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ANÁLISIS BIOLÓGICO-MICROBIOLÓGICO

ANÁLISIS BIOLÓGICO-
MICROBIOLÓGICO

CENTRO DE TECNOLOGÍAS AMBIENTALES 2


ANÁLISIS BIOLÓGICO-MICROBIOLÓGICO

CENTRO DE TECNOLOGÍAS AMBIENTALES 2


ANÁLISIS BIOLÓGICO-MICROBIOLÓGICO

BIOSEGURIDAD EN EL LABORATORIO DE BIOLOGÍA

HERRAMIENTAS /
N° ORDEN DE EJECUCIÓN
INSTRUMENTOS
1. Capacitar a os participantes en el orden, ➢ Artículos de vidrio.
limpieza y ➢ Equipos y
cuidados que se debe tener en un laboratorio accesorios.
de Biología. ➢ Reactivos.

DENOMINACIÓN

I. BIOSEGURIDAD EN EL LABORATORIO DE BIOLOGÍA.

TECNOLOGÍAS AMBIENTALES Tiempo: 2 HT:


Hrs. 1/18

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ANÁLISIS BIOLÓGICO-MICROBIOLÓGICO

1.1. INTRODUCCIÓN.
El laboratorio debe ser un lugar seguro para trabajar donde no se deben permitir
descuidos e indisciplina. Para ello se tendrán siempre presente los posibles riesgos
asociados al trabajo con materiales peligrosos. Nunca hay excusa para los accidentes
en un laboratorio bien equipado en el cual trabaja personal bien informado.

1.2. COMPETENCIAS.
Capacitar al alumnado en el orden, limpieza y cuidados que se debe tener en un
laboratorio de Biología.

1.3. MATERIALES.
- Mandil o guardapolvo de color blanco.
- Implementos de seguridad.
- Guía y cuaderno de apuntes.

1.4. PROCEDIMIENTO.
A continuación se exponen una serie de normas que deben conocerse y seguirse en el
laboratorio:

- Durante la estancia en el laboratorio el alumno debe ir provisto de mandil o


guardapolvo, gafas de seguridad, tapabocas, guantes de látex. El mandil o
guardapolvo y el tapabocas deberán emplearse durante toda la estancia en el
laboratorio. Las gafas de seguridad siempre que se manejen productos
peligrosos, se realice siembra de tejidos en cámara y durante el calentamiento de
disoluciones. Los guantes deben utilizarse obligatoriamente en la
manipulación de productos tóxicos o cáusticos y para la desinfección, siembra y
manipulación de material sujeto a estudio o investigación.
- No debe ingresar con accesorios personales que puedan comprender riesgos de
accidentes mecánicos, químicos o por fuego, como son anillos, pulseras, collares,
gorras y sombreros, y además, para crear un ambiente aséptico adecuado.
La responsabilidad por las consecuencias de no cumplir esta norma dentro del
laboratorio es enteramente del estudiante.
- Está prohibido fumar, beber o comer en el laboratorio, así como dejar encima
de la mesa del laboratorio algún tipo de prenda.
- Mantener las uñas recortadas. El cabello largo se llevará siempre recogido (con
un aditamento que lo contenga).
- Utilizar siempre zapato cerrado.
- Debe conocerse la toxicidad y riesgos de todos los compuestos con los que se
trabaje. Debe consultarse siempre las etiquetas y libros sobre reactivos en
busca de información sobre seguridad.
- Como regla general no se debe pipetear nunca con la boca utilizar peras o
pipeteadores. Los volúmenes de ácidos, bases concentradas y disolventes
orgánicos se medirán con probetas, en el caso de que se deban medir los
volúmenes exactos se deben utilizar pipetas de vidrio o micropipetas.
- Mantener sólo el material requerido para la sesión sobre la mesa de trabajo.
- Los frascos de reactivos deben permanecer en los estantes respectivos. Los
demás objetos personales o innecesarios deben guardarse en los casilleros
destinados para ello.
- Los frascos de los reactivos deben cerrarse inmediatamente después de su uso,

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durante su utilización los tapones deben depositarse siempre boca arriba sobre la
mesa.
- No deben manipularse jamás productos o disolventes inflamables cerca a
mecheros.
- Si algún reactivo se derrama, debe retirarse inmediatamente dejando el lugar
perfectamente limpio. Las salpicaduras de sustancias básicas deben neutralizarse
con un ácido débil (por ejemplo, Ácido cítrico) y las de sustancias ácidas con
una base débil (bicarbonato sódico).
- Cuando se tengan dudas sobre las precauciones de manipulación de algún
producto debe consultarse al profesor antes de proceder a su uso.
- No calentar nunca enérgicamente una disolución. La ebullición debe ser siempre
suave.
- El mechero debe cerrarse, una vez utilizado, tanto de la llave del propio
mechero como la toma del gas de la mesa o si es manual tapándolo.
- Las disoluciones y recipientes calientes deben manipularse con cuidado.
- Para la introducción y extracción de recipientes de hornos y estufas deben
utilizarse las pinzas y guantes adecuados.
- Las heridas y quemaduras deben ser tratadas inmediatamente. En el caso de
salpicaduras de ácidos sobre la piel lavar inmediatamente con agua abundante,
utilizando las duchas instaladas y teniendo en cuenta que en el caso de ácidos
concentrados la reacción con el agua puede producir calor. Es conveniente
retirar la ropa para evitar que el corrosivo quede atrapado entre la ropa y la piel.
- Deben conocerse la situación específica de los elementos de seguridad (lavaojos,
ducha, extintor, salidas de emergencia,...) En el laboratorio así como todas las
indicaciones sobre seguridad expuestas en el laboratorio.
- No debe llevarse a la boca ningún material de laboratorio; si algún reactivo es
accidentalmente ingerido, avise de inmediato al Profesor o a la persona
encargada.

1.5. NORMAS DE TRABAJO.


- Cada estudiante es responsable del material que se le asigne, además del
equipo especial (por ejemplo centrífugas, balanzas, cámaras de flujo laminar,
agitadores, ollas de esterilización, estufas, pH-metros, entre otros.) En caso de
pérdida o daño, el docente deberá reportar el hecho al encargado del laboratorio.
Antes de empezar con el procedimiento experimental o utilizar algún aparato
revisar todo el material, y su manual de funcionamiento.
- Al finalizar cada sesión de prácticas el material y la mesa de laboratorio deben
dejarse perfectamente limpios y ordenados.
- Las disoluciones de reactivos, que no sean patrones ni muestras, se almacenan
en botellas de vidrio o plástico que deben limpiarse y rotularse perfectamente.
- Los reactivos sólidos deben devolverse al lugar de donde se tomaron
inmediatamente después de su uso.
- Las balanzas deben dejarse a cero y perfectamente limpias después de finalizar
la pesada.
- Cerca de las balanzas sólo deben permanecer los estudiantes que se encuentren
pesando.
- El material asignado a cada práctica debe permanecer en un lugar adecuado
para ella. Bajo ningún concepto se sacarán reactivos o material de prácticas
fuera del laboratorio.

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1.6. CALENTAR Y DESTILAR


- Para recoger recipientes calientes como cápsulas, crisoles, vasos, entre otros,
utilizar las correspondientes pinzas. También nos podremos ayudar de un paño.
- Cuando se calienten líquidos, evitar que la posible proyección pueda alcanzar a
cualquier persona o reactivo incompatible. Al calentar una solución en un tubo de
ensayo, debe hacerse bajo el nivel del líquido y constantemente agitando. No
debe apuntarse con el tubo al compañero o a sí mismo, pues puede
proyectarse.
- Al calentar vidrio, dejar enfriar antes de cogerlo. Colocarlo sobre un material
térmicamente aislante, el vidrio caliente tiene el mismo aspecto que el vidrio frío.
- No manipular productos inflamables (benceno, tolueno, éter, etc.) en presencia de
mecheros encendidos. No destilar éter con llama o en presencia de mecheros
encendidos.

1.7. GASES.
- Las reacciones en las que se prevea un desprendimiento de gases, deben
realizarse siempre en una cámara extractora.
- No se deben oler directamente los productos químicos, si debe realizarse,
abanicarse hacia sí con la mano.

1.8. PUESTO DE TRABAJO.


- Conservar siempre limpios los aparatos y el puesto de trabajo. Evitar derrames de
sustancias, pero si ocurre accidentalmente, informar al docente o persona
encargada para llevar a cabo la adecuada recolección.
- Todas las prácticas deberán realizarse con limpieza, al terminar la sesión, toda el
área de trabajo deberá quedar ordenada y limpia.

1.9. MANEJO DE SUSTANCIAS.


- No deben manipularse productos químicos con las manos. Usar papel, espátulas,
etc. Usar guantes para el manejo de reactivos corrosivos y/o altamente tóxicos.
No comer y no fumar en el laboratorio, y antes de hacerlo fuera del mismo, lavarse
las manos.
- Al usar cualquier tipo de reactivos, asegúrese que es el necesario para a
práctica y lea su etiqueta. Si es transferido de recipiente etiquételo de nuevo.
- Deben utilizarse las pipetas rotuladas para cada reactivo, no intercambiarlas, esto
evita la contaminación de los mismos.
- Todos los reactivos deberán manejarse con el equipo perfectamente limpio. Al
pipetear líquidos transfiéralos a otro recipiente para su uso. Los reactivos no
usados no se devuelven a los frascos originales; pedir asesoría.
- Dilución de ácidos: añadir lentamente el ácido al agua contenida en un recipiente,
agitando constantemente y enfriándolo. Nunca añadir agua al ácido.
- Al agitar moderadamente un tubo de ensayo golpee con la punta del dedo la
base del tubo. Cuando requiera una agitación vigorosa por inversión del recipiente,
tápelo con un tapón de vidrio esmerilado o papel parafilm o vinilpel. Nunca hacerlo
con la mano.
1.10. RESIDUOS
Con el objetivo de minimizar, controlar y evitar la contaminación ambiental por

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residuos químicos en los laboratorios de Química, Bioquímica, Suelos y Tejidos


Vegetales existen diagramas de flujo de cada práctica, éstos indican el recipiente
adecuado para la disposición de cada grupo de residuos. Su manejo se indica la
primera semana de clases.
- Los residuos líquidos deben disponerse en recipientes especiales para cada uno
de ellos. El personal encargado del laboratorio procederá a su debido
tratamiento.
- Depositar los residuos sólidos como agar, papeles de cromatografía, papel
filtro, entre otros, en la caneca roja o en el recipiente destinado para ello.
- El material de vidrio roto deberá descartarse en el recipiente especial para ese
efecto, informando del hecho al encargado del laboratorio, pues es material de
inventario.

CUESTIONARIO.

1. Dibujar y nominar los pictogramas de seguridad más representativos dentro del


laboratorio de práctica.
2. Clasificar los diferentes pictogramas de seguridad según su utilización.

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MATERIALES DE LABORATORIO

HERRAMIENTAS /
N° ORDEN DE EJECUCIÓN INSTRUMENTOS
1. Principales materiales y equipos de laboratorio. - Artículos de vidrio.
2. Reconocimiento de las partes del microscopio - Equipos y accesorios.
óptico compuesto - Reactivos.
- Disponibles en el laboratorio.

DENOMINACIÓN

II. INSTRUMENTACIÓN EN EL LABORATORIO DE BIOLOGÍA:


DESCRIPCIÓN DEL MICROSCOPIO COMPUESTO.

TECNOLOGÍAS AMBIENTALES Tiempo: 2 Hrs. HT: 2/18

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2.1. COMPETENCIAS.
Familiarizar al estudiante con los diversos materiales y reactivos necesarios para el
desarrollo de las diferentes prácticas.
Distinguir las partes constitutivas del microscopio.

2.2. MATERIALES.
- Todo material de vidrio, de metal, de porcelana; equipos o aparatos disponibles
en el laboratorio de Biología.
- Todos los reactivos sólidos y líquidos disponibles en el laboratorio.

Seguir orientaciones del Profesor.

2.3. PRINCIPALES MATERIALES.

a) Láminas portaobjetos: Vidrio rectangular de 6,2 x 2,2 cm sobre la cual se coloca


la muestra o el objeto que va a ser observado con el microscopio.
b) Laminilla o cubre objeto: Vidrio cuadrado de 1,8 cm por lado que cubre al objeto
a ser observado con el microscopio.
c) Placas de Petri: Recipiente redondo, de cristal o plástico de diferentes diámetros
(siendo más comunes los de diámetros alrededor de 10 cm), de fondo plano, con
una cubierta de la misma forma que la placa, pero algo más grande de diámetro,
para que se pueda colocar encima y cerrar el recipiente. Se utiliza en los
laboratorios principalmente para el cultivo de bacterias y otros microorganismos,
soliéndose cubrir el fondo con distintos medios de cultivo (por ejemplo agar) según
el microorganismo que se quiera cultivar.
d) Pipetas Pasteur: Pipeta con punta capilar, de vidrio o poliestireno.
e) Vasos de precipitado o beakers. Se emplean para realizar mezclas de líquidos,
disolución de sólidos, medición de volúmenes (cuando no se requiere de mucha
exactitud).
f) Tubos de ensayo o de prueba. Como su nombre lo indica, se emplean en la
realización de reacciones químicas, generalmente las de identidad. Se trabaja con
pequeños volúmenes.
g) Probetas. Conocidas también como cilindros graduados sirven para realizar
mediciones de volúmenes de líquidos.
h) Pipetas graduadas. Estas pipetas son de tubo de diámetro uniforme. Su exactitud
depende de esta uniformidad.
i) Matraces cónicos (Erlenmeyer). Se utilizan para hervir soluciones cuando hay
que reducir a un mínimo la evaporación; son útiles en las titulaciones y para empleo
general.
j) Mecheros: de Bunsen (a) y de alcohol (b). Nos proporcionan la fuente de calor.
El de Bunsen necesita de gas propano para dar el calor.
k) Gradilla de tubos. Es un soporte para tubos de ensayo. Puede ser de madera, de
metal.
l) Pinzas. Se emplean para sujetar o manipular tubos de ensayo, beakers, cápsulas
de porcelana, etc.; especialmente cuando están calientes.

2.4. EQUIPOS DE LABORATORIO.

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a) Microscopio. El microscopio es un instrumento que permite observar objetos que


son demasiado pequeños para ser vistos a simple vista.
b) Estufa. Equipo que se utiliza para secar y esterilizar recipientes de vidrio y metal
en el laboratorio. Se identifica también con el nombre de Horno de secado.
c) Incubadora. Dispositivo que sirve para mantener y hacer crecer cultivos
microbiológicos o cultivos celulares. La incubadora mantiene la temperatura, la
humedad y otras condiciones en grado óptimo, tales como el contenido de dióxido
de carbono (CO2) y de oxígeno en su atmósfera interior.
d) Centrifuga. Equipo que pone en rotación una muestra para –por fuerza centrífuga–
acelerar la decantación o la sedimentación de sus componentes o fases
(generalmente una sólida y una líquida), según su densidad. Existen diversos tipos,
comúnmente para objetivos específicos.
e) Cocinilla. Aparato de sobremesa, portátil y autónomo, que posee uno o más
elementos de calefacción eléctrica, y que se emplea para calentar recipientes con
líquidos, de forma controlada.
f) ph-metro. Sensor utilizado en el método electroquímico para medir el pH de una
disolución. La determinación de pH consiste en medir el potencial que se desarrolla
a través de una fina membrana de vidrio que separa dos soluciones con diferente
concentración de protones.
g) Balanza analítica. Clase de balanza de laboratorio diseñada para medir pequeñas
masas, en un principio de un rango menor del miligramo (y que hoy día, las
digitales, llegan hasta la diezmilésima de gramo: (0,0001 g o 0,1 mg).
h) Autoclave. Recipiente de presión metálico de paredes gruesas con un cierre
hermético que permite trabajar a alta presión para realizar una reacción industrial,
una cocción o una esterilización con vapor de agua.

CUESTIONARIO.

1. Dibujar y nominar todos los materiales observados en práctica, incluyendo las


partes de un microscopio compuesto.
2. Clasificar los diferentes materiales observados según su uso.

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MICROSCOPÍA

HERRAMIENTAS /
N° ORDEN DE EJECUCIÓN
INSTRUMENTOS
1. Descripción de las partes del microscopio. - Lupa.
2 Descripción de las partes del estereoscopio. - Microscopio compuesto.
- Estereoscopio
- Láminas portaobjeto.
- Laminillas cubreobjeto.
- Papel lente.
- Fibras de algodón.
- Tijeras.
- Frasco gotero con
agua corriente.
- Pinzas metálicas.

DENOMINACIÓN

III. DESCRIPCION DEL MICROSCOPIO COMPUESTO


Y ESTEREOSCOPIO.

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3.1. RECONOCIMIENTO DE LAS PARTES DEL MICROSCOPIO ÓPTICO


COMPUESTO.
El microscopio compuesto, es un instrumento que tiene los siguientes sistemas:

A. El sistema de soporte.
B. El sistema de aumento.
C. El sistema de iluminación.
D. El sistema de ajuste.

A. El sistema de soporte, comprende:


- El estativo.
- El portaobjetivos.
- La platina.

B. El sistema de aumento está formado


por:
- El tubo cilíndrico.
- Los objetivos.
- Los oculares.

C. El sistema de iluminación comprende:


- El condensador.
- El diafragma.
- El sistema interno incorporado de iluminación.
- El mecanismo del piñón y cremallera para desplazar el condensador.

D. El sistema de ajuste está compuesto por:


- Los tornillos macrométricos.
- Los tornillos micrométricos.

3.2. CONSTRUCCION Y PRINCIPIO DEL MICROSCOPIO.


El estativo (1) consta de un pie muy firme, y de la parte superior por la cual puede
sostenerse el microscopio, En esta parte van montados el tubo cilíndrico (4) y el
portaobjetivos (2) En las aberturas del tubo se instala los oculares (6). El portaobjetivo
es un revolver generalmente cuádruple que lleva colocados en sus orificios con rosca
derecha, los objetivos de 5x, 10x, 40x y 100x.

Los objetivos (5) que se ponen cada vez en servicio, por rotación del revolver
portaobjetivos, proyectan en el diafragma del ocular una imagen de la preparación
colocada en la platina (3). Esta imagen presenta inversión lateral y horizontal, la cual
se observa con el ocular como si se tratase de una lupa. Para enfocar dicha imagen
ha de ajustarse convenientemente la distancia entre el objetivo y el objeto. A tal fin se
utilizan dos mecanismos distintos, el mando aproximado del macrométrico (11) y el
enfoque de precisión con el micrométrico (12). En los microscopios modernos, ambos
mandos forman un solo conjunto. La platina (3) puede ser fija o de movimiento vertical

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y horizontal para la observación de la preparación.

Debajo de la platina se halla el sistema de iluminación (9) que concentra sobre la


preparación la luz procedente del manantial luminoso. El condensador (7) se
encuentra entre el sistema de iluminación interna y la platina, lleva los rayos luminosos
a un foco común sobre el objeto. Mediante la cremallera (10) se puede elevar
(iluminación máxima) o bajar (iluminación mínima) y se debe centrar y ajustar
adecuadamente. El diafragma (8) que se encuentra dentro del condensador, se utiliza
para ampliar o reducir el ángulo, y por lo tanto la cantidad de luz que entra en
el condensador. Cuanto más se abra el diafragma más se amplía el ángulo y en
consecuencia aumenta la AN (Apertura Numérica) y se puede observar detalles muy
pequeños, sin embargo al mismo tiempo se reduce el contraste.

3.3. TIPOS DE MICROSCOPIOS.


MICROSCOPIOS ÓPTICOS:
- Microscopio simple: Consta de una sola lente pequeña y convexa montada
sobre una plancha con un mecanismo para sujetar el material que se va a
examinar, por ejemplo la lupa.
- Microscopio compuesto: Presentan varias lentes tanto en el objetivo como en el
ocular. Se utilizan para estudiar especímenes delgados, por lo general, se para
examinar cultivos, preparaciones trituradas o una lámina muy fina del material
que sea. Normalmente depende de la luz que atraviese la muestra desde abajo.

MICROSCOPIOS ÓPTICOS ESPECIALES:


- Microscopio estereoscópico: Formado por un par de lentes de baja potencia que
convergen en el espécimen. Estos instrumentos producen una imagen
tridimensional.
- Microscopio de luz ultravioleta: Utiliza el rango ultravioleta del espectro luminoso
en lugar del rango visible, bien para aumentar la resolución con una longitud de
onda menor o para mejorar el detalle absorbiendo selectivamente distintas
longitudes de onda de la banda ultravioleta.
- Microscopio petrográfico: O, de polarización, se utiliza para identificar y estimar
cuantitativamente los componentes minerales de las rocas ígneas y las rocas
metamórficas.
- Microscopio en campo oscuro: Utiliza una luz muy intensa en forma de un cono
hueco concentrado sobre el espécimen. El campo de visión del objetivo se
encuentra en la zona hueca del cono de luz y sólo recoge la luz que se refleja en
el objeto. Por ello las porciones claras del espécimen aparecen como un fondo
oscuro y los objetos minúsculos que se están analizando aparecen como una luz
brillante sobre el fondo.
- Microscopio de fase: Se usa principalmente para aumentar el contraste entre las
partes claras y oscuras de las células sin colorear. Es ideal para especímenes
delgados o células aisladas.
- Microscopio de fluorescencia: Se aplica un colorante fluorescente en las muestras
que se deseen observar, y éstas al ser estimuladas por un haz de luz, emitirán parte
de la energía absorbida como rayos luminosos.

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- Microscopios electrónicos: Es un microscopio que utiliza electrones en vez de


fotones o luz visible para formar imágenes de objetos diminutos. Los
microscopios electrónicos permiten alcanzar una capacidad de aumento muy
superior a los microscopios convencionales (hasta 500.000 aumentos comparados
con los 1000 aumentos de los mejores microscopios ópticos) debido a que la
longitud de onda de los electrones es mucho menor que la de los fotones.
- Microscopio electrónico de transmisión: Emite un haz de electrones
dirigido hacia el objeto que se desea aumentar. Una parte de los electrones
rebotan o son absorbidos por el objeto y otros lo atraviesan formando una imagen
aumentada de la muestra.
- Microscopio electrónico de barrido: Permite obtener imágenes de gran resolución
en materiales pétreos, metálicos y orgánicos. La luz se sustituye por un haz de
electrones, las lentes por electroimanes y las muestras se hacen conductoras
metalizando su superficie. Los electrones secundarios se asocian a una señal de
TV.
- Microscopios de sonda de barrido: Se utiliza una sonda que recorre la superficie
de una muestra, proporcionando una imagen tridimensional de la red de átomos
o moléculas que la componen. La sonda es una afilada punta de metal que
puede tener un grosor de un solo átomo en su extremo.
- Microscopio de efecto túnel: Este microscopio utiliza un fenómeno de la física
cuántica, denominado efecto túnel para proporcionar imágenes detalladas de
sustancias conductoras de electricidad. La sonda se coloca a una distancia de
pocos ángstrom de la superficie del material y se aplica un voltaje pequeño
entre la superficie y la sonda. A causa de la poca distancia entre el material y la
sonda algunos electrones se escapan a través del hueco, generando una corriente.
El flujo de corriente es mayor cuando la sonda se acerca al material y disminuye
cuando se aleja. A medida que el mecanismo de barrido mueve la sonda por
encima de la superficie, se ajusta de modo automático la altura de la sonda para
mantener constante la corriente del efecto túnel. Estos ajustes minúsculos
permiten dibujar las ondulaciones de la superficie. Después de muchas pasadas
hacia adelante y hacia atrás se utiliza una computadora para crear una
representación tridimensional del material.
- Microscopio de fuerza atómica: Se usa incluso con materiales no conductores. A
medida que la sonda se mueve a lo largo de la superficie de la muestra los
electrones de la sonda de metal son repelidos por las nubes electrónicas de los
átomos de la misma. La altura de la sonda se ajusta de modo automático para
mantener constante la fuerza recibida. Un sensor registra el movimiento
ascendente y descendente de la sonda y entrega la información a una
computadora, que a su vez la utiliza para dibujar una imagen tridimensional de la
superficie del espécimen.

3.4. RECONOCIMIENTO DE LAS PARTES DEL ESTEREOSCOPIO


El estereoscopio es el instrumento óptico que por medio de dos imágenes planas
de un mismo objeto, tomadas desde dos puntos de vista poco separados entre sí,
puestas una al lado de otra y miradas cada una con un ojo, da la sensación del relieve.
Partes del estereoscopio:

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Consta de cuatro pequeños espejos, colocados de tal forma que permiten el desvío
de las imágenes correspondientes a cada ojo puestas una al lado de la otra. Así al
verse una encima de la otra da el efecto tridimensional o estereoscópico. Para
poder ajustarse al tamaño de diferentes imágenes, el instrumento tiene un eje o
pivote que altera el grado de separación

El microscopio estereoscópico consta:


- Pie o base: Sobre la que se apoya el microscopio.
- Tubo ocular: Tiene forma cilíndrica y en su extremidad superior se colocan los
oculares.
- Revólver: Que es una pieza giratoria en la que se enroscan los objetivos. Al girar
el revólver, los objetivos pasan por el eje del tubo y están listos para trabajar.
- La columna, asa o brazo: Que está en la parte posterior, sostiene el tubo en su
posición superior y en la inferior se adapta al pie.
- La platina: Es una pieza metálica en donde se coloca la preparación u objeto a
observar, puede ser fija o giratoria.
- El carro: Colocado sobre la platina que permite el deslizamiento de la preparación
de adelante hacia atrás y de derecha a izquierda.
- Tornillo macrométrico mediante el cual se asciende o desciende el tubo.
- Tornillo micrométrico: que se mueve casi imperceptiblemente al deslizar el tubo o la
platina, permite el enfoque exacto y nítido de la preparación u objeto. Lleva adosado
un tambor graduado que se usa para precisar movimiento y puede medir el espesor
de los objetos.

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CUESTIONARIO.
1. Dibujar e identificar las partes del microscopio y estereoscopio.
2. Graficar cómo se genera la imagen en un microscopio simple y en uno compuesto.
3. Preparar una tabla indicando, al menos, 5 muestras que pueden observarse con
cada uno de los tipos de microscopio mencionados.

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HERRAMIENTAS /
N° ORDEN DE EJECUCIÓN
INSTRUMENTOS
- Lupa.
1. Empleo de la lupa. - Microscopio compuesto.
2. Empleo y cuidado del microscopio. Observación - Láminas portaobjeto.
3. de muestras biológicas. - Laminillas cubreobjeto.
- Papel lente.
- Tiras de papel
periódico impreso.
- Fibras de algodón.
- Tijeras.
- Frasco gotero con
agua corriente.
- Pinzas metálicas.

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IV. MANEJO DEL MICROSCOPIO.

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4.1. PROCEDIMIENTO.

• EMPLEO DE LA LUPA. La lupa es una lente biconvexa o planoconvexa, de


corto enfoque que aumenta el tamaño de un objeto. Se le denomina lente de
aumento, microscopio simple o lupa. La lupa forma una imagen virtual del objeto y
el ojo “mira” esta imagen virtual. Está provista de un mango adecuado para su uso.
El part ic ipante observará con la lupa, la superficie del dorso de su mano, letras
de diferentes tamaños, y fibras de lana colocadas sobre una lámina portaobjeto.

• EMPLEO Y CUIDADO DEL MICROSCOPIO. La habilidad en el manejo del


microscopio se adquiere con la práctica; pero si se siguen algunas reglas sencillas,
cualquier persona puede aprender a utilizarlo sin dificultad, con satisfacción y en
corto tiempo. Si se llevan a cabo cuidadosamente cada uno de los siguientes
pasos, en el orden en que se dan, el principiante solucionará la mayoría de las
dificultades.
- Limpiar la parte superior del condensador, ocular y objetivo, frotando
suavemente con papel especial para lentes.
- Conectar el cable del microscopio al tomacorriente, accionar el interruptor de
encendido.
- Con la muestra sobre la platina, haga girar hasta su lugar el objetivo que
desee utilizar y, mientras observa lateralmente, coloque el objetivo justamente
en la posición en que tendrá que enfocarse.
- Ver por el ocular del microscopio y asegurar la adecuada cantidad de luz,
regulando el condensador y diafragma.
- Enfocar primero con el tornillo macrométrico y, luego, con el micrométrico,
siempre moviendo los dispositivos hacia arriba.
- Mantener el foco mediante el manejo continuo del tornillo micrométrico.

• OBSERVACIÓN DE LA LETRA MINÚSCULA.


- Rotar el revolver hasta el objetivo de menor aumento 5x, baje el tubo hasta que
el lente frontal quede muy cerca de la platina, abra el diafragma hasta la mitad.
¿Qué se observa?
- Limpiar una lámina portaobjeto con un pedazo de papel lente, sostener la
lámina sólo por los bordes.
- Con el gotero verter una gota de agua en el centro de la lámina, encima colocar
la letra “a” o la fibra de lana.
- Colocar la laminilla sobre la muestra.
- Colocar la preparación sobre la platina.
- Mirar por el ocular y baje suavemente el tubo utilizando el tornillo macrométrico
hasta que la imagen esté en el campo visual. ¿Qué se observa?
- Proceder a la focalización micrométrica. Observar qué ocurre con la imagen.
- Mirando por el ocular, trasladar la muestra a la izquierda o derecha y observar
hacia dónde aparentemente se desplaza la imagen.
- Para una magnificación mayor, cambiar el objetivo a 10x y 40x, utilizando la
mano izquierda, mejorar la imagen con el tornillo micrométrico.
- El cambio de objetivo o de preparación exige un nuevo control del diafragma.
- Repetir los pasos desde el número 3 hasta el final, colocando la fibra de
algodón. ¿Qué se observa?

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CUESTIONARIO.

1. Preparar una reseña histórica del microscopio.


2. ¿Cuál era la situación social que se vivía en Europa a fines del siglo XVI e inicios
del siglo XVII?
3. ¿Cuál fue la importancia del invento del microscopio para la sociedad de aquel
tiempo?
4. ¿Qué descubrimientos científicos ha permitido el uso del microscopio en el
presente siglo?
5. Definir: Imagen Real, Imagen Virtual, Poder de Resolución, Índice de Refracción.

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BIOMOLÉCULAS

HERRAMIENTAS /
N° ORDEN DE EJECUCIÓN
INSTRUMENTOS
- Glucosa al 1%
1. Reconocer lapresencia de las - Fructosa al 1%
principales biomoléculas inorgánicas. - Sacarosa al 1%
2. Determinar experimentalmente el
- Maltosa al 1%
comportamiento químico de los
- Almidón al 1%
carbohidratos.
- Reactivo de Seliwanoff
- Reactivo de Benedict
- Lugol
- Tubos de ensayo
- Pipetas de 5 ml.

DENOMINA

V. BIOMOLÉCULAS: RECONOCIMIENTO DEL AGUA Y


CARBOHIDRATOS.

TECNOLOGÍAS AMBIENTALES Tiempo: 2 Hrs. HT:5/18

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ANÁLISIS BIOLÓGICO-MICROBIOLÓGICO

5.1. PROCEDIMIENTOS.

Reconocimiento del agua.


Colocar una hoja tierna y fresca en el fondo de un tubo de ensayo seco. Calentar
el tubo observar y hacer el esquema respectivo.

Determinación de los monosacáridos mediante los procesos químicos de


reducción.
Fundamento:
Cuando un azúcar reductor se somete a la acción del calor en el medio alcalino del
reactivo de Benedict sufre fenómenos de enolización y al fragmentarse su molécula se
forman cuerpos fuertemente reductores para el cobre transformándolo en ión cuproso
(Cu+), el que a su vez reacciona con los iones OH- del medio para dar óxido cuproso
(Cu2O) de color ladrillo.

Preparar 8 tubos como selo indica el cuadro:

TUBO 1 2 3 4 5 6 7 8
Solución 1% Extracto Extracto
de
carbohidratos y Glucosa Fructosa Sacarosa Maltosa Almidón de de
extractos 1 ml. 1 ml. 1 ml. 1 ml. 1 ml. pasas papa
vegetales 1 ml. 1 ml.
Agua destilada 1 ml.
Reactivo de
Benedict 0.5 ml. 0.5ml. 0.5ml. 0.5ml. 0.5ml. 0.5 ml. 0.5 ml. 0.5ml.

Resultados:

Marcar los tubos e introducirlos en un baño de agua hirviendo durante 5 minutos.


Anotar cada minuto las diferencias de coloración en cada tubo e interpretar sus
observaciones.

Diferenciación entre aldosas y cetosas.


Fundamento:
El resorcinol contenido en el reactivo de Seliwanoff, reacciona con altas
concentraciones de furfural y derivados presente en las cetosas, para dar un
compuesto de color rojo cereza.

Preparar 3 tubos de ensayo y proceda de acuerdo al cuadro siguiente:

TUBO 1 2 3
Solución 1% del Glucosa Fructosa
carbohidratos 0.5 ml. 0.5 ml. Extracto de pasas
Reactivo de Seliwanoff 2.5 ml. 2.5 ml. 3 gotas
Resultados

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ANÁLISIS BIOLÓGICO-MICROBIOLÓGICO

Llevar al baño María a 100° C por 3 minutos. Enfriar e interpretar sus observaciones.

Determinación de los polisacáridos. Mediante su comportamiento frente al yodo.


Fundamento.
Los fenómenos de adsorción entre el almidón y el yodo origina la formación de
complejos de yoduro de almidón de color azul negruzco.

Preparar 2 tubos de ensayo y proceder de acuerdo al cuadro siguiente:

TUBO 1 2
Solución 1% del carbohidratos Almidón 2 ml. Maltosa 2 ml.
Lugol 3 gotas 3 gotas
Resultados:

Colocar los tubos en el baño María a 100° C durante 5 minutos.


Observar la presencia o no de color de cada tubo.

Reconocimiento de polisacáridos.
- Lavar bien la “papa”, luego retirar la cáscara con una cuchilla.
- Realizar cortes en formas rectangulares.
- Colocar tres de estos trozos en un vaso de precipitado con agua y llevarlo a hervor;
otros tres trozos ponerlos en agua y otros tres dejarlos sobre una Placa Petri.
- Una vez hervidos los tres trozos de papa, extraerlos y colocarlos en una Placa Petri.
- A las tres muestras de papa (hervidas, remojadas y dejadas al ambiente),
agregarles unas gotas de lugol. ¿ Qué es lo que sucede? Anotar observaciones.

CUESTIONARIO.

1. ¿A qué se denomina azúcar reductor?


2. ¿Cuál es la diferencia entre una aldosa y una cetosa?
3. ¿Cuál es la importancia de los carbohidratos en el proceso de respiración celular?

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ANÁLISIS BIOLÓGICO-MICROBIOLÓGICO

HERRAMIENTAS /
N° ORDEN DE EJECUCIÓN
INSTRUMENTOS
➢ Cloroformo.
1. Determina experimentalmente el comportamiento ➢ Éter etílico.
químico de los lípidos y proteínas, con la ayuda ➢ Agua destilada.
de reacciones cualitativas. ➢ Sudan III.
➢ Reactivo de Biuret.
➢ Tubos de ensayo.
➢ Beaker.
➢ Pipeta de 5 ml.
➢ Albúmina.
➢ Leche evaporada.
➢ Aceite vegetal.

DENOMINACIÓN
VI. BIOMOLÉCULAS: LÍPIDOS Y PROTEÍNAS.

TECNOLOGÍAS AMBIENTALES Tiempo: 2 Hrs. HT: 6/18

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ANÁLISIS BIOLÓGICO-MICROBIOLÓGICO

6.1. PROCEDIMIENTOS.
Identificación de lípidos.
Solubilidad.
Fundamento. Se basa en la propiedad de los lípidos de ser solubles en solventes
orgánicos proceder de acuerdo al cuadro:

TUBO 1 2 3 4
Agua destilada Alcohol Cloroformo Éter etílico
Solvente
1 ml. 1 ml. 1 ml. 1 ml.
Aceite 3 gotas 3 gotas 3 gotas 3 gotas
Resultados

Utilizando el mecanismo de coloración: Sudan III.


Fundamento. Se basa en la propiedad de solubilidad de una sustancia orgánica en aceite.
El reactivo es soluble en los lípidos dando una coloración rosada.
Proceder de acuerdo al cuadro siguiente:
TUBO 1 2 3

Compuestos Aceite vegetal 1 ml. Leche Evaporada 1 ml. Agua Destilada 1 ml.

Sudan III 1 ml. 1 ml. 1 ml.

Resultados

Agitar fuertemente cada tubo y dejar en reposo. Interprete sus resultados.

Identificación de proteínas.
Mediante la detección de enlaces peptídico en medio alcalino.
Fundamento: Se basa en la formación de un enlace de coordinación del ión cobre con
los enlaces peptídicos presentes en la proteína en un medio fuertemente alcalino (sulfato
de cobre al 1 %, Biuret), resultando un complejo de color violeta.

Proceder de acuerdo al cuadro siguiente:


TUBO 1 2 3
Albúmina al 1% Leche Evaporada Agua Destilada
Compuestos
1 ml. 1 ml. 1 ml.

Reactivo de Biuret 1 ml. 1 ml. 1 ml.

Resultados

CUESTIONARIO.

1. ¿Por qué los lípidos son insolubles en agua?


2. ¿En qué consiste el enlace de coordinación en las proteínas?
3. ¿Qué función cumplen los componentes químicos de la materia viva
reconocidos en la práctica?

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ANÁLISIS BIOLÓGICO-MICROBIOLÓGICO

HERRAMIENTAS/
N° ORDEN DE EJECUCIÓN INSTRUMENTOS
- Microscopio compuesto.
1. Observación de células procariotas y - Láminas portaobjeto y cubreobjeto.
eucariotas con diferentes tinciones. - Papel lente.
2. Reconocimiento de las formas de - Pinzas metálicas.
células procariotas. - Solución de NaCl al 0.9 %
3. Reconocimiento de las partes de la célula - Violeta de genciana.
eucariota vegetal. - Lugol.
- Azul de metileno, Fucsina básica.
- Solución de alcohol-acetona.

DENOMINACIÓN
VII. CÉLULAS PROCARIOTAS Y CÉLULAS EUCARIOTAS.

TECNOLOGÍAS AMBIENTALES Tiempo: 4 Hrs. HT: 7/18

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ANÁLISIS BIOLÓGICO-MICROBIOLÓGICO

7.1. PROCEDIMIENTOS.

Cocos Bacilos Espiroquetas

Formas bacterianas más comunes: Cocos, bacilos y espiroquetas.

OBSERVACIÓN DE CÉLULAS PROCARIOTAS FIJADAS Y COLOREADAS.


- Identificar la lámina portaobjeto escribiendo en 1/3 de la misma “CE” equivalente
a “coloración especial”, y hacer un círculo en la parte posterior central de los
2/3 restantes de la lámina.
- Colocar una gota de la solución de NaCl al 0,9% sobre la lámina portaobjeto
utilizando la pipeta Pasteur provista de un chupón.
- Obtener una muestra de sarro dental con ayuda de un palillo mondadientes.
- Realizar un frotis fino (seguir las instrucciones del profesor), fijar con ayuda
del mechero de Bunsen.
- Cubrir la preparación con la solución de violeta de genciana por 1 minuto.
- Lavar con agua corriente.
- Agregar Lugol por 1 minuto.
- Lavar con alcohol-acetona por 1 minuto.
- Lavar con agua.
- Agregar Fucsina básica por 1 minuto.
- Secar la lámina al medio ambiente o con ayuda del mechero de Bunsen.
- Enfocar la preparación al microscopio observando primero con los objetivos
secos de 10X, luego 40X y finalmente con el objetivo de inmersión de 100x.
Observar la presencia de células bacterianas muertas y las principales formas
diferentes de las mismas como son cocos, bacilos y espiroquetas. Estas se pueden
visualizar de color violeta o de color rojo, las primeras serán denominadas
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ANÁLISIS BIOLÓGICO-MICROBIOLÓGICO

Gram positivas y las segundas Gram negativas.

CÉLULA EUCARIOTA.
Célula vegetal.
Extraer el tejido epidémico del catáfilo de cebolla, colorear con lugol, cubrir la
preparación con la laminilla, observar reconocer la pared celular, a menos y
mayor aumento citoplasma, núcleo, nucleolo y otros.

Célula animal.
Obtener la muestra de mucosa bucal con un palillo
mondadiente y montar, sobre la lámina portaobjeto,
con una gota de azul de metileno.

Observar a 10X y 40 X la membrana celular, el núcleo


y el nucleolo.

CUESTIONARIO.
1. ¿Cuál habría sido el motivo por el que se produjo la endosimbiosis?
2. ¿Qué ventaja evolutiva representa la presencia de una doble membrana rodeando al
núcleo?
3. ¿Cuáles son las semejanzas y diferencias entre las células procariotas y eucariotas?
4. ¿Por qué son importantes las bacterias en la vida de nuestro planeta?

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ANÁLISIS BIOLÓGICO-MICROBIOLÓGICO

HERRAMIENTAS /
N° ORDEN DE EJECUCIÓN INSTRUMENTOS
1 Reconocimiento de cromoplastos y sus pigmentos - Muestra de Elodea, zanahoria
presentes en las células vegetales. y papa.
2 Identifica las mitocondrias como centrales de - Reactivo de Lugol.
energía de las células. - Microscopio compuesto.
- Láminas porta y cubre
objetos.
- Colorante Verde de Janus.
- Gotero.
DENOMINACIÓN
VIII. ORGANELAS CELULARES.

TECNOLOGÍAS AMBIENTALES Tiempo: 4 Hrs. HT: 8/18

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ANÁLISIS BIOLÓGICO-MICROBIOLÓGICO

8.1. PROCEDIMIENTO.

Célula vegetal.
- Colocar una hoja en una lámina portaobjeto, agregar una gota de agua y cubrir con
laminilla, observar con los objetivos 10X y 40 X. Identificar los cloroplastos estructuras
ovoides con clorofila (pigmento verde).
- Realizar un corte transversal de la raíz tuberosa de la “zanahoria” Daucus carota
de agua observar a 10X y 40 X e identificar los cromoplastos estructuras de diferentes
formas que contienen un pigmento de color naranja el caroteno.

Célula animal. Para observar las mitocondrias, obtener la muestra del carrillo interno
de la mucosa epitelial, con un extremo de la lámina portaobjeto limpia.
- Hacer un frotis de la muestra sobre otra lámina portaobjeto.
- Secar la muestra a temperatura ambiente.
- Cubrir la preparación con el colorante Verde Janus durante 5 minutos.
- Eliminar el exceso del colorante, no lavar la lámina, y dejar secar al medio ambiente.
- Observar al microscopio con objetivos de 10 y 40x.
- Hacer un esquema de las observaciones.

CUESTIONARIO.

1. Describir las características y funciones de las estructuras celulares observadas.


2. ¿Cómo se habrían originado las organelas?

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ANÁLISIS BIOLÓGICO-MICROBIOLÓGICO

MEMBRANA CELULAR

HERRAMIENTAS /
N° ORDEN DE EJECUCIÓN INSTRUMENTOS
- Láminas y laminillas.
1. Comprobar el proceso de difusión. - Beakers.
- Sulfato de cobre en cristales.
2. Interpretar los movimientos pasivos de sustancias - Solución de NaCl 5%
a través de las membranas celulares (ósmosis). - Microscopio.
- Alcohol yodado.
Describir e interpretar el comportamiento de - Gradilla.
3. células vegetales y animales en soluciones - Solución de NaCl al
hipotónicas, isotónicas e hipertónicas. 0.9% (suero fisiológico).
- Solución de NaCl al 0.2%

DENOMINACIÓN
IX. MOVIMIENTO DE SUSTANCIAS A TRAVÉS DE MEMBRANAS
CELULARES.

TECNOLOGÍAS AMBIENTALES Tiempo: 4 Hrs. HT: 9/18

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ANÁLISIS BIOLÓGICO-MICROBIOLÓGICO

9.1. PROCEDIMIENTOS.

DIFUSIÓN:
- Colocar un cristal de sulfato de cobre en un tubo de ensayo y llenarlo con agua
destilada.
- Dejar en reposo y cada 16 minutos medir la distancia utilizando papel milimetrado (o
regla).
- Dibujar y calcular la velocidad de difusión del sulfato de cobre en el agua.

ÓSMOSIS EN CÉLULAS VEGETALES:


- Separar el tejido epidérmico del envés de la hoja de Tradescantia sp., obtener tres
porciones de dicho tejido y colocar en láminas diferentes y adicionar una gota de
solución de NaCl 0.2 %, 0.9% y 5%, respectivamente.
- Observar a 10X y 40X, interpretar los resultados.
- Cortar en cruz tres ejes de inflorescencias de “diente de león” y colocarlos en vasos
de precipitados que contengan las soluciones de NaCl al 0.2%, 0.9% y 5%.
- Observar e interpretar los resultados.

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ANÁLISIS BIOLÓGICO-MICROBIOLÓGICO

ÓSMOSIS EN CÉLULAS ANIMALES:


- Desinfectar el dedo medio con el algodón embebido en la solución de alcohol
yodado, esperar que se volatilice.
- Utilizando la lanceta, realizar la punción del dedo.
- Depositar una gota de sangre en tres láminas.
- A cada lámina adicionar una gota de solución NaCl 0.2%, 0.9% y 5%,
respectivamente.
- Cubrir cada preparación con la laminilla, evitando la formación de burbujas de aire.
- Observar al microscopio con el objetivo de 10x y 40x.

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ANÁLISIS BIOLÓGICO-MICROBIOLÓGICO

CUESTIONARIO.
1. Enumerar las diferencias y similitudes entre la difusión y la ósmosis.
2. De las soluciones utilizadas identifique y explique cuál es isotónico, hipotónico e
hipertónico.
3. ¿Cómo la pared celular afecta el comportamiento osmótico de la célula?
4. Explicar por qué la difusión y la osmosis son importantes para las células.
5. ¿Cómo se absorben los fármacos a través de una membrana celular?

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ANÁLISIS BIOLÓGICO-MICROBIOLÓGICO

TEJIDOS VEGETALES

HERRAMIENTAS /
N° ORDEN DE EJECUCIÓN INSTRUMENTOS

1. Identificar los principales tejidos vegetales. - Bisturí, pinza.


- Láminas y laminillas.
- Microscopio compuesto.
- Papel lente.

DENOMINACIÓN
10. TEJIDOS VEGETALES.

TECNOLOGÍAS AMBIENTALES Tiempo: 3 Hrs. HT: 10/18

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ANÁLISIS BIOLÓGICO-MICROBIOLÓGICO

10.1. PROCEDIMIENTOS.
Los cortes histológicos que se realizan con mayor frecuencia son:
- Corte superficial: es el corte que se realiza realizando un dobles en la hoja y pasando
de manera superficial la cuchilla por la hoja de tal manera que se obtenga un
pedacito de hoja.
- Corte transversal: primero se identifican el largo y ancho para luego realizar el corte
de manera transversal al largo de la hoja o de manera transversal al ancho de la
misma
- Corte longitudinal: es el corte que se realiza de manera paralela a lo largo de la
estructura (hoja, tallo o raíz).

Tejidos vegetales:
- Realizar corte superficial de la hoja de trébol, hacer el montaje en agua. Observar el
tejido epidérmico.
- Realizar corte transversal de la hoja de trébol y observar tejidos epidérmicos y
parenquimático.
- Realizar corte transversal del tallo de la alfalfa y de álamo e identificar los tejidos
epidérmico, mecánico, parenquimático y conductor.

CUESTIONARIO.
1. ¿Cuáles son las diferencias estructurales y funcionales de los diferentes tejidos
observados?
2. ¿Qué función cumplen la cutícula, los estomas, pelos, vasos leñosos y liberianos?

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ANÁLISIS BIOLÓGICO-MICROBIOLÓGICO

TEJIDOS ANIMALES

HERRAMIENTAS /
N° ORDEN DE EJECUCIÓN INSTRUMENTOS
- Bisturí, pinza.
1. Identificar los principales tejidos animales. - Láminas y laminillas.
- Microscopio compuesto.
- Papel lente.
- Pata de grillo.
- Suero fisiológico.
- Lugol.
- Láminas de tejidos animales.

DENOMINACIÓN
11. TEJIDOS ANIMALES.

TECNOLOGÍAS AMBIENTALES Tiempo: 3 Hrs. HT: 11/18

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ANÁLISIS BIOLÓGICO-MICROBIOLÓGICO

11.1. PROCEDIMIENTOS.

Tejidos animales:
- Colocar al grillo en el frasco letal (algodón con cloroformo).
- Cortar la pata de grillo, retirar la quitina y coger con la pinza una porción del
músculo, colocar en suero fisiológico.
- Disociar con una aguja las fibras musculares y preparar una lámina con una gota de
lugol.
- Observar al microscopio a 10 X y 40X las fibras musculares.
- Realizar esquemas de las observaciones.
- Observar al microscopio las láminas histológicas a 10X y 40X; describir los tipos de
tejido y sus características.

CUESTIONARIO.
1. ¿Cuáles son las diferencias estructurales y funcionales de los diferentes tejidos
observados?
2. Explicar cómo es el proceso de regeneración en cada uno de los tejidos animales,
en caso de sufrir algún daño.

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ANÁLISIS BIOLÓGICO-MICROBIOLÓGICO

REPRODUCCIÓN

HERRAMIENTAS /
N° ORDEN DE EJECUCIÓN INSTRUMENTOS
- Levadura de cerveza
1. Estudia y valora las diferentes formas de reproduc- Saccharomyces cerevisae.
ción de los seres vivos. - Láminas preparadas con
gametos (ovocitos y
espermatozoides) fijados.
- Gotero.
- Microscopio compuesto.
- Papel lente.
- Estiletes.
- Porta- y cubre-objetos.
- Azul de lactofenol.

DENOMINACIÓN
REPRODUCCIÓN.

TECNOLOGÍAS AMBIENTALES Tiempo: 2 Hrs. HT: 12/18

CENTRO DE TECNOLOGÍAS AMBIENTALES 38


ANÁLISIS BIOLÓGICO-MICROBIOLÓGICO

12.1. PROCEDIMIENTOS.

a) Tomar una porción de la levadura y hacer el montaje en una gota de azul


e lactofenol. Observar la formación de una protuberancia o yema en la superficie
del organismo vegetal unicelular y luego cómo se separa por medio de un
tabique (GEMACIÓN).
b) Utilizando el helecho, hacer el estudio de la historia vital de este organismo:
Identificar la generación esporofítica de la planta; y en él observar: el rizoma
provisto de raíces fibrosas y de varias hojas o frondas, analizar la cara inferior de
estas con ayuda del microscopio. Identificar los esporangios en cada una de las
cuales se producen esporas.
c) Observar e identificar las láminas preparadas con espermatozoides y óvulos.

LEVADURA DE CERVEZA
HELECHO “Pteris vitata” “Saccharomyces cerevisae”
Tipo de Reproducción: Sexual “ESPORAS” Tipo de Reproducción: Asexual

Zona
Pelúcida

Citoplasma

ESPERMATOZOIDE OVOCITO

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ANÁLISIS BIOLÓGICO-MICROBIOLÓGICO

CUESTIONARIO:

1. ¿Cuál es la importancia de la reproducción?


2. ¿Qué ventajas y desventajas encuentran en el proceso de la reproducción asexual y
sexual?
3. ¿Qué es la clonación?
4. ¿Cuál es la función de los gametos humanos en el proceso de perpetuación de la
especie?

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ANÁLISIS BIOLÓGICO-MICROBIOLÓGICO

SERES VIVOS – PARTE I

HERRAMIENTAS /
N° ORDEN DE EJECUCIÓN INSTRUMENTOS
- Láminas portaobjetos.
1. Reconocer las características fundamentales - Láminas cubreobjetos.
de los organismos representantes de cada - Plumón tinta indeleble.
uno de los reinos establecidos en la - Papel lente.
clasificación de Whittaker, desde la - Microscopio compuesto.
perspectiva evolutiva, ecológica y económica.
- Placas Petri.
- Muestra de agua dulce
estancada, con protozoarios.
- Goteros.
- Pinzas, estiletes.
- Cianobacteria (Nostoc).
- Hongos.

DENOMINACIÓN
13. CLASIFICACIÓN DE LOS SERES VIVOS: MONERA, PROTIS Y
FUNGI

TECNOLOGÍAS AMBIENTALES Tiempo: 2 Hrs. HT: 12/18

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ANÁLISIS BIOLÓGICO-MICROBIOLÓGICO

13.1. COMPETENCIA.

Reconoce las características fundamentales de los organismos representantes de cada


uno de los reinos establecidos en la clasificación de Whittaker, desde la perspectiva
evolutiva, ecológica y económica.

13.2. MATERIALES.

- Láminas portaobjeto.
- Laminillas cubreobjeto.
- Plumón de tinta indeleble.
- Papel lente.
- Microscopio compuesto.
- Placas Petri.
- Muestra de agua dulce estancada que contenga protozoarios.
- Goteros, pinza, estiletes, guantes, mascarillas.
- Cianobacteria (Nostoc).
- Hongos microscópicos Penicilium (moho de naranja), Rhizopus (moho negro del pan).
- Hongos macroscópicos Agaricus sp. “champiñones”

13.3. PROCEDIMIENTOS.

• REINO MONERA.
- Preparar una lámina con muestras de Nostoc sp.
- Realizar preparaciones microscópicas del alga azul verde. Observar a mayor y menor
aumento. Identificar los heterocistos, lugar donde se fija el nitrógeno atmosférico.

Heterocistos
Bacterias
• REINO PROTISTA
- Obtener las muestras de agua estancada, en frascos de boca ancha, en una
laguna, charco o acuario.

CENTRO DE TECNOLOGÍAS AMBIENTALES 42


ANÁLISIS BIOLÓGICO-MICROBIOLÓGICO

- Colocar una gota de agua estancada en el centro de la lámina portaobjetos.


- Cubrir cuidadosamente con una laminilla.
- Observar al microscopio a 5x, 10X y 40 X y realizar esquemas de sus
observaciones.

Representantes comunes del Reino Protista: Protozoarios.

Giardia Frontonia Paramecium Ameba


• REINO FUNGI.
- Con el estilete extraer con mucho cuidado una muestra del moho de la naranja y
colocarla en una lámina portaobjeto con una gota de agua destilada cubrir con la
laminilla y observar a menor y mayor aumento. Observar las características más
representativas.
- Realizar el mismo procedimiento con el moho negro del pan. Observar las
características más representativas.

CENTRO DE TECNOLOGÍAS AMBIENTALES 43


ANÁLISIS BIOLÓGICO-MICROBIOLÓGICO

Penicillium sp Rhizopus nigricans

- Colocar la muestra de Agaricus sp. en una placa Petri y describir sus


características.
- Realizar cortes transversal y longitudinal y observar la estructura interna formada
por la estructura de reproducción.

Agaricus campestri

CUESTIONARIO.

1. Señalar las características fundamentales de una célula procariota.


2. ¿Cuál es la importancia económica de las bacterias?
3. ¿Qué protistas (protozoos, algas) se comercializan en el mercado nacional e
internacional y bajo qué presentación?
4. Indicar las características generales de los hongos, enfatizando en su tipo de nutrición.
5. ¿Cuál es la importancia de los hongos?
6. Relacionar las eras geológicas (período precámbrico, paleozoico, mesozoico,
cenozoico, terciario y cuaternario) con la aparición de los diferentes reinos.

CENTRO DE TECNOLOGÍAS AMBIENTALES 44


ANÁLISIS BIOLÓGICO-MICROBIOLÓGICO

SERES VIVOS – PARTE II

HERRAMIENTAS /
N° ORDEN DE EJECUCIÓN INSTRUMENTOS
- Láminas portaobjetos.
1. Reconocer las características fundamentales de - Láminas cubreobjetos.
los organismos representantes de cada uno de - Plumón tinta indeleble.
los reinos establecidos en la clasificación de - Papel lente.
Whittaker, desde la perspectiva evolutiva,
- Microscopio compuesto.
ecológica y económica.
- Placas Petri.
- Muestra de agua dulce
estancada, con protozoarios.
- Goteros.
- Pinzas, estiletes.

DENOMINACIÓN
CLASIFICACIÓN DE LOS SERES VIVOS: PLANTAS Y ANIMALES.

TECNOLOGÍAS AMBIENTALES Tiempo: 2 Hrs. HT: 12/18

CENTRO DE TECNOLOGÍAS AMBIENTALES 45


ANÁLISIS BIOLÓGICO-MICROBIOLÓGICO

14.1. INTRODUCCIÓN.

Los científicos creen que hay alrededor de 10 millones de especies diferentes sobre la
Tierra. Imagina lo difícil que es estudiar y comprender las características, comportamiento
y evolución de todas las especies. Para hacer su trabajo más fácil, los científicos clasifican
a los seres vivos en grupos y subgrupos cada vez más pequeños, basándose en las
semejanzas y diferencias de los organismos.

La taxonomía o sistemática es la que estudia la clasificación de los organismos según


especializaciones. Las principales categorías taxonómicas son: phylum (división o tipo),
clase, orden, familia, género y especie. La taxonomía proporciona información directa e
inferida sobre la estructura del cuerpo y la historia evolutiva respectivamente.

Reino Plantae: Formado por organismos multicelulares, autotróficos; que presentan


células con paredes de celulosa; contienen clorofila a y b y carotenoides como pigmentos
accesorios; almacenan almidón.

Se clasifican como:
➢ Briofitos (División Bryophyta) (hepáticas, antocerotes y musgos): son plantas de
ambientes húmedos, relativamente poco diferenciadas, sin raíces verdaderas
y sin tejidos vasculares diferenciados; se reproducen por esporas; tienen espermas
móviles, nadadoras en agua libre.
➢ Traqueofitos o plantas vasculares: generalmente están diferenciadas en tallos, hojas y
raíces verdaderas, con tejidos vasculares diferenciados. Se clasifican a su vez en
criptógamas -plantas vasculares inferiores que se reproducen por esporas- y
fanerógamas –plantas vasculares superiores que se reproducen por semillas:
gimnosperma “semilla desnuda” y angiosperma “óvulo cubierto”.

Reino Animalia: Los integrantes de este Reino son organismos multicelulares, que se
alimentan por ingestión de moléculas orgánicas.

Se clasifican en: Parazoa -sin tejidos verdaderos, representado por el Phylum Porifera
(Esponjas de mar)- y Eumetazoa -con tejidos verdaderos constituido a su vez por 15 phyla:
Cnidaria (hydra, corales, anémonas, medusas), Ctenophora (cintas de mar),
Platyhelminthes (gusanos planos: Planaria, chiripas, solitaria), Nemertea (gusanos con
trompa o proboscis), Rotifera (rotíferos), Mollusca (moluscos), Nematoda (gusanos
redondos, como la lombriz del cerdo o Ascaris lumbricoide), Annelida (gusanos
segmentados: Lombriz de tierra), Onychophora (gusanos caminantes), Arthropoda
(animales invertebrados con extremidades articuladas: escorpiones, arañas, crustáceos,
milípedos, centípedos, insectos), Phoronida (forónidos), Bryozoa (briozoarios),
Brachiopoda (concha lámpara), Echinodermata (estrellas del mar, dólares de arena,
pepinos de mar, etc.) y finalmente, Chordata (cordados: tunicados, amphioxus,
vertebrados).
14.2. COMPETENCIA.

CENTRO DE TECNOLOGÍAS AMBIENTALES 46


ANÁLISIS BIOLÓGICO-MICROBIOLÓGICO

Reconoce las características fundamentales de los organismos representantes de cada


uno de los reinos de plantas y de animales, establecidos en la clasificación de Whittaker,
desde la perspectiva evolutiva, ecológica y económica.

14.3. MATERIALES.
- Láminas portaobjeto.
- Laminillas cubreobjeto.
- Papel lente.
- Microscopio compuesto.
- Placas Petri.
- Goteros, pinza, estiletes, guantes.
- Hojas de “trébol”.
- Tallos de “alfalfa”.
- Tallo y ramillas de “alamos”.
- Laminas fijadas de tejidos animales.

14.4. PROCEDIMIENTOS.

REINO PLANTAE.
- Preparar diferentes muestras de vegetales. Briofitos y Traqueofitos.
- Dibujar las muestras representantes de este reino.
- Briofitos (División Bryophyta) (hepáticas, antocerotes y musgos):

Traqueofitas o plantas vasculares: Generalmente están diferenciadas en tallos, hojas y


raíces verdaderas, con tejidos vasculares diferenciados.

CENTRO DE TECNOLOGÍAS AMBIENTALES 47


ANÁLISIS BIOLÓGICO-MICROBIOLÓGICO

Se clasifican a su vez en criptógamas -plantas vasculares inferiores que se reproducen


por esporas- y fanerógamas –plantas vasculares superiores que se reproducen por
semillas: gimnosperma “semilla desnuda” y angiosperma “óvulo cubierto”.

REINO ANIMALIA.

Dibujar las muestras representantes de este reino.

Ejemplos:
Esponjas de mar. Arañas y escorpiones.
Anemonas. Cordados (anfibios y vertebrados).
Moluscos.

Esponjas de mar Anemonas

CENTRO DE TECNOLOGÍAS AMBIENTALES 48


ANÁLISIS BIOLÓGICO-MICROBIOLÓGICO

Moluscos

Arañas y Escorpiones

CUESTIONARIO.

1. Señalar las características fundamentales y diferencias de la célula vegetal y animal.


2. Indicar las características generales de los vegetales, enfatizando en su tipo de
metabolismo.
3. ¿Cuál es la importancia de las plantas en la vida del hombre?

CENTRO DE TECNOLOGÍAS AMBIENTALES 49


BIBLIOGRAFÍA
1. Alberts, B. Biología Molecular de la Célula, Tercera Edición. Barcelona. Editorial
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