Práctica de laboratorio - Uso del Microscopio

Introducción

Magnificación

La magnificación que obtienes de un objeto u organismo que observes a través de un microscopio

es el producto del aumento que le da el lente en el objetivo multiplicado por aumento del lente
ocular. Típicamente el ocular tiene una magnificación de 10X. Esto quiere decir que el tamaño de
lo que observes aumentará unas 10 veces. Los lentes presentes en la pieza o montura revólver son
los objetivos. La magnificación de estos lentes puede ser de 4X, 10X, 40X y 100X.

Magnificación = Poder del ocular x Poder del objetivo

El valor de la magnificación la tienes que acompañar con una letra X mayúscula, por ejemplo:

10X x 10X = 100X

Montaje Húmedo

Un montaje húmedo consta de colocar algún objeto o espécimen sobre una laminilla, aplicarle
agua y luego colocar sobre todo esto un cubreobjetos. A continuación, prepararás un montaje
húmedo.

Figura 1. Preparación de un montaje húmedo

Materiales

De laboratorio Que deben llevar los estudiantes

Microscopio 1 hoja de papel milimetrado
Estereoscipio 3 hilos de distintos colores
Porta y cubreobjetos Hoja de periódico
 Azul de metileno Yogurt
Goteros Semen
Bisturí Sangre
Pinzas Mucosa bucal
Agujas de disección Frasco de muestra de orina
Lancetas Flores y frutos
Cebolla
Agua del lago

Procedimiento

Observación de la letra “e”

El campo visual en el microscopio se refiere a lo que observas a través del ocular. A continuación,
experimentarás lo que ocurre con el campo visual mientras cambias de objetivo. Toma una
laminilla con la letra “e” que has recortado del periódico y obsérvala en el microscopio con el
objetivo de menor poder y presenta un dibujo. Repite el procedimiento anterior, pero esta vez
con el objetivo de mediano poder. Presenta un dibujo y anota que cambio has observado. Repite
el procedimiento anterior con el objetivo de mayor poder. Presenta un dibujo y anota que
cambios has observado.

Toma una laminilla con los hilos de tres colores, obsérvalos con el objetivo de mediano poder y
enfoca con el botón micrométrico moviéndolo lentamente. ¿Qué observas? Explica.

Campo visual
Toma una laminilla y coloca y recorte de 1 cm 2 de papel milimetrado, obsérvalo con cada objetivo
y enfoca moviéndolo lentamente. ¿Qué observas? Explica.

Observación de montajes húmedos

Prepara un montaje húmedo usando las laminillas y cubreobjetos que se encuentran en el
laboratorio. Mientras observas por el ocular, mueve con tus dedos la platina mecánica o tornillo
de ajuste hacia la derecha y luego hacia la izquierda. ¿Qué observas? Aplica esto a la muestra de
Yogurt y a la de sangre.

Figura 2. Extendido de células sanguíneas

Resultados
Objetivo de menor poder Objetivo de mediano poder Objetivo de mayor poder

Magnificación X Magnificación X Magnificación X

Figura 3. Observación de la letra “e”
 Figura 4. Observación de bacilos gram+ Figura 5. Observación de células sanguíneas

Figura 6. Observación de semen Figura 7. Observación de células de mucosa

bucal

Figura 8. Observación de flor Figura 9. Observación de fruto

Preguntas

1. ¿Con qué objetivo TIENES QUE comenzar SIEMPRE tus observaciones con el microscopio?
2. ¿Qué botón, micrométrico o macrométrico, TIENES QUE utilizar SIEMPRE cuando usas el
objetivo de mayor potencia?

3. Determina la magnificación que obtienes con el objetivo de menor poder de tu

microscopio.

4. Determina la magnificación que obtienes con el objetivo de mayor poder de tu

microscopio.
 Materiales de “La vida”

Introducción

Las biomoléculas pueden ser identificadas con unas pruebas colorimétricas sencillas. Estas pruebas
utilizan indicadores específicos para cada tipo de biomolécula. Un resultado positivo o negativo
para la presencia de una de estas biomoléculas se demuestra por medio de un cambio de color. En
el caso de determinar el pH tendrás un color diferente para cada número de pH. Los indicadores
que utilizarás son los presentes en la Tabla 1. Todas estas pruebas, a excepción de la prueba
Benedict, las puedes realizar en un tubo de ensayo con la solución a temperatura ambiente. Para
poder llevar a cabo la prueba Benedict tienes que calentar la solución en un baño de María. Para
utilizar todos los indicadores antes mencionados sólo tienes que utilizar unas cuantas gotas de
cada una de ellas, la cantidad debes determinarla por medio de la experimentación.
Tabla 1.

Coloración
Indicador Modo de Acción
Positiva
Habilidad de una biomolécula de decolorar el permanganato de Anaranjado a
Benedict
potasio gracias a la presencia de grupos cetónicos y aldehídos. verde
Actúa en las moléculas de glucosa que se encuentran arregladas en
Lugol Violeta
forma de espiral como en polisacáridos
En presencia de proteínas el biuret reacciona con los enlaces
peptídicos cambiando el color de la sustancia a violeta o purpura. Un
Biuret Violeta o
color rosado indica la presencia de pequeños polipéptidos. La
(proteínas) purpura
intensidad del color es proporcional al tamaño de las cadenas
peptídicas
Anaranjado a
Sudan IV Tiñe compuestos no polares
rojo
Se observa una
Mancha
Compuestos no polares dejan una mancha translúcida en el papel mancha semi-
translúcida
transparente

Para llevar a cabo este experimento necesitas un control. El grupo control se utiliza en las
investigaciones científicas como aquella parte o componente de la investigación que se supone no
reaccione o se afecte por el factor o compuesto estudiado.

¿Cuál debe ser el control de todas las pruebas que vas a llevar a cabo? Explica tu respuesta.
Materiales

De laboratorio Que deben llevar los estudiantes

Beakers 100 ml Licuado de papa cruda
Tubos de ensayo y gradillas Aceite de cocina
Reactivo Biuret Huevo
Reactivo Benedick Azúcar
Reactivo Lugol Gaseosa (7up ó Sprite)
Reactivo Sudan Jugo de caja
Cintas medidoras de Ph Fabuloso
Baño María Leche
Vinagre

Procedimiento

Experimento 1. Prueba de Biuret para proteínas

a. Marca 6 tubos de ensayo como sigue: 1A, 1H, 1G, 1GA, 1AL, 1P.
b. A cada tubo añade 2ml de las muestras asi:
a. 1A – 2 ml de agua destilada
b. 1H – 2 ml de albumina de huevo
c. 1G – 2 ml de solución de glucosa
d. 1GA – 2 ml de gaseosa (Sprite)
e. AL – 2 ml de solución de almidón al 10%
f. 1P - 2 ml de solución de papa
c. A cada uno añadir 2 ml de reactivo de biuret, mezcle y observe el cambio de color (si el
reactivo de biuret no está disponible, adhiera 2ml de NaOH al 10% y 10 gotas de CuSO4)
tenga en cuenta que el NaOH es muy caustico.
d. Anote sus resultados en la tabla correspondiente.
e. Marque con “+” el resultado positivo para la prueba

Experimento 2. Prueba de Benedick para monosacáridos

En la presencia de azucares el benedick camba de color azul a un color verde, amarillo, naranja o
rojizo dependiendo de la cantidad de azúcar presente. Naranja y rojo indican grandes cantidades
de azúcar.

a. Marque 6 tubos de ensayo de la siguiente forma: 2A, 2H, 2G, 2GA, 2AL, 2P.
b. En cada tubo agregue 2 ml de la muestra como sigue:
a. 2A – 2 ml de agua destilada
b. 2H – 2 ml de albumina de huevo
c. 2G – 2 ml de solución de glucosa
d. 2GA – 2 ml de gaseosa (Sprite)
e. 2L – 2 ml de solución de almidón al 10%
f. 2P – 2 ml de solución de papa
c. Agregue a cada tubo 2 ml de reactivo de Benedick, agítelos y llévelos al baño María de 3 a
5 minutos.
 d. Observe el color final y anote los resultados en la tabla correspondiente.
e. Marque con “+” el resultado positivo para la prueba

Experimento 3. Prueba de Lugol (Yodo) para almidón.

En la presencia de almidón el yodo cambia a un color purpura oscuro o azul oscuro. El almidón
está formado por muchas unidades de glucosa una al lado de la otra, esta organización atrapa las
moléculas de yodo y produce el color oscuro.

a. Marque 6 tubos de ensayo de la siguiente forma: 3A, 3H, 3G, 3GA, 3AL, 3P.
b. En cada tubo agregue 2 ml de la muestra como sigue:
a. 3A – 2 ml de agua destilada
b. 3H – 2 ml de albumina de huevo
c. 3G – 2 ml de solución de glucosa
d. 3GA – 2 ml de gaseosa (Sprite)
e. 3L – 2 ml de solución de almidón al 10%
f. 3P - 2 ml de solución de papa
c. Agregue a cada tubo 0.5 ml de reactivo de Lugol, agítelos. Observe el color
g. final y anote los resultados en la tabla correspondiente.
d. Marque con “+” el resultado positivo para la prueba

Experimento 4. Prueba para lípidos.

El sudan es una sustancia liposoluble e insoluble en agua. En presencia de lípidos el sudan se torna
rosado o rojo.

a. Toma un papel y márcalo en dos regiones una para “agua” y otra con “aceite”
b. Coloque una gota de la sustancia correspondiente a cada región marcada.
c. Deje secar por varios minutos y anote sus observaciones en la tabla correspondiente.
d. En un tubo de ensayo adicione 2 ml de agua y 2 ml de aceite vegetal, observe. Agite
vigorosamente deje reposar por 5 minutos y observe nuevamente. Anote sus
observaciones.
e. Añada unas gotas de sudan al tubo que contiene las soluciones de agua y aceite, agítelo y
déjelo reposar por algunos minutos. Anote sus observaciones.

Experimento 5. Estimación de pH con cinta indicadora

a. Coloque 10 ml de agua destilada en un beaker.

b. Estime el valor de pH evitando contaminar la cinta indicadora con cualquier sustancia o
fluido.
c. Repita este mismo procedimiento para agua de la llave y otras sustancias problemas.
Anote sus resultados en la tabla correspondiente.
Resultados
Tabla 2. Resultados a biomoléculas

Proteína Azúcar Almidón Lípidos

Contenido pH
Color +ó- Color +ó- Color +ó- Color +ó-
Agua destilada
Albumina de huevo
Solución de glucosa
Gaseosa
Solución de almidón
Licuado de papa

¿Son los valores de pH similares para el agua destilada y el agua de la llave? Si no, ¿cómo podría
explicar esta diferencia?

Dibuje la escala de pH y ubique los siguientes valores: 0, 7 y 14. Ahora marque en la escala con los
nombres e indique la ubicación de los valores de pH para cada sustancia que probó.

Analiza los resultados.