INSTITUTO POLITÉCNICO NACIONAL

ESCUELA NACIONAL DE CIENCIAS BIOLÓGICAS

Químico Bacteriólogo Parasitólogo

Departamento de Microbiología
Laboratorio de Ecología Microbiana

PRÁCTICA No. 1. DETERMINACIÓN CUANTITATIVA DE

POBLACIONES MICROBIANAS EN AIRE.

4QV1

Equipos No. 3B y 4B

Docentes:
● Martínez Gómez Irma Gabriela.
● Rivera Orduña Flor Nohemí.
● Sánchez Sánchez T. Nidia.
● Wang Hu EnTao.

Alumnos:
● Ángeles Cuchillo Israel.
● García Cruz Mitzi Belén.
● López Castillo José Alfredo.
● Vasquez Franco Bryan Giovanny.

Fecha de entrega: 07 de Septiembre de 2021.

Objetivos.
1. Cuantificar bacterias mesofílicas aerobias, hongos filamentosos y
microorganismos coliformes presentes en el aire.
2. Medir las variables físicas para cada sitio de muestreo.
3. Correlacionar los resultados obtenidos.
4. Establecer un patrón temporal de distribución de los microorganismos de
acuerdo a la ubicación de los sitios de muestreo.

Resultados.

Tabla 1. UFC/caja de microorganismos de aire.

Estación BMA Hongos Coliformes
No. Altura (m) 1 2 1 2 1 2
1 0 62 65 10 8 1 0
1.5 40 39 3 5 0 2
2 0 42 40 5 7 0 1
1.5 35 30 2 3 0 0
3 0 85 95 15 10 25 28
1.5 105 92 14 12 30 26
4 0 50 55 6 5 0 2
1.5 30 25 2 0 0 0
5 0 60 58 7 3 3 5
1.5 51 48 1 1 1 2
6 0 59 63 9 4 2 3
1.5 20 32 2 1 1 0
7 0 135 145 25 30 18 23
1.5 150 155 27 28 25 20
8 0 73 69 10 4 0 0
1.5 40 49 3 5 0 0

En la Tabla 1 se muestran los resultados obtenidos del número de colonias

encontradas en cada estación y la distancia a la que estaban, de los diferentes
microorganismos, como lo son: Bacterias Mesofílicas Aerobias (BMA),
Microorganismos Coliformes y Hongos Filamentosos. Considerando que el tiempo
de exposición de la muestra era de 5 minutos en las estaciones 1,2,4,5 y 6 y en las
estaciones 3 y 7 solo fue de 2 minutos.

Tabla 2. Abundancia de microorganismo en atmósfera a diferentes estaciones y alturas.

 Estación BMA Hongos Coliformes
2 2
No. Altura (m) UFC/caja UFC/m /h UFC/caja UFC/m /h UFC/caja UFC/m2/h
1 0 65 1.36x105 8 1.68x104 0 0
4 4
1.5 39 8.24x10 5 1.05x10 2 4.22x103
2 0 40 8.44x104 7 1.47x104 1 2.11x103
1.5 30 6.33x104 3 6.34x103 0 0
5 4
3 0 95 7.01x10 10 5.28x10 28 1.47x105
1.5 92 7.86x105 12 6.33x104 26 1.37x105
4 0 55 1.16x105 5 1.05x104 2 4.22x103
1.5 25 5.28x104 0 0 0 0
5 3
5 0 58 1.22x10 3 6.34x10 5 1.05x104
1.5 48 1.01x105 1 2.11x103 2 4.22x103
6 0 63 1.33x105 4 8.44x103 3 6.34x103
1.5 32 6.75x104 1 2.11x103 0 0
5 5
7 0 145 7.65x10 30 1.58x10 23 1.21x105
1.5 155 8.13x105 28 1.47x105 20 1.05x105
8 0 69 1.45x105 4 8.44x103 0 0
5 4
1.5 49 1.03x10 5 1.05x10 0 0

A partir de cada dato proporcionado de la Tabla 1 se construyó la Tabla 2, en la cual

se presentan las Unidades Formadoras de Colonias por caja, por metro cuadrado y
por metro cuadrado sobre hora, para ello se realizaron los siguientes cálculos:

Considerando que la caja Petri en donde se incubaron los microorganismos tiene un

diámetro de 8.5 cm y que para sacar el área de un círculo se usa la fórmula:
A= π*r2. Por lo tanto el radio es igual a 4.25 cm y sustituyendo los datos en dicha
fórmula, se tiene que:
A= 3.1416*(4.25)2 = 56. 74 cm2 es el área de nuestra caja Petri.

Ahora, para determinar la cantidad de microorganismos presentes en esos 56.74

cm2 se considera el número de UFC de la Tabla 1, específicamente los de la
sección 2 y que 1m2= 10, 000 cm 2. Primero calculando la de las bacterias
mesofílicas aerobias, se obtiene lo siguiente:

A los 0 m se tienen 65 UFC de BMA:

60 UFC --------- 56.74 cm2
X --------- 10, 000 cm2 X= 1.14x104 UFC/m2

Ahora para determinar la cantidad de UFC/m 2/h, se consideran los minutos en los
que se expuso para tomar la muestra y se tiene que:

1.14x104 UFC/m2 ----------------- 5 minutos

X -------------------- 60 minutos X= 1.36x105 UFC/m2/h

Obteniendo el primer dato de nuestra tabla 1. Se sigue con el mismo procedimiento,
solo cambiando el número de UFC y tomando en cuenta los minutos de exposición
de cada muestra, recordando que en las estaciones 3 y 7 fue de 2 minutos y en las
demás estaciones fue de 5 minutos.

Después se determinaron los logaritmos de cada estación con su respectiva

distancia de UFC/m2/h de cada grupo microbiano, obteniendo la siguiente gráfica:

Tabla 3. Abundancia de microorganismo en atmósfera a diferentes estaciones y alturas,

considerando UFC/m2/h y log UFC/m2/h
Estación BMA Hongos Coliformes

No. Altura (m) UFC/m2/h Log UFC/m2/h Log UFC/m2/h Log

UFC/m2/h 2
UFC/m /h UFC/m2/h
1 0 1.36x105 5.13 1.68x104 4.22 0 -
4 4 3
1.5 8.24x10 4.91 1.05x10 4.02 4.22x10 3.62
4 4 3
2 0 8.44x10 4.92 1.47x10 4.16 2.11x10 3.32
1.5 6.33x104 4.80 6.34x103 3.80 0 -
5 4 5
3 0 7.01x10 5.84 5.28x10 4.72 1.47x10 5.16
5 4 5
1.5 7.86x10 5.89 6.33x10 4.80 1.37x10 5.13
4 0 1.16x105 5.06 1.05x104 4.02 4.22x103 3.62
4
1.5 5.28x10 4.72 0 - 0 -
5 3 4
5 0 1.22x10 5.08 6.34x10 3.80 1.05x10 4.02
1.5 1.01x105 5 2.11x103 3.32 4.22x103 3.62
5 3 3
6 0 1.33x10 5.12 8.44x10 3.92 6.34x10 3.80
4 3
1.5 6.75x10 4.82 2.11x10 3.32 0 -
7 0 7.65x105 5.88 1.58x105 5.19 1.21x105 5.08
5 5 5
1.5 8.13x10 5.91 1.47x10 5.16 1.05x10 5.02
5 3
8 0 1.45x10 5.16 8.44x10 3.92 0 -
1.5 1.03x105 5.01 1.05x104 4.02 0 -

Dicha tabla se realizó determinando el logaritmo de las UFC/m2/h y después se

realizó un promedio de ese logaritmo de cada grupo microbiano a partir de la
distancia de cada estación, para ello se sumó los logaritmos de cada altura de todos
los grupos microbianos. Por ejemplo:

Para la estación 1 a 0 m: Se sumaron 5.13 + 4.22 + 0= 9.35, luego se divide entre 3

porque son 3 grupos microbianos, dando 3.11

Siguiendo el mismo procedimiento se tiene que:

Para la estación 1 a 1.5 m: 4.18

Para la estación 2 a 0 m: 4.13 Para la estación 3 a 1.5 m: 5.27

Para la estación 2 a 1.5 m: 2.86 Para la estación 4 a 0 m: 4.23

Para la estación 3 a 0 m: 5.24 Para la estación 4 a 1.5 m: 1.57

Para la estación 5 a 0 m: 4.3 Para la estación 7 a 0 m: 5.38

Para la estación 5 a 1.5 m: 3.98 Para la estación 7 a 1.5 m: 5.36

Para la estación 6 a 0 m: 4.28 Para la estación 8 a 0 m: 3.02

Para la estación 6 a 1.5 m: 2.71 Para la estación 8 a 1.5 m: 3.01

Con los datos anteriores se construyó la siguiente gráfica:

Figura 1. Número de Unidades Formadoras de Colonias de los distintos grupos microbianos

(Bacterias Mesofílicas Aerobias (BMA), Microorganismos Coliformes y Hongos
Filamentosos) con respecto al tiempo y la distancia (UFC/m2/h).

También se analizaron los factores abióticos y bióticos presentes en el lugar de

muestreo de cada estación (ver tabla 4), para ello se tomaron en cuenta las
variables físicas del aire, como lo son: grados del viento al igual que su dirección y
temperatura en °C.

Tabla 4. Temperatura y viento de las estaciones

Estación Temperatura
(°C)
1 18.5
2 19
3 15
4 17
5 18.5
6 18
7 16
8 17
Viento
Grado Dirección
2 Norte a sur
1 Este a oeste
3 Sureste a noroeste
3 Suroeste a noreste
4 Norte a sur
4 Este a oeste
2 Sureste a noroeste
3 Suroeste a noreste
Discusión.
En el caso de los microorganismos BMA en las estaciones 1, 2, 3, 4, 5, 6 y 8 hubo
una mayor cantidad de microorganismos a un nivel de 0 m, mientras que para la
estación 7 fue un mayor número de microorganismos al nivel de 1.5 m. En las
estaciones 3 y 7 al nivel de 0 m fue donde se encontró la mayor cantidad de UFC´s
para bacterias mesofílicas aerobias, esto debido a que estas estaciones se sitúan
en la caída de la cascada favoreciendo el transporte de los microorganismos por ello
aun a menos tiempo de exposición la cantidad de UFC fue mayor a las de las
demás estaciones.033
En el caso de los hongos las estaciones 1, 2, 4, 5, 6 y 7 hubo una mayor cantidad
de microorganismos a un nivel de 0 m esto puede ser debido a que posee un mayor
tamaño y por lo tanto mayor peso, por lo que habrá menor cantidad de estos en el
aire y en las estaciones 3 y 8 había un número mayor al nivel de 1.5 m debido a las
condiciones de estas siendo las de mayor cantidad de corriente de agua y por lo
tanto brisa.
Por último para los microorganismos coliformes en la estación 1 hubo mayor número
al nivel de 1.5 m, para las estaciones 2, 3, 4, 5, 6 y 7 fue al nivel de 0 m y para la
estación 8 no hubo presencia de microorganismos a ningún nivel. Nuevamente se
observa que en las estaciones 7 y 3 se obtuvieron mayor cantidad de UFC de
microorganismos coliformes debido a la ubicación de estas estaciones (caída de la
cascada).
Observando todos los conteos podemos decir que en términos generales hay un
mayor número de UFC ́s de microorganismos a 0 m que a 1.5 m, esto debido a que
el aire no posee los nutrientes necesarios para que las poblaciones crezcan, ya que
solo es un medio de transporte de los microorganismos. Siguiendo la regla de que a
mayor altura menor abundancia de microorganismos presentes.

Los microorganismos más abundes que podemos encontrar en el aire son las
bacterias mesofílicas aerobias ya que estas son un grupo de microorganismos que
tienen en común que su temperatura óptima de crecimiento es de 30-37°C
(mesófilas) y viven en presencia de oxígeno (aerobias). Dicho esto, podemos
observar que la principal condición para su crecimiento es la presencia de oxígeno
por lo cual en el aire además de transportarlos hay un crecimiento también de sus
poblaciones.

El aire es uno de los principales medios para muchos microorganismos coliformes.

La transmisión de bacterias ocurre por aerosoles o por grandes gotas de partículas
orgánicas que son llevadas por el aire (Guyon, 2000; Allen et al., 2003), por tal
razón la presencia de coliformes es más notable en la estación donde se encuentra
la cascada, ya que esta dispersión está influenciada en gran medida por la acción
del ecosistema lótico. La ausencia de coliformes nos indica una menor carga
microbiana de coliformes en el área de muestreo aéreo, esto varía de acuerdo a las
condiciones del suelo, presencia de aerosoles, presencia constante en materia
fecal, etc.

Los factores ambientales toman un papel importante sobre la abundancia y la

distribución de los microorganismos en el aire, ya que influye la temperatura,
teniendo una temperatura cálida alrededor de 37°C es un hábitat ideal para muchos
microorganismos; añadiendo otros factores como abundancia de materia orgánica,
precipitaciones anuales, luz, dirección del viento, etc.

Conclusiones.
● Los microorganismos BMA tienen un mayor crecimiento a los 0 m que a los
1.5 m. debido a la caída de cascada favoreciendo el transporte de
microorganismos en el aire.
● En el caso de los hongos también presentan un mayor crecimiento a los 0 m,
sin embargo, en algunos casos hubo un crecimiento mayor a los 1.5 m
debido a la corriente de agua y por lo tanto brisa.
● En los organismos coliformes se observa un mayor crecimiento a los 1.5 m,
en los casos de mayor cantidad de UFC se debe debido a la caída de
cascada y por lo tanto, transporte de microorganismos en el aire.
● En el caso de la estación 3 y 7 hubo una gran cantidad de microorganismos
lo que se debe a la ubicación de las estaciones, ya que estaban cerca de una
caída de agua, lo que esparcía más a los microorganismos.
Cuestionario.
1. ¿Por qué los cambios de temperatura son tan drásticos en el aire?

Existen diferentes motivos por los cuales la temperatura cambie, pero

principalmente se debe a las corrientes de aire que se generan, entre más
corrientes de aire se genere, más será el cambio de temperatura. Otro factor
importante por considerar es la humedad relativa, pues es el contenido de vapor en
el aire; además es un factor en donde si el aire caliente puede retener menor
cantidad de vapor de agua, en cambio el aire frío la humedad relativa es más alta.

2. ¿Qué nos índica la presencia de microorganismos en el aire?

Los microorganismos pueden ser transportados rápidamente, en forma de

bioaerosoles, a través de grandes distancias con el movimiento del aire que
representa el mejor camino de dispersión. Los microorganismos dispersados en el
aire tienen una considerable importancia biológica debido que Numerosas
enfermedades de plantas son causadas por hongos y algunas por virus y bacterias
que se transmiten por el aire, produciendo graves pérdidas en las cosechas
(Waggoner, 1983)

Varias enfermedades del hombre y los animales, víricas, bacterianas y fúngicas se

transmiten por la atmósfera y a menudo se producen brotes epidémicos. Además,
los microorganismos por su metabolismo o transformando la materia orgánica, son
la fuente principal de los gases producidos biológicamente en la atmósfera:
amoníaco, óxido nítrico, óxido nitroso, sulfhídrico, anhídrido carbónico.
(Stetzenbach, 1997).

3. ¿Cómo explica que los hongos puedan presentarse en cualquiera de los

medios empleados en la práctica?
Los hongos son cosmopolitas esto quiere decir que se encuentran casi en cualquier
parte, por ende, los hongos se encontrarán en la gran mayoría de procesos de
descomposición de la materia orgánica donde presente humedad, por ello el agar
rosa de bengala (ARB) es un medio selectivo que es diseñado para su proliferación,
además de que este medio suprime el crecimiento de bacterias con una temperatura
de incubación de 28°C, similar al resto de medios empleados en la práctica.

Por parte del medio EMB sabemos que los hongos no son muy exigentes y que solo
necesitan una fuente de carbono, nitrógeno y suficiente humedad consiguiéndolo en
este medio ya que el único aspecto selectivo es el uso de sacarosa/lactosa que está
dado por los indicadores eosina y azul de metileno. Finalmente, el medio CPS-EL al
igual que el medio EMB cumple con suficientes aportes de carbono, nitrógeno y
energía suficiente para el crecimiento de hongos debido a la presencia de bacto-
peptona, almidón y extracto de levadura que dan a favor el crecimiento de hongos,
además de que la temperatura de crecimiento es a 28°C; igual que la del ARB.

Bibliografía.

De la Rosa, M. A. Mosso & C, Ullán. (2002). El aire: Hábitat y medio de transmisión

de organismos. Departamento de Microbiología II. Facultad de Farmacia. Instituto
Universitario de Ciencias Ambientales. Hidalgo, México.

STETZENBACH, L. (1997): «Introduction to aerobiology». En: Hurst, C.J. et al. (ed).

Manual of environmental microbiology. Ed. American Society for Microbiology,
Washington.

WAGONER, P. E. (1983): «The aerial dispersal of the pathogens of plant disease».

En : Brooksby, J. B. (ed). The aerial transmission of disease. Ed. The Royal Society,
London

Holt-Harris and Teague. 1916. J. Infect. Dis. 18:596