NUEVO GIMNASIO SCHOOL

PRÁCTICA PRE-ESCRITA #3
“INVESTIGACIÓN EXPERIMENTAL DE UN FACTOR QUE AFECTE LA ACTIVIDAD
ENZIMÁTICA”
EVALUANDO MEJORAMOS

Grado: Décimo 2021 período

Docente: Giovanna Galvis Rojas Área: Biología - IB
A 2

Estudiante: Maria Fernanda Duarte Arias-

Fecha: 16.07.21 A: B: C:
Nicolas Betancourt Castillo

1. INTRODUCCIÓN

La enzima amilasa permite digerir los carbohidratos, esta se produce en el páncreas y en las glándulas
salivales, se puede también encontrar en alimentos como el mango. Esta enzima se encarga de descomponer
carbohidratos complejos como el almidón en azúcares simples como la glucosa. Muchos organismos
especialmente el ser humano puede descomponer el almidón gracias a esta enzima que actúa como
catalizador para una mayor absorción de estos azúcares dentro del organismo. Al igual que todas las
enzimas, la amilasa funciona a unas concentraciones óptimas temperatura y son a estas condiciones óptimas
que funciona con el sustrato.

Para el desarrollo de la investigación se tuvo que mezclar la solución de agua con almidón más un mango
pasado por una licuadora, estos dos son un ejemplo de enzima (mango) y sustrato (almidón), por lo que al
unirlos provocan actividad enzimática. Se debían exponer estas soluciones a diferentes rangos de
temperatura, por lo que se dividió la muestra en 4 tubos de ensayo, cada uno con 3 mg de almidón y 3 mL
de agua, más 3 gotas del mango a temperaturas de 0-5 °C, 20-25 °C, 75-80 °C, 95-100 °C. Para medir qué
tan rápido fue este proceso en las diferentes temperaturas se tiene que medir la concentración de oxígeno lo
cual se hará por medio de un sensor el cual estaría conectado al labquest que tomaría los datos durante 3
minutos, para luego graficarlos.
Para el desarrollo de la práctica es necesario el uso de guantes de nitrilo /latex, tapabocas, gafas de
seguridad y bata de laboratorio ya que se emplearán sustancias que pueden resultar tóxicas al ser humano.

Lo que nos motivó a realizar la investigación es el poder identificar bajo qué temperatura la amilasa actúa
mejor y a que temperatura se ve afectado el proceso de actividad enzimática.

2. PREGUNTA DE INVESTIGACIÓN
¿De qué manera la temperatura afecta la actividad enzimática del mango durante 3 minutos de reacción?

3. MARCO TEÓRICO
La amilasa también conocida como sacarasa o ptiliana es una enzima que degrada el almidón en azúcares
más simples. Su función es de catalizar los hidratos de carbono, es decir que realiza un reacción de
hidrólisis para poder digerir el almidón en azúcares como la glucosa y la maltosa.. Existen dos tipos de
amilasa la Alfa amilasa y la beta amilasa; la única diferencia es el lugar en donde se encuentran y la forma
 en la que realizan la hidrólisis. La alfa amilasa se encuentra en el tubo digestivo de los animales, mientras
que la beta amilasa en las plantas y frutas. Ambos tipos de enzimas hidrolizan los enlaces 1-4 del almidón,
sin embargo la beta amilasa comienza su acción de hidrólisis a partir de los extremos del carbohidrato, y
continúa por toda la cadena rompiendo los enlaces y dando lugar a la maltosa (glucosa-glucosa). 1

El mango es una fruta que tiene grandes cantidades de beta amilasa, esto facilita la digestión al consumir
esta fruta, debido a que se degradan más fácil los carbohidratos. Durante la maduración del mango, la β-
amilasa se rompe el almidón en azúcar lo cual le da el sabor dulce a esta fruta. El almidón por otro lado es
un carbohidrato complejo de fácil digestión (polisacárido) que pertenece al grupo de los glucanos. Está
formado por cadenas de glucosa lineales (amilosa) o ramificadas (amilopectina). La amilosa y la
amilopectina son polisacáridos las cuales el organismo puede digerir gracias a la amilasa. Cuando la
amilasa del mango reacciona con el almidón, se une este sustrato al sitio activo de la enzima y forman una
coalición.2

La temperatura puede afectar la actividad enzimática de la amilasa, ya que a ciertas temperaturas la enzima
tiende a trabajar mejor o peor, o incluso a llegar a desnaturalizarse. La temperatura optima de la reacción es
alrededor de los 70 a 80 °C, es decir, cuando llegue a esta se podrá evidenciar mayor desprendimiento de
O2; La actividad enzimática puede ser medida por medio de que tanto oxígeno se desprende durante el
proceso, si desprende más, significa que hubo mayor actividad enzimática, y viceversa. A temperaturas
bajas la enzima tiende a no tener gran desprendimiento de O2, mientras que a temperaturas muy altas, como
los 90 °C, es mayor, pero hasta tal punto, ya que puede que la enzima se desnaturaliza, lo que provocaría
que la actividad enzimática simplemente parara, ya que la estructura del sitio activo cambiaria y la enzima y
el sustrato ya no podrían colisionar.3

4. VARIABLES
4.1. Controlada: Mango, 3 minutos de reacción
4.2. Dependiente: actividad enzimática
4.3. Independiente: temperatura

5. HIPÓTESIS
*H1: la temperatura afecta directamente la actividad enzimática del mango durante 3 minutos de reacción
6. METODOLOGÍA
6.1. Materiales
● Computador (1 unidad)
● LabQuest Marca Vernier (1 unidad)

1 Nutritienda, “Para que sirve la amilasa”, 2010, Tomado de: https://blog.nutritienda.com/amilasa/

2 Pere Castells, 2016, “El almidón”, tomado de: https://www.investigacionyciencia.es/revistas/investigacion-y-ciencia/biocarburantes-
489/el-almidn-1136
3 Espinel Esperanza- Lopez Elizabeth, (21.08.2009), “PURIFICACIÓN Y CARACTERIZACIÓN DE α-AMILASA DE PENICILLIUM
COMMUNE PRODUCIDA MEDIANTE FERMENTACIÓN EN FASE SÓLIDA” Bogota, Colombia, Tomado de:
https://revistas.unal.edu.co/index.php/rcolquim/article/view/13396/36546#:~:text=La%20enzima%20presenta%20un%20pH,rango
%200%2D50%20%C2%B0C.
 ● Logger Pro Demo (1 unidad)
● Sensor de oxígeno marca Vernier ± 0.01 ppm / 1% (1 unidad)
● Sensor de temperatura marca Vernier ±0.01°C (1 unidad)
● Baño maría
● Vaso de precipitado de 600 mL ± 50mL (2 unidades)
● Cuatro tubos de ensayo de 18 X 150 mm
● Buretra 50mL ± 0,1mL
● Vaso de precipitado de 250 mL ± 25 mL
● Suspensión de enzima
● Almidón 9 mg
● Hielo
● Gradilla para tubos de ensayo
● Soporte universal
● Nueces (3 unidades)
● ¼ de Mango
● Licuadora (1 unidad)
● Churrusco (1 unidad)
● Cinta de enmascarar
● Marcador
● Agitador (1 unidad)

6.2. Método

1. Conectar el sensor de oxígeno al LabQuest.

2. ubicar una nuez en la cual se colocarán previamente los tubos de ensayo, la nuez debe quedar asegurada
de tal manera que se pueda mover de lado a lado
3. Ubicar el sensor de oxígeno al soporte universal con ayuda de una nuez de tal manera que al mover la
nuez con el tubo de ensayo este quede lo más cerca posible
4. Ubicar la bureta al soporte universal de tal manera que quede encima del tubo de ensayo sin impedir el
movimiento de este

Ensayo del efecto de la Temperatura

1. Colocar cuatro tubos de ensayo limpios en la gradilla y etiquetarlos T 0 – 5, T 20 – 25, T 75 – 80 y T 95 –

100.
2. Agregue 3 mL de almidón y 3 mL de agua a cada tubo de ensayo, así como se muestra en la tabla 1
3. Revolver las muestras con un agitador

Etiqueta de Tubo de Ensayo Volumen de almidón (mg) Volumen de agua (mL)

T0–5 3 3

T 20 – 25 (temperatura ambiente) 3 3
 T 75 – 80 3 3

T 90 – 100 3 3

Tabla 1. Cantidad de sustancias para medir efecto de la temperatura

4. Medir la actividad Enzimática a 0 – 5°C:
a. Preparar un baño de agua a la temperatura correspondiente al intervalo de 0 – 5°C colocando agua y
hielo en un vaso de precipitado de 600 mL. Asegure que la temperatura permanece en dicho rango a
lo largo del ensayo.
b. Colocar el tubo de ensayo T 0 – 5 en el baño de agua fría hasta que la temperatura de la mezcla
alcance una temperatura dentro del intervalo de 0 – 5°C. Registrar el valor real de la temperatura del
contenido del tubo de ensayo en el espacio en blanco en la Tabla 2
c. olocar el tubo de ensayo bajo la bureta y agregar 2 gotas de solución enzimática
4. Con cuidado, agitar bien el tubo de ensayo para lograr la mezcla completa del contenido. Debe comenzar la
reacción. El próximo paso debe realizarse lo más pronto posible.
5. Ubicar el tubo de ensayo debajo del sensor de oxígeno. Haga clic en el botón “Iniciar toma de datos” para
comenzar la adquisición de datos. La toma de datos terminará en 3 minutos.
6. Una vez terminada la adquisición de datos, retirar el tubo de ensayo que se encuentra debajo del sensor y
desechar el contenido en un vaso de precipitado de desperdicios.
7. Encontrar la velocidad de la actividad enzimática:
a. Mover el puntero del mouse hasta el lugar donde los datos comienzan a aumentar su valor.
Mantenga presionado el botón del mouse. Arrastre el puntero del mouse hasta el punto donde los
valores de la presión no aumenten más y suelte dicho botón.
b. Hacer clic en el botón “Ajuste Lineal “, para realizar la regresión lineal. Aparecerá una caja flotante
con la fórmula de la línea del mejor ajuste.
c. Registre la pendiente de la línea, m, como la velocidad de la actividad enzimática en la Tabla 3.
d. Cierre la caja flotante de la regresión lineal.

8. Medir la actividad Enzimática a 75 – 80°C:

a. Preparar un baño de agua a la temperatura correspondiente al intervalo de 75 – 80°C colocando agua
caliente en un vaso de precipitado de 600 mL. Asegurar que la temperatura permanece en dicho
rango a lo largo del ensayo.
b. Colocar el tubo de ensayo T 75 – 80 en el baño de agua caliente hasta que la temperatura de la
mezcla alcance una temperatura entre 75 – 80°C. Registre el valor real de la temperatura del
contenido del tubo de ensayo en el espacio en blanco en la Tabla 2.
c. colocar el tubo de ensayo bajo la bureta y agregar 2 gotas de solución enzimática. Repetir los pasos
4 – 7.
9. Medir la actividad Enzimática a 95 – 100°C:
a. Preparar un baño de agua a la temperatura correspondiente al intervalo de 95 – 100°C colocando
agua muy caliente en un vaso de precipitado de 600 mL. Asegurar que la temperatura permanece en
dicho rango a lo largo del ensayo.
 b. Colocar el tubo de ensayo T 95 – 100 en el baño de agua muy caliente hasta que la temperatura de la
mezcla alcance la temperatura del intervalo 95 – 100°C. Registrar el valor real de la temperatura del
contenido del tubo de ensayo en el espacio en blanco en la Tabla 2.
c. colocar el tubo de ensayo bajo la bureta y agregar 2 gotas de solución enzimática. Repetir los pasos
4 – 7.
10. Medir la actividad enzimática a 20 – 25°C (temperatura ambiente):
a. Registrar la temperatura del tubo de ensayo T 20 – 25 en la Tabla 2
b. colocar el tubo de ensayo bajo la bureta y agregar 2 gotas de solución enzimática. Repetir los pasos
4 – 7.

Etiqueta de Tubo de Ensayo Rango de temperatura (°C)

T0–5

T 20 – 25 (temperatura ambiente)

T 75 – 80

T 95 – 100

Tabla 2. Temperatura a la cual se encontraba la solución

7. RESULTADOS
Etiqueta de tubo de Pendiente o rapidez (ppm/
ensayo %)

0-5°C

20-25°C

75 -80°C

95-100°C

Tabla 3. Rapidez de producción de oxígeno

8. ANÁLISIS
PROCESAMIENTO DE DATOS
Gráfico de Temperatura
Genere el gráfico de la velocidad de la actividad enzimática vs. Temperatura. Los valores de velocidad se
deben graficar en el eje vertical (eje y) y los de temperatura en el eje horizontal (eje x). Los valores de la
velocidad son los mismos que los valores de las pendientes en la Tabla 4.
Parte II. Efecto de la Temperatura
3. ¿A qué temperatura es máxima la velocidad de la actividad enzimática? ¿Mínima? Explique.
4. ¿Cómo afecta el cambio de temperatura a la velocidad de la actividad enzimática? ¿Concuerda esto
con el patrón que usted anticipó?
5. ¿Por qué la actividad enzimática disminuye a temperaturas elevadas?

9. EVALUACIÓN
 Importante discutir los puntos fuertes y débiles de la investigación, así como las limitaciones de los datos y
posibles fuentes de error.

10. CONCLUSIONES
En la conclusión se debe indicar si la hipótesis propuesta se acepta o se rechaza de acuerdo con los
resultados analizados.

11. REFERENCIAS
Emplear las normas APA de referenciación según la teoría consultada.
● Nutritienda, “Para que sirve la amilasa”, 2010, Tomado de: https://blog.nutritienda.com/amilasa/
● Pere Castells, 2016, “El almidón”, tomado de: https://www.investigacionyciencia.es/revistas/investigacion-
y-ciencia/biocarburantes-489/el-almidn-1136
● Espinel Esperanza- Lopez Elizabeth, (21.08.2009), “PURIFICACIÓN Y CARACTERIZACIÓN DE α-
AMILASA DE PENICILLIUM COMMUNE PRODUCIDA MEDIANTE FERMENTACIÓN EN FASE
SÓLIDA” Bogota, Colombia, Tomado de:
https://revistas.unal.edu.co/index.php/rcolquim/article/view/13396/36546#:~:text=La%20enzima
%20presenta%20un%20pH,rango%200%2D50%20%C2%B0C.

RÚBRICA DE EVALUACIÓN INTERNA DEL BACHILLERATO INTERNACIONAL

NIVEL
CRITERI PUNTAJE
ASPECTO PARA EVALUAR OTORGA COMENTARIO
O OBTENIDO
DO

COM Relación con la exploración.

PRO Elección de pregunta de
MISO investigación o tema.

PERS
Diseño, implementación o
ONA
presentación de la
L
investigación
(0-2)

EXPL Identificación del tema y

ORA planteamiento de la pregunta
CIÓN de investigación

Información de referencia para

(0-6)
la pregunta de investigación

Pertinencia de la metodología
para abordar la pregunta de la
investigación.
 Aspectos éticos,
medioambientales y de
seguridad del informe escrito

Pertinencia de los datos brutos

presentados.

Precisión del procesamiento

ANÁL de datos
ISIS
Consideración de las

(0-6) incertidumbres en el análisis

Relación de la Interpretación
de los datos procesados y la
conclusión

Pertinencia de la conclusión
con respecto a la pregunta de
investigación.

Comparación de la conclusión
EVAL con el contexto científico
UACI aceptado.
ON
Discusión de las limitaciones

(0-6) de los datos, fuentes de error y

de los puntos fuertes y débiles
de la investigación.

Sugerencias para la mejora y la

ampliación de la investigación.

Presentación de la
investigación.

Claridad y estructura del

COM
informe.
UNIC
ACIÓ Comprensión del objetivo,

N proceso y resultados de la
investigación.
(0-4)
Errores en el uso de
convenciones y terminología
específica de la asignatura.

TOTAL /24