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I. INTRODUCCIÓN.
El coagulo que se forma por acción del cuajo presenta una estructura y características
reologicas muy diferentes de la formada por un gel láctico o acido. Es suave, elástico,
de una gran cohesión, impermeable, y contráctil, en el caso de un coagulo enzimático,
se tendrá una agregación de micelas que están fuertemente mineralizadas; por lo
contrario, en el gel láctico hay una agregación de sub-unidades micelares únicamente
formadas por la asociación de proteínas, la dosis del cuajo utilizada también es
importante en las características reologicas del gel; una dosis elevada aumenta la
rapidez de las uniones entre micelas, la velocidad de rigidez y la impermeabilidad del
gel[ CITATION LEN85 \l 10250 ]
FIGURA N°2: unión entre sub – unidades micelares por el fosfato de calcio
FUENTE: [ CITATION SCH82 \l 10250 ]
III.2. DIFERENTES TIPOS DE ENZIMAS COAGULANTES
Dentro de las enzimas coagulantes se encuentra el cuajo que es extraído del cuarto
estómago de los rumiantes jóvenes y los sustitutos del cuajo que pueden ser de origen
vegetal, animal bacteriano y fúngico.
III.2.1.CUAJO DE ORIGEN ANIMAL Y SUSTITUTO.
En los mamíferos, las únicas enzimas interesantes para la quesería son las secretadas por
el estómago. Las altas cantidades de enzimas digestivas producidas por el páncreas
como tripsina y quimotripsina, no interesan, ya que su actividad proteolítica no
específica es demasiado grande y, además, su pH óptimo se sitúa en la zona alcalina
(Alais, 1996).
Quimosina es el nombre científico de la enzima contenida en la preparación comercial
denominada “cuajo”. El término quimosina es preferible al de “renina”, que se presta a
confusión. Además el extracto de cuajo presenta una actividad coagulante entre un 10%
a un 20% de pepsina (Alais, 1996).
Según Alais (1996), la pepsina, en especial la de cerdo, se utiliza en algunos países de la
zona mediterránea, en la fabricación de quesos, dando cuajadas amargas, cuya
consistencia es diferente a las obtenidas con cuajo. El real inconveniente de esta enzima
es que no cuaja leche fresca.
El cuajo obtenido de pepsina de pollo y cerdo, según Whitaker citado por Little (1978),
son obtenidas como pepsinógeno de la mucosa del estómago de estos animales.
Posteriormente, el pepsinógeno, por un fenómeno autocatalítico, se transforma en
pepsina y ésta se purifica para luego ser usada en quesería. La pepsina de pollo, también
se ha utilizado como sustituto de cuajo (Little, 1978).
III.2.2. CUAJO DE ORIGEN VEGETAL Y SUSTITUTO
Los vegetales han sido objeto de investigación con el fin de aislar enzimas coagulantes,
mucho antes que los microorganismos. El jugo de numerosas especies pueden dar
origen a la coagulación de la leche, pero las enzimas que se extraen tienen una actividad
16 proteolítica bastante intensa respecto a su actividad coagulante. (Alais, 1996)
Existen coagulantes de flores de cardos como Cynara cardunculus que son usados
tradicionalmente en Portugal en la fabricación de quesos blandos con leche de oveja.
Esta enzima tiene mayor actividad al disminuir el pH y más proteolítica que el cuajo
(Viera y Barbosa, citados por Green, 1999).
Alais (1996), menciona que la Fiscina extraída de la higuera, la Bromelina, extraída de
los tallos de la piña, son parecidas a la papaína, que por sí sola pueda romper los enlaces
peptídicos que la tripsina y la pepsina rompen separadamente. Ocurre lo mismo,
probablemente, para las preparaciones del cardo, las alcachofas, galios, calabazas, etc.
El mismo autor señala que, los resultados obtenidos al usar las enzimas vegetales, son
en general malos en los que se refiere al rendimiento y las calidades organolépticas de
los quesos fabricados de esta forma: defecto de textura y amargor pronunciado.
III.2.3. CUAJO DE ORIGEN MICROBIANO Y SUSTITUTO
Se encuentran las bacterias esporuladas aeróbias del género Bacillus. Estas bacterias
sobre todo B. subtilis, B. cereus, B. licheniformis, B. mesentericus, B. polymyxa, se
cultivan industrialmente para la producción de diversas enzimas: amilasa, proteasa,
sacarosa, etc. Del medio de cultivo se puede extraer, en efecto, enzimas coagulantes de
la leche. Su aptitud para quesería es mejor que la de las enzimas vegetales, pero
sensiblemente peor que la de las enzimas producidas por los mohos. Corrientemente, las
cuajadas obtenidas carecen de cohesión, y la actividad proteolítica de estos productos es
bastante elevada. Las mayores esperanzas se fundan actualmente en las enzimas
fúngicas. Se utilizan tres especies de mohos para producir las enzimas coagulantes que
son: Endothia parasitica, Mucor pusillus, Mucor miehei. (Alais, 1996).
III.3.FACTORES QUE AFECTAN LA COAGULACIÓN
Entre los más importantes factores que afectan la coagulación, se destacan aquellos
generales referidos a la composición de la leche (en particular su contenido en proteínas
grasa), el estado de lactación, calidad higiénica y sanitaria, etc.
Otros factores denominados críticos que caracterizan el proceso, afectan la coagulación
por quimosina de la leche. La Literatura enfatiza sus efectos y su interacción (Ernstrom
et al., 1958; Jen y Ashworth, 1970; Kowalchyk y Olson, 1977; Dalgleish, 1983; Okigbo
et al., 1985a,b; Noël et al., 1991; Sbodio et al., 1997b). En la elaboración de queso, se
identifican tres variables independientes relevantes, a saber: pH de coagulación,
temperatura y concentración enzimática, a las que deberíamos agregar el CaCl2
adicionado. Las interacciones entre ellas han sido estudiadas por numerosos autores y,
en el medio local, por Sbodio et al. (1997b, 2002).
IV.2. MÉTODOS.
IV.2.1.MATERIA PRIMA
Control de calidad de la materia prima
Acidez.
Densidad.
Prueba del alcohol.
Disolución y preparación del cultivo por acción enzimática del cuajo (quimosina)
Método del tubo de ensayo: el método más utilizado en el tiempo ha sido de Berridge
que responde a las siglas TCB, como método de la medida de la actividad de la enzima
coagulante.
Este método es estimativo del tiempo que transcurre hasta que la leche deja de
comportarse como un líquido, momento que se denomina “punto de gelificación
teórico” a una temperatura de 35°C por un tiempo de media hora.
a). Coagulación:
La mezcla inoculada coagula totalmente a 35° C durante un periodo de 30minutos.
Método del tubo de ensayo: el método más utilizado en el tiempo ha sido de Berridge
que responde a las siglas TCB, como método de la medida de la actividad de la enzima
coagulante.
sumar el tiempo mínimo que emplea la enzima para hidrolizar el porcentaje de
caseína y el tiempo necesario para la reacción de agregación avance hasta que
sea capaz de ser captada por el ojo humano.
Este método es estimativo del tiempo que transcurre hasta que la leche deja de
comportarse como un líquido, momento que se denomina “punto de gelificación
teórico” a una temperatura de 35°C por un tiempo de media hora.
a). Coagulación:
La mezcla inoculada coagula totalmente a 35° C durante un periodo de 30minutos.
C).Desuerado:
Se agito con el cuchillo 10 minutos de agitación lenta y se procede a realizar el
desuerado haciendo drenar todo el suero contenido en él.
Disolución y preparación del cultivo por acción acida del vinagre (ácido acético).
Método del tubo de ensayo: el método más utilizado en el tiempo ha sido de Berridge
que responde a las siglas TCB, como método de la medida de la actividad de la enzima
coagulante.
Este método es estimativo del tiempo que transcurre hasta que la leche deja de
comportarse como un líquido, momento que se denomina “punto de gelificación
teórico” a una temperatura de 35°C por un tiempo de media hora.
a). Coagulación:
La mezcla inoculada coagula totalmente a 35° C durante un periodo de 30minutos.
b). Corte manual de la cuajada:
Una vez que se lleva a cabo la coagulación de la leche (35 º C) se procede al corte del
producto formado utilizando liras de acero inoxidable provistas de cuerdas de acero
inoxidable tensadas en este caso trabajos con poca cantidad de leche que es 1 litro
entonces solamente trabajo en un vaso precipitado y corete se hizo con un cuchillo, Esta
operación es realizada en un tiempo de aproximadamente 10‐15 minutos.
C).Desuerado:
Se agito con el cuchillo 10 minutos de agitación lenta y se procede a realizar el
desuerado haciendo drenar todo el suero contenido en él.
V. RESULTADOS Y DISCUSIONES.
V.1. RESULTADOS.
TABLA N°1: evaluación fisicoquímica de la leche de vaca, prueba del alcohol, acidez y
densidad.
Evaluación Resultados
fisicoquímicas
Acidez 21.5°D Fuente: propia, OCHOA TICONA; Ruth
Densidad 1.026 Claudia.
Prueba del alcohol Positivo La elección de la leche es sin duda la
operación más importante en la industria
quesera, ya que la calidad de los quesos depende indirectamente de la materia prima,
cualquier defecto de la leche se transmitirá posteriormente al producto.
Según la normatividad NTP202.001: LECHE Y PRODUCTOS LACTEOS. Leche
cruda. Específica que la acidez titulable, como ácido láctico de la leche cruda debería
estar entre: 0.13 - 0.17 y según la tabla N°7 nos muestra una acidez de 0.21.5,
comparando con la normatividad, menciono que esta acida, esta fuera del rango.
Sobre la prueba de alcohol nos salió positiva debido a que la leche estuvo adulterada y
por esos motivos no pudimos pasteurizar ya que al pasteurizarlo se iba a cortar y no
hubiéramos podido llevar acabo esta práctica.
Resultados de los Cálculos para la gelificación de la leche
TABLA N°2: disolución y preparación del cultivo por acción enzimática, punto de
gelificación y tiempo de coagulación.
ACCIÓN ENZIMÁTICA PUNTO DE TIEMPO DE
GELIFICACIÓN T° COAGULACIÓN
cuajo (quimosina) 35°C 16minutos
vegetal (papaína) 35°C 2.7 minutos
Vinagre (ácido acético). 35°C 10 segundos
Fuente: propia, OCHOA TICONA; Ruth Claudia.
TABLA N°3: resultado del tubo de ensayo, peso de masa, peso de la tela y peso total.
ACCIÓN PESO DE MASA PESO DE LA TELA PESO TOTAL
ENZIMATICA
cuajo (quimosina) 124g 12g 136g
vegetal (papaína) 91g 12g 103g
Vinagre (ácido 45g 12g 57g
acético).
Fuente: propia, OCHOA TICONA; Ruth Claudia.
140
120
100
80
60
40
20
0
1 2 3
cuajo (quimosina)
3384.5
2608.5
0.76 12.3
1 2 3 4
0.48 5.4
1 2 3 4
FIGURA N°6: unión entre sub – unidades micelares por el fosfato de calcio
3025
2545
0.34 5.4
1 2 3 4
Como se puede apreciar en la figura N°7, el queso elaborado con el cuajo (quimosina)
obtuvo una calificación de bueno en la prueba organoléptica, categoría color, olor,
sabor y textura.
Evaluación organoléptica - de color, olor sabor y textura, VEGETAL (PAPAINA).
FIGURA N°8: unión entre sub – unidades micelares por el fosfato de calcio
vegetal (papaína)
4
3.5
3
2.5
2
1.5
1
0.5
0
1 2 3 4
Como se puede apreciar en la figura N°8, el queso elaborado con vegetal (papaína)
obtuvo una calificación de bueno en la prueba organoléptica, categoría color y olor y en
cuanto sabor obtuvo regular y la textura malo.
Evaluación organoléptica - de color, olor sabor y textura, VINAGRE BLANCO
(ACIDO ACETICO).
FIGURA N°9: unión entre sub – unidades micelares por el fosfato de calcio
Como se puede apreciar en la figura N°9, el queso elaborado con vinagre blanco (ácido
acético). Obtuvo una calificación de bueno en la prueba organoléptica, categoría color
y olor y en cuanto sabor y textura obtuvo regular.
VI. CONCLUSIONES.
Logramos coagular la caseína de la leche por acción enzimática del cuajo
(quimosina), presentó una textura cerrada, homogénea, con aspecto y
consistencia de plan, debido a que el cuajo retiene gran parte de las sales
insolubles de la leche, obtuvimos un buen rendimiento.
Logramos coagular la caseína de la leche por acción enzimática vegetal
(papaína), pero no con totalidad porque al hacer el sinéresis, hubo una mala
manipulación al realizarlo, por eso es que no salió también y no hubo un buen
rendimiento.
Logramos coagular la caseína de la leche por acción acida del vinagre (ácido
acético), se logró hacer este procedimiento pero hubo una falla porque en la guía
de practica mencionaba agregar un 75 ml de vinagre blanco lo cual nosotros
agregamos 40 ml de vinagre por esas razones tal vez no nos dio un buen
rendimiento, pero aprendimos el procedimiento.
Determinamos la función del cuajo en la leche; La función principal del cuajo
es separa la caseína, de su fase liquida, que es a lo que llamamos suero, lo que le
hace totalmente importante.
Se determinó el tiempo de coagulación de las enzimas, el tiempo de coagulación
de mayor rapidez fue del vinagre blanco y lo que demoro fue del cuajo
(quimosina).
La diferencia que hubo entre la caseína coagulada por acción cuajo frente a los
otros métodos es el tiempo de coagulación y el rendimiento.
VII. BIBLIOGRAFÍA.
BRULE. (1974 ). Etude de la teneur en elements mineraus des produits . españa .
HOOYDONK, V. (1986). The efecct of various cations on the rennetingnof milk . dairy.
PAYENS. (1984). On the enzymic triggered clotting of casein. nesh: milk dairy .