1

TECNOLÓGICO NACIONAL DE MÉXICO

INSTITUTO TECNOLÓGICO DE LA CUENCA DEL PAPALOAPAN

BOTÁNICA SISTEMÁTICA

UNIDAD 2. Métodos de estudio de los microrganismos

PRÁCTICA N°4
Esterilización

PRESENTA
Martínez Sánchez luz yareli

CARRERA
Ingeniería en Agronomía

ASESOR
M. C. JOSÉ ALFREDO GARCIDUEÑAS PAZ

SEMESTRE

GRUPO
A
 2

ÍNDICE

INTRODUCCIÓN ........................................................................................................ 3

OBJETIVO............................................................................................................... 3

MATERIAL .............................................................................................................. 4

METODOLOGÍA ...................................................................................................... 5

RESULTADOS ............................................................................................................ 5

CONCLUSIÓN ............................................................................................................ 6

BIBLIOGRAFÍA ....................................................................................................... 6
 3

INTRODUCCIÓN

La esterilización es un método de eliminación total de todo tipo de organismo que

asegura la ausencia absoluta de cualquier forma viviente. Una esterilización deficiente o
manipulación incorrecta de materiales y medios de cultivo conlleva a contaminaciones,
resultados erróneos o pérdida del material biológico. Por ello, se requieren buenas
prácticas de laboratorio para su adecuado manejo.

La esterilización por calor seco o húmedo son los métodos que se utilizan con mayor
frecuencia en el Laboratorio de Microbiología. El calor seco destruye a los
microorganismos por oxidación, por ejemplo, al exponerlos directamente a la flama de
un mechero o en horno a 150-180°C durante 2 horas. Estos métodos se aplican en la
esterilización de asas de inoculación y para todo tipo de material de vidrio y quirúrgico.
Los procesos con calor húmedo afectan la estabilidad de estructuras celulares y
proteínas; se aplican para esterilizar medios de cultivo, soluciones termoestables,
materiales de vidrio y cultivos bacterianos que se desechan. El equipo de uso común es
la autoclave, que utiliza vapor de agua a presión (15 lb/in2); con esta presión el material
alcanza una temperatura de 121 °C y si se mantiene durante 15 minutos se asegurará la
inactivación de endosporas, que son las estructuras bacterianas más resistentes al calor.

La esterilización implica la destrucción de todos los microorganismos, incluyendo los

esporos. La desinfecciónsupone la destrucción de los microorganismos vegetativos que
pueden causar enfermedades o en el contexto de las industrias de alimentos, los que
pueden producir alteraciones. La desinfección no mata necesariamente a los esporos.

OBJETIVO

Conocer los principios generales de las técnicas de esterilización de materiales de vidrio

(cajas de Petri y Tubos de ensayo) para ser utilizados en prácticas futuras
 4

MATERIAL
Bata

Guates látex

3 matraz Erlenmeyer de 250 ml

2 tubos de ensaye

10 cajas Petri

3 pipetas de 10 ml

2 pinzas de disección grandes

1 pinza de disección pequeña

Autoclave
1 paquete de algodón plisado

1 metro de pañalina

1 marcador indeleble

1 carrete de hilo blanco

1 rollo de papel estraza

1 tijeras

1 cinta masking

1 franela

Atomizador con alcohol 70%

Atomizador con benzaldehído

 5

METODOLOGÍA

• Portar bata cubre bocas y guantes de látex.

• Rellenar la hoja de material
• Limpiar la mesa que será ocupada con alcohol y benzaldehído
• Coloca el papel de estraza sobre la mesa de laboratorio
• Envolver correctamente la caja de Petri, se dobla el papel por las dos mitades de tal forma
que la cubra y dejando un pliegue en el centro, posteriormente se doblan las puntas hacia
atrás y se pone cinta testigo.
• Para envolver el tubo de ensayo se corta un pedazo de papel de estraza a lo largo, se tapa
el orificio superior con un tapón hecho de algodón y se comienza a envolver de forma circular
hasta que cubra todo el tubo se deberá de poner cinta masking en las dos puntas dando un
dobles de tal forma que queden en la misma dirección.
• Colocar el nombre de la mesa a ala que pertenece los materiales
• Colocar agua suficiente en la autoclave, se meterá el material envuelto, se sellará y se dejará
en el fuego por 20 minutos.
• Al pasar los 20 minutos se sacará el material, se dejará secar y después podrá utilizarse o
bien se podrá guardar

RESULTADOS
Se debe utilizar el papel correcto, de lo contrario se romperá y el material no queda
esterilizado. Si el material no se envuelve correctamente, la materia no está estéril.
 6

CONCLUSIÓN
El material debe ser esterilizado para poder ser usado antes de cultivas microorganismos
porque de lo contrario podrían crecer otros organismos que no son requeridos. Es
importante envolver correctamente el material y el tiempo que es necesario para que se
logre la esterilización.

La limpieza, desinfección y esterilización son tareas fundamentales para reducir los

riesgos en entornos donde se presenta una alta carga micobacteriana, principalmente
aquellos asociados con la contaminación. Por tanto, como parte de los programas de
limpieza y seguridad en la industria farmacéutica, alimenticia, bioquímica y en entornos
de servicios sanitarios, se deben implementar procesos que garanticen que tal limpieza,
desinfección y esterilización se realicen de manera correcta, según las características
específicas del tipo de trabajo realizado en cada entorno. Para comenzar se debe realizar
un lavado de instrumental y material para laboratorio. Una vez hecho esto, se puede
proceder a su desinfección, y en caso de ser requerido, a su esterilización.

BIBLIOGRAFÍA

Black, J. 1999. Microbiology Principles and Exploration. Fourth edition. John Wiley
& Son, Inc.

Clavell, L.; Pedrique de Aulacio, M. 1992. Microbiología. Manual de Métodos Generales

(2da edición). Facultad de Farmacia. Universidad Central de Venezuela.

Murray, P. 1999. Manual of Clinical Microbiology. 7th edition. American Society for
Microbiology. Washington, DC
.
Standards of Sterilization. 2001. Monitoring the Sterilization Process. Online Education.

The Pharmacopeia of the United States of America. Sterilization and Sterility Assurance
of Compendial Articles. Cap 1211. 32 Edition. Rockville: USP; 2008.