Actividad antimicrobiana de

metabolitos secundarios de
Aspergillus fumigatussensu stricto
sobre cepas clínicas de Staphylococcus
aureus y Streptococcus pneumoniae
- Jorge A Sanchez-Perez, Vilma Béjar Castillo, Fredy

Villanueva Cotrina, José M. Guevara-Granados -

docente: presentado por :

Dr. Hebert Soto Gonzales Anco Mena Cinthia Samanda
Chumbes Manzano, Saray Esther

introduccion
La resistencia a los antibióticos de
bacterias Gram positivas es un
grave problema de salud pública
donde algunas medidas paliativas
pueden encontrarse en los
principios antimicrobianos de
hongos filamentosos
Resultados
Se obtuvo una media de 24,02 ±
2,51 mm y 23,62 ± 4,68 mm de
halo de inhibición sobre
Staphylococcus aureus sensible y
resistente oxacilina,
respectivamente.
Actividad antimicrobiana de metabolitos secundarios de Aspergillus
fumigatussensu stricto sobre cepas clínicas de Staphylococcus
aureus y Streptococcus pneumoniae
RESUMEN INTRODUCCION METODOS RESULTADOS DISCUSIÓN
Aislamiento clínico
Objetivos Metodos de A. fumigatus
compuestos con actividad
Obtencion de un cultivo sensu stricto cepas
antimicrobiana a partir de la Diseño del estudio Muestra Actividad antimicrobiana Staphylococcus aureus y Streptococcus pneumoniae
obtencion fermentación de hongos monosporico. Metabolismo secundarios
filamentosos es una metodología presentes en el extracto crudo evaluó
se obtuvo Primer reporte de la región Extraccion de principios activos de una cepa
La fermentación líquida de A. fumigatus se ampliamente utilizada se realizo de AF 303 clinica
Evaluar la actividad antimicrobiana de realizó en un caldo líquido sulfato, papa y se emplearon
metabolitos secundarios de un aislamiento dextrosa, utilizando acetato de etilo para la Masa (182 mg Evidencia de alcaloides,
clínico de Aspergillus fumigatus sobre extracción de metabolitos
Metabolismos
estudio observacional utilizando en 600 ml) de caldo de esteroles y triterpenos más no
cepas clínicas de Staphylococcus aureus y cultivo secundarios
un aislamiento clínico de A. sesquiterpenlactonas Desarrollo infeccioso del hongo
Streptococcus pneumoniae. agar papa dextrosa (APD) y se La concentración de
luego determinados metabolitos, fumigatus sensu stricto (AF303), incubó por 7 días a 35° C para el conidias en un rango de presento Importancia de evaluar cepas de aislamiento
1ra resiembra resultados
producen
dependiendo de factores: T, pH, obtenido a partir de un paciente 30 cepas clínicas Cepas de
estudio de las características 1x106 ? 4x106 Distintas formas de interacción Caracteristicas del medio clinico por la generacion de metabolismos
disponibilidad o fermentacion en Staphylococcus aureus secundarios
con aspergiloma deStaphylococcus aureus 27 cepas de macroscópicas y microscópicas conidias/mL
Staphylococcus aureus cepas
medio liquido (S.au), 15 sensibles y 15 Streptococcus pneumoniae Actividad antimicrobiana Factores geneticos intrinsecos
Mediante la metodología de disco ATCC 25923 y Streptococcus Streptococcus pneumoniae.
difusión se evaluó la actividad resistentes a meticilina (S.pn), 15 sensibles y 12 no pneumoniae ATCC 20 mm
antimicrobiana considerada como sensibles a penicilina. 49619. (S.au ATCC se evidenció
un halo mayor de 6 mm. 25923)
Agar sulfato, papa, dextrosa (SPG) Factores abióticos Temperatura, pH y nutrientes
actividad solucion twen 80 al 1%, 10 Por un halo de inhibicion
metabolitos subcultivo el cual fue incubado a 37°C por 7 se preparo influenciada
marinas, antimicrobiana, en mL fueron vertidos al (>6mm ATCC (7,8,9)) Cepa ambiental de AF
secundarios de días.
extraccion fuentes endofíticos, de evaluando bacterias Gram +/- y subcultivo 22 mm
Aspergillus identificadas, determinando sus perfiles de Factores bioticos Depredadores y competidores
suelos, entre otros hongos patogenicos (S.pn ATCC
fumigatus susceptibilidad antimicrobianos y se encuentraban
Conclusiones 49619)
conservadas en la Sección de Bacteriología del Instituto
de Medicina Tropical ??Daniel Alcides Carrión??de la
Facultad de Medicina de la Universidad Nacional
Mayor de San Marcos. 37°, pH 7,35 - 7,45, bioelementos
para el ensayo
Extracto Cambian por condiciones en homeostasis
fundamental para el desarrollo Disco difusíon orgánico sobre cepas AF influenciada por factores en
de moléculas precursoras y sobre cepas clínica de neumococo el medio interno Sistema inmunologico
El extracto crudo de A. fumigatus posee totrofase
Para Streptococcus pneumoniae cofactores para la síntesis de
metabolitos secundarios de naturaleza Se enfrentan a las moleculas y celulas
sensibles y no sensibles a penicilina metabolitos secundarios
alcaloide y esteroles insaturados con
las medias fueron de 25,82 ± 4,05
actividad antimicrobiana.
mm y 26,5 ± 5,39 mm, metabolismo de meticilina (15/39) S. au sensibles S. aureus resistentes meticilina (15/30) penicilina (15/27) S. au sensibles S. aureus resistentes penicilina (12/27)
cinetica fases
respectivamente. Aspergillus spp. Extraccion de metabolitos Caracterización química Evaluación
Fermentacion liquida Analisis estadistico
secundarios cualitativa del extracto antimicrobiana Difiere de la hipotesis
Piierde propiedad de generar M.S. con A.
microbiana al estar fuera.
crudo Media estadistica superior a la
24,02 (+/- 0,57 mm) 23,62 (+/- 4,68 mm) 25,82 (+/- 4,05 mm) 26,5 (+/- 5,39 mm)
comparando diferencias de mayoria de estudios
concentración de carbohidratos y conidias pre-fermentacion paso 1 R core team 2013 promedio
conduce a una mayor producción de Existe sinergia entre las molesculas en la
idiofase Posible hipotesis estructura bacteriana
E.c obtenido 1. se paso 3.
metabolitos secundarios, como respuesta 2. preparo
preparo
de adaptacion, depredacion y competencia en un matraz Erlenmeyer se análisis de proporción de varianzas
añadió 45 mL de caldo SPG más En una pera de decantación se disuelto en etanol (v/v) para y diferencia de promedios de dos Determinación estadistica Comparacion multiple de
los 5 mL del cultivo monospórico y mezcló un volumen del caldo de evaluar semicuantitativamente las dejaron secar por 15 minutos y se grupos mediante la prueba de medias (prueba de Tukey)
(p<0,05) Falta de estandarizacion desde la extraccion de
fue incubado a temperatura cultivo mas un volumen de acetato reacciones de identificación de discos estériles en blanco (Whatman conservaron en congelación a -20° hipótesis con una significancia de Principal limitacion M.S. hasta la evaluacion antimicrobiana
medios estandarizados
ambiente por 5 días en agitación de etilo, en proporción al tercio alcaloides, terpenos y esteroles N° 42) de 6 mm de diámetro los C. Igualmente, se impregnaron 5%.
demostrar la capacidad antimicrobiana del Agar MüllerHinton (MH) y
extracto crudo de Aspergillus fumigatus sensu producir mejores y más accesibles constante de 120 rpm realizando 3 lavados consecutivos. (reacción de cuales fueron impregnados con 25 uL discos control con 25 uL de la fase
MH con 5% de sangre de P. Shapiro Wilk
compuestos antibióticos que sean Liebermann-Burchard) y lactonas del extracto crudo de AF303 por acuosa de la extracción orgánica, y Optimo rendimiento en la obtencion de la masa
stricto, aislado de una muestra clínica carnero para S.au y S.pn Fortaleza
objetivo alternativa
eficientes ante la resistencia de estas (reacción de Legal) triplicado, concentrado en unidades de discos control negativo con DMSO No existe diferencia cruda.
correspondiente a un aspergiloma pulmonar, respectivamente C. sensibles < C. resistentes
bacterias.
luego 100 mg/mL, utilizando DMSO 5% 5 significativa entre ambos
sobre cocos Gram positivos causantes de obtencion de 2 fases
infecciones de alto impacto epidemiológico Para el análisis exploratorio de
datos, constatando la distribución Eficiente segun la cepa, condiciones de
trasferido a un caldo SPG fresco Rendimiento
fermentacion y concentracion de estracto
de 250 mL llevándose a un fase organica e inorganica, ambas normal.
tiempo de incubación de 7 días se utilizaron para la evaluación
en las mismas condiciones de antimicrobiana por difusión en agar. Caracteristicas del estudio
rotación y temperatura La fase orgánica se evaporó al aire Se evaluó la actividad del extracto crudo sobre cepas
Hallazgos Obtuvieron una media del halo de inhibición sobre
circulante a 40°C y se obtuvo una P. parametrica de Tukey Sau ATCC 25923 de 20 y 18 mm (17,18)
referenciales (ATCC) de ambos géneros de bacterias Gram
masa cruda de producción de positivas, además de la muestra de cepas clínicas. Se
culminado el tiempo de fermentacion metabolitos secundarios consideró la presencia de actividad antimicrobiana por la
observación de un halo de inhibición mayor a 6 mm análisis múltiple de medias de los Objetivo preliminar Caracterizar la fraccion de acetato de etilo
se filtra el caldo usando una halos de inhibición
bomba al vacío acoplado a un
sistema estéril con filtro de poro
de 0,22 µ
Necesaria para estudios que puedan reproducir la
metodología sobre bacterias Gram negativas de
Importancia importancia clínica en infecciones asociadas a la
atención en salud o adquiridas en la comunidad.