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https://sfamjournals.onlinelibrary.wiley.com/doi/10.1111/j.

1365-
2672.2010.04762.x
Después de leer el artículo de probióticos, responda a las siguientes
preguntas:

1. Indique el objetivo del estudio


Determinar la resistencia a los antimicrobianos de los probióticos japoneses
disponibles en el mercado sin la supervisión de un farmacéutico.

2. En un algoritmo describa con precisión toda la metodología empleada


Se realizaron:
 Aislados bacterianos: 463 aislados clínicos de S. aureus
 Pruebas de susceptibilidad: se realizaron mediante un método
automatizado de microdilución de caldo con el panel Pos Combo 23S
(MicroScan; Siemens, Sacramento, CA). Los MIC se determinaron por las
recomendaciones del CLSI
 Detección de resistencia a meticilina: El gen mecA fue detectado por
PCR
 PFGE: Los 135 aislados de SARM fueron genotipados por PFGE después
de la digestión SmaI del ADN cromosómico, preparado mediante una
modificación del protocolo descrito por Cookson
 PCR multiplex para escribir SCCmec: Los tipos de SCCmec se
determinaron mediante el uso de una estrategia de PCR multiplex que
generó un patrón de amplificación específico para cada tipo estructural
de SCCmec
 Detección de genes PVL: Los genes de leucocida de Panton-Valentine
(PVL) (lukS-PV y lukF-PV) fueron detectados por PCR
 Determinación de tipos de reguladores de genes accesorios (agr): se
utilizó un esquema de dos PCR
 Mecanografía de spa y análisis de BURP: La región X polimórfica del gen
de la proteína A (spa) se amplificó a partir de todos los aislados de SARM.
Mediante la aplicación del algoritmo BURP implementado por el
software, los tipos de spa con más de cinco repeticiones se agruparon en
diferentes grupos, siendo el costo calculado entre los miembros de un
grupo menor o igual a 6.
 MLST: Se seleccionaron varias cepas representativas de cada tipo y
subtipo de PFGE para determinar el ST

3. Nombre los antimicrobianos y concentraciones que se utilizaron por el


método de difusión en disco.
 Ampicilina: 10 ug
 Cefpiroma: 30 ug
 Ciprofloxacina: 5 ug
 Claritromicina: 15 ug
 Ceftriaxona: 30 ug
 Cefotaxima: 30 ug
 Eritromicina: 15 ug
 Cefepima: 30 ug
 Gentamicina: 10 ug
 Kanamicina: 30 ug
 Metronidazol: 50 ug
 Estreptomicina: 10 ug
 Tetraciclina: 30 ug
 Vancomicina: 30 ug

4. Nombre los genes que se estudiaron para demostrar la resistencia a los


antimicrobianos
Amplificaciones de PCR de genes asociados con la resistencia a los macrólidos
(ermA, ermB, ermC, msrA/B, ereA, ereB, mphA y genes mefA/E), aminoglucósidos
(aph[3′], vancomicina (vanA, vanB, vanC1 y vanC2 o vanC3), tetraciclina (Ribo-2-
FW/Ribo-2-RV y tet(W)

5. Cual es el objetivo de los bioensayos de inactivación de antibióticos y señale


los resultados obtenidos con este ensayo en el estudio.
Analizar si los probióticos que generalmente se ingieren en grandes cantidades,
durante la terapia combinada probiótico-antibiótico, pueden interactuar
antagónicamente con los antibióticos. 
Los resultados mostraron que no hay descenso en las concentraciones efectivas
de vancomicina, claritromicina y cefepima en los filtrados, después de la
incubación de inóculos pesados de las 11 cepas probadas con estos tres
antibióticos.

6. Construya una tabla y señale la frecuencia de las cepas aisladas de los


probióticos

Tipo de probiótico Cepas aisladas Frec.

Probióticos Lactobacilos Lactobacillus casei 11


lácteos
Lact. acidophilus 5

Lactobacillus gasseri 2

Lactobacillus plantarum 2

Lact. delbrueckii ssp. bulgaricu 6

Lactobacillus brevis 1
Lact. helveticus 1

Estreptococos Strep. thermophilus 3

Bifidobacterias Bifidobacterium 3
animalis ssp.lactis
Bifidobacterium longum 2

Probióticos en Lactobacilos Lact. casei 1


forma de tabletas
Lact. acidophilus 1

Lact. gasseri 1

7. ¿Se encontraron genes de resistencia a los antibióticos en las cepas


estudiadas?
Aunque las cepas de la misma especie identificadas en este estudio parecían
fenotípicamente resistentes a los antibióticos, no llevaban genes de resistencia a
los antibióticos.

8. ¿A qué se puede atribuir la resistencia fenotípica a los antibióticos?


Puede atribuirse a mecanismos intrínsecos de resistencia o a la presencia de
genes de resistencia a los antibióticos que no se examinaron en este estudio.

9. ¿En qué situación se puede considerar la terapia combinada de antibióticos


y probióticos?
La terapia combinada de antibióticos y probióticos solo puede considerarse
compatible si se mantiene la potencia del antibiótico y la viabilidad del probiótico.

10. De acuerdo a lo que se dice en el articulo cuales son los dos importantes
conceptos que deben ser considerados cuando se elija la terapia combinada
de antibióticos y probióticos.
 En primer lugar, los probióticos viables deben llegar a su sitio diana en el
tracto gastrointestinal en un número lo suficientemente grande como para
lograr sus efectos. Por lo tanto, deben tener altos niveles de resistencia
constitutiva natural o genes de resistencia a antibióticos inducibles
intransferibles que les permitan sobrevivir en la concentración real de
antibióticos que pueden estar presentes en el tracto gastrointestinal
humano.
 En segundo lugar, cuando las bacterias susceptibles se exponen a las
concentraciones bactericidas de un antibiótico, la mayoría de la población
muere dentro de 1-2 h y algunas bacterias sobreviven incluso en presencia
de antibióticos activos. Por lo tanto, en ensayos aleatorizados doble ciego
controlados con placebo, los efectos beneficiosos de los probióticos
aislados después del final de la terapia no siempre deben atribuirse a
probióticos normales viables.

https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC2691083/
Después de leer el artículo sobre MRSA responda a las siguientes
preguntas:
1. ¿Cuál fue el objetivo del estudio?
Determinar qué clones están circulando en España y si las cepas se han
propagado entre hospitales mediante el análisis de una muestra representativa de
aislados recogidos en un estudio de prevalencia puntual. 

2. ¿Cuántos aislamientos de S. aureus fueron estudiados?


Un total de 463 aislados clínicos de S. aureus provenientes de 145 hospitales en
un solo día

3. ¿Cuántos S. aureus fueron resistentes a la meticilina?


De los aislados de S. aureus, 135 (29,2%) eran resistentes a la meticilina (MRSA)

4. ¿Por cuál técnica se detectó la resistencia a la meticilina?


Las pruebas de susceptibilidad se realizaron mediante un método de microdilución

5. De los 135 aislamientos de S. aureus resistentes a la meticilina estudiados


¿qué número fue resistente a la ciprofloxacina, tobramicina, gentamicina,
eritromicina y clindamicina?
 Ciprofloxacina (93,3%)
 Tobramicina (72,6%)
 Gentamicina (20,0%)
 Eritromicina (66,7%)
 Clindamicina (39,3%)

6. ¿Cuál es el valor de la MIC para catalogar a los aislamientos susceptibles a


la vancomicina y teicoplanina?
Todos los aislados eran susceptibles a la vancomicina (MICs ≤ 2 mg/litro) y a la
teicoplanina (MICs ≤ 8 mg/litro).

7. ¿En cuántos genotipos de PFGE se agruparon los MRSA?


Se agruparon en 13 genotipos (E7, E8, E10, E11, E12, E13, E15, E16, E17, E18,
E19, E20 y A). Se observaron dos genotipos (E19 y E20) por primera vez en
España. Predominaron los genotipos E7 (con subtipos E7a y E7b; 28,1%) y E8
(con subtipos E8a y E8b; 24,4%) y juntos representaron el 52,5% de los aislados.

8. ¿En cuántos tipos spa se agruparon los MRSA?


Se identificaron 32 tipos de spa diferentes: 21 estaban representados por una sola
cepa y 7 eran nuevos tipos de spa no descritos anteriormente. El tipo de spa t067
fue el más frecuente (48,9% de los aislados), seguido del tipo de spa t002 (14,8%).

9. ¿Cuántos MRSA fueron susceptibles a los glucopéptidos?


Todos los aislados eran susceptibles a los glucopéptidos

10. ¿Cuál fue el tipo SCC-mec más frecuente en el estudio?


El SCC-mec más frecuente fue de tipo I (7,4%), seguido por SCC-mec tipo IV
(6,7%) y SCC-mec tipo II (5,2).

11. Responda falso o verdadero al siguiente texto encontrado en el artículo, y si


es necesario aclare: “The use of spa typing in this study allowed us to detect
two predominant types (t067 and t002) in Spain that are very uncommon in
other countries”
Verdadero, el tipo de spa t067 (ST5-MRSA-IV) fue dominante entre los aislados
españoles de SARM, una situación no descrita en otros países. También se
presenta una frecuencia mayor del tipo de spa t002 en España que en otros
países.

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