Documentos de Académico
Documentos de Profesional
Documentos de Cultura
2011
GUIA DE LABORATORIO DE QUÍMICA No. 5
INTEGRANTES:________________________
________________________
________________________
________________________
DOCENTE: MSc. Harvey Andrés Milquez Sanabria FECHA DE ENTREGA: _______________
TEMA: MICROSCOPIA
Objetivos
El alumno reconocerá el microscopio compuesto, identificará cada una de sus partes y lo manejará
correctamente observando la presencia de microorganismos en muestras biológicas
MATERIAL. MATERIAL BILÓGICO SUSTANCIAS
Microscopio compuesto Sarro dental* Sol. Salina. NaCl al 0.85%
Porta y cubre objetos Muestra de orina*
Palillo Muestra de Excremento*
Hisopo Cebolla cabezona *
INTRODUCCIÓN.
El microscopio es el instrumento más frecuentemente utilizado y el más útil en un laboratorio
de microbiología, proporciona la amplificación o agrandamiento que nos permite ver organismos y
estructuras invisibles a simple vista. Los microscopios permiten una amplia gama de
amplificaciones, desde cien veces a cientos miles de veces.
Las dos categorías de microscopios disponibles son los microscopios ópticos y los
microscopios electrónicos. Los microscopios ópticos utilizan un sistema de lentes ópticas y
comprenden los microscopios de campo claro, campo oscuro, fluorescencia y contraste de fases. Los
microscopios electrónicos emplean haces de electrones en lugar de ondas de luz para producir una
imagen ampliada.
• * Material suministrado por el alumno
FUNDACIÓN UNIVERSITARIA MONSERRATE
2011
MANEJO Y USO DEL MICROSCOPIO ÓPTICO
1. Colocar el objetivo de menor aumento en posición de empleo y bajar la platina
completamente. Si el microscopio se recogió correctamente en el uso anterior, ya debería
estar en esas condiciones.
2. Colocar la preparación sobre la platina sujetándola con las pinzas metálicas.
3. Comenzar la observación con el objetivo de 4x (ya está en posición) o colocar el de 10
aumentos (10x) si la preparación es de bacterias.
4. Para realizar el enfoque:
a. Acercar al máximo la lente del objetivo a la preparación, empleando el tornillo
macrométrico. Esto debe hacerse mirando directamente y no a través del ocular, ya
que se corre el riesgo de incrustar el objetivo en la preparación pudiéndose dañar
alguno de ellos o ambos.
b. Mirando, ahora sí, a través de los oculares, ir separando lentamente el objetivo de la
preparación con el macrométrico y, cuando se observe algo nítida la muestra, girar el
micrométrico hasta obtener un enfoque fino.
5.‐ Pasar al siguiente objetivo. La imagen debería estar ya casi enfocada y suele ser suficiente con
mover un poco el micrométrico para lograr el enfoque fino. Si al cambiar de objetivo se perdió por
completo la imagen, es preferible volver a enfocar con el objetivo anterior y repetir la operación
desde el paso 3. El objetivo de 40x enfoca a muy poca distancia de la preparación y por ello es fácil
que ocurran dos tipos de percances: incrustarlo en la preparación si se descuidan las precauciones
anteriores y mancharlo con aceite de inmersión si se observa una preparación que ya se enfocó con
el objetivo de inmersión.
PROCEDIMIENTO
TÉCNICAS DE MONTAJE HÚMEDO
La gota pendiente o las preparaciones húmedas permiten examinar organismos vivos
suspendidos en un fluido. Las preparaciones húmedas se hacen colocando una gota del fluido que
contiene el organismo sobre una lámina de vidrio y cubriéndola con una fina pieza de vidrio
(cubreobjetos): para reducir la tasa de evaporación y eliminar corrientes de aire, generalmente se
rodea la gota con vaselina.
Cuando se examinan las preparaciones húmedas por microscopía de campo claro, es
importante ajustar la fuente de luz de forma adecuada. Es posible disminuir la intensidad de la luz
mediante la utilización de filtros especiales.
MONTAJE EN SOLUCIÓN SALINA FISIOLÓGICA (NaCl 0.85%) O AGUA
Utilizada para estudiar la movilidad de las bacterias
FUNDACIÓN UNIVERSITARIA MONSERRATE
2011
A)
1.‐ En el centro de un portaobjetos coloca una gota de solución salina
2.‐ Con un hisopo toma muestra de sarro dental de un compañero que no se haya lavado los
dientes y colócala en la solución salina mezclando cuidadosamente
3.‐ Examinar con objetivos de 40X y 60 X.
B)
1.‐ Centrífuga aproximadamente 10 ml de orina a 2,500 rpm durante 5 minutos.
2.‐ Desecha el líquido sobrenadante y procede a mezclar el sedimento urinario
3.‐ Coloca una gota del sedimento mezclado en el centro de un portaobjetos limpio y seco
4.‐ Sobre el sedimento pon un cubreobjetos y observa con el objetivo de 40X y 60X
C)
1.‐ En un tubo de 13 X 100mm coloca las tres cuartas partes de solución salina fisiológica
2.‐ Con un aplicador de madera toma muestra de excremento de varias partes de la muestra y
deposítalo dentro del tubo con la solución salina, agita uniformemente.
3.‐ En un portaobjetos limpio y seco, coloca una gota de muestra preparada en los pasos anteriores
4.‐Coloca un cubreobjeto sobre la preparación y observa en el microscopio con objetivo 40X y 60X
CUESTIONARIO:
1.‐ ¿Que es poder de resolución?
2.‐ ¿Qué finalidad te proporciona el utilizar microscopio compuesto: ________________________‐
_______________________________________________________
________________________________________________________________________________
3.‐ ¿Cuál es la importancia que tiene el diafragma en el microscopio?
___________________________________________________________________________________________________________________
_____________________________________________
FUNDACIÓN UNIVERSITARIA MONSERRATE
2011
4.‐ ¿Qué tipo de bacterias pudiste observar en las muestras que se estudiaron
___________________________________________________________________________________________________________________
_____________________________________________
5.‐ ¿Qué importancia tiene el estudiar y observar los microorganismos en muestras biológicas?
___________________________________________________________________________________________________________________
_____________________________________________
6.‐ Escribe el nombre de cada una de las partes del microscopio compuesto