Scientia et Technica Año 2016, Mes 07 Universidad Tecnológica de Pereira.

ISSN 0122-1701

POLARIMETRÍA

Sara Abello Castañeda, Juliana Rincón López

Escuela de Química, Universidad Tecnológica de Pereira, Pereira, Colombia.
Septiembre 2016.
Correo-e: realcamaleon@gmail.com

Resumen- Se realizó un estudio polarimétrico en dos sesiones II. PROCEDIMIENTO.

diferentes, en la primera sesión se hizo un reconocimiento del
equipo y se identificó su comportamiento frente a sustancias
ópticamente activas realizando análisis cuantitativos a través
del cálculo de la concentración de soluciones de fructuosa al
8% y sacarosa al 15% además de un análisis cualitativos con
la identificación de una sustancia por medio de la rotación
específica e identificando la relación que hay entre la rotación
y la temperatura la cual resulto tener una relación inversa.
Palabras clave- polarímetro, rotación específica, dextrógiro,
levógiro, actividad óptica.
Se siguió el procedimiento de la práctica 2.0 de polarimetría del
libro Análisis instrumental, Prácticas de laboratorio del
Profesor Federmán Castro Eusse.
En la calibración del instrumento con agua destilada se encontró
que el ángulo de ésta fue de 1,2 por lo tanto todos los ángulos
reportados en los resultados tendrán la corrección aplicada,
todos los datos reportados correspondientes a la fructuosa
fueron reportados por el grupo de laboratorio No 4, estos datos
serán corregidos con la calibración del instrumento respectivo
de ellos.

a. Sesión 1
I. INTRODUCCIÓN En la sesión número uno se analizó dos muestras y para cada
una de ellas se prepararon soluciones patrón para realizar las
La polarimetría es una técnica que sirve para analizar sustancias curvas de calibración respectivas y averiguar su concentración,
ópticamente activas, con base en la medición del giro que además se analizó otra muestra de concentración conocida con
ocasiona al plano de vibración de un rayo de luz polarizada. el fin de averiguar que sustancia es y cómo es su
Cuando un rayo polarizado (Luz polarizada es aquella que comportamiento frente al cambio de temperatura.
consta de radiaciones que vibran en un solo plano.) atraviesa
ciertas sustancias, ocurre una interacción entre las radiaciones Tabla 1.1 Concentración de los patrones preparados para la
y las moléculas de la sustancia ocasionando un giro del rayo fructuosa.
fuera de su plano de oscilación. Sustancias ópticamente activas Fructuosa
son aquellas que hacen girar el plano de vibración de la luz # Muestra Concentración (g/100mL)
polarizada. 1 2
Se dice que la sustancia es Dextrógira (+) si el giro ocurre en el
sentido de las manecillas del reloj para un observador que mira 2 3
hacia la fuente de luz, y Levógira (-) si el giro ocurre en sentido 3 4
contrario. [1] 4 6
Ésta técnica basa su análisis cuantitativo en la ley de Biot que
se define como Tabla 2. Concentración de los patrones preparados para la
= �[ ] sacarosa.
Sacarosa
Siendo β el ángulo leído en el polarímetro, la longitud del
# Muestra concentración (g/100mL)
tubo porta muestra, C la concentración de la solución y [α]
denominado como rotación específica o poder rotatorio 1 3,5
específico característico de cada sustancia. [2] 2 5,5
El mayor campo de aplicación de la polarimetría se da en el 3 7,5
análisis y caracterización de azucares, es también utilizado
4 9,5
ocasionalmente en análisis farmacéutico cuantitativo, pero su
relativa insensibilidad es un inconveniente.[3] 5 11,5
6 13,5

1
El patrón para la fructuosa fue preparada por el grupo No 5
y los datos fueron compartidos.
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44 -0,9
Tabla 3.rotación de muestras problema 49 -3,6
Muestra Concentración (g/100ml) Rotación Luego se realizó la aplicación en la cual se analizó la sacarosa:
Problema
P1 Desconocida -8,15
1. En la gaseosa Squizz, que por su etiqueta que indicaba que
P2 desconocida 12,8 contenía 19g de azucares por cada 240 mL (estos azucares
P3 5 9,6 se asumieron sólo como sacarosa ya que en los ingredientes
sólo se referían a “azúcar” sacarosa) se hicieron los
patrones a partir de una solución madre de sacarosa 1,5%.
Tabla 4. Rotación de soluciones madre. Se midió el ángulo de la gaseosa y al ver que se salía de la
Muestra β(°) rotación de los patrones se disolvieron 5 mL de la gaseosa
en un matraz de 25 mL con agua.
Sln. Madre Sacarosa 15% 19,15
Sln Madre Fructuosa 8% -12,85 2. En la leche condensada Nestlé que en su etiqueta indica que
contiene como ingredientes leche y azúcar, y esta última en
una concentración de 22g por cada 30 ml.
Tabla 5. Variación de la rotación de la muestra p3 con respecto Para poder medir su rotación se disolvieron 5 mL de
a la temperatura. lecherita en un matraz de 100 mL con agua, al ser tan
espesa y el color de la matriz de análisis tan blanco se tuvo
Rotación temperatura (°c)
que pasar por un filtro de 0,1mm con carbono activado,
9,6 28 luego por una columna cpe c 18 y por último por un filtro
5,7 40 PFTV de 25 micras, lo cual limpio de interferentes e hizo
3,7 50 posible su lectura.
1,8 60
Tabla 8. Patrones para el análisis de la aplicación con
sacarosa.
b. Sesión 2.
En un primer lugar se prepararon dos soluciones de sacarosa Patrón # Concentración Rotación
con HCl a diferentes concentraciones (ambas con 25 ml de g/100 mL
sacarosa al 20% enrasadas a 50 mL con el HCl respectivo), la 1 10 2,8
primera con HCl 6M la cual se dejó dos horas a 50°C para 2 8 2,6
determinar el punto final de la inversión del azúcar, y la otra 3 6 1,9
con HCL 2,5M con el fin de medir su rotación cada cuatro 4 4 1,3
minutos hasta que fuera negativa y así determinar la constante Squizz X 7,9
de velocidad de la inversión de la sacarosa. Lecherita x x

Tabla 9. Rotación del squizz y la lecherita luego de ser

Tabla 6. Variación del ángulo de la rotación de la sacarosa al
disueltos.
invertirse.
Muestra Concentración Rotación
Sln de sacarosa al 20% con HCL 6M.
g/100mL
Después de 2 hora 2:30 horas
Squizz 1,4
rotación -12,01 -24,2
Lecherita 2,2
Tabla 7. Variación de la rotación del azúcar al invertirse a
III.RESULTADOS.
través del tiempo.
a. Sesión 1.
Sln de sacarosa al 20% con HCL 2,5M Se midió el ángulo de rotación de cada patrón para construir la
Tiempo (min) Rotación (β) curva de calibración y encontrar la concentración de la muestra
0 15,8 problema.
5 14,6 Siendo P1: la muestra problema de fructuosa y P2: la muestra
10 12,10 problema de sacarosa.
14 10,6 Para P1, los resultados fueron los siguientes:
19 8,1
24 7,4 Tabla 10. Rotaciones de los patrones de fructuosa.
29 5,2 Fructuosa
34 4,1 # Muestra Concentración β(°)
39 2,2 (g/100mL)
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1 2 -4,1 Ilustración 2. Curva de calibración de la sacarosa.
2 3 -7,5
3 4 -11,2 Curva de calibración para la
30 sacarosa
4 6 -13,75

rotación β °)
Ilustración 1. Curva de calibración para la fructuosa 20 y = 1,2744x - 1,1022
R² = 0,9965
Curva de calibración de la Fructuosa
10
0
-2 0 2 4 6 8
-4 0
Rotación β °)

y = -2,3929x - 0,1643 0 5 10 15 20 25
-6 concentración (g/100mL)
R² = 0,9349
-8
-10
De igual manera se procede para calcular la concentración de la
-12 muestra problema a partir de la ecuación de la curva de
-14 calibración de la sacarosa con un índice de correlación del
-16 0,9623
Concentración de patrones.
= , + ,
, + , , �
A partir de la ecuación reportada por la regresión lineal de la = =
,
curva de calibración se procede a calcular la concentración de
la muestra problema de fructuosa, teniendo en cuenta que el
Siendo este el valor experimental y comparado con el valor
índice de correlación es de 0,9349.
teórico del 8% se calcula el error de 36,6 %.
Para el tratamiento de la muestra P3, primero se grafica la curva
=− , − ,
de calibración, luego su rotación específica para realizarle la
corrección de temperatura para al final determinar el
Conociendo que la pendiente negativa indica que la fructuosa
compuesto.
es una sustancia levógira (ya que todos los patrones midieron
Por medio de la ley de Biot con todos los valores de rotación se
más de 90°) y que en la ecuación Y indica la rotación y X la
calcula la rotación específica
concentración, por eso se procede a despejar X y a reemplazar
= �
− , + , , �
= =
− , Reemplazando en la ley de Biot.
Tabla 12. Calculo de la rotación específica para cada
Siendo este el valor experimental y comparado con el valor temperatura.
teórico de 3% se calcula el error mediante la siguiente ecuación
Rotación (β) rotación temperatura (°c)
� � � � � � − � �ó �� específica(α)
� = 9,6 96 28
� �ó ��
� =10% 5,7 57 40
3,7 37 50
Tabla 11. Curva de calibración para la Sacarosa
Sacarosa 1,8 18 60

Muestra Concentración (g/100mL) rotación β

# (°) Como para la ecuación de corrección de la rotación con respecto
1 8,7 10,3 a la temperatura se necesita la pendiente de la curva de
calibración, se procede a graficar.
2 12,1 14,4
3 13,5 15,5
4 21,5 26,5
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. Tabla 14. Datos necesarios para graficar y encontrar βo.

Ilustración 3. Curva de calibración de la calibración de la
variación de la rotación con respecto a la temperatura t log − ∞
5 1,56
Variación de la rotación con 10 1,542
120 14 1,509
100
respecto a la temperatura. 19 1,5
24 1,468
Rotación.(α)

80 29 1,452
60 34 1,422
y = -2,4121x + 159,34
39 1,367
40
R² = 0,9801 44 1,314
20 49 1,589
0
0 10 20 30 40 50 60 70
Ilustración 4. Gráfica de log(βt-β∞) vs. T para encontrar β0.
Temperatura (°C)
1,8
Y con la pendiente de -2,4121 se calcula la rotación a 20°C por 1,6
medio de la siguiente ecuación
�� �2
1,4
= + −
1,2

Log(βt-βγ
Reemplazando queda 1 y = -0,0057x + 1,6251
20°� �2
= − , − 0,8
0,6
Y aplicándola con todas las temperaturas en T2, dan los 0,4
siguientes resultados 0,2
0
Tabla 13. Rotación a 20°C calculada a partir de los valores de
0 10 20 tiempo
30 (min) 40 50 60
temperatura tomados.

t2 20°�

28 -64.74 A partir de la ecuación del gráfico se encuentra que log(β0-(-

40 -74,75 24,2))= 1,6251
50 -70,64 β0=17,979
60 -65,5 Dado las propiedades de los logaritmos, por lo tanto la constante
de velocidad para cada instante.
b. Sesión dos.
Para el cálculo de la constante de velocidad, se utiliza la Tabla 15. Constante de velocidad promedio y para cada
siguiente ecuación instante.

, − ∞ t (min) βt (°) k
= � 5 15,8 0,0105
− ∞ − −
10 12,1 0,01499
Que se puede resolver en 14 10,6 0,01372
− ∞ ,
= � 19 8,1 0,01403
− ∞
Siendo la rotación al iniciar la reacción, el ángulo de 24 7,4 0,01201
rotación en el tiempo indicado y ∞ la rotación correspondiente 29 5,2 0,01243
al final de la rotación. 34 4,1 0,0117
Para calcular se debe construir una gráfica y extrapolar ya 39 2,2 0,012
que en la primera medición ha transcurrido un tiempo que puede
44 -0,9 0,0134
afectar el cálculo.
Se toma ∞ como el ángulo de rotación encontrado con la 49 -3,6 0,0146
última medición después de 2:30 horas de la solución de K promedio = 0,012938
sacarosa al 20% con HCl 6M el cual fue de -24,2°.
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Por otro lado, para la aplicación se construye la curva de dato #1 a 28°C fue eliminado puesto a que se asumió como
calibración para calcular la concentración de la gaseosa y la la temperatura ambiente de la cual no se tiene control. El
lecherita. (a partir de la tabla 8). dato #4 a 60°C fue también descartado debido a que como
no se conoce la sustancia podría ocurrir que esta empezara
Tabla 16.curva de calibración para la aplicación a desintegrarse a altas temperaturas lo que generaría un
error en la medición del ángulo de giro (por ejemplo un
Curva de calibración de la disacárido).
3 Se llegó a la conclusión de que la muestra tratada era
sacarosa. galactosa por medio de la comparación entre el dato
experimental y los datos de rotaciones específicas
2
rotación

suministradas en el Manual de Laboratorio de Federman

Castro Eusse [1], al calcular el error con la rotación
1 y = 0,25x + 0,35 específica a 20°C teórica de 79°ml/g dm da de 6%.
R² = 0,9921
Una vez comparados los datos experimentales con los
0
suministrados por el profesor se encontró que la sustancia
0 5 10 15 problema podría ser lactosa o glucosa lo que indica que la
concentración (g/100ml) sustancia problema no puede ser galactosa como se
concluyó anteriormente, con este nuevo patrón el error en
Con un R de 0,9921 se procede a calcular por medio de la el ángulo medido es del 42%. Esta diferencia se puede
ecuación la concentración de sacarosa en la lecherita y en la deber a factores externos, principalmente a lecturas
gaseosa squizz inapropiadas de las mediciones, puesto que el polarímetro
= , + , es un instrumento que requiere de un buen observador, ya
que el observador que está frente al prisma analizador, debe
− , girarlo hasta que no vea nada de luz, y luego leer el ángulo
=
, girado. De igual forma pudo presentarse error en la
Siendo así incorrecta manipulación del polarímetro en cada medición
Tabla 17. Concentración experimental de las soluciones y su respectiva limpieza.
preparadas con la gaseosa y la lecherita. - En la parte de las soluciones de sacarosa y fructosa, fueron
encontrados errores del 36 y 10% respectivamente. Aunque
Squizz Lecherita dichos valores no son tan elevados se esperaba una mejor
Concentración g/100ml 4,2 7,4 precisión del trabajo experimental, estos errores se pueden
deber a que ocurrió un error en la preparación de las
Ya que tanto la gaseosa como la lecherita fueron diluidas, se soluciones madres, por lo tanto los valores de ángulo de
calcula el contenido de azúcar directamente en ellas por medio giro de las soluciones llevar un error asociado. Aparte a
del siguiente factor esto el instrumento con el que se realizó la práctica no es el
más óptimo pues su uso por el paso de los años ha
, � ���� � �� ��
∗ ∗ = disminuido su precisión.
� � � �
b. Sesión dos.
, � ���� � � � �� - La constante de velocidad de inversión de la sacarosa fue
∗ ∗ =
��ℎ� � � � � de 0,0129, lo cual podría indicar que la reacción
efectivamente se da a condiciones de laboratorio pero se
aumenta considerablemente cuando es calentada o
Y comparando con su valor teórico se calcula el error catalizada con un ácido más fuerte.
- En la aplicación de la técnica con la gaseosa Squizz el error
Error squizz: 165,8 % encontrado fue de 165,8%, un valor muy alto que se podría
Error lecherita: 101,9% mediante a que los otros componentes de la gaseosa como
el acidulante, saborizantes o conservantes podrían ser
componentes orgánicos ópticamente activos que interfieren
III. ANÁLISIS. en la medida del ángulo de giro de la sacarosa pues sólo se
a. Sesión 1. consideró esta en la construcción de los patrones y su
- Explicar el error obtenido en las muestras problema. respectivo análisis.
- En el cálculo de la rotación específica para determinar la - En la aplicación de la técnica con la Lecherita se
sustancia problema se encontró que después de hacer el presentaron varios problemas, el principal de ellos el color
ajuste a 20°C la rotación específica de la muestra fue opaco y homogéneo de la matriz (ya que el polarímetro
74°ml/g dm, este dato fue seleccionado a partir de una tiene la limitación de sólo poder medir sustancias
eliminación de algunos datos registrados en la tabla 13. El incoloras) para eliminar este problema se buscó de
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diferentes formas quitarle el color por medio de las técnicas
enunciadas anteriormente en el procedimiento. Una vez
medido el ángulo y calculada su concentración de sacarosa
se encontró el error de 101,9%, este error tan alto se debe
a que uno de los principales componentes de la lecherita es
la leche y dado a que muchos componentes de esta son
ópticamente activos interfieren en la medida del ángulo de
la sacarosa aislada el cual era el objetivo.
IV. CONCLUSIONES
- La polarimetría es una técnica muy efectiva en el análisis
cualitativo el cual nos indica como es la interacción de la
luz con la sustancia para así caracterizarlo como levógira o
dextrógira, por otro lado en el análisis cuantitativo podría
dar ciertos problemas ya que aunque la rotación específica
sea una para cada sustancia, varias sustancias pueden tener
rotación específica similares lo cual puede llevar a un error
de identificación como sucedió en esta práctica donde se
creía que era galactosa pero era otra.
- La polarimetría es una técnica en la cual al querer entender
como varía la rotación de una sustancia con respecto la
variación de la temperatura no se encuentra una relación
entre ellas, dado a que la rotación sólo depende de la
composición química de la sustancia a analizar. A
diferencia de lo que ocurre en otras técnicas instrumentales
como la refractomertría donde sí se encuentra una relación
entre la temperatura y el índice de refracción.
- La polarimetría es una técnica instrumental basada en el
efecto de la luz polarizada en sustancias ópticamente
activas, a través de esta se pueden determinar
concentraciones de sustancias por medio de la construcción
de curvas de calibración y también se puede estudiar la
cinética de las reacciones o equilibrios químicos e
identificar sustancias problemas, se debe tener en cuenta
que este instrumenta presenta varias limitaciones como son
que
1. la matriz debe ser incolora.
2. El observador determina los valores de ángulos de
giro lo cual conlleva a un error humano.
3. Las medidas deben ser realizadas en lugares oscuros
para distinguir mejor los claros y oscuros y tener
valores más exactos.
V. PREGUNTAS.
- ¿Qué factores afectaron las medidas del ángulo de giro?
Uno de los factores que afecta el ángulo de giro es la lectura
del mismo ya que esto depende del ojo del analista. Otro factor
es la temperatura.
- ¿Qué factores afectan la medida de la rotación específica?
Temperatura: El efecto de la temperatura tiene poca
importancia si no se modifica en más de un grado en relación
con la temperatura considerada por la Farmacopea (20℃).
Existen tablas de corrección para los azucares.
Longitud de Onda de la luz: La rotación específica es
inversamente proporcional a cuadrado de la longitud.
La no corrección de temperatura de αDt, una mal determinación
del ángulo de giro y el no saber con exactitud la concentración
de la muestra.
- Cómo puede determinar la confianza en los resultados
analíticos obtenidos?
Evidentemente todo nuevo método analítico debe validarse para
demostrar su idoneidad, pero generalmente existen
metodologías antiguas aplicadas durante mucho tiempo y
entonces tiene poco sentido validar como si fuera una
metodología desconocida. Se habla entonces de una validación
retrospectiva, donde se pueden combinar los nuevos criterios de
validación con toda la experiencia ya adquirida. En cambio, se
conoce como validación prospectiva a la que se realiza frente a
un producto nuevo.
En muchos casos un método analítico es desarrollado y
validado por un grupo de trabajo y aplicado por otro grupo y
para asegurar que este último sea a su vez capaz de entregar
resultados confiables, es conveniente realizar una transferencia
de validación. Si se trata, por ejemplo, de un método
cromatográfico consiste en la comparación de resultados de las
pruebas de adecuación y análisis en paralelo, al menos dos
muestras homogéneas de concentraciones conocidas, dentro del
rango de aceptación del producto o dentro del rango de
aplicación de la metodología.
En un ensayo de validación deben considerarse los siguientes
parámetros:
- selectividad
- linealidad
- precisión
- exactitud
- sensibilidad
- robustez
-¿Consultar en qué consiste la Escala Internacional del Azúcar?
En la industria del azúcar, la rotación se expresa sobre una
escala diferente, llamada Escala Internacional del Azúcar (ISS
en sus siglas inglesas), que se denota como ºZ. Los polarímetros
que se han diseñado para su uso específicamente en la indDe
todas ellas, sin lugar a dudas, la más utilizada es la
recuperación.
Si bien el valor verdadero de la concentración no se conoce sino
que sólo puede estimarse, es posible preparar una muestra por
un procedimiento más exacto que el evaluado (por pesada,
dilución en peso, etc.) y utilizarla como referencia.
La exactitud o mejor dicho la inexactitud debe ser tan pequeña
como sea posible para que el valor medido se aproxime al de
referencia, o sea, la recuperación debe acercarse al 100%.
En el análisis de macrocomponentes, en general se requiere que
el valor medido no difiera significativamente del aceptado
como referencia. Para determinarlo, se utiliza un ensayo t de
Student, efectuando varias determinaciones de la muestra de
concentración conocida y calculando el t experimental (tob) que
se compara con tablas t para n-1 grados de libertad en el nivel
de confianza escogido, generalmente p=0,05.
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- Describa las características técnicas del polarímetro
utilizado, consulte en catálogos actualizados de
instrumentación química o en internet sobre las variedades,
características y aplicaciones de los nuevos modelos de los
polarímetros en control de calidad y control de procesos.

1. Polarímetro Serie ADP600

La serie ADP600 está disponible en versiones de longitud de

onda sencilla, dual y múltiple cubriendo el espectro visible y
con capacidad para medición en la altamente sensible región
ultravioleta. Gracias a estas capacidades, la serie ADP600 es
particularmente adecuada para uso por científicos que deseen
medir compuestos quirales y otras sustancias ópticamente
activas tanto en las industrias químicas, farmacéutica y
alimentaria como en la academia.

Como parte fundamental de la simplicidad operativa hemos

integrado una interface de usuario que se basa en una pantalla
táctil a color y de alta definición. El equipo cuenta con una
simple estructura de menús que se caracteriza por el sistema
METHOD. Es muy similar al de los refractómetros de la serie
RFM, con control Peltier, que son tan populares en la industria.

2. Polarímetro Serie ADP400

Polarímetros para azúcar, alimentos y aplicaciones químicas y

farmacéuticas. El ADP410 es un polarímetro de bajo coste, y el
ADP440+ ofrece medidas de 3 decimales en conformidad con
USP, y satisface los requisitos operativos de la normativa FDA
21CFR Parte 11.

3. Polarímetro Modelo D7
El polarímetro Modelo D7 ofrece la mayor precisión encontrada
en un polarímetro óptico, y es idóneo para laboratorios que
realizan un número reducido de muestras o para propósitos
educativos.

VI. REFERENCIAS.
-informe.
[1] Práctica 2.0 polarimetría, Practicas de laboratorio de
Federman Castro Eusse.
[2] Página 97, DICCIONARIO AKAL DE FÍSICA, ÉLIE
LÉVY, Edición 1.
[3]Página 301, CURSO DE ÁNALISIS FARMACEÚTICO,
K.A. CONNORS, editorial REVERTÉ, Edición 1.
- Preguntas
http://www.fao.org/docrep/010/ah833s/ah833s15.htm (visitada
el 29 de agosto del 2016)
http://www.bellinghamandstanley.com/spanish.html (visitada
el 27 de agosto del 2016)
http://www.normalizacion.gob.ec/wp-
content/uploads/downloads/2013/11/nte_inen_264.pdf
(visitada el 27 de agosto del 2016)