Desarrollo:

ACTIVIDADES 1- Prepare el volumen solicitado de los medios de cultivo siguiendo la

técnica operatoria

Técnica operatoria: Los medios de cultivo comercialmente disponibles se presentan

como polvos deshidratados, estériles y deben ser conservados en sus frascos originales
con la tapa fuertemente ajustada.

Antes de preparar cualquier medio se debe leer cuidadosamente el rótulo del envase y
fijarse la fecha de vencimiento.

Deben prepararse empleando material de vidrio limpio y seco

1) Se calcula la cantidad de polvo, de acuerdo con las instrucciones del rótulo del
envase y el volumen total que se desee preparar.
2) Se pesa sobre papel de aluminio y se vuelca en el recipiente en el que será
preparado (debe ser un recipiente graduado, caso contrario se medirá el volumen
de líquido en otro recipiente auxiliar limpio y graduado).
3) Se le va agregando el agua destilada y se agita vigorosamente hasta obtener una
suspensión o solución (si es caldo) homogénea. Los caldos suelen dar soluciones
transparentes que no necesitan calentamiento ni ninguna otra manipulación antes
de ser llevados al autoclave. Las soluciones con agar, sin embargo, requieren
calentamiento casi hasta ebullición con agitación constante y a fuego suave (o a
Baño María o microondas) para lograr su solubilización completa.
4) Se debe observar con cuidado la solución durante el calentamiento ya que una
vez que aparecieron las primeras burbujas tiende a desbordar por ebullición.
5) Luego los medios se dosifican teniendo en cuenta el uso que se les dará. Los
tubos que contengan estas soluciones que serán esterilizadas en autoclave deben
contener sólo dos terceras partes de su volumen total ocupado por el líquido para
evitar desbordes. Así preparadas las soluciones deben esterilizarse en autoclave
(15 minutos a 121 ºC) seguir indicaciones del fabricante Una vez retirados del
autoclave, los medios deben dejarse enfriar y conservarse así refrigerados.
6) Los tubos con tapa a rosca no deben ajustarse completamente cuando se
introducen en el autoclave para su esterilización, la tapa debe quedar con media
rosca. Una vez retirados del autoclave, sí deben ajustarse para minimizar los
riesgos de contaminación. (Brooks, 2014)
Los medios de cultivo deshidratados se deben almacenar en envases sellados bajo las
condiciones que señale el fabricante. Generalmente se almacenan en un lugar fresco
(entre 15 y 25o), con poca humedad y protegidos de la luz solar directa. Nunca se deben
almacenar cerca de autoclaves, hornos, ni otra fuente de calor o vapor.

Una vez que el medio de cultivo ha sido preparado y esterilizado, puede almacenarse a
temperatura ambiente por un periodo máximo de 2 semanas protegido de la luz, o por
periodos mayores a 12–15 oC. Sin embargo, almacenados bajo refrigeración entre 2 y
8 oC se prolonga la vida útil de los mismos, (nunca por debajo de 0oC porque se
destruye la estructura del gel). Los medios de cultivo se deben mantener en recipientes
bien cerrados para evitar su deshidratación y cuando se usa tapón de algodón, se debe
colocar por encima una envoltura de papel (Craft). (Muñoz, 2019)
Bibliografía
Brooks, G. (2014). Microbiologia Medicina. Mexico: McGraw-Hill.

Muñoz, I. (30 de 03 de 2019). Microbiologia. Obtenido de

https://www.ecured.cu/Medio_de_cultivo_(Microbiolog%C3%ADa)