UNIVERSIDAD DE LA SIERRA

División de Ciencias Biológicas

Licenciatura en Biología.
Asignatura:
BIOTECNOLOGIA.
Practica No. 1:
Técnicas de extracción de ADN
Elaborado por:
Cañez Ochoa Jazmín Zamara
Domínguez Juárez María de los Ángeles
Martínez Gómez Aldo César
Profesor de asignatura:
Guilebaldo Lavandera Barreras.
Grupo: BIO 3-1
Moctezuma, Sonora; a 13 de septiembre de 2022
Introducción:
Los Ácidos Nucleicos son las biomoléculas portadoras de la información genética.
Son biopolímeros, de elevado peso molecular, formados por otras subunidades
estructurales o monómeros, denominados Nucleótidos. Desde el punto de vista
químico, los ácidos nucleicos son macromoléculas formadas por polímeros
lineales de nucleótidos, unidos por enlaces éster de fosfato, sin periodicidad
aparente. De acuerdo a la composición química, los ácidos nucleicos se clasifican
en Ácidos Desoxirribonucleicos (ADN) que se encuentran residiendo en el núcleo
celular y algunos organelos, y en Ácidos Ribonucleicos (ARN) que actúan en el
citoplasma.
Extracción de ADN:
Es un método por el cual se obtiene el ADN a partir de las células. La extracción
consiste en separar el ADN de otros componentes celulares (como la membrana o
las proteínas) con el fin de poder estudiarlo o manipularlo. En la investigación
biomédica el ADN se utiliza para analizar a pacientes con diferentes
padecimientos como enfermedades genéticas, cáncer, infecciones, etc.
Objetivos:
 Poner de manifiesto la existencia de ADN en las células que
componen los organismos vegetales.
 Conocer los métodos más comunes de extracción, así como la
función de los compuestos utilizados.
 Cuantificar la cantidad de ADN extraído como porcentaje
 Evidenciar la presencia de ADN por irradiación

TECNICA 1: EXTRACCIÓN DE ADN DE SEMILLA DE CHÍCHARO:

MATERIALES:
Licuadora
Vaso de precipitados
Varilla de vidrio recta
Varilla de vidrio con extremo doblado en forma de gancho
Tubo falcon 50 ml
Pipeta
Solución de Cloruro de Sodio al 10 %
Alcohol etílico frío (al 70%)
semilla de chícharo (10 g)
Metodología:
 La semilla se llevó ya pulverizada a la práctica
 Se agregó en un vaso de precipitado y se le agregó 15ml de cloruro de
sodio.
 Se revolvió suavemente con una varilla de vidrio durante 15 minutos.
 Posteriormente se dejó sedimentar el material sólido y se pasó 5 ml del
sobrenadante a un tubo falcon.
 Agregamos 5 ml de alcohol frío con el tubo inclinado a unos 45° por las
paredes del tubo, sin que el líquido inferior se removiera. Entre medio de la
solución salina y el alcohol se observó un material blanquecino.
 Se extrajo con un palillo de brocheta con la punta un poco aplanada.
 El material se cambió a un tubo ependorf y se centrifugó 5 min a 6000 rpm
para obtener el pellet.
 Se eliminó el alcohol sobrante y se pesó el tubo con el pellet para ver el
cambio de peso en el tubo.
  En función de la cantidad de semilla utilizada, exprese el porcentaje de
Ácidos nucleicos extraídos.

TECNICA 2: EXTRACCIÓN DE ADN DE GERMEN DE TRIGO

MATERIALES
Detergente líquido (Dawn, Arm &Hammer, Tide) 10 ml
Alcohol isopropílico frio
Agua destilada
Tubo de ensayo de 50 ml
Probeta de 25 ml
Aguja de disección
Pipeta Pasteur con goma
Viales o tubos pequeños con rosca
Papel filtro
Germen crudo de trigo
Metodología:
 Se colocó un gramo de germen de trigo curdo en un vaso de precipitado.
 Se añadieron 20 ml de agua a 50-60 grados Celsius y se mezcló durante 3
minutos.
 Se añadió 1ml de detergente líquido y se mezcló por 5 minutos suavemente
para no generar espuma.
 La mezcla se añadió al tubo falcon.
 Con el tubo falcon ladeado se vertió lenta y suavemente 14ml de alcohol
por la pared del tubo de forma que se formó una capa sobre la solución de
agua, germen de trigo y detergente, el ADN se alcanzó a precipitar en la
interfase del agua y el alcohol.
 Se dejó reposar para que el ADN firme, pegajoso y de color blanco se
formara en la interfase del agua y el alcohol.
 Se usó un palo de brocheta para recolectar el ADN y añadirlo a un tubo
ependorf y se centrifugó a 6000 rpm durante 5 minutos.

 Finalmente, los dos tubos se irradiaron en luz UV para ver si logramos

agarrar la muestra de ADN.