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ANÁLISIS BIOLÓGICO-
MICROBIOLÓGICO
HERRAMIENTAS /
N° ORDEN DE EJECUCIÓN
INSTRUMENTOS
1. Capacitar a os participantes en el orden, ➢ Artículos de vidrio.
limpieza y ➢ Equipos y
cuidados que se debe tener en un laboratorio accesorios.
de Biología. ➢ Reactivos.
DENOMINACIÓN
1.1. INTRODUCCIÓN.
El laboratorio debe ser un lugar seguro para trabajar donde no se deben permitir
descuidos e indisciplina. Para ello se tendrán siempre presente los posibles riesgos
asociados al trabajo con materiales peligrosos. Nunca hay excusa para los accidentes
en un laboratorio bien equipado en el cual trabaja personal bien informado.
1.2. COMPETENCIAS.
Capacitar al alumnado en el orden, limpieza y cuidados que se debe tener en un
laboratorio de Biología.
1.3. MATERIALES.
- Mandil o guardapolvo de color blanco.
- Implementos de seguridad.
- Guía y cuaderno de apuntes.
1.4. PROCEDIMIENTO.
A continuación se exponen una serie de normas que deben conocerse y seguirse en el
laboratorio:
durante su utilización los tapones deben depositarse siempre boca arriba sobre la
mesa.
- No deben manipularse jamás productos o disolventes inflamables cerca a
mecheros.
- Si algún reactivo se derrama, debe retirarse inmediatamente dejando el lugar
perfectamente limpio. Las salpicaduras de sustancias básicas deben neutralizarse
con un ácido débil (por ejemplo, Ácido cítrico) y las de sustancias ácidas con
una base débil (bicarbonato sódico).
- Cuando se tengan dudas sobre las precauciones de manipulación de algún
producto debe consultarse al profesor antes de proceder a su uso.
- No calentar nunca enérgicamente una disolución. La ebullición debe ser siempre
suave.
- El mechero debe cerrarse, una vez utilizado, tanto de la llave del propio
mechero como la toma del gas de la mesa o si es manual tapándolo.
- Las disoluciones y recipientes calientes deben manipularse con cuidado.
- Para la introducción y extracción de recipientes de hornos y estufas deben
utilizarse las pinzas y guantes adecuados.
- Las heridas y quemaduras deben ser tratadas inmediatamente. En el caso de
salpicaduras de ácidos sobre la piel lavar inmediatamente con agua abundante,
utilizando las duchas instaladas y teniendo en cuenta que en el caso de ácidos
concentrados la reacción con el agua puede producir calor. Es conveniente
retirar la ropa para evitar que el corrosivo quede atrapado entre la ropa y la piel.
- Deben conocerse la situación específica de los elementos de seguridad (lavaojos,
ducha, extintor, salidas de emergencia,...) En el laboratorio así como todas las
indicaciones sobre seguridad expuestas en el laboratorio.
- No debe llevarse a la boca ningún material de laboratorio; si algún reactivo es
accidentalmente ingerido, avise de inmediato al Profesor o a la persona
encargada.
1.7. GASES.
- Las reacciones en las que se prevea un desprendimiento de gases, deben
realizarse siempre en una cámara extractora.
- No se deben oler directamente los productos químicos, si debe realizarse,
abanicarse hacia sí con la mano.
CUESTIONARIO.
MATERIALES DE LABORATORIO
HERRAMIENTAS /
N° ORDEN DE EJECUCIÓN INSTRUMENTOS
1. Principales materiales y equipos de laboratorio. - Artículos de vidrio.
2. Reconocimiento de las partes del microscopio - Equipos y accesorios.
óptico compuesto - Reactivos.
- Disponibles en el laboratorio.
DENOMINACIÓN
2.1. COMPETENCIAS.
Familiarizar al estudiante con los diversos materiales y reactivos necesarios para el
desarrollo de las diferentes prácticas.
Distinguir las partes constitutivas del microscopio.
2.2. MATERIALES.
- Todo material de vidrio, de metal, de porcelana; equipos o aparatos disponibles
en el laboratorio de Biología.
- Todos los reactivos sólidos y líquidos disponibles en el laboratorio.
CUESTIONARIO.
MICROSCOPÍA
HERRAMIENTAS /
N° ORDEN DE EJECUCIÓN
INSTRUMENTOS
1. Descripción de las partes del microscopio. - Lupa.
2 Descripción de las partes del estereoscopio. - Microscopio compuesto.
- Estereoscopio
- Láminas portaobjeto.
- Laminillas cubreobjeto.
- Papel lente.
- Fibras de algodón.
- Tijeras.
- Frasco gotero con
agua corriente.
- Pinzas metálicas.
DENOMINACIÓN
A. El sistema de soporte.
B. El sistema de aumento.
C. El sistema de iluminación.
D. El sistema de ajuste.
Los objetivos (5) que se ponen cada vez en servicio, por rotación del revolver
portaobjetivos, proyectan en el diafragma del ocular una imagen de la preparación
colocada en la platina (3). Esta imagen presenta inversión lateral y horizontal, la cual
se observa con el ocular como si se tratase de una lupa. Para enfocar dicha imagen
ha de ajustarse convenientemente la distancia entre el objetivo y el objeto. A tal fin se
utilizan dos mecanismos distintos, el mando aproximado del macrométrico (11) y el
enfoque de precisión con el micrométrico (12). En los microscopios modernos, ambos
mandos forman un solo conjunto. La platina (3) puede ser fija o de movimiento vertical
Consta de cuatro pequeños espejos, colocados de tal forma que permiten el desvío
de las imágenes correspondientes a cada ojo puestas una al lado de la otra. Así al
verse una encima de la otra da el efecto tridimensional o estereoscópico. Para
poder ajustarse al tamaño de diferentes imágenes, el instrumento tiene un eje o
pivote que altera el grado de separación
CUESTIONARIO.
1. Dibujar e identificar las partes del microscopio y estereoscopio.
2. Graficar cómo se genera la imagen en un microscopio simple y en uno compuesto.
3. Preparar una tabla indicando, al menos, 5 muestras que pueden observarse con
cada uno de los tipos de microscopio mencionados.
HERRAMIENTAS /
N° ORDEN DE EJECUCIÓN
INSTRUMENTOS
- Lupa.
1. Empleo de la lupa. - Microscopio compuesto.
2. Empleo y cuidado del microscopio. Observación - Láminas portaobjeto.
3. de muestras biológicas. - Laminillas cubreobjeto.
- Papel lente.
- Tiras de papel
periódico impreso.
- Fibras de algodón.
- Tijeras.
- Frasco gotero con
agua corriente.
- Pinzas metálicas.
DENOMINACIÓN
IV. MANEJO DEL MICROSCOPIO.
4.1. PROCEDIMIENTO.
CUESTIONARIO.
BIOMOLÉCULAS
HERRAMIENTAS /
N° ORDEN DE EJECUCIÓN
INSTRUMENTOS
- Glucosa al 1%
1. Reconocer lapresencia de las - Fructosa al 1%
principales biomoléculas inorgánicas. - Sacarosa al 1%
2. Determinar experimentalmente el
- Maltosa al 1%
comportamiento químico de los
- Almidón al 1%
carbohidratos.
- Reactivo de Seliwanoff
- Reactivo de Benedict
- Lugol
- Tubos de ensayo
- Pipetas de 5 ml.
DENOMINA
5.1. PROCEDIMIENTOS.
TUBO 1 2 3 4 5 6 7 8
Solución 1% Extracto Extracto
de
carbohidratos y Glucosa Fructosa Sacarosa Maltosa Almidón de de
extractos 1 ml. 1 ml. 1 ml. 1 ml. 1 ml. pasas papa
vegetales 1 ml. 1 ml.
Agua destilada 1 ml.
Reactivo de
Benedict 0.5 ml. 0.5ml. 0.5ml. 0.5ml. 0.5ml. 0.5 ml. 0.5 ml. 0.5ml.
Resultados:
TUBO 1 2 3
Solución 1% del Glucosa Fructosa
carbohidratos 0.5 ml. 0.5 ml. Extracto de pasas
Reactivo de Seliwanoff 2.5 ml. 2.5 ml. 3 gotas
Resultados
Llevar al baño María a 100° C por 3 minutos. Enfriar e interpretar sus observaciones.
TUBO 1 2
Solución 1% del carbohidratos Almidón 2 ml. Maltosa 2 ml.
Lugol 3 gotas 3 gotas
Resultados:
Reconocimiento de polisacáridos.
- Lavar bien la “papa”, luego retirar la cáscara con una cuchilla.
- Realizar cortes en formas rectangulares.
- Colocar tres de estos trozos en un vaso de precipitado con agua y llevarlo a hervor;
otros tres trozos ponerlos en agua y otros tres dejarlos sobre una Placa Petri.
- Una vez hervidos los tres trozos de papa, extraerlos y colocarlos en una Placa Petri.
- A las tres muestras de papa (hervidas, remojadas y dejadas al ambiente),
agregarles unas gotas de lugol. ¿ Qué es lo que sucede? Anotar observaciones.
CUESTIONARIO.
HERRAMIENTAS /
N° ORDEN DE EJECUCIÓN
INSTRUMENTOS
➢ Cloroformo.
1. Determina experimentalmente el comportamiento ➢ Éter etílico.
químico de los lípidos y proteínas, con la ayuda ➢ Agua destilada.
de reacciones cualitativas. ➢ Sudan III.
➢ Reactivo de Biuret.
➢ Tubos de ensayo.
➢ Beaker.
➢ Pipeta de 5 ml.
➢ Albúmina.
➢ Leche evaporada.
➢ Aceite vegetal.
DENOMINACIÓN
VI. BIOMOLÉCULAS: LÍPIDOS Y PROTEÍNAS.
6.1. PROCEDIMIENTOS.
Identificación de lípidos.
Solubilidad.
Fundamento. Se basa en la propiedad de los lípidos de ser solubles en solventes
orgánicos proceder de acuerdo al cuadro:
TUBO 1 2 3 4
Agua destilada Alcohol Cloroformo Éter etílico
Solvente
1 ml. 1 ml. 1 ml. 1 ml.
Aceite 3 gotas 3 gotas 3 gotas 3 gotas
Resultados
Compuestos Aceite vegetal 1 ml. Leche Evaporada 1 ml. Agua Destilada 1 ml.
Resultados
Identificación de proteínas.
Mediante la detección de enlaces peptídico en medio alcalino.
Fundamento: Se basa en la formación de un enlace de coordinación del ión cobre con
los enlaces peptídicos presentes en la proteína en un medio fuertemente alcalino (sulfato
de cobre al 1 %, Biuret), resultando un complejo de color violeta.
Resultados
CUESTIONARIO.
HERRAMIENTAS/
N° ORDEN DE EJECUCIÓN INSTRUMENTOS
- Microscopio compuesto.
1. Observación de células procariotas y - Láminas portaobjeto y cubreobjeto.
eucariotas con diferentes tinciones. - Papel lente.
2. Reconocimiento de las formas de - Pinzas metálicas.
células procariotas. - Solución de NaCl al 0.9 %
3. Reconocimiento de las partes de la célula - Violeta de genciana.
eucariota vegetal. - Lugol.
- Azul de metileno, Fucsina básica.
- Solución de alcohol-acetona.
DENOMINACIÓN
VII. CÉLULAS PROCARIOTAS Y CÉLULAS EUCARIOTAS.
7.1. PROCEDIMIENTOS.
CÉLULA EUCARIOTA.
Célula vegetal.
Extraer el tejido epidémico del catáfilo de cebolla, colorear con lugol, cubrir la
preparación con la laminilla, observar reconocer la pared celular, a menos y
mayor aumento citoplasma, núcleo, nucleolo y otros.
Célula animal.
Obtener la muestra de mucosa bucal con un palillo
mondadiente y montar, sobre la lámina portaobjeto,
con una gota de azul de metileno.
CUESTIONARIO.
1. ¿Cuál habría sido el motivo por el que se produjo la endosimbiosis?
2. ¿Qué ventaja evolutiva representa la presencia de una doble membrana rodeando al
núcleo?
3. ¿Cuáles son las semejanzas y diferencias entre las células procariotas y eucariotas?
4. ¿Por qué son importantes las bacterias en la vida de nuestro planeta?
HERRAMIENTAS /
N° ORDEN DE EJECUCIÓN INSTRUMENTOS
1 Reconocimiento de cromoplastos y sus pigmentos - Muestra de Elodea, zanahoria
presentes en las células vegetales. y papa.
2 Identifica las mitocondrias como centrales de - Reactivo de Lugol.
energía de las células. - Microscopio compuesto.
- Láminas porta y cubre
objetos.
- Colorante Verde de Janus.
- Gotero.
DENOMINACIÓN
VIII. ORGANELAS CELULARES.
8.1. PROCEDIMIENTO.
Célula vegetal.
- Colocar una hoja en una lámina portaobjeto, agregar una gota de agua y cubrir con
laminilla, observar con los objetivos 10X y 40 X. Identificar los cloroplastos estructuras
ovoides con clorofila (pigmento verde).
- Realizar un corte transversal de la raíz tuberosa de la “zanahoria” Daucus carota
de agua observar a 10X y 40 X e identificar los cromoplastos estructuras de diferentes
formas que contienen un pigmento de color naranja el caroteno.
Célula animal. Para observar las mitocondrias, obtener la muestra del carrillo interno
de la mucosa epitelial, con un extremo de la lámina portaobjeto limpia.
- Hacer un frotis de la muestra sobre otra lámina portaobjeto.
- Secar la muestra a temperatura ambiente.
- Cubrir la preparación con el colorante Verde Janus durante 5 minutos.
- Eliminar el exceso del colorante, no lavar la lámina, y dejar secar al medio ambiente.
- Observar al microscopio con objetivos de 10 y 40x.
- Hacer un esquema de las observaciones.
CUESTIONARIO.
MEMBRANA CELULAR
HERRAMIENTAS /
N° ORDEN DE EJECUCIÓN INSTRUMENTOS
- Láminas y laminillas.
1. Comprobar el proceso de difusión. - Beakers.
- Sulfato de cobre en cristales.
2. Interpretar los movimientos pasivos de sustancias - Solución de NaCl 5%
a través de las membranas celulares (ósmosis). - Microscopio.
- Alcohol yodado.
Describir e interpretar el comportamiento de - Gradilla.
3. células vegetales y animales en soluciones - Solución de NaCl al
hipotónicas, isotónicas e hipertónicas. 0.9% (suero fisiológico).
- Solución de NaCl al 0.2%
DENOMINACIÓN
IX. MOVIMIENTO DE SUSTANCIAS A TRAVÉS DE MEMBRANAS
CELULARES.
9.1. PROCEDIMIENTOS.
DIFUSIÓN:
- Colocar un cristal de sulfato de cobre en un tubo de ensayo y llenarlo con agua
destilada.
- Dejar en reposo y cada 16 minutos medir la distancia utilizando papel milimetrado (o
regla).
- Dibujar y calcular la velocidad de difusión del sulfato de cobre en el agua.
CUESTIONARIO.
1. Enumerar las diferencias y similitudes entre la difusión y la ósmosis.
2. De las soluciones utilizadas identifique y explique cuál es isotónico, hipotónico e
hipertónico.
3. ¿Cómo la pared celular afecta el comportamiento osmótico de la célula?
4. Explicar por qué la difusión y la osmosis son importantes para las células.
5. ¿Cómo se absorben los fármacos a través de una membrana celular?
TEJIDOS VEGETALES
HERRAMIENTAS /
N° ORDEN DE EJECUCIÓN INSTRUMENTOS
DENOMINACIÓN
10. TEJIDOS VEGETALES.
10.1. PROCEDIMIENTOS.
Los cortes histológicos que se realizan con mayor frecuencia son:
- Corte superficial: es el corte que se realiza realizando un dobles en la hoja y pasando
de manera superficial la cuchilla por la hoja de tal manera que se obtenga un
pedacito de hoja.
- Corte transversal: primero se identifican el largo y ancho para luego realizar el corte
de manera transversal al largo de la hoja o de manera transversal al ancho de la
misma
- Corte longitudinal: es el corte que se realiza de manera paralela a lo largo de la
estructura (hoja, tallo o raíz).
Tejidos vegetales:
- Realizar corte superficial de la hoja de trébol, hacer el montaje en agua. Observar el
tejido epidérmico.
- Realizar corte transversal de la hoja de trébol y observar tejidos epidérmicos y
parenquimático.
- Realizar corte transversal del tallo de la alfalfa y de álamo e identificar los tejidos
epidérmico, mecánico, parenquimático y conductor.
CUESTIONARIO.
1. ¿Cuáles son las diferencias estructurales y funcionales de los diferentes tejidos
observados?
2. ¿Qué función cumplen la cutícula, los estomas, pelos, vasos leñosos y liberianos?
TEJIDOS ANIMALES
HERRAMIENTAS /
N° ORDEN DE EJECUCIÓN INSTRUMENTOS
- Bisturí, pinza.
1. Identificar los principales tejidos animales. - Láminas y laminillas.
- Microscopio compuesto.
- Papel lente.
- Pata de grillo.
- Suero fisiológico.
- Lugol.
- Láminas de tejidos animales.
DENOMINACIÓN
11. TEJIDOS ANIMALES.
11.1. PROCEDIMIENTOS.
Tejidos animales:
- Colocar al grillo en el frasco letal (algodón con cloroformo).
- Cortar la pata de grillo, retirar la quitina y coger con la pinza una porción del
músculo, colocar en suero fisiológico.
- Disociar con una aguja las fibras musculares y preparar una lámina con una gota de
lugol.
- Observar al microscopio a 10 X y 40X las fibras musculares.
- Realizar esquemas de las observaciones.
- Observar al microscopio las láminas histológicas a 10X y 40X; describir los tipos de
tejido y sus características.
CUESTIONARIO.
1. ¿Cuáles son las diferencias estructurales y funcionales de los diferentes tejidos
observados?
2. Explicar cómo es el proceso de regeneración en cada uno de los tejidos animales,
en caso de sufrir algún daño.
REPRODUCCIÓN
HERRAMIENTAS /
N° ORDEN DE EJECUCIÓN INSTRUMENTOS
- Levadura de cerveza
1. Estudia y valora las diferentes formas de reproduc- Saccharomyces cerevisae.
ción de los seres vivos. - Láminas preparadas con
gametos (ovocitos y
espermatozoides) fijados.
- Gotero.
- Microscopio compuesto.
- Papel lente.
- Estiletes.
- Porta- y cubre-objetos.
- Azul de lactofenol.
DENOMINACIÓN
REPRODUCCIÓN.
12.1. PROCEDIMIENTOS.
LEVADURA DE CERVEZA
HELECHO “Pteris vitata” “Saccharomyces cerevisae”
Tipo de Reproducción: Sexual “ESPORAS” Tipo de Reproducción: Asexual
Zona
Pelúcida
Citoplasma
ESPERMATOZOIDE OVOCITO
CUESTIONARIO:
HERRAMIENTAS /
N° ORDEN DE EJECUCIÓN INSTRUMENTOS
- Láminas portaobjetos.
1. Reconocer las características fundamentales - Láminas cubreobjetos.
de los organismos representantes de cada - Plumón tinta indeleble.
uno de los reinos establecidos en la - Papel lente.
clasificación de Whittaker, desde la - Microscopio compuesto.
perspectiva evolutiva, ecológica y económica.
- Placas Petri.
- Muestra de agua dulce
estancada, con protozoarios.
- Goteros.
- Pinzas, estiletes.
- Cianobacteria (Nostoc).
- Hongos.
DENOMINACIÓN
13. CLASIFICACIÓN DE LOS SERES VIVOS: MONERA, PROTIS Y
FUNGI
13.1. COMPETENCIA.
13.2. MATERIALES.
- Láminas portaobjeto.
- Laminillas cubreobjeto.
- Plumón de tinta indeleble.
- Papel lente.
- Microscopio compuesto.
- Placas Petri.
- Muestra de agua dulce estancada que contenga protozoarios.
- Goteros, pinza, estiletes, guantes, mascarillas.
- Cianobacteria (Nostoc).
- Hongos microscópicos Penicilium (moho de naranja), Rhizopus (moho negro del pan).
- Hongos macroscópicos Agaricus sp. “champiñones”
13.3. PROCEDIMIENTOS.
• REINO MONERA.
- Preparar una lámina con muestras de Nostoc sp.
- Realizar preparaciones microscópicas del alga azul verde. Observar a mayor y menor
aumento. Identificar los heterocistos, lugar donde se fija el nitrógeno atmosférico.
Heterocistos
Bacterias
• REINO PROTISTA
- Obtener las muestras de agua estancada, en frascos de boca ancha, en una
laguna, charco o acuario.
Agaricus campestri
CUESTIONARIO.
HERRAMIENTAS /
N° ORDEN DE EJECUCIÓN INSTRUMENTOS
- Láminas portaobjetos.
1. Reconocer las características fundamentales de - Láminas cubreobjetos.
los organismos representantes de cada uno de - Plumón tinta indeleble.
los reinos establecidos en la clasificación de - Papel lente.
Whittaker, desde la perspectiva evolutiva,
- Microscopio compuesto.
ecológica y económica.
- Placas Petri.
- Muestra de agua dulce
estancada, con protozoarios.
- Goteros.
- Pinzas, estiletes.
DENOMINACIÓN
CLASIFICACIÓN DE LOS SERES VIVOS: PLANTAS Y ANIMALES.
14.1. INTRODUCCIÓN.
Los científicos creen que hay alrededor de 10 millones de especies diferentes sobre la
Tierra. Imagina lo difícil que es estudiar y comprender las características, comportamiento
y evolución de todas las especies. Para hacer su trabajo más fácil, los científicos clasifican
a los seres vivos en grupos y subgrupos cada vez más pequeños, basándose en las
semejanzas y diferencias de los organismos.
Se clasifican como:
➢ Briofitos (División Bryophyta) (hepáticas, antocerotes y musgos): son plantas de
ambientes húmedos, relativamente poco diferenciadas, sin raíces verdaderas
y sin tejidos vasculares diferenciados; se reproducen por esporas; tienen espermas
móviles, nadadoras en agua libre.
➢ Traqueofitos o plantas vasculares: generalmente están diferenciadas en tallos, hojas y
raíces verdaderas, con tejidos vasculares diferenciados. Se clasifican a su vez en
criptógamas -plantas vasculares inferiores que se reproducen por esporas- y
fanerógamas –plantas vasculares superiores que se reproducen por semillas:
gimnosperma “semilla desnuda” y angiosperma “óvulo cubierto”.
Reino Animalia: Los integrantes de este Reino son organismos multicelulares, que se
alimentan por ingestión de moléculas orgánicas.
Se clasifican en: Parazoa -sin tejidos verdaderos, representado por el Phylum Porifera
(Esponjas de mar)- y Eumetazoa -con tejidos verdaderos constituido a su vez por 15 phyla:
Cnidaria (hydra, corales, anémonas, medusas), Ctenophora (cintas de mar),
Platyhelminthes (gusanos planos: Planaria, chiripas, solitaria), Nemertea (gusanos con
trompa o proboscis), Rotifera (rotíferos), Mollusca (moluscos), Nematoda (gusanos
redondos, como la lombriz del cerdo o Ascaris lumbricoide), Annelida (gusanos
segmentados: Lombriz de tierra), Onychophora (gusanos caminantes), Arthropoda
(animales invertebrados con extremidades articuladas: escorpiones, arañas, crustáceos,
milípedos, centípedos, insectos), Phoronida (forónidos), Bryozoa (briozoarios),
Brachiopoda (concha lámpara), Echinodermata (estrellas del mar, dólares de arena,
pepinos de mar, etc.) y finalmente, Chordata (cordados: tunicados, amphioxus,
vertebrados).
14.2. COMPETENCIA.
14.3. MATERIALES.
- Láminas portaobjeto.
- Laminillas cubreobjeto.
- Papel lente.
- Microscopio compuesto.
- Placas Petri.
- Goteros, pinza, estiletes, guantes.
- Hojas de “trébol”.
- Tallos de “alfalfa”.
- Tallo y ramillas de “alamos”.
- Laminas fijadas de tejidos animales.
14.4. PROCEDIMIENTOS.
REINO PLANTAE.
- Preparar diferentes muestras de vegetales. Briofitos y Traqueofitos.
- Dibujar las muestras representantes de este reino.
- Briofitos (División Bryophyta) (hepáticas, antocerotes y musgos):
REINO ANIMALIA.
Ejemplos:
Esponjas de mar. Arañas y escorpiones.
Anemonas. Cordados (anfibios y vertebrados).
Moluscos.
Moluscos
Arañas y Escorpiones
CUESTIONARIO.