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INICIO

Realizar una siembra masiva en agar sangre

Colocar un disco de bacitracina de 0,04 U


sobre superficie del agar

Incubar de 20 a 24 horas a 34°C en


ambiente con microaerofilia

Realizar una medición del halo de inhibición


(si existe) del cultivo

Si este es mayor a 14 mm la sensibilidad es


positiva

FIN
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Realizar una siembra masiva en agar sangre

Colocar un disco de optoquina sobre


superficie del agar

Incubar de 20 a 24 horas a 34°C en


ambiente con microaerofilia

Realizar una medición del halo de inhibición


(si existe) del cultivo

Si este es mayor a 14 mm la sensibilidad es


positiva

Si el halo se encuentra entre 9 y 14 mm


realizar prueba de confirmación de
solubilidad en bilis

FIN
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Realizar una siembra masiva en agar


Mueller Hinton

Inoculando una cierta cantidad de bacterias


de manera uniforme para formar un
“césped” bacteriano.

Colocar un disco de papel filtro con la


novobiocina al 5𝜇g

Incubar de 18 a 24 horas a 34°C

Verificar si existe la presencia de un halo de


inhibición

FIN
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Tomar la placa de agar con la siembra del


microorganismo susceptible a la prueba

Colocar el disco impregnado de antibióticos


(sulfametoxazol) en el cuadrante correspondiente
(en el caso de un análisis) o en el centro del agar a
analizar.

Se lleva a incubar de acuerdo a los requerimientos


que el microorganismo requiera (por lo general  de
18 a 24 hrs).

Se mide el diámetro de la zona que rodea a cada


disco

Los resultados se anotan de acuerdo a cada


combinación de microorganismo-antibiótico tiene
diámetros diferentes que implican a las anotaciones
del fabricante.

FIN
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Poner 0,1 ml de agua desionizada estéril en un


pequeño tubo de ensayo de plástico

Tomar 1-3 colonias de un aislamiento reciente y


emulsionarlas en el agua.

Dejar caer el disco de hipurato en la suspensión


(usar pinzas).

Incubar en medio aerobio durante 2 horas a 35-


37°C.

Dispensar 2 gotas del reactivo ninhidrina o 3 gotas


de BactiDrop ninhidrina, en cada tubo de ensayo,
mezclar y reincubar en medio aerobio durante 30
minutos a 35-37°C.

Observar el desarrollo de un color entre azul y


púrpura.

FIN
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Abrir la llave del gas y encender el mechero

Esterilizar el asa bacteriológica al rojo vivo y enfriar en la caja de agar


sangre a utilizar.

Abrir la caja de Petri con la cepa muestra (Streptococcus aureus) y


recolectar un poco del crecimiento con el asa bacteriológica.

En una caja de Petri con agar sangre hacer una línea en el medio del
agar, desde la parte superior a la inferior, en un sólo estriado.

Esterilizar el asa bacteriológica

Abrir la caja con el cultivo de alguno de las bacterias a analizar y


realizar una línea del centro de la estría hacia el borde del agar (es
importante no tocar la estría principal, dejar aprox. 0.5 cm).

Esterilizar el asa bacteriológica.

Realizar las estrías con las demás bacterias, sin que se unan.

Incubar a 35±2°C por 24 horas.

FIN

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