Preguntan los expositores:

1. ¿Cuál es el tratamiento estándar para la enfermedad de células falciformes?

El trasplante alogénico de células madre hematopoyéticas. (Santi 😊)
2. ¿Cómo se produce la hemoglobina falciforme?
La hemoglobina falciforme es una variante de la hemoglobina adulta normal y se va a
producir cuando el gen de la globina βeta contiene una única mutación sin sentido E-
6V. (Mafer)
3. ¿Cuál es el porcentaje de Hb fetal en sangre total que aporta beneficio en la
enfermedad de células falciformes?
20 % de Hb fetal en sangre, se asocia con una mejora de los síntomas de la
enfermedad de células falciformes. (Liss Coloma)
4. ¿La expresión de BCL11A, no afectó al linaje de celulas B? (Mateo)
Dado que la expresión de BCL11A es necesaria para el desarrollo normal de las células
B, las inmunoglobulinas y los niveles de CD19+ y CD3+ se evaluaron al inicio y a los
6, 12 y 24 meses después de la infusión. Los resultados indican un desarrollo y una
función normales del compartimento de células B y sugieren una ausencia de toxicidad
consistente con la supresión de BCL11A específica de eritroides.
5. ¿Qué es un transplante haploidéntico? (Dani)
En nuestro paciente El trasplante haploidéntico ampliaría el grupo de donantes
disponible, pero requiere el agotamiento de las células T del donante, ya sea ex vivo o
in vivo. Se han informado éxitos, pero persisten los desafíos del fracaso del injerto y la
reconstitución inmunitaria retrasada.
Los trasplantes haploidénticos, es decir donde el donador es compatible con el receptor
sólo en un haplotipo HLA, constituyen una alternativa para los pacientes que carecen de
un donante emparentado o no emparentado con una compatibilidad aceptable. Las
ventajas son la disponibilidad inmediata del donante, no hay restricción étnica, los
donantes pueden ser múltiples y pueden seleccionarse por sexo, edad y seropositividad.
Hay acceso opcional para extracción de células hematopoyéticas, si se desea
manipulación inmunológica posterior al trasplante. Los problemas principales asociados
al procedimiento son la enfermedad del injerto en contra del hospedero (EICH) de
grado grave, el rechazo del injerto, la reconstitución inmune retrasada que predispone a
infecciones y la generación escasa del efecto injerto contra leucemia.
6. ¿Qué es el quimerino mixto? (Andre)
En nuestro estudio los pacientes con quimerismo mixto no presentan otros síntomas
relacionados con la enfermedad de células falciformes siempre que el quimerismo
exceda aproximadamente el 20 %. 4,20-22 Esto se debe a que los pacientes con incluso
una proporción relativamente pequeña de células injertadas del donante son capaces de
sostener porcentajes mucho más altos de eritrocitos derivados del donante debido a la
prolongación de la vida útil de los glóbulos rojos en la sangre periférica.
7. ¿Se asocia con alguna alteración de vectores lentivirales? (Jordi)
El artículo nos indica que la generación actual de vectores lentivirales no se ha
asociado hasta ahora con la mutagénesis de inserción, con 12 años de seguimiento.
Incluso señala que los ensayos anteriores de terapia génica, los retrovirus y que
contienen potenciadores causan leucemia en algunos pacientes por la mutagénesis
insertal.
8. En cuanto a su descubrimiento ¿Con qué está involucrado el BCL11A? (Dani M.)
El BCL11A se descubrió que está involucrado en la regulación del desarrollo de la
globina, esto fue por medio de estudios de asociación basados en todo el genoma.
 9. ¿Cuál es la ventaja de alterar el equilibrio de la producción de globina intracelular?
(Daniel Alvarado)
En realidad, esto es ventajoso porque incluso una pequeña disminución de HbS resulta
en un gran aumento en el tiempo hasta la formación de polímeros, el principal
determinante del proceso falciforme en los glóbulos rojos.
10. ¿Con que se determinó el número de copias del vector? Daniel Alvarado
Con el uso de un ensayo de reacción en cadena de la polimerasa cuantitativa (qPCR)
11. ¿Con que se evaluó la Hb, HbF y el porcentaje de células F? Jéssica Chisaguano
Hb con hemogramas completos de rutina, HbF cromatografía líquida de alta resolución
y el porcentaje de células F por citometría de flujo.

Pregunta el curso:

1. ¿Existe alguna otra patología o proceso donde también se emplee la terapia génica
lentiviral? (Nico)
Sí, por ejemplo, hay ensayos clínicos de terapia génica lentiviral específicamente
basada en la adición de un gen de globina βeta modificado que han demostrado
beneficios en la talasemia β dependiente de transfusiones.
2. ¿Qué es la aféresis? (Liss Cortéz)
La aféresis es la técnica mediante la cual se separan los componentes de la sangre, y se
selecciona los necesarios para su aplicación en un procedimiento médico, mientras el
resto de componentes son devueltos al torrente sanguíneo.
3. ¿Qué cantidad sería necesaria a nivel individual de glóbulos rojos, para prevenir la
polimerización de Hb falciforme? (Mishu)
Aunque no existen muchos estudios, es probable que un nivel de 10 picogramos de Hb
F por célula, o aproximadamente un tercio del contenido de hemoglobina celular, sea
suficiente para prevenir la polimerización
4. ¿Cuál fue el principal efecto adverso que sufrió uno de los pacientes luego de la
infusión de terapia génica? (Isra)
El paciente 4 tuvo varios episodios severos de priapismo entre 4 y 8 meses después de
la terapia génica.
5. ¿Cuánto incrementó la hemoflobina fetal? (Dani Marquez)
La hemoglobina fetal aumentó a una nueva línea de base de 9,3 a 11,4 g por decilitro en
los cinco pacientes que no recibieron transfusión y se mantuvo estable con el tiempo y
los niveles de hemoglobina fetal en los pacientes 3, 4, 6, 7 y 8, la HbF por célula F
aumentó de 5,0 a 7,1 pg por célula a un promedio de 12,7 pg por célula.
6. ¿En los resultados clínicos, qué pasó con el paciente 6? (Amanda)
El paciente 6 tenía necrosis avascular de la cadera izquierda antes de la inscripción en el
estudio. Nueve meses después de la terapia génica, en este paciente se habían
desarrollado síntomas consistentes con necrosis avascular de la cadera derecha.
7. ¿Por quién es suprimido BCL11A? (Geo)
Por un shRNA incrustado en una arquitectura de micro ARN que aprovecha la
maquinaria celular endógena para producir un aumento simultáneo de la proteína HbF
y la disminución de la HbS.
8. ¿Qué indican los estudios sobre el quimerismo de menos del 50%? (Giss)
Los estudios indican que en el trasplante alogénico se asociacia con evidencia de
laboratorio la persistencia de hemólisis.
9. ¿Qué demostró las células traducidas por shmiR? (Dani P.)
 Altos niveles de HbF por células F, independientemente de los números de copias
vectorial in vivo.
10. ¿Se hizo algo por el riesgo de desarrollar accidente cerebrovascular posterior? Caro
Guerrero
Debido a un mayor riesgo potencial de accidente cerebrovascular posterior, se
describió un régimen de transfusión predeterminado en el proceso de consentimiento
y se implementó después de la infusión de células genéticamente modificadas para
mantener un nivel máximo de HbS que no supere el nivel inicial del paciente antes de
la terapia génica.
11. ¿Cómo fue la supervisión del estudio? Kathy Cachimuel
El estudio se realizó bajo una solicitud de nuevo fármaco en investigación aprobada
por la Administración de Alimentos y Medicamentos y fue revisado a intervalos
regulares por una junta independiente de monitoreo de datos y seguridad asignada
por el Instituto Nacional del Corazón, los Pulmones y la Sangre. Los datos informados
estaban actualizados a octubre de 2020.