“AÑO DEL BICENTENARIO DEL PERÚ: 200 AÑOS DE

INDEPENDENCIA”

UNIVERSIDAD NACIONAL DE PIURA

Facultad de Ingeniería Industrial

Escuela Profesional de Ingeniería

Agroindustrial e Industrias Alimentarias

“PRACTICA N° 2:
DISEÑO Y MANEJO DE UN
BIOARREACTOR
AERÓBICO”

CURSO:
Biotecnología

DOCENTE:
Ing. Jorge Luis Bermejo Benites

PRESENTADO POR:
Alban Flores Anabell
Abad Villegas Edinson
Barranzuela Neyra Xiomara
Carhuapoma García Delia

Piura,

Perú 2021

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 INDICE
I. INTRODUCCIÓN.............................................................................................3

1.1. Objetivos......................................................................................................4

II. MARCO TEORICO..........................................................................................4

2.1. Materiales, equipos y reactivos...................................................................14

2.1.1. Materiales.............................................................................................14

2.1.2. Equipos................................................................................................15

2.1.3. Reactivos..............................................................................................16

III. PROCEDIMIENTO.......................................................................................16

IV. CONCLUSIONES.........................................................................................16

V. DISCUSIONES.............................................................................................16

VI. RECOMENDACIONES................................................................................17

VII. REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS..........................................................18

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 I. INTRODUCCIÓN

El diseño en bioingeniería no es solo la aplicación de conceptos básicos y teóricos que

conlleven a lograr un prototipo; para la realización íntegra de un modelo, otra gran parte,

trata de la adaptación creativa y de la utilización del ingenio propio para lograr el propio

objetivo de conjuntar el ambiente biológico de un cultivo vivo con el ambiente artificial

de un dispositivo controlado; este es el resultado denominado biorreactor o reactor

biológico.

Un biorreactor es por tanto un dispositivo biotecnológico que debe proveer internamente

un ambiente controlado que garantice y maximice la producción y el crecimiento de un

cultivo vivo; esa es la parte biológica. Externamente el biorreactor es la "frontera que

protege ese cultivo del ambiente externo: contaminado y no controlado. El biorreactor

debe por tanto suministrar los controles necesarios para que la operación o proceso

(bioproceso) se lleve a cabo con economía, alto rendimiento (productividad) y en el

menor tiempo posible; esa es la parte tecnológica.

Los tratamientos biológicos son de gran interés en los procesos de depuración sobre todo

para las aguas residuales. Su uso, se fundamenta en el aprovechamiento de la capacidad

para degradar de ciertos microorganismos, de igual manera sus capacidades de acumular,

adsorber, precipitar o volatilizar una gran variedad de contaminantes presentes en el agua

contaminada en este caso.

El desempeño de los biorreactores depende casi en su totalidad del microorganismo que

se selecciona para obtener el producto de interés. Aunque la productividad del proceso

está relacionada con la optimización de los parámetros de operación del equipo siendo la

célula la entidad donde se desarrolla toda actividad manufacturada. Debido a que la

producción depende de la población de microorganismos el ambiente donde las células se

3
cultivan debe proporcionar lo necesario para que ellas rindan los resultados esperados.

Una etapa que juega un importante rol en el desarrollo de estos procesos, es el diseño de

los biorreactores o reactores biológicos. A diferencia de lo que ocurre con equipos para

procesos de transferencia de masa o de calor, no existe una metodología para el diseño de

equipos, dentro de los cuales se desarrolle una reacción o conversión bioquímica, debido

principalmente a que el diseño del biorreactor está regido por el sistema de reacción

específico que se va llevar a cabo y el tipo de microorganismo que se emplee.

Un biorreactor o fermentador es aquel dispositivo que proporciona un medio ambiente

controlado que permite el crecimiento eficaz de las células (microorganismos) para la

transformación de una materia prima en un producto. Este medio ambiente, debe tener

niveles óptimos de temperatura, pH, sustrato, sales, y oxígeno.

Los biorreactores son equipos donde se realiza el proceso de cultivo, sea en estado sólido

o líquido. Su diseño debe ser tal que se asegure homogeneidad entre los componentes del

sistema y condiciones óptimas para el crecimiento microbiano y la obtención del

producto deseado.

El biorreactor se configura para proveer al usuario un sistema tipo paquete que contiene

elementos necesarios para "funcionar en un proceso de "fermentación; los dispositivos

básicos requeridos para "funcionar en un proceso de "fermentación son:

 Equipo para suministrar aire. (transferencia de masa)

 Equipo para generar y controlar la temperatura. (transferencia de energía)

 Equipo para agitación mecánica. (transferencia de movimiento).

Un biorreactor está diseñado para brindar las características necesarias de monitoreo de

diferentes variables como temperatura, presión y concentración de gases, originadas

4
como resultado de la transformación química, las mismas que deben mantenerse

controladas a fin de ofrecer condiciones óptimas para el desarrollo y la acción del

microorganismo.[CITATION Nov12 \l 2058 ]

Otros equipos como bombas, rotámetros, válvulas, filtros, tuberías, abrazaderas, pH-

metros y sus controladores, deben ser adquiridos aparte, teniendo en claro que el equipo

puede emplearse para realizar una fermentación controlando manualmente el pH, el

oxígeno disuelto y el nivel de espuma.

En el diseño del biorreactor se tiene en cuenta, además del tipo de proceso

microbiológico, el efecto del flujo, el tiempo de residencia, el pH, la temperatura, la

biomasa, la concentración de nutrientes y la velocidad de agitación para que se desarrolle

en forma óptima la conversión de los lodos.

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 1.1. OBJETIVOS

1.1.1. Objetivo General

1.1.2. Objetivo Especifico

II. MARCO TEORICO

Las decisiones tomadas en el diseño del reactor tienen un efecto considerable sobre el

rendimiento global del proceso. Todavía no existen procedimientos sencillos o estándar

para el diseño reactores que cubran todos los aspectos del recipiente y de su operación.

El conocimiento de cinética de las reacciones es esencial para comprender como

funcionan los reactores biológicos, aunque también son necesarias otras áreas de

ingeniería de bioprocesos como balances de materia y energía, la mezcla, la transferencia

de materia y la transmisión de calor.[ CITATION Pau98 \l 2058 ]

El diseño de biorreactores es una tarea de ingeniería bastante compleja. Los

microorganismo o células son capaces de realizar su función deseada con gran eficiencia

bajo condiciones óptimas. Las condiciones ambientales de un biorreactor tales como flujo

de gases (por ejemplo, oxígeno, nitrógeno, dióxido de carbono, etc.), temperatura, pH,

oxígeno disuelto y velocidad de agitación o circulación, deben ser cuidadosamente

monitoreadas y controladas.

La mayoría de los "fabricantes industriales de biorreactores usan recipientes, sensores,

controladores y un sistema de control interconectados para su "funcionamiento en el

sistema de biorreacción.

La misma propagación celular (fenómeno conocido como Fouling puede afectar la

esterilidad y eficiencia del biorreactor, especialmente en los intercambiadores de calor.

Para evitar esto, el biorreactor debe ser fácilmente limpiable y con acabados lo más
sanitario posible (de ahí sus formas redondeadas). Se requiere de un intercambiador de

calor para mantener el bioproceso a temperatura constante. La fermentación biológica es

una fuente importante de calor, por lo que, en la mayor parte de los casos, los

biorreactores requieren de agua de enfriamiento. Pueden ser refrigerados con una

chaqueta externa o, para recipientes sumamente grandes, con serpentines internos.

En un proceso aerobio, la transferencia óptima de oxígeno es tal vez la tarea más difícil

de lograr. El oxígeno se disuelve poco en agua (y aun menos en caldos fermentados) y es

relativamente escaso en el aire (20.8 %). La transferencia de oxígeno usualmente se

facilita por la agitación que se requiere también para mezclar los nutrientes y mantener la

fermentación homogénea. Sin embargo, existen límites para la velocidad de agitación,

debidos tanto al alto consumo de energía (que es proporcional al cubo de la velocidad del

motor) como al daño ocasionado a los organismos debido a un esfuerzo de corte

excesivo.

Los biorreactores industriales usualmente emplean bacterias u otros organismos simples

que pueden resistir la fuerza de agitación.  También son fáciles de mantener ya que

requieren solo soluciones simples de nutrientes y pueden crecer a grandes velocidades.

En los biorreactores utilizados para crecer células o tejidos, el diseño es

significativamente distinto al de los biorreactores industriales. Muchas células y tejidos,

especialmente de mamífero, requieren una superficie u otro soporte estructural para poder

crecer y los ambientes agitados son comúnmente dañinos para estos tipos de células y

tejidos. Los organismos superiores también requieren medios de cultivo más complejos.

Para el diseño de un biorreactor pueden resumirse del siguiente modo dependiendo del

tipo de reactor y la fermentación a utilizar:

1. El tanque debe diseñarse para que funcione asépticamente durante numerosos

días, para evitar la aparición de contaminantes en las operaciones de bioprocesos

 de larga duración.

2. Debe permitir una mayor área de contacto entre las fases biótica y abiótica del

sistema, es decir, se debe proporcionar un sistema adecuado de aireación y

agitación para cubrir las necesidades metabólicas de los microorganismos.

3. El consumo de energía debe ser el mínimo posible.

4. Entradas para la adición de nutrientes y el control del pH.

5. El crecimiento microbiano es generalmente exotérmico, por lo que, el biorreactor

debe facilitar la transferencia de calor, del medio hacia las células y viceversa, a

medida que se produce el crecimiento celular, además de mantener estable la

temperatura deseada.

6. Mantener las células uniformemente distribuidas en todo el volumen del cultivo.

7. Suministrar oxigeno a una velocidad tal que satisfaga el consumo.

8. El diseño debe ser tal que permita mantener el cultivo puro; una vez que todo el

sistema ha sido esterilizado y posteriormente inoculado con el microorganismo

deseado.

Los biorreactores mas utilizados a nivel industrial están provistos de mecanismos de

agitación, dispersión y aireación, así como de sistemas para el control de la temperatura,

pH.

CONJUNTO BIORREACTOR SISTEMA

El conjunto biorreactor- sistema de cultivo debe cumplir con los siguientes objetivos:

1. Mantener las células uniformemente distribuidas en todo el volumen de

cultivo.

2. Mantener constante y homogénea la temperatura.

3. Minimizar los gradientes de concentración de nutrientes.

4. Prevenir la sedimentación y la floculación.

5. Permitir la difusión de gases nutrientes a la velocidad requerida por el cultivo.

 6. Mantener el cultivo puro.

7. Mantener un ambiente aséptico.

8. Maximizar el rendimiento y la producción.

9. Minimizar el gasto y los costos de producción.

10. Reducir al máximo el tiempo.

Las operaciones realizadas por estos biorreactores son las siguientes:

 Homogenización, para mantener la temperatura y la distribución de concentración

de manera uniforme.

 Mezcla solida / liquido, para mantener una suspensión con una distribución de

solidos uniforme.

 Procesos liquido / liquido para dispersar una fase en otra, formar emulsiones y

realizar extracciones.

 Proceso gaseoso/liquido, para dispersar el gas en los líquidos, airear el líquido.

 Intercambio de calor.

CLASIFICACIÓN DE LOS BIORREACTORES

 Clasificación operativa

Tanto biorreactores como fermentadores se clasifican primeramente de acuerdo al

modo de operación: discontinuo, semicontinuo, continuo.

Esta es una clasificación operativa y se aplica a cualquier reactor, sea químico o

biológico (biorreactor). En los reactores biológicos el modo de operación define el

sistema de cultivo que es el mismo y delimita la clasificación procesal-productiva

del bioproceso (cultivo). Al operar un biorreactor en una determinada categoría

(discontinuo, semicontinuo, continuo), automáticamente queda determinado el

modo de cultivo del sistema y se definen los parámetros y las características

operativas y de diseño que intervienen en el proceso productivo del sistema. 

  Clasificación biológica

Los sistemas biológicos deben interaccionar con el ambiente externo para poder

crecer y desarrollarse; es por eso que los biorreactores se clasifican

biológicamente de acuerdo al metabolismo procesal del sistema de cultivo:

anaeróbico, facultativo, aeróbico.

Los bioprocesos de cultivo y las fermentaciones están basados en el metabolismo

celular del cultivo. El metabolismo define los parámetros y características

operativas-biológicas de diseño y de operación del biorreactor.

Estas características son las que intervienen en el parte biológico del sistema y

tienen que ver con el crecimiento, productividad y rendimiento del cultivo; por lo

que, definen la clasificación biológica- procesal del sistema de cultivo.

 Clasificación biológica-operativa

Ambas clasificaciones; la biológica y la operativa, son procesalmente

interdependientes y en su conjunto afectan el diseño final del biorreactor.

Al conjuntarse ambas clasificaciones, se conjuntan también la función operativa y

la biológica para establecer entre ambas un propósito de utilización, el modo de

cultivo y el bioproceso. Siendo el propósito de utilización, el destino de cultivo

del biorreactor; para qué tipo de cultivo va a ser utilizado el biorreactor; el modo

de cultivo es sinónimo de sistema de cultivo y el bioproceso es en sí, todo el

proceso. para la historia

MODO DE OPERACIÓN Y SISTEMAS DE CULTIVO

El modo de operación de un sistema de cultivo, es sinónimo del modo de operar del

biorreactor o fermentador. Este no solo influye en el diseño propio del reactor, también,

en el modelo cinético de crecimiento del cultivo y en el proceso de producción. Existen

tres modos de cultivo aunados a tres modos básicos de operación:

 o Discontinuo(batch): por lotes o tandas, sin alimentación (F); se coloca dentro del

biorreactor la carga total de cada proceso (tanda o lote) de cultivo o

fermentación y se dejar que se lleve a cabo el proceso productivo o la

fermentación por el tiempo que sea necesario; el cuál se denomina tiempo de

retención.

o Semicontinuo (fed-batch): por lotes alimentados, con alimentación de entrada

(F1); se alimenta una línea de entrada o alimentación (F1) para que el sistema de

cultivo tenga un producto (biomasa) con máximo de crecimiento (exponencial)

y aumente la productividad.

o Continuo (continuos): por quimioestato, se alimenta una línea de entrada F1 o

alimentación y se drena una línea de salida F2 o lavado; de manera que los

flujos o caudales de ambas líneas sean iguales y la producción sea continua.

CONTROL Y MONITOREO DEL BIOPROCESO

Los parámetros a controlar dentro de un biorreactor son:

 Temperatura

 pH

 Presión parcial de O2

 Formación de espuma

Temperatura

La temperatura es un importante parámetro en la fermentación, si es que hay una

desviación de un par de grados puede disminuir drásticamente el crecimiento y la

biosíntesis de productos. Es por esto que la variación de temperatura debe varias entre

± 0.5 ℃.

pH

El pH es un bioproceso, tiene menos efecto sobre la actividad biológica de los

microorganismos que la temperatura, frecuentemente las bacterias crecen en un intervalo

de pH de 4 – 8, las levaduras de 3 – 6 y los mohos de 3 – 7. Esto también es aprovechado

en la industria. Por ejemplo, las fermentaciones de levaduras generalmente operan a un

pH tan bajo como sea posible para reducir la contaminación por bacterias.

Espuma

La aparición de espuma es un fenómeno muy indeseable ya que existe el riesgo de perder

el caldo de fermentación y no es posible llevar a cabo análisis de alta calidad y

mediciones con la presencia de espuma en el reactor. La espuma también interfiera en la

velocidad de transferencia de materia en los fluidos como se menciona en Uso de agentes

antiespumantes para el consumo de oxígeno.

 2.1. Materiales, equipos y reactivos

2.1.1. Materiales

Materiales de vidrio

 Balón de destilación

 Matraz aforado

 Tubos de ensayo

 Vidrio reloj

 Vaso precipitado

 Microscopio

 Cajas de Petri

 Probeta

 pH-metro

 Matraz de Erlenmeyer

 Botellas para cultivos

 Pipeta

 Portaobjeto

 Bureta

 Tubo de microcentrífuga

 Picnómetro

 Embudo de separación o decantación

Materiales de porcelana

 Embudo Büchner

 Cápsula de porcelana

 Crisol
 Mortero

 Triángulo de porcelana

Material metálico

 Pinza metálica

 Mechero Bunsen

 Cuchara de Combustión

 Rejilla de asbesto

 Asa

 Balanza analítica

Material de plástico

 Pizeta

 Cubeta

 Pera de succión

2.1.2. Equipos

 Equipo termociclador o PCR

 Equipo de electroforesis

 Equipo de extracción de ADN

 Campana de extracción

 Centrifugas

 Ultracongelador

 Incubadoras

 Liofilizador

 Rotavapor
 2.1.3. Reactivos

 Sustancias nocivas
 Sustancias irritantes

 Gases inflamables

 Explosivos

 Gases No-inflamables
 Sustancias oxidantes
 Sustancias corrosivas
 Sustancias toxicas

III. PROCEDIMIENTO

Reconocer la mayor cantidad de materiales y equipos descritos mediante la práctica, así

como también se debe tomar precauciones para el manejo de materiales y equipos

utilizados en el laboratorio de biotecnología reconociendo su uso y funcionamiento para

evitar un mal manejo de los mismos.

IV. CONCLUSIONES

 Es de suma importancia que en el inicio de una práctica se tenga que realizar un

reconocimiento de materiales y equipos que se utilizaran, además es esencial

conocer su funcionamiento.

 Es necesario para prevenir cualquier accidente no provocado y no lamentar

consecuencias.

V. DISCUSIONES

 Se toma en cuenta la gran cantidad de implementos como materiales y equipos

que podemos encontrar para la práctica de laboratorio y su uso dependiendo de

cada tipo de material y según como se utiliza, tomar las indicaciones y

precauciones.
  Es fundamental conocer las medidas de bioseguridad que se manejan en el

laboratorio, por ende, debemos de identificar cada uno de los riesgos que se

presentan ya sea por el manejo de material, muestras y equipos, debemos de saber

identificar cada uno de los riesgos y las posibles soluciones que se puedan

presentar y actuar en su debido momento para así contrarrestar probables

situaciones, que nos pongan en riesgo a algún miembro del laboratorio o de

alguna practica que se esté llevando acabo.

VI. RECOMENDACIONES

 Para entrar a un laboratorio se debe tener en cuenta los materiales de bioseguridad

como guantes, mandil, gorro. Todos estos materiales son importantes para evitar

el contagio o transmisión de cualquier agente patógeno.

 Todo el material, especialmente los materiales y equipos delicados, como lupas y

microscopios, deben manejarse con cuidado para así evitar los golpes o el forzar

sus mecanismos.

 Al ingresar al área de laboratorio se deberá usar guantes, tapabocas y mandil para

así evitar cualquier accidente y también para minimizar el desplazamiento de la

flora bacteriana de la piel hacia el interior del área de trabajo protegiendo así las

manos y brazos de toda contaminación existente.

 Bibliografía

Anonimo. (s.f.). Biorreactores y su aplicacion. Mexico: Facultad de Ciencias Químicas.

Doran, P. M. (1998). Principios de ingenieria de los bioprocesos. España: ACRIBIA. S.A.

Novoa, D. (2010). Introduccion a las bioseparaciones. Grupo de Estudio en Biotecnologia y Ingenieria de

Alimentos.

ANEXOS

ANEXO1: Balón De ANEXO2: ANEXO3: Tubo de

Destilación Matraz aforado ensayo

ANEXO4: Vidrio reloj

ANEXO5: Vaso precipitado ANEXO6: Microscopio

ANEXO7: Cajas de Petri

ANEXO8: Probetas ANEXO9: pH-metro

ANEXO10: Matraz de ANEXO11: Botella de
ANEXO12: Pipeta
Erlenmeyer cultivo

ANEXO13: Portaobjetos ANEXO14: Bureta ANEXO15: Tubo de

microcentrífuga

ANEXO17: Embudo de ANEXO18: Varilla

ANEXO16: Picnómetro
separación de vidrio
 ANEXO19: Embudo ANEXO20: Cápsula de

Büchner porcelana
ANEXO21: Crisol

ANEXO23: Triángulo ANEXO24: Pinzas

de porcelana metálicas
ANEXO22: Mortero

ANEXO25: Mechero ANEXO26: Cuchara de ANEXO27:

Bunsen Combustión Soporte universal

ANEXO28: Rejilla de ANEXO29: Asa de ANEXO30:

asbesto siembra Balanza analítica

ANEXO31: Pizeta ANEXO32: Cubeta ANEXO33: Pera

de succión

ANEXO36: Equipo
ANEXO34: Equipo ANEXO35: Equipo de

electroforesis de extracción de ADN

termociclador o PCR
 ANEXO44: Sustancias nocivas ANEXO45: Sustancias
ANEXO43: Autoclave
irritantes
ANEXO37: Campana ANEXO39:
ANEXO38: Centrífuga
de extracción Ultracongelador

ANEXO41:
ANEXO40: ANEXO42: Rotavapor
Liofilizador
Incubadora
 ANEXO47: ANEXO48: Sustancias
ANEXO46: Gases

inflamables Explosivo oxidantes

ANEXO47: Sustancias ANEXO48: Sustancias

corrosivas toxicas