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NORMA VENEZOLANA AGUA POTABLE. METODO DE DETERMINACION DEL NUMERO MAS PROBABLE DE BACTERIAS COLIFORMES oY) (Onn) PROLOGO La Comisién Venezolana de Normas Industriales (COVENIN), creada en 1958, es el organismo encargado de programar y coordinar las actividades de Normalizacién y Calidad en el pals. Para llevar 2 cabo el trabajo de elaboracién de normas, Ia COVENIN consttuye Comités y Comisiones ‘Téenicas de Nommalizacién, donde participan organizaciones gubemamentales y no-gubernamentales relacionadas con un érea especifia, ‘La presente norma fue elaborada por el Comité Técnico de Normalizacién CT 10y aprobada por la COVENIN en su reunién No 123 de fecha 13/10/93 NORMA VENEZOLANA AGUA POTABLE COVENIN 3047-93, DETERMINACION DEL NUMERO MAS PROBABLE DE. BACTERIAS COLIFORMES 1 NORMAS COVENIN A CONSULTAR COVENIN 1126-89 Alimentos. Identificaci6n y ‘Preparacion de muestras para él anilisis microbiol6gico. COVENIN 2614-89 Agua potable. Toma de mues- tras 2 OBJETO Y CAMPO DE APLICACION Esta Norma Venezolana contempla el método de ensayo de rutina para la determinacién del nimero més probable Ge baceras coliformes en agus potable, 3. PRINCIPIO DEL METODO EI método consiste en inocular yolimenes conocidos de tuna muestra de agua potable,en cfu de $6 10. tubos de ensayo, con un medio de cultivo no selectivo, doble con- centrado, y con tubos de fermentacién incorporados., Después del periodo de incubscién se observan los tubos ue presenten formacién de gas y/o turbidez, se confirman en un medio de cultivo selectivo, y se obtiene el NMP de bacterias coliformes, utilizando las tablas disefiadas para tal fin, 4 EQUIPOS E INSTRUMENTOS 4.1. Equipo para la preparacién de muestras (Norma CO- ‘VENIN 1126) 42 Incubadora con egulador de temperatura 43 ipetas graduadas, de 1 y 10m, estéiles 44 Tubos de ensayo de 150.x 15 mm y 150x20mm 4.5 Tubos de Dusham o de fermentacién, de 10-x 75 mm 4.6 Equipo de uso comin en el labortorio 5. MEDIOS DE CULTIVO 5.1 Caldo lauril sulfato triptosa, doble concentrado (AnexoD) ‘52 Caldo lactosabilis verde brillante (296) (Anexo 1) 6 MATERIAL A ENSAYAR El material a ensayar consiste en una muestra representa vva de agua potable, tomada segiin la Norma Venezolana COVENIN 2614, 7. PROCEDIMIENTO 7.1 La muestra se identifica y prepara segin la Nonma Venezolana COVENIN 1126 1.2 PRUEBA PRESUNTIVA, 7.2.1 Se inoculan volimenes de 10 ml de muestra en cada luno de § tubos que contengan caldo lauril sulfato triptosa doble concentrado, con tubo de fermentacién invertido, Se mezcla suavemente. NOTA 1: Sise-requiere mayor previsién en el método, se inoculan 10 tubos 7.2.2 Se incuban 835 + 0,5°C. Después de 24 + 2h, agi- te suavemente cada tubo y observe la aparicin de gas y/o ‘urbiedad, siambas son negativas se reincuban por 24 + 2 hhadicionsles, 7.2.3 ‘Se consideran como tubos positivos en la prueba presuntiva aquellos que presenten cualquier cantidad de fs en el tubo Durham y/o turbiedad en el medio de culti- v0, después de 24 a 48 horus de incubacién. 7.3 PRUEBA CONFIRMATORIA 73.1 Se agita suavemente cada uno de los tubos positivos de la prueba anterior, y se transfiere una asada del cultivo 8 tubos que contengan caldo laciosa bilis verde brillante (2%), con tubo de fermentacién invertido, + 0,5°C durante 48 hrs, 7.3.2 Se incuban a35° 7.33 Finalizado el perfodo de incubacién se consideran ‘como tubos positivos en la prueba confirmatoria, aquellos

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