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PRACTICA N°6

ACTIVIDAD ENZIMATICA DE
LA CATALASA

TOXICOLOGIA Y SEGURIDAD ALIMENTARIA


I. INTRODUCCION
En este presente informe trataremos el tema sobre la actividad de la
enzima de la catalasa, esta enzima esta presente en todos los seres
vivos; la función de la catalasa es oxidar y descomponer el peróxido
de hidrógeno que se crea dentro de las células como se da en el
proceso de metabolismo tanto catabolismo y anabolismo que resultan
ser residuos tóxicos para el organismo transformándola en sustancia
no toxica (H2O2 en H2O y O2 ). La catalasa en él ser humano se
encuentra en el hígado y peroxidasa, que se encuentra en las plantas.
En esta práctica de laboratorio consistió en observar la presencia de
catalasa que está en el hígado de pollo y hojas de planta (muestras),
reactivos como el peróxido de hidrogeno (comúnmente llamada agua
oxigenada) y agua destilada. se llevará dos muestras a tratamiento
térmico y otras dos sin tratamiento térmico ahí veremos cómo influye
la temperatura en la acción de la enzima de la catalasa.

II. CAPACIDADES
• Demuestro la presencia de la enzima catalasa en los tejidos
animales y vegetales

• Analizo la acción enzimática de la catalasa y la formación de


producto en forma de gas O2 y líquido H2O.
• Desarrollo habilidades y destrezas en la manipulación de los
equipos y materiales.

III. FUNDAMENTO

En el organismo existe un sistema de protección antioxidante formado por


enzimas y compuestos de bajo peso molecular. Una de las enzimas que
interviene en la protección y, en consecuencia, en el mantenimiento
del balance oxidante/antioxidante es la catalasa(CAT). La catalasa es una
enzima hemo proteica, que se caracteriza por poseer una estructura
tetramérica, en la cual casa subunidad contiene un grupo Hem (Fe+3)
Esta presenta en la mayoría de las bacterias aeróbicas estrictas,
facultativas y anaeróbicas aerotolerantes. La catalasa manifiesta
actividad de peroxidasa, cataliza la oxidación de sustratos acoplada a
la reducción del peróxido de hidrogeno, para formar agua y oxigeno
molecular.

“El peróxido de hidrogeno es muy toxico para las bacterias. Generalmente


los miroorganismos que carecen de citocromos también carecen de
catalasa, así la mayoría de las bacterias anaerobias no la poseen”
(Rodríguez Cavallini, Evelyn, 2005, p 217)

Para Elmer Koneman (2008) El peróxido de hidrogeno se forma como


uno de los productos finales de oxidación del metabolismo aerobio e los
hidratos de carbono. Si se permite que se acumule, resulta letal para las
células bacterianas. La catalasa convierte el peróxido de hidrogeno en
agua y oxigeno según la siguiente reacción:
2 H2O2 2 H2O +O2

Para José M. Macarulla (1994) La catalasa a nivel celular se localiza en


las mitocondrias y peroxisomas, excepto en los eritrocitos, donde se
encuentra el citosol. Esta enzima es una metaloproteinatetramerica, cuyo
peso molecular se encuentra en el rango de 210-280 kD. Constade 4
subunidades idénticas que se mantienen unidad por interacciones no
covalentes. Cada subunidad contiene un grupo prostético de
protoporfirina IX y el contenido protohémico y el hierro representan un
1,1% y 0,09% respectivamente en el peso molecular total de la enzima

La temperatura puede tener un efecto importante sobre la actividad de las


enzimas y las velocidades de reacción. A bajas temperaturas, el aporte
de calor usualmente aumenta la velocidad de una reacción enzimática,
porque los reactivos tienes mayor energía y pueden alcanzar l nivel de la
energía de activación con mayor facilidad. Sin embargo, si la temperatura
se eleva demasiado, es posible que se desnaturalice la enzima,
provocando la desorganización de su estructura terciaria y la pérdida de
su actividad catalítica.

IV. MATERIALES, EQUIPO Y REACTIVOS


Muestra: 1 hígado de pollo, 2 hojas de planta.

Materiales y equipos: 4 tubos de ensayo, 1 gradilla, 1 pipeta de


10ml, baño maría, 1 cuchillo.

Reactivos: Agua oxigenada (H2O2), agua destilada.


V. PROCEDIMIENTO
✓ El hígado de pollo se pica en pequeños trozos a igual las hojas
de planta

✓ Colocamos cuatro tubos de ensayo del 1 al 4 sobre la gradilla


✓ Luego se introduce las muestras en los tubos de ensayo
✓ Tubo 1: hojas con 4ml de agua destilada.
✓ Tubo 2: hígado con 4ml de agua destilada.

✓ Tubo 3: hojas con 4ml de H2O2


✓ Tubo 4: hígado con 4ml de H2O2
✓ Se observa las reacciones y se registra
✓ Al tubo 1 y 2 lo llevamos a tratamiento térmico (baño maría 60°C
X 10´)

✓ Observo los cambios que ocurrió y se deja enfriar


✓ añado al tubo 1 y 2; 4ml de agua oxigenada (H2O2).
✓ Observo los cambios que se dan en los tubos y se registró
VI. CÁLCULOS Y RESULTADOS

CUADRO 1: CARACTERÍSTICA DE LA MUESTRA ANTES Y


DESPUÉS DE LA APLICACIÓN DE H2O2:

MUESTRA MUESTRA + H2O MUESTRA + H2O2

Apareció poquísimas Hubo una reacción notoria


burbujas presencia de burbujas al
máximo

Hígado de Pollo

No hubo ninguna reacción Hubo presencia de


Hoja de la Planta
pequeñas burbujas
CUADRO 2: CARACTERÍSTICA DE LA MUESTRA CON APLICACIÓN
DE CALOR Y APLICACIÓN DE H2O2:

MUESTRA + CALOR +
MUESTRA MUESTRA + CALOR
H2O2

Solo se apreció pequeñísimas Hubo reacción, pero solo en


burbujas mínima presencia de burbuja

Hígado de pollo

No hubo reacción Poca presencia de burbujas


Hoja de la Planta
VII. DISCUSION DE LOS RESULTADOS
En el hígado de pollo (sin tratamiento térmico) hubo más reacción ya
que hay mayor presencia de la enzima catalasa al estar en contacto
con el peróxido de hidrógeno ahora con el tratamiento térmico se notó
en menor reacción ya que la enzima catalasa al someterse al calor
reduce su actividad entonces la temperatura influye bastante. Estos
datos indican que la actividad de la catalasa tiende a disminuir al
aumentar la temperatura. - Cuando un tejido permanece por encima
de los 100ºC (se cuece) la catalasa se desnaturaliza y pierde su
actividad biológica; Que las bajas temperaturas no afectan a su
actividad, incluso después de congelar el órgano, la catalasa sigue
con su misma funcionalidad. (L. CANCHO; C. GARCÍA; L. MOLANO;
J. MORENO Y F. ALFONSO 2012)
En las hojas de planta no hubo reacción en ambos casos ya que están
producen o tienen en sus células como mecanismos de defente ante
ataque de patógenos en sus tejidos vegetales.
VIII. CONCLUSIONES

en esta práctica lo que se observó y se registró fue que la enzima


catalasa presentes tanto en el tejido animal y vegetal
con agua destilada no hay mucha reacción en cambio con el peróxido
de hidrogeno si la hay, pero solamente en el hígado de pollo hubo
mayor efervescencia, al someterse al calor la actividad de la catalasa
se reduce ya que se desnaturaliza porque es una enzima hemo
proteica
IX. CUESTIONARIO
1. ¿Por qué presenta un intenso burbujeo cuando el hígado entra en
contacto con el H2O2?
Si el hígado se macera, las células se rompen, con lo cual la reacción
con peróxido de hidrógeno se lleva a cabo con más rapidez y la
espuma burbujeo) que resulta se debe al desprendimiento de
oxígeno gaseoso de la mezcla de la reacción. (Brown, T, Bursten, B.
y Le May, H.2004)
2. ¿Por qué la reacción se da en una menor intensidad al entrar en
contacto el H202 con la hoja?

porque estas producen naturalmente en su composición el peróxido


de hidrogeno quiere decir que ya contienen dicha enzima

3. ¿Qué sucede cuando la muestra de hígado se somete a


calentamiento?
La enzima catalasa, al ser una proteína puede desnaturalizarse al
someterse al calor. La desnaturalización de una proteína implica la
alteración de sus estructuras secundaria, terciaria o cuaternaria,
dejando intacta la estructura primaria; el resultado de esto es que la
proteína nativa (como se encuentra en la célula) pierde su actividad
biológica.
X. REFERENCIAS
https://es.scribd.com/doc/80995770/Reaccion-de-higado-de-res-en-
presencia-de-agua-oxigenada
https://issuu.com/danielafonseca38/docs/practica_no.5_bq
http://slideplayer.es/slide/11618275/
http://cprbrozas.juntaextremadura.net/REVISTA_FINAL.pdf
https://es.scribd.com/doc/81014235/Practica-Higado

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