provocándole un cambio de conformación
necesario para su acción sobre determinadas enzimas celulares.
Los nucleótidos por sí solos no son capaces de inducir una
respuesta celular, por lo que han de interaccionar con enzimas
proteína-quinasas específicas con subunidades reguladoras
para la unión al nucleótido cíclico y subunidades catalíticas que
quedan libres tras la unión y sirven para fosforilar enzimas celu-
lares. Tras la fosforilación, las enzimas pueden ser activadas o
inhibidas y, como consecuencia, se modificará la actividad ce-
lular. En general las enzimas catabólicas se activan y las anabó-
licas se inhiben.
Los principales nucleótidos que actúan como segundos
mensajeros son el AMPc y el GMPc, y las enzimas catalíticas en
cada caso son la adenilato ciclasa y guanilato ciclasa respecti-
vamente. Cuando cesa la acción hormonal, estas enzimas se
inactivan y los nucleótidos cíclicos son hidrolizados hasta AMP
y GMP por fosfodiesterasas específicas, las cuales pueden ser
moduladas por diversas sustancias, tales como prostaglandinas,
cafeina, calcio, etc.
HORMONAS ACTIVAS EN EL
INTERIOR DE LA CÉLULA
Las hormonas este- Las hormonas de naturaleza lipídica y las derivadas del
roideas y los deriva- aminoácido tirosina (catecolaminas y hormonas tiroideas),
dos de la tirosina se
unen al receptor es- pueden atravesar fácilmente la membrana plasmática, dadas
pecífico en el interior sus características de liposolubilidad. En el interior celular se li-
de la célula y no re- gan a receptores específicos intracitoplasmáticos o intranuclea-
quieren segundos
mensajeros. res. El complejo hormona-receptor se une al ADN para modifi-
car la expresión genética. La activación de determinados genes
(rara vez la inactivación) se traduce en la síntesis de proteínas
específicas.

Una diferencia importante entre los receptores de membra-

na y los receptores intracelulares es que estos últimos no
precisan de segundos mensajeros, si bien la interacción hormo-
na-receptor tiene caracteristicas similares a las descritas para las
hormonas peptídicas.
Por último es preciso señalar que el complejo hormona-re-
ceptor puede tener efectos directos en el citoplasma, los cuales
son independientes de los efectos producidos sobre el nucleo
celular, donde también puede haber receptores para las hor-
monas esteroideas, como se han demostrado para las tiroideas.
Figura 21.2.– Mecanismo general de activación de las células diana.
EFECTOS BIOLÓGICOS
Las hormonas peptídicas se sintetizan en forma de precur-

sores pre-prohormonales, en el retículo endoplásmico de las
células endocrinas y antes de abandonarlo se suelen fragmen-
tar dando lugar a la prohormona, que es transferida al apara-
to de Golgi donde será de nuevo fragmentada y almacenada
en gránulos de secreción que contienen el péptido de conexión
y la hormona totalmente aislada. El estímulo o señal específica
pone en marcha el proceso de secreción por exocitosis.
Para las hormonas derivadas del aminoácido tirosina, la sín-
tesis ocurre en el citoplasma celular, mediante una serie de re-
acciones catalizadas por enzimas, que como en el caso anterior
culminan con el almacenamiento de la hormona hasta el mo-
mento de su secreción.

Figura 21.3.– Esquema de la secreción hormonal.
Las hormonas esteroideas, por el contrario, no se encuen-

tran almacenadas en cantidades suficientes, si bien las células
endocrinas responsables de su secreción contienen las enzimas
y precursores necesarios para la síntesis y liberación casi inme-
diata de dichas hormonas ante la llegada de la señal específica.
El periodo de almacenamiento previo a la secreción hormo-
nal, el inicio de la actividad biológica tras la estimulación es-
pecífica y la duración de la misma, son factores característicos
de cada una de las hormonas y existen en consecuencia gran-
des diferencias de unas a otras.
Las hormonas peptídicas y las catecolaminas (adrenalina y
noradrenalina) circulan en sangre libremente por ser solubles
en el plasma sanguíneo, mientras que las hormonas tiroideas y
esteroideas, por su escasa solubilidad, necesitan de transporta-
dores proteicos, los cuales se comportan como almacenes cir-
culantes de la hormona, estableciéndose un equilibrio dinámi-
co entre la hormona ligada al transportador y una pequeña
concentración de hormona libre que representa la fracción
biológicamente activa, por ser la única que puede unirse de
forma específica a los receptores hormonales celulares.
El metabolismo hormonal podría definirse como la desapa-
rición irreversible de la hormona de la circulación sanguínea
tras su captación específica por la célula diana, o como la mo-
dificación de su estructura a nivel hepático y/o renal para su to-
tal eliminación.
Las concentraciones hormonales en plasma suelen ser muy
pequeñas y se encuentran sometidas a un riguroso control. El
sistema endocrino funciona como un todo, existiendo múltiples
conexiones entre las distintas glándulas endocrinas y el otro
gran sistema de coordinación y control de nuestro organismo,
el sistema nervioso.
El principal mecanis- El principal mecanismo de control de la secreción hormo-
mo de control de la nal es sin duda la retroinhibición o feed-back. Prácticamente
secreción de una hor-
mona es el de retroin- todas las hormonas se encuentran sometidas a este mecanis-
hibición. mo de control que se establece a través de diferentes interme-

diarios, como por ejemplo, el ión calcio para la secreción de

PTH; la glucosa para la secreción de insulina y glucagón pan-
creáticos, así como para otras hormonas que también partici-
pan en el control de la glucemia, tales como catecolaminas,
hormona del crecimiento y glucocorticoides; la concentración
y el volumen de los líquidos extracelulares para la secreción de
ADH, etc.
Sin embargo, el ejemplo más característico de interacción
de diferentes mecanismos de control lo constituye el eje hipotá-
lamo-hipófisis-glándulas periféricas, en el que las hormonas
producidas por las gládulas periféricas establecen una retroinhi-
bición sobre las estructuras del eje neuroendocrino, controlan-
do la producción de las hormonas tróficas que actúan sobre di-
chas glándulas periféricas (tiroides, suprarrenales y gónadas).
Además de estos sistemas de control, la secreción hormonal
ocurre de forma rítmica. Los patrones rítmicos de secreción
para las distintas hormonas son variables y están relacionados
con fenómenos de naturaleza cíclica, como son el día y la no-
che, el sueño y la vigilia, las estaciones del año, etc., pudiendo
establecerse modificaciones en la frecuencia de los pulsos de
secreción, en relación con las diferentes etapas del crecimiento
y desarrollo del individuo. Los efectos biológi-
Aunque los efectos biológicos producidos por las hormonas cos de las hormonas
se pueden agrupar en
son de distinta naturaleza, los podemos agrupar básicamente tres tipos.
en tres tipos:
1. Modifican la permeabilidad de la membrana celular y
facilitan la entrada de sustancias para su utilización
como precursores biosintéticos o como compuestos
energéticos.
2. Activan enzimas de membrana que desencadenan una
cascada de reacciones metabólicas.
3. Activan el mecanismo de transcripción de la información
genética desde el núcleo al citoplasma a partir de la sín-
tesis de ARN mensajero y su traducción en la síntesis de
proteínas celulares con actividad enzimática.
RESUMEN
La gran complejidad de las reacciones químicas que

tienen lugar en nuestro organismo, muchas de ellas en
sentidos opuestos, y que en conjunto determinan el meta-
bolismo corporal, necesitan un control riguroso. Las reac-
ciones químicas se encuentran catalizadas por proteínas

enzimáticas, muchas de ellas con una función clave en el

desarrollo de una determinada secuencia metabólica. La
regulación de estas enzimas clave permite controlar la ve-
locidad de los diferentes procesos metabólicos. El sistema
endocrino a través de mensajeros químicos denominados
hormonas ejerce parte del control del metabolismo. Las
hormonas actúan a nivel de receptores celulares presentes
en las células diana. La localización del receptor es perifé-
rica si se trata de hormonas hidrosolubles, o intracelular
para las hormonas lipídicas y derivadas del aminoácido ti-
rosina. Con independencia de la localización del receptor,
los efectos hormonales finales se traducen en la modifica-
ción de la actividad metabólica celular.
Las hormonas que actúan a nivel de membrana produ-
cen cambios de configuración en el receptor que activa
determinados mecanismos de membrana en los que están
implicados una proteína denominada G, la cual es respon-
sable de la activación de una enzima de membrana cuya
actividad final se traduce en el aumento de nucleótidos cí-
clicos en el interior celular con una gran importancia en el
control de enzimas clave del metabolismo celular. Los nu-
cleótidos cíclicos se comportan como segundos mensaje-
ros, siendo la hormona el primer mensajero. Existen otros
segundos mensajeros como el calcio o ciertos metabolitos
que modifican la permeabilidad iónica de la membrana.
Las hormonas que pueden atravesar la membrana celular
son las hormonas lipídicas y las hormonas tiroideas que se
ligan a receptores intracelulares. El complejo hormona-re-
ceptor se fija al ADN, dando lugar a la transcripción de ge-
nes específicos (síntesis proteica).
Síndrome de resistencia a la insulina
Se caracteriza por una falta de respuesta periférica a la insu-

lina debido a mutaciones múltiples en el receptor, y cursa con
hiperinsulinismo. Es posible diferenciar entre el tipo A, de pre-
sentación en mujeres jovenes de talla alta con tendencia al hir-
sutismo facial y alteraciones del aparato reproductor, funda-
mentalmente del tipo ovarios poliquísticos; y el tipo B, que co-
rresponde a mujeres mayores y se acompaña de enfermedades
del sistema inmune. Clínicamente cursa con dolores articulares,

alopecia, leucopenia, proteinuria y presencia de anticuerpos

antinucleares y anti-ADN. La acantosis nígricans constituye un
signo de resistencia a la insulina. Se trata de una hiperpigmen-
tación de la piel localizada en pliegues laterales del cuello, axi-
las e ingles.
Cólera
Se trata de una infección producida por el vibrión colérico

cuyo vehículo de transmisión es el agua y algunos alimentos de
origen marino. No existen reservorios animales y son muy raros
los portadores humanos crónicos. El periodo de incubación es
de cinco días, al cabo de los cuales se presenta un cuadro de
diarrea acuosa con pérdida de moco y electrolitos que conduce
a deshidratación, acidosis, calambres, hipotensión, shock y
muerte si no se actúa con prontitud. En caso de toxiinfección
alimentaria el comienzo suele ser con dolor abdominal y vómi-
tos que preceden a la diarrea. La tóxina proteica presenta dos
componentes, uno que permite su fijación a la mucosa intesti-
nal, y otro que actúa sobre la proteína G de la membrana dis-
minuyendo su actividad GTPasa, responsable de la activación
permanente de la enzima adenilato-ciclasa, la cual produce un
aumento extraordinario de AMPc que altera el transporte de io-
nes a través de la mucosa intestinal, provocando el escape ma-
sivo de electrolitos acompañado de grandes volúmenes de
agua hacia la luz intestinal.

Estructura de
TEMA 22 cromosomas y genes
Cromosomas. Genes. ADN: Estructura y propieda-

des. Mutaciones.
La complejidad estructural y funcional de una célula implica

el uso de una enorme cantidad de información, presente a lo
largo de su ciclo vital y repetida con absoluta identidad en to-
das y cada una de las células de un organismo pluricelular. Se
comprende pues la importante presencia celular de ADN,
como portador de información genética, constituyendo cade-
nas extraordinariamente largas, que superan con mucho la pro-
pia dimensión de la célula que lo contiene. Ello plantea un im-
portante problema de ubicación, resuelto mediante un empa-
quetamiento terciario del ADN que produce como resultado la
estructura cromosómica.
CROMOSOMAS
En las células eucarióticas, el ADN se encuentra asociado a

proteínas básicas, las histonas, formando nucleoproteínas que
se organizan de forma característica para dar lugar a la croma-
tina nuclear. Durante la fase de división, la cromatina alcanza
un mayor grado de compactación formando los cromosomas, Durante la división
que están constituidos por una única molécula lineal de ADN, celular, la cromatina
alcanza un mayor gra-
unida a histonas en cantidades prácticamente iguales, con un do de compactación
altísimo grado de empaquetamiento, cuya unidad estructural formando los cromo-
sería el nucleosoma. Resulta sorprendente la capacidad de em- somas.
paquetamiento que manifiesta el ADN. Por ejemplo, los 46 cro-
mosomas de una célula humana contienen, en conjunto, alre-
dedor de 7.800 Mpb en moléculas de ADN que extendidas lle-
garían a alcanzar algo más de 2,5 metros de longitud.
La microscopía electrónica muestra que la cromatina nucle-
ar es una organización basada en cadenas de forma esférica,

Los cromosomas es- unidas entre sí por filamentos finos de ADN. Cada una de las
tán constituidos por esferas corresponde a un nucleosoma, formado por una se-
una única molécula
lineal de ADN unida cuencia de ADN de unas 200 pb, enrollados alrededor de una
a histonas, cuya uni- estructura proteica constituida por un octámero de histonas en
dad estructural es el el que entran a formar parte dos de cada uno de los tipos H2A,
nucleosoma.
H2B, H3 y H4 (Fig. 22.1). Las histonas son proteínas caracteri-
zadas por la presencia muy elevada de aminoácidos como lisi-
na y arginina, que le confieren un carácter básico, de las cuales
se distinguen cinco tipos distintos (Tabla 22.1), cuatro que en-
tran a formar parte del nucleo central del nucleosoma y un
quinto, H1, que juega un papel importante en la conexión de
nucleosomas adyacentes.
Figura 22.1.– Nucleosoma. Núcleo central.
Tabla 22.1.– Tipos de Histonas.
Tipo Aminoácidos Relación Lys/arg Localización

H1 215 20,00 Conexión
H2A 129 01,25 Núcleo
H2B 125 02,50 Núcleo
H3 135 00,72 Núcleo
H4 102 00,79 Núcleo
Las distintas especies difieren en la cantidad de ADN que

contiene el nucleosoma, oscilando entre 160 y 240 pares de
bases, pero, independientemente de esa cantidad, aparece una

ESTRUCTURA DE CROMOSOMAS Y GENES 291
secuencia de longitud igual para todos ellos de 140 pb, que, Las distintas especies
junto al octámero de histonas, constituye el núcleo central del difieren en la canti-
dad de ADN que
nucleosoma (Fig. 22.1). Esta secuencia de 140 pb organizada contiene el nucleoso-
como superhélice levógira de ADN ejecuta una vuelta y 3/4 soma.
bre los cuatro pares de histonas, de tal forma que resulta unido
por su cara interior, sin que las proteínas sobresalgan ni rodeen
la cadena de ADN.
Cuando la secuencia de nucleótidos es algo mayor, entre
160 y 240 pb, se alcanza un nivel estructural distinto, el cro-
matosoma (Fig. 22.2), que difiere del anterior en que la cade-
na desarrolla dos vueltas sobre las histonas incorporando,
además, un monómero de histona H1, por su parte externa,
responsable de la unión con nucleosomas adyacentes. La aso-
ciación de varios nucleosomas unidos de esta manera constitu-
ye el polinucleosoma, que representa un nivel de organiza-
ción más complejo.
Figura 22.2.– Cromatosoma.
En relación con la estructura de los cromosomas, en las cé- La asociación de va-

lulas eucarióticas, durante la fase de división, una vez duplica- rios nucleosomas
constituye el polinu-
do el contenido del ADN, se produce una condensación del cleosoma, el cual re-
mismo, dando lugar a los diferentes cromosomas. En la organi- presenta un nivel de
zación del ADN cromosómico los nucleosomas constituyen la organización más
complejo.
estructura básica, los cuales se asocian para constituir fibras de
100 denominadas nucleofilamentos, y éstos, a su vez, se em-
paquetan en fibras más gruesas o solenoide de 300 o incluso

de 600, donde las histonas H1 interaccionan fuertemente entre

sí, para que permanezcan unidos los nucleofilamentos (Fig.
22.3). Los cromosomas muestran un armazón proteico central,
de naturaleza distinta de las histonas, conocido como proteínas
andamio, al que se unen las distintas fibras para que resulte
una máxima estabilización del conjunto.
Figura 22.3.– Nucleo filamento y empaquetamiento en solenoide.
En procariotas, el cromosoma bacteriano es generalmente

circular y se muestra unido a la cara interna de la membrana.
La asociación con proteínas similares a las histonas es respon-
sable de una organización en forma de cadena de cuentas que
recuerda a la de la cromatina, aunque su estabilidad es pasaje-
ra, uniéndose y disociándose en periodos de tiempo reducido.
GENES
Un gen es una se- Un gen es una secuencia de ADN que se expresa de mane-
cuencia de ADN que ra específica, codificando una cadena polipeptídica a traves del
se expresa de manera
específica codifican- ARN mensajero o produciendo formas estables de ARN distin-
do una cadena poli- tos del mensajero o participando en procesos de regulación de
peptídica, o produ- la expresión génica. A los primeros se les denomina genes es-
ciendo formas esta-
bles de RNA. tructurales y a los segundos genes reguladores. Por regla ge-
neral, los genes ocupan posiciones constantes en la cadena de
ADN y, en consecuencia, se corresponderán con segmentos de-
terminados en los cromosomas. En los virus, el material genéti-
co es reducido y puede estar en forma de ADN o ARN (ver
tema 19 de la primera parte). En los ARN-virus el genoma es
muy reducido, siendo más variable el tamaño en los de ADN.
En las bacterias, existe normalmente un sólo cromosoma circu-
Algunos genes parti- lar que contiene, en la mayoría de los casos, una única copia
cipan en procesos de de cada gen; disponen, además, de ADN extracromosómico
regulación de la ex- circular que constituye los denominados plásmidos que perma-
presión génica, por lo
que se denominan se- necen siempre aislados aunque, en determinadas ocasiones
cuencias reguladoras. pueden integrarse en el cromosoma circular, de forma tempo-

ral. En conjunto, su contenido genético es casi doscientas veces En las células euca-
mayor que en el caso de los virus, y su regulación es, por lo ge- riotas el número de
genes es 20 veces su-
neral, a nivel de transcripción, dependiente de una organiza- perior al de las bacte-
ción funcional denominada operón, que consiste en una serias.
cuencia reguladora con centros de control que ejercen su ac-
ción sobre un conjunto de genes estructurales.
En el caso de las células eucarióticas la complejidad es mu-
cho mayor, en gran medida porque el número de genes es del
orden de 20 veces superior al de las bacterias. En éstos, es fre-
cuente que existan regiones codificantes o exones, separadas
por fragmentos no codificantes o intrones (Fig. 22.4), cuya ex-
presión en el ARN es posteriormente eliminada del transcrito
primario mediante cortes y empalmes durante la fase de madu-
ración. En el ADN de las eucariotas pueden distinguirse tres ti-
pos de secuencias, las de elevada reiteración, las moderada-
mente repetidas y las de copia única o muy escasa, relaciona-
das unas con la codificación y otras con el control, las cuales se
tratarán en el apartado siguiente.
Figura 22.4.– Estructura del gen de la ovoalbúmina.

Los intrones (regiones no codificantes) se representan en azul claro.
ADN: ESTRUCTURA Y PROPIEDADES
La naturaleza química y configuración del ADN ya han sido

tratadas. En este apartado se discutirán aquellos aspectos es-
tructurales que tienen especial repercusión en la conservación y
expresión de la información genética, por una parte, la super-
helicidad del ADN y, por otra, las características distintivas de
las secuencias específicas de control y codificación que se
muestran en él.
Superenrollamiento del ADN: La mayor parte de las Las moléculas de

moléculas de ADN, tanto procariotas como eucariotas, presen- ADN presentan como
característica estruc-
tan, como una característica estructural, la existencia de giros tural la presencia de
en la dirección del eje longitudinal de la cadena que se cono- giros en la dirección
cen como superenrollamientos, tanto en las moléculas circula- del eje longitudinal,
llamados superenrro-
res como longitudinales, siempre que, en estas últimas, los ex- llamientos.
tremos permanezcan sujetos. Dos posibles caminos llevan a
esta situación (Fig. 22.5):

Figura 22.5.– Superenrollamiento del ADN. La mayoría de las moléculas de

DNA que se encuentran en la naturaleza están superenrrolladas negativamente.
a) Si un filamento trenzado que constituye un sistema esta-

ble enrollado en hélice, es girado por uno de sus extre-
mos en el sentido que reduce el número de vueltas ini-
ciales mientras permanece el otro fijo, se introduce una
tensión que, cuando se unan posteriormente los extre-
mos para formar un círculo, se liberará provocando un
enrollamiento añadido o superenrollamiento que se co-
noce como superhélice negativa.
La importancia de los b) De manera similar, si el giro al que se somete el filamen-
superenrrollamientos to provoca un exceso de vueltas, cuando se unan los ex-
guarda relación con
la compactación del tremos para formar un círculo, la liberación de la tensión
ADN y con la separa- provocará un superenrollamiento, en este caso conocido
ción transitoria de como superhélice positiva.
sus filamentos para
la replica o transcrip- La forma habitual de superenrollamiento en la naturaleza es
ción.
la superhélice negativa, pero experimentalmente pueden ser
obtenidas superhélices positivas de ADN, conformación que,
en determinadas situaciones, también aparece de forma transi-
toria in vivo. Tanto una como otra no son formas privativas de
cadenas circulares de ADN, sino que éstas pueden producirse
en moléculas lineales siempre que sus extremos permanezcan
anclados. En la formación de superhélices actúan un tipo de

enzimas denominadas topoisomerasas, que, mediante corte en

puntos determinados de la hebra y posterior unión, modifican
el grado de helicidad. En procariotas, las topoisomerasas I y III
(de tipo 1) ejercen su acción sobre una de las hebras, provo-
cando una relajación del ADN, disminuyendo así el número de
superenrollamientos negativos; las topoisomerasas II (de tipo
2), dependientes de ATP, por su parte provocan cortes que
afectan a las dos hebras de la cadena, añadiendo dos superen-
rollamientos negativos por cada intervención de la enzima.
Una topoisomerasa II bien conocida es la denominada girasa
de E. coli. En eucariotas, existen topoisomerasas de los tipos 1
y 2, sin embargo, las del tipo 2 no pueden introducir superen-
rollamientos negativos, pero sí relajar los positivos, lo que, en
definitiva, tiene como efecto la consolidación de los superenro-
llamientos negativos producidos en la formación de los nucleo-
somas. En efecto, la conformación del nucleosoma exige la
aparición de un superenrollamiento negativo, cuando la cade-
na de ADN gira alrededor del octeto de histonas, y para com-
pensarlo surge otro positivo deslocalizado. La eliminación de
este último por acción de topoisomerasas tipo 2 hace aumentar
la superhelicidad negativa.
La importancia del superenrollamiento del ADN no se re-
laciona sólo con la necesidad de compactación del ADN en la
célula, sino también con procesos esenciales que requieren la
separación transitoria de los filamentos de ADN, como la re-
plicación o transcripción, o la estabilización de determinadas
estructuras, como las cruciformes o secuencias de ADN-Z
levógiro.
Secuencias específicas: En relación con secuencias es-

pecíficas del ADN en eucariotas, a diferencia de lo que sucede
en procariotas, pueden distinguirse tres clases según su frecuen-
cia de repetición: las de alta reiteración, las moderadamente
reiteradas y las de copia única.
Un porcentaje importante del genoma humano está consti- Un porcentaje impor-
tuido por secuencias que se repiten de forma reiterada. Una de tante del genoma hu-
mano está formado
ellas de 300 pb, conocida como Alu, se encuentra repetida cer- por secuencias que se
ca de un millón de veces. Otras más pequeñas, denominadas repiten de forma rei-
ADN satélite, se encuentran repetidas unas diez mil veces, es- terada.
pecialmente agrupadas alrededor del centrómero del cromoso-
ma, por lo que se ha sugerido una función relacionada con la
actividad de éste. Otros genes aparecen reiterados de una for-
ma más moderada. En el caso de los que codifican ARN ri-
bosómico, la mayoría de los eucariotas poseen 100 copias o
más, que aparecen agrupadas en tándem, en lugares específi-
cos del cromosoma, relacionados con los nucleolos. Otro ejem-

plo de reiteración moderada se encuentra en los genes que co-

difican determinadas proteínas, como los de las histonas, que
aparecen repetidos de forma variable, según la especie, entre
algunos pares y 1.000 veces. Los genes de los cinco tipos de
histona, aparecen en una secuencia, separados por otros tantos
segmentos espaciadores, repetidos en tándem. Son característi-
cas muy particulares de los genes de histonas el hecho de care-
cer de intrones y de secuencias finalizadoras de poliadenina
(Fig. 22.6).
Figura 22.6.– Genes de histonas en el erizo de mar y en la mosca de la fruta.
Muchas proteínas vie- Por último, muchas proteínas vienen codificadas por genes
nen codifcadas por de una sola o muy escasas copias. Diferentes ejemplos han
genes de una sola co-
pia. sido constatados, como el gen de la fibroína de la seda, el de la
ovoalbúmina o los que codifican subunidades de hemoglobina,
en los reticulocitos. Un aspecto particular en estos genes que, a
la vez, pone de manifiesto el carácter adaptable del genoma, es
el hecho de que bajo presión selectiva aumentan el número de
copias, amplificando así su capacidad de expresión.
MUTACIONES
Una mutación es la Una mutación es una alteración permanente en una se-

alteración permanen- cuencia de ADN, capaz de modificar la información genética
te de una secuencia
del ADN capaz de previa, lo que repercute en el producto final de su expresión,
modificar la informa- codificando proteínas diferentes, si es que el fenómeno afecta a
ción genética previa. genes estructurales, o interfiriendo en procesos de control si se
trata de secuencias de regulación de la expresión genética. Pero
lo más importante es su trascendencia, porque puede transmi-
tirse a generaciones futuras a través de procesos normales de
replicación. El ADN genómico que contiene la información
genética de la célula resulta irreemplazable, al no disponerse

más que de una o dos copias completas, según sea su condi-

ción de célula haploide o diploide, por lo que, ante la perspec-
tiva de producción de errores, existen diferentes mecanismos
de reparación para prevenir los efectos de modificaciones es-
pontáneas inducidas por mutágenos o los fallos que tienen lu-
gar en procesos normales de replicación.
Los tipos de mutaciones más frecuentes son, la sustitución Los tipos de mutacio-
de pares de bases por otros, la eliminación de pares de bases, nes más frecuentes
son: la sustitución,
la inserción de uno o más pares de bases y la introducción de eliminación e inser-
modificaciones que afectan a la disposición de los nucleótidos. ción de uno o más
La más común de ellas, la sustitución de bases, puede ser de pares de bases.
dos tipos: transiciones, cuando se sustituye una purina con
otra purina o una pirimidina con otra pirimidina, y transver-
siones, cuando se sustituye una purina con una pirimidina o
viceversa.
Existen sustancias que tienen el carácter de mutágenos quí- Los agentes mutáge-
micos, unas por ser análogas de bases como el 5-bromo-uraci- nos pueden ser tanto
de naturaleza física
lo o la 2-amino-purina, causantes de transiciones AT GC; y como química.
otras por provocar modificaciones químicas en las bases, por
ejemplo, la hidroxilamina, que afecta específicamente a la cito-
sina provocando su transformación en un derivado que se
aparea con adenina para dar lugar a una transición CG AT.
También el ácido nitroso es otro agente modificador capaz de
provocar desaminaciones que transforman la adenina en hi-
poxantina, la citosina en uracilo y la guanina en xantina, origi-
nando transiciones AT GC.
Otros agentes tienen naturaleza física, como las radiaciones
ionizantes y luz ultravioleta. La luz UV provoca la aparición de
enlaces covalentes entre timinas contiguas, dando lugar a dí-
meros que alteran la estructura del ADN e impiden cualquier
proceso de expresión genética o replicación a partir de ellos.
Las células tienen a su disposición diferentes mecanismos
de corrección de errores que son bien conocidos en E. coli (Ta-
bla 22.2):
1. Reparación de apareamientos incorrectos: Una Los mecanismos ce-
enzima denominada Dam metilasa produce metilación lulares de corrección
de errores son: 1. re-
en las adeninas de secuencias (5')GATC, antes de la paración de aparea-
replicación. Una vez que se produce ésta, durante un mientos incorrectos.
corto periodo de tiempo pueden ser discriminadas las 2. reparación por eli-
minación de bases o
hebras molde de las hijas, hasta que finalmente actúe de nucleótidos y 3.
la enzima metilasa. Un sistema enzimático repara los reparación directa del
errores de apareamiento en regiones próximas a la se- ADN.
cuencia GATC.
2. Reparación por eliminación de base: Cuando la al-
teración corresponde a una base modificada, como

Tabla 22.2.– Mecanismos de corrección de ADN en E.coli.
Sistema
Alteración Enzimas/proteínas
reparador
Apareamientos Dam metilasa Reparación de
incorrectos ADN helicasa apareamientos
SSB incorrectos
ADN polimerasa III
Exonucleasa I
ADN ligasa
Proteínas MutH, MutL, MutS
Bases ADN glucosilasas Reparación por
modificadas AP endonucleasas eliminación de base
ADN polimerasa I
ADN ligasa
Alteraciones ABC escinucleasa Reparación por
estructurales ADN polimerasa I eliminación de
en el ADN ADN ligasa nucleótido
Dímeros de ADN fotoliasas Reparación directa
pirimidina, O6-metilguanina-ADN del ADN
O6-metilguanina metiltransferasa
desaminaciones o formación de dímeros de pirimidi-

na, enzimas del tipo ADN glucosilasas provocan la eli-
minación de la base afectada quedando, en ese lugar,
un sitio apurínico o apirimidínico (sitios AP). Posterior-
mente otras enzimas AP endonucleasas eliminan el
resto desprovisto de base, que es reemplazado por el
nucleótido correcto por medio de ADN polimerasa I y,
finalmente, se restablece la unión de la cadena me-
diante ADN ligasa.
3. Reparación por eliminación de nucleótidos: Cuan-
do tienen lugar importantes alteraciones en la estructura
del ADN, como por ejemplo, en la formación de díme-
ros de pirimidina, actúa un tipo de endonucleasa es-
pecífica que provoca la eliminación del fragmento
dañado. En E. coli interviene una enzima denominada
ABC escinucleasa capaz de provocar dos cortes, uno a
cada lado del fragmento dañado. La regeneración de la
secuencia corre a cargo de enzimas ADN polimerasa I y
ADN ligasa.
4. Reparación directa del ADN: Enzimas ADN fotoliasas,
en el caso de dímeros de pirimidina producidos por la
exposición a luz UV y O6-metilguanina-ADN metiltrans-
ferasa, en la formación de O6-metilguanina por alquila-
ción de la guanina, reparan directamente los nucleótidos
alterados, sin necesidad de provocar cortes ni elimina-
ciones en la cadena.

RESUMEN
Estructura de cromosomas y genes. En las células

eucarióticas, el ADN se encuentra asociado a proteínas
básicas, las histonas, formando nucleoproteínas, para dar
lugar a la cromatina nuclear. Durante la fase de división,
la cromatina alcanza un mayor grado de compactación
formando los cromosomas. La unidad estructural sería el
nucleosoma, formado por una secuencia de ADN de
unas 200 pb, enrollados alrededor de un octámero de his-
tonas en el que entran a formar parte dos de cada uno de
los tipos H2A, H2B,H3 y H4. Las histonas son proteínas
con un carácter básico, de las cuales se distinguen cinco ti-
pos distintos, cuatro entran a formar parte del nucleo cen-
tral del nucleosoma y un quinto tipo, H1, juega un papel
importante en la conexión de nucleosomas adyacentes.
Un nivel estructural distinto es el cromatosoma, en el que
se incorpora un monómero H1. La asociación de varios
nucleosomas unidos constituye el polinucleosoma. En los
cromosomas eucarióticos los nucleosomas constituyen la
estructura básica que se asocian para constituir fibras de
100 denominadas nucleofilamentos y éstos, a su vez,
empaquetarse en fibras más gruesas o solenoide de 300 o
incluso de 600. Los cromosomas muestran un armazón
proteico central conocido como proteínas andamio al que
se unen las distintas fibras. En procariotas, el cromosoma
bacteriano es generalmente circular y se muestra unido a
la cara interna de la membrana. Un gen es una secuencia
de ADN que se expresa de manera específica, codificando
una cadena polipeptídica o produciendo formas estables
de ARN distintos del mensajero, genes estructurales, o
participa en procesos de regulación, genes reguladores.
En los virus, el material genético es reducido y puede estar
en forma de ADN o ARN. En las bacterias existe normal-
mente un sólo cromosoma circular con una única copia de
cada gen. En el caso de las células eucarióticas la comple-
jidad es mucho mayor. En sus genes existen regiones codi-
ficantes o exones, separados por fragmentos no codifican-
tes o intrones. El ADN tanto en procariotas como eucario-
tas presenta giros en la dirección del eje longitudinal de la
cadena que se conocen como superenrollamientos, cuya
forma habitual en la naturaleza es la superhélice negativa.
En su formación actúan un tipo de enzimas denominadas
topoisomerasas. En relación con secuencias específicas

del ADN en eucariotas, a diferencia de lo que sucede en

procariotas, pueden distinguirse tres clases según su fre-
cuencia de repetición: las de alta reiteración, las modera-
damente reiteradas y las de copia única. Una mutación es
una alteración permanente en una secuencia de ADN. Las
más frecuentes son la sustitución de pares de bases por
otros, la eliminación de pares de bases, la inserción de uno
o más pares de bases y la introducción de modificaciones
que afectan a la disposición de los nucleótidos. Las células
tienen a su disposición diferentes mecanismos de correc-
ción de errores.
Las alteraciones en genes que intervienen en los sistemas

de reparación de ADN conducen a diferentes enfermedades
que frecuentemente desembocan en cáncer. El Xeroderma pig-
mentosum es una enfermedad genética autosómica recesiva
que provoca una extremada sensibilidad a la luz solar y a la ra-
diación UV. Hace su aparición en la infancia, con sequedad de
la piel, cicatrices y queratosis, acompañado de un desarrollo
atrofico de la dermis. El proceso finalmente suele conducir a la
aparición de cáncer de piel. En estudios sobre fibroblastos de la
piel se ha puesto de manifiesto, en los afectados por esta enfer-
medad, una manifiesta incapacidad para reparar los dímeros
de pirimidina producidos por efecto de la luz solar. En concreto
se ha sugerido un defecto en la escinucleasa que corta el frag-
mento dañado.
Otras enfermedades degenerativas como el cáncer colorrec-
tal sin pólipos hereditario (Síndrome de Lynch) se relacionan
con alteraciones en los sistemas de reparación de apareamien-
tos incorrectos de ADN. La mayoría de los sujetos con predis-
posición a esta enfermedad muestran mutaciones en dos genes
identificados como hMLH1 y hMSH2, cuyos equivalentes en E.
coli son las proteínas MutS y MutL, que junto con MutH inter-
vienen en procesos de reparación de ADN. Probablemente, la
imposibilidad de codificar de forma correcta proteínas depen-
dientes de hMLH1 y hMSH2 permita la acumulación de muta-
ciones que pueden afectar a genes que controlan la prolifera-
ción celular, y con ello, la aparición de la neoplasia.

Replicación y
TEMA 23 transcripción del ADN
Replicación del ADN. ADN polimerasas. Transcrip-

ción. Polinucleótido fosforilasa. Transcriptasa in-
versa y replicasas.
La conservación y expresión de la información genética exi-

ge, por una parte, la existencia de un mecanismo de copia ca-
paz de reproducir la totalidad del contenido genético de una
célula, y por otra, un dispositivo adecuado que traslade parte
de la información del ADN a moléculas de ARN, para su expre-
sión activa. Tales mecanismos son los procesos de Replicación
y Transcripción del ADN que constituyen pilares centrales del
flujo de información genética en los seres vivos, procesos com-
plejos que incluyen, además, mecanismos de control y correc-
ción, que garantizan la integridad de la información que en
cada momento se está transfiriendo. Ambos procesos se basan
en un ensamblaje ordenado de nucleótidos siguiendo un mo-
delo que actúa de molde, y una estricta ley de corresponden-
cias bajo la cual una secuencia determina invariablemente otra
complementaria.
REPLICACIÓN DEL ADN
En esencia, la replicación es un proceso de síntesis de ADN La replicación y trans-

que permite obtener una copia exacta de otra previa que actúa cripción del ADN
constituyen los pila-
como molde. Su desarrollo sigue unos principios que se man- res centrales del flujo
tienen en todos los seres vivos, procariotas y eucariotas: de información gené-
tica en los seres vivos.
1. Es semiconservativa. Las nuevas cadenas de ADN sin-
tetizadas a partir de una inicial contienen una de las he-
bras nueva y la otra vieja. Messelson y Stahl, en 1957,
pusieron de manifiesto este hecho (Fig. 23.1), siguiendo
la duplicación del ADN de células de E. coli previamente
cultivadas en un medio con isótopo pesado del nitróge-

Figura 23.1.– Experimento de Messelson y Stahl que pone de

manifiesto la replicación semiconservativa del ADN.
La replicación del no N15, lo que les permitía separar el ADN pesado frente
ADN es un proceso al normal. Trasladadas a un medio normal, se obtuvo
de síntesis que per-
mite obtener una co- ADN después de la primera duplicación que, centrifuga-
pia exacta de otra do en gradiente de densidad, formaba una única banda
previa que actúa co- de cadenas híbridas ligeras y pesadas. En la segunda ge-
mo molde.
neración, tras nueva duplicación, el ADN centrifugado
mostraba dos bandas, una de menor densidad con ADN
ligero, y otra pesada que correspondía a ADN híbrido.
Se demostraba, pues, que la duplicación se producía
sintetizando una nueva hebra sobre otra antecesora que
hacía de molde.
En las células euca- 2. Se desarrolla en ambos sentidos, a partir de un
riotas la réplica se punto origen en procariotas o varios en eucariotas.
establece a partir de
varios puntos de ini- El ADN circular de organismos procariotas se replica a
ciación en cada uno partir de un punto específico, que en E. coli se conoce
de los cromosomas. como lugar oriC, a partir del cual, la maquinaria de re-

REPLICACIÓN Y TRANSCRIPCIÓN DEL ADN 303
plicación actúa de forma bidireccional, constituyendo

sendas horquillas de replicación, hasta encontrarse en el
extremo opuesto al punto de origen (Fig. 23.2).
Figura 23.2.– Replicación del ADN en E-coli, a partir de un punto de origen.
En eucariotas, la replicación se produce a partir de va-

rios puntos de iniciación en cada uno de los cromoso-
mas, lo que resulta lógico si se considera la mayor com-
plejidad del ADN eucariótico, tanto en longitud como en
estructura.
3. La síntesis de ADN tiene lugar en dirección La síntesis de ADN
5c o 3c, a cargo de ADN polimerasas, y para su ini- ocurre en dirección
5' o 3' y corre a car-
cio se requiere una pequeña molécula cebadora, go de ADN polimera-
habitualmente ARN. En la horquilla de replicación, las sas.
cadenas del ADN que se va a copiar permanecen abier-
tas, actuando de moldes para la inserción de desoxinu-
cleótidos trifosfato (d-NTP), por parte de la ADN poli-
merasa que, de esta forma, irá generando las dos cade-
nas hijas. Pero una característica de estas enzimas es que

incorporan los nucleótidos en dirección 5c o 3c, de ma-

nera exclusiva. Esto hace que una de las cadenas, la que
coincide con dicha dirección, denominada hebra con-
ductora o guía, se sintetice de forma continua, en tanto
que la otra, la hebra rezagada, lo hace en secuencias
cortas, conocidas como fragmentos de Okazaki, que
posteriormente son unidos (Fig. 23.3). Por otra parte, la
acción de las ADN polimerasas requiere la existencia
previa de una cadena de polinucleótido sobre la cual co-
mienza a adicionar d-NTP en su extremo 3c-OH. Puesto
que ninguna enzima puede sintetizar directamente ADN,
se utiliza un pequeño fragmento cebador de ARN, sinte-
tizado por ARN polimerasas, que forman parte del com-
plejo de replicación, conocidas como primasas, siendo
posteriormente eliminado por acción exonucleasa de la
ADN polimerasa I.
Figura 23.3.– Síntesis de ADN en dirección 5c-3c por la ADN-polimerasa.
La replicación del Replicación en procariotas: En E. coli, un complejo

ADN se desarrolla en equipo enzimático que incluye polimerasas, helicasas, topoiso-
varias fases: inicia-
ción, elongación y merasas, ligasas y primasas, entre otras, constituye una entidad
terminación, siendo de control que se conoce como replisoma, encargada de llevar
necesaria la interven- a cabo la replicación del ADN, proceso que se desarrolla en va-
ción de una topoiso-
merasa para la sepa- rias fases:
ración de las cadenas
hijas. Iniciación: El segmento oriC es una secuencia de 245 pb
que tiene características específicas (Fig. 23.4): muestra un tán-
dem formado por tres segmentos de 13 nucleótidos ricos en
pares AT y, próximas a éstos, cuatro puntos de unión para la
proteína adnA (Tabla 23.1), constituidos por secuencias de

Figura 23.4.– Segmento oriC de E. coli.
Tabla 23.1.– Proteínas que participan en el inicio de la replicación en E. coli.
Proteínas del inicio de la replicación en E. coli

Proteína Acción
AdnA Separa las cadenas en el punto de inicio de la replicación
AdnB Acción helicasa. Desenrolla el ADN
AdnC Colabora en la fijación de la AdnB en el punto de inicio
HU Proteína estimuladora del inicio (tipo histona)
Primasas Síntesis de cebadores de ARN
SSB Estabiliza los filamentos sencillos una vez separados
ADN girasa Disminuye la tensión de la cadena provocada por apertura
9 pb. La fijación de esta proteína inicia el proceso de separa-

ción de las hebras de ADN, permitiendo la actuación de adnB,
enzima helicasa que cataliza el desenrollamiento de la cadena,
y adnC, que es necesaria para la correcta fijación de la ante-
rior. Una vez separadas, las hebras sencillas han de ser estabili-
zadas, lo que se logra con la fijación de una proteína SSB. La
apertura de la cadena provoca un aumento de superhelicidad
positiva que es eliminada por la acción de una topoisomerasa,
la ADN girasa, que introduce superenrollamientos negativos.
Queda así todo preparado para que se comience la síntesis de
las nuevas cadenas, en la siguiente fase de elongación. Un as-
pecto esencial es el estricto control que la célula tiene que ejer-
cer sobre la replicación de su ADN, que debe producirse una
sóla vez en cada ciclo. Se conocen al menos dos mecanismos
que participan en el control del inicio de la replicación, por una
parte, la formación de un complejo inactivo adnA-ADP, por
hidrólisis del ATP, que puede ser nuevamente reactivado por
acción de fosfolípidos ácidos de la membrana; y por otra, se
han identificado proteínas inhibidoras de la iniciación cromosó-
mica, IciA, que se fijan a los segmentos de 13 pb de la secuen-
cia iniciadora, impidiendo la acción de la proteína adnA.

Elongación: En esta fase participan diferentes enzimas que

se encuentran en la horquilla de replicación: ADN helicasas
que desenrollan el ADN parental, ADN girasas que relajan la
tensión provocada en la cadena, proteínas SSB que fijan las
hebras simples, primasas que sintetizan el ARN cebador y ADN
polimerasa III encargada de la inserción de desoxirribonucleóti-
dos trifosfato. Como se ha indicado anteriormente, la síntesis
de las cadenas de ADN se desarrolla de forma diferente, según
sea la hebra conductora o la rezagada.
En el caso de la conductora, la síntesis tiene lugar en la mis-
ma dirección de avance de la ADN polimerasa III, por coincidir
con la orientación 5c-3c del filamento. Una vez separados los fi-
lamentos por acción de la ADN helicasa e intervención de la
ADN girasa, la hebra se estabiliza por fijación de la proteína
SSB. A continuación, se sintetiza un ARN cebador por las enzi-
mas primasas, generalmente de algunas decenas de nucleóti-
dos, momento a partir del cual la ADN polimerasa puede inser-
tar desoxirribonucleótidos, siguiendo la complementaridad de
la hebra parental.
La síntesis de la hebra rezagada muestra un procedimiento
diferente al anterior. Un conjunto de proteínas que forman el
complejo regulador denominado primosoma, que contiene
adnB, adnC y primasas, entre otras; es el encargado de con-
trolar el proceso. Puesto que su orientación 3c-5c es contraria
a la de síntesis, el filamento molde tiene que formar un bucle
alrededor de uno de los dímeros de la ADN polimerasa III
(Fig. 23.5), con lo que la dirección de avance coincide ahora
con la dirección 5c-3c de la cadena a sintetizar, lo que permite
que se vayan insertando nucleótidos. Cuando se ha sintetiza-
do un fragmento de unos 1.000 nucleótidos, se desprende de
la hebra molde, para formar un nuevo bucle más adelante y
repetir así el proceso. Esto hace que la síntesis se lleve a cabo
de forma intermitente, produciendo los fragmentos de Okaza-
ki. Cada uno de ellos requiere, previo al comienzo de su sín-
tesis, un cebador que es fabricado por enzimas primasas que
forman parte del primosoma. Posteriormente son eliminados
por la acción 5c-3c exonucleasa de la ADN polimerasa I y sus-
tituidos, por esta misma enzima, con nucleótidos de desoxirri-
bosa, restableciendo así la continuidad de la cadena. La
unión entre fragmentos se lleva a cabo por una ADN ligasa
(Fig. 23.6).
Terminación: Corresponde a la finalización del proceso de

copiado y a la separación en dos cadenas hijas. Es poco conoci-
do, pero se sabe que es necesaria la intervención de una ADN
topoisomerasa IV para la separación de las cadenas sintetizadas.

Figura 23.5.– Síntesis de la hebra rezagada. Formación de un bucle

alrededor del dímero de ADN polimerasa III.
Replicación en células eucarióticas: esencialmente se

produce de manera parecida a la de los procariotas, con algu-
nas diferencias. En relación con la iniciación, se han identifica-
do, en levaduras, secuencias específicas denominadas ARS,
con longitudes de alrededor de 300 pb. En los cromosomas hu-
manos, los puntos de iniciación se encuentran separados entre
sí por distancias no superiores a 300 kb, a partir de los cuales
tiene lugar el proceso, de forma bidireccional, desde numero-
sos puntos, lo que asegura una adecuada velocidad de duplica-
ción, teniendo en cuenta que el avance de la horquilla de repli-
cación es sólo de unos 50 nucleótidos por segundo. Se desco-
noce, sin embargo, la estructura de las secuencias iniciadoras.
También en el equipo enzimático se pueden señalar aspectos

Figura 23.6.– Unión de fragmentos de Okazaki por ADN ligasa.
particulares, como ha quedado explicado anteriormente. Otros

factores de la replicación en eucariotas lo constituyen las proteí-
nas RFA que se fijan a las hebras simples del ADN desenrolla-
das con una función similar a la de SSB en E. coli; y RFC que
colabora en la estabilidad de los complejos de replicación.
ADN POLIMERASAS
Como ya se ha indicado, son las enzimas responsables de la

inserción específica de d-NTP que muestran, además, capaci-
dad de corrección y reparación. Se han estudiado con detalle
las ADN polimerasas de E. coli, desde el aislamiento de la pri-
mera por Kornberg, en 1955, lo que ha facilitado el conoci-

miento de las características propias de las que actúan en otros La ADN polimerasa I
organismos procariotas y eucariotas. es capaz de adicionar
d-NTP de forma es-
La enzima aislada por Kornberg, denominada ADN poli- pecífica a un extremo
merasa I, se trata de un monómero de 103 Kd, capaz de adi- 3'-hidroxilo de una
cionar d-NTP, de forma específica, a un extremo 3c-hidroxilo de cadena previa de
ADN.
una cadena de ADN previa, según la reacción:
(ADN)n restos d-NTP o (ADN)n 1 restos PPi
Requiere, por tanto, la existencia de una cadena cebadora

que ofrezca un 3c-OH libre, sobre el que actuar, provocando un
ataque nucleofílico del grupo hidroxilo sobre el átomo de fósfo-
ro más interno de un d-NTP (Fig. 23.7), que da lugar a un
puente fosfodiéster, con eliminación de pirofosfato, el cual es
hidrolizado posteriormente por una pirofosfatasa. Un aspecto
esencial de su funcionamiento es el hecho de estar dirigido por
un molde, es decir, un mismo centro activo es capaz de catali-
zar la inserción de cualquiera de los cuatro d-NTP, pero la ubi-
cación simultánea de la hebra molde condiciona el proceso
para que la posibilidad de incorporación de un desoxinucleóti-
do sea mínima si no puede aparearse con el de la otra hebra,
según la correspondencia de Watson y Crick, por lo que el nue-
vo filamento sintetizado es una copia fiel del original, depen-
diente en todo momento de la hebra que actúa como molde.
Pero no es ésta la única actividad que realiza esta enzima. Por
digestión con proteasas se obtienen dos fragmentos del mismo,
uno pequeño que manifiesta actividad 5c-3c exonucleasa, y
otro grande, denominado fragmento de Klenow, que conserva
Figura 23.7.– Unión de nucleotidos por la ADN polimerasa I.

las propiedades de ADN polimerasa y de 3c-5c exonucleasa.

Son, pues, tres las actividades a su cargo: ADN polimerasa,
3c-5c exonucleasa y 5c-3c exonucleasa, correspondiente, cada
una de ellas, a otros tantos centros activos que ocupan posicio-
nes diferentes en la molécula (Fig. 23.8). La actividad
3c-5c exonucleasa cataliza la hidrólisis de la cadenas de ADN en
el extremo 3c donde exista un nucleótido no apareado, lo que
constituye un mecanismo reparador de errores de inserción,
durante la polimerización. Por su parte, la actividad 5c-3c exo-
nucleasa escinde la cadena tanto en el extremo 5c terminal
como en puntos próximos a éste, jugando un papel importante
La ADN polimerasas en la corrección de errores que alteran la estructura normal del
II está involucrada en
los procesos de repa- ADN y en la eliminación del ARN cebador durante el proceso
ración del ADN. de replicación.
Figura 23.8.– Fragmentos obtenidos por digestión de la ADN polimerasa I.
La ADN polimerasas Además, se han aislado otras dos enzimas, ADN polime-
III es 100 veces más rasa II y ADN polimerasa III, que participan en el proceso
activa para la inser-
ción de nucleótidos de replicación de ADN. Ambas incorporan desoxinucleótidos
que la I, siendo el 5c-trifosfato en el extremo 3c-OH de una cadena preexistente,
componente principal manteniendo la dirección de síntesis 5c-3c y tienen, además,
del complejo multien-
zimático responsable actividad 3c-5c exonucleasa. Las evidencias han puesto de
de la síntesis de ADN. manifiesto que la ADN polimerasa II está involucrada en los
procesos de reparación del ADN, mientras que la ADN poli-
merasa III es el componente principal de un complejo mul-
tienzimático responsable de la mayor parte de la síntesis de
ADN, del que forma parte también la ADN polimerasa I, que
se encarga de eliminar el cebador y completa los huecos con
nuevo ADN, ademas de ejercer la misión correctora que le es
propia.
La ADN polimerasa III es un holoenzima compuesto de 10
subunidades con una eficacia para la inserción de nucleótidos
del orden de cien veces mayor que la de ADN polimerasa I. El
conjunto se organiza en forma de dímero asimétrico que abra-
za a la cadena de ADN, formando un anillo, de manera que
ejerce su función deslizándose a lo largo de la cadena.
En eucariotas, también existen diferentes ADN polimerasas.
Se ha identificado una ADN polimerasa a, con cuatro subuni-

dades, una de ellas con acción primasa y otra, la mayor, donde

reside la capacidad polimerasa de la enzima. Otra enzima iden-
tificada es la ADN polimerasa d, con dos subunidades, que se
asocia a una proteína nuclear denominada PCNA para consti-
tuir un complejo de síntesis que rodea a la cadena de ADN.
Las evidencias parecen apuntar a que la ADN polimerasa D tie-
ne como misión la síntesis de la cadena rezagada, mientras que
la G podría estar dedicada a la síntesis de la cadena conducto-
ra. También se conoce una ADN polimerasa e, que participa
en la reparación del ADN.
TRANSCRIPCIÓN
Es el proceso por el que se sintetiza ARN, a partir de un

fragmento de ADN, iniciando así un flujo de información que
culmina con la síntesis de ARNm y, finalmente, de proteínas;
o con la de formas estables de ARN (ARNt, ARNr, ARNnp),
con fines de regulación o catalítico. Las secuencias de ADN
utilizadas corresponden a genes o grupos de genes que cons-
tituyen una unidad de transcripción, precedidos de secuen-
cias específicas de control. Un aspecto importante del proceso
es, precisamente, que el inicio de la síntesis de ARN no se
produce en puntos cualesquiera de la cadena de ADN, sino
en lugares determinados denominados promotores, que ge-
neralmente anteceden a los genes, es decir, se localizan arriba
del nucleótido que inicia la síntesis, el cual es designado
como nucleótido 1. Es en estos puntos donde se fijan las
ARN polimerasas, para comenzar la transcripción. De la do-
ble cadena del ADN, una es la que actúa como molde o ca-
dena (), que sirve de soporte y modelo para la inserción de
ribonucleótidos, y la otra es la hebra codificante o cadena (),
que contiene la información a transferir al ARN, comenzando
desde el nucleótido 1 hasta el punto de finalización, abajo,
en dirección 5c-3c.
La síntesis de ARN está dirigida por ARN polimerasas de-
pendientes de ADN que, a diferencia de las ADN polimerasas,
no requieren una cadena cebadora previa. La enzima inserta
nucleótidos trifosfato de ribosa (NTP) siguiendo la complemen-
taridad con las bases de una hebra molde de ADN, con la sal-
vedad de que el complementario de la Adenina, en el molde,
es el uracilo, en la nueva cadena. El mecanismo de reacción es
similar al de las polimerasas de ADN, manteniéndose por tanto
la dirección de síntesis 5c-3c; y una cuestión importante es que
carecen de actividad nucleasa, por lo que no están capacitadas
para la corrección de errores.

El ARN se sintetiza a Transcripción en procariotas: En las bacterias, los pro-

partir de un fragmen- motores están situados siempre aguas arriba, constituidos por
to de ADN mediante
el proceso de trans- dos secuencias que, aunque varían en los diferentes promoto-
cripción. res, muestran nucleótidos que se repiten en todos ellos, lo que
permite definir las denominadas secuencias de consenso. En E.
coli, se sitúan en torno a las posiciones 10 y 35 y las secuen-
cias de consenso son, para el primero, TATAAT, que es conoci-
da como TATA o caja de Pribnow, y, para el segundo,
TTGAC (Fig. 23.9).
Figura 23.9.– Secuencias de consenso en promotores de procariotas.
El inicio de la sínte- Un solo tipo de ARN polimerasa dependiente de ADN se

sis de ARN se produ- encarga de la transcripción en procariotas. Se trata de una ho-
ce en lugares deter-
minados de la cadena loenzima compuesta de varias subunidades (D, E, Ec, Y y V).
de ADN, denomina- La subunidad V es la responsable del reconocimiento de los lu-
dos promotores. gares específicos para el inicio de la síntesis, al comienzo de la
unidad de transcripción. El proceso se desarrolla con una fase
de inicio, donde la ARN polimerasa se une al promotor provo-
cando la separación parcial de la cadena de ADN y la incorpo-
ración de los dos primeros nucleótidos que se aparean con sus
complementarios en la cadena molde, en el punto de comienzo
(posición 1), y posteriormente resultan unidos por enlace fos-
fodiéster. Por lo general la síntesis comienza con la inserción de
un nucleótido de adenina o guanina que conserva su carácter
de trifosfato durante todo el proceso. A partir de aquí comienza
la fase de elongación en la que van insertándose los NTP a
Las ARN polimerasas medida que se desplaza la ARN polimerasa. La cadena nacien-
se fijan en los puntos te se mantiene unida, en un tramo de unos 12 nucleótidos, al
promotores para co-
menzar la transcrip- ADN molde, formando un híbrido ADN-ARN que va escindién-
ción. dose a medida que se insertan nuevos nucleótidos (Fig. 23.10),
lo que permite que la cadena de ADN vaya recuperando su es-
tructura original. El proceso de transcripción determina la apa-
rición de tensiones en el ADN, por modificación del superenro-
llamiento, lo que exige la participación de enzimas topoisome-
rasas. La síntesis continúa hasta que determinadas secuencias
en el ADN molde y la participación de factores protéicos termi-
nadores provocan la disociación de la ARN polimerasa, y con
ello, la finalización de la transcripción. El ARN formado consti-
tuye el transcrito primario, que tiene carácter policistrónico al

Figura 23.10.– Desplazamiento de la ARN polimerasa.
proceder de unidades de transcripción compuestas por más de

un gen.
Transcripción en eucariotas: Aunque, sustancialmente,

el proceso tiene lugar de forma similar al de procariotas, exis-
ten diferencias importantes en cuanto a estructura de la unidad
de transcripción, promotores y enzimas que participan; y en
cuanto a transformaciones del ARN transcrito primario en la
etapa de maduración.
En el núcleo de las células eucarióticas se distinguen tres La síntesis de ARN es
ARN polimerasas diferentes, encargadas de la síntesis de los dirigida por ARN po-
limerasas dependien-
distintos tipos de ARN, la de Tipo I, que se encuentra en el nu- tes de ADN.
cleolo, preside la síntesis de ARNr de cadena grande (28s, 18s
y 5,8s), la de Tipo II, situada en el nucleoplasma, sintetiza
ARNm y ARN de pequeño tamaño. Finalmente, la de Tipo III,
que también se encuentra en el nucleoplasma, se encarga de la
síntesis de ARNt y ARNr 5s. Todas ellas catalizan la formación
del enlace fosfodiéster de la misma manera que las procarióti-
cas, mediante ataque nucleofílico del resto 3c-OH de la cadena
naciente sobre el fosfato más interno del NTP, no requieren una
cadena cebadora, la dirección de síntesis es 5c-3c y carecen de
actividad nucleasa. También existe una ARN polimerasa de-
pendiente de ADN en las mitocondrias.
Ademas de los promotores, en las células eucarióticas son
necesarias determinadas proteínas que colaboran en la identi-
ficación de los puntos de unión para las ARN polimerasas, la
propia fijación de éstas y el inicio de la transcripción. Tales
proteínas constituyen los denominados factores de transcrip-

ción (TF), de los cuales existen tipos específicos para cada

ARN polimerasa (TFI, TFII y TFIII, respectivamente). La ARN
polimerasa II reconoce un número muy elevado de promoto-
res diferentes que se localizan aguas arriba, en dirección 5c del
punto de iniciación de la transcripción (1). La secuencia más
cercana, en eucariotas superiores, se localiza alrededor del nu-
cleótido -25 y corresponde a un compartimento TATA (caja de
Hogness), en cuyo reconocimiento participa el factor de trans-
cripción TFIID (Fig. 23.11). Este compartimento no es sufi-
ciente para mantener una actividad transcripcional elevada del
Se distinguen tres promotor y es necesaria la intervención de otros comparti-
ARN polimerasas di- mentos que se sitúan por arriba, entre los nucleótidos 40 y
ferentes en el núcleo
de las células euca- 110 (secuencias CAAT, CG y otras). La iniciación comienza
rióticas que se encar- con la fijación de TFIID al compartimento TATA y seguida-
gan de la síntesis de mente los restantes, TFIIA y TFIIB. A continuación se incorpo-
los distintos tipos de
ARN. ra la ARN polimerasa II y TFIIE, constituyendo el denominado
aparato básico de transcripción, que sintetiza ARNm a baja
velocidad. Para un mayor rendimiento se requiere la participa-
ción de otros factores transcripcionales que actúen sobre sus
respectivos centros de control. La actividad de un número ele-
vado de promotores eucarióticos, relacionados con genes de
tipo II, se incrementa de manera notable por intervención de
las denominadas secuencias intensificadoras (enhancers), que
se encuentran en posiciones diversas, hacia arriba, hacia aba-
jo o en medio de un gen. Una propiedad de éstos es que sólo
son activos en tipos concretos de células que dispongan de
proteínas estimuladoras del intensificador. Por ejemplo la
Figura 23.11.– (A) Localización de promotores en eucariotas. (B) Localización de los factores TFII-A, TFII-B,
TFII-D y TFII-E. La ARN-pol. II y TFII-E se unen al complejo después de que lo hayan hecho los factores
TFII-A, D y E.

unión hormona-receptor, en el caso de hormonas esteroideas,

constituye un compuesto activador del intensificador capaz de
potenciar la transcripción de un determinado grupo de genes.
El hecho de que la proteína receptora aparezca sólo en tejidos
específicos restringe la actividad del intensificador y el ámbito
de intervención de la propia hormona, a las células de éste.
Una situación parecida sucede con los intensificadores virales
que, en gran medida, son la causa de la especificidad de las
infecciones víricas, en lo que se refiere tanto a hospedadores
como a tipos de tejidos susceptibles.
Procesos de maduración del ARN

transcrito primario
Una parte del ARN transcrito de células procarióticas y,

prácticamente, de todas las eucarióticas sufre un proceso de
transformación postranscripcional conocido como maduración,
que puede corresponder a: cortes específicos en la cadena, adi-
ción de secuencias nucleotídicas en ambos extremos de la ca-
dena o transformación de nucleótidos existentes.
Los ARN ribosómicos tanto de procariotas como de euca-
riotas se sintetizan a partir de un precursor largo o ARN prerri-
bosómico. También los ARNt proceden de precursores más
largos que son recortados en sus extremos 5c y 3c. En ocasiones
el precursor contiene varios ARNt que han de ser separados El ARN transcrito su-
mediante cortes específicos en la cadena dirigidos por enzimas fre un proceso de
transformación pos-
RNasas integradas por un componente protéico, acompañado transcripcional deno-
en algunos casos de ARN catalítico, como en el caso de la minado maduración.
RNasa-P. Otras transformaciones propias de los ARNt son la in-
corporación de secuencias CCA en el extremo 3c por la nucleo-
tidil transferasa y la modificación de bases que ocupan posicio-
nes características, por metilación, reducción o desaminación.
Los ARNm de eucariotas, a diferencia de los procariotas, Los ARN ribosómicos
son sintetizados en moléculas precursoras grandes que son so- se sintetizan a partir
de un precursor largo
metidas a un proceso de corte y empalme hasta acabar dando o ARN prerribosómi-
ARNm más pequeños, aptos para la codificación de un poco.
lipéptido. La razón de esto es que los genes eucarióticos contie-
nen secuencias intercaladas no codificantes (intrones) que se-
paran a las codificantes (exones), situación que queda reflejada
en el transcrito primario, el cual, asimismo, contiene intrones y
exones. La eliminación de los intrones se hace mediante cortes
y empalmes (splicing), llevado a cabo, en la mayoría de los ca-
sos, por un complejo enzimático nuclear que contiene proteí-
nas y ARN nuclear pequeño denominado espliceosoma. En
otras ocasiones se ha podido comprobar la capacidad, en de-

terminados ARN, de auto-corte de intrones. Además de los

procesos de eliminación de secuencias no codificantes, en los
ARNm eucarióticos se producen otras transformaciones, como
son: la incorporación de un casquete en el extremo 5c de la ca-
dena, formado por un resto de 7-metil-guanosina que se une al
nucleótido 5c-terminal mediante un enlace poco frecuente
5c,5c-trifosfato; y, también, la unión por el extremo 3c-OH de
una secuencia de 20 a 250 nucleótidos de adenina que consti-
tuye la cola poli(A).
POLINUCLEÓTIDO FOSFORILASA
La polinucleótido fos- Es una enzima no dependiente de ADN que polimeriza

forilasa es una enzi- ARN de forma aleatoria, incorporando nucleótidos para formar
ma no dependiente
de ADN que polimeri- un polinucleótido de ribosa. Fue aislada en 1955 por M. Grun-
za ARN de forma ale- berg-Manago y S. Ochoa, en bacterias. La reacción requiere
atoria incorporando nucleótidos-5c-difosfatos, sin que puedan ser incorporados los
nucleótidos de ribosa
para formar un poli- trifosfatos. Los nucleótidos son unidos por enlace 3c,5c-fosfo-
nucleótido. diéster. Un aspecto característico de la reacción y que, proba-
blemente, delata el papel de esta enzima, es su carácter fácil-
mente reversible, por lo que puede dirigirse en el sentido de la
hidrólisis de la cadena. Es posible que su papel en la célula sea,
en realidad, la degradación de ARN para dar los correspon-
dientes NDP libres.
TRANSCRIPTASA INVERSA Y REPLICASAS
La biología de los virus ha incorporado al dogma funda-

mental del flujo de información genética nuevas posibilidades
como son la síntesis de ADN y ARN dependientes de ARN.
Como se trató en el tema 20 de la primera parte, los retro-
virus son virus con ARN como material genético, que desarro-
llan su ciclo de infección incorporándose al genoma del hues-
ped, para lo que necesitan transcribir la información desde
En células eucarióti- ARN a ADN, esto es, en sentido inverso. Tal acción es llevada a
cas se ha identificado cabo por una enzima vírica denominada transcriptasa inversa o
una enzima similar a
la transcriptasa inver- retrotranscriptasa. Durante el proceso de infección, el virus in-
sa, produciendo ADN troduce su genoma codificado en un ARN monohebra junto
a partir de ARN en con la enzima, que cataliza la formación de una cadena com-
los telómeros de los
cromosomas. plementaria de ADN, formando un híbrido ADN-ARN, y poste-
riormente degrada la cadena de ARN sustituyéndola por ADN
complementario del primero, con lo que queda ultimado el du-
plex. Al igual que las ADN y ARN polimerasas, la transcriptasa
inversa contiene Zn2 en su molécula y, para iniciar el proceso

requiere un cebador, para lo que utiliza un ARNt que es intro- La ARN replicasa o
ducido por el virus en el proceso de internalización. El ARNt se ARN polimerasa de-
pendiente de ARN es
aparea con su secuencia complementaria en el extremo 3c de la capaz de sintetizar
cadena de ARN viral, permitiendo la acción de la transcriptasa ARN complementario
inversa que incorpora nucleótidos en dirección 5c-3c al igual a partir de ARN viral.
que las demás polimerasas. Esta enzima carece de actividad
3c-5c correctora, por lo que su tasa de error es relativamente
elevada (1/20.000).
En células eucarióticas se ha identificado una enzima que
utiliza un mecanismo similar a la transcripción inversa, produ-
ciendo ADN a partir de ARN, en los telómeros de los cromoso-
mas. El ADN telomérico plantea un problema especial, porque
al ser el ADN del cromosoma una estructura lineal, no es posi-
ble, con las enzimas habituales, situar un cebador en los extre-
mos y, posteriormente, sustituirlo por ADN. Para evitar el acor-
tamiento paulatino del cromosoma, por pérdida de nucleótidos
de los extremos, en cada ciclo de replicación, existe una enzi-
ma, la telomerasa, constituida por proteína y ARN que contie-
ne copias de los fragmentos teloméricos. Mediante una retro-
transcripción, la telomerasa incorpora ADN telomérico obteni-
do a partir del ARN.
Finalmente, existe otra enzima vírica capaz de sintetizar
ARN complementario a partir del ARN del virus, conocida
como ARN polimerasa dependiente de ARN o ARN repli-
casa. La enzima cataliza la síntesis de ARN en dirección 5c-3c,
requiriendo como molde ARN. Tienen una alta especificidad,
lo que hace que sólo actúen con ARN del virus.
RESUMEN
Replicación del ADN: Es un proceso de síntesis de

ADN que permite obtener una copia exacta de otra previa
que actúa como molde. Es semiconservativa; se desarro-
lla en ambos sentidos, a partir de un punto de origen en
procariotas, o varios en eucariotas; La síntesis de ADN tie-
ne lugar en dirección 5c-3c, a cargo de ADN polimerasas,
y para su inicio se requiere una pequeña molécula ceba-
dora, habitualmente ARN. Una de las cadenas, la que
coincide con la dirección 5c-3c, denominada hebra con-
ductora o guía, se sintetiza de forma continua, en tanto
que la otra, la hebra rezagada, lo hace en secuencias cor-
tas, conocidas como fragmentos de Okazaki, que poste-
riormente son unidas. Como cebador se utiliza un pe-

queño fragmento de ARN, sintetizado por primasas, sien-

do posteriormente eliminado por acción exonucleasa de la
ADN polimerasa I. ADN polimerasas: Son las enzimas
responsables de la inserción específica de d-NTP que
muestran, además, capacidad de corrección y reparación.
La transcripción es el proceso por el que se sintetiza ARN
a partir de un fragmento de ADN, partiendo de lugares es-
pecíficos de la cadena de ADN denominados promoto-
res, que generalmente anteceden a los genes, y está dirigi-
da por ARN polimerasas dependientes de ADN. Ademas
de los promotores, en las células eucarióticas son necesa-
rios factores de transcripción (TF). Maduración del
ARN: Una parte del ARN procariótico y, prácticamente,
todos los eucarióticos sufren un proceso de transformación
postranscripcional conocido como maduración, que puede
corresponder a cortes específicos en la cadena, adición de
secuencias nucleotídicas en ambos extremos de la cadena
o transformación de nucleótidos existentes. Polinucleóti-
do fosforilasa: Es una enzima no dependiente de ADN
que polimeriza ARN de forma aleatoria. Transcriptasa
inversa y replicasas: Los retrovirus introducen su geno-
ma codificado en un ARN monohebra junto con una enzi-
ma transcriptasa inversa que cataliza la formación de
una cadena complementaria de ADN, formando un híbri-
do ADN-ARN, y posteriormente degrada la cadena de
ARN sustituyéndola por ADN complementario del prime-
ro, con lo se obtiene un dúplex completo de ADN. En cé-
lulas eucarióticas se ha identificado una enzima, la telo-
merasa, que utiliza un mecanismo similar a la transcrip-
ción inversa, produciendo ADN a partir de ARN, en los
telómeros de los cromosomas. La ARN polimerasa depen-
diente de ARN o ARN replicasa es otra enzima vírica ca-
paz de sintetizar ARN complementario a partir del ARN
del virus.
Desde hace algún tiempo se ha tratado de establecer una

relación directa entre el acortamiento de los telómeros cro-
mosómicos y procesos de envejecimiento celular que conducen
a la pérdida de vitalidad y capacidad de división en los tejidos.
En 1986 Howard Cooke, examinando regiones teloméricas de
cromosomas sexuales humanos, observó que éstas eran más

cortas en células somáticas que en las líneas germinales, sugi-

riendo que la paulatina pérdida de la secuencia telomérica pro-
tectora podría limitar la capacidad de proliferación en estos teji-
dos. Desde entonces se ha suscitado una controversia que
poco a poco se va despejando con trabajos que aportan una
relación causal entre acortamiento de los telómeros y senescen-
cia celular, comprobada tanto en envejecimiento de cultivos ce-
lulares como en tejidos humanos, in vivo. La identificación de
la telomerasa, una nucleoproteína capaz de restaurar las se-
cuencias teloméricas, mediante transcripción inversa, a partir
del ARN que la integra, es un mecanismo esencial para el man-
tenimiento de la integridad de los telómeros, que abre perspec-
tivas insospechadas. Si el acortamiento de los telómeros consti-
tuye, de alguna manera, un reloj celular que delimita la expec-
tativa de vida en una célula, los sistemas que lo previenen
deben apuntar hacia una inmortalización de ésta. La mayor
parte de las células somáticas humanas no expresan una subu-
nidad de la telomerasa conocida como hTRT (transcriptasa in-
versa de la telomerasa humana), con lo que, a pesar de dispo-
ner del resto de unidades de la enzima, ésta no resulta activa.
Bodnar y colaboradores han comprobado que la activación de
la telomerasa en cultivos celulares humanos a los que se había
incorporado genes hTRT, provocaba una elongación artificial
en los cromosomas, por adición de secuencias repetidas
TTAGGG, que constituyen las terminaciones normales en las
regiones teloméricas, acompañada de una espectacular altera-
ción en la capacidad de crecimiento de las células. Se sabe que
los telómeros humanos pierden alrededor de 100 pb en cada
ciclo de división y, cuando han sido eliminadas algunas pocas
kilobases, la célula detiene su división y envejece. Sin embargo,
se desconoce qué mecanismo está implicado en la detección
del acortamiento telomérico y de qué forma interviene en el
funcionamiento celular. Lo que pocos dudan es de que este
proceso tiene que jugar un papel importante como sistema su-
presor tumoral en células que hayan alterado el patrón normal
de crecimiento. El avance en este campo de investigación abre
nuevas perspectivas en el control de las enfermedades tumora-
les, pero también en otros campos en los que sea un aspecto
clave el mantenimiento de la vitalidad celular, como en el caso
de enfermedades crónicas degenerativas o en las alteraciones
patológicas del envejecimiento.

Síntesis
TEMA 24 de proteínas
Ribosomas. Activación de aminoácidos. Iniciación

y ciclo de elongación. Inhibidores de la síntesis de
proteínas. El código genético.
En el esquema del flujo de la información genética, la tra-

ducción constituye el último paso que materializa la informa-
ción contenida en el ADN, mediante la descodificación de ór-
denes que determinan finalmente la secuencia de cadenas poli-
petídicas concretas. Unas moléculas del tipo ARN transferente La traducción consti-
actúan como adaptadores encargados de hacer corresponder tuye el último paso
para materializar la
las distintas órdenes genéticas, transcritas desde el ADN a información conteni-
ARNm, y dirigir la inserción de aminoácidos de forma específi- da en el ADN.
ca, de tal manera que se establece una correspondencia entre
la secuencia de nucleótidos y la cadena de aminoácidos sinteti-
zada, correspondencia que sustenta el concepto de código
genético. El orden en el que aparecen los distintos nucleótidos
en el ADN es, pues, determinante de la composición del po-
lipéptido que se sintetiza, concretamente, se sabe que cada gru-
po de tres constituye una orden genética elemental que dirige
la inserción de un aminoácido determinado y es conocido
como codón. El conjunto de codones responsables de la sínte-
sis de una cadena polipeptídica completa se ordena a lo largo
de una secuencia de ADN constituyendo un gen. La síntesis de La síntesis de proteí-
proteínas tiene lugar en fases. Tres son comunes a otros proce- nas tiene lugar en
tres fases: iniciación,
sos de síntesis de cadenas complejas: Iniciación, elongación y elongación y finaliza-
finalización. En ésta han de considerarse, además, otras fases ción.
adicionales: una previa de carácter preparatorio, con la activa-
ción de aminoácidos, y otra, posterior a la finalización, que
consiste en la maduración y plegamiento del polipéptido for-
mado. En el proceso participan más de un centenar de molécu-
las distintas, lo que pone de manifiesto su complejidad. Un gru-
po de ellas se estructuran formando los ribosomas, verdaderas
maquinarias de montaje en la síntesis de proteínas en las que

los diferentes tipos de ARNr desempeñan un papel activo junto

a proteínas.
RIBOSOMAS
Los ribosomas son Son orgánulos celulares desprovistos de membrana, consti-

orgánulos celulares tuidos en su mayor parte por diferentes tipos de ARN ribosómi-
desprovistos de mem-
brana, constituidos co (ARNr) y proteínas que actúan, en realidad, como un siste-
por diferentes tipos ma multienzimático que dirige el proceso de síntesis de proteí-
de ARN ribosómico nas. En las células procarióticas tiene un coeficiente de
(ARNr) y proteínas
que dirigen el proceso sedimentación de 70S y está formado por dos subunidades,
de síntesis proteica. una grande y otra pequeña, de 30S y 50S, respectivamente
(Fig. 24.1). La subunidad pequeña está consituida por un ARNr
16S y 21 proteínas que se identifican de la S-1 a S-21. La subu-
nidad grande la forman dos tipos de ARNr, 5S y 23S, y 34 pro-
teínas que se conocen como L-1 a L-34. En cada una de ellas
se localizan puntos críticos donde tienen lugar los diferentes pa-
sos de la síntesis de proteínas. En la porción pequeña, se locali-
za el punto de unión del ARNm, próximo al extremo 3c de la
cadena de ARNr 16S. En esta misma subunidad, en una hendi-
Figura 24.1.– Estructura y composición de los ribosomas.

SÍNTESIS DE PROTEÍNAS 323
dura se sitúa el punto de unión de los ARNt. La subunidad 50S

muestra tres protuberancias. Entre dos de ellas se localiza la ac-
tividad peptidiltransferasa, que se encarga de la formación del
enlace peptídico entre los aminoácidos, y en la tercera, de as-
pecto más estilizado, se sitúa el centro GTPasa, que se encarga
de dirigir los desplazamientos de ARNm y de transferentes. Am-
bas subunidades tienen, por tanto, forma irregular, de modo
que, cuando se acoplan, dejan entre ellas una hendidura en la
que se inserta el ARNm durante la traducción, el cual es leído
en dirección 5c-3c. En el ribosoma se delimitan dos regiones en
las que participan ambas subunidades, el lugar aminoacilo o lo-
cus A, donde se produce la incorporación de los diferentes ami-
noacil-ARNt durante la síntesis de la cadena polipeptídica, y el
peptidilo o locus P, en el que se encuentra el ARNt inmediato
anterior unido a la cadena polipetídica en formación, a la espe-
ra de la incorporación de un nuevo transferente.
En eucariotas, los ribosomas son mayores, con un coefi-
ciente de sedimentación 80S, exceptuando los de las mitocon-
drias y cloroplastos que mantienen características similares a
los de procariotas. Poseen también dos subunidades, la menor
de 40S contiene ARNr 18S, y la mayor, 60S, con ARNr 5S,
5,8S y 28S, y en ellos también se delimitan regiones A y P, con
funciones específicas durante la síntesis de proteínas.
ACTIVACIÓN DE AMINOÁCIDOS
Es una fase preparatoria que tiene un objetivo doble, por La activación de ami-
una parte, capacitar a los distintos aminoácidos para que pue- noácidos permite su
incorporación a la ca-
dan ser incorporados a la cadena naciente que se va a sinteti- dena peptídica na-
zar, mediante su unión a un transportador que es el ARNt; y, ciente gracias a la
por otra, establecer un sistema de correspondencias mediado unión específica a
sus ARNt a través de
por el por el propio ARNt, al que se unen de forma específica, los cuales puede ser
a través del cual puede ser interpretado el código genético. interpretado el códi-
Además de los 20 aminoácidos y otros tantos, o más, ARNt, go genético.
participan en esta fase enzimas aminoacil-ARNt sintetasas,
cada una de ellas es específica de la unión de un aminoácido a
su ARNt correspondiente, como establecieron Paul Zamecnik y
Mahlon Hoagland en 1957. Son enzimas dependientes de ATP
y Mg2 que catalizan la reacción:
aminoácido ARNt ATP o aminoacil-ARNt

AMP PPi
En la que el pirofosfato liberado es hidrolizado a fosfato

inorgánico, lo que hace que el conjunto del proceso tenga un

balance energético favorable. Por lo general existe una sola

Aa-ARNt sintetasa para cada aminoácido y, cuando existen
varios ARNt para un mismo aminoácido, es una Aa-ARNt sin-
tetasa común la que los une. La reacción tiene lugar en dos
pasos, primero se forma un aminoacil-AMP derivado por reac-
ción, en el centro activo, entre el grupo D-carboxilo del ami-
noácido y el resto fosfato en 5c del AMP con liberación de pi-
rofosfato, procedente del ATP. En el segundo paso, se transfie-
re el resto aminoacilo desde el aminoacil-AMP a la adenina
que constituye el extremo 3c del ARNt correspondiente. Pue-
den distinguirse dos clases de enzimas, según el curso de esta
segunda reacción: en las de clase I, la unión se hace en el hi-
droxilo 2c-OH del nucleótido 3c terminal del ARNt, y posterior-
mente es trasladado al 3c por transesterificación. En las de cla-
se II, la esterificación se produce directamente sobre el 3c-OH
del ARNt.
Cada aminoacil-ARNt sintetasa resulta doblemente especí-
fica. Por un lado, lo es de uno de los 20 aminoácidos y, por
otro, de un tipo concreto de ARNt. Este hecho es de vital im-
portancia porque permite establecer una línea de correspon-
dencia unívoca entre un aminoácido determinado y una se-
cuencia anticodón, característica del ARNt al que se une; y es
en base a esta relación como cada uno de los codones del
ARNm, dirige la inserción de un aminoácido específico, a
través de la secuencia anticodón del ARNt, a la cual se aco-
plan. El reconocimiento del ARNt por la aminoacil-ARN sinte-
tasa específica, depende de nucleótidos situados en posicio-
nes críticas (Fig. 24.2), que difieren de un ARNt a otro, loca-
lizándose preferentemente en los brazos anticodón y del
aminoácido; y se ha demostrado que la alteración de tales
nucleótidos modifica la capacidad de reconocimiento específi-
co por parte de la enzima. Otro factor que también influye en
el reconocimiento es la configuración adoptada por el ARNt
y, en algunos casos, la enzima reconoce la propia secuencia
anticodón del transferente. También el tamaño del aminoáci-
do y sus propiedades juegan un papel preponderante en la
Tanto el tamaño de unión con el ARNt adecuado. La fidelidad con la que tenga
los aminoácidos lugar el proceso de activación de aminoácidos es esencial
como sus propieda-
des, juegan un papel para el resultado final de la síntesis, puesto que a partir de
preponderante en la entonces no existe comprobación ulterior en la fase ribosómi-
unión con el ARNt ca. Muchas aminoacil-ARNt sintetasas disponen de un segun-
adecuado.
do centro específico para corrección de pruebas, que hidroli-
za la unión de aquellos aminoácidos que no sean correctos,
sin embargo otras obtienen niveles de precisión elevados con
la propia capacidad de discriminación que dispone el centro
activo de la enzima.

Cada aminoacil ARNt

sintetasa es doble-
mente específica,
tanto de aminoácido
como de ARNt.
Figura 24.2.– Puntos críticos en el reconocimiento del ARNt(Ala) de levadura.

(DHU: dihidrouridina; I: inosina; mI: metilinosina; mG: metilguanosina;
<: pseudourinina; T: ribotimidina.
INICIACIÓN Y CICLO DE ELONGACIÓN
Iniciación. En esta fase tienen lugar diferentes aconteci- La fase de iniciación

mientos que comienzan con la unión del ARNm a la unidad comienza con la unión
del ARNm a la uni-
pequeña del ribosoma, en la que intervienen factores de inicia- dad pequeña del ribo-
ción, y posterior incorporación de un ARNt iniciador que, en soma y posterior in-
procariotas, codifica la formilmetionina (f-MET) y, en eucario- corporación de un
ARNt iniciador.
tas, la metionina (MET), pero en ambos casos se trata de un
transferente distinto del que introduce el aminoácido metionina
en lugares intermedios durante el proceso de elongación de la
cadena polipetídica. Finalmente, se incorpora al conjunto la A continuación se in-
unidad grande del ribosoma, quedando todo preparado para el corpora al conjunto
la unidad grande del
ciclo de elongación de la cadena. ribosoma, quedando
En procariotas, la metionil-ARNt-sintetasa incorpora prime- todo dispuesto para
ro el aminoácido y, posteriormente, es introducido un radical el ciclo de elongación
de la cadena.
formilo en el grupo D-amino de la metionina, por acción de
una transformilasa, dando lugar al definitivo N-formilmetionil-
ARNt. En los eucariotas, aunque el aminoácido no está formi-
lado, el ARNt que actúa de iniciador es distinto al que incorpo-

ra la metionina a lo largo de la síntesis. Todos los transferentes

que se unen a la metionina, sean iniciadores o no, disponen de
un mismo anticodón (UAC) y, por tanto, su incorporación está
dirigida por un mismo codón del ARNm que es el AUG.
El proceso de iniciación es bien conocido en las bacterias.
La formación del complejo de iniciación comienza con la incor-
poración a la subunidad 30S de un factor conocido como IF-3
(factor de iniciación 3), el cual impide un ensamblaje temprano
de las unidades del ribosoma. Seguidamente se une el ARNm,
de forma que el triplete iniciador 5c-AUG queda situado en un
lugar específico. Esto ocurre así gracias a la existencia, en el
ARNm, de secuencias iniciadoras, próximas a AUG, conocidas
como secuencias de Shine-Dalgarno (Fig. 24.3), las cuales se
aparean con regiones específicas de ARN ribosómico 16S, for-
zando así una localización concreta del triplete. Son estas se-
cuencias las que permiten, además, distinguir entre el triplete
iniciador y el que codifica la inserción de metionina en posicio-
nes internas del polipéptido. Como se ha indicado en la sec-
ción anterior, en los ribosomas se consideran los lugares ami-
noacilo (A) y peptidilo (P). Durante el proceso de síntesis de
proteínas, los diferentes aminoacil-ARNt que entran, ocupan,
en primer lugar, el locus aminoacilo, sin embargo, y debido a la
posición en la que se dispone AUG, en el ribosoma, durante la
iniciación, el N-formilmetionil ARNt se sitúa directamente en el
lugar peptidilo. El siguiente paso es la incorporación del factor
IF-2 unido a GTP y la fijación del f-MET-ARNt a la subunidad
30S que se une al codón de inicio AUG. El paso final de la ini-
ciación consiste en la incorporación de la subunidad 50S del ri-
bosoma que coincide con la hidrólisis del GTP y su liberación
como GDP Pi, y la separación de los factores IF-2 e IF-3 dan-
do lugar al denominado complejo de inicio.
Figura 24.3.– Secuencias de Shine-Dalgarno próximas a AUG en el ARNm que codifica

la proteína A del fago R17.
En las células eucarióticas se conocen hasta nueve factores

de iniciación distintos. Uno de ellos, la proteína fijadora del
casquete de ARNm (resíduo de 7-metil-guanosina en el extre-

mo 5c del ARNm), permite la fijación del ARNm a la subunidad Se conocen hasta nue-
40S. A diferencia de procariotas, el ARNm eucariótico carece ve factores de inicia-
ción distintos en las
de secuencia identificadora, por lo que el triplete AUG inicia- células eucarióticas.
dor se localiza posteriormente mediante un barrido del mensa-
jero, en el que participan factores eIF4-A, eIF4-B y eIF4-F, y se
procede a la unión del Met-ARNt, facilitada por el factor eIF2.
La fosforilación del eIF2, a cargo de una proteína kinasa, impi-
de su regeneración, con lo que resulta inactivado, constituyen-
do así un mecanismo de regulación de la síntesis de proteínas
en eucariotas. En la incorporación de la subunidad grande
60S, que completa la estructura del complejo de iniciación,
participa el factor eIF5, quien promueve la eliminación de la
subunidad 40S, de factores previamente utilizados.
Elongación. Tras las fases de activación de aminoácidos e El ciclo de elonga-

iniciación, la inserción sistemática de aminoácidos para cons- ción consiste en la
inserción sistemática
truir un péptido, según las indicaciones codificadas por el de aminoácidos se-
ARNm, tiene lugar a través del ciclo de elongación. El proceso gún la información
es bien conocido en bacterias. Los requisitos para su puesta en codificada por el
ARNm.
funcionamiento son:
a) La presencia de un complejo de iniciación con las carac-
terísticas explicadas anteriormente.
b) Factores proteicos de elongación consistentes en tres
proteínas designadas como EF-G, EF-Tu y EF-Ts.
c) El aminoacil-ARNt que corresponda al siguiente codón
del ARNm, inmediato al AUG en dirección 3c, y
d) GTP.
La elongación se desarrolla mediante tres pasos que se repi- El proceso de elonga-
ten de forma cíclica (Fig. 24.4). En el primero, el aminoacil- ción continúa hasta
que se incorpora un
ARNt se une al factor EF-Tu que, previamente, ha incorporado triplete de finaliza-
GTP. A continuación, todo el conjunto se incorpora al lugar A ción.
del complejo de iniciación activo. En el segundo paso, se pro-
duce la transferencia del resto aminoacilo (en este caso formil-
metionina) desde el ARNt que se encuentra en el lugar P, al que
ocupa el lugar A, estableciéndose un enlace peptídico entre
ambos aminoácidos. El grupo D-amino del aminoácido que
ocupa el lugar A, ejerce una acción nucleofílica sobre el enlace
éster que une el resto aminoacilo con el ARNt del locus P, des-
plazándolo de éste. El resultado es que, en el lugar A, el ARNt
que lo ocupa muestra en su extremo 3c los dos aminoácidos,
en el orden en el que entraron, en tanto que, en el lugar P, el
primer ARNt que se fijó aparece desacilado. La actividad pepti-
dil transferasa que cataliza la formación del enlace peptídico
corresponde al ARN 23S y no a una proteína, como puso de
manifiesto H. Noller en 1992.

Figura 24.4.– Ciclo de elongación. (A) Complejo de iniciación. (B) Incorporación del aminoacil-ARNt si-
guiente, con intervención del factor EF-Tu. (C) Unión peptídica catalizada por la peptidiltransferasa. (D) Des-
plazamiento del ribosoma, con posterior expulsión del ARNt desacilado.
El tercer paso corresponde a la translocación del ribosoma

que se desplaza en dirección 3c hasta que un nuevo codón se
sitúa en el locus A, mientras que el ARNt con los dos aminoáci-
dos (dipeptidil-ARNt) ha pasado a ocupar el locus P y el ARNt
desacilado es liberado. Este proceso requiere la participación
del factor EF-G o translocasa y GTP.
Ahora se está en situación de repetir el mismo esquema,
esto es, incorporación de un nuevo transferente que sea com-
plementario de la secuencia codón, acción peptidil transferasa
que traslada el dipéptido del lugar P al lugar A, mediante enla-
ce peptídico, lo que da lugar a un tripéptidil-ARNt y, posterior-
mente, nueva translocación del ribosoma. En cada uno de es-
tos pasos intervienen los factores indicados y GTP como apor-

te de energía. Así, el ciclo se va repitiendo en tanto que el ri-

bosoma se desplaza en dirección 3c, incorporando un nuevo
aminoácido cada vez, con lo que la cadena polipeptídica se
alarga desde su extremo amino hacia el carboxilo terminal. El
mismo ARNm puede ser leído por varios ribosomas a la vez
que constituyen un polirribosoma, lo que aumenta la eficacia
del proceso.
En eucariotas, el ciclo de elongación sigue pasos simila-
res, con factores denominados eEF-1D, eEF-1EJ y eEF-2, cu-
yas acciones se corresponden con los de procariotas EF-Tu,
EF-Ts y EF-G.
El proceso de elongación continúa hasta que se incorpora
un triplete que tiene como significado la finalización de la sínte-
sis. En procariotas participan tres factores de liberación (RF)
que intervienen en la rotura del enlace que une la cadena poli-
peptídica al ARNt, en la liberación como polipéptido libre y en
la separación de las subunidades del ribosoma que, de esta for-
ma, queda inativo. EL factor RF-1 reconoce los codones termi-
nadores UAG y UAA, en tanto que RF-2 reconoce a UGA y
UAA En eucariotas un solo factor de liberación eRF reconoce
los tres codones de finalización.
A partir de ahora, la cadena polipeptídica entrará en una Durante la fase de
fase de maduración en la que es sometida a plegamiento y mo- maduración las pro-
teínas son sometidas
dificaciones que incluyen proteolísis en puntos específicos, mo- a plegamiento y mo-
dificación de cadenas laterales de determinados aminoácidos, dificaciones que in-
formación de enlaces covalentes entre puntos determinados, cluyen proteolísis en
puntos específicos de
generalmente puentes disulfuros entre restos de cisteína, e in- la cadena.
corporación de grupos prostéticos, entre las más relevantes.
INHIBIDORES DE LA SÍNTESIS
DE PROTEÍNAS
La posibilidad de interferir de forma específica e irreversible A través de sustan-

sobre la mayor parte de los procesos que constituyen la síntesis cias inhibidoras se
puede interferir de
de proteínas, a través de sustancias inhibidoras, es un fenóme- forma específica e
no ampliamente utilizado en la naturaleza como estrategia irreversible a lo largo
competitiva entre los distintos seres vivos, especialmente micro- del proceso de la sín-
tesis de proteínas.
organismos. Antibióticos y toxinas integran la mayor parte del
arsenal de este tipo de sustancias. Los aminoglucósidos (estrep-
tomicina, neomicina, tobramicina, etc.) actúan inhibiendo la
síntesis bacteriana de proteínas en etapas iniciales de activa-
ción y en la formación del complejo iniciador. La estreptomici-
na impide la translocación del ribosoma a lo largo del ARNm lo
que bloquea la traducción e impide la incorporación de nuevos
ribosomas. Las tetraciclinas se unen a la subunidad 30S de ri-

bosomas bacterianos impidiendo la incorporación del aminoa-

cil-ARNt al locus A y, además, ejercen un efecto quelante sobre
el Mg2, dificultando la unión de las dos subunidades ribosómi-
cas. Los fenicoles (cloranfenicol) bloquean la transferencia de
la cadena peptidílica del locus P al locus A, impidiendo la for-
mación del enlace peptídico, efecto que puede aparecer tam-
bién en algunas células eucarióticas, lo que explica la toxicidad
de estos fármacos.
Los antibióticos y las Otro grupo de inhibidores con especial repercusión en el
tóxinas bacterianas, hombre son las toxinas. La toxina diftérica, procedente del
integran la mayor
parte del arsenal de Corynebacterium diphteriae, actúa sobre el factor de elonga-
sustancias inhibido- ción eucariótico eEF-2, responsable de la translocación del ri-
ras. bosoma. La toxina produce una ADP-ribosilación en un resto
modificado de la histidina, denominado diftamida. La transfor-
mación de la diftamida bloquea la capacidad de eEF-2 para
promover el desplazamiento del ribosoma sobre el ARNm.
También la ricina, procedente del ricino, tiene una acción inhi-
bidora sobre los ribosomas eucarióticos.
EL CÓDIGO GENÉTICO
Desde la identificación de los ácidos nucléicos como sopor-

te de la información genética, se hacía evidente que el orden
en el que aparecía la secuencia de nucleótidos codificaba la
inserción de aminoácidos en la síntesis de una cadena poli-
peptídica. Puesto que son 20 los aminoácidos a codificar, la
mínima unidad de codificación habría de construirse al menos
con secuencias de tres nucleótidos, ya que de ello resultarían
combinaciones suficientes para este propósito (43 64). En los
años sesenta, los trabajos realizados por Nirenberg, Mathaei y
Leder y finalmente las observaciones de Khorana contribuye-
ron decisivamente a la identificación de los tripletes de nucleó-
tidos que codificaban todos los aminoácidos, estableciendo
una especie de diccionario que se conoce como código genéti-
co (Tabla 24.1).
De los 64 tripletes de De las 64 combinaciones, 61 codifican la inserción de ami-
nucleótidos identifi- noácidos y tres, UAA, UAG y UGA, se denominan codones sin
cados, 61 codifican
aminoácidos y tres, sentido, cuyo papel es indicar el punto de finalización del pro-
UAA, UAG y UGA, ceso, provocando la liberación de la cadena polipeptídica, jun-
son tripletes de finali- to con los correspondientes factores de liberación.
zación, provocando
la liberación de la ca- Una de las características más notorias del código genético
dena peptídica sinte- es el hecho de que un mismo aminoácido venga codificado por
tizada. varios codones, por lo que se dice que el código está degenera-
do, sin embargo, ello no quiere decir que sea ambiguo, puesto
que un mismo triplete sólo puede especificar un aminoácido

Tabla 24.1.– Código genético. En negrita se muestran resaltados

los tripletes de terminación y el de iniciación.
U C A G
UUU Fen UUC Ser UAU Tirl UGU Cis U
UUC Fen UUC Ser UAC Tir UGC Cis C
U
UUA Leu UCA Ser UAA Final UGA Final A
UUG Leu UCG Ser UAG Final UGG Trp A
CUU Leu CCU Pro CAU His CGU Arg U
CUC Leu CCC Pro CAC His CGC Arg C La secuencia de nu-
C cleótidos codifica la
CUA Leu CCA Pro CAA Gln CGA Arg A
CUG Leu CCG Pro CAG Gln CGG Arg A secuencia de aminoá-
cidos en la síntesis
AUU Ile ACU Tre AAU Asp AGU Ser U peptídica.
AUC Ile ACC Tre AAC Asp AGC Ser C
A
AUA Ile ACA Tre AAA Lis AGA Arg A
AUG Met ACG Tre AAG Lis AGG Arg G
GUU Val GCU Ala GAU Asp GGU Gli U
G GUC Val GCC Ala GAC Asp GGC Gli C
GUA Val GCA Ala GAA Glu GGA Gli A
concreto. El orden en que se lee un codón es 5c-3c, como co-

rresponde a la dirección de avance del ribosoma, y el triplete
anticodón del ARNt se inserta en dirección 3c-5c, es decir, que
la primera base del codón se aparea con la tercera del anti-
codón. De los tres nucleótidos del transferente, el primero de
ellos puede formar combinaciones al margen del patrón de
Watson y Crick, mediante puentes de hidrógeno más débiles
que las uniones A-U y G-C. Este hecho sustenta la hipótesis del
balanceo, que afecta a la unión de los ARNt al mensajero, y
que justifica la existencia de más de un codón para la mayoría
de los aminoácidos. Según esto, los dos primeros nucleótidos
del codón establecen uniones estrictas, según el modelo habi-
tual, con el tercero y segundo del anticodón, respectivamente,
siendo responsables de la especificidad definitiva de la secuen-
cia, en tanto que la tercera base del triplete codón puede unir-
se, de manera menos específica, con el primero del anticodón,
lo que hace que un mismo aminoácido pueda ser codificado
por secuencias que se diferencien en el tercero de los nucléoti-
dos, dentro de unos límites. Así, arginina o leucina disponen de
hasta seis secuencias codificadoras, mientras que triptófano o
metionina sólo de una. La hipótesis del balanceo puede esque-
matizarse según cuatro relaciones establecidas por Crick:
1. Las dos primeras bases de un codón establecen uniones
estrictas con el anticodón, según el modelo de aparea-
miento de Watson y Crick.
2. La primera base de un anticodón, que se aparea con la
tercera del codón, determina el número de codones que
pueden ser compatibles. Así, cuando se trata de C o A,

la fijación resulta específica y corresponde a un solo

codón; por el contrario, cuando se trata de U o G, el
mismo ARNt puede leer dos codones; y, si se trata del
nucleótido modificado inosinato, el ARNt puede fijarse
hasta con tres codones diferentes.
3. Cuando un aminoácido viene especificado por diferen-
tes codones, los que difieren en las dos primeras bases
requieren ARNt distintos.
4. Para la traducción de los 61 codones son necesarios 32
ARNt.
Como regla general, el ARNm es leído desde el triplete ini-
ciador AUG, hacia el extremo 3c, siguiendo la secuencia de co-
dones, en un único marco de lectura, es decir, considerando la
primera base contigua al AUG como inicio del triplete y así su-
cesivamente (Fig. 24.5), hasta llegar a un triplete terminador.
Se ha observado en virus la utilización de diferentes marcos de
lectura, como consecuencia de la existencia de genes solapa-
dos, es decir, genes que constituyen fragmentos de otro gen.
Otra posibilidad de modificación del marco de lectura de un
ARNm es la edición postranscripcional, como sucede en el caso
de la síntesis de la apolipoproteína B de la LDL (lipoproteína
de baja densidad), en el hombre, que permite la síntesis de las
formas hepática e intestinal de la misma, a partir de un único
ARNm, por acción de una enzima citosina desaminasa intesti-
nal, que provoca la transformación de un codón específico
CAA en el triplete de finalización UAA, resultando así la forma
corta intestinal de la proteína.
Figura 24.5.– Ejemplo de utilización de diferentes marcos de lectura en el gen D, del ADN del virus IX174,
que contiene el gen E. En la secuencia superior, la lectura a partir del triplete iniciador AUG en el ARNm
transcrito da lugar a una proteína, en tanto que una modificación en el marco de lectura que afecta al codón
UAU (tyr), es leído como AUG (Met), lo que inicia una segunda proteína.
El código genético es El código genético tiene una vigencia universal, siendo apli-
universal, siendo de cable a la totalidad de los seres vivos, con algunas excepciones
aplicación a la totali-
dad de los seres vi- encontradas en mitocondrias, cloroplastos y algunos eucariotas
vos. unicelulares.

RESUMEN
La traducción constituye el último paso que materializa

la información contenida en el ADN. Unas moléculas del
tipo ARN transferente actúan como adaptadores dirigien-
do la inserción de aminoácidos de forma específica, de tal
manera que se establece una correspondencia entre la se-
cuencia de nucleótidos y la cadena de aminoácidos sinteti-
zada. Un grupo de tres nucleótidos consecutivos, en el
ARNm, constituye una orden genética elemental que diri-
ge la inserción de un aminoácido determinado y es cono-
cido como codón. Los ribosomas son orgánulos celulares
desprovistos de membrana, constituidos en su mayor par-
te por diferentes tipos de ARN ribosómico (ARNr) y proteí-
nas que actúan como un sistema multienzimático que diri-
ge el proceso de síntesis de proteínas. La síntesis de proteí-
nas se produce en fases: Activación de aminoácidos:
con un objetivo doble, capacitar a los distintos aminoáci-
dos para que puedan ser incorporados a la cadena nacien-
te y establecer un sistema de correspondencias que inter-
prete el código genético. Iniciación: que comienza con la
unión del ARNm a la unidad pequeña del ribosoma, en la
que intervienen factores de iniciación, y posterior incorpo-
ración de un ARNt iniciador. Finalmente, se incorpora al
conjunto la unidad grande del ribosoma, quedando todo
preparado para la siguiente fase. Elongación: donde tie-
ne lugar la inserción sistemática de aminoácidos para
construir un péptido, según las indicaciones codificadas
por el ARNm. Finalización: el proceso de elongación
continúa hasta que se incorpora un triplete que tiene
como significado la finalización de la síntesis. Madura-
ción: en la que los polipéptidos sintetizados son someti-
dos a plegamiento y modificaciones que incluyen proteoli-
sis, modificación de cadenas laterales, formación de enla-
ces covalentes, generalmente puentes disulfuros e
incorporación de grupos prostéticos. Inhibidores de la
síntesis de proteínas: los aminoglucósidos (estreptomi-
cina, neomicina, tobramicina, etc.) inhiben la síntesis bac-
teriana en etapas iniciales de activación y en la formación
del complejo iniciador. La estreptomicina impide la trans-
locación del ribosoma a lo largo del ARNm. Las tetracicli-
nas impiden la incorporación del aminoacil-ARNt al locus
A y, además, ejercen un efecto quelante sobre el Mg2, difi-
cultando la unión de las dos subunidades ribosómicas. Los

fenicoles (cloranfenicol) bloquean la transferencia de la ca-

dena peptidílica del locus P al locus A. La toxina diftérica
actúa sobre el factor de elongación eucariótico eEF-2, res-
ponsable de la translocación del ribosoma. La ricina, pro-
cedente del ricino, tiene una acción inhibidora sobre los ri-
bosomas eucarióticos. El código genético: se han identi-
ficado los tripletes de nucleótidos que codifican todos los
aminoácidos, lo que se conoce como código genético. De
las 64 combinaciones, 61 codifican la inserción de ami-
noácidos y tres indican finalización del proceso. Se dice
que el código está degenerado por el hecho de que un
mismo aminoácido puede estar codificado por varios co-
dones, pero no es ambiguo, puesto que un mismo triplete
sólo puede especificar un aminoácido concreto. El código
genético tiene una vigencia universal, con algunas excep-
ciones encontradas en mitocondrias, cloroplastos y algu-
nos eucariotas unicelulares.
Por lo general, el marco de lectura de un ARNm es único y

comienza con la primera base del triplete contiguo al AUG ini-
ciador. No obstante, en determinadas ocasiones, las modifica-
ciones en el patrón de lectura permiten la obtención de formas
variadas del polipéptido, conservando su funcionalidad o bien
adquiriendo otra (véase el apartado Código Genético). Sin
embargo, otras variaciones en el marco de lectura del ARNm
conducen a alteraciones patológicas como las que tienen lugar
en relación con la síntesis de hemoglobina, como consecuen-
cia de alteración en los codones terminadores. Las talasemias
constituyen un conjunto de síndromes que afectan a la estruc-
tura y tamaño de las cadenas D y E que integran la hemoglo-
bina. La talasemia D se produce por mutación en el codón ter-
minador UAA, en posición 142, lo que provoca cadenas de
globina D más largas de lo normal, por lo general de 172 ami-
noácidos, en lugar de 141. En la talasemia E0 no se sintetiza la
globina E debido a una mutación en el codón 17 del gen, que
transforma AAG (lisina) en el terminador UAG. Los péptidos
obtenidos no tienen capacidad para constituirse como cade-
nas E funcionales y, en consecuencia, la globina D se acumula
precipitando y alterando la membrana celular, provocando un
síndrome hemolítico. Otras mutaciones que alteran el marco
de lectura normal del ARNm que codifica cadenas de globina

conducen, por el contrario, a situaciones de policitemia, como

en el síndrome de McKees Rocks. En este caso, la mutación
afecta al codón en posición 145 de la globina E, que codifica
tirosina, de UAU o UAC a los finalizadores UAA o UAG, lo
que provoca un ligero acortamiento desde 146, que son los
residuos normales, a 144. El resultado es una cadena funcio-
nal, pero con una apetencia muy elevada por el oxígeno, lo
que es compensado con un aumento de la eritropoyesis que
lleva a la situación de policitemia.

Tecnología de
TEMA 25 ADN recombinante
Fundamentos de la clonación. Vectores de clona-

ción. Estrategia de la clonación. Aplicaciones a las
ciencias médicas.
La tecnología del ADN recombinante comprende una serie

de métodos para identificar un gen (o segmentos concretos de
ADN) en un organismo, aislarlo, analizarlo, si es preciso, modi-
ficarlo y reinsertarlo dentro de otro organismo consiguiendo
que se exprese con normalidad.
Los objetivos de este conjunto de técnicas son, principal-
mente:
1. Obtener grandes cantidades del producto del gen.

2. Conocer las consecuencias de una determinada modifi-
cación del gen en el funcionamiento celular.
3. Sustituir un gen defectuoso por otro normal.
Estas técnicas han permitido un avance considerable de la

biología y genética molecular, la medicina, la agricultura y la
ecología. En medicina están proporcionando nuevos métodos
de diagnóstico, de agentes terapéuticos y revelando el mecanis-
mo molecular de diversas enfermedades.
FUNDAMENTOS DE LA CLONACIÓN
El conjunto de bacterias que surgen de una bacteria aislada

en una placa de cultivo, y que se conoce como colonia, es, sen-
cillamente, un clon. Clonar es hacer copias idénticas de unos
organismos, células, virus o moléculas de ADN derivadas de la
replicación de un único progenitor genético. Mediante la clona-
ción se puede disponer de cantidades suficientes de un único
tipo de células.

Etapas de la clona- La clonación de un gen o un fragmento de ADN implica la

ción: separación del resto del genoma, la unión a una molécula por-
1. C o r t e d e l A D N
genómico por si- tadora y la inserción en un organismo para poder amplificarlo
tios específicos. muchas veces. Con este procedimiento se pueden obtener mi-
2. Elección de molé- les e incluso millones de copias del gen o fragmento de ADN
culas de ADN (vec-
tores) capaces de inicial.
autorreplicarse. La clonación requiere básicamente las siguientes etapas:
3. Unión de los frag-
mentos de ADN a 1. Corte del ADN genómico por sitios específicos y obten-
los vectores. ción de los fragmentos de ADN.
4. Introducción de
los fragmentos de 2. Elección de moléculas de ADN (vectores) capaces de
ADN-vector en cé- autorreplicarse y corte específico de las mismas.
lulas huésped. 3. Unión de los fragmentos de ADN a las moléculas auto-
5. Selección e identi-
ficación de células rreplicativas (recombinación).
huésped con el vec- 4. Introducción de ambas en una célula huésped.
tor e inserto ade- 5. Selección e identificación de células huésped que contie-
cuado.
nen el ADN recombinante.
El corte del genoma para obtener fragmentos de ADN se
realiza mediante enzimas de restricción o endonucleasas de res-
tricción. Estas sustancias reconocen secuencias específicas de
ADN de doble cadena y cortan ambas en lugares específicos.
Las secuencias reconocidas son palindrómicas, esto es, poseen
simetría rotacional respecto a un eje. Los cortes son de dos ti-
Las enzimas de res- pos: uno en que se cortan las cadenas simétricamente respecto
tricción reconocen y a un eje y otro en que se cortan en el mismo punto. El primero
cortan ADN de doble
cadena por sitios es- deja extremos cohesivos o adhesivos y el segundo extremos ro-
pecíficos. mos (Fig. 25.1).
Las palabras o frases

palindrómicas son
aquellas que son
iguales se comience
por la primera o por
la última letra:
– Radar.
– Dábale arroz a la
zorra el abad.
Figura 25.1.– Especificidad de las enzimas de restricción. La Ban H1 y

la Eco RI dejan extremos cohesivos y la HhaI romos.

TECNOLOGÍA DE ADN RECOMBINANTE 339
Figura 25.2.– Fragmentos de ADN obtenidos de un genoma con diferentes en-

zimas de restricción. Los fragmentos de mayor tamaño son los de parte su-
perior. El tamaño de los fragmentos se conoce comparando con fragmentos
patrones de longitud conocida.
Se han caracterizado y purificado cientos de enzimas a la

que se denomina por una abreviatura correspondiente a la es-
pecie bacteriana de la que derivan. Así, Bam de Bacillus am-
gloliquefaciens, Eco de Escherichia coli, Hal del Haemophilus
aegyptius, etc.
Los fragmentos de ADN resultantes dependiendo del ta-
maño, se pueden separar por electroforesis en geles de poliacri-
lamida o agarosa; los geles de poliacrilamida separan fragmen-
tos de unos mil pares de bases y los de agarosa de 15.000 a
20.000 pares de bases. Los fragmentos se separan en bandas
que se pueden visualizar añadiendo a la disolución de los geles
colorantes como bromuro de etidio, que a la luz ultravioleta
presenta una intensa fluorescencia de color naranja. La longi-
tud o tamaño de los fragmentos de ADN se puede conocer me-
diante la comparación de las bandas con fragmentos patrones
de longitud conocida (marcadores). Cada fragmento de ADN
se puede purificar cortando la banda correspondiente del gel,
eliminando la matriz del gel y el colorante.

Para identificar en cuál de las bandas se encuentra el gen o

la secuencia de ADN de nuestro interés se suele realizar una hi-
bridación. Esta técnica consiste en desnaturalizar los fragmen-
tos de ADN que aparecen en el gel después de la eletroforesis y
transferirlos a membranas de nitrocelulosa o nylon. Las posi-
ciones de los fragmentos en el gel se mantienen en la membra-
na. Después la membrana se introduce en una disolución que
Una sonda es un frag- contiene una sonda radiactiva marcada con 32P (Fig. 25.3).
mento de ADN (o Posteriormente se observa por autorradiografía el fragmento o
ARN) monocatenario
con el fosfato final fragmentos de restricción que posean una secuencia comple-
marcado con 32P. mentaria a la sonda y que, por consiguiente, haya hibridado
con ella. Esta técnica se denomina trasferencia Southern (Sout-
Figura 25.3.– Transferencia e hibridación de ADN (o Southern blotting). Cada

banda radiactiva en la película corresponde al fragmento de ADN de interés.

hern blotting) en honor a su diseñador E. M. Southern. De for-

ma similar se pueden separar moléculas de ARN por electrofo-
resis en gel e identificar secuencias concretas por hibridación.
En este caso se denomina transferencia Northern. También se
puede aplicar esta técnica para detectar una proteína determi-
nada uniéndola a un anticuerpo específico y entonces se deno-
mina transferencia Western. Resumiendo, las técnicas Sout-
hern, Northern y Western se corresponden respectivamente
con las transferencias de ADN, ARN y proteína.
VECTORES DE CLONACIÓN
En E. coli, el microorganismo que más se emplea en clona- Vectores de clona-

ción y el mejor conocido molecular y funcionalmente, se utili- ción:
– Plásmidos: pBR322
zan tres vectores o vehículos de clonación: los plásmidos, los pBR328
bacteriófagos y los cósmidos. Los plásmicos son moléculas de – Bacteriófagos: Fago
ADN circular de doble cadena extrageniomales y que se repli- l, T2, Fago m.
– Cósmidos.
can independientemente del cromosoma bacteriano. Su ta-
maño oscila entre 2 y 400 kilopares de bases (Kpb), transpor-
tan genes para la inactivación de antibióticos, producción de
toxinas y degradación de productos naturales. Los plásmidos
no son imprescindibles para la vida de las bacterias, algunas no
contienen ninguno y otras pueden contener hasta veinte. Se Conjugación bacte-
pueden clasificar en conjugativos y no conjugativos dependien- riana. Una bacteria
transfiere a través de
do de si llevan o no un conjunto de genes de transferencia, de- un pili un cordón de
nominados trans, que favorece la conjugación bacteriana es su genoma a otra
decir, la transferencia de material genético de una bacteria a bacteria.
otra. Los plásmidos también se pueden introducir sin el concur-
so de ningún elemento por transformación.
Tanto en el proceso de conjugación como en el de transfor-
mación para detectar el ADN plásmidico, se necesita un méto-
do de selección. La estrategia más común es introducir en el
plásmido un gen que la célula huésped necesita para crecer
bajo determinadas condiciones o un gen que confiera resisten-
cia frente a un antibiótico, en este caso sólo aquellas células
bacterianas que porten el plásmido serán resistentes al antibió-
tico y podrán crecer en medios que lo contengan.
Uno de los plásmidos más utilizados es el pBR322, que con-
tiene genes de resistencia a la tetraciclina y a la ampicilina. El
plásmido contiene una serie de sitios específicos que pueden
ser cortados por enzimas de restricción para introducir frag-
mentos de ADN. La inserción de ADN en el punto de corte de
EcoRI no altera ninguno de los dos genes de resistencia a los
antibióticos. Sin embargo, la inserción en los puntos de corte a
los Hind III, Pal 1I o Ban HI inactiva el gen de resistencia a la

Figura 25.4.– Plásmido pBR322. Se indican los puntos de corte de algunas

enzimas de restricción y las zonas que codifican resistencia a tetraciclina y am-
picilina.
Figura 25.5.– Transducción o infección por fagos de una bacteria. El ADN del
fago controla el sistema metabólico y replicativo bacteriano y termina por des-
truirla. En algunos casos el ADN del fago se inserta en el de la bacteria.

tetraciclina, y el PstI resistencia a amplicilina. Las células bacte-

rianas que contengan pBR322 con un fragmento de ADN in-
sertado en el punto de corte de, por ejemplo, Hind III, son re-
sistentes a la ampicilina y sensibles a la tetraciclina, y se pue-
den seleccionar fácilmente observando las colonias que crecen
en amplicilina y no aparecen en la placa que contiene tetracicli-
na. Las células que no portan el plásmido son sensibles a los
Figura 25.6.– Identificación de la colonia bacteriana que porta

el vector con el fragmento de ADN de interés.

Figura 25.7.– Esquema de clonación de un fragmento de ADN procariótico en

E. coli con pBR322 (ampR ampicilina resistente, tetR tetraciclina resistente).
dos antibióticos, mientras los que lo portan, pero no llevan in-

sertado el ADN, son resistentes a ambos.
El bacteriógrafo más utilizado como vector es el fago O. Este
bacteriógrafo tiene un mecanismo muy eficaz para introducir
más de 48 Kpb de ADN en la bacteria. El procedimiento gene-
ral para clonar ADN en el fago O se basa en dos características
de su genoma:
1) Cerca de un tercio de su genoma puede ser reemplaza-
do por ADN foráneo.

2) El ADN se empaqueta en partículas de fago de alrede-

dor de 40-50 Kpb.
Cuando los fragmentos de ADN de un tamaño adecuado se
ligan al ADN del fago, los ADN resultantes se pueden empa-
quetar dentro de partículas de fago, por adicción de extracto
crudo de células bacterianas que contienen todas las proteí-
nas necesarias para ensamblar un fago completo. Ese proce-
so se denomina empaquetamiento in vitro. Los fagos pue-
den infectar bacterias de E. coli bien destruyéndolas o inser-
tando su ADN en el genoma de la bacteria. En este último
caso el ADN del fago se replica junto al ADN de la célula
durante muchas generaciones. Ciertos cambios ambientales
pueden poner en marcha la expresión del ADN del fago y
desencadenan los procesos que conducen a la lisis de la
bacteria.
Los cósmidos están construidos a partir de plásmidos y ge- Los cósmidos están
nes O. Los cósmidos son moléculas de ADN pequeñas construidos a partir de
plásmidos y genes l.
(5-7 Kpb), circulares y con las siguientes características:
1) Un origen de replicación plasmídico.
2) Uno o más marcadores seleccionables.
3) Varios sitios de restricción donde se puede insertar el
ADN exógeno y
4) Un sitio cos, que es una secuencia de ADN del bacterió-
fago que se necesita en el equipamiento.
Genotecas. Una genoteca es una colección de fragmentos

derivados del genoma de un organismo insertados en un vec-
tor de clonación. El vector se introduce en microorganismos
(generalmente bacterias o levaduras) de tal forma que cada cé-
lula contenga un fragmento del ADN recombinante. El procedi-
miento se basa en romper el ADN en muchos fragmentos y,
posteriormente, clonarlos todos. Esto es, la información conte-
nida en un organismo está representada en el conjunto de frag-
mentos de la genoteca. Los fragmentos se insertan en el ADN
de un vector previamente tratado en la misma enzima de res-
tricción que se ha utilizado para la rotura del ADN. La mezcla Las genotecas son
(fragmento ADN-vector) se usa para transformar las células colecciones de frag-
mentos obtenidos del
bacterianas o se empaqueta en partículas de fago. El resultado genoma de un orga-
final es una serie de bacterias o fagos en que cada portador de nismo e insertados en
una molécula de ADN recombinante es diferente. Al conjunto vectores de clonación.
de todos ellos se le denomina genoteca, librería genómica o bi-
blioteca genómica.
Para identificar el gen de interés en una genoteca se hacen
crecer las bacterias en medio sólido de forma que en las placas
se puedan apreciar colonias bacterianas individuales.

Posteriormente, se procede como anteriormente, esto es, se

tratan las bacterias con álcali para desnaturalizar su ADN y se
transfieren las células a una membrana de nitrocelulosa o ny-
lon. Posteriormente, las placas se sumergen en una disolución
que contiene una sonda de ADN marcada radiactivamente que
hibrida con el ADN del gen complementario. Se lava la placa y
se expone a una película de rayos X, las manchas que apare-
cen en la película indican la posición de las colonias portadoras
del inserto de ADN de interés.
ESTRATEGIA DE LA CLONACIÓN
La clonación de ge- La clonación de un gen es un procedimiento en teoría relati-

nes eucariotas no se vamente sencillo. Si el ADN procede de una célula bacteriana,
puede realizar direc-
tamente del ADN, ya una vez extraído y purificado se trata con una enzima de restric-
que éste está consti- ción que deje extremos cohesivos. Si se elige como vector de clo-
tuido por exones e in- nación, un plásmido (pBR322) se corta con la misma enzima de
trones.
restricción para que queden extremos que se complementen con
los de los fragmentos de ADN. Ambos elementos se unen me-
diante la ADN ligasa. Los plásmidos con el inserto sufren una
primera selección en placas con antibióticos a los que son resis-
tentes. Posteriormente, bien con una sonda, de forma semejante
Los intrones no se tra- a como se identifican los fragmentos de ADN, o bien extrayendo
ducen y las bacterias el plásmido, cortándolo en la misma enzima de restricción y rea-
no tienen mecanismos
para eliminarlos. lizando electroforesis se pueden seleccionar aquellas células bac-
terianas que llevan el plásmido con el inserto de ADN de interés.
La clonación de genes eucarióticos (vegetales o animales)
planteó, al principio, serios problemas, puesto que la mayoría
de sus genes son un conjunto de intrones y exones. Por ello, es-
La transcriptasa in- tos genes no pueden ser expresados en bacterias que carecen
versa sintetiza ADN de la maquinaria necesaria para cortar los intrones y eliminar-
partir de ARNm. El
ADN obtenido se de- los del transcrito. Esta dificultad se supera introduciendo en la
nomina ADNc (ADN bacteria plásmidos con fragmentos de ADN complementario
complementario). (ADNc) del ARNm. Esto es, existe una enzima denominada
transcriptasa inversa que sintetiza ADN a partir de un ARNm.
Para su acción la enzima requiere:
a) Los cuatro desoxirribonucleósidos trifosfato (dNTP);
b) ARNm purificado.
Posteriormente, se forma un doble cordón ADN-ARN que
se somete a degradación alcalina para hidrolizar el ARN. El
ADN monocatenario o de simple cordón se trata con ADN po-
limerasa que requiere los 4 dNTP, un cebador o “primer” y la
cadena de ADN que le sirve de molde. El resultado es un frag-
mento de ADN bicatenario que se denomina ADNc.

Figura 25.8.– Síntesis de ADN complementario (ADNc) a partir de

ARNm de un órgano de mamífero.
A partir de este ADNc el procedimiento sigue el mismo ca-

mino que la clonación de fragmentos de ADN de células proca-
rióticas.
Técnicas en ingeniería genética: PCR y secuenciación

de ADN.
Existen dos técnicas que han supuesto un avance especta-
cular en la investigación sobre el ADN genómico:
a) La reacción en cadena de la polimerasa (PCR).
b) La secuenciación de fragmentos de ADN.
Anteriormente hemos estudiado que la clonación del ADN
genómico permite lograr dos objetivos importantes: Primero
separa cada fragmento de ADN de los demás del genoma, y
segundo, amplifica segmentos de ADN seleccionados. Después
de que el ADN o región particular del ADN ha sido clonado,
debe conocerse su secuencia.
La técnica de PCR permite obtener millones e incluso miles La técnica de PCR
de millones de copias de cualquier secuencia seleccionada del permite obtener mi-
llones de copias de
ADN genómico en unas pocas horas. Una propiedad importan- un fragmento de ADN
te de esta técnica es que no hace falta que el segmento de sin necesidad de se-
ADN elegido sea separado del ADN genómico antes de co- pararlos previamente
del genoma.
menzar el procedimiento de amplificación. Sin embargo, una
vez que se ha amplificado, el segmento puede separarse fácil-
mente del resto de ADN (que no se ha amplificado) mediante
la electroforesis en gel.

Una mezcla de reac- La reacción en cadena de la polimerasa (PCR) se realiza en

ción de PCR contie- un tubo de plástico de pequeña capacidad (0,2 ml) al que se
ne:
1. Genoma o fragmen- añaden los siguientes componentes: El fragmento de ADN de
to de ADN. doble cadena que se desea amplificar, las cuatro dNTP, el “pri-
2. Los cuatro desoxi- mer” o cebador y un ADN, polimerasa estable al calor. Esta
rribonucleósido tri-
fosfato. ADN polimerasa (taq) procede de la bacteria termófila Ther-
3. Un “primer” o ce- mus acuaticus y es estable y activa a 72 ºC.
bador. Un ciclo de PCR consta de 5 etapas, dos de ellas, la inicial y
4. La enzima taq.
final, se realizan solamente una vez y las tres intermedias un
número prefijado de veces que se denominan ciclos (entre 25 y
40) (Fig. 25.9).
Figura 25.9.– Esquema de la etapa cíclica de la reacción en cadena de la ADN

polimerasa. Después de un ciclo se amplifica el ADN dos veces; después de 25
el fragmento de ADN se puede amplificar unas 106 veces.

Las tres etapas intermedias son:

a) Separación de las cadenas de ADN por calentamiento
(94-95 ºC) durante unos segundos.
b) Hibridación de los cebadores. La disolución se enfría
(52-54 ºC) para que se unan las cadenas de ADN se-
paradas.
c) Síntesis de ADN. Se calienta la disolución (72 ºC) para
que la ADN polimerasa sintetice nuevas cadenas de
ADN a partir de los cebadores.
Estas tres etapas (separación de las hebras, hibridación de 2', 3'- didesoxirribo-
los cebadores y síntesis de ADN) se llevan a cabo repetitiva- nucleósido trifosfato.
El compuesto impide
mente cambiando únicamente la temperatura de la mezcla de el crecimiento de la
reacción. No es necesario añadir ningún reactivo después del cadena porque carece
primer ciclo. El fragmento de ADN se puede ampliar según 2n, de grupos hidroxilo
en los carbonos 2' y
siendo n el número de ciclos; esto es, después de 25 ciclos se 3'.
puede amplificar unas de 106 veces (Fig. 25.10).
Figura 25.10.– Diagrama de una reacción de PCR típica. Los números por en-
cima de la línea indican la temperatura y por debajo el tiempo en minutos:
segundos.
El análisis de la estructura del ADN se puede realizar por 3'AGTAGACATGAC

varios métodos, pero el que se utiliza casi con exclusividad en GA5' 5'TC3'
los últimos años es el desarrollado por F. Sanger y colaborado- 3'AGTAGACATGAC
res y que se denomina “método por interrupción controlada de GA5' 5'TCATC3'
la replicación enzimática”.
3 ' A G TA G A C T G A C
El método para secuenciar un fragmento de ADN se basa GA5'
en copiar uno de los cordones de ADN mediante la ADN poli- 3'TCATCT6AC3'
merasa. El cebador para la síntesis es un fragmento comple- 3'AGTAGATGAC6G
A5'
mentario que se puede obtener por digestión con una enzima 5'TCATCTGAC3'
de restricción o por síntesis química. La reacción contiene
además los cuatro desoxirribonucleósido trifosfato, un análogo,
2c, 3c-didesoxirribonucleósido trifostato, de una base, el cual Fragmentos de ADN
de distintos tamaños
impide, cuando se introduce en la cadena, un crecimiento pos- obtenidos en la sínte-
terior de esta. Como el compuesto entra en la cadena al azar, sis de una cadena
se producen fragmentos de distinta longitud. El proceso se repi- cuando en la mezcla
de reacción se incor-
te con otra muestra del fragmento original y el análogo cargado pora 2,3-didesoxiciti-
con otra base diferente. Los cebadores se marcan con una sus- din trifosfato.

tancia con diferente color según sea la base terminal, así, azul
para adenina, rojo para citosina, verde para timina y amarillo
para guanina.
Las mezclas de reacción se juntan y se someten a electrofo-
resis. Las bandas separadas de ADN se detectan por fluores-
cencia al salir del gel, y la secuencia de colores se corresponde
con la de las bases. El método se realiza en un aparato auto-
mático de secuenciación que puede determinar de una vez cer-
ca de un millar de bases.
APLICACIONES A LAS CIENCIAS MÉDICAS
Los descubrimientos producidos en los últimos años utili-

zando las técnicas de ADN recombiante o Ingeniería genética y
los relacionados con ellas han permitido obtener un mejor co-
nocimiento de la estructura, organización y expresión de los ge-
nes, y han posibilitado su aplicación en diferentes campos de
las ciencias. En medicina la aplicación de estas técnicas ha
abierto nuevas esperanzas en el diagnóstico, prevención, detec-
ción y terapia de varias enfermedades.
Las técnicas de ADN recombinante han permitido la inser-
ción y expresión de genes, que codifican productos de interés
Aplicaciones de la In-
biomédico en bacterias, levaduras, y el crecimiento a escala in-
geniería genética a dustrial ha facilitado la obtención de cantidades apreciables de
las ciencias médicas: proteínas y péptidos humanos de gran utilidad para el trata-
– Conocer la función
y expresión de los
miento de determinadas enfermedades que hasta entonces se
genes. obtenían sólo en pequeñas cantidades de tejidos animales o de
– Obtener substan- cadáveres.
cias con fines te-
rapéuticos en canti- La mayor parte de las enfermedades genéticas no tienen un
dades adecuadas. tratamiento eficaz, y las que lo tienen se basan tanto en el
– Diagnóstico precoz aporte periódico de sustancias que el organismo no puede fa-
de enfermedades.
– Obtención de ani- bricar, como en evitar la acumulación de un producto nocivo
males transgénicos. provocado por la carencia de la enzima necesaria para su me-
– Terapia génica. tabolismo. Una solución terapéutica sería la inserción del gen
– Aplicaciones de la
técnica del PCR. normal en las células defectuosas del individuo enfermo y su
– Detectar virus y expresión correcta; este proceso se denomina terapia génica.
bacterias en los te- Para aplicar esta clase de terapia es necesario, principalmente,
jidos.
– Detectar cánceres conocer el gen defectivo y clonar el gen homólogo normal.
en estadios preco- Posteriormente, hay que saber en qué células suele estar activo,
ces. éste es punto clave del proceso porque un gen sólo puede ser
– Determinar el pa-
rentesco entre indi- insertado en células accesibles, por ejemplo, células de la san-
viduos. gre o de la piel. Actualmente se están ensayando varios proto-
– Identificar indivi- colos clínicos para el tratamiento de enfermedades genéticas
duos mediante la
“huella dactilar del como la carencia de adenosina desaminasa (ADA), la fibrosis
ADN”. quística, las anemias hemolíticas, la hemofilia, etc.

La obtención de animales transgénicos mediante la mi-

croinyección de embriones con el gen o por transducción con
retrovirus ha permitido obtener fundamentalmente ratones
transgénicos que tienen gran interés como modelos de enfer-
medades génicas como la enfermedad de Tay-Sachs y la Dia-
betes mellitus.
Por otra parte, la técnica de PCR también está proporcio-
nando una ayuda valiosa a las ciencias médicas. Mediante esta
técnica se pueden detectar la presencia de bacterias y virus en
la sangre y tejidos de un individuo antes de que éste desarrolle
una respuesta inmune. También se pueden detectar cánceres
en un estadio temprano. En medicina forense esta técnica per-
mite conocer el parentesco de personas. Un simple cabello, una
pequeña mancha de sangre o de semen suelen ser suficientes
para obtener cantidades adecuadas de ADN para un análisis
posterior. Otra aplicación interesante es en el transplante de ór-
ganos. En este proceso el aceptor rechaza el órgano cuando los
antígenos HLA del donante no son suficientemente parecidos a
los del aceptor. La amplificación de los genes por PCR permite
determinar los tipos de HLA y comprobar sus diferencias o
analogías.
RESUMEN
La tecnología del ADN recombinante o Ingeniería

genética ha supuesto un desarrollo extraordinario en el co-
nocimiento de las bases moleculares de la vida. El diseño
y construcción de moléculas recombinantes se basa en el
conocimiento de los mecanismos de replicación del ADN,
de la estructura, de la organización y de la regulación de la
expresión génica.
La clonación de un gen o fragmento de ADN de célu-
las procariotas requiere un corte específico del ADN genó-
mico por enzimas de restricción, y la elección de un vector
adecuado para unir el gen. Los vectores más utilizados son
los plásmidos, los baceteriofagos y los cósmidos. El vector
con el gen se introduce en células hospedadoras para su
multiplicación. La identificación de las células con el inser-
to de interés se suele realizar mediante sondas radiactivas
según la técnica de transferencia de Southern. La clona-
ción de genes de células eucarióticas requiere la obtención
previa del ADN a partir de ARNm mediante la transcripta-
sa inversa.

La información contenida en el ADN de un organismo

se puede fragmentar, unirse a vectores de clonación y al-
macenarse. Al conjunto de todos ellos se denomina geno-
teca o librería de genes.
Dos técnicas han permitido un avance espectacular de
la Ingeniería genética: La de la reacción en cadenada de la
polimerasa (PCR) y la secuenciación automática de nu-
cleótidos.
La aplicación de las técnicas de ADN recombinante
está mostrando su valiosa utilidad en el diagnóstico y pre-
vención de varias enfermedades y en las nuevas terapias a
aplicar.
La terapia génica en las enfermedades hereditarias se aplicó

por primera vez en 1990 a una niña de cuatro años que pa-
decía carencia de adenina desaminasa (ADA). Esta enzima del
sistema inmunológico y su deficiencia expone a los pacientes a
contraer fácilmente enfermedades infecciosas. El gen que codi-
fica la ADA suele estar activo en los linfocitos, por lo que fue
relativamente fácil extraer esas células de la sangre del paciente
e identificarlo.
Posteriormente, se introdujo el gen correcto en células pre-
cursoras de los linfocitos utilizando vectores basados en retrovi-
rus. Este proceso permitió la corrección de la enfermedad debi-
do a la deficiencia de ADA.
Otros casos susceptibles de aplicar una terapia génica son
aquellos en los que el gen alterado es el responsable de la pro-
ducción de una sustancia presente en la sangre, donde su fun-
ción es necesaria, por ejemplo, en las enfermedades hemofíli-
cas debidas a la carencia de un factor de coagulación. En estos
caso se puede insertar el gen correcto en cualquier tipo de cé-
lula del mismo organismo con tal de que éste pueda sintetizar
el producto e introducirlo en la sangre. Hay bastantes tipos de
células capaces de realizar esta función, como las células del te-
jido conjuntivo subcutáneo, de la epidermis o de los músculos.

Regulación de
TEMA 26 la expresión génica
Modelo del operón. Genomas eucarióticos. Proteí-

nas reguladoras de la transcripción.
El conjunto de reacciones que tienen lugar en las células vi-

vas está regulado y coordinado de forma precisa. Como se ha
visto anteriormente uno de los procesos que interviene en la
regulación de una ruta metabólica es a través de la actividad
de sus enzimas, la cual puede ser controlada por varios facto-
res, cambios alostéricos y modificaciones covalentes. Otro pro- El control de la ex-
ceso de control es a través de la síntesis de enzimas, esto es, re- presión génica de to-
das las células es a
gulando la expresión génica. Una célula de E. coli puede con- nivel del proceso de
tener 10-15 moléculas de una proteína cuando utiliza un transcripción.
determinado nutriente como fuente de carbono. Si en un mo-
mento determinado se cambia de nutriente, la velocidad de
síntesis de la proteína puede aumentar considerablemente y
después de un corto período de tiempo incrementar el número
de moléculas por encima del millar.
La transcripción de las enzimas de una ruta metabólica sue-
le realizarse de forma coordinada, ya que están agrupadas
constituyendo una unidad denominada operón. La transcrip-
ción de un operón es bloqueada por proteínas represoras y ac-
tivada por proteínas activadoras. Los cromosomas de las célu-
las eucarióticas son de tamaño mayor que las procarióticas y
poseen un nivel de organización más complejo. En ellas la acti-
vación de los genes es más importante que la supresión. Para
que se puedan expresar es necesario que se activen mediante
la unión de factores de transcripción o proteínas reguladoras a
los centros de control del ADN.
EL MODELO DEL OPERÓN
Las células de E. coli pueden ser cultivadas en medios de-

nominados mínimos que contienem algunas sales minerales y

nutrientes como glucosa, que les sirve de fuente de carbono y

energía. En estos sencillos medios de cultivo la bacteria es ca-
paz de sintetizar todos los componentes necesarios para crecer
y desarrollarse.
La mayoría de las cepas de E. coli también son capaces de
crecer en lactosa, un disacárido que se encuentra en la leche;
cuando este compuesto es la única fuente de carbono, la célula
bacteriana induce la síntesis de tres nuevas enzimas que no son
necesarias cuando utiliza la glucosa. Estas enzimas son la
E-D-galactosidasa, que hidroliza la lactosa a D-glucosa y D-ga-
lactosa, la D-galactosido permeasa, que facilita el transporte de
la lactosa en la célula, y la transcetilasa, cuya función fisiológica
permanece desconocida.
El estudio con mutantes defectivos y el descubrimiento de
que las cantidades de las tres enzimas se incrementaban pro-
porcionalmente al cambiar la lactosa por la glucosa, conduje-
ron a F. Jacob y J. Monod a pensar que la velocidad de síntesis
de las tres enzimas estaba dirigida por unos elementos comu-
Operón es el conjun- nes diferentes de los genes que las codificaban. Estos investiga-
to de centros de con- dores en 1961 propusieron el modelo del operón para explica
trol y genes estructu-
rales. la regulación de la síntesis de enzimas que metabolizan la lacto-
sa. Los elementos genéticos de este modelo (Fig. 26.1) son un
gen regulador (i), los centros de control (promotor (p) y opera-
dor (o)) y los genes estructurales (z, y, a).
Figura 26.1.– El operón lac y su gen regulador. Los genes estructurados son los
genes que codifican las enzimas. El promotor y el operador son los centros de
control.
El represor interactua Estos últimos son los que codifican la E-galactosidasa, la

con el operador impi- permeasa y la transacetilasa. El gen regulador codifica una pro-
diendo la transcrip-
ción de los genes es- teína denominada represor que puede interaccionar con el
tructurales. operador y, cuando esto sucede, no se produce la transcripción
de los genes estructurales. En estas condiciones la ARN polime-
rasa permanece unida al promotor. Ésta es la situación cuando
las células de E. coli crecen en glucosa, las enzimas que meta-
bolizan la lactosa no se sintetizan porque no son necesarias.
Sin embargo, cuando las células crecen en lactosa, un inductor
se une al represor, desbloqueando el operador y permitiendo
que la ARN polimerasa sintetice la ARNm de lactosa que va a
codificar las tres enzimas correspondientes. Aunque el modelo

REGULACIÓN DE LA EXPRESIÓN GÉNICA 355
del operón implica todos los elementos genéticos, se suele de- El inductor se une al
nominar operón lac al conjunto de los centros de control (p, o) represor desbloque-
ando al operador y
y los genes estructurales (x, y, z). (Fig. 26.2). permitiendo que la
ARN polimerasa
transcriba los genes
estructurales.
Figura 26.2.– Esquema del mecanismo de inducción de la síntesis

de enzimas del metabolismo de la lactosa.
Cuando E. coli crece sobre lactosa, el inductor es la 1,6-alo-

lactosa, un compuesto formado a partir de la lactosa del me-
dio, pero pueden ser inductores los E-galactósidos, como el iso-
propiltiogalactosido (IPTG), que no es metabolizable.
El operón lac no sólo está sujeto a un control negativo sino El operón lac está su-
que la expresión de sus genes estructurales está mediada por jeto a un control ne-
gativo y un control
un control positivo. Este control impide que, en presencia de positivo.
glucosa, se induzcan los genes implicados no sólo en el catabo-
lismo de la glucosa sino de otros azúcares. Ello supone un aho-
rro energético, ya que prefiere utilizar glucosa (puesto que sus
enzimas se sintetizan siempre cualquiera que sea el nutriente) a
otros compuestos en que sus enzimas deben ser inducidas para
que se sinteticen. Debido a este comportamiento, las enzimas
catabólicas de la glucosa se tipifican como constitutivas y las
otras inducibles.
En E. coli existe otro mecanismo regulador denominado
“represor por catabolito”, por el que los genes implicados en el Las enzimas constitu-
tivas se sintetizan en
catabolismo de lactosa, arabinosa y otras azúcares permanecen presencia de cual-
reprimidos en presencia de glucosa. quier fuente de car-
El efecto represor de la glucosa está mediado por el AMPc bono. Las enzimas in-
ducibles se sintetizan
(adenosina monofosfato cíclico) y una proteína denominada sólo en presencia de
CAP (del inglés, Catabolite gen-activator protein). En ausencia un inductor.

de glucosa, la CAP se une en un lugar específico cercano al

promotor lac e incrementando la transcripción del ARN más de
50 veces. Por lo tanto, la CAP es un elemento de regulación
positiva sensible a los niveles de glucosa, mientras que el repre-
sor lac es un elemento de regulación negativa sensible a los ni-
veles de lactosa.
El efecto de la glucosa sobre la CAP está mediado por el
AMPc. La unión de la CAP se realiza cuando las concentracio-
nes de AMPc son altas y el sitio de unión del AMPc está ocupa-
do. En presencia de glucosa, la concentración de AMPc dismi-
nuye, impidiendo la unión de la CAP y, por tanto, disminuyen-
do la expresión del operón lac. De esta forma, para que haya
una fuerte inducción del operón, se requiere tanto la presencia
de lactosa (para inactivar al represor) como la ausencia o baja
concentración de glucosa (para incrementar la concentración
de AMPc y facilitar la unión de la CAP). El complejo CAP-
AMPc estimula la transcripción al unirse al centro promotor
(Fig. 26.3).
Figura 26.3.– Estimulación de la transcripción por el complejo CAP-AMPc en el

operón lac. (A) En presencia de glucosa. (B) En ausencia de glucosa y presen-
cia de lactosa.
E l c o m p l e j o CA P-
AMPc estimula la
transcripción al unir- La CAP y el AMPc están implicados en la regulación coor-
se a determinados dinada de muchos operones, sobre todo para enzimas del me-
centros promotores y tabolismo de azúcares. Por lo tanto, se puede resumir estos he-
favorece la unión a
ellos de la ARN poli- chos indicando que los operones catabólicos inducibles se en-
merasa. cuentran bajo un doble control: un operón inductor específico

para cada operón y el complejo CAP-AMPc, que afecta a mu-

chos operones. Esta red de operones con un regulador común
se denomina regulón.
La regulación transcripcional de los operones no sólo afecta
los procesos catabólicos, sino que también opera en la regula-
ción de las enzimas de las rutas anabólicas, como los de la sín-
tesis de aminoácidos. A este respecto uno de los operones más
estudiados es el de la síntesis del triptófano. En E. coli, el
ARNm transcrito del operón trp codifica las cinco enzimas que
transforman el corismato en triptófano. Estas cinco proteínas se
sintetizan de manera coordinada y en cantidades equimolecu-
lares gracias a la traducción de su ARNm poligénico. La regula-
ción se obtiene de la interacción de un represor específico so-
bre el operador trp codificado para el gen trpR situado lejos del
operón trp. Un complejo represor-triptófano se une fuertemen-
te al operador e impide que la ARN polimerasa pueda unirse al
promotor trp y los genes estructurados no se transcriben.
Figura 26.4.– El operón trp y su gen regulador trpR. El complejo represor tripó-
fano se une al operador impidiendo la transcripción de los genes estruc-
turados.
Para comprender la velocidad con que se sintetizan los ge- El atenuador o centro
nes estructurales hay que introducir un nuevo elemento descri- de terminación con-
trolada está situado
to por Yanofsky y col. Este elemento denominado atenuador o entre el operador y el
centro de terminación controlada se localiza entre el opera- primer gen estructu-
dor y el primer gen estructural, y contiene una secuencia nucle- ral.
otídica específica. Cuando el triptófano escasea, se modifica la
estructura del ADN para que la ARN polimerasa sobrepase el
atenuador y transcriba los genes estructurales (Fig. 26.5).
GENOMAS EUCARIÓTICOS
En las células euca-
Los genomas de las células eucarióticas son mayores y tie- rióticas el proceso de
nen una organización estructural superior a los procarióticas. activación de los ge-
nes es más importan-
Debido a que el ADN de los organismos superiores debe codifi- te que el de repre-
car todas las proteínas especializadas que se encuentran en los sión.

Figura 26.5.– Regulación de la transcripción del operón Trp. (A) En exceso de

triptófano la ARN polimerasa se para en el atenuador. (B) En ausencia o esca-
sez de triptófano la ARN polimerasa sobrepasa el atenuador al modificarse la
estructura del ADN y se transcriben los genes estructurales.
Los genomas de la diferentes tejidos, cabría esperar que estos organismos contu-
especie humana con- vieran una cantidad mayor de ADN de la que se encuentra en
tienen un millar de
veces más cantidad las procariotas como E. coli. Sorprendentemente la cantidad de
de ADN que E. coli. ADN en las células eucariotas es mucho mayor de la esperada.
Así, el genoma humano codifica unas 50 proteínas más que
una célula bacteriana, pero el tamaño es 1.000 veces superior;
evidentemente en las eucariotas existe una gran cantidad de
ADN que no codifica proteínas. Mientras que en el ADN de E.
coli hay en su práctica totalidad una copia de cada gen, algu-
nos fragmentos del ADN contienen secuencias 105 ó 106 veces
repetidas.
Uno de los motivos del gran tamaño de los genomas euca-
riotas es que la mayor parte de los genes eucariotas, están inte-

rrumpidos por intrones, fragmentos de ADN que no se tradu- El número de pares

cen. También porque hay varios tipos de secuencias de ADN de base en la especie
humana es de
repetidas, como son los ADN satélites y los denominados ele- 3,9 × 109 y en E. coli
mentos Alu. Los ADN satélites se encuentran cerca de los 4,0 × 106.
centrómeros de los cromosomas, que son las regiones en las
que se unen las cromátides hermanas, mientras la función de
las secuencias Alu es todavía desconocida.
El ADN de los genomas eucarióticos no está libre sino uni-
do fuertemente a un grupo de sustancias denominadas histo-
nas. El conjunto de ambas moléculas (CNA-histonas) se deno-
mina cromatina. Se han encontrado cinco tipos de histonas:
H1, H2A, H2B, H3 y H4. Las histonas son moléculas proteicas
con una masa entre 11.000 y 21.000 daltons y, por término
medio, cada cuatro aminoácidos uno es lisina o arginina y por
eso tienen carácter marcadamente básico (cargados positiva-
mente).
En 1974, Kornberg propuso que la cromatina estaba consti- Los nucleosomas per-
tuida por unidades repetitivas de 200 pares de bases de ADN y miten un empaqueta-
miento más compac-
de dos histonas, denominando a estas estructuras nucleoso- to del ADN y una es-
mas. Por ello, la mayor parte del ADN está enrollada por el ex- tabilización mayor de
terior de un núcleo de histonas, y el resto del ADN une los nulos cromosomas. Es-
tán formados por unos
cleosomas adyacentes de la misma forma que un hilo une las 200 pares de bases y
cuentas de un collar. Estas estructuras permiten un empaquetados histonas.
miento más compacto de ADN y una estabilización mayor de
los cromosomas.
La replicación del ADN eucariótico es, como en las bac-
terias ,de forma semiconservativa. Sin embargo, según se ha
demostrado por microscopia electrónica, la replicación tiene
lugar simultáneamente en varios puntos. Así un cromosoma
de Drosophila tiene al menos 6.000 horquillas de replica-
ción por molécula de ADN. La activación de cada punto de La replicación del
iniciación genera dos horquillas de replicación divergentes. ADN eucariótico se
realiza al mismo tiem-
Las formas elipsoides que se extienden en ambas direccio- po en diferentes pun-
nes se funden para formar las dos moléculas de ADN hijas tos.
(Fig. 26.6).
Las células eucarióticas contienen varios tipos de ADN po-
limerasas. Las polimerasas D y G intervienen en la replicación
del ADN, y las E y H en la reparación del ADN. El modo de
acción de las enzimas es semejante al de las células bacteria-
nas. Como estas requieren como intermediarios activados
cuatro desoxirribonucleósidos trifosfato, un molde (del que si-
guen las instrucciones) y un cebador; la síntesis tiene lugar en
dirección 5c-3c.
En el ciclo celular de las células eucarióticas el ADN se repli-
ca durante la fase de síntesis, y los cromosomas replicados se
segregan al interior del núcleo durante la fase de mitosis (M).

Figura 26.6.– Replicación del ADN en las células eucarióticas.
Entre la mitosis y la síntesis de ADN existe una fase G1 (de gap,

latencia) y entre la síntesis del ADN y la mitosis se interpone
otra fase de latencia denominada G2 (Fig. 26.7).
Figura 26.7.– Ciclo celular en eucariotas. En el punto R comienza

la replicación y en el I se inicia la mitosis.
La mitosis en la especie humana está regulada por una pro-

teína denominada CDK2, y que para su actividad requiere a
otra proteína denominada cíclina B.

PROTEÍNAS REGULADORAS DE
LA TRANSCRIPCIÓN
Las células de organismos superiores utilizan para regular la Características en la

expresión génica algunos mecanismos similares a los de las cé- regulación de la ex-
presión génica de cé-
lulas bacterianas. Así, en principio, la regulación tiene lugar, lulas eucariotas: La
como en las células procariotas, a nivel de transcripción. Sin cromatina altera la
embargo, las células de organismos superiores poseen algunas estructura, y los pro-
cesos de transcrip-
características de control propias. Entre las más importantes ción y traducción es-
está que la cromatina sufre múltiples cambios en la estructura tán separados física-
de la región que se transcribe y que existe una separación física mente.
entre la transcripción que tiene lugar en el núcleo y la traduc-
ción que se realiza en el citoplasma (Fig. 26.8).
Figura 26.8.– Los genes de las células eucarióticas son un mosaico de exones
(e) e intrones (c), éstos no se traducen. La transcripción tiene lugar en el núcleo
y la traducción en el citosol.
Uno de los sistemas de control de las células eucarióticas lo

constituye la asociación de múltiples proteínas, denominadas
activadoras, que se unen a los genes y los controlan. Las ARN
polimerasas de estas células, al contrario de lo que sucede con

la de las procariotas, no pueden transcribir el ADN por sí solas.

Antes deben unirse a un determinado fragmento de ADN, con
una secuencia específica activadora para actuar elevando la
formación del complejo transcripcional.
Las hormonas consti- Un segundo control de la transcripción lo constituyen una
tuyen un importante serie de sustancias como las hormonas esteroideas (estradiol,
control en las células
eucariotas. cortisol, progesterona y testosterona) y tiroideas. Estas sustan-
cias se unen a receptores propios, activándolos y permitiendo
que dichos receptores interactúen con secuencias pequeñas de
ADN específicas para cada complejo hormona-receptor, que se
denominan elementos de respuesta a hormonas y favorecen la
transcripción de sus genes (Fig. 26.9).
Figura 26.9.– Control de la transcripción por hormonas esteroides.
Un tercer grupo de reguladores transcripcionales lo constitu-

yen las denominadas proteínas con cremallera de leucina. La
característica más notable de estas proteínas es la presencia de
segmentos con una longitud aproximada de 35 residuos en los
que aparecen cinco leucinas. Estas proteínas forman un dímero

que se mantiene unido por un D-helicoide enrollado, las leuci-

nas estabilizan la estructura mediante interacciones hidrofóbi-
cas y enlaces de van der Waals.
Estas proteínas con cremallera de leucina se unen al ADN
en lugares específicos y aproximan fragmentos de ADN para
que se unan dos secuencias y se favorezca la transcripción.
En la especie humana, las proteínas con cremallera de leu- Las proteínas con cre-
cina intervienen en el efecto del AMPc sobre la transcripción. mallera de leucina es-
timulan la transcrip-
Los genes controlados por AMPc presentan un elemento de ción.
respuesta a este compuesto (CRE).
Figura 26.10.– Control transcripcional mediado por AMPc y la proteína con

cremallera de leucina CREB. M es un mensajero que no atraviesa la membrana
celular. CRE es una secuencia de ADN de 8 pares de bases y palindrómica,
que secunda a CREB.

Una proteína de unión al elemento de respuesta al AMPc, la

CREB, se une a una secuencia diana, CRE, que es una secuen-
cia palindrónica de ocho pares de bases. La dimerización de
CREB a través de su cremallera de leucina acerca fragmentos
de ADN (Fig. 26.10). El AMPc se forma como sabemos por la
acción de una cascada de reacciones que activa la proteína qui-
nasa A (PKA). La fosforilación de CREB por medio de la proteí-
na quinasa A provoca la dimerización y aumenta su eficacia
como activador de la transcripción. La CREB es una diana para
la calmodulina, la proteína quinasa C y para otras quinasas.
RESUMEN
Los genes de las células procarióticas regulan su expre-

sión fundamentalmente a nivel de transcripción.
Los genes que codifican las proteínas inducibles se
agrupan en operones, que son unidades de expresión gé-
nica coordinada. El operón que primero se describió fue el
lac, que contiene dos centros de control y tres genes es-
tructurales.
El AMPc estimula la transcripción de muchos operones
catabólicos al unirse a la proteína activadora de los genes
catabólicos (CAP).
La expresión completa del operón lac requiere tanto un
galactosido inductor como el AMPc que se forma cuando
está ausente o escasea la glucosa. Los genes que codifican
las enzimas de las rutas biosintéticas también están contro-
lados con precisión. El operón trp, que es uno de los me-
jores estudiados, controla la transcripción de los genes me-
diante un elemento denominado atenuador o centro de
terminación controlada.
Los cromosomas eucarióticos son mucho mayores y
más complejos que los procarióticos, pero la regulación de
su expresión génica es también a nivel de la transcripción.
Sin embargo, el ADN eucariótico se une posteriormente a
proteínas básicas denominadas histonas, tiene algunas ca-
racterísticas propias por lo que se refiere a los cambios que
sufre el genoma durante la transcripción y la reparación fí-
sica entre el lugar en que se realiza este proceso y la tra-
ducción, y posee otros sistemas de control. Entre esos, los
más importantes son:
a) la presencia de varias proteínas reguladoras o facto-
res de transcripción que favorezca el ensamblaje del
complejo de iniciación;

b) la existencia de receptores nucleares que modulan

los efectos de hormonas y otras sustancias, y
c) la acción de proteínas con cremalleras de leucina
que son dimeros unidos que se estabilizan gracias a
los residuos de lisina y que aproximan fragmentos
de ADN.
Una patología relacionada con la síntesis de proteínas son

los trastornos denominados talasemias. Las talasemias son un
grupo de hemoglobinopatías en los cuales se reduce el nivel de
síntesis de las cadenas D o E de la hemoglobina originando una
anemia severa. El nombre deriva del griego Thalassa (que sig-
nifica mar), en referencia a los muchos casos encontrados alre-
dedor del mar mediterráneo. En la mayoría de las talaseminas
la estructura primaria de las cadenas de hemoglobina es nor-
mal, lo que es anómalo es la cantidad de las cadenas D (D-tala-
semia) y E (E-talasemia) o de los similares a la D y la E.
Las D-talasemias pueden ser debidas a defectos en la expre-
sión de uno o de los cuatro genes que codifican las cadenas D
de la hemoglobina. Cuando son defectuosos cuatro, se produ-
ce anemia grave o muerte del organismo en el útero. Los de-
fectos de tres genes dan lugar a la enfermedad por la hemoglo-
bina H (Hb H), y los eritrocitos de estas personas contienen al-
tas concentraciones de esta hemoglobina que es un tetrámero
formado solamente por subunidades E.
Las E-talasemias pueden ser de dos tipos: la talasemia E,
en la que se sintetizan cadenas E en cantidades anormalmente
pequeñas, y la talasemia E0, en la que no se detectan cadenas
E en los eritrocitos.
Los lactantes con E-talasemia presentan anemia intensa an-
tes de los dos años de edad. Tienen icteria, hepatoesplenome-
galia y cambios esqueléticos que reflejan aumentos de volumen
de la médula ósea. Estos lactantes se dice que tienen talasemia
mayor. Los portadores de un alelo de E-talasemia se dice que
tienen talasemia menor.
No se conoce ningún tratamiento eficaz para las talasemias,
por lo que la detección de la naturaleza de los defectos genéti-
cos es de gran importancia para el tratamiento y medidas a se-
guir en el curso de la enfermedad.

Introducción a la
TEMA 27 inmunología molecular
Sistema inmunitario. Inmunoglobulinas.
El organismo está en contacto continuo con agentes micro-

bianos, potencialmente infecciosos, como bacterias, virus, hon-
gos y parásitos, que suponen una amenaza, ya que pueden pro-
ducir alteraciones patológicas e incluso la muerte. Para comba-
tirlos, el cuerpo está equipado con un sistema de defensa que le
proporciona un considerable grado de inmunidad, ya que en
los individuos normales la mayoría de las infecciones tienen una
duración limitada y dejan pocas lesiones permanentes.
SISTEMA INMUNITARIO
Existen dos tipos de inmunidad:
a) inmunidad innata o inespecífica, y
b) inmunidad adaptativa o específica.
Ambos tipos de sistemas están estrechamente interconectados,
y están constituidos por células y factores solubles.
A) Inmunidad innata o inespecífica

El cuerpo cuenta con barreras mecánicas y químicas como El sistema inmune
primera línea de defensa. La principal barrera de defensa es la inespecífico está cons-
tituido básicamente
piel. Además, la mayoría de los fluidos corporales contienen por la piel, los compo-
componentes bactericidas, como el ácido del jugo gástrico o la nentes bactericidas de
lisozima de la saliva y las lágrimas. los fluidos corporales,
las células fagocita-
Si los microorganismos superan estas barreras protectoras, y rias y las células NK.
penetran a través de la piel, entran en juego las células fagoci-
tarias: fagocitos (monocitos/macrófagos) y granulocitos neutró-
filos. Cuando penetran, por ejemplo, bacterias en los tejidos
corporales, inicialmente actúan los granulocitos neutrófilos,

que son atraídos, en gran número, desde la circulación sanguí-

nea hacia el sitio de penetración de la bacteria mediante un
proceso denominado quimiotaxis, y fagocitan los microorganis-
mos. El proceso de fagocitosis se ve favorecido si la superficie
del microorganismo tiene unidos factores del sistema del com-
plemento, inmunoglobulinas o ambos, ya que los neutrófilos
tienen receptores específicos para estas moléculas. La digestión
del microorganismo en el interior del neutrófilo se debe a las
enzimas hidrolíticas que contiene en sus lisosomas, y a agentes
oxidantes como peróxido de hidrógeno (H2O2). Todos estos
procesos van acompañados de un aumento del flujo sanguíneo
en la zona de la infección, lo que provoca un enrojecimiento, y
de un aumento de la permeabilidad capilar para las proteínas,
lo que genera tumefacción, y son los aspectos esenciales de la
inflamación. La capacidad de defensa de los granulocitos
neutrófilos es corta debido a que su vida media es breve, apro-
ximadamente un día. A continuación, la defensa la desarrollan
los macrófagos, que proceden de los monocitos circulantes en
la sangre y tienen capacidad fagocitaria. Además de los mono-
citos/macrófagos circulantes, existen macrófagos en los tejidos,
donde constituyen el sistema retículo endotelial (SER). Son
células de vida media larga.
Otro tipo de leucocitos que se encuentran en la sangre son
las células asesinas naturales (NK o natural killer), especiali-
zadas en la defensa inespecífica frente a los virus. Detectan al-
teraciones en la superficie de las células infectadas por virus, se
acumulan en su superficie y las destruyen mediante la apertura
de poros, proceso denominado citotoxicidad. También actúan
sobre algunas células tumorales.
Las células NK son activadas por los interferones, com-
puestos producidos y liberados habitualmente por las propias
células infectadas por virus. Los interferones son un grupo de
proteínas importantes en la defensa frente a infecciones víricas.
El sistema inmune Los microorganismos patógenos también son atacados ines-
adaptativo elabora pecíficamente fuera de los fagocitos mediante el sistema del
una respuesta especí-
fica para cada agente complemento. El sistema del complemento es una de las princi-
infeccioso. pales vías efectoras del proceso de inflamación, y conduce a la
perforación de la pared externa de las bacterias gramnegativas.
Al mismo tiempo, la lisozima del plasma, la linfa y las secrecio-
nes corporales degradan enzimáticamente la pared bacteriana.
B) Inmunidad adaptativa o específica
Algunos microorganismo patógenos y la mayoría de los vi-

rus han desarrollado, a lo largo de la evolución, mecanismos

INTRODUCCIÓN A LA INMUNOLOGÍA MOLECULAR 369
para defenderse de las células fagocitarias, por lo que para eli-

minarlos ha de intervenir el sistema inmunitario adaptativo,
que elabora una respuesta específica para cada agente infec-
cioso, que normalmente basta para erradicarlo. Además, este
sistema adaptativo guarda memoria del agente infeccioso, y
puede impedir que cause la enfermedad si se tiene un segundo
contacto con el mismo. En este sistema adaptativo cooperan
macrófagos, inmunoglobulinas y distintos tipos de linfocitos.
Los linfocitos se desarrollan a partir de células madre he-
matopoyéticas pluripotenciales, que están localizadas prima-
riamente en los tejidos hematopoyéticos: el hígado en los fetos
y la médula ósea en los adultos. Durante la vida fetal y la pri-
mera infancia, algunas células precursoras procedentes de los
tejidos hematopoyéticos migran, por vía sanguínea, al timo,
donde adquieren su especificidad o competencia inmune,
transformándose en linfocitos T. En los mamíferos los linfoci- En la respuesta inmu-
tos B se desarrollan a partir de células madre en la médula ne específica partici-
pan los linfocitos T,
ósea. El timo y la médula ósea son órganos linfoides prima- los linfocitos B y las
rios o centrales, ya que en ellos se desarrollan los linfocitos a células presentadoras
partir de células precursoras. Algunos de los linfocitos formados de antígeno (APC).
en los órganos linfoides primarios, maduran y migran, vía san-
guínea, hacia los órganos linfoides secundarios: bazo, gan-
glios linfáticos, amígdalas y tejido linfoide no encapsulado; des-
de donde se desplazan a los vasos linfáticos y sanguíneos por
los que circulan, para participar en la defensa inmunitaria.
Los linfocitos expresan un gran número de moléculas distin- Los linfocitos expre-
tas en su superficie, algunas de las cuales aparecen brevemente san en su superficie
moléculas que carac-
en ciertos estadios, mientras que otras son características de terizan a cada linea
distintas líneas celulares. Estas últimas se denominan marcado- celular.
res y se designan como CD (designación de agrupamientos o
Cluster designation). Los linfocitos T expresan el complejo po-
lipeptídico CD3 junto con el receptor antigénico TCR y se pue-
den subdividir en dos poblaciones diferentes:
a) Linfocitos T colaboradores (TH), que expresan CD4
(T CD4), y reconocen a los antígenos en asociación con
moléculas clase II del Complejo Principal de Histocom-
patibilidad (MHC). A su vez, estas células presentan dos
poblaciones, una con función cooperadora, que influ-
ye sobre las células T y B, y otra población que induce
funciones supresoras/citotóxicas en las células CD8.
b) Linfocitos T citotóxicos/supresores (TC/S), que ex-
presan CD8 (T CD8), y reconocen a los antígenos en
asociación con moléculas clase I de MHC, las cuales se
encuentran en la superficie de todas las células nuclea-
das. Las células T citotóxicas destruyen las células infec-

tadas, foráneas o malignas, mediante lisis. Los linfocitos

T supresores reprimen la respuesta inmunitaria de las cé-
lulas T y B.
Los linfocitos B presentan diversos marcadores de superfi-
cie. Expresan inmunoglobulinas, que están insertadas en su
membrana, donde actúan como receptores específicos para el
antígeno. También presentan receptores del complemento para
C3b, así como receptores Fc para IgG (Fig. 27.1).
Figura 27.1.– Esquema de los marcadores de superficie de células T y células B humanas.
Las células presentadoras de antígeno (APC) son una

población leucocitaria heterogénea. Se encuentran, de forma
primaria, en la piel, los ganglios linfáticos, el bazo y el timo. En
su superficie, la mayoría de las APC tienen antígenos MHC cla-
se II, importantes para la presentación del antígeno a las células
T. Son células APC las células de Langerhans de la piel, y los
macrófagos. Los macrófagos actúan englobando el elemento
extraño, degradan enzimáticamente sus proteínas de forma
muy específica y exhiben los fragmentos peptídicos de carácter
antigénico sobre la membrana celular junto con proteínas MHC
de la clase II. De esta forma, los macrófagos preparan el reco-
nocimiento del antígeno por parte de los linfocitos T CD4.
En la respuesta inmu- En la respuesta inmune las células T CD4 son decisivas, ya
ne las células T CD4+ que intervienen tanto en la respuesta celular como en la humo-
son decisivas, ya que
intervienen tanto en ral. Si suponemos una infección vírica, la respuesta inmune
la respuesta celular celular comenzará con la ingestión del virus por una célula
como en la humoral. presentadora de antígeno (APC), generalmente un macrófago,
que lo destruye y exhibe las proteínas víricas antigénicas sobre
su membrana junto con una molécula MHC clase II propia del
macrófago. Las células T cooperadoras CD4 (TH) se activan al
unirse simultáneamente al antígeno y a la proteína MHC clase

II, a lo cual también contribuye la interleuquina-1 (IL-1) segre-

gada por el macrófago. La célula TH segrega entonces interleu-
quina-2 (IL-2), que induce la proliferación de las células T
CD8, que también han reconocido al antígeno, presentado por
un macrófago en el contexto de la proteína MHC clase I. Algu-
nas de las células CD8, linfocitos T citotóxicos, matan a las cé-
lulas infectadas que exhiben el antígeno vírico. Posteriormente,
otras células CD8, linfocitos T supresores, se encargan de su-
primir esta respuesta citotóxica, desconectando la defensa in-
munitaria una vez cumplida su misión. Tras la supresión persis-
te una población de células T de memoria, que probablemente
se mantengan toda la vida (Fig. 27.2).
Figura 27.2.– Esquema de la respuesta inmune celular.
En la respuesta inmune humoral, una célula T coopera-

dora CD4 (TH) se activa, como en el caso anterior, tras recono-
cer el antígeno presentado por un macrófago en el contexto de
una molécula MHC clase II y por acción de la IL-1 segregada
por el macrófago. La célula T CD4 se une entonces a una cé-
lula B que haya reconocido también el antígeno. El contacto de

la célula T CD4 estimula la maduración, multiplicación y dife-

renciación de la célula B en un clon de células plasmáticas que
secretan inmunoglobulinas específicas frente al antígeno, en
este ejemplo el virus, al que se unen rodeándolo e inactivándo-
lo. Las linfoquinas secretadas por la célula T CD4, entre ellas
interleuquina-2, interleuquina-4 e interleuquina-6, colaboran
en la maduración de los linfocitos B. Las células B también
pueden reconocer antígeno libre en solución en sangre o linfa,
pero también necesitan la ayuda de las células T CD4. Una
población de células de memoria persiste para hacer frente rá-
pidamente al antígeno en posteriores contactos (Fig. 27.3).
Figura 27.3.– Esquema de la respuesta inmune humoral.
Otro sistema, de de- Otro sistema, de carácter enzimático, que contribuye a la

fensa frente microor- defensa frente a microorganismos patógenos es el sistema del
ganismos patógenos
es el sistema del complemento, una de cuyas vías necesita de una respuesta
complemento, una de humoral previa para activarse. El sistema del complemento es
cuyas vías necesita un sistema enzimático de activación que se encuentra en el
de una respuesta hu-
moral previa para ac- plasma. Es una de las principales vías efectoras del proceso in-
tivarse. flamatorio. Está formado por unas veinte proteínas, y su activa-
ción desencadena una respuesta rápida muy amplificada a
través de un sistema de cascada, donde el producto de una re-
acción es la enzima catalítica de la siguiente. La mayoría de sus

componentes se designan con la letra “C” seguida de un nú-

mero, y cuando son escindidos por una enzima, el producto de
menor tamaño tiene el sufijo “a” y el de mayor tamaño el “b”.
El complemento se activa por dos vías distintas: El complemento se
activa por dos vias
a) la vía clásica y distintas. La clásica
b) la vía alternativa. está mediada por
complejos antígeno-
En la vía clásica hay una activación específica que presupone anticuerpo. La alter-
nativa se activa por
una respuesta humoral, ya que está mediada por complejos polisacaridos de la
antígeno-anticuerpo, donde el anticuerpo es IgG o IgM, hacen pared celular bacte-
falta dos moléculas de IgG o una de IgM. La vía alternativa es riana.
una activación inespecífica, se produce directamente por poli-
sacáridos y liposacáridos de la pared celular bacteriana.
En la activación específica por la vía clásica, las proteínas
que intervienen se aúnan en tres grupos:
• Grupo de reconocimiento: formado por C1, proteína for-
mada por varias subunidades, una molécula de C1q, dos
de C1r y dos de C1s. El C1q está formado por 18 cade-
nas polipeptídicas.
• Grupo de activación: formado por las proteínas C4, C2 y
C3
• Grupo de ataque a membrana: constituido por las proteí-
nas C5, C6, C7, C8 y C9.
Cuando las moléculas de inmunoglobulina (2 IgG o 1 IgM)
se combinan con el antígeno, sufren un cambio conformacional
que permite la fijación, a través de su región Fc, de C1q. La
unión de C1q induce la activación autocatalítica de una molé-
cula de C1r, que escinde— el otro zimógeno C1r, transformándo-
—
lo en su forma activa C1r (la barra significa activación): C1r
escinde las dos moléculas
— de C1s, transformándolas en serín-
esterasas activas, C1s .
—
La enzima C1s actúa sobre C4, que tiene un enlace tioés-
ter, y lo escinde en C4b y C4a; el C4b se une a un receptor de
superficie de la membrana plasmática, y actúa a su vez como
sitio de unión para el zimógeno— C2, que combinado con C4b
se convierte en sustrato de C1s , que lo escinde en C2a y C2b.
El— fragmento C2a se une a C4b, y así se forma el complejo
——
C4b2a , que es una enzima denominada convertasa de C3. El
———
C3 tiene un tioéster interno, que es escindido por C4b2a en
dos fragmentos, C3a y C3b. El C3a es liberado a la fase líqui-
da y desempeña el papel de mediador de la inflamación, es
una anafilotoxina que produce liberación de histamina por las
células que la almacenan, y tiene efectos quimiotácticos para
ciertos leucocitos. El fragmento C3b
———se une a su receptor en la
superficie celular, junto a C4b2a , formando la enzima

—
——— —
C4b2a 3b , que es la convertasa de C5, al que divide en C5a y
C5b (Fig. 27.4). El fragmento C5a pasa a la fase líquida y de-
sempeña las mismas funciones que C3a. El fragmento C5b se
une a C6 y C7, formando el complejo C5b67, que se une a la
superficie celular en un sitio distinto del sitio de la convertasa
de C5, y también puede trasladarse a otras células que carez-
can de dicha enzima. A continuación, C8 se combina con la
subunidad C5b del complejo C5b67 y se inserta en la mem-
brana, en donde varias moléculas de C9 polimerizan y se en-
samblan para formar el complejo de ataque a la membrana,
Figura 27.4.– Esquema de la vía clásica del complemento hasta

la formación de C5b.

ya que se produce un émbolo lítico. La lisis celular comienza

con la unión de C8, y aumenta su velocidad con la polimeriza-
ción de C9 (Fig. 27.5).
Figura 27.5.– Esquema de la formación del complejo de ataque a membrana

(CAM), común para la vía clásica y la vía alternativa del complemento.
El resultado final de la cascada del complemento es la for- El resultado final de

mación de agujeros, con un diámetro interior de unos 10 nm, la cascada del com-
plemento es la forma-
en la membrana celular. Que producen un hinchamiento celu- ción de agujeros en
lar, debido al efecto Donnan, por lo cual la célula se rompe ex- la membrana celular.
plosivamente. Estos agujeros produ-
cen un hinchamiento
La vía alternativa se desarrolla plenamente en presencia celular, debido al
de membranas celulares bacterianas. En la fase líquida el enla- efecto Donnan, por lo
ce tioéster interno del componente C3 se escinde lentamente cual la célula se rom-
pe explosivamente.
de forma espontánea en medio acuoso, generándose una for-
ma activa del C3 denominada C3i. Al C3i se une el factor B,
formándose C3iB, sobre el que actúa el factor
——D escindiendo a
B, así se libera Ba y se forma el complejo C3iBb, que es la con-
vertasa de C3 de la vía alternativa, y permanece en la fase lí-
quida. El C3b que se genera por acción enzimática puede unir-
se a la membrana de una célula bacteriana, se une a C3b el
factor B, con una elevada afinidad, y por acción del factor D se
———
forma una convertasa estable C3bBb situada en la superficie
celular, que genera muchos fragmentos C3b que se unen a la

membrana bacteriana, produciéndose la amplificación. Esta

convertasa puede unir más fragmentos de C3b para formar
———— —
C3bBb 3b, que es la convertasa de C5 de la vía alternativa.
Una vez hidrolizado C5, se desencadena el complejo de ataque
a membrana, que es común para ambas vías.
Tanto la vía clásica Tanto la vía clásica como la alternativa están sometidas a
como la alternativa sistemas de regulación. La vía clásica se regula mediante inhi-
están sometidas a
sistemas de regula- bidores. En cuanto a la vía alternativa, la etapa de amplifica-
ción. ción no se produce si el C3b se une a la superficie de las célu-
las propias.
INMUNOGLOBULINAS:
ESTRUCTURA Y FUNCIÓN
Las inmunoglobuli- Las inmunoglobulinas (Ig) son glicoproteínas que se en-

nas son segregadas cuentran en el plasma y en la fase líquida tisular de todos los
por las células plas-
máticas, derivados de mamíferos, así como, algunas de ellas, en la superficie de los
los linfocitos B que linfocitos B, donde actúan como receptores de antígenos es-
han tenido contacto pecíficos.
con el antígeno.
La estructura general de una molécula de inmunoglobulina
consiste en cuatro cadenas polipeptídicas iguales dos a dos,
unidas por puentes disulfuro y enlaces no covalentes. Las de
menor tamaño se denominan cadenas ligeras (L) y las de ma-
yor tamaño pesadas (H) (Fig. 27.6). Las cadenas ligeras tienen
una masa molecular de 25.000 Da, y en los vertebrados pue-
den ser de dos tipos, kappa (N) o lambda (O); pero en una
molécula de inmunoglobulina las dos cadenas ligeras son igua-
les, bien N o bien O, nunca una de cada tipo. Las cadenas pe-
Existen cinco clases sadas tienen una masa molecular entre 50.000 y 77.000 Da,
de inmunoglobulinas existen cinco tipos generales de cadenas pesadas, denomina-
(IgG, IgM, IgA, IgD,
IgE) deter minadas das J, P, D, G y H, cada una de las cuales define una clase de in-
por el tipo de cadena munoglobulinas, así tendremos cinco clases de inmunoglobuli-
pesada que las forma nas: IgG, IgM, IgA, IgD e IgE, respectivamente. Además, las in-
(g, m, a, d, e).
munoglobulinas de cada una de las clases son muy
heterogéneas, dentro de cada clase hay subclases, que depen-
den del tipo de cadena pesada que posean, así por ejemplo,
hay cuatro subclases de IgG: IgG1, IgG2, IgG3 e IgG4, según
que su cadena pesada sea J1, J2, J3 o J4, respectivamente.
En la cadena ligera se distinguen dos regiones diferentes,
una región variable (VL) desde el extremo amino terminal hasta
la mitad de la cadena (aminoácidos 1 a 108), cuya secuencia
de aminoácidos es variable, y una región constante (CL) cuya
composición en aminoácidos es constante (excepto por las va-
riaciones alotípicas e isotípicas). Cada región VL y CL presenta
un puente disulfuro intracatenario que genera un bucle peptídi-

La estructura general
de una molécula de
inmunoglobulina con-
siste en cuatro cade-
nas polipeptídicas
iguales dos a dos,
unidas por puentes
disulfuro y enlaces no
covalentes. Las de
menor tamaño se de-
nominan cadenas li-
geras (L) y las de ma-
yor tamaño pesadas
(H).
Figura 27.6.– Esquema de la estructura de la IgG (A). Plegamiento característi-

co de los dominios de la cadena ligera de una inmunoglobulina, con las regio-
nes hipervariables en el dominio VL (B). Esquema de los dominios de la molé-
cula de IgG (C).
co de unos 60-70 aminoácidos. Igualmente, en la cadena pesa-

da hay dos regiones, una región variable en cuanto a su se-
cuencia de aminoácidos situada en el extremo amino terminal
de la cadena, denominada VH, que abarca los primeros

La variabilidad de los 108 aminoácidos, y una región constante, CH, mucho mayor
dominios variables de que la de la cadena ligera. En el caso de la IgG, que puede
cadena pesada y de
cadena ligera no es considerarse un anticuerpo típico, la región constante de cade-
homogénea. Existen na pesada y se subdivide a su vez en tres regiones estructural-
algunos segmentos mente distintas: CH1, CH2 y CH3. Cada una genera regiones glo-
poli-peptídicos cortos
en estas regiones bulares denominadas dominios. Cada uno de estos dominios
cuya variabilidad es de unos 110 aminoácidos presenta una estructura característica
mucho mayor, y que consistente en dos amplias hojas E antiparalelas unidas por el
se denominan regio-
nes hipervariables. puente disulfuro (Fig. 27.6).
En una molécula de inmunoglobulina cada cadena ligera
está unida a una pesada por un enlace disulfuro en la región
carboxi terminal de la cadena L; a su vez, las dos cadenas pe-
sadas están unidas entre sí por uno o varios puentes disulfuro
situados en la región constante de cadena pesada, y esta zona
constituye la “bisagra”, que permite la flexibilidad de los dos
brazos de la molécula de inmunoglobulina.
Los segmentos hiper- La variabilidad de los dominios variables de cadena pesada
variables forman el y de cadena ligera no es homogénea. Existen algunos segmen-
centro de unión del
antígeno. tos polipeptídicos cortos en estas regiones cuya variabilidad es
mucho mayor, y que se denominan regiones hipervariables. El
plegamiento de los dominios variables determina que estas re-
giones, situadas en las zonas de los residuos 30, 50 y 95, que-
den expuestas y próximas hacia el exterior de la molécula. Es-
tos segmentos hipervariables forman el centro de unión del
Los anticuerpos cons-
tan de regiones de se- antígeno, y la especificidad del anticuerpo viene determinada
cuencia única que les por la naturaleza de sus aminoácidos (Fig. 27.6).
confieren la especifi- Las inmunoglobulinas son proteínas bifuncionales.
cidad de unión al
antígeno, y de regio- Los anticuerpos constan de regiones de secuencia única
nes de secuencia que les confieren la especificidad de unión al antígeno, y de re-
constante que inter- giones de secuencia constante que intervienen en las funciones
vienen en las funcio-
nes activas comunes activas comunes de cada clase. Las mismas funciones efectoras
de cada clase. son mediadas por anticuerpos de muy distinta especificidad.
CLASES DE INMUNOGLOBULINAS
Cada clase de inmunoglobulinas presenta una funciones

biológicas específicas.
La IgG activa el siste- • IgG: Se encuentra sólo en la forma monomérica de cua-
ma del complemento, tro cadenas, su masa molecular es de 146.000 Da. Su ca-
actúa como antitoxi-
na y atraviesa la pla- dena pesada es J, y existen cuatro subclases. Está distri-
centa. buida entre los espacios intravascular y extravascular, la
subclase más abundante en el suero es la IgG1 (9 mg/mL).
Entre sus funciones está la de activar el sistema del com-
plemento, actuar como antitoxina, y en los seres humanos

atraviesa la placenta confiriendo inmunidad al recién na-

cido durante los primeros meses de vida.
• IgM: Se encuentra fundamentalmente en el espacio intra- La IgM es un agente
vascular, su concentración plasmática es de 1,5 mg/mL. aglutinante y citolíti-
co muy eficaz.
Su cadena pesada es P, no existen subclases, y su estructu-
ra consiste en un pentámero de la unidad básica de cuatro
cadenas, por lo que su masa molecular es de 970.000 Da.
Las subunidades del pentámero están unidas entre sí me-
diante enlaces disulfuro entre los dominios CP3, así como
entre el péptido final del dominio CP4. En el pentámero
existe una cadena peptídica adicional denominada cade-
na J, formada por 137 aminoácidos, con masa molecular
de 15.000 Da, y de estructura similar a un dominio de in-
munoglobulinas, que está unida por enlaces disulfuro con
el péptido terminal de las cadenas pesadas (Fig. 27.7). La
IgM es el principal anticuerpo frente a microorganismos
infecciosos antigénicamente complejos, es un agente aglu-
tinante y citolítico muy eficaz.
Figura 27.7.– Esquema de la estructura pentamérica de la IgM,

con la cadena J en la región central.
• IgA: Su cadena pesada es D; se puede encontrar en for- La IgA secretora

ma monomérica y dimérica, y además los dímeros pue- abunda en las secre-
ciones seromucosas.
den estar unidos al componente secretor. Asimismo, de la

IgA existen dos subclases, IgA1 e IgA2, (IgA1 3,0 mg/mL;

IgA2 = 0,5 mg/mL). Los dímeros de IgA tienen la cadena
J, unida por puente disulfuro.
Esta inmunoglobulina es la más abundante en las secre-
ciones seromucosas como la saliva, la leche, el calostro,
las secreciones genitourinarias y las traqueobronquiales.
En las secreciones la IgA está en forma dimérica, unida al
componente secretor, y se denomina IgA secretora (IgAs).
El componente secretor es una proteína de masa molecu-
lar 70.000 Da, que se adhiere a la IgA cuando ésta atra-
viesa el epitelio hacia las secreciones, y su función es pro-
teger a la inmunoglobulina de los agentes proteolíticos.
La IgD abunda en la • IgD: La cadena pesada de esta inmunoglobulina es G y
superficie de los lin- no existen subclases. Su masa molecular es de 185.000 Da.
focitos B.
Su presencia en el plasma (0,03 mg/mL) es inferior al 1%
del total de inmunoglobulinas, sin embargo abunda en la
superficie de los linfocitos B, donde se cree que participa
en la diferenciación de estás células inducida por el antí-
geno.
La IgE se encuentra • IgE: La cadena pesada de la IgE es H. Su concentración
en la superficie de plasmática es muy pequeña ( 0,0001 mg/mL). Se en-
basófilos mastocitos
y células de las mu- cuentra en la superficie de basófilos y mastocitos de todos
cosas. los individuos, así como en la superficie de células de las
mucosas, como la nasal y la bronquial. Su función es la
defensa frente a parásitos helmintos, pero en la sociedad
industrializada se relaciona con reacciones de hipersensi-
bilidad inmediata como el asma o la fiebre del heno.
RESUMEN
El organismo combate los agentes infecciosos mediante

su sistema inmunitario. Existen dos tipos de inmunidad, la
innata o inespecífica y la adaptativa o específica, ambas
estrechamente relacionadas. La inmunidad innata está
constituida por barreras mecánicas como la piel, y quími-
cas como los componentes bactericidas de los fluidos cor-
porales; además participan células fagocitarias como los
granulocitos neutrófilos, otras células fagocitarias son los
macrófagos, que proceden de los monocitos circulantes en
la sangre. Otro tipo de leucocitos que se encuentran en la
sangre son la células asesinas naturales, especializadas en
la defensa inespecífica frente a los virus. También participa

en la defensa inespecífica la vía alternativa del sistema del

complemento.
La inmunidad adaptativa o específica elabora una
respuesta específica para cada agente infeccioso, además
guarda memoria del mismo. En este sistema adaptativo
cooperan macrófagos, inmunoglobulinas y distintos tipos
de linfocitos. El sistema inmune específico actúa a través
de dos tipos de respuestas. En la respuesta inmune celular
participan las células presentadoras de antígeno (APC), cé-
lulas TH, linfocitos T citotóxicos y linfocitos T supresores,
asimismo persiste una población de células T de memoria.
En la respuesta inmune humoral participan células APC
que presentan el antígeno a las células TH, que estimula la
maduración y proliferación de un linfocito B que ha tenido
contacto con el antígeno, formándose células plasmáticas
que sintetizan anticuerpos específicos frente al antígeno, al
cual se unen inactivándolo; también se forma una pobla-
ción de células B de memoria.
Otro sistema, de carácter enzimático, presente en el
plasma, que contribuye a la defensa frente a microorganis-
mos patógenos es el sistema del complemento, que se
activa por dos vías: la clásica y la alternativa. La vía clásica
está mediada por complejos antígeno-anticuerpo. La vía al-
ternativa, se activa por polisacáridos y liposacáridos de la
pared celular bacteriana. El resultado final del sistema del
complemento es la formación de agujeros en la membrana
celular, por lo que la célula se rompe explosivamente.
Las inmunoglobulinas son glicoproteínas que se en-
cuentran en el plasma y en la fase líquida tisular, así como,
algunas de ellas, en la superficie de los linfocitos B, donde
actúan como receptores antigénicos específicos. Están for-
madas por cuatro cadenas polipeptídicas, iguales dos a
dos, unidas por puentes disulfuro y enlaces no covalentes.
Las de menor tamaño se denominan ligeras (L) y las de
mayor tamaño pesadas (H). Existen cinco tipos generales
de cadenas pesadas, cada una de las cuales define una
clase de inmunoglobulinas: IgG, IgM, IgA, IgD e IgE. Cada
cadena, L o H, está constituida por varios dominios de
unos 110 aminoácidos dispuestos en dos amplias hojas E
antiparalelas con un puente disulfuro intracaternario. La
cadena L tienen un dominio de secuencia de aminoácidos
variable (VL) y otro de secuencia constante (CL); las cade-
nas H tiene un dominio VH y tres o cuatro (dependiendo
de la clase de Ig) CH. En los dominios variables (VL y VH)

hay unas regiones hipervariables, que constituyen el cen-

tro de unión del antígeno. Las inmunoglobulinas son pro-
teínas bifuncionales, una región de la molécula interviene
en la unión específica al antígeno, y otra región distinta es
la responsable de las funciones efectoras propias de cada
clase de inmunoglobulinas.
Hipersensibilidad inmediata de tipo I
El término hipersensibilidad se refiere a una situación en

que se produce una respuesta inmune adaptativa exagerada o
inadecuada. La hipersensibilidad de tipo I consiste en una re-
acción alérgica inmediata tras la exposición al alergeno, que es
un antígeno. Dentro de este tipo de hipersensibilidad se en-
cuentran el asma, la fiebre del heno, los eccemas, la urtica-
ria y las alergias a los alimentos. Estas alergias se producen
tras la estimulación de los mastocitos sensibilizados con IgE por
parte del alergeno.
Los antígenos ambientales (alergenos), inicialmente ino-
cuos, penetran en el organismo a través de las mucosas y son
fagocitados y procesados por las células presentadoras de antí-
geno (CPA) locales, que los presentan a los linfocitos TH, que
secretan citocinas para inducir la proliferación de los linfocitos
B, los cuales secretan IgE específica frente al alergeno. La IgE
se une a los receptores de FcH de los mastocitos, por lo que és-
tos quedan sensibilizados. Cuando el individuo tiene un con-
tacto posterior con el alergeno, éste se une a las IgE de la su-
perficie de los mastocitos sensibilizados entrecruzándolas, se
produce un aumento de Ca2 intracelular que induce la libera-
ción de mediadores almacenados, como histamina y proteasas,
así como la síntesis de mediadores lipídicos, como leucotrienos
y prostaglandinas. Los agentes quimiotácticos (interleuquina 5,
interleuquina-8 o interferon D) que liberan los mastocitos atra-
en neutrófilos, eosinófilos y basófilos hacia la región de activa-
ción; la histamina produce vasodilatación y aumenta la perme-
abilidad vascular, activando, junto con algunas proteasas, el
proceso inflamatorio; finalmente, las prostaglandinas (PGD2) y
los leucotrienos (LTC4, LTD4), junto con la histamina, produ-
cen contracción de la musculatura lisa bronquial y aumentan
las secreciones mucosas, obstruyendo las vías aéreas. De esta
forma se producen los síntomas clínicos de la alergia.

Estructura molecular
TEMA 28 del músculo
Estructura de la fibra muscular esquelética. Es-

tructura molecular del músculo esquelético. Meca-
nismo de la contracción muscular. Control de la
contracción muscular por calcio. El músculo car-
díaco. El músculo liso. Fuentes de energía en el
músculo.
De los tres tipos de músculos que tienen los animales, el

músculo esquelético y el cardiaco se denominan estriados por
su apariencia en bandas claras y oscuras a nivel microscópico,
lo que les diferencia del músculo liso. Por otra parte, las células
del músculo cardiaco y del liso tienen un único núcleo, y se de-
nominan miocitos; las células del músculo esquelético se deno- Las células que for-
minan fibras musculares, y son largas y multinucleadas. man el músculo es-
quelético se denomi-
Esta variedad en estructura, tamaño y función de los dife- nan fibras muscula-
rentes tipos de células musculares, también se refleja en el tiem- res.
po que requieren los distintos tipos de músculos para contraer-
se y relajarse. Así, la respuesta más rápida, en el orden de mili- Las células del mús-
culo cardíaco y del
segundos, es la del músculo esquelético de contracción rápida, músculo liso se deno-
y la respuesta más lenta es la del músculo liso, que es del orden minan miocitos.
de segundos.
ESTRUCTURA DE LA FIBRA
MUSCULAR ESQUELÉTICA
Las células cilíndricas que forman el músculo esquelético se

denominan fibras musculares, su longitud es de 1 a 40 nm y
su diámetro de unos 100 Pm. Cada fibra muscular está envuel-
En el citoplasma de
ta por una membrana celular eléctricamente excitable denomi- la fibra muscular
nada sarcolema (Fig. 28.1). Se trata de células plurinucleadas, están las miofibrillas,
en las que el número de núcleos aumenta con la longitud de la compuestas por uni-
dades repetitivas de-
fibra. El citoplasma se denomina sarcoplasma, y contiene ha- nominadas sarcóme-
ces de filamentos fuertemente empaquetados, estos filamentos ros.

Figura 28.1.– Estructura de la fibra muscular esquelética.
se denominan miofibrillas. Cada miofibrilla se compone de

unas 20.000 unidades que se repiten llamadas sarcómeros.
Entre las miofibrillas, y paralelas a ellas, hay numerosas mito-
condrias. Una forma especializada de retículo endoplásmico, el
retículo sarcoplásmico (RS), envuelve a cada miofibrilla. El
RS está formado por túbulos membranosos longitudinales
que se disponen paralelos a las miofibrillas, y que finalizan en
canales aplastados conocidos como cisternas terminales. El RS
contiene una gran cantidad de Ca2. Por otra parte, el sarcole-
ma de la fibra muscular presenta invaginaciones que forman el
sistema de túbulos transversales o túbulos-t, que se disponen
perpendiculares a la miofibrilla. Al final de cada sarcómero hay
una estructura de membranas denominada tríada, formada por
un túbulo-t y dos cisternas terminales; cada cisterna terminal
está unida al túbulo-t por una estructura base. La contracción
del músculo esquelético se desencadena por un estímulo ner-
vioso, que genera un potencial de acción que se extiende por el
sarcolema y a lo largo de la red de túbulos-t. La señal atraviesa
la unión de la tríada e induce la liberación de Ca2 del retículo
sarcoplásmico al sarcoplasma, el cual interacciona con los
sarcómeros de la fibra muscular e induce la contracción.
ESTRUCTURA MOLECULAR DEL

MÚSCULO ESQUELÉTICO
En cuanto a la estructura del músculo esquelético, una fi-

bra o célula muscular contiene muchas miofibrillas paralelas,

ESTRUCTURA MOLECULAR DEL MÚSCULO 385
cada una con un diámetro de 1 Pm, que están inmersas en el El sarcómero es la

citosol. Una micrografía electrónica de una sección longitudi- unidad fundamental
de la miofibrilla. Pre-
nal de una miofibrilla muestra las bandas claras y oscuras alter- senta una alternancia
nantes (Fig. 28.2). La unidad fundamental, denominada de bandas claras y
sarcómero, se repite cada 2,3 Pm a lo largo del eje de la fibri- oscuras como conse-
cuencia de la distri-
lla. La banda A oscura y la banda I clara alternan con regulari- bución de los fila-
dad. La región central de la banda A se denomina zona H, es mentos gruesos y de
menos densa que el resto de la banda. La zona H está dividida los filamentos delga-
dos.
en dos partes iguales por un disco central denominado disco M
(o línea M), En el centro de la banda I está el disco Z (o línea
Z). La línea Z marca el límite entre cada sarcómero.
Figura 28.2.– Micrografía óptica y electrónica del músculo esquelético.

Estructura del sarcómero.

Un filamento grueso Las secciones transversales de una miofibrilla permiten

está formado por
unas 300 moléculas
observar la distribución molecular subyacente del sarcómero,
de miosina orienta- mostrando que existen dos clases de filamentos proteicos que
das para conferirle un interaccionan entre sí. Los filamentos gruesos tienen un diá-
carácter bipolar.
metro de unos 15 nm, mientras que el de los filamentos del-
gados es de 9 nm. La zona H está constituida por filamentos
gruesos ordenados hexagonalmente. La banda I está formada
por un conjunto hexagonal de filamentos delgados. En la re-
Un filamento delgado gión oscura, en los extremos de cada banda A, los filamentos
está formado por una
cadena de actina F,
delgados y los gruesos forman interdigitaciones; cada filamento
varias moléculas de grueso está rodeado por seis filamentos delgados, y cada fila-
tropomiosina y varias mento delgado se encuentra en el centro de tres filamentos
del complejo troponi-
na.
gruesos. El disco M, en el centro de la zona H, contiene varias
proteínas, entre ellas creatina quinasa, miomesina y proteína
M. Los filamentos gruesos consisten fundamentalmente en
miosina. Los filamentos delgados están compuestos principal-
mente por tres proteínas: actina, tropomiosina y el complejo
troponina. Los filamentos delgados y gruesos interaccionan
mediante puentes cruzados, constituidos por regiones o domi-
nios de la molécula de miosina.
En el filamento grueso, formado por unas 300 moléculas de
miosina, las moléculas de miosina se orientan con sus cabezas
globulares hacia el extremo más cercano del filamento. Esta
orientación deja una zona desnuda, carente de cabezas globu-
lares, en el centro del filamento, donde se localiza el disco M.
Por lo tanto, los filamentos gruesos son bipolares.
Un filamento delgado está formado por una cadena de acti-
na F, que es un polímero lineal de monómeros de actina G, por
varias moléculas de tropomiosina y varias moléculas de tropo-
nina. Cada molécula de tropomiosina está en contacto con
unos siete monómeros de actina, y a cada molécula de tropo-
miosina se une una molécula del complejo troponina, el cual
está constituido por tres proteínas diferentes: troponina T, tro-
ponina I y troponina C. En el filamento delgado todos los
monómeros de actina tienen la misma direccionalidad.
MECANISMO DE LA
CONTRACCIÓN MUSCULAR
Modelo de los filamentos deslizantes
La contracción de las fibras musculares se produce por el

deslizamiento de los filamentos gruesos de miosina a lo largo
de los filamentos delgados de actina. La longitud de los fila-
mentos gruesos y delgados no cambia durante la contracción

muscular. La disminución de la longitud del sarcómero durante Durante la contrac-

la contracción supone un movimiento de deslizamiento en di- ción muscular los fi-
lamentos delgados a
recciones opuestas de los dos extremos de un filamento grueso cada lado del disco
de miosina, lo cual es factible porque tanto los filamentos del- M de un filamento
gados como los gruesos tienen carácter direccional. Los fila- grueso son arrastra-
dos hacia dicho disco
mentos delgados siempre se disponen a partir de las líneas Z de M por el deslizamien-
una forma uniforme; entre dos líneas Z cualesquiera, los dos to de las cabezas de
conjuntos de filamentos de actina se disponen en direcciones miosina, acortandose
así el tamaño del
opuestas. Por otra parte, la polaridad de los filamentos gruesos sarcómero.
de miosina se invierte en el disco M. Así, durante la contrac-
ción los filamentos de actina a cada lado del disco M son arras-
trados hacia el disco M por el deslizamiento de las cabezas de
miosina, produciéndose un acortamiento neto del sarcómero
(Fig. 28.3).
Figura 28.3.– Acortamiento del sarcómero por deslizamiento de los filamentos

durante la contracción muscular.
Las diferentes etapas de la contracción muscular están im-

pulsadas por la actividad ATPasa de la miosina. La fuerza de la
contracción muscular se produce por la interacción de miosina,
actina y ATP. Durante el ciclo de contracción el ATP interaccio-
na con la miosina, que produce su hidrólisis en ADP y Pi , los El deslizamiento de
cuales quedan unidos a la miosina; la actina interacciona con los filamentos grue-
sos y delgados se
el complejo miosina-ADP-Pi y estimula la liberación del Pi y a debe a cambios con-
continuación del ADP, por lo cual la actina aumenta el número formacionales en las
de recambio de la miosina; seguidamente, un nuevo ATP se cabezas de miosina
como consecuencia
une al complejo actomiosina provocando la disociación de la de hidrólisis del ATP,
actina y la miosina. El complejo ATP-miosina resultante está catalizada por la acti-
dispuesto para otro ciclo de catálisis (Fig. 28.4). Estas reaccio- vidad ATPasa de la
miosina.
nes requieren la presencia de Mg2.
La energía libre de la hidrólisis del ATP se traduce en cam-
bios conformacionales en las cabezas de miosina, que produ-

Figura 28.4.– Ciclo de catálisis de la contracción muscular.
cen el deslizamiento de los filamentos gruesos y delgados (Fig.

28.5). En el músculo en reposo, las cabezas de miosina con
ADP y Pi unidos están disociadas de los filamentos de actina.
Cuando se produce un estímulo que conduce a la contracción
muscular, que implica un incremento del Ca2 citosólico, las ca-
bezas de miosina se separan del filamento grueso para unirse a
la actina del filamento delgado (etapa 1). La unión de la actina
estimula la liberación del Pi , lo que va seguido de un cambio
conformacional crucial de la cabeza de miosina, denominado
golpe de potencia de la contracción muscular, y de la disocia-
ción del ADP (etapa 2); y los filamentos gruesos se mueven a
lo largo de los filamentos delgados a medida que las cabezas
de miosina se relajan pasando a una conformación de menor
energía. Durante el golpe de potencia las cabezas de miosina
se inclinan unos 45º y su energía conformacional disminuye.
Esto mueve el filamento grueso aproximadamente 10 nm a lo
largo del filamento delgado (etapa 3). La subsecuente unión
del ATP a la miosina (etapa 4), y la hidrólisis de este ATP (eta-
pa 5) causan la disociación de las cabezas de miosina de los fi-
lamentos delgados y también hacen que las cabezas de miosi-
La contracción mus- na retornen a su conformación de alta energía, esto es con su
cular se desencadena eje longitudinal casi perpendicular al de los filamentos gruesos.
al aumentar la con-
centración de Ca2+ en En el músculo esquelético en contracción este ciclo se repite a
el sarcoplasma. la velocidad de cinco ciclos por segundo.

Figura 28.5.– Ciclo del mecanismo de contracción del músculo esquelético.
CONTROL DE LA CONTRACCIÓN
MUSCULAR POR CALCIO
El elemento desencadenante de la contracción muscular es En la fibra muscular,

el aumento de la concentración de Ca2 en las inmediaciones el impulso del nervio
motor desencadena
de las fibras musculares del músculo esquelético o de los mioci- la liberación de Ca2+
tos del músculo cardiaco y del músculo liso. En todos los casos, del reticulo sarco-
el aumento de Ca2 se debe al flujo del mismo a través de ca- plásmico al sarco-
plasma.
nales de calcio. La contracción muscular termina cuando la
concentración de Ca2 en el sarcoplasma disminuye por la ac-

ción de bombas específicas como la ATPasa de Ca2 del retícu-

lo sarcoplásmico (Fig. 28.6).
Figura 28.6.– Bombas y canales de calcio.
Tanto las cisternas terminales del retículo sarcoplásmico

como los túbulos-t y el sarcolema contienen canales de
calcio. Los canales de calcio de los túbulos-t del músculo es-
quelético y del músculo cardíaco se denominan receptores de
dihidropiridina (DHP). El canal de calcio de las cisternas ter-
minales del retículo sarcoplásmico se denomina receptor de
rianodina. El Ca2 es la señal que permite al músculo estriado
responder a los impulsos del nervio motor. En el músculo en
reposo la concentración de Ca2 en el sarcoplasma es inferior a
1 PM, por lo que los centros de baja afinidad para el Ca2 de la
troponina C (Tn C) están vacíos. En estas condiciones la tropo-
nina I (Tn I) interacciona directamente con la actina del fila-

mento delgado para impedir la interacción de la actina con las

cabezas S1 de miosina; además, la Tn I y la troponina T (Tn T)
interaccionan con la tropomiosina para mantenerla alejada del
surco entre los monómeros de actina (Fig. 28.7).
Figura 28.7.– Modificaciones inducidas en los filamentos por la

unión de calcio a la troponina C.
Como consecuencia del impulso nervioso, el Ca2 liberado

por el RS hace que la concentración de Ca2 en el sarcoplasma
se eleve hasta 10 PM. A esta concentración, se produce la
unión de Ca2 a los centros de baja afinidad de la Tn C, lo que
induce un cambio conformacional en el dominio N-terminal de

la proteína, exponiéndose un bolsillo hidrofóbico que aumenta

la afinidad de este dominio por la TnI. El aumento de la inte-
racción entre Tn I y Tn C produce una disminución de la inte-
Al aumentar la con-
racción entre Tn I y actina (Fig. 28.7). El resultado es que la
centración de Ca2+ en tropomiosina se desliza más profundamente en el surco del fila-
el sarcoplasma, la mento delgado de actina, exponiéndose los sitios de unión de
TnC sufre un cambio
conformacional que
miosina en la actina e iniciándose el ciclo de la contracción
favorece su interac- muscular.
ción con TnI, permi- Resulta pues evidente que el Ca2 controla la contracción
tiendo así que la acti-
na interaccione con muscular por un mecanismo alósterico en el que el flujo de la
la miosina. información transcurre en el sentido:
Ca2 o troponina o tropomiosina o actina o miosina
EL MÚSCULO CARDÍACO
En la contracción del El músculo cardiaco, al igual que el músculo esquelético es

músculo cardíaco es estriado, y la contracción muscular se produce mediante el sis-
esencial la entrada de
Ca2+ extracelular pa- tema actina-miosina-tropomiosina-troponina. Por el contrario,
ra desencadenar la li- el músculo cardíaco presenta ritmicidad intrínseca, es un sinitio
beración de Ca2+ del en el que cada miocito (50-100 Pm de longitud, 10-20 Pm de
reticulo sarcoplásmi-
co, que inducirá los diámetro) se comunica con los demás. El sistema de túbulos-t
cambios pertinentes está más desarrollado que en el músculo esquelético, pero el
en el TnC. retículo sarcoplásmico es mucho menos extenso, por lo que se
dispone de menos Ca2 intracelular para la contracción muscu-
lar; los receptores de rianodina o estructuras base de las cister-
nas terminales son la conexión entre éstas y los túbulos-t.
El Ca2 extracelular es fundamental en la contracción del
músculo cardiaco. El Ca2 entra en los miocitos a través de ca-
nales de calcio existentes en el sarcolema. Los que más contri-
buyen cuantitativamente a la entrada de Ca2 son los canales
de calcio lentos (tipo L). Los canales de calcio rápidos (tipo
T) del sarcolema son menos numerosos que los lentos, y contri-
buyen a la fase inicial de aumento del Ca2 mioplasmático. Este
incremento inicial del Ca2 en el mioplasma permite que el Ca2
actúe sobre los receptores de rianodina o estructuras base
del retículo sarcoplásmico, que se abren permitiendo una salida
masiva de Ca2 al mioplasma; este mecanismo se denomina li-
beración de calcio inducida por calcio (Fig. 28.8).
La salida de Ca2 del miocito se produce, principalmente,
mediante el intercambiador de Ca2+-Na+, que mantiene bajos
los niveles de Ca2 intracelular en el músculo en reposo me-
diante el intercambio de un Ca2 por tres Na, lo que contribu-
ye a la relajación. Sin embargo, este intercambiador puede fun-
cionar en sentido inverso, así cualquier compuesto que aumen-

Figura 28.8.– Liberación de calcio inducida por calcio en el músculo cardiaco.
te el Na intracelular también incremente de modo secundario

el Ca2 intracelular y produce una contracción más fuerte. Se
trata de un efecto ionotrópico positivo, que puede ser desenca-
denado, por ejemplo, por el digital, fármaco que se utiliza para
la insuficiencia cardíaca, ya que inhibe la Na/K-ATPasa pro-
duciendo un aumento del Na intracelular, y como consecuen-
cia de Ca2.
La ATPasa de Ca2 del sarcolema es una bomba de Ca2
que contribuye a la salida de Ca2 del miocito, aunque de for-
ma minoritaria.
EL MÚSCULO LISO
Las estructuras moleculares del músculo liso son muy seme-

jantes a la de los músculos estriados, pero en él los sarcómeros
no están alineados de la forma en que lo están en los de apa-
riencia estriada. Los miocitos que forman este tipo muscular
son células muy alargadas (100-500 Pm de longitud, 2-6 Pm
de diámetro), forman un sincítio, y el tejido tiene muy pocos
túbulos-t y un retículo sarcoplásmico rudimentario.
La contracción del músculo liso, igual que la del estriado,
está regulada por Ca2. El Ca2 que estimula la contracción del
músculo liso tiene un origen predominantemente extracelular, y
entra en el miocito a través de canales de calcio del sarcolema.
Estos canales pueden abrirse por estimulación eléctrica o por la
unión de hormonas o fármacos a receptores de membrana.

El músculo liso tiene un tiempo de respuesta muy lento, y

en los vertebrados es el que se encarga de las contracciones in-
voluntarias, largas y lentas de diversos órganos, incluyendo las
paredes intestinales o el útero.
La contracción del Una diferencia esencial con los músculos estriados es que
músculo liso se esti- carece del complejo troponina en los filamentos delgados, aun-
mula por Ca2+ extra-
celular. que sí posee actina y tropomiosina. Además, las cadenas lige-
ras de la miosina son diferentes a las del músculo estriado. A
pesar de la ausencia del complejo troponina, la contracción del
músculo liso es dependiente de Ca2, que activa la quinasa de
cadena ligera de miosina (MLCK), una enzima que fosforila
la cadena ligera reguladora de miosina (LC2), lo cual desenca-
dena la contracción muscular. La relajación del tejido se produ-
ce por desfosforilación.
Los filamentos delga- El mecanismo (Fig. 28.9) de la contracción comienza cuan-
dos del músculo liso do la estimulación eléctrica, desencadenada por el sistema ner-
carecen del complejo
troponina. vioso autónomo o involuntario, abre los canales de Ca2 del
sarcolema y la concentración de Ca2 aumenta desde 0,1 PM a
10 PM, pudiendo entonces el Ca2 unirse fácilmente a la cal-
modulina. La unión del complejo Ca2-calmodulina a MCLK
activa esta quinasa, que fosforila a LC2, y estimula la contrac-
ción del músculo liso. La desactivación de la MLCK se produce
Figura 28.9.– Modelo de control de la contracción del músculo liso. CaM: calmodulina;
MLCK: quinasa de cadena ligera de miosina; MLC: cadena ligera de miosina (LC2).

al descender el nivel de Ca2 mioplasmático por acción de la

Ca2-ATPasa del sarcolema. Entonces la fosfatasa de cadena li-
gera defosforila a LC2 y se produce la relajación muscular. Esta
reacción es relativamente lenta, lo que hace que la contracción
del músculo liso sea más sostenida que la del estriado.
La contracción del músculo liso está regulada por acción El aumento de la con-
hormonal. Así, la unión de epinefrina (adrenalina) a los recep- centración de Ca2+ en
el sarcoplasma activa
tores del músculo liso activa la adenilato ciclasa y conduce a la la MLCK, que fosfori-
formación de AMPc intracelular. El AMPc activa una proteína la la LC2, desencade-
quinasa que fosforila a MLCK; la forma fosforilada de MLCK nando así la contrac-
ción muscular.
tiene mucha menos afinidad por el complejo Ca2-calmodulina
y, por lo tanto, es fisiológicamente inactiva. Esta inactivación
revierte por acción de la fosfatasa de cadena ligera de miosina.
FUENTES DE ENERGÍA EN EL MÚSCULO
Para que se produzca la contracción muscular es imprescin-

dible el ATP. En el músculo esquelético el ATP disponible sólo
permite uno o dos segundos de contracción, por lo que este
compuesto ha de ser renovado a partir de una o varias fuentes,
dependiendo de la situación metabólica del individuo.
Las fuentes de ATP para la contracción muscular son (Fig.
28.10):
Figura 28.10.– Esquema de la fuentes de ATP del músculo.

• Por oxidación de glucosa en la glucólisis. Esta glucosa

puede provenir de la glucosa sanguínea o de la degrada-
ción del glucógeno muscular. En el sarcoplasma de las cé-
lulas musculares, próximos a las bandas I del sarcómero,
hay gránulos de glucógeno, cuya degradación, catalizada
por la glucógeno fosforilasa muscular, se activa por la ele-
vación de los niveles de Ca2, de AMP o por adrenalina.
Dependiendo de la si- • Mediante fosforilación oxidativa, para lo que es necesario
tuación metabólica un suministro adecuado de oxígeno. En los músculos con
del individuo, el mús-
culo equelético utili- una elevada demanda de oxígeno existe mioglobina, lo
zará glucosa o ácidos que les confiere color rojo. Los sustratos del metabolismo
grasos como sustra- aeróbico del músculo son la glucosa, procedente de la
tos para la obtención
de ATP. sangre o de la degradación del glucógeno muscular, y los
ácidos grasos procedentes de los triacilgliceroles del tejido
adiposo.
• A partir de fosfato de creatina, compuesto que proporcio-
na fosfatos de alta energía que permiten regenerar ATP a
partir de ADP durante la contracción muscular; el fosfato
de creatina se forma a partir de creatina y ATP cuando el
músculo está relajado. La enzima que cataliza este proce-
so es la creatina quinasa, que forma parte de los discos M
del sarcómero.
• A partir de ADP. El ATP puede formarse a partir de dos
moléculas de ADP en una reacción catalizada por la ade-
nilato quinasa. El ADP procede de la hidrólisis del ATP
catalizada por la miosina-ATPasa durante la contracción
muscular.
RESUMEN
Los animales poseen tres tipos de músculos, el músculo

esquelético, el cardíaco y el liso. Los dos primeros se deno-
minan estriados. Las células del músculo esquelético se
denominan fibras musculares, mientras que las del múscu-
lo cardíaco y las del liso se denominan miocitos.
La fibra muscular esquelética es una célula cilíndrica
multinucleada. En el sarcoplasma se encuentran haces de
filamentos denominados miofibrillas, cada una de las cua-
les está formada por unidades que se repiten, denomina-
das sarcómeros.
El sarcómero, se repite cada 2,3 Pm a lo largo del eje
de la fibrilla, la longitud entre dos líneas Z. La banda A os-
cura y la banda I clara se alternan con regularidad. Esta

apariencia es debida a la disposición de los filamentos

gruesos y delgados que componen las miofibrillas.
La contracción de las fibras musculares se produce por
el deslizamiento de los filamentos gruesos de miosina a lo
largo de los filamentos delgados de actina, sin modificarse
la longitud de los filamentos, y con un acortamiento neto
del sarcómero. La contracción es un proceso cíclico en el
que se produce la hidrólisis de ATP.
La contracción del músculo esquelético se desencade-
na por un impulso nervioso, produciéndose la liberación
de Ca2 del retículo sarcoplásmico al sarcoplasma. El Ca2
sarcoplasmático se une a los centros de baja afinidad de la
Tn C, aumentando su interacción con Tn I, lo que dismi-
nuye la afinidad de Tn I por la actina, y se desplaza la tro-
pomiosina dejando accesibles los sitios de unión de miosi-
na en la actina, e iniciándose el ciclo de la contracción
muscular.
En el músculo cardíaco la contracción muscular se pro-
duce mediante el sistema actina-miosina-tropomiosina-tro-
ponina, y es inducida por Ca2. En este tipo de músculo el
Ca2 extracelular es fundamental.
El músculo liso carece del complejo troponina en los fi-
lamentos delgados. La contracción muscular está inducida
por Ca2, de origen fundamentalmente extracelular, que
activa la quinasa de cadena ligera de miosina (MLCK), en-
zima que fosforila la cadena ligera reguladora de miosina
(LC2), lo cual desencadena la contracción muscular.
El ATP necesario para la contracción muscular procede
de la oxidación de la glucosa, proveniente de la sangre o
de la hidrólisis del glucógeno muscular, de la oxidación de
los ácidos grasos; del fosfato de creatina existente en el
músculo; o de la biosíntesis de ATP a partir de ADP.
Control terapéutico de contracción

del músculo liso
Trastornos respiratorios como el asma o diversas alergias

producen una contracción excesiva del músculo liso bronquial.
El tratamiento con epinefrina (adrenalina), mediante pastillas o
aerosoles inhalados, actúa inhibiendo la quinasa de cadena li-
gera de miosina (MLCK) mediante un proceso de fosforilación

que la inactiva, ya que la forma fosforilada no puede interac-

cionar con el complejo Ca2-calmodulina, lo que impide la con-
tracción muscular, y relaja el músculo liso bronquial. Se han
desarrollado fármacos más específicos, como el albuterol, que
actúan más selectivamente sobre los pulmones y evitan los
efectos secundarios de la epinefrina sobre el corazón.
Rigidez y rigor mortis
Cuando se produce una disminución acusada de los niveles

de ATP en el sarcoplasma, como consecuencia de un gran nú-
mero de ciclos de contracción-relajación, o por un descenso en
su síntesis por ausencia de oxígeno, como sucede en la isque-
mia, entonces la Ca2-ATPasa del retículo sarcoplásmico deja
de bombear Ca2 fuera del sarcoplasma, manteniéndose eleva-
dos los niveles de Ca2 en el sarcoplasma, lo que hace que se
promueva la interacción de las cabezas globulares S1 de miosi-
na con la actina F de los filamentos delgados; además, al no
existir ATP, no se produce la separación de las cabezas S1 de
miosina de la actina F, esto desencadena una situación de con-
tracción continuada y por tanto produce rigidez muscular.
El rigor mortis es el endurecimiento o rigidez del cuerpo que
se produce después de la muerte. Se produce como conse-
cuencia de los procesos descritos anteriormente, ya que des-
pués de la muerte deja de producirse ATP, y por lo tanto no se
produce la disociación de las cabezas S1 de miosina de la acti-
na F de los filamentos delgados, por lo que no se presenta la
relajación muscular.

Estructura y función
TEMA 29 del nervio
Estructura y función del nervio. Mecanismo de

transmisión de los impulsos nerviosos. Sinapsis y
Neurotransmisores.
El sistema nervioso está compuesto por los nervios periféri-

cos y las estructuras que configuran el sistema nervioso central
(SNC), cerebro, cerebelo, y médula espinal. Desde un punto de
vista funcional se distingue el componente somático y el com-
ponente vegetativo o sistema nervioso autónomo (SNA), am-
bos con sus respectivas porciones central y periférica.
El SNC. se compone de todas las neuronas que conducen
estímulos desde los núcleos centrales hasta los músculos es-
queléticos y desde los receptores sensoriales hasta los núcleos
centrales. Los órganos internos, corazón, vasos sanguíneos,
aparato digestivo, aparato genitourinario, y en general todo el
músculo liso y el tejido glandular, se encuentra inervado por
neuronas que no están bajo el control de la voluntad, por lo
que se denomina SN autónomo o vegetativo.
El SN por lo tanto, integra tanto los núcleos centrales,
como las conducciones periféricas o nervios. Estos son: doce
pares de nervios craneales y treinta y un pares de nervios es-
pinales. En el SN autónomo los nervios aislados suelen ser
la excepción, tratandose básicamente de redes nerviosas pe-
riféricas.
ESTRUCTURA Y FUNCIÓN DEL NERVIO
El nervio es un conjunto de fibras en ocasiones rodeadas de El nervio es un con-

mielina y envueltas por tejido conectivo. Este tejido forma tam- junto de fibras rodea-
das o no de mielina y
bién el endoneuro que envuelve cada fibra individualmente, el envueltas en tejido
perineuro que las agrupa en haces y el epineuro o envoltura conectivo.
global que contiene los vasos sanguíneos.

Las neuronas son cé- Las fibras nerviosas son prolongaciones del soma neuro-
lulas excitables, canal, tanto dendríticas como axónicas, rodeadas del neurilema.
paces de modificar su
potencial transmem- La velocidad de conducción de los impulsos nerviosos depen-
brana como respues- de del diámetro de estas fibras y de la presencia de mielina.
ta a diferentes estí- Las fibras gruesas mielinizadas de tipo A son las más rápidas,
mulos.
mientras que las delgadas y amielínicas de tipo C son las más
lentas. Tanto las fibras nerviosas como el soma de las neuro-
nas se encuentran aislados del medio extracelular por la mem-
brana plasmática con sus características especiales de permea-
bilidad.
Mecanismo de transmisión de los

impulsos nerviosos
En la mayoría de las células del organismo existen potencia-

les eléctricos a través de la membrana, pero sólo algunas de
ellas como las neuronas y fibras musculares, denominadas cé-
lulas excitables, son capaces de modificar estos potenciales
como respuesta a diversos estímulos. Las fibras nerviosas utili-
zan estos cambios como mecanismo para enviar señales o im-
pulsos nerviosos, mientras que las fibras musculares desarrollan
una contracción capaz de generar fuerza.
El potencial de reposo
El potencial de repo- Consiste en una diferencia de potencial a través de la mem-

so puede calcularse brana plasmática, debido a la desigual distribución de iones en-
según la ecuación de
Goldman a partir de tre los compartimentos intra y extracelular. Su valor oscila en
las concentraciones torno a 70 mV, negativo el interior respecto al exterior. Las
ionicas intra y extra- causas del potencial de reposo se encuentran en la selectiva
celulares y de sus
permeabilidades rela- permeabilidad de la membrana a los iones:
tivas.
1. La presencia de proteínas en el interior de la célula car-
gadas positivamente dado el carácter anfótero de las
mísmas y el pH celular ligeramente alcalino (7,4), esta-
blece un gradiente de concentración de iones positivos
desde el interior hasta el exterior, responsable de la elec-
tronegatividad interna.
2. La bomba Na/KATPasa como mecanismo de transpor-
te activo, establece una dirección preferente para el
transporte del Na hacia el exterior y K hacia el interior
celular.
3. El movimiento de los iones difusibles de Na, K y Cl,
que se mueven libremente dependiendo de su concen-

ESTRUCTURA Y FUNCIÓN DEL NERVIO 401
tración química y de su carga eléctrica para alcanzar un

estado de equilibrio electroquímico tipo Donnan.
El potencial de reposo es pues un potencial de difusión que
puede calcularse a partir de las concentraciones de los iones in-
tra y extracelulares y de sus permeabilidades relativas según la
ecuación de Goldman. Dicha ecuación está intimamente rela-
cionada con la de Nerst, que permite calcular la relación exis-
tente entre la diferencia de concentración y la diferencia de po-
tencial a través de la membrana para que un ión permanezca
en equilibrio dinámico y por tanto su difusión neta en cualquier
dirección sea cero.
El potencial de difusión para los iones implicados según la
ecuación de Goldman sería:
C(Na ) d PNa C(K ) d PK C(Cl ) d PCl

EM(milivoltios) 61 log
C(Na ) f PNa C(K ) f PK C(Cl ) f PCl

Dependiendo de la carga electrica de cada ión, la permea-

bilidad selectiva de la membrana (P) para cada uno de ellos y
la concentración (C) de los respectivos iones dentro (d) y fuera
( f ) de la célula. El grado de implicación de cada uno de los io-
nes en la determinación del potencial de reposo es proporcio-
nal a la permeabilidad de la membrana para él mismo. Por tan- El movimiento de io-
to, cuando la permeabilidad de la membrana es cero, excepto nes responsable del
potencial de reposo
para uno de ellos, la ecuación de Goldman se iguala a la de es mínimo y la célula
Nernst y el potencial de membrana quedaría establecido por el mantiene la neutrali-
gradiente de concentración para ese ion. dad eléctrica.
Los valores calculados con ésta ecuación se corresponden

básicamente con los observados experimentalmente (registro
de la diferencia de potencial a través de la membrana introdu-
ciendo un electrodo en el interior celular). Pequeñas diferencias
se deben a que la ecuación no tiene en cuenta el efecto conti-
nuo de la bomba de sodio, sin cuya actuación las concentracio-
nes iónicas cambiarían paulatinamente hasta igualarse en am-
bos compartimentos intra y extracelular. Los valores del poten-
cial de reposo no coinciden por lo tanto con los potenciales de
equilibrio de ninguno de los distintos iones aisladamente. Final-
mente es importante recordar que, para generar el potencial de
reposo, el movimiento de iones es mínimo y la célula permane-
ce eléctricamente neutra, de forma que el numero de anio-
nes y cationes en cada compartimento es el mismo. No obstan-
te la membrana queda revestida por cargas negativas en la su-
perficie interna y positivas en la externa, como una placa
dipolar. En esta situación que es la de reposo, se dice que la
membrana está polarizada.

El potencial de acción
Se denomina potencial de acción a los cambios de poten-

cial que se producen en la membrana como respuesta a un
estímulo. Tales cambios obedecen a la modificación de la per-
meabilidad a los iones que tiene lugar cuando la célula entra
en acción enviando señales.
Los estímulos capa- Los estímulos capaces de generar potenciales de acción
ces de desencadenar pueden ser de distinta naturaleza (mecánicos, químicos o eléc-
potenciales de acción
pueden ser de distin- tricos) pero han de tener la intensidad mínima necesaria, deno-
ta naturaleza: física, minada intensidad umbral para modificar la permeabilidad
química o eléctrica. de reposo de forma activa (Fig. 29.1).
Figura 29.1.– Esquema del potencial de acción.
Cada potencial de acción comienza pues con perdida de la

polaridad inicial y termina con la recuperación del potencial de
reposo. Las fases que se suceden son:

Fase de despolarización. La membrana se vuelve extra- La membrana se vuel-

ordinariamente permeable al sodio por efecto del estímulo. Se ve extraordinariamen-
te permeable al sodio
facilita así el cambio de configuración espacial de proteínas in- por efecto del estímu-
tegrales presentes en las membranas de las células excitables, lo.
que funcionan como canales de paso para sodio. Estos canales
son dependientes de voltaje y por tanto sensibles a las modifi- Los canales de sodio
caciones del potencial de reposo. Cuando la diferencia de po- son dependientes de
voltaje y por tanto
tencial entre el interior y exterior se hace menor, aproximándo- sensibles a los cam-
se a cero, ocurre el cambio abriendose la compuerta. El meca- bios del potencial de
nismo funciona como un circuito de retroalimentación positiva. reposo.
Así, un potencial de acción no se producirá hasta que no se al-
cance el nivel de potencial de reposo que alimenta el feed-back
positivo. Es lo que se denomina umbral de excitabilidad. Supe-
rado el umbral, el sodio entra en la célula a favor de su gra-
diente electroquímico. Esta acumulación de cargas positivas en
la cara interna de la membrana, invierte la polaridad de repo-
so, que alcanza valores de 30 mV.
Fase de repolarización. En milésimas de segundo los ca-

nales de sodio se cierran por efecto del mismo cambio eléctri-
co. Comienza así la fase de repolarización. Los canales de so-
dio no volverán a abrirse hasta que la membrana alcance su
polaridad de reposo. Los canales de potasio se abren coinci-
diendo en el tiempo con el cierre de los anteriores, ya que son
sensibles a los cambios de voltaje que se están produciendo, lo
que facilita la salida del ion, ahora también a favor de su gra-
diente electroquímico. De esta forma se acelera la repolariza-
ción. Los canales de potasio también se cierran espontánea-
mente.
Otros iones como el calcio intervienen también en el desa-
rrollo del potencial de acción. El calcio es un ion extracelular
para el que existen en casi todas las células una bomba de cal-
cio que lo expulsa hacia el exterior. También existen canales de
paso dependientes de voltaje que se activan lentamente, algu-
nos de los cuales pueden ser compartidos por el sodio.
La concentración de iones intra y extracelulares en general
tiene importancia en el desarrollo de los potenciales de acción
y en la excitabilidad de las membranas al influir de forma im-
portante en los mecanismos de permeabilidad y en el nivel de
voltaje al que se activan los canales.
Después de un potencial de acción y durante un periodo de Después de un poten-
tiempo denominado periodo refractario, no se puede produ- cial de acción la cé-
lula permanece du-
cir un nuevo potencial de acción. Este efecto se debe al tiempo rante un tiempo en
necesario para que las proteínas canales del sodio recuperen su periodo refractario.
conformación inicial y los valores del potencial de reposo al-
cancen o estén muy próximos a los valores iniciales.

Propagación del potencial de acción
El cambio de permeabilidad para el sodio que inicia el po-

tencial de acción en un punto cualquiera de la membrana, es
responsable de su propagación a los puntos adyacentes, debi-
do al flujo local de iones positivos que al entrar en la célula au-
mentan el voltaje por encima del umbral de excitabilidad y
consiguen la apertura de los canales adyacentes. El proceso
continúa de forma explosiva pues las zonas recién despolariza-
das producen a su vez flujos locales de iones con efectos simila-
res. La propagación no puede retroceder a los puntos anterio-
res ya que se encuentran en periodo refractario. Esta forma de
propagación a lo largo de toda la fibra nerviosa recibe el nom-
bre de impulso nervioso y se dice que sigue la ley del todo o
nada, siempre que la membrana esté integra y las condiciones
sean las adecuadas (Fig. 29.2).
Figura 29.2.– Propagación de los potenciales de acción en una fibra nerviosa amielínica.
Los impulsos nervio- A pesar de que no existe una dirección única de propaga-
sos permiten la co- ción, los impulsos nerviosos permiten la comunicación entre
municación entre
neuronas y suelen te- neuronas y suelen tener como destino final la sinapsis.
ner como destino fi- Se trata de una estructura funcional que permite el paso de
nal la sinapsis. información de una neurona a otra o a un grupo de neuronas
conectadas con la primera. Existen distintos tipos de sinapsis,
pero desde una perspectíva bioquímica es la sinapsis química

la que utiliza neurotransmisores como mensajeros para trans-

mitir la información.
SINAPSIS Y NEUROTRANSMISORES
En la sinapsis química se distinguen tres elementos: En la sinapsis química

se distinguen tres ele-
1) Terminal presináptica, habitualmente es una termi- mentos:
1. Terminal presinápti-
nal axónica y contiene las vesículas del neurotransmi- ca.
sor para su liberación inmediata por exocitosis. El aco- 2. Neurotransmisor.
plamiento excitación-secreción, implica a los iones de 3. Terminal postsináp-
tica.
calcio.
2) Neurotransmisor (NT), que es liberado a la hendidura
sináptica tras la llegada de un potencial de acción por el
axón hasta la terminal presináptica. Se han propuesto
dos sistemas efectores para el NT: uno sería la conse-
cuencia de proteínas receptoras que, tras la unión, au-
mentarían la permeabilidad iónica, mientras que el otro
dependería de la actuación de segundos mensajeros,
como ocurre con las hormonas petídicas.
3) Terminal postsináptica, con abundantes canales ióni-
cos y receptores para las moléculas del neurotransmisor.
Suele localizarse en la membrana del soma o de las den-
dritas. Así pues, una neurona recibe miles de contactos
sinápticos, y puede enviar información a su vez a varias
neuronas dependiendo de lo ramificado de su axón (Fig.
29.3). La eliminación del neurotransmisor es importante
para finalizar la acción del mensajero y puede hacerse
de dos formas diferentes, una de ellas consiste en la
inactivación a nivel de la hendidura sináptica mediante
enzimas presentes en la terminal postsináptica. La otra La eliminación del
sería por captación del neurotransmisor desde la termi- neurotransmisor es
importante para fina-
nal presináptica para su reutilización, o por células de la lizar la acción del
glía para su metabolización y excreción posterior. mensajero.
El metabolismo de los neurotransmisores incluye la síntesis,

almacenamiento, liberación, acción e inactivación. Estos proce-
sos requieren energía, lo que justifica su gran demanda por
parte de las neuronas.
Aunque los primeros neurotransmisores estudiados fueron
la acetil-colina y las catecolaminas adrenalina y noradrenalina,
por ser los más extendidos fuera del SNC. Sin embargo la fami-
lia de los neurotransmisores ha ido creciendo a expensas de La síntesis de cateco-
distintos tipos de sustancias que participan en la neurotransmi- laminas tiene lugar a
partir del aminoácido
sión a nivel central, tales como aminoácidos y derivados, pépti- tirosina.
dos, otras catecolaminas, etc., que pasamos a considerar.

Figura 29.3.– Esquema de una sinápsis química colinérgica.
1. Acetil-colina (Ach). Se sintetiza a partir de acetil CoA

y colina bajo la acción de la colinacetiltransferasa. El
acetil CoA procede del ácido pirúvico y ha de ser trans-
portado desde su origen mitocondrial hasta el citoplas-
ma. La colina procede de la dieta o es sintetizada a par-
tir de la serina, aminoácido no esencial. También puede
captarse por la terminal presináptica después de la
hidrólisis que realiza la acetilcolinesterasa en la membra-
na postsináptica (Fig. 29.4).
(CH3)3NCH2CH2OH CH3CO · SCoA o

o (CH3)3NCH2CH2OCO · CH3 CoASH3
Figura 29.4.– Síntesis de acetil-colina.
Las neuronas dopa- 2. Catecolaminas. Derivan del hidroxifenol o catecol con

minérgicas almace-
nan DA mientras que
una cadena lateral que contiene un grupo amino. La sín-
las noradrenérgicas y tesis se produce a partir del aminoácido tirosina por ac-
adrenérgicas transfor- ción de la tirosin-monooxigenasa dependiente de
man la DA por hidro-
xilación de la cadena
NADPH, que rinde L-DOPA, sobre la que actúa una des-
lateral en noradrena- carboxilasa para su transformación en dopamina (DA)
lina. (Fig. 29.5). Esta última enzima necesita vitamina B6 como
cofactor. Las neuronas dopaminérgicas almacenan DA,

Figura 29.5.– Síntesis de catecolaminas.
mientras que las neuronas noardrenérgicas y adrenérgi-

cas transforman la DA en noradrenalina (NA) por hidro-
xilación de la cadena lateral. Esta reacción es catalizada
por la dopamina-beta-monooxigenasa. La NA a su vez es
convertida en adrenalina (A) por metilación del grupo
amino terminal de la NA. La reacción está catalizada por
la NA-metiltransferasa. Estas reacciones tienen lugar tam-
bién en la médula suprarrenal, capaz de liberar adrena-
lina y noradrenalina a la sangre, desde donde pueden
desarrollar sus acciones en calidad de hormonas. La de-
gradación tiene lugar por la acción de enzimas aminooxi-
dasa (MAO), catecol-metiltransferasa y alcohol-deshidro-
genasa. Algunos productos de degradación pueden de-
tectarse en el líquido cefalorraquídeo, sangre y orina, y
pueden determinarse analíticamente como indicadores
del metabolismo de estos neurotransmisores.
3. Otras aminas. Serotonina e histamina. La serotonina La síntesis de seroto-
o 5-hidroxitriptamina se encuentra en muchos tejidos nina se produce a par-
tir del triptófano.
aunque sólo en el cerebro actúa como neurotransmisor
(Fig. 29.6). Su síntesis se produce a partir del triptófa-
no que las neuronas captan de la circulación para su

Figura 29.6.– Síntesis y degradación de la serotonina.
hidroxilación hasta 5-hidroxitriptófano, por una triptó-

fano-monooxigenasa. La posterior descarboxilación
para producir 5-hidroxitriptamina es catalizada por la
5-hidroxitriptófano-descarboxilasa, enzima muy abun-
dante en el citoplasma y similar a la descarboxilasa im-
plicada en la síntesis de catecolaminas, por lo que la
síntesis de serotonina depende de la primera enzima de
la ruta que tiene carácter limitante. La vía principal
para la degradación de serotonina requiere de las enzi-
La serotonina es con- mas aminooxidasa y aldehidodeshidrogenasa. La meti-
vertida en melatonina lación o sulfatación de la amina o sus derivados puede
en la glándula pineal.
inactivar la serotonina y favorecer su eliminación. En la
glandula pineal la serotonina es convertida en una hor-
mona, la melatonina, cuyas acciones se oponen a las
gonadotropinas.
La histamina se obtiene por descarboxilación de la histi-
dina (Fig. 29.7). La enzima implicada puede ser una
Algunos aminoácidos descarboxilasa específica o la misma enzima implicada
como GABA, ác. glu- en la síntesis de catecolaminas y serotonina. Su degra-
támico y glicina ac-
túan como neuro- dación se produce por transformación final en ácido N-
transmisores. metilimidazol-acético. Las enzimas implicadas secuen-
cialmente son histamina-metiltransferasa, amina-oxidasa
y aldehído-deshidrogenasa. La histamina también es un
mediador de la inflamación, localizado fundamental-

Figura 29.7.– Metabolismo de la histamina.
mente en los mastocitos, presentes en la mayoría de los

tejidos. A nivel gástrico participa en la secreción de
clorhídrico mediante un mecanismo paracrino.
4. Aminoácidos. El 4-aminobutirato (GABA), ácido
glutámico y glicina son aminoácidos que actúan como
neurotransmisores. Otros aminoácidos quizás también lo
sean, aunque no está totalmente elucidado. El ácido
gamma aminobutírico está ampliamente distribuido en
el cerebro de los mamíferos y su síntesis se produce por
descarboxilación del glutamato. La glutamato-descarbo-
xilasa es casi exclusiva de las neuronas gabérbicas. El
glutamato necesario para la síntesis del neurotransmisor
se obtiene a partir del 2-cetoglutarato por transamina-
ción. Éste último procede del ciclo de Krebs. La acción
del GABA sobre la terminal postsináptica es de caracter
inhibidor. Sin embargo, la acción del glutamato como
neurotransmisor es de caracter excitador, al igual que el
ácido aspartico, cuyas moléculas son muy parecidas, lo
que dificulta su diferenciación funcional como neuro-
transmisores. Su acción finaliza habitualmente por cap-
tación desde la terminal presináptica o células de la glía.
La glicina es un aminoácido implicado en la transmi-
sión de numerosas vías. Se sintetiza fundamentalmente
a partir de la serina mediante la enzima serina hidroxi-

metiltransferasa. La reacción es reversible y el exceso de

glicina revierte el proceso hacia la formación de serina.
Se trata de un neurotransmisor de caracter inhibidor,
que despues de ejercer sus acción sobre la terminal post-
sináptica suele ser captado para su reutilización por la
neurona presináptica.
5. ATP. El ATP también puede ser almacenado en la termi-
nal presinática y liberarse tras la llegada a ella de poten-
ciales de acción, ejerciendo como neurotransmisor. Su
inactivación se realiza por hidrólisis en la hendidura
sináptica.
La síntesis de neu- 6. Neuropéptidos. A partir de la década de los 70 nume-
ropéptidos se produ- rosos péptidos se incorporan a la clasificación de los neu-
ce en forma de pre-
cursores inactivos. rotransmisores. La mayoría de ellos se conocían en rela-
ción a otro tipo de funciones fisiológicas, entre ellas la ac-
tuación paracrína o endocrína de algunos péptidos
intestinales en el control de la función digestíva. Parece
ser que su síntesis se produce en forma de precursores
inactivos como ocurre con algúnas hormonas, y su libe-
ración separa el péptido activo de los aminoácidos de co-
nexión. Una vez cumplido el mensaje se produce la hi-
drolisis del neuropéptido por peptidasas específicas.
Sus acciones se rela- Algunos neuropéptidos de origen hipotalámico estimu-
cionan con procesos lan la liberación de hormonas adenohipofisarias, mien-
de modulación local
más que con la neutras que otros se almacenan en la neurohipófisis y se li-
rotransmisión. beran desde allí a la sangre para actuar ellos mismos
como hormonas. Otros péptidos cerebrales participan en
complejas funciones relacionadas con el aprendizaje, la
memoria o el control de la homeostasia. En general sus
acciones se relacionan con procesos de modulación lo-
cal más que con la neurotransmisión, ya que se liberan
por neuronas que disponen además de otro neurotrans-
misor. Se encuentran implicados en determinadas enfer-
medades neurológicas, por lo que existe gran interés en
dilucidar todos los aspectos relativos a su metabolismo y
localización.
RESUMEN
El nervio es un conjunto de fibras, prolongaciones de

las neuronas, cuyas membranas se caracterizan por pre-
sentar una diferencia de potencial a su través que se deno-
mina potencial de reposo. El potencial de reposo se produ-
ce por una distribución desigual de los iones entre el inte-

rior y el exterior. Esta distribución puede variar a conse-

cuencia de modificaciones temporales en la permeabilidad
de la membrana, cuya consecuencia es la excitación.
Cuando el potencial de reposo alcanza un nivel crítico de
excitación como consecuencia de un estímulo umbral, se
produce un potencial de acción. Los potenciales de acción
se transmiten a lo largo de la membrana de la fibra nervio-
sa y su destino final es la sinapsis. Se trata de una estructu-
ra de conexión que permite el paso de información de una
neurona a otra. Un elemento clave en este tipo de comu-
nicación es el neurotransmisor. Distintos tipos de neuro-
transmisores actúan como mensajeros en la sinápsis, des-
de la acetil-colina y catecolaminas, hasta neuropéptidos,
pasando por algunos aminoácidos. El conocimiento de su
metabolismo incluye la síntesis, almacenamiento, libera-
ción, acción e inactivación, así como su distribución en el
sistema nervioso central (SNC) y está contribuyendo a es-
clarecer la función de los distintos grupos neuronales así
como una parte importante de la neurofisiología y neuro-
patología.
Enfermedad de Parkinson
Es debida a la lesión más frecuente de los ganglios basales

del encéfalo, concretamente del sistema nigro-estriatal. Los sín-
tomas consisten en rigidez, temblor de reposo y bradicinesia.
La dopamina es el principal neurotransmisor en estas estructu-
ras cerebrales, en las cuales se ha comprobado para los enfer-
mos de Parkinson, una disminución en las concentraciones
neuronales de dopamina, de las enzimas implicadas en su sín-
tesis y degradación y de los metabolitos intermediarios. La ad-
ministración de L-DOPA, precursor de la dopamina que puede
atravesar la barrera hematoencefálica, mejora los síntomas,
aunque es descarboxilada parcialmente en los tejidos periféri-
cos. Para evitar este efecto se utiliza la metildopahidrazina que
inhibe la descarboxilasa y no penetra en SNC.
Epilepsia
Es una enfermedad convulsivante crónica con diferentes ti-

pos y estadíos, según se produzca o no pérdida de conciencia y

convulsiones tónico-clónicas. Una de sus causas es la disminu-

ción en la actividad o síntesis del GABA, neurotransmisor de
caracter inhibidor cerebral. El tratamiento requiere el empleo
de anticonvulsionantes que actuen a nivel sináptico evitando
su inactivación inmediata y prolongando su acción.
Depresión
Es una de las alteraciones afectivas más frecuentes, cuya

sintomatología principal es la tristeza, acompañada de una in-
capacidad para interesarse por el entorno y una disminución
de la vitalidad con inactividad y cansancio general. En ocasio-
nes se trata de un trastorno adaptativo reaccional ante un
acontecimiento demostrable. Otras veces se puede constatar su
base genética. Puede demostrarse también un defecto en la
concentración de catecolaminas o serotonina a nivel cerebral.
Los inhibidores de la aminooxidasa (IMAO) se utilizan para au-
mentar la acción del neurotransmisor, sin embargo tienen efec-
tos secundarios importantes a nivel periférico. Se puede au-
mentar el tiempo de acción inhibiendo la captación por la ter-
minal presináptica, siendo éste el mecanismo de acción de los
antidepresivos tricíclicos.

Bioquímica
TEMA 30 de la visión
Fotorreceptores. El 11-cis retinal: estructura y fun-

ción.
En la especie humana los receptores visuales se localizan en

el ojo, el estímulo adecuado para las células fotorreceptoras es
la luz, que puede definirse como la radiación electromagnética
cuyas longitudes de onda están comprendidas entre 770 (rojo)
y 380 (violeta). Los colores típicos del espectro se encuentran
dentro de estos límites. El ojo se localiza en la cuenca orbitaria,
en él podemos distinguir el globo ocular y los órganos anejos.
El globo ocular es una esfera de aproximadamente 2 cm de
diametro, cuyas paredes están constituidas por tres membra-
nas: esclerótica, coroides y retina, ésta última es la estructura
fotosensible del ojo y va a ser estimulada por la banda visible
del espectro de energía radiante. Las células fotorreceptoras
actúan como transductores de la energía luminosa, a partir de
la cual van a originar una señal nerviosa que contiene un men-
saje visual al alcanzar los centros nerviosos. En el interior del
globo ocular se encuentra el humor acuoso, el cristalino y el
cuerpo vítreo. Los órganos anejos protegen y permiten el movi-
miento del ojo. Estos son: las cejas, parpados, pestañas, apara-
to lacrimal y los músculos del ojo.
FOTORRECEPTORES
El proceso visual implica la participación de fotorrecepto- Las células sensibles

res o células sensibles al estímulo luminoso. Existen dos tipos al estímulo luminoso
son los conos y los
de fotorreceptores, conos y bastones, ambos se localizan en bastones, localizados
la retina. en la retina.
Los conos se localizan casi exclusivamente en una región
de la retina denominada fóvea. Están especializados en la esti-
mulación con luz abundante, proporcionando la visión en co-

Los conos son res- lor. Estos fotorreceptores se sitúan muy próximos, en unidades
ponsables de la vi- sensitivas pequeñas que reciben el nombre de campos de re-
sión en color.
cepción. Su estimulación produce gran agudeza visual, por lo
que poseen una gran capacidad discriminativa.
Los bastones propor- Los bastones se sitúan en el resto de la retina, muy separa-
cionan la visión en dos entre sí, dando lugar a campos de recepción amplios. Se
blanco y negro.
estimulan con poca luz (visión con luz tenue), proporcionando
visión en blanco y negro. No distinguen los colores, siendo la
agudeza visual que proporcionan muy pequeña.
Figura 30.1.– Sección del ojo humano.
Las ondas luminosas Las ondas luminosas impactan con estos receptores produ-
al impactar sobre los ciendo cambios químicos que generan impulsos nerviosos que
fotorreceptores indu-
cen en ellos cambios serán transmitidos hasta el cerebro.
químicos que generan Estos dos tipos de células requieren vitamina A para la for-
impulsos nerviosos. mación de los pigmentos visuales.
Los bastones pierden su pigmento fotosensible, la rodopsi-
na o púrpura visual, cuando son iluminados, por lo que, al pa-
sar de una zona bien iluminada hacia otra en penumbra, no
podemos ver hasta pasado un cierto tiempo, el cual es necesa-
rio para sintetizar de nuevo rodopsina.
El pigmento visual de La rodopsina es un compuesto formado por retinal (aldehí-
los bastones es la ro- do de la vitamina A unido a una proteína, la opsina). El retinal
dopsina, formada por
retinal (forma 11-cis) por acción de la luz se transforma en un isómero que se des-
y la proteína opsina. prende del fotorreceptor pasando a la sangre, y en el hígado se
resintetiza de nuevo hasta retinal.

BIOQUÍMICA DE LA VISIÓN 415
Figura 30.2.– Representación esquemática de los fotorreceptores.
En los conos existen tres pigmentos, uno sensible al rojo, En los conos existen
otro al verde y otro al azul. La combinación de estos produce tres tipos de pigmen-
tos conforme a su sen-
toda la gama de colores que podemos ver. Los tres juntos sibilidad al color, rojo,
producen el blanco. La isomerización del pigmento por efecto verde, o azul.
de la luz pone en marcha los cambios de potencial de los re-
ceptores.
El E-caroteno es un pigmento de color naranja que se en-
cuentra en zanahorias y verduras de color verde oscuro o ama-
rillo. Estos alimentos son buenas fuentes del pigmento. El E-ca-
roteno es precursor de la vitamina A, siendo escindido por en-
zimas de la mucosa intestinal que oxidan el doble enlace
situado en el centro de la molécula, dando de esta forma dos
moléculas de retinal o forma aldehídica, cada una de ellas es a
continuación reducida a la forma alcohólica, el todo-trans-reti-
nol o vitamina A que también se puede encontrar en forma de
isomero 11-cis.
El hígado, yema de huevo y leche entera son buenas fuen-
tes de retinol preformado. La conversión de los carotenoides en
retinol raramente alcanza el cien por cien, por lo que la poten-
cia en vitamina A de los distintos alimentos se expresa en ter-

Figura 30.3.– Estructura del retinol.
minos de equivalentes de retinol (1 U.I. de vitamina A 1 Pg

de retinol o 6 Pg de E-caroteno y 12 Pg de otros carotenoides).
El retinol es absorbido por la mucosa intestinal donde es es-
terificado con un ácido graso, normalmente con el ácido palmí-
tico que es el más abundante en el organismo humano, dando
palmitato de retinol. Tras su esterificación el retinol es transpor-
tado por el torrente circulatorio hasta el hepatocito, donde es
almacenado asociado a una proteína denominada proteína fi-
jadora de retinol. La proteína fijadora libera el retinol cuando
alcanza la retina, donde el todo-trans-retinol es oxidado dando
de nuevo todo-trans-retinal que posteriormente se transformará
en el isomero 11-cis-retinal debido a la acción catalítica de la
enzima retinal-isomerasa.
Los pigmentos visuales de las células fotorreceptoras trans-
forman una señal luminosa en impulso nervioso. El mecanismo

es el mismo para ambos tipos de fotorreceptores, si bien el pro-

ceso se ha estudiado fundamentalmente en los bastones, así
cuando la luz incide sobre el bastón, la rodopsina sufre una se-
rie de transformaciones químicas rápidas que conducen a la
formación de rodopsina fotoexcitada que proporciona el nexo
de unión entre esta serie de reacciones y la respuesta eléctrica.
El producto final de la transformación ocasionada por la luz
consiste en la formación de un complejo con el 11-cis-retinal La luz transforma el
produciendo el pigmento visual rodopsina. Cuando la rodopsi- 11-Cis retinal en su
isomero el todo-trans-
na absorbe luz, el 11-cis-retinal se isomeriza en todo-trans-reti- retinal.
nal-opsina. En situaciones de luz y oscuridad la forma todo-
Figura 30.4.– Ciclo de la rodopsina.

trans del retinal se isomeriza a 11-cis y la rodopsina es reconsti-

tuida. El retinol es devuelto a la circulación y se almacena en el
hígado. Cuando es necesario, el retinol entra de nuevo en la
circulación periférica y es captado por la retina para ser conver-
tido en todo-trans retinal e isomerizado a 11-cis retinal. El ciclo
se completa cuando éste último se combina con la opsina para
producir de nuevo rodopsina.
La combinación de Todas estas reacciones se producen en la zona de membra-
los tres colores bási- nas del segmento externo de los bastones, la cual presenta gran
cos produce toda la
gama de los mismos. número de invaginaciones. El acoplamiento entre los cambios
moleculares que provoca la luz y la respuesta eléctrica se realiza
mediante la activación de la transducina, una proteína G es-
pecífica. Esta proteína intercambia GTP por GDP, activando
una fosfodiesterasa. Ésta última a su vez cataliza el paso de
GMPc a 5c-GMP. Cuando los niveles celulares de GMPc están
elevados (como ocurre en la oscuridad) se mantienen abiertos
los canales de sodio de la membrana y la célula esta por lo tan-
to relativamente despolarizada. En estas condiciones se produ-
ce una liberación tónica de neurotransmisor por parte del
bastón. La reducción de los niveles de GMPc debido a la inci-
dencia de la luz determina el cierre de los canales de sodio y la
membrana se hiperpolariza, disminuyendo de esta forma la li-
beración de neurotransmisor. Este cambio en la liberación del
neurotransmisor constituye la señal que posteriormente es pro-
cesada por las células nerviosas de la retina. La bomba de so-
dio mantiene baja la concentración de este ion en el interior ce-
lular. Durante el proceso de transducción se produce una am-
plificación de la respuesta a la luz, cada molécula activa de
rodopsina activará unas 500 moléculas de transducina, cada
una de las cuales a su vez producirá la hidrólisis de varios miles
de moléculas de GMPc.
La isomerización de Los procesos en los conos son similares, aunque existen
los pigmentos de los tres tipos distintos de rodopsinas (con diferentes espectros) y
conos por efectos de
la luz, provoca cam- de transducina. Los diferentes tipos de pigmentos contienen
bios en el potencial la misma fracción de 11-cis retinal, diferenciándose en sus
de membrana de los opsinas. La sensibilidad de los conos es inferior a la de los
receptores generando
así los impulsos ner- bastones.
viosos. En presencia de luz, la mayor parte de la rodopsina se en-
cuentra no conjugada y, por lo tanto, la sensibilidad a la luz es
baja. Durante el proceso de adaptación a la oscuridad, que
dura unos cuarenta minutos, los niveles de rodopsina se incre-
mentan, aumentando así la sensibilidad a la luz hasta unas
25.000 veces. Los conos se adaptan más rápidamente que los
bastones, pero su sensibilidad es mucho menor. El proceso in-
verso, adaptación a la luz, requiere aproximadamente cinco mi-
nutos. Debido a que durante el proceso fotoquímico se produ-

ce cierta perdida de vitamina A, es necesario un aporte conti-

nuo de la misma a través de la dieta. Una deficiencia de vita-
mina A origina una disminución en sus niveles sanguíneos que
tiene como resultado un aumento del tiempo necesario para la
formación de nueva rodopsina tras la exposición a la luz. La vi-
tamina A se almacena en el hígado en cantidades relativamen-
te altas, por ello no es frecuente que se produzcan deficiencias
lo suficientemente graves como para causar problemas clínicos,
a menos que la carencia se prolongue de manera crónica du-
rante periodos de tiempo relativamente largos (meses).
RESUMEN
Existen dos tipos de fotorreceptores, conos y bastones.

Las ondas luminosas impactan con estos receptores pro-
duciendo cambios químicos que dan lugar a impulsos ner-
viosos que se transmiten al cerebro. Estos dos tipos de cé-
lulas requieren vitamina A para la formación de los dife-
rentes tipos de fotopigmentos. El E-caroteno produce dos
moléculas de vitamina A (retinol). La oxidación del retinol
en el carbono número 15 produce la forma aldehídica o
retinal. La rodopsina, pigmento visual, está formada por
retinal y la proteína opsina. En la oscuridad, el retinal de la
rodopsina se encuentra en la forma 11-cis. Cuando son
excitadas por la luz visible las moléculas de rodopsina, el
11-cis retinal experimenta una serie de transformaciones
que rinden todo-trans-retinal, el cual fuerza un cambio en
la forma de la molécula de rodopsina. Esta transformación
conduce a una señal eléctrica hacia el cerebro, que es la
base de la transducción visual.
Xeroftalmía o ceguera nocturna
La vitamina A interviene en el proceso de la visión y su de-

ficiencia provoca además de otros trastornos, ceguera noctur-
na. Dado que esta vitamina se almacena en el hígado, la caren-
cia de la misma sólo aparece después de periodos prolongados
de ingestión inadecuada. La ceguera nocturna es un síntoma
precoz de carencia leve de vitamina A que consiste en que los
receptores lumínicos de los bastones no responden normal-
mente al estímulo luminoso. La deficiencia grave de vitamina A

da lugar a una progresiva queratinización de la cornea, conoci-

da como xeroftalmía en sus estados avanzados. En las etapas
finales suele aparecer infección seguida de hemorragia ocular y
perdida permanente de visión. Los síntomas graves de carencia
de vitamina A generalmente sólo se ven en países subdesarro-
llados.
Por otra parte el exceso de almacenamiento de la vitamina
o hipervitaminosis es un cuadro tóxico. La ingesta alimentaria
de vitamina A no provoca toxicidad, por lo que la mayoría de
los casos de hipervitaminosis ocurren por dosis farmacológicas
masivas utilizadas en el tratamiento del acné o en la prevención
de resfriados, si bien esta práctica, común en tiempos pasados,
es relativamente rara en la actualidad.
Discromatopsias
Algunas enfermedades genéticas se caracterizan por la au-

sencia de un tipo o más de determinados conos, en estos casos
se encuentra alterada la síntesis de fotopigmento. La discroma-
topsia estará más o menos acentuada en función del número
de pigmentos afectados y de su grado de afectación. En cada
caso, existirá ceguera para el color codificado por el tipo de
cono afectado. Este tipo de trastornos de la visión se encuentra
en aproximadamente el 10% de la población, del cual el 90%
corresponde a los varones, ya que se trata de una enfermedad
genética ligada al cromosoma X. La alteración de los fotopig-
mentos puede llegar a hacerlos completamente insensibles a la
luz, en este caso se habla de ceguera total para los colores. Esta
forma de la enfermedad es muy rara y afecta solo al 0,01% de
la población.

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Introducción al metabolismo. Reacciones catabóli-

En la bioquímica estructural hemos examinado las propie-

El metabolismo se puede definir como el conjunto de reac- El metabolismo es el

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Estas funciones no se realizan de forma aislada o inde-

El metabolismo tiene lugar a través de secuencias de reac-

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El metabolismo se puede organizar en etapas: tres para el

El anabolismo también transcurre en tres etapas. Co-

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dos grasos o monosacáridos. En la etapa III del anabolismo

1º. Cada etapa en el catabolismo o en el anabolismo im-

EL FLUJO DE ENERGÍA EN LAS CÉLULAS

Cuando una molécula como la glucosa es degradada a CO2

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LA LOCALIZACIÓN DE LAS RUTAS

Figura. 1.2.– Localización de las enzimas de algunas rutas metabólicas

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REGULACIÓN DEL METABOLISMO

Como se ha indicado anteriormente, la célula realiza todos

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El metabolismo es el conjunto de reacciones cataliza-

Las células animales no pueden llevar a cabo un metabolis-

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Tabla 1.1.– Algunos ensayos enzimáticos que se utilizan en

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La ruta glucolítica. Las rutas de los átomos de car-

La glucólisis (hidrólisis de azúcar) es el proceso por el que

Los carbohidratos de la dieta son digeridos y absorbidos

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En el hígado y en el tejido muscular la glucosa se degrada

Fosforilación de la glucosa. Es la primera reacción de la

La hexoquinasa cataliza también la fosforilación de otras

* A partir de ahora y mientras no se especifique lo contrario todos los mono-

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glucógeno. En el hígado hay una segunda enzima que fosforila

Isomerización de la glucosa 6-fosfato. La conversión

La reacción transcurre rápidamente en ambas direcciones

Fosforilación de fructosa 6-P. Es la segunda reacción de

Figura 2.1.– La primera etapa de la glucólisis. En ella se utiliza ATP

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La fosforilación de la fructosa 6-P es una reacción esen-

Escisión de fructosa 1,6-bisfosfato. Esta reacción es

Interconversión de las triosas fosfato. Puesto que

La segunda etapa de la glucólisis. La segunda etapa

1,3-bisfosfoglicerato H2O o 3-fosfoglicerato Pi

ADP Pi o ATP H2O

'G c 6,0 kcal/mol

glucosa ATP o glucosa 6-P ADP

fructosa 6-P ATP o fructosa 1,6-bisfosfato ADP

2 1,3 bisfosfoglicerato 2 ADP o

2 fosfoenolpiruvato 2 ADP o 2 piruvato 2 ATP

2-gliceraldehído 3-fosfato 2 NAD 2 Pi o

piruvato NADH H o lactato NAD

glucosa 2 ATP 2 NAD 2 Pi 4 ADP

glucosa 2 Pi 2 ADP o 2 lactato 2 ATP 2H2O

piruvato NAD CoA-SH o acetil-CoA