NORMA
VENEZOLANA
AGUA POTABLE. METODO DE
DETERMINACION DEL NUMERO
MAS PROBABLE DE BACTERIAS
COLIFORMES
oY)
(Onn)PROLOGO
La Comisién Venezolana de Normas Industriales (COVENIN), creada en
1958, es el organismo encargado de programar y coordinar las actividades de
Normalizacién y Calidad en el pals. Para llevar 2 cabo el trabajo de
elaboracién de normas, Ia COVENIN consttuye Comités y Comisiones
‘Téenicas de Nommalizacién, donde participan organizaciones gubemamentales y
no-gubernamentales relacionadas con un érea especifia,
‘La presente norma fue elaborada por el Comité Técnico de Normalizacién
CT 10y aprobada por la COVENIN en su reunién No 123 de fecha 13/10/93NORMA VENEZOLANA
AGUA POTABLE
COVENIN
3047-93,
DETERMINACION DEL NUMERO MAS PROBABLE DE.
BACTERIAS COLIFORMES
1 NORMAS COVENIN A CONSULTAR
COVENIN 1126-89 Alimentos. Identificaci6n y
‘Preparacion de muestras para él
anilisis microbiol6gico.
COVENIN 2614-89 Agua potable. Toma de mues-
tras
2 OBJETO Y CAMPO DE APLICACION
Esta Norma Venezolana contempla el método de ensayo
de rutina para la determinacién del nimero més probable
Ge baceras coliformes en agus potable,
3. PRINCIPIO DEL METODO
EI método consiste en inocular yolimenes conocidos de
tuna muestra de agua potable,en cfu de $6 10. tubos de
ensayo, con un medio de cultivo no selectivo, doble con-
centrado, y con tubos de fermentacién incorporados.,
Después del periodo de incubscién se observan los tubos
ue presenten formacién de gas y/o turbidez, se confirman
en un medio de cultivo selectivo, y se obtiene el NMP de
bacterias coliformes, utilizando las tablas disefiadas para
tal fin,
4 EQUIPOS E INSTRUMENTOS
4.1. Equipo para la preparacién de muestras (Norma CO-
‘VENIN 1126)
42 Incubadora con egulador de temperatura
43 ipetas graduadas, de 1 y 10m, estéiles
44 Tubos de ensayo de 150.x 15 mm y 150x20mm
4.5 Tubos de Dusham o de fermentacién, de 10-x 75 mm
4.6 Equipo de uso comin en el labortorio
5. MEDIOS DE CULTIVO
5.1 Caldo lauril sulfato triptosa, doble concentrado
(AnexoD)
‘52 Caldo lactosabilis verde brillante (296) (Anexo 1)
6 MATERIAL A ENSAYAR
El material a ensayar consiste en una muestra representa
vva de agua potable, tomada segiin la Norma Venezolana
COVENIN 2614,
7. PROCEDIMIENTO
7.1 La muestra se identifica y prepara segin la Nonma
Venezolana COVENIN 1126
1.2 PRUEBA PRESUNTIVA,
7.2.1 Se inoculan volimenes de 10 ml de muestra en cada
luno de § tubos que contengan caldo lauril sulfato triptosa
doble concentrado, con tubo de fermentacién invertido,
Se mezcla suavemente.
NOTA 1: Sise-requiere mayor previsién en el método, se
inoculan 10 tubos
7.2.2 Se incuban 835 + 0,5°C. Después de 24 + 2h, agi-
te suavemente cada tubo y observe la aparicin de gas y/o
‘urbiedad, siambas son negativas se reincuban por 24 + 2
hhadicionsles,
7.2.3 ‘Se consideran como tubos positivos en la prueba
presuntiva aquellos que presenten cualquier cantidad de
fs en el tubo Durham y/o turbiedad en el medio de culti-
v0, después de 24 a 48 horus de incubacién.
7.3 PRUEBA CONFIRMATORIA
73.1 Se agita suavemente cada uno de los tubos positivos
de la prueba anterior, y se transfiere una asada del cultivo
8 tubos que contengan caldo laciosa bilis verde brillante
(2%), con tubo de fermentacién invertido,
+ 0,5°C durante 48 hrs,
7.3.2 Se incuban a35°
7.33 Finalizado el perfodo de incubacién se consideran
‘como tubos positivos en la prueba confirmatoria, aquellos