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FOTOSINTESIS
PHOTOSYNTHESIS
MATERIALES Y MÉTODO
Materiales y equipos:
Reactivos:
Lugol
Etanol al 96%
Método:
Experimento 1: Cromatografía con espinaca para identificar los carotenos presentes.
Se tomó una porción de espinaca la cual se macero y se diluyo con 2 ml de acetona, una
vez macerada y liquida la espinaca, se tomado una gota del extracto de espinaca y se ubicó
a 2 cm del borde de una tira de papel filtro dejándola secar para luego introducir la tira de
papel en un tubo de ensayo en el cual se encontraba una mezcla de petróleo – acetona de
manera que solo 1 cm del papel tocara la mezcla. Luego se observó cómo se separaron los
diferentes pigmentos.
Experimento 2: Identificación de almidón en una hoja que realizo fotosíntesis y en
otra que no.
Previamente al laboratorio fueron cubiertas 5 hojas de un árbol y las otras fueron
descubiertas. Al llegar al laboratorio ambas muestras de hojas se limpiaron y se pusieron a
baño María durante 30 min, una vez listo el baño se dejaron reposar otros 30 min en un
alcohol orgánico para que los pigmentos fuesen separados de la hoja y se les realizo la
tinción con Lugol para identificar si existía o no presencia de almidón en la hoja.
RESULTADOS
Carotonos
Xantofitas
Clorofila A
Clorofila B
Figura 1. Cromatografía de espinaca
Hoja que no
realizo fotosíntesis
Hoja que realizo
fotosíntesis
En la figura 2 se observan como dos hojas se tiñen de forma distinta con el lugol ya que en
una se observaron cómo hay presencia de almidón (color negro o azul oscuro) indicador de
proceso de fotosíntesis y la otra mantiene con el color de la tinción lugol (café claro), lo
cual indica que esta no realizo proceso de fotosíntesis. Las hojas fueron dejadas en baño
María durante 30 min y en alcohol otros 30 min para separar los pigmentos y poder
identificar mejor si la hoja realizo o no proceso de fotosíntesis.
DISCUSION
La cromatografía sobre papel es una técnica extremadamente sencilla, es frecuente observar
procedimientos que minimizan la importancia de variables fundamentales en la separación
de los pigmentos. Si bien se han descrito múltiples procedimientos y disolventes, la
extracción directa con acetona es muy utilizada debido a su polaridad, escasa selectividad y
amplio margen de solubilización. el proceso de extracción debe ser rápido, en un ambiente
fresco, con luz tenue y evitando disgregar la muestra con el disolvente, para no
proporcionar la formación de compuestos degradación. mientras que los carotenoides son
bastante estables y sólo se han descrito oxidaciones e isomerizaciones posteriores al
desarrollo de la cromatografía, los pigmentos fotosintéticos de las plantas superiores están
representados por las clorofilas a y b y un amplio grupo de sustancias denominadas
carotenoides, que se dividen en carotenos y xantofilas. (Braithwaite y Smith, 2001). Como
se observa en la (figura 1) el orden en que se eluyen los pigmentos es de forma inversa a su
polaridad, es decir, los más polares que han retenido cerca de la línea de aplicación
mientras que los menos polares, cerca de la línea de máxima altura del eluyente. La
separación de los pigmentos fotosintéticos mediante cromatografía sobre papel transcurre
fundamentalmente, a través de un mecanismo de absorción física, donde se establecen una
serie de equilibrios de absorción-desorción que depende de la polaridad de cada pigmento.
El disolvente o eluyente por su estructura química contribuye a que los pigmentos puedan
separarse mediante sucesivos equilibrios.
La tinción de hojas con Lugol permite visualizar el contenido en almidón de esta. El Lugol
es una solución yodada, compuesta por 0,5 % I2/1,5 % KI, con afinidad por los polímeros
de glucosa. El Lugol tiñe el almidón debido a que las moléculas de yodo se alinean en el
interior de las hélices formadas por las cadenas de glucosa. (Ball. Et Al., 1996). Las plantas
son organismos autótrofos, lo que significa que producen su propio alimento, el almidón se
forma en los cloroplastos durante la fotosíntesis. Después es hidrolizado y se resintetiza
como almidón de reserva en los amiloplastos o granos de almidón. y sustentan a otros
organismos. Sin el sol, no habría fotosíntesis y la vida no sería sustentable, como sugiere
(Colleoni. Et Al., 2011). En la (figura 2) se observa en la parte derecha una hoja en luz
estuvo en actividad fotosintética, en consecuencia, tenía almidón en su estructura y a
realizar el experimento la hoja se tiñe de color azul oscuro debido a que el almidón
reacciona con el Lugol. en la (figura 2) la parte de la izquierda que estuvo sometida a
oscuridad no se tiñe, debido a que el almidón que tenía almacenado en la hoja se consumió
cuando no realizó fotosíntesis y consecuencia no se tiñe y toma el color del reactivo (café
claro) por la ausencia de almidón.
¿Puede la misma hoja en la sombra realizar fotosíntesis con la misma intensidad que lo
hace cuando está expuesta a la luz solar directamente?
¿En qué consisten las reacciones luminosas y oscuras de la fotosíntesis?
Fase luminosa: Necesita luz para producir moléculas de energía orgánica (ATP y
NADPH). Esta fase la inician los pigmentos de color, principalmente clorofilas de color
verde.
Durante la fase luminosa de la fotosíntesis, la luz del sol es capturada a través de una serie
de reacciones que involucran a la clorofila química. Esto da como resultado la síntesis de
dos compuestos químicos de alta energía: ATP y NADPH. La energía química de este
último es retenida por electrones que pueden ser transferidos fácilmente a otros
compuestos. Este conjunto de reacciones requiere agua (H2O) de la cual se libera oxígeno
durante el proceso. El ATP y el NADPH se utilizan posteriormente para producir glucosa a
partir del CO2 en la siguiente fase de la fotosíntesis, la fase oscura. (Koning, R. E. 1994).
Fase oscura: Utiliza las moléculas de energía orgánica (ATP y NADPH).
El ATP proporciona la energía mientras que el NADPH proporciona los electrones
necesarios para fijar el CO2 (dióxido de carbono) en los carbohidratos. Este ciclo de
fijación del carbono también se llama Ciclo de Calvin Benison, y ocurre en el estroma.
Las reacciones oscuras no continuarán si las plantas son privadas de luz durante demasiado
tiempo ya que las reacciones iniciales del proceso dependen directamente de la absorción
de luz por parte de la planta. (Koning, R. E. 1994).
Las plantas C3, C4 Y CAM utilizan el ciclo de Calvin para formar azucares a partir de CO 2.
Estas vías para fijar CO2 tienen varias ventajas y desventajas y permiten que las plantas
estén aptas para diferentes hábitats. El mecanismo de las plantas C3 funciona bien en
ambientes frescos, mientras que C4 y CAM están adaptadas a climas cálidos y secos.
(Guralnick, Lonnie J., Cline A, Smith M y Rowan F. 2008).
Las vías C4 y CAM han evolucionado independientemente muchas veces, lo cual indica
que pueden dar a las especies de plantas en climas cálidos una ventaja evolutiva
considerable. (Guralnick, Lonnie J., Cline A, Smith M y Rowan F. 2008).
Tabla 1. Comparaciones entre plantas C3, C4 y CAM. (Guralnick, Lonnie J., Cline A,
Smith M y Rowan F. 2008).
SEPARACION DE FIJACION ESTOMAS MEJOR
TIPO CO2 y C. CALVIN ABIERTOS ADAPTACION
BIBLIOFRAFIA
A. Braithwaite y F. Smith. Chromatographic Methods. 5 edición, Kluwer Academic (2001)
Acosta, B. Pigmentos fotosintéticos (2021)
Bello, S. Photosynthesis. Molecular Biochemistry II: The Bellow Lectures (Fotosíntesis:
Bioquímica molecular II: Lecciones de Bellow). (2009).
Berg, J., Tymoczko J., Stryer, L. Two photosystems generate a proton gradient and
NADPH in oxygenic photosynthesis (Dos fotosistemas generan un gradiente de protones y
NADPH en la fotosíntesis oxigénica). En Biochemistry (Bioquímica), (2002)
Guralnick, Lonnie J., Amanda Cline, Monica Smith y Rowan F. Sage. (2008). Evolutionary
physiology: the extent of C4 and CAM photosynthesis in the genera Anacampseros and
Grahamia of the Portulacaceae (Fisiología evolutiva: el alcance de la fotosíntesis de plantas
C4 y CAM en los géneros Anacampseros y Grahamia de las portulacáceas).
Johnson, K. Raven, P., Mason, B. Losos R. Photosynthesis (Fotosíntesis). (Biología),
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Koning, R. E. (1994). Light reactions (Reacciones dependientes de la luz).
Ball S., Guan H., James M., Myers A., Keeling P., Moville G., Buleon A., Colonna P., Preiss J. From
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glucógeno a la amilopectina: Un modelo para la biogénesis del almidón vegetal gránulo de la
planta)
Colleoni, C., Cenci, U., Raj, J.N., Tirtiaux, C. The evolution of glycogen and starch metabolism in
eukaryotes gives molecular clues to understand the establishment of plastid endosymbiosis. 2011
(La evolución del metabolismo del glucógeno y el almidón en los eucariotas da pistas moleculares
para entender el establecimiento de la la endosimbiosis de los plásmidos.)