microscopía

10m
1 μm
 5μm

5μm
5μm
 Límite de resolución

400 nm < λ < 700 nm

LR = 0.61 x λ AN: apertura numérica
AN

LRojo = 0.2mm
LRMO = 0.2μm
LRMET = 0.2nm
1μm
10μm
10m
 1000X

5m

4m
 Características principales de un MOC, de un MET y de un MEB
El dibujo pone de manifiesto las similitudes en el diseño de estos tipos de microscopios. Mientras que las lentes del
MOC son de cristal, las de los microscopios electrónicos son bobinas magnéticas. Ambos tipos de microscopios
electrónicos requieren que la muestra se coloque al vacío.
Microscopio óptico compuesto
Microscopios electrónicos
Microscopio electrónico de barrido
 Sistemas ópticos de un microscopio de fluorescencia
El juego de filtros consta de dos filtros de corte (1 y 3) y de un espejo dicroico (de ranuras ordenadas) (2). En este
ejemplo se muestra un juego de filtros adecuado para la detección de la fluorescencia de la fluoresceína. En este tipo
de microscopios es especialmente importante que la lente objetivo tenga una elevada apertura numérica, ya que para
una amplificación dada la brillantez es proporcional a la cuarta potencia de la apertura numérica.
Funcionamiento del microscopio de fluorescencia. La luz procedente de la fuente (lámpara de
mercurio o xenón), atraviesa un primer filtro que selecciona la longitud de onda capaz de excitar al
fluorocromo, antes de incidir sobre la muestra. Esta luz se refleja en un espejo dicroico e incide
sobre la muestra, excitando al fluorocromo, el que emite fotones de una longitud de onda mayor
que la incidente. La luz emitida por la muestra no se refleja sino que atraviesa el espejo dicroico y
llega a un segundo filtro que selecciona la longitud de onda de emisión del fluorocromo.
Finalmente, la luz ingresa a un fotomultiplicador que la convierte en una señal eléctrica.
https://iie.fing.edu.uy/investigacion/grupos/gti/timag/trabajos/2007/proteus/epifluorescencia.html
Microscopio de fluorescencia

¿Qué son los

fluorocromos?
 DAPI (4 ',6-diamidino-2-fenilindol): marcador fluorescente que se une
fuertemente a regiones enriquecidas en adenina y timina en secuencias
de ADN

Perfil de fluorescencia de excitación

(358nm, UV) y emisión (461nm, azul) de
DAPI unido a ADN bicatenario
 ANEXO MICROSCOPIO ÓPTICO: Lente de inmersión

https://www.microscopyu.com/tutorials/immersion