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INGENIERÍA QUÍMICA ACTAS

VOLUMEN 49, 2016 La Asociación Italiana
de Ingeniería Química En
línea en www.aidic.it/cet
Editores invitados: Enrico Bardone, Marco Bravi, Tajalli
Keshavarz Copyright © 2016, AIDIC Servizi Srl, ISBN
978-88-95608-40-2; ISSN 2283-9216 DOI: 10.3303/CET1649078

¿La relación C/N realmente afecta el rendimiento de biometano? A

investigación de tres años sobre la digestión del estiércol de búfalo
Juana Guarino*a, Claudia Carotenutoa, Filomena di Cristófaroa, Stefanía PapáB,
Biagio Morronea, Mario Minalea
aDipartimento di Ingegneria Industriale e dell'Informazione, Seconda Università degli Studi di Napoli, via Roma 29, 81031 Aversa –
CE, Italia.
B Dipartimento di Scienze e Tecnologie Ambientali Biologiche e Farmaceutiche, Seconda Università degli Studi di Napoli,

Via Vivaldi 43, 81100 Caserta, Italia.

giovanna.guarino@unina2.it

En este trabajo estudiamos la digestión anaerobia del estiércol de búfalo de agua recolectado durante un período de tres
años con el objetivo de investigar el efecto de la relación C/N del sustrato en la producción de biometano. Las muestras
investigadas muestran una relación C/N entre 9 y 50, siendo este intervalo mucho más amplio que el típicamente
considerado óptimo en la literatura para los procesos de digestión de residuos.
Las pruebas experimentales se realizan en modo discontinuo, a 37 °C y con un pH inicial igual a 6 o 7, sin
control durante el proceso de digestión.
Observamos que, independientemente de la relación C/N de las muestras analizadas, la productividad de Gompertz, expresada en
términos de fracción de volumen de biometano, siempre es superior al 54 %. Se registra una productividad ligeramente mayor para
los sustratos digeridos a partir de un pH inicial establecido en 7. Entonces podemos concluir que la relación C/N del estiércol de
búfalo de agua no afecta realmente el rendimiento de biometano.

1. Introducción
La biomasa incluye una gran cantidad de material como muchos desechos orgánicos diferentes, como la fracción orgánica de los desechos
sólidos municipales, lodos de depuradora, desechos de alimentos, estiércol animal (Li et al., 2009). Este último es un sustrato de bajo costo rico
en carbohidratos, especialmente indicado para producir biocombustibles en digestores anaerobios.
En este trabajo estudiamos la digestión anaeróbica del estiércol de búfalo. Las granjas de búfalos son una de las actividades
más importantes del sur de Italia. Uno de los problemas relacionados con las granjas de búfalos es la gestión de residuos. De
hecho, la directiva de nitratos [91/676/EEC] identifica las zonas vulnerables a los nitratos de origen agrícola, donde está
prohibido esparcir estiércol animal. Una solución inteligente a este problema es la transformación del estiércol animal en
bioenergía.
La digestión anaerobia consta de varias reacciones biológicas interdependientes, complejas, secuenciales y paralelas (Carillo
et al., 2012, Merlin Christy et al., 2014), durante las cuales los productos obtenidos de un grupo de microorganismos sirven
como sustrato para el siguiente, lo que resulta en transformación de materia orgánica principalmente en una mezcla
gaseosa de CH4 y compañía2 con cantidades menores de N2, h2, Nueva Hampshire3 y H2S (Gujer y Zehnder, 1983).
En la literatura se ha prestado atención a la individualización de la relación C/N correcta para maximizar el rendimiento de
biometano y Bardiya y Gaur (1997) sugirieron un rango óptimo de 20 a 30. De hecho, Al Juhaimi et al. (2014) utilizan una
relación C/N igual a 30 para la digestión anaeróbica de desechos de palma, Rao y Singh (2004) reportaron una relación C/N
óptima igual a 25 para desechos sólidos municipales, Yasin y Wasim (2011) individualizaron una relación C/N óptima /N
relación igual a 30 para la fermentación de biogás de estiércol de búfalo. Sin embargo, se han encontrado valores
ligeramente fuera de este rango como, por ejemplo, en Tewelde et al. (2012) quienes detectaron una relación C/N igual a 17
para digerir un residuo de cervecería.
En un período de tres años observamos una amplia variabilidad de la relación C/N de los estiércoles de búfalo recolectados
de la misma granja (di Cristofaro et al., 2014). Esto puede deberse a las diferencias en el suministro de alimentos para
animales, la estación del año de la recolección y la fase hormonal del ganado. Nos enfocamos en la influencia de la relación
C/N en la medida del rendimiento de biometano en términos de CH4 fracción de volumen en el producido

Por favor cite este artículo como: Guarino G., Carotenuto C., Di Cristofaro F., Papa S., Morrone B., Minale M., 2016, ¿La relación c/n realmente afecta el rendimiento de
biometano? una investigación de tres años sobre la digestión del estiércol de búfalo, Chemical Engineering Transactions, 49, 463-468
DOI: 10.3303/CET1649078
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biogás Investigamos una relación C/N que varía de alrededor de 9 a alrededor de 50, superando así en gran medida
el rango de valores óptimos sugerido en la literatura. El estiércol de búfalo de agua se digirió en modo discontinuo
en condiciones mesófilas, sin agregar bacterias de la semilla ni nutrientes externos.

2. Materiales y métodos
Las boñigas de búfalo se tomaron de una granja italiana, ubicada en Villa Literno (Caserta, Italia), y siempre se recogieron por la
mañana, se colocaron en recipientes de plástico, se transportaron al laboratorio y se colocaron inmediatamente en la nevera, a +4 °C.
De esta forma, el estiércol se almacena correctamente, ya que cualquier proceso de metabolismo se detiene o, al menos, se ralentiza.

Las muestras de estiércol se identifican con letra mayúscula y se enumeran en la Tabla 1 junto con la cantidad de
sólidos totales (TS), sólidos volátiles (SV), C, N y C/N.

2.1 Sólidos totales y sólidos volátiles

El cálculo de los sólidos totales (TS) (o materia seca) está especificado por la norma europea [UNI EN 14346,
(2007)]. Este método se aplica a muestras sólidas y muestras que se solidifican durante el proceso de secado. Se
aplica a muestras que contienen más del 1 % de residuo seco. El cálculo de los sólidos volátiles (SV) de las muestras
está especificado en la Norma Europea [UNI EN 15169, (2007)]. Este procedimiento es aplicable a todo tipo de
residuos, lodos y sedimentos y suele utilizarse para estimar el contenido de materia orgánica volátil.
TS varía de alrededor de 17 a 35 % (Cuadro 1) y el valor medio es 24,52 % ± 6,2 %. Esta gran desviación estándar se
debe no solo a la inevitable variabilidad biológica del sustrato, sino también a las diferentes condiciones de
recolección: por ejemplo, las muestras recolectadas de establos sin techo en un período lluvioso suelen ser más
húmedas. VS varía de aproximadamente 52 a 74 %.

2.2 Contenido de C, N y relación C/N

La determinación del contenido de C y N se obtiene utilizando el analizador EA 1110 [Thermoquest, Italia]. El
El método de medición se basa en la oxidación completa e instantánea (combustión instantánea dinámica) de las muestras
(Friis et al. 1998), con su conversión de sustratos orgánicos a productos gaseosos. Estos últimos se separan con un
cromatógrafo de gases, equipado con una columna Porapack PQS, y se cuantifican mediante un detector de conductividad
térmica. La relación C/N varía de aproximadamente 9 a 50 (Tabla 1), en gran parte fuera del rango 20-30 indicado como
óptimo en la literatura (Bardiya y Gaur, 1997).

3. Protocolo Experimental
La preparación de la muestra sigue un protocolo experimental bien definido y probado (Guarino et al., 2014). El estiércol se
mezcla con agua destilada para lograr una relación de masa de estiércol/agua igual a 30/70. Las pruebas anteriores
mostraron que esta relación es un buen compromiso entre el potencial de productividad del biogás y la viscosidad de la
suspensión. El pH de la mezcla se reduce con una solución acuosa de HCl 1 M para lograr un valor de 6,0 o 7,0. En particular,
elegimos pH = 6 en cuatro casos y pH = 7 en otros cuatro casos (Tabla 1). Fijamos el pH inicial del proceso (pHen),
evolucionando espontáneamente y controlándolo solo cuando se detiene la digestión (pHaleta). Cada muestra también se
somete a un pretratamiento mecánico de tres pasos: primero se mezcla a mano, luego se homogeneiza eléctricamente
durante 2 minutos y finalmente se filtra con un filtro Büchner equipado con una bomba de vacío.
Las pruebas experimentales se realizan en reactores por lotes que consisten en botellas de vidrio de borosilicato [Wheaton,
EE. UU.] de 280 ml selladas con tapas perforables. La anaerobiosis se obtiene insuflando nitrógeno en el interior de las
botellas con un sistema de dos agujas. Las botellas finalmente se colocan en un horno ventilado a 37 °C donde se inicia el
proceso de digestión.

Tabla 1: Propiedades de las muestras de estiércol de búfalo

TS [%] VS [%] C [%] norte [%] C/N pHen

A 28.63 - 30.83 0,62 50.12 6.0
B 20.56 - 30.18 0.86 34,93 6,0
C 26.9 - 34,78 1,06 32,72 6,0
D 17.08 - 38,75 1,88 20,61 7.0
mi 20.74 73,85 31,94 1,85 17,26 7,0
F 35,28 67,31 31,51 1,58 19,94 6,0,7,0
GRAMO 22,44 52,54 27,62 2,83 9,75 7,0
 465

La digestión anaeróbica de los desechos animales generalmente no requiere la adición de bacterias de semilla para la
producción de biogás (Carillo et al., 2014) y esta característica distingue los desechos animales de otros desechos orgánicos
(Yokoyama et al., 2007). También en nuestro estudio, el estiércol fue digerido sin ninguna adición de nutrientes o
comunidades microbianas externas.
La composición del gas del espacio de cabeza de la botella se analiza con el cromatógrafo de gases MicroGC Agilent 3000
equipado con dos columnas capilares: una MolSieve 5 A y una Poraplot U. La primera se usa para separar H2, oh2, norte2 y CH
4; la temperatura del inyector y de la columna se ajustan respectivamente a 90 °C y 110 °C con Ar como gas portador. Este
último se utiliza para CO2 mediciones; la temperatura del inyector y de la columna se ajustan a 90 °C y 85 °C,
respectivamente, y He es el gas portador.

4. Resultados y discusión
Los resultados se presentan en términos de fracción volumétrica de metano en el biogás en función del tiempo; se
interpolan con la ecuación de Gompertz modificada (Khanal et al., 2004):
∙
= − λ-t+1 (1)

donde H [%] es la producción acumulada, PAGS [%] es la productividad, es decir, el valor asintótico, Rmetro [h-1] es la tasa
máxima de producción, mi es el número de Euler, λ [h] el tiempo de fase de retardo y t [h] el tiempo de incubación. La Figura
1 muestra CH4 fracción de volumen en función del tiempo para las muestras A, B, C y F, es decir, las cuatro muestras
digeridas con pHen = 6. Los valores correspondientes de los parámetros de Gompertz PAGS, Rmetro y λ, obtenidos del mejor
ajuste de los datos con la ecuación (1), se reportan en la Tabla 2 junto con el coeficiente de regresión R2 y el valor del pHaleta
medida al final del proceso de digestión.

80
pHen = 6,0; T = 37 °C
70

60

50
% CH4

40

30

20 Muestra A (C/N=50.12)
Muestra B (C/N=34,93)
10 .. Muestra C (C/N=32,72)
Muestra F (C/N=19,94)
0
0 100 200 300 400 500 600 700 800
Tiempo [h]

Figura 1: Evolución de la concentración de biometano con el tiempo a pHen = 6, la temperatura de fermentación es de 37 °C. Los
símbolos son los datos experimentales, las líneas son las curvas de regresión.

Tabla 2: Parámetros de Gompertz para los datos de la Fig. 1 (pHen = 6,0; T = 37 °C)

PAGS [%] λ [h] Rmetro [h-1] R2 pHaleta

Muestra A 54.1 36,26 0,25 0.99 6.77

Muestra B 60,9 140.74 0.16 0.99 7.01
Muestra C 59.7 120.82 0.23 0.99 7.19
Muestra F 58,9 137.83 0.21 0.99 6.86
466

Los datos de la Figura 1 y la Tabla 2 indican que la muestra A tiene un comportamiento ligeramente diferente al de las muestras B, C y
F. En particular, la Muestra A tiene el tiempo de fase de retardo más corto (λ = 36,26 h) y la tasa de producción más rápida (R = 0,25
horas-1), mientras que el valor de PAGS es el más pequeño e igual al 54,1 %. Observe que el proceso de digestión de la muestra A se
detuvo después de aproximadamente 400 h, mientras que, en los otros casos, seguimos el proceso durante al menos 500 h. Esto
puede conducir a una subestimación de la productividad.PAGS de la muestra A. Las muestras B, C y F tienen un tiempo de fase de
retraso similar (alrededor de 133 h) y un PAGS igual a alrededor del 60%, R varía de 1,16 a 0,23 h-1. Vale la pena notar que la muestra
A tiene una C/N igual a 50.12, mucho mayor que el valor sugerido como óptimo en la literatura para la digestión de desechos,
mientras que las otras relaciones C/N caen cerca del límite del intervalo sugerido [20- 30]. También podemos observar que el pHaleta
evoluciona automáticamente, en los cuatro casos, hacia un valor casi neutral (Tabla 2). La Figura 2 muestra CH4 fracción de volumen
en función del tiempo para las muestras D, E, F y G, es decir, las cuatro muestras digeridas con pHen = 7. Los valores correspondientes
de los parámetros de Gompertz PAGS, Rmetro y λ, obtenidos del mejor ajuste de los datos con la ecuación (1), se reportan en la Tabla 3
junto con el coeficiente de regresión R2 y el valor del pHaleta medida al final del proceso de digestión. Los datos de la Figura 2 y la Tabla
3 muestran que las cuatro muestras se comportan de manera similar. Se puede observar una ligera diferencia para la muestra E
(triángulos), que tiene una tasa de producción ligeramente más rápida igual a 0,39 h-1. Hagamos hincapié en que en este caso la
relación C/N de la muestra G (representada conestrellas) es menor que los valores sugeridos como óptimos, y no hay diferencias
significativas en la productividad PAGS se encuentran con respecto a las otras muestras. Es interesante señalar que el pHaleta vuelve a
ser neutral y casi invariable con respecto al pHen.

80
pHen = 7,0; T = 37 °C
70

60

50
CH4 [%]

40

30

20 Muestra D (C/N=20,61)
Muestra E (C/N=17,26)
10 .. Muestra F (C/N=19,94)
Muestra G (C/N=9.75)
0
0 100 200 300 400 500 600 700 800
Tiempo [h]

Figura 2: Evolución de la concentración de biometano con el tiempo a pHen = 7, la temperatura de fermentación es de 37 °C. Los
símbolos son los datos experimentales, las líneas son las curvas de regresión.

Tabla 3: Parámetros de Gompertz para los datos de la Fig. 2 (pHen = 7,0; T = 37 °C)

PAGS [%] λ [h] Rmetro [h-1] R2 pHaleta

Muestra D 68.81 99.07 0.18 0.99 7.13

Muestra E 69.93 97,19 0,39 1.00 6.95
Muestra F 63.86 139.67 0.33 0.99 7.05
Muestra G 70.51 79,25 0,20 1.00 -
 467

5. Conclusiones
El objetivo de este trabajo es comprender si el valor de la relación C/N realmente afecta el proceso de digestión anaeróbica
del estiércol de búfalo de agua en condiciones mesófilas. A pesar de que los valores considerados óptimos en la literatura
varían de 20 a 30, las muestras que analizamos muestran una alta productividad de biometano en un intervalo C/N más
amplio de 9 a 50. La Figura 3 resume todos nuestros resultados experimentales informados en términos de productividad.
PAGS en función de la relación C/N. Por casualidad, solo un punto (muestra D) cae realmente dentro del intervalo óptimo,
delimitado en la figura con líneas discontinuas, y dos puntos (muestras F) están en el límite inferior, todos los demás están
fuera. La productividad de todas las muestras varía entre 54,1 % y 70 %. Se puede reconocer una tendencia cada vez menor
en la Fig. 3, sin embargo, es importante señalar que: i) la productividad de la muestra A puede subestimarse debido al corto
tiempo de incubación; ii) en la Fig. 3 las productividades obtenidas se refieren a muestras digeridas a partir de dos pH
diferentesen's. Más crítica parece la observación de que, en promedio, la productividad de las muestras con pHen = 7 (
simbolos de agujeros) es ligeramente mayor que el de las muestras con pHen = 6 (simbolos llenos). El proceso parece así
promovido por un pH = 7 y, de hecho, también las muestras que comenzaron con un pH inicial = 6 evolucionaron
espontáneamente hacia un pH neutro.

80
EpH7
70 DpH7
GpH7 pH6
FpH7
60
C pH6
FpH6

50 ApH6
P [%]_CH4

40

30

20

10

0
0 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60
C/N

Figura 3: CH4 productividad frente a Relación C/N. Las líneas discontinuas delimitan el intervalo de relación C/N óptimo de la literatura.

Referencias

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