PRÁCTICA 2: Calibración de material

volumétrico
FUNDAMENTO

La calibración del material volumétrico consiste en comparar el volumen de agua medido con el peso
de ese volumen.

Para comprobar la calibración de las micropipetas en su volumen máximo y en su volumen mínimo.

OBJETIVOS

 Aprender el procedimiento que se debe realizar para comprobar si el material volumétrico

está calibrado.

MATERIALES

 Micropipeta automática.

 Pipeta aforada y pipeta graduada.

 Puntas desechables adecuadas.

 Termómetro.

 Vaso de precipitado.

 Balanza electrónica.

 Recipiente para pesar el volumen medido.

 Agua destilada.

 Calculadora.

PROCEDIMIENTO

1. Equilibrar la temperatura de las pipetas con la temperatura de la sala 2 horas antes de

calibrar.

2. Encender la balanza electrónica unos 20-30 minutos antes de pesar para que vaya
calentando.

3. Seleccionar una micropipeta automática indicando el rango de volumen con el que puede
trabajar. Identificar también tipo de pipeta (p50, p200, p1000, etc.), marca y modelo.

4. Calibraremos en primer lugar la micropipeta ajustándola a su volumen máximo.

5. Tarar la balanza con el recipiente que vayamos a emplear para pesar el volumen de agua.

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 6. Cargar la pipeta con agua al máximo de su capacidad (con cuidado de soltar el émbolo
suavemente).

7. Descargar la pipeta sobre el recipiente utilizado en la pesada y anotar el peso obtenido.

8. Repetir los puntos 5, 6 y 7 un total de 10 veces y anotar los resultados de las pesadas en la
tabla.

9. Calcular la media de todos los valores de masa sumando los resultados obtenidos y
dividiendo entre el total de medidas.

10. Repetir los pasos anteriores ajustando ahora el volumen máximo de la pipeta aforada y
graduada. Medir los volúmenes y pesarlos 10 veces.

11. Calcular el error relativo (expresado como porcentaje) cometido al medir con la micropipeta
teniendo en cuenta que el valor teórico esperado para el agua destilada es que al pesar 1 mL
obtengamos una masa de 1 g. Para estimar el valor experimental, tener en cuenta la fórmula
de conversión de masa a volumen que se indica más abajo.

12. Calcular la exactitud y precisión mediante las fórmulas adecuadas.

FÓRMULAS PARA ANALIZAR LOS RESULTADOS DE LAS MEDIDAS

Error absoluto
Ea = l valor experimental - valor teórico l

Error relativo (en %)

Er = l valor experimental - valor teórico l / valor teórico x 100

Conversión de masa a volumen

V= ( w + e ) x Z

V = Volumen (mL)
w = masa (weight) (mg)
e = pérdida por evaporación (mg)
z = factor de conversión para mg/mL
Nota: La pérdida por evaporación puede ser significativa con pequeños volúmenes. Para
determinar la pérdida de masa, dispensar agua en el recipiente de pesada, tomar nota de la
lectura y empezar a tomar el tiempo con un cronómetro. Comprobar cuánto decrece la lectura
en 30 segundos. Comparar el resultado con el tiempo de pipeteo. La duración normal de un
pipeteo son 10 segundos y las masa perdida 2 μg. Si se usa una trampa de evaporación o una
tapa, no es necesario realizar la corrección de evaporación.

Condiciones normales (CN): 20 oC y 1 atm.

1 atm = 1013 mbar

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Exactitud

La exactitud es la diferencia entre el volumen seleccionado en la micropipeta y el volumen

dispensado.

A=   - VS

A = Exactitud (accuracy)
= Volumen medio
Vs = Volumen seleccionado

En un certificado de calibración la exactitud se expresa como un valor relativo: ACC % = 100 % x A/V s

Precisión

La precisión se refiere a la repetitividad de los pipeteos. Se expresa como desviación estándar (s) o
coeficiente de variación (CV).

Además de la propia micropipeta, la práctica en el laboratorio y la experiencia del usuario son

también factores importantes que afectan a la precisión.

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 s = desviación estándar (standar deviation)
Vi = Volumen de cada medida
= Volumen medio
n = número de medidas

INFORME DE RESULTADOS

- Micropipeta utilizada:

- Rango de volúmenes que mide la micropipeta:

- Resultados obtenidos en las distintas pesadas y valor medio:

CALIBRACIÓN MICROPIPETA CALIBRACIÓN PIPETA

Masa Volumen Masa Volumen
Pesada 1
Pesada 2
Pesada 3
Pesada 4
Pesada 5
Pesada 6
Pesada 7
Pesada 8
Pesada 9
Pesada 10
Valor
medio

- Error relativo cometido al medir volúmenes con la micropipeta (en %):

- Exactitud:

- Precisión:

- Conclusiones: