Inhibición de CYP3A4 por fracciones de flavonoides y flavonoides individuales

La fracción flavonoide total inhibió la actividad de CYP3A4 con un IC50 del 1%. Las
subfracciones de flavonoides I-III también inhibieron CYP3A4, pero con menor potencia por
lo que el cálculo de un IC50 no fue posible. La sinensetina y la nobiletina inhibieron el CYP3A4,
pero solo a concentraciones más altas. La combinación sinergica de sinensetina y nobiletina
produjo un IC50 de 72 µM (relativo a cada compuesto).

Inhibición de CYP1A2 por fracciones de flavonoides y flavonoides individuales

La fracción flavonoide total inhibió CYP1A2 con un IC50 de 2,5%. Esta actividad no se observó
con las subfracciones I-III, sinensetina, la nobiletina y la tangeretina fueron potentes
inhibidores de CYP1A2.

Inducción de ARNm de CYP3A4, ABCB1, CYP1A1 y CYP1A2 por fracciones de flavonoides y

flavonoides individuales
La fracción de flavonoides totales indujo la expresión de ARNm de todos los genes
investigados de manera dependiente de la concentración, con un efecto máximo similar a los
controles positivos rifampicina y βnaftoflavona.

Ninguna subfraccion indujoCYP3A4 o ABCB1.

Solo la sub-fracción 1 indujo CYP1A1 ARNm.

Tangeretina Indujo ARNm CYP3A4.

Nobiletin, sinensetin y tangeretina indujo ARNm CYP1A1.

CYP1A2fue inducida por nobiletina y sinensetina

DISCUSION

CYP3A4 y CYP1A2, que fueron inhibidos por todo el jugo

La isoenzima CYP1A2 metaboliza menos, por lo que su inhibición pueden producirse

interacciones medicamentosas graves.

CYP1A2 fue inhibido profundamente por la fracción flavonoide total y en menor grado por las
subfracciones I-III. Aunque no pudimos evaluar la sub-fracción IV, esta fracción es
probablemente responsable de la inhibición observada, porque todos los flavonoides
principales encontrados en esta fracción eran inhibidores potentes de CYP1A2 con IC50 valores
que oscilan entre 2,4 y 7,8 µM. Nuestros datos confirmaron los efectos inhibidores de CYP1A2
de tangeretina y sinensetina descritos anteriormente.

la nobiletina, la sinensetina y la tangeretina son inhibidores principales de CYP1A2 que

contribuyen o causan la inhibición de CYP1A2 observada con el jugo de clementina y su
fracción flavonoide.

La fracción flavonoide total inhibió CYP3A4 más potente que CYP1A2, pero esta fuerte
inhibición no se observó con las subfracciones I-III. De manera similar, ninguno de los
flavonoides individuales probados inhibió el CYP3A4, lo que significa que los efectos aditivos o
sinérgicos podrían ser responsables de los efectos observados con la fracción total de
flavonoides.
Se probaron las posibles interacciones con sinensetina y nobiletina y fueron aditivas (Figura 2).
Nuestros datos de hesperidina, nobiletina y sinensetina se confirmaron

Narirutina y didimina, demostraron claramente una inhibición muy débil de CYP3A4 solo a
concentraciones más altas.

El jugo de clementina indujo genes fuertemente impulsados por PXR, comoCYP3A4 y ABCB1,
así como genes impulsados por AhR, como CYP1A1 y CYP1A2. Estos efectos también se
observaron para la fracción flavonoide total (CYP1A1 se recuperó la actividad en la sub-
fracción I, pero no se probaron flavonoides individuales). Esto sugiere que sus componentes
principales, 6,8-di-C-glucosil-apigenina y / o 6,8-di-C-glucosil-diosmetina, potencialmente
causada CYP1A1 inducción. Ni las subfracciones II y III ni sus componentes indujeronCYP1A1.
Sin embargo, todos los flavonoides de sub fracción IV inducida CYP1A1 mientras que la
nobiletina y la sinensetina también indujeronCYP1A2. Así, la fracción flavonoide total, sub-
fracción I, nobiletina, sinensetina y tangeretina activaron AhR, lo que sugiere la inducción
deCYP1A1 y CYP1A2 fue mediado por este factor de transcripción.

Nobiletina, sinensetina y tangeretina se ha descrito como un inductor deCYP1A1 / A2; para la

Ninguna de las subfracciones I-III ni sus componentes indujeron ABCB1o CYP3A4; por el

La inducción deCYP3A4 fue mucho más pronunciada que la inducción de ABCB1 (Theile et al.,
2017). En conjunto, la inducción deCYP1A observado con el jugo de clementina utilizado en
nuestro estudio, y sus fracciones de flavonoides, se puede atribuir a la nobiletina, sinensetina,
tangeretina y los compuestos de la sub-fracción I, mientras que la tangeretina fue la única
CYP3A4-compuesto inductor.

Sin embargo, queda otra cuestión importante, a saber, si las concentraciones de los
flavonoides activos en el jugo de clementina alcanzan concentraciones en vivo lo
suficientemente alto como para provocar interacciones con fármacos coadministrados.

Los principales componentes del jugo de clementina utilizados en nuestro estudio,

hesperidina y narirutina, en concentraciones> 100 µM, no tuvieron efectos prominentes
sobre los CYP investigados.

Los posibles responsables, la nobiletina, la sinensetina y la tangeretina, estaban presentes en

concentraciones mucho más bajas en el jugo de clementina (3-5 µM). En el intestino, estas
concentraciones pueden ser lo suficientemente altas como para inhibir o inducir los CYP, pero
las concentraciones plasmáticas después de la ingestión de clementinas o jugo de clementina
nunca se han medido y, por lo tanto, los cálculos siguen siendo especulativos.

Sin embargo, las biodisponibilidades de la nobiletina y la tangeretina al menos no son altas

(36% y 6-27%, respectivamente, en ratas [Kumar y col., 2012; Hung et al., 2018; Elhennawy y
Lin, 2017]) y los flavonoides se unen a proteínas en el plasma (Bolli y col., 2010); por lo tanto,
parece poco probable que las concentraciones sistémicas de estos flavonoides, después de la
ingestión de clementinas o jugo de clementina, alcancen concentraciones lo suficientemente
altas como para ejercer interacciones entre alimentos y medicamentos.

En general, la probabilidad de interacciones entre la clementina y el fármaco depende

sustancialmente de la (s) cantidad (s) de fruta (s) ingeridas y su composición, que varía mucho
entre lotes y cosechas.
Recientemente, hemos demostrado que otro lote de clementinas no contiene nobiletina,
sinensetina ni tangeretina, y no inhibe la actividad de CYP3A.en vivo (Hohmann et al., 2019),
subrayando la importancia de la variación de un lote a otro.

Podría surgir un mayor riesgo de interacciones farmacológicas por la ingestión de flavonoides

individuales o extractos de cítricos con efectos beneficiosos para la salud. Los flavonoides
cítricos son compuestos biológicamente activos que ejercen varios efectos beneficiosos que
incluyen acciones antioxidantes, antiinflamatorias y antihipertensivas (Barreca et al., 2017;
Mulvihill, Burke y Huff, 2016) y, por tanto, se promocionan como o dentro de los suplementos
dietéticos. Los estudios que investigaron, por ejemplo, los efectos beneficiosos de la
hesperidina utilizaron

Especialmente para la nobiletina, la sinensetina y la tangeretina, con sus fuertes efectos sobre
la expresión de algunos genes CYP en el rango micromolar inferior, las interacciones pueden
ser un riesgo desatendido cuando se consumen como suplementos dietéticos

Sin embargo, las concentraciones de 6,8-di-C-glucosil-apigenina, 6,8-di-C-glucosildiosmetina y

crisoeriol 7-O-neohesperidoside fueron bajos en comparación con los otros flavonoides. La
posible inhibición y / o inducción tendría que ser muy fuerte para que las contribuciones de
estos compuestos al efecto global fueran sustanciales.

No investigamos todos los posibles efectos aditivos y sinérgicos. Sin embargo, los efectos de
los flavonoides individuales investigados no explicaron por completo los fuertes efectos del
jugo de clementina nativa o la fracción flavonoide total, lo que significa que es posible que
otros compuestos estén activos o que el impacto de las clementinas / jugo de clementina en
las enzimas metabolizadoras de fármacos sea menor. resultado de la acción combinada de
varios flavonoides o compuestos no flavonoides. (3)