INFORME DE ACTIVIDADES PRÁCTICAS UTILIZANDO LAS TÉCNICAS IN

VITRO REALIZANDO EL ANÁLISIS PROXIMAL (MS, MI, MO) E IN SITU

PARA DETERMINAR FDN Y FDA EN EL RUMEN.

La actividad practica de laboratorio para la materia de nutrición animal dirigida por el ING.
ZOOT. Juan Avellaneda en la Universidad Técnica Estatal de Quevedo en los laboratorios
de la Finca experimental La María, se desarrolló a partir de la fecha del 18 al 21 de abril del
2022, en donde se desarrollaron distintas técnicas de laboratorio para el análisis proximal
en el pasto de consumo animal para lograr determinar los porcentajes de Materia Seca
(%MS), Cenizas (%MI), Materia Organica (%MO), Fibra Detergente Neutra (%FDN) e
Fibra Detergente Acida (%FDA).
MATERIALES:

 Estufa
 Balanza analítica
 Desecador de vidrio
 Crisoles de porcelana
 Bolsas de nylon
 Mufla
 Incubadora
 Pinzas
Primeramente, se procedió a pesar en la balanza analítica todas las bolsitas para muestras al
vacío tomando apunte de todos los pesos en gramos (g), previamente cada bolsita se las
identifico con un número y una letra P iniciando desde 1 hasta el total de bolsas obtenidas
para el desarrollo de la práctica; posteriormente se procedió a colocar la muestra
parcialmente seca en cada bolsita en la balanza analítica la cantidad de 0.5 ± 0.1 gramos
aproximadamente.

Para la determinación de la materia seca (MS)

Se procedió al uso de los crisoles de porcelana en donde primeramente se las colocan en la
estufa por alrededor de 20 minutos, transcurrido el tiempo se las coloca en el desecador de
vidrio por uno 15 a 30 minutos para que se enfríe y se estabilice el peso, posteriormente se
procede a pesarlas en la balanza analítica tomando apunte de su peso, luego se tara la
balanza con el crisol y se procede a colocar aproximadamente 2 gramos de la muestra en
cada crisol; una vez realizado el proceso anterior se las coloca en la estufa nuevamente con
la muestra durante 24 horas a 300 °C. Después de este tiempo se procede a realizar el
mismo proceso anterior de retirar colocarlos en el desecador en el tiempo determinado y
posteriormente pesar la materia ya seca tomando apunte de su peso obtenido para con estos
datos del peso inicial y el peso final (seco) obtener el % de materia seca aplicando la
siguiente formula:
 masa muestra seco
% Materia Seca (MS) = ∗100
masa muestra inicial

Ejemplo: Crisol # 81
Masa de crisol = 36.6351 g.
Masa muestra inicial= 2.0061 g.
Masa crisol + muestra después de estufa = 38.0538 g.
Masa muestra seco = (Masa crisol + masa después de estufa) – (masa crisol)
Masa muestra seco = 38.0538 – 36.6351 = 1.4187 g.

1.4187
% Materia seca (MS) = ∗100 = 70.7193%
2.0061

Para determinación de % Ceniza (Materia Inorgánica MI)

Para obtener el % de ceniza se procedió a colocar los mismos crisoles con las muestras que
quedaron anteriormente utilizados en la determinación de la materia seca y ubicarlos en la
mufla hasta descomponerlo en cenizas durante un tiempo estipulado y una temperatura
entre los 500 y 600 °C. Una vez transcurrido el proceso se procede a retirarlos de la mufla y
colocarlos en el desecador por un lapso de 15 a 30 minutos, luego de este tiempo se los
procede a pesar los crisoles que contienen el resto de cenizas en la balanza analítica y
tomamos apunte de su peso obtenido, para con este dato proceder al cálculo del % ceniza
presente mediante la siguiente formula:
100(masa de ceniza)
% Ceniza = ∗100
(% materia seca)(masa muestra)

Ejemplo: Crisol # 81
Masa de crisol = 36.6351 g.
Masa muestra inicial= 2.0061 g.
Masa crisol + muestra después de mufla = 36.8069 g.
Masa ceniza = (Masa crisol + masa después de mufla) – (masa crisol)
Masa ceniza = 36.8069 – 36.6351 = 0.1718 g.
% Materia seca (MS) = 70.7193%

100(0.1718 g .)
% Ceniza = ∗100
(70.7193)(2.0061 g)

17.18 g .
% Ceniza = ∗100 = 12.1097%
141.87

Porcentaje de Materia Orgánica (%MO)

Para hallar el porcentaje de MO se aplica la diferencia del 100% con el porcentaje de
Materia Inorgánica (ceniza) procediendo al cálculo continuando el ejercicio de esta manera:
 % Materia Organica (%MO) = 100% - % ceniza (MI)

% MO = 100 – 12.1097 = 87.8903%

ANÁLISIS DE DIGESTIBILIDAD IN SITU

Este método consiste en realizar el análisis directamente en el rumen del animal en el cual
las bolsas de nylon material indigerible de tamaño de 15 x 10 cm previamente numeradas y
tratadas en la estufa y pesadas al vacío para su posterior llenado de los 4 tipo de muestras
con 4 repeticiones con un peso aproximado de la muestra de 8 ± 1 g. en 7 intervalos de
tiempos correspondientes (0, 3, 6, 12, 24, 48 y 72 horas) llenando en total de 112 bolsas,
seguidamente realizado el respectivo amarre y sellado de las bolsas y sujetadas a un cordón
de nylon de unos 20 cm de longitud con un contrapeso en uno de los extremos distal y
unidas a una cadena para facilitar la inmersión y retiro del rumen. Esta es colocada dentro
del rumen del vacuno previamente fistulado y colocado una cánula ruminal para la
manipulación del rumen en intervalos de 0 horas, 3 horas, 6 horas, 12 horas, 24 horas, 48
horas y 72 horas empezando por las de mayor tiempo hasta las de menor tiempo con el
objetivo de poder retirar todas las bolsas al mismo tiempo, para luego ser lavadas en agua
fría a 4 °C para retirar toda presencia de microorganismos, posterior al lavado estas pasan
al proceso de secado a una temperatura aproximada de 65 °C durante 48 horas, ya cumplido
el tiempo se proceden al pesado de las mismas tomando apunte de los pesos, con el objetivo
de hallar la tasa de degradabilidad cálculo que se realiza a partir de la desaparición de la
materia seca utilizando la siguiente formula:

Degradabilidad in situ (%) = [(peso inicial – peso final)/ (peso inicial)] x 100.

ANÁLISIS DE DIGESTIBILIDAD IN VITRO

Este método consiste en realizar el análisis simulando el proceso de degradabilidad del
rumen del animal en el cual las bolsas de nylon material indigerible de tamaño de 10 x 5 cm
previamente numeradas y tratadas en la estufa y pesadas al vacío para su posterior llenado
de los 4 tipo de muestras con 4 repeticiones con un peso aproximado de la muestra de 0.5 ±
1 g. en 7 intervalos de tiempos correspondientes (0, 3, 6, 12, 24, 48 y 72 horas) llenando en
total de 112 bolsas, seguidamente se realiza el sellado de las bolsas con la selladora
eléctrica. Estas son ubicadas por tratamientos de a 4 dentro de unas botellas con liquido de
digestión ruminal que simula la digestión del rumen junto con una solución buffer que
simula la saliva, los cuales son ubicados dentro de una incubadora en el laboratorio en
intervalos de 0 horas, 3 horas, 6 horas, 12 horas, 24 horas, 48 horas y 72 horas empezando
por las de mayor tiempo hasta las de menor tiempo con el objetivo de poder retirar todas las
bolsas al mismo tiempo, para luego ser colocadas con detergente neutro para solubilizar
toda presencia de microorganismos durante 1 h a 100°C, posteriormente pasan al proceso
de secado a una temperatura aproximada de 39 °C durante 72 horas, ya cumplido el tiempo
se realiza el pesado de las mismas tomando los respectivos apuntes de los pesos de cada
bolsa, estos valores obtenidos se consideran una estimación de la digestibilidad real de los
alimentos.
 (masa de muestra seca despues de FDN )
% DIGESTIÓN DE MS = ∗100
(masa de muestra seca )

ANEXOS
MATERIALES